CN1279223C - 亚麻微生物快速脱胶温水沤麻方法 - Google Patents
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Abstract
亚麻微生物快速脱胶温水沤麻方法，它涉及一种沤麻方法。现有的沤麻方法存在发酵周期长、出麻率低、亚麻纤维强度低、质量差的弊端。本发明的沤麻方法是将菌种在30℃下用果胶固体培养基活化24小时，活化后的菌种以沤麻容器中亚麻原茎重量的1%为接种量接入到沤麻容器中，此时亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，然后用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻池中加入46.3～92.6g/m3氯化钠和92.6～129.6g/m3尿素，78-100个小时后，沤麻结束；本发明的沤麻方法可以缩短亚麻的发酵周期、提高亚麻纤维的出麻率、提高亚麻纤维的强度、改善亚麻纤维质量、减少亚麻沤制中污水，利于推广应用。
Description
技术领域：
本发明涉及一种沤麻方法。
背景技术：
目前我国采用的温水沤麻的方法是：首先将原茎分为各个等级，然后将同一等级的原茎经过人工捆成每个三公斤左右的小捆，将捆好的亚麻原茎装入沤麻池中装载密度为95-100公斤/立方米，然后将沤麻池注满清水浸泡四个小时(这称为‘先水’或‘一遍水’)，四个小时后将沤麻池中的水排净，再将沤麻池用清水注满(这称为‘上温水’或‘二遍水’)，注满后给沤麻池用蒸汽加温至所需要的温度(一般为30℃～37℃)，在亚麻沤制过程中每天两遍用蒸汽补温(也叫补气)至所要求的温度。在判断沤制终点时采用的是感官法，感官法主要就是指“抽茎法”(在麻茎的根部三分之一的位置将沤制完成的麻茎折断，能够将其中的木质部由纤维部中抽出为到达沤制终点)。上述方法存在的弊端是：1.温水沤麻的发酵周期时间长：目前对于亚麻原料厂的亚麻原茎来说基本上是分为五个等级，其中每一个等级的沤制工艺都不是很一致，这主要体现在沤制温度不同和沤制时间不同，而且各个原料厂的沤制工艺执行标准也不是很一致：1-3等原茎的沤制温度为33℃-35℃，沤制时间为110-124小时；4-5等原茎的沤制温度为30℃-32℃，沤制时间为95-110小时。2.温水沤麻的出麻率低。3.温水沤麻生产的亚麻纤维强度低：采用天然沤麻方法一、二等原茎所产纤维强度为170-180N，三等原茎所产纤维强度为160-170N，四、五等原茎所产纤维强度为130-150N。4.温水沤麻所消耗的能耗较大：沤麻生产需要使沤麻池内的温度达到一定的温度，实现这一条件工厂采用蒸汽补温，这样的话每天每个池子要补汽两遍就要耗费大量的蒸汽，也就是要耗费大量的煤。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种可以缩短亚麻的发酵周期、提高亚麻纤维的出麻率、提高亚麻纤维的强度、改善亚麻纤维质量、减少亚麻沤制中污水的亚麻微生物快速脱胶温水沤麻方法，将菌种在30℃下用牛肉膏蛋白胨固体培养基活化24小时，活化后的菌种以沤麻容器中亚麻原茎重量的1％为接种量接入到沤麻容器中，此时亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，然后用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻池中加入46.3～92.6g/m3氯化钠和92.6～129.6g/m3尿素，78-100个小时后，沤麻结束；前述菌种的制备过程如下：沤麻液接种在富集培养基中，37℃静止培养，24小时后，用无菌移液管吸取5mL菌液转至另外装有100mL富集培养基的三角瓶中培养24h，连续转接2～3次，所加的果胶量随着转接次数逐渐增加；然后将菌液用平板稀释法在分离培养基上涂布，37℃静止培养48h，将获得的单菌落保存后在分离培养基上利用“三区划线”的方法反复纯化后，即得到所述的菌种；前述活化用的牛肉膏蛋白胨固体培养基为：按牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，121℃灭菌30min；前述沤麻液接种的富集培养基：按牛肉膏3g、蛋白胨4g、NaCl 5g、果胶3g～15g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min；前述涂布所用的分离培养基：按果胶4g、蛋白胨4g、NaCl 5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min。使用本发明沤麻方法，可以对一等原茎由原来的出麻率17％提高至18.5％、对二等原茎由原来的出麻率15％提高至16.5％、对三等原茎由原来的出麻率13％提高至14％、对四等原茎由原来的出麻率10％提高至11％、对五等原茎由原来的出麻率8％提高至8.5％。在对巴彦亚麻有限公司的实际测试时得知，使用本发明的沤麻方法可以对全厂原茎的平均出麻率提高1％。使用本发明的沤麻方法可以使每一种原茎的强度提高20-30N。使用本发明的沤麻方法可以提高亚麻纤维的平均号1#。使用本发明的沤麻方法可以使沤麻过程缩短24小时，因此可以节省两遍汽，从而达到节约能耗的目的。
具体实施方式：
具体实施方式一：将菌种在30℃下用牛肉膏蛋白胨固体培养基活化24小时，活化后的菌种以沤麻容器中亚麻原茎重量的1％为接种量接入到沤麻容器中，此时亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，然后用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻池中加入46.3～92.6g/m3氯化钠和92.6～129.6g/m3尿素，78-100个小时后，沤麻结束；
