CN1308011C

CN1308011C - 一种提取灵芝孢子脂溶性活性物质的方法

Info

Publication number: CN1308011C
Application number: CNB2003101211849A
Authority: CN
Inventors: 文华安
Original assignee: Beijing Hengdali Real Estate Co ltd; Institute of Microbiology of CAS
Current assignee: Beijing Hengdali Real Estate Co ltd; Institute of Microbiology of CAS
Priority date: 2003-12-22
Filing date: 2003-12-22
Publication date: 2007-04-04
Anticipated expiration: 2023-12-22
Also published as: CN1631431A

Abstract

本发明公开了一种提取灵芝孢子脂溶性活性物质的方法。本发明所提供的提取灵芝孢子脂溶性活性物质的方法，是以破壁灵芝孢子粉为原料，以CO₂为萃取剂，应用CO₂超临界点技术提取灵芝孢子脂溶性活性物质，所述CO₂的纯度为99.9%食用级CO₂，流量为12-18L/小时；萃取温度为25℃-45℃，萃取压力为25-35MPa，萃取时间为1-6小时。本发明方法获得的灵芝孢子脂溶性活性物质含有大量的灵芝三萜类化合物和不饱和脂肪酸。可将本发明提取的灵芝孢子脂溶性活性物质制成胶囊或滴剂、或作为添加剂加入其它食品或保健品中，或作为化妆品的原料。

Description

一种提取灵芝孢子脂溶性活性物质的方法

技术领域

本发明涉及应用超临界萃取装置提取灵芝孢子脂溶性活性物质的方法及其专用设备。

背景技术

灵芝(Ganoderma lucidum)是中医药宝库中的珍品，是著名的药用真菌。在我国把灵芝作为药物应用已有悠久历史。早在2000年前的《神农本草经》就把灵芝列为上药，并详细论述了灵芝的性味、功用等，以后历代医学家如葛洪的《抱朴子》、苏敬的《新修本草》、陶弘景的《神农本草经集注》，以及李时珍的《本草纲目》等也论述、记载了灵芝的药用功能。中国药典(2000版，一部)收载了灵芝作为法定中药材，国家卫生部批准灵芝为新资源食品。

现代医学研究证明，灵芝能提高人体免疫功能，抑制肿瘤，对慢性支气管炎、神经衰弱、冠心病、肝炎、高血脂症、高血压、白细胞减少症等疾病都有较好的作用。长期服用灵芝类产品，能增强体质，预防疾病，加速康复，已被人们普遍接受。

灵芝孢子是灵芝子实体成熟时产生肉眼看似褐色烟雾粉状物，掉落在灵芝菌盖上或地上，这种粉状物在显微镜下观察是一个个形如褐色瓜子状的孢子，即灵芝孢子，大量的孢子收集在一起称为灵芝孢子粉。

灵芝孢子是灵芝的精华。灵芝孢子含有灵芝多糖，三萜类化合物，核苷酸，不饱和脂肪酸等重要的生物活性成份。但是，灵芝孢子的细胞壁由几丁质组成，十分坚硬，其细胞内的生物活性成分很难被释放利用。

目前，从灵芝子实体或孢子中获得具生理活性的灵芝多糖、三萜类(灵芝酸)、核苷酸和不饱和脂肪酸等化合物，主要方法是通过水提(高温下)、有机溶剂提取。方法之一：在高温下水提取后，用有机溶剂沉淀；方法之二：有机溶剂提取后，回收溶剂，获得灵芝粗提取物。上述方法通过高温提取造成对灵芝有效成分部分破坏，有机溶剂提取对环境造成一定污染，产品中有一定量的有机溶剂残留。2002年，有从灵芝孢子中提取灵芝孢子油的报导，方法是：将灵芝孢子加入水、明胶、淀粉的混合物中，或一种食用添加剂中，混合均匀，挤压成型，自然干燥，然后进行超临界点萃取，获得灵芝孢子油和脱脂灵芝孢子。该方法需要在灵芝孢子粉中加水或添加剂，造型较复杂，而且孢子油产率较低(15.8％)，添加剂混入脱脂灵芝孢子粉中，难于分离。

发明创造内容

本发明的目的是提供一种产率较高、成本较低的提取灵芝孢子脂溶性活性物质(灵芝孢子油)的方法。

本发明所提供的提取灵芝孢子脂溶性活性物质的方法，是以破壁灵芝孢子粉为原料，以CO₂为萃取剂，应用超临界点技术提取灵芝孢子脂溶性活性物质。

所述破壁灵芝孢子粉可由常规方法制备，按下述方法可得到更好的破壁灵芝孢子粉：本方法是使用BILION POWDER微粉机(型号：BFM-J6BI)，首先将设备接通电源，设定制冷温度在5℃至-15℃，待温度降至设定温度后，将优质灵芝孢子粉装入粉碎鼓内，设定粉碎时间为40分钟，启动运行键，运行40分钟后，待机器停止运行，打开粉碎鼓阀门，取出被破壁的灵芝孢子粉。本方法保证了灵芝孢子的生物活性成分不被破坏，破壁率达95％以上。

