CN1316899C - 绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂，以及该复配杀虫剂的油悬浮剂和粉剂的制备方法。该复配杀虫剂中绿僵菌与菊酯类农药的重量百分比是：绿僵菌占90.0-99.0%，菊酯类农药占1.0-10.0%；所述菊酯类农药为天然除虫菊酯原药或氰戊菊酯原药或三氟氯氰菊酯原药或高效氯氰菊酯原药。本发明所得产品具有兼容性好，杀虫毒力强，生产成本低，能大幅度减少菊酯类农药对环境的污染，延缓害虫抗药性产生的优点；并且制备方法简单。
Description
技术领域
本发明涉及农药杀虫剂，尤其涉及绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂，本发明还涉及绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂油悬浮剂与粉剂的制备方法。
现有技术
昆虫病原真菌是最重要的杀虫微生物类群，在自然条件下约70％的昆虫病害是真菌引起的，已发现的昆虫病原真菌多达100多个属700多个种。病原真菌具有安全、不杀伤非目标生物等优点，同时是唯一具有触杀特性的病原微生物，其致病机制复杂，因而尽管它是最早应用于害虫防治的微生物，但是仍未发现有抗性害虫产生。绿僵菌(Metarhizium)是最早用于防治害虫的昆虫病原真菌，利用它来防治害虫的研究与实践已愈百年。据不完全统计，已有近百余种农作物、林木及卫生害虫用绿僵菌进行室内实验的评价，约有150种昆虫以进行小规模的田间防治试验。随着巴西和澳大利亚广泛使用金龟子绿僵菌防治甘蔗和牧草害虫取得较大进展，以及在非洲用黄绿绿僵菌防治蝗虫的试验成功，对绿僵菌的研究进入了高潮。近10年来，国内外对绿僵菌杀虫剂的研制明显加速，国内外已登记的产品有10多个。但目前真菌杀虫剂存在防效不稳定、杀虫速度较慢或成本较高等缺点，限制了其广泛应用。
为了提高真菌杀虫剂杀虫速度、降低成本，人们通常采用的真菌杀虫剂与可兼容的化学农药进行复配，达到上述目的。自从Anderson和Roberts在研究白僵菌混配时选择了西维因、呋喃丹、谷硫磷、甲基谷硫磷、伏虫脲和硫丹等6种化学农药作为复配剂以来，多种化学农药用于白僵菌杀虫剂的复配当中，并取得了很好的杀虫效果。目前，化学杀虫剂与真菌杀虫剂混合制存在三个方面的问题：(1)化学农药毒性较高或复配制剂中化学农药的含量较高造成对环境的污染；(2)化学农药与真菌农药相容性较差，影响真菌贮存稳定性；(3)真菌农药与化学农药复配工艺不成熟，如在复配制剂中加入影响真菌活性的乳化剂、增溶剂等。迄今为止，国内没有一种杀虫真菌与化学农药复配制剂登记注册。
菊酯类农药是一种高效、广谱、低毒、低残留的昆虫神经毒剂，具胃毒和触杀作用，由于作用位点单一，许多农、林、牧有害昆虫对菊酯类农药产生抗药性；同时，高剂量的菊酯类农药对蜜蜂、鱼类及天敌昆虫有一定毒性，影响生态环境，这些不足使得一些菊酯类农药被接受程度逐渐下降，人们不得不寻找新的农药替代菊酯农药。如：氰戊菊酯已被禁止在茶叶上使用。如不采取有效措施解决抗药性的问题和降低田间用量，多种菊酯类农药将不可避免的遭到被淘汰的命运。
采用低剂量或亚致死剂量的菊酯类农药与绿僵菌混合，能发挥真菌杀虫剂与菊酯类农药各自优势，加快真菌农药的杀虫速度，又能大幅度降低化学农药用量、减少对环境的污染，延迟昆虫对化学农药抗药性产生，因此，具有广阔的发展前景。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种兼容性好，并能大幅度减少菊酯类农药对环境污染的绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂。
本发明的目的之二是提供一种绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂的制备方法。
本发明所述复配杀虫剂主要由昆虫病原真菌和菊酯类农药组成，并且昆虫病原真菌与菊酯类农药的重量百分比是：昆虫病原真菌占90.0-99.0％，菊酯类农药占1.0-10.0％；所述昆虫病原真菌是绿僵菌，所述菊酯类农药为天然除虫菊酯原药或氰戊菊酯原药或三氟氯氰菊酯原药或高效氯氰菊酯原药。
