CN1313104C - 一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物 - Google Patents

一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN1313104C
CN1313104C CNB2005100348701A CN200510034870A CN1313104C CN 1313104 C CN1313104 C CN 1313104C CN B2005100348701 A CNB2005100348701 A CN B2005100348701A CN 200510034870 A CN200510034870 A CN 200510034870A CN 1313104 C CN1313104 C CN 1313104C
Authority
CN
China
Prior art keywords
radix bupleuri
polymycin
extract
pharmaceutical composition
anticancer pharmaceutical
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB2005100348701A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1706454A (zh
Inventor
李翔
秦岭
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
South China Sea Institute of Oceanology of CAS
Original Assignee
South China Sea Institute of Oceanology of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by South China Sea Institute of Oceanology of CAS filed Critical South China Sea Institute of Oceanology of CAS
Priority to CNB2005100348701A priority Critical patent/CN1313104C/zh
Publication of CN1706454A publication Critical patent/CN1706454A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1313104C publication Critical patent/CN1313104C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明涉及一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是含有多霉素和柴胡提取物，其中多霉素和柴胡提取物的质量比是1∶26.9～1724.1，所述的柴胡提取物的制备方法是：将柴胡用溶剂浸泡提取，然后分离出上清液和沉淀物，然后将上清液去除水分后干燥，得到柴胡提取物。本发明的抗癌药物组合物，有效地抑制了癌细胞的生长，与单独使用多霉素相比，由于柴胡提取物的抗癌协同作用因而降低了多霉素的临床应用的剂量，从而降低了多霉素的毒副作用，并且调节和降低了癌细胞对多霉素抗药性增加的速率，因而提高了多霉素的使用效率，更有效地抑制了癌细胞的生长。另外本发明药物组合物可工业化生产。

