CN1270001C - 加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法 - Google Patents
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Abstract
加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法，它涉及一种沤麻方法。现有的沤麻方法存在沤麻废液不能重复利用、生产成本高的弊端。本发明的沤麻方法是将经过微生物脱胶温水沤麻方法所得的沤麻液以沤麻容器容积50%的量加入到沤麻容器中，容器中的亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，再用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻容器中加入氯化钠和尿素，加入量为每立方米沤麻容器加74～92.6克氯化钠和1 29.6～231.5克尿素，72～88个小时后，沤麻结束。本发明的沤麻方法可以降低生产成本，缩短亚麻的发酵周期、提高亚麻纤维的出麻率、提高亚麻纤维的强度、改善亚麻纤维质量、减少亚麻沤制中污水，利于推广应用。
Description
技术领域：
本发明涉及一种用沤麻废液沤麻的方法。
背景技术：
目前我国采用的温水沤麻的方法是：首先将亚麻原茎分为各个等级，然后将同一等级的原茎经过人工捆成每个三公斤左右的小捆，将捆好的亚麻原茎装入沤麻池中，装载密度为95-100公斤/立方米，然后将沤麻池注满清水浸泡四个小时(这称为‘先水’或‘一遍水’)，四个小时后将沤麻池中的水排净，再将沤麻池用清水注满(这称为‘上温水’或‘二遍水’)，注满后给沤麻池用蒸汽加温至所需要的温度。这要耗费大量的煤，并且现有的沤麻废液只能排放，不仅使环境污染，而且造成了原料浪费。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种可以使沤麻废液重复使用的加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法，具体步骤为：将微生物脱胶温水沤麻方法反应后的沤麻液以沤麻容器容积50％的量加入到沤麻容器中，容器中的亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，再用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻容器中加入氯化钠和尿素，加入量为每立方米沤麻容器加74～92.6克氯化钠和129.6～231.5克尿素，72～88个小时后，沤麻结束。微生物脱胶温水沤麻方法为：将菌种在30℃下用牛肉膏蛋白胨固体培养基活化24小时，活化后的菌种以沤麻容器中亚麻原茎重量的1％为接种量接入到沤麻容器中，此时亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，然后用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻容器中加入氯化钠和尿素，加入量为每立方米沤麻容器加46.3～74克氯化钠和92.6～129.6克尿素，72～88个小时后，沤麻结束。使用本发明沤麻方法，可以使沤麻废液重复使用，避免了环境污染的同时，降低了成本，加菌沤麻液能够回用的基本原理如下：1、加菌沤麻液发酵结束后，发酵液中的果胶酶产生菌的数量要高于没有加菌的沤麻液(可以高10倍)：在加菌沤麻过程中，加入的是果胶酶产生菌。经过一个沤麻周期后在沤麻液中的果胶酶产生菌以芽孢的形式存在于沤麻液中，这是由于沤麻液中可以被果胶酶产生菌所利用的能源物质被消耗完，从而果胶酶产生菌要以芽孢的形式存在。不加菌沤麻液中的果胶酶产生菌也是在发酵结束时以芽孢的形式存在，只是量很少并且在沤麻液中有害菌和一些有害物质要高于加菌沤麻液。加菌沤麻液中的有害菌要低于不加菌的沤麻液，这是生态竞争的结果。2、加菌沤麻液中的果胶酶活性要高于不加菌沤麻液中的果胶酶活性：在加菌沤麻的过程中，果胶酶产生菌的数量大量增加，在果胶酶产生菌的数量大量增加时果胶酶产生菌要产生果胶酶去分解果胶。因为加菌沤麻液中果胶酶产生菌的数量很大，从而它的产酶量也很大(酶是一种蛋白质)，这些产生的酶就存在于加菌沤麻液中，再回用时，沤麻液中的酶活性就要高于正常的工艺。并且，经实际测试，使用本发明的方法，对一等原茎由原来的出麻率17％可以提高至18.5％，对二等原茎由原来的出麻率15％提高至16.5％，对三等原茎由原来的出麻率13％提高至14％，对四等原茎由原来的出麻率10％提高至11％，对五等原茎由原来的出麻率8％提高至8.5％。在对巴彦亚麻有限公司的实际测试时得知，使用本发明的沤麻方法可以对全厂原茎的平均出麻率提高1％。使用本发明的沤麻方法可以使每一种原茎的强度提高20-30N。使用本发明的沤麻方法可以提高亚麻纤维的平均号1#。使用本发明的沤麻方法可以使沤麻过程缩短24～36小时，因此可以节省两遍汽，从而达到节约能耗的目的。