所述CO₂的纯度为99.9％食用级CO₂，流量为12-18L/小时；所述萃取温度为25℃-45℃，所述萃取压力为25-35MPa，所述萃取时间为1-6小时。

为了达到更好的萃取效果，所述萃取釜II(1L)CO₂的流量优选为14L/小时，萃取釜I(5L)CO₂的流量优选为18L/小时；所述萃取温度为35℃，所述萃取压力为30MPa，所述萃取釜II(1L)萃取时间为2小时，萃取釜I(5L)萃取时间为4小时。所述灵芝孢子脂溶性活性物质与所述萃取剂CO₂进行分离的压力分离器I为10MPa，分离器II为4MPa，温度分离器I为50℃，分离器II为45℃。

所述灵芝孢子脂溶性活性物质与所述萃取剂进行分离的压力为4MPa-10MPa，温度为45-50℃。

本发明的第二个目的是提供一种提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备。

本发明所提供的提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备，包括CO₂输入装置，萃取装置和分离装置；所述CO₂输入装置的输出端连接于所述萃取装置的输入端，所述萃取装置的输出端连接于所述分离装置的输入端。

所述CO₂输入装置包括存储CO₂的贮罐，检测CO₂流量的流量计和提供高压CO₂的高压泵以及净化CO₂的净化器；所述贮罐的输出端连接于所述流量计的输入端，所述流量计的输出端连接于所述高压泵的输入端，所述高压泵的输出端连接于所述净化器的输入端，所述净化器的输出端连接于所述萃取装置的输入端。

为了节约能源，提高CO₂的利用率，所述提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备还包括净化器，所述净化器的输入端连接于所述分离装置的输出端，所述净化器的输出端连接于所述贮罐的输入端。

为了适应不同提取规模的需要，提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备可选择不同容量的萃取装置。为了防止加入萃取装置的破壁灵芝孢子粉堵塞设备，所述萃取装置的出口处巧妙地设置了一过滤装置，如滤纸。

为达到更好的分离效果，所述提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备可包括两个或两个以上的所述分离装置。

本发明在低温、以无毒CO₂为溶媒的条件下，应用超临界点萃取技术从破壁灵芝孢子粉中更加简便地提取灵芝孢子脂溶性活性物，具有以下优点：1.破壁灵芝孢子粉中不添加粘结剂，加滤纸有效地防止了因灵芝孢子粉体积小容易进入超临界萃取设备系统所引起的堵塞，保证了提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备的安全使用；2.在低温下CO₂超临界点萃取破壁灵芝孢子粉，萃取物不受高温影响，并在密闭的环境中进行萃取，防止了产物的氧化；3.在分离器中进行灵芝孢子脂溶性活性物质的分离、纯化，保证了灵芝孢子脂溶性活性物质的纯正；4.萃取时间短，仅需1-6小时，节约能源，有效地提高了设备的利用率；5.方法简单，易掌握，成本低，灵芝孢子脂溶性活性物质的收率高，达29.0％。

实验证明，上述方法获得的灵芝孢子脂溶性活性物质含有大量的灵芝三萜类化合物和不饱和脂肪酸。可将本发明提取的灵芝孢子脂溶性活性物质制成胶囊或滴剂、或作为添加剂加入其它食品或保健品中，或作为化妆品的原料。

附图说明

图1为本发明的提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备示意图

具体实施方式

实施例1、用于提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备

用于提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备如图1所示，它包括CO₂输入装置，萃取装置和分离装置；其中，CO₂输入装置包括存储CO₂的贮罐A，检测CO₂流量的流量计B和提供高压CO₂的高压泵C以及净化CO₂的净化器D₁；贮罐A的输出端连接于流量计B的输入端，流量计B的输出端连接于高压泵C的输入端，高压泵C的输出端连接于净化器D₁的输入端；萃取装置包括阀门1(2)及萃取缸(釜)I(II)，净化器D₁的输出端连接于萃取缸的输入端；分离装置包括分离器I和II，萃取缸的输出端连接于分离器的输入端。