Description

一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物
技术领域
本发明涉及一种抗癌药物组合物，具体来说是涉及具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物。
背景技术
大多数的有抗癌作用的西药是通过和癌细胞内活跃的DNA或相关的酶反应使DNA链断裂，或是形成自由基，或是改变细胞的通透性等等。然而这一类的西药在使用时存在着两个问题：一是对病人具有较强的毒副作用，比如免疫抑制作用，心脏毒性等；二是癌细胞对抗癌药物具有不断增强的抗药性。因此解决或者降低这两方面的负面效应，对不断多的癌症病人是一个福音。其中多霉素(doxorubicin)是一种广泛应用于治疗乳腺癌，肺癌等多种恶性肿瘤细胞所引起的癌症药物，但是同样存在上面所说的两个问题。根据文献(Chou T C，Talalay P.Quantitative analysis of dose-effect relationships：the combined effects of multipledrugs or enzyme inhibitors.Adv Enzyme Regul，1984，22：27-55.)的记载，不同药物的协同作用能提高相应药物的使用效果。
中国传统中药资源非常丰富，有效和合理地开发这些生物学资源是解决目前世界上天然活性产物开发研究瓶颈的最有效的办法，研究出中药与西药的协同作用并加以应用是其中有效的途径。
柴胡是多种中药制剂中的有效成分，对治疗上呼吸道感染、寒热、胸闷、呕吐、急性水肿性胰腺炎、单纯性胃炎、急性胆囊炎、胆石症、急性肾盂、肾炎、无黄胆型肝炎都有显著疗效，广泛用于消炎，镇痛和抗病毒感染。有文献(韩晓红等.北华大学学报，2004，5(4)：323-325)报道柴胡有抗肿瘤作用，具有钙离子通道阻滞剂的作用，逆转人肝癌细胞多药耐约，对长春新碱(Vincristine)体外细胞毒增效作用；但至今未见柴胡与多霉素对抑制癌细胞的协同作用。
发明内容
本发明的目的在于开发出一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，更有效的抑制癌细胞的生长，同时，使多霉素的毒副作用和癌细胞抗药性增加速率得以降低。
本发明将一定比例的柴胡提取物和多霉素混合，生成的抗癌药物组合物有效地抑制了癌细胞的生长，中和了多霉素的毒副作用，同时，降低癌细胞对多霉素的抗药性增加速率，从而实现了本发明的目的。
本发明涉及到一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是含有多霉素和柴胡提取物，其中多霉素和柴胡提取物的质量比是1∶26.9～1724.1，所述的柴胡提取物的制备方法包括以下的步骤：
(1)将柴胡用溶剂浸泡提取，然后分离出上清液和沉淀物；
(2)将上清液去除水分后干燥，得到柴胡提取物。
本发明的优选条件是：所述的多霉素和柴胡提取物的质量比最好是1∶107～216，所述的柴胡提取物的制备方法中，步骤(1)所述的柴胡可以是新鲜、半干或干燥的柴胡等，所述的溶剂可以是水、甲醇、乙醇或丙酮等，并最好按照每10mL溶剂加入1g干燥柴胡的比例进行浸泡，浸泡提取可以在常温或加热进行，所述的分离可以采用常规的分离方法例如离心分离等，所述的沉淀物最好再次提取，即将沉淀物在-70℃冰冻，缓慢融冰后加水煮沸，分离取出上清液，两次分离出的上清液一起进行步骤(2)的处理；步骤(2)所述的上清液去除水分和干燥可以采用通常的方法，例如可以采用减压蒸发或用溶剂乙酸乙酯、乙醚、氯仿等萃取后减压蒸馏等。
本发明的抗癌药物组合物还可以含有一种或多种药学上可接受的载体，所述的药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体可以是稀释剂如水等，填充剂如淀粉、蔗糖等，粘合剂，润湿剂，甜味剂等。
本发明的药物组合物可以采用通常的方法制备，可以使用通常的药物剂型，各种剂型可以按照药物领域的常规方法制备。
本发明的抗癌药物组合物，有效地抑制了癌细胞的生长，与单独使用多霉素相比，由于柴胡提取物的抗癌协同作用从而降低了多霉素的临床应用的剂量，降低了多霉素的毒副作用，而且调节和降低了癌细胞对多霉素抗药性增加的速率，提高了多霉素的使用效率。当柴胡提取物的提取方法按比例扩大时，可以形成大规模制备用于工业化药物生产。
柴胡和多霉素在本发明的质量比范围内具有协同作用，在不同浓度下多霉素和柴胡提取物对人乳腺癌细胞生长抑制试验中发现，在柴胡提取物浓度为0.0625mg/mL时，可以观察到轻微的协同作用，体现在细胞抑制率上比单独使用多霉素略有增加；随着柴胡提取物浓度增加，和多霉素配成的药物组合物对人乳腺癌细胞的抑制率超过了单独使用多霉素的一倍以上，从有效抑制癌细胞又不损害正常细胞考虑，其中以0.125mg/mL柴胡提取物和0.58～1.16μg/mL多霉素的混合物(多霉素和柴胡提取物的质量比为1∶107～216)协同效果最佳。柴胡提取物和多霉素对人乳腺癌细胞均具有不同程度的细胞毒性，使用GraphPad Prism4软件包(San Diego，CA)进行统计学分析，从八个不同浓度药物的细胞生长率中计算出供试样品的IC50其中柴胡提取物对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的IC50为0.226mg/mL，多霉素IC50为1.728μg/mL。而当柴胡丙酮提取物和多霉素浓度超出本发明限制的范围时，供试细胞全部死亡。
具体实施方式
以下的实施例是对本发明的进一步说明，但本发明不限于下述实施例。
下述实施例中的ER和PR双阴性的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231及ER和PR双阳性的人乳腺癌细胞株MCF-7均购自美国ATCC。
实施例1：柴胡提取物的制备
取1g新鲜柴胡，用10mL 40％丙酮常温浸泡，离心后分开上清液和沉淀物。对沉淀物再次提取，取沉淀物在-70℃冰冻，缓慢融冰后加水煮沸，再次取上清液。将两次的上清液混合后用乙酸乙酯萃取并减压蒸馏干燥，得到217mg柴胡丙酮提取物。所得柴胡丙酮提取物配成25％水溶液。
实施例2：柴胡提取物的制备
取1g干燥柴胡放入10mL水中，在常温下浸泡并煮沸，离心后分开上清液和沉淀物。将上清液用乙酸乙酯萃取后减压蒸馏干燥，得到279mg柴胡沸水提取物，再配成25％水溶液备用。
实施例3：柴胡提取物的制备