本发明所述复配杀虫剂主要成分重量最佳比例为：绿僵菌占90.0-93.0％，天然除虫菊酯占7-10％。
本发明的复配杀虫剂主要成分重量最佳比例为：绿僵菌占96.0-98.0％，氰戊菊酯占2-4％。
本发明的复配杀虫剂主要成分重量最佳比例为：绿僵菌占97.0-98.0％，三氟氯氰菊酯占2-3％。
本发明所述复配杀虫剂主要成分重量最佳比例为：绿僵菌占94.0-96.0％，高效氯氰菊酯占4-6％。
本发明的复配杀虫剂适用于绿僵菌通过固体发酵获得的分生孢子。其重量为分生孢子总数÷纯孢子粉的含孢量(亿孢子/g)。
本发明的复配杀虫剂配比中，菊酯类农药按有效成份净含量折算。
本发明所述绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂的剂型是油悬浮剂或者粉剂。
本发明所述复配杀虫剂油悬浮剂的制备方法为：按农药复配杀虫剂的配比要求分别称取绿僵菌纯孢子粉和菊酯类农药原药。先将菊酯类农药溶解在重量含量为0.1-1.0％抗氧化剂的植物油中，再加入绿僵菌纯孢子粉和菊酯类农药重量0.5-3倍的增效剂，用100-200转/分钟的速度搅拌1小时，最后加入满足复配杀虫剂对绿僵菌含量要求的重量含量为0.1-1.0％抗氧化剂的植物油稀释，使油悬浮剂中的真菌孢子的含量为100-300亿孢子/mL。
本发明所述复配杀虫剂粉剂的制备方法为：将烘干的绿僵菌培养物及培养基粉碎，过300目制成绿僵菌高孢粉，用血球计数板检测绿僵菌高孢粉的含孢量，换算出相当于绿僵菌纯孢粉的重量；然后按配比要求称取菊酯类农药和菊酯类农药重量0.5-3倍的增效剂(如：增效醚)，并将菊酯类农药和增效剂溶解在重量含量为0.1-1.0％抗氧化剂的植物油中，再采用超细喷雾技术或搅拌混合技术将含有菊酯类农药的植物油与相应比例的绿僵菌高孢粉混合均匀，最后加入满足复配杀虫剂对绿僵菌孢子含量要求的氢质碳酸钙，用混合机以100-200转/分钟的速度混合30-40分钟即可。
上述抗氧化剂是丁基烃基茴香醚或二丁基羟基甲苯或没子食子酸丙酯或硫代二丙酸二月桂酯。所述植物油是食用植物油。如大豆油、菜籽油、棉子油、色拉油等。
本发明的复配杀虫剂具有以下优点：
1、菊酯类农药与绿僵菌孢子兼容性好，增效作用明显，与其组成的各单剂农药相比，提高了杀虫毒力。
2、复配制剂中的菊酯类农药田间剂量为菊酯类农药单剂用量的2-10％，减少其对环境的污染，对天敌安全。
3、降低生产成本。复配制剂中绿僵菌的田间用量为绿僵菌单剂的30-75％，减少绿僵菌生产成本。
4、能大幅度减少菊酯类农药对环境污染，延缓害虫抗药性产生。
5、生产工艺简单。
实验数据一、病原真菌孢子与高效氯氰菊酯的兼容性好
称取菊酯类农药天然除虫菊酯、氰戊菊酯、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯原药各2g，分别溶解在89g的重量含量为1-10％凡士林和0.1-1.0％抗氧化剂的植物油中，然后加入19g绿僵菌纯孢子粉和1g增效醚混匀均匀后，各制成100g油悬浮剂，密封保存于温度为26±1℃的环境中，以未加菊酯类农药为对照。每个月随机取出混匀后的油悬浮剂1g，用玻璃纸圆片法在1/4SDA平板上测萌发率。26±1℃下培养24小时取玻璃纸圆片用棉蓝染色后镜检，计数200-300个孢子，记录萌发的孢子数，计算萌发率，每一处理三个重复。
表1绿僵菌孢子与菊酯类农药的兼容性
从表1可以看出：菊酯类农药天然除虫菊酯、氰戊菊酯、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯按重量比为10∶90的比例与绿僵菌干孢子混配后密封贮存，对真菌孢子的萌发率没有明显的影响，说明天然除虫菊酯、氰戊菊酯、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯与绿僵菌孢子的兼容性好。
实验数据二、绿僵菌和菊酯类农药复配制剂的增效作用