为了提高CO₂的利用率，本发明的设备还包括净化器D₂，净化器D₂的输入端连接于分离器II的输出端，净化器D₂的输出端连接于贮罐A的输入端。

实施例2、提取灵芝孢子脂溶性活性物质

使用图1所示的提取灵芝孢子脂溶性活性物质的设备进行提取灵芝孢子脂溶性活性物质，具体过程如下：将优质的破壁灵芝孢子粉200克装入萃取釜II中，取圆形新华滤纸一张盖在萃取釜口上，拧紧萃取釜盖。开启阀门，通入纯度99.9％食用级CO₂，CO₂从贮罐A经流量计B进入高压泵C加压，加压后的CO₂经净化器D₁，开启阀门1进入萃取釜II(1L)。控制CO₂流量14L/h，萃取釜II(1L)萃取压力30MPa，萃取温度35℃，分离器I压力10MPa，温度50℃，分离器II压力4MPa，温度45℃，萃取2小时。从萃取釜II出的CO₂携带的灵芝孢子脂溶性物混合液进入分离器I和II，经减压后分离，CO₂经净化器返回贮罐A，循环使用。将萃取的灵芝孢子脂溶性活性物质从分离器I底部放出，获得高纯度的灵芝孢子脂溶性活性物质，放低温避光保存。从分离器I中分离出灵芝孢子脂溶性活性物58.8克，产率29.4％。

实施例3、提取灵芝孢子脂溶性活性物质

方法、操作同实施例1，所不同的是萃取釜II(1L)萃取压力为25MPa，温度30℃，萃取3小时，获得灵芝孢子脂溶性活性物质33.8克，产率16.9％。

实施例4、提取灵芝孢子脂溶性活性物质

方法、操作同实施例1，所不同的是萃取釜II(1L)萃取压力为30MPa，温度25℃，萃取时间6小时，获得灵芝孢子脂溶性活性物质23.7克，产率11.85％。

实施例5、提取灵芝孢子脂溶性活性物质

方法、操作实施例1，所不同的是萃取釜II(1L)萃取压力为35MPa，温度30℃，萃取时间4小时，获得灵芝孢子脂溶性活性物质44.6克，产率22.3％。

实施例6、提取灵芝孢子脂溶性活性物质

方法、操作同实施例1，所不同的是萃取釜II(1L)萃取压力为30MPa，温度30℃，萃取时间3小时，获得灵芝孢子脂溶性活性物质38.5克，产率19.25％。

实施例7、提取灵芝孢子脂溶性活性物质

方法、操作同实施例1，所不同的是萃取釜II(1L)萃取压力为30MPa，萃取温度40℃，萃取时间3小时，获得灵芝孢子脂溶性活性物质52.5克，产率26.25％。

实施例8、提取灵芝孢子脂溶性活性物质

方法、操作同实施例1，所不同的是萃取釜II(1L)萃取压力为30MPa，萃取温度45℃，萃取时间3小时，获得灵芝孢子脂溶性活性物质49.0克，产率24.5％。

实施例9、提取灵芝孢子脂溶性活性物质

将优质的破壁灵芝孢子粉1000克装入萃取釜I(5L)中，取圆形新华滤纸一张盖在萃取釜口上，拧紧萃取釜盖。开启阀门，通入纯度99.9％食用级CO₂，CO₂从贮罐A经流量计B进入高压泵C加压，加压后的CO₂经净化器D₁，开启阀门2进入萃取釜I(5L)。控制CO₂流量18L/h，萃取缸I(5L)萃取压力30MPa，萃取温度35℃，分离器I压力10MPa，温度50℃，分离器II压力4MPa，温度45℃，萃取4小时。从萃取釜I出的CO₂携带的灵芝孢子脂溶性物混合液进入分离器I和II，经减压后分离，CO₂经净化器返回贮罐A，循环使用。将萃取的灵芝孢子脂溶性物从分离器I底部放出，获得高纯度的灵芝孢子脂溶性活性物质，放低温避光保存。从分离器I中分离出灵芝孢子脂溶性活性物质279.4克，产率27.94％。

实施例10、灵芝孢子脂溶性活性物质的检测

1.灵芝孢子脂溶性活性物质中不饱和脂肪酸的检测采用色谱仪(TL9900)分析，结果表明不饱和脂肪酸(油酸、亚油酸、亚麻酸和棕榈酸)含量达76.56％。

2.灵芝孢子脂溶性活性物质中三萜类化合物的检测采用高压液相色谱仪HPLC(LC-6A)分析，结果表明灵芝三萜(赤芝孢子酸A、赤芝酸A、灵芝酸C)含量达2.458×100^-2％。

Claims

1、一种提取灵芝孢子脂溶性活性物质的方法，是以破壁灵芝孢子粉为原料，以流量为14L/小时的CO₂为萃取剂，在温度为35℃、压力为30MPa的条件下，萃取2小时，获得灵芝孢子脂溶性活性物质；其中，依次采用两个分离器使所述灵芝孢子脂溶性活性物质与所述萃取剂CO₂分离，分离器I的压力为10MPa，温度为50℃，分离器II的压力为4MPa，温度为45℃。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述CO₂的纯度为99.9％食用级CO₂。