取1g干燥的柴胡，用10mL 50％乙醇浸泡3～12小时内缓慢加热到70℃，离心后分开上清液和沉淀物。对沉淀物再次提取，取沉淀物在-70℃冰冻，缓慢融冰后加水煮沸，再分离出上清液。将两次分离的上清液用乙酸乙酯萃取后减压蒸馏干燥，得到249mg柴胡乙醇提取物，并配成25％水溶液备用。
实施例4：不同浓度下多霉素和柴胡丙酮提取物对人乳腺癌细胞生长抑制试验
将人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞培养在含10％胎牛血清、1×105U/L青霉素、100mg/L链霉素、2g NaHCO3和0.3g谷胺酰胺的RPMI1640培养液内，人乳腺癌细胞株MCF-7细胞培养在含10％胎牛血清、1×105U/L青霉素、100mg/L链霉素、2g NaHCO3和0.3g谷胺酰胺的Dulbecco改良的Eagle培养液内(DMEM；Gibco BRL Grand Island，NY)，饱和湿度、37℃和5％CO2浓度下培养至对数生长期和80％融合度后，以0.25％胰酶溶液消化，用含10％新生牛血清(Gibco BRL)的相应培养液制成单细胞悬液，进行细胞计数后，将细胞浓度调整为5×104个细胞/mL.以每孔100μL接种于96孔板，培养24h.将已贴壁的细胞分组，每组2个平行孔。一组为不加药组，其余组分别加入实施例1制备的柴胡丙酮提取物或其25％的溶液和供试多霉素，柴胡提取物浓度分别调节至0.0625mg/mL、0.125mg/mL、0.250mg/mL、0.500mg/mL，多霉素浓度分别调节至0.29μg/mL，0.58μg/mL，1.16μg/mL，和2.32μg/mL，药物组分别按上述浓度进行单独和混合试验，混合浓度组合及其中的多霉素和柴胡提取物的质量比见表1。同时以不接种细胞、只加100μL培养液的孔作空白对照.然后将细胞置CO2培养箱中继续培养48～72h。每孔加20μL 5mg/mL四氮唑(MTT)无血清培养液，37℃下培养4h后去掉上清液，加入100μL DMSO，在自动酶标仪(DYNEX Technologies，Chantilly，VA)上570nm波长处测定光吸收值，计算细胞存活率，结果见表2。
表1不同浓度的多霉素和柴胡提取物组合中多霉素和柴胡提取物的质量比
  多霉素浓度(μg/mL)   柴胡提取液的浓度(mg/mL)
  0.0625   0.125   0.25   0.5
  0.29   1∶216   1∶431   1∶862   1∶1724.1
  0.58   1∶107.8   1∶216   1∶431   1∶862
  1.16   1∶54   1∶107.8   1∶216   1∶431
  2.32   1∶26.9   1∶54   1∶107.8   1∶216
表2不同浓度下多霉素和柴胡丙酮提取物对人乳腺癌细胞生长率(％)的影响
  多霉素浓度(μg/mL)   柴胡内酮提取物浓度(mg/mL)
  0   0.0625   0.125   0.25   0.5
  0.0   100.000   97.479   102.271   49.417   0
  0.29   66.485   58.276   37.813   8.376   2.486
  0.58   57.163   43.527   22.259   12.624   0
  1.16   32.641   29.336   15.182   6.158   0
  2.32   21.598   17.360   11.825   0   0
实施例5：不同浓度下多霉素和柴胡水提取物对人乳腺癌细胞生长抑制试验
按照实施例4的试验方法，仅将试验药物柴胡丙酮提取物改为实施例2制得的柴胡水提取物，试验结果见表3。
表3不同浓度下多霉素和柴胡沸水提取物对人乳腺癌细胞生长率(％)的影响
  多霉素浓度(μg/mL)   柴胡沸水提取物浓度(mg/mL)
  0   0.0625   0.125   0.25   0.5
  0.0   100.000   99.461   97.553   59.229   0
  0.29   63.442   67.259   41.621   16.843   0
  0.58   49.785   51.265   25.326   10.072   0
  1.16   35.361   33.167   17.537   0   0
  2.32   20.077   21.493   14.375   9.436   0
实施例6：不同浓度下多霉素和柴胡乙醇提取物对人乳腺癌细胞生长抑制试验
按照实施例4的试验方法，仅将试验药物柴胡丙酮提取物改为实施例3制得的柴胡乙醇提取物，试验结果见表4。
表4不同浓度下多霉素和柴胡乙醇提取物对人乳腺癌细胞的生长率(％)的影响
  多霉素浓度(μg/mL)   柴胡乙醇提取物浓度(mg/mL)
  0   0.0625   0.125   0.25   0.5
  0.0   100.000   109.530   98.795   57.238   9.273
  0.29   67.959   65.049   39.415   13.024   1.961
  0.58   56.428   49.029   23.148   6.259   0
  1.16   37.094   32.656   14.944   8.743   0
  2.32   23.749   24.960   12.159   2.346   0
实施例7：柴胡提取物对多霉素协同作用综合因子分析
将实施例4～6不同浓度的多霉素和0.125mg/mL柴胡提取物的药物组合物(多霉素和柴胡提取物的质量比为1∶54～431)对人乳腺癌细胞生长抑制试验结果进行协同作用综合因子分析，其综合因子(Combination index(CI))按照文献(Chou TC，Talalay P.Quantitativeanalysis of dose-effect relationships：the combined effects of multiple drugs orenzyme inhibitors.Adv Enzyme Regul，1984，22：27-55.)总结的方法计算。按照国际公认的划分方法，CI值小于1为协同作用，等于1为增效作用，大于1为减效作用。计算结果见表5。
表5不同浓度的柴胡提取物和多霉素的CI值对比
  柴胡提取液浓度(mg/mL)   多霉素浓度(μg/mL)
  0.29   0.58   1.16   2.32
  0.125   0.763   0.690   0.679   0.806