以杀蝗绿僵菌CQMa102为试验菌株，在上述复配比例范围内，配置100亿/ml绿僵菌·天然除虫菊酯油悬浮剂、100亿/ml绿僵菌·氰戊菊酯油悬浮剂、100亿/ml绿僵菌·三氟氯氰菊酯油悬浮剂、100亿/ml绿僵菌·高效氯氰菊酯油悬浮剂和1亿/g绿僵菌·高效氯氰菊酯粉剂。分别测定绿僵菌、菊酯类农药和复配制剂对2-4日龄体重相近的健康东亚飞蝗成虫的毒力。处理后的试虫放入饲养箱内，饲以新鲜麦苗，置于27±1℃，湿度75-85％，光周期16h L/8hD条件下饲养，供药后4天观察其死活虫数，计算出各种试验浓度下的死亡率(％)。用DPS软件统计致死中量(LD50)。根据Sun法(1960)计算共毒系数(CTC)，以CTC值判断100亿孢子/mL高氯·绿僵菌的联合毒力作用。CTC值100左右为相加作用，大于120时为明显增效作用。将以绿僵菌定义为标准剂。其毒力指数(TI)为100。
复配制剂是真菌农药单剂的毒力倍数＝真菌农药单剂LD50/复配制剂LD50
试验中同时以不给药为空白对照，若空白对照蝗虫的死亡率≤5％时，给药组的死亡率不作校正，若对照组死亡率5-15％时，择按下列公式将给药组的死亡率进行校正。
表2菊酯类农药与绿僵菌对蝗虫的联合毒力作用
| 菊酯类成份 | 剂型 | 重量配比 | LD50(ug/头)(95％置信限) | CTC |
| 天然除虫菊酯 | 油悬浮剂 | 92∶8 | 0.29(0.15-0.62) | 413.30 |
| 氰戊菊酯 | 油悬浮剂 | 97∶3 | 0.51(0.13-0.68) | 396.96 |
| 三氟氯氰菊酯 | 油悬浮剂 | 98∶2 | 0.28(0.12-0.55) | 381.81 |
| 高效氯氰菊酯 | 油悬浮剂 | 96∶4 | 0.16(0.10-0.49) | 346.70 |
| 高效氯氰菊酯 | 粉剂 | 95∶5 | 0.21(0.13-0.52) | 329.15 |
| 对照(绿僵菌) | - | 5.61(3.89-9.32) | - |
从表2可以看出：在上述复配范围比例内，菊酯类农药与绿僵菌的共毒系数(CTC)在300-420之间，均大于120，说明菊酯类农药与绿僵菌复配制剂具有明显增效作用。复配制剂毒力较纯绿僵菌制剂提高10-35倍。
实验数据三、复配杀虫剂室内毒力测定
以杀蝗绿僵菌CQMa102为试验菌株，配制①100亿/ml绿僵菌·天然除虫菊酯油悬浮剂(92∶8)、②100亿/ml绿僵菌·高效氯氰菊酯油悬浮剂(95∶5)、③1亿/g绿僵菌·三氟氯氰菊酯粉剂(98∶2)、④5亿/g绿僵菌·氰戊菊酯粉剂(97∶3)、⑤100亿/ml绿僵菌油悬浮剂和⑥1亿/g绿僵菌粉剂。自室内饲养的第一代蝗虫种群中，挑选蝗虫虫体重相同的健康成虫，放入种有麦苗的直径为35cm×50cm网笼中，每处理50头。油悬浮剂稀释5倍后按50ul/笼的用量超低容量喷雾，粉剂按1.5g/笼的用量喷粉。设杀蝗绿僵菌油剂与不施药为对照。重复3次。每天定时观察，三天后更换新鲜麦苗。调节养虫室室温至28±1℃，相对湿度60-85％，光暗周期为16h/8h。24小时观察一次。连续调查一周，记载各处理的死虫数，以镊子轻触虫体，足和虫翅不动为死亡。数据统计参照实验数据一
表3菊酯类农药与绿僵菌对蝗虫的室内毒力测定(校正死亡率，％)
| 药剂 | 药后1d | 药后2d | 药后3d | 药后4d | 药后5d | 药后6d | LT50(d) |
| ① | 1.24 | 5.33 | 21.67 | 48.67 | 90.67 | 95.33 | 3.69 |
| ② | 3.67 | 11.67 | 23.00 | 59.67 | 94.33 | 97.67 | 3.31 |
| ③ | 5.33 | 13.67 | 19.67 | 63.67 | 93.33 | 98.67 | 3.24 |
| ④ | 3.33 | 10.67 | 20.33 | 54.67 | 95.33 | 100 | 3.38 |
| ⑤ | 0 | 2.67 | 7.33 | 12.33 | 25.33 | 34.67 | - |
| ⑥ | 0 | 1.33 | 5.33 | 8.67 | 21.67 | 29.33 | - |