前述菌种的制备过程如下：沤麻液接种在富集培养基中，37℃静止培养，24小时后，用无菌移液管吸取5mL菌液转至另外装有100mL富集培养基的三角瓶中培养24h，连续转接2～3次，所加的果胶量随着转接次数逐渐增加；然后将菌液用平板稀释法在分离培养基上涂布，37℃静止培养48h，将获得的单菌落保存后在分离培养基上利用“三区划线”的方法反复纯化后，即得到所述的菌种；
前述活化用的牛肉膏蛋白胨固体培养基为：按牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，121℃灭菌30min；
前述沤麻液接种的富集培养基：按牛肉膏3g、蛋白胨4g、NaCl 5g、果胶3g～15g、加水至1000mL的比例配制，pH7.0～7.2，112℃灭菌30min；
前述涂布所用的分离培养基：按果胶4g、蛋白胨4g、NaCl 5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min。
本发明中沤麻所采用菌种，申请人将其取名为果胶酶产生菌HDYM-01，HDYM-02：
HDYM-01：为好氧端生芽孢短杆菌，革兰氏染色为紫色，阳性。菌落形态为圆形、菌落颜色乳白、菌落边缘不整齐、菌落表面不光滑、隆起、不透明、菌落干燥。乙酰甲基甲醇(V.P)实验阴性，产硫化氢实验阳性，明胶液化阳性，硝酸盐还原阴性，淀粉水解阴性，吲哚试验阴性，糖发酵试验产酸不产气。
HDYM-02：为兼性厌氧中生芽孢链杆菌，革兰氏染色为红色，阴性。菌落形态为圆形或椭圆、菌落颜色乳白、菌落边缘整齐、菌落表面光滑、隆起、不透明、菌落湿润。乙酰甲基甲醇(V.P)实验阴性，产硫化氢实验阳性，明胶液化阴性，硝酸盐还原阳性，淀粉水解阳性，吲哚试验阴性，糖发酵试验产酸产气。
根据以上菌株的形态特征及生理生化特性，参照《伯杰氏细菌鉴定手册》中规定，将好氧和兼性厌氧的产芽孢细菌都列入芽孢杆菌属。HDYM-01菌株在好氧条件下生长良好，HDYM-02菌株在好氧和厌氧情况下均可生长，鉴于此，HDYM-01，HDYM-02菌株初步鉴定为芽孢杆菌属。
在前述菌种活化之后可以进行扩大培养，其扩大培养过程为：a.一级菌种培养：将活化后的菌种用接种环分别接入装有工业扩大培养基300mL的10个三角瓶中，每个瓶中用一个接种环的菌种，30℃培养24小时，使菌体数量达到1×108以上；b.二级菌种培养：以a步骤中1％菌液的接种量接种到装有工业扩大培养基300L的培养容器中，30℃培养24小时，使菌体数量达到1×108以上；c.三级种子培养：再以b步骤中1％菌液的接种量接种到装有工业扩大培养基3t的培养容器中，30℃培养24小时，即完成扩大培养过程；
前述工业扩大培养基按：玉米糖浆10mL，新鲜豆浆10mL，大粒盐5g，尿素2g，加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min。
Claims (2)
1.一种亚麻微生物快速脱胶温水沤麻方法，其特征在于将菌种在30℃下用牛肉膏蛋白胨固体培养基活化24小时，活化后的菌种以沤麻容器中亚麻原茎重量的1％为接种量接入到沤麻容器中，此时亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，然后用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻池中加入46.3～92.6g/m3氯化钠和92.6～129.6g/m3尿素，78-100个小时后，沤麻结束；
前述菌种的制备过程如下：沤麻液接种在富集培养基中，37℃静止培养，24小时后，用无菌移液管吸取5mL菌液转至另外装有100mL富集培养基的三角瓶中培养24h，连续转接2～3次，所加的果胶量随着转接次数逐渐增加；然后将菌液用平板稀释法在分离培养基上涂布，37℃静止培养48h，将获得的单菌落保存后在分离培养基上利用“三区划线”的方法反复纯化后，即得到所述的菌种；
前述活化用的牛肉膏蛋白胨固体培养基为：按牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，121℃灭菌30min；
前述沤麻液接种的富集培养基：按牛肉膏3g、蛋白胨4g、NaCl5g、果胶3g～15g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min；
前述涂布所用的分离培养基：按果胶4g、蛋白胨4g、NaCl5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min。
2.根据权利要求1所述的亚麻微生物快速脱胶温水沤麻方法，其特征在于在菌种活化之后进行扩大培养，其扩大培养过程为：a.一级菌种培养：将活化后的菌种用接种环分别接入装有工业扩大培养基300mL的10个三角瓶中，每个瓶中用一个接种环的菌种，30℃培养24小时，使菌体数量达到1×108以上；b.二级菌种培养：以a步骤中1％菌液的接种量接种到装有工业扩大培养基300L的培养容器中，30℃培养24小时，使菌体数量达到1×108以上；c.三级种子培养：再以b步骤中1％菌液的接种量接种到装有工业扩大培养基3t的培养容器中，30℃培养24小时，即完成扩大培养过程；前述工业扩大培养基按：玉米糖浆10mL，新鲜豆浆10mL，大粒盐5g，尿素2g，加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min。
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