Claims (8)

1.一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是组成中含有多霉素和柴胡提取物，其中多霉素和柴胡提取物的质量比是1∶26.9～1724.1，所述的柴胡提取物的制备方法包括以下的步骤：
(1)将柴胡用溶剂浸泡提取，然后分离出上清液和沉淀物；
(2)将上清液去除水分后干燥，得到柴胡提取物。
2.根据权利要求1的一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是所述的多霉素和柴胡提取物的质量比是1∶107～216。
3.根据权利要求1的一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是在柴胡提取物的制备方法的步骤(1)中，将得到的沉淀物再次提取，然后将两次分离出的上清液一起进行步骤(2)的处理。
4.根据权利要求3的一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是所述的提取，方法是将沉淀物在-70℃冰冻，缓慢融冰后加水煮沸，分离取出上清液。
5.根据权利要求1的一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是柴胡提取物制备方法的步骤(1)所述的柴胡是新鲜、半干或干燥的柴胡，所述的溶剂是水、甲醇、乙醇或丙酮，并按照每10mL溶剂加入1g干燥柴胡的比例进行浸泡，浸泡提取在常温或加热进行，所述的分离采用离心分离。
6.根据权利要求1的一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是柴胡提取物制备方法的步骤(2)所述的去除水分采用溶剂萃取，所述的干燥采用减压蒸馏的方法。
7.根据权利要求6的一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是步骤(2)所述的溶剂是乙酸乙酯、乙醚或氯仿。
8.根据权利要求1～7的任一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物，其特征是组成中含有药学上可接受的载体。
CNB2005100348701A 2005-05-27 2005-05-27 一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物 Expired - Fee Related CN1313104C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2005100348701A CN1313104C (zh) 2005-05-27 2005-05-27 一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2005100348701A CN1313104C (zh) 2005-05-27 2005-05-27 一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1706454A CN1706454A (zh) 2005-12-14
CN1313104C true CN1313104C (zh) 2007-05-02