从表3可以看出：在上述复配范围比例内，菊酯类农药与绿僵菌复配制剂对蝗虫的室内毒力明显高于绿僵菌单剂的毒力，杀虫时间明显缩短。各复配制剂的LT50在3-4天，药后5天的校正死亡率大于90％，而绿僵菌单剂在药后5天的校正死亡率＜30％。
实验数据四、复配杀虫剂田间防效
以杀蝗绿僵菌CQMa102为试验菌株，配制100亿/ml绿僵菌·高氯油悬浮剂(绿僵菌∶高氯重量比为96∶4)。超低容量喷雾。数据统计参照实验数据一。
表4 100亿/ml绿僵菌·高氯油悬浮剂防治西藏飞蝗田间药效试验
| 处理 | 稀释倍数 | 用药量(ml/公顷) | 虫口基数(头/m2) | 药后1天 | 药后3天 | 药后5天 | |||
| 残虫量(头/m2) | 防效(％) | 残虫量(头/m2) | 防效(％) | 残虫量(头/m2) | 防效(％) | ||||
| 复配制剂 | 7 | 1000 | 128.14 | 117.13 | 13.61 | 79.34 | 44.31 | 45.54 | 68.46 |
| 5 | 1000 | 151.71 | 129.60 | 13.75 | 98.19 | 41.79 | 15.21 | 91.10 | |
| 3 | 1000 | 162.36 | 87.21 | 43.68 | 49.94 | 68.95 | 12.23 | 93.32 | |
| 绿僵菌单剂 | 3 | 1000 | 153.09 | 146.11 | 4.30 | 113.61 | 33.26 | 95.47 | 44.80 |
| 空白 | 134.41 | 142.25 | 149.17 | 151.11 | |||||
从表4可以看出：100亿/ml绿僵菌·高氯油悬浮剂不同稀释倍数对西藏飞蝗的毒力都明显高于绿僵菌单剂，其中稀释3倍和5倍的复配制剂药后5天的防效的防效都大于90％，无明显的差异，使用时选用稀释5倍后施药，既能达到显著提高毒力，又能减少绿僵菌与高效氯氰菊酯的用量。
具体实施例
实施例1：
称取1Kg高效氯氰菊酯原药(重量有效含量97％)或0.5Kg氰戊菊酯原药(重量有效含量92％)或2.3Kg天然除虫菊酯原药(重量有效含量70％)；加入装有5Kg重量含量为0.2％丁基烃基茴香醚的大豆油的150升混合器中；溶解后再加入70Kg重量含量为0.1％丁基烃基商香醚的大豆油、19Kg含孢量为500亿/g的绿僵菌纯孢粉和1.25Kg增效醚，用100-200转/分钟的速度搅拌0.5小时；最后用重量含量为0.1％丁基烃基商香醚植物油稀释，使油悬浮剂中的真菌孢子的含量为100亿孢子/mL，制成100亿/ml绿僵菌天然除虫菊酯油悬浮剂或100亿/ml绿僵菌氰戊菊酯油悬浮剂或100亿/ml绿僵菌高效氯氰菊酯油悬浮剂。
实施例2：
称取2.3Kg天然除虫菊酯原药(重量有效含量70％)；加入装有10Kg重量含量为0.5％二丁基羟基甲苯的菜籽油的150升混合器中混匀；再加入70Kg重量含量为0.5％二丁基羟基甲苯的菜籽油、19Kg含孢量为1000亿/g的绿僵菌纯孢粉和2.3Kg增效醚，用100-200转/分钟的速度搅拌0.5小时；最后用重量含量为0.1％二丁基羟基甲苯的菜籽油稀释，制成200亿/ml绿僵菌天然除虫菊酯油悬浮剂。
实施例3：
分别称取0.6Kg高效氯氰菊酯原药(重量有效含量97％)或0.3Kg三氟氯氰菊酯原药(重量有效含量94％)后加入装有重量含量为0.4％没子食子酸丙酯的棉子油的10升混合器中，再加入0.5Kg增效醚，使总重量为4Kg，用100-200转/分钟的速度搅拌0.5小时备用；将烘干的绿僵菌培养基粉碎，过300目制成绿僵菌高孢粉，用血球计数板检测绿僵菌高孢粉的含孢量为110亿/g(绿僵菌CQMa102纯孢粉得含孢量为500亿/g)；将含10Kg纯孢粉的46Kg绿僵菌高孢粉装入喷雾塔，用高压喷雾器喷入备用棉子油，再加入4950Kg的氢质碳酸钙，用混合机混合3040分钟即成1亿/g绿僵菌·高效氯氰菊酯粉剂或1亿/g绿僵菌·三氟氯氰菊酯粉剂。
实施例4：