Family

ID=35580686

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2005100348701A Expired - Fee Related CN1313104C (zh) 2005-05-27 2005-05-27 一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1313104C (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CL2011002020A1 (es) 2011-08-18 2012-04-20 Univ Santiago Chile Metodo in vitro para modificar el perfil de celulas treg presentes en una poblacion total de esplenocitos de una muestra biologica porque comprende aislar, cultivar y exponer los esplenocitos a un medio de atp y polimixina b.10 ug/ml a 100 ug/ml y uso combinado de polomixina b y atp para preparar un medicamento util en el tratamiento de tumores.

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1444935A (zh) * 2002-05-09 2003-10-01 华东理工大学 表没食子儿茶素没食子酸酯在抗肿瘤药物中应用
CN1473041A (zh) * 2000-10-31 2004-02-04 ������������ʽ���� 联合用作抗癌剂的药物组合物

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1473041A (zh) * 2000-10-31 2004-02-04 ������������ʽ���� 联合用作抗癌剂的药物组合物
CN1444935A (zh) * 2002-05-09 2003-10-01 华东理工大学 表没食子儿茶素没食子酸酯在抗肿瘤药物中应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
中药柴胡提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度的影响 韩晓红，北华大学学报(自然科学版)，第5卷第4期 2004 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN1706454A (zh) 2005-12-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20150042274A (ko) 식물 마이크로 리보핵산의 추출, 제조 및 그 응용
CN103385912A (zh) 猴耳环提取物及其在制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌药物中的应用
Cui et al. Stimulation of dragon's blood accumulation in Dracaena cambodiana via fungal inoculation
CN102824417A (zh) 治疗幽门螺旋杆菌相关疾病的新方法
CN105816511A (zh) 猴耳环提取物在制备抗多重耐药鲍曼不动杆菌药物中的应用
CN101254224A (zh) 一种用于抗艾滋病病毒和抗菌的青梅提取物
CN1313104C (zh) 一种具有柴胡和多霉素协同作用的抗癌药物组合物
CN102198195A (zh) 一种具有抗氧化功能的药物组合物
HuAng et al. Antihypertensive activities of extracts from tissue cultures of Vitis thunbergii var. taiwaniana
CN106822331A (zh) 以锁状多聚体多酚为主的荔枝皮提取物在制备治疗高尿酸血症药物或保健品中的应用
CN1733752A (zh) 具有抗癌、抗菌作用的余甘子提取物及其中药制剂的生产方法
CN106074662B (zh) 一种具有解酒保肝作用的姜黄组合物
CN103638052A (zh) 双齿多刺蚁提取物及其制备和医药用途
CN106177035B (zh) 具有降血糖、抗癌的月季花有效提取物的制备方法及应用
CN104857116B (zh) 中药地榆在制备抗真菌药物增效剂中的应用
CN102697800B (zh) 繁缕多糖组合物及其在制备抗病毒药物中的应用
CN101084991B (zh) 一种藏药唐古特青兰提取物及其在制备抗病毒药物中的应用
CN106135204A (zh) 番石榴属植物中二苯酮类化合物作为抗真菌的应用
CN115607606B (zh) 辣椒来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用
CN109602775B (zh) 乳苣醇提物在制备抗乳腺癌药物中的用途
CN103638055A (zh) 拟黑多刺蚁提取物及其和抗真菌医药用途
Al-Khalasi et al. Antifungal activity of Moringa peregrina plant extracts against Candida kruzei
CN103877126B (zh) 瘤盖拟层孔菌的药用用途及治疗肿瘤的药物组合物
CN110025643B (zh) 一种抗癌活性复方物及其制备方法与应用
CN108992478A (zh) 楤木提取物在制备药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20070502

Termination date: 20140527