分别称取0.7Kg高效氯氰菊酯原药(重量有效含量97％)或0.5Kg氰戊菊酯原药(重量有效含量94％)后加入装有重量含量为0.3％硫代二丙酸二月桂酯的大豆色拉油的10升混合器中，再加入1Kg增效醚，使总重量为10Kg，用100-200转/分钟的速度搅拌0.5小时备用；将烘干的绿僵菌培养物连培养基粉碎，过300目制成绿僵菌高孢粉，用血球计数板检测绿僵菌高孢粉的含孢量为120亿/g(绿僵菌CQMa105纯孢粉得含孢量为1000亿/g)；将含12Kg纯孢粉的100Kg绿僵菌高孢粉装入喷雾塔，用高压喷雾器喷入备用大豆色拉油，再加入4890Kg的氢质碳酸钙，用混合机混合30-40分钟即成2亿/g绿僵菌高效氯氰菊酯粉剂或2亿/g绿僵菌氰戊菊酯粉剂。
Claims (8)
1、一种绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂，其特征在于，它包括昆虫病原真菌和菊酯类农药，所述昆虫病原真菌与菊酯类农药的重量百分比是：昆虫病原真菌占90.0-99.0％，菊酯类农药占1.0-10.0％；所述昆虫病原真菌是绿僵菌，所述菊酯类农药为天然除虫菊酯原药或氰戊菊酯原药或三氟氯氰菊酯原药或高效氯氰菊酯原药。
2、根据权利要求1所述的一种绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂，其特征在于，所述绿僵菌与天然除虫菊酯原药的重量百分比：绿僵菌占90.0-93.0％，天然除虫菊酯占7-10％。
3、根据权利要求1所述的一种绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂，其特征在于，所述绿僵菌与氰戊菊酯原药的重量百分比为：绿僵菌占96.0-98.0％，氰戊菊酯占2-4％。
4、根据权利要求1所述的一种绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂，其特征在于，所述绿僵菌与三氟氯氰菊酯原药的重量百分比为：绿僵菌占97.0-98.0％，三氟氯氰菊酯占2-3％。
5、根据权利要求1所述的一种绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂，其特征在于，所述绿僵菌与高效氯氰菊酯原药的重量百分比为：绿僵菌占94.0-96.0％，高效氯氰菊酯占4-6％。
6、根据权利要求1或2或3或4或5所述的一种绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂，其特征在于，所述复配杀虫剂的剂型是油悬浮剂或者粉剂。
7、一种如权利要求6所述的绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂的制备方法，其特征在于，油悬浮剂配置方法为：首先按原料配比要求分别称取绿僵菌纯孢子粉和菊酯类农药原药；然后，将菊酯类农药溶解在重量含量为0.1-1.0％抗氧化剂的植物油中，再加入绿僵菌纯孢子粉、菊酯类农药重量0.5-3倍的增效醚，用100-200转/分钟的速度搅拌1小时，最后用重量含量为0.1-1.0％抗氧化剂的植物油稀释，使油悬浮剂中的真菌孢子的含量为100-300亿孢子/mL；所述抗氧化剂是丁基烃基茴香醚或二丁基羟基甲苯或没子食子酸丙酯或硫代二丙酸二月桂酯；所述植物油是食用植物油。
8、一种如权利要求6所述的绿僵菌与菊酯类农药复配杀虫剂的制备方法，其特征在于，粉剂配置方法为：先将烘干的绿僵菌培养基粉碎，过300目制成绿僵菌高孢粉，用血球计数板检测绿僵菌高孢粉的含孢量，换算出相当于绿僵菌纯孢粉的重量；然后按配比要求称取菊酯类农药、菊酯类农药重量0.5-3倍的增效醚，并将菊酯类农药和增效醚溶解在重量含量为0.1-1.0％抗氧化剂植物油中，再采用超细喷雾技术或搅拌混合技术将含有菊酯类农药的植物油与绿僵菌高孢粉混合均匀，最后加入满足复配杀虫剂对绿僵菌含量要求的轻质碳酸钙，用混合机以100-200转/分钟的速度混合30-40分钟即可；所述抗氧化剂是丁基烃基茴香醚或二丁基羟基甲苯或没子食子酸丙酯或硫代二丙酸二月桂酯；所述植物油是食用植物油。
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