具体实施方式：
具体实施方式一：将微生物脱胶温水沤麻方法反应后的沤麻液以沤麻容器容积50％的量加入到沤麻容器中，容器中的亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，再用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻容器中加入氯化钠和尿素，加入量为每立方米沤麻容器加74～92.6克氯化钠和129.6～231.5克尿素，72～88个小时后，沤麻结束。
将菌种在30℃下用牛肉膏蛋白胨固体培养基活化24小时，活化后的菌种以沤麻容器中亚麻原茎重量的1％为接种量接入到沤麻容器中，此时亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，然后用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻容器中加入氯化钠和尿素，加入量为每立方米沤麻容器加46.3～74克氯化钠和92.6～129.6克尿素，72～88个小时后，沤麻结束。
前述菌种的制备过程如下：沤麻液接种在富集培养基中，37℃静止培养，24小时后，用无菌移液管吸取5mL菌液转至另外装有100mL富集培养基的三角瓶中培养24h，连续转接2～3次，所加的果胶量随着转接次数逐渐增加；然后将菌液用平板稀释法在分离培养基上涂布，37℃静止培养48h，将获得的单菌落保存在分离培养基上，利用“三区划线”的方法反复纯化后，即得到所述的菌种；
前述活化用的固体培养基为牛肉膏蛋白胨培养基：按牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，121℃灭菌30min；
前述沤麻液接种的富集培养基：按牛肉膏3g、蛋白胨4g、NaCl 5g、果胶3g～15g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min；
前述涂布所用的分离培养基：按果胶4g、蛋白胨4g、NaCl 5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min。
本发明中沤麻所采用菌种，申请人将其取名为果胶酶产生菌HDYM-01，HDYM-02：
HDYM-01：为好氧端生芽孢短杆菌，革兰氏染色为紫色，阳性。菌落形态为圆形，菌落颜色乳白，菌落边缘不整齐，菌落表面不光滑、隆起、不透明，菌落干燥。乙酰甲基甲醇(V.P)实验阴性，产硫化氢实验阳性，明胶液化阳性，硝酸盐还原阴性，淀粉水解阴性，吲哚试验阴性，糖发酵试验产酸不产气。
HDYM-02：为兼性厌氧中生芽孢链杆菌，革兰氏染色为红色，阴性。菌落形态为圆形或椭圆，菌落颜色乳白，菌落边缘整齐，菌落表面光滑、隆起、不透明，菌落湿润。乙酰甲基甲醇(V.P)实验阴性，产硫化氢实验阳性，明胶液化阴性，硝酸盐还原阳性，淀粉水解阳性，吲哚试验阴性，糖发酵试验产酸产气。
根据以上菌株的形态特征及生理生化特性，参照《伯杰氏细菌鉴定手册》中规定，将好氧和兼性厌氧的产芽孢细菌都列入芽孢杆菌属。HDYM-01菌株在好氧条件下生长良好，HDYM-02菌株在好氧和厌氧情况下均可生长，鉴于此，HDYM-01。HDYM-02菌株初步鉴定为芽孢杆菌属。
在前述菌种活化之后可以进行扩大培养，其扩大培养过程为：a.一级菌种培养：将活化后的菌种用接种环分别接入装有工业扩大培养基300mL的10个三角瓶中，每个瓶中用一个接种环的菌种，30℃培养24小时，使菌体数量达到1×108以上；b.二级菌种培养：以a步骤中1％菌液的接种量接种到装有工业扩大培养基300L的培养容器中，30℃培养24小时，使菌体数量达到1×108以上；c.三级种子培养：再以b步骤中1％菌液的接种量接种到装有工业扩大培养基3t的培养容器中，30℃培养24小时，即完成扩大培养过程；
前述工业扩大培养基按：玉米糖浆10mL、新鲜豆浆10mL、大粒盐5g、尿素2g，加水至1000mL的比例配制，pH 7.0～7.2，112℃灭菌30min。
Claims (5)
1.一种加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法，其特征在于将经过微生物脱胶温水沤麻方法反应后的沤麻液以沤麻容器容积50％的量加入到沤麻容器中，容器中的亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，再用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻容器中加入氯化钠和尿素，加入量为每立方米沤麻容器加74～92.6克氯化钠和129.6～231.5克尿素，72～88个小时后，沤麻结束；微生物脱胶温水沤麻方法为：将菌种在30℃下用牛肉膏蛋白胨固体培养基活化24小时，活化后的菌种以沤麻容器中亚麻原茎重量的1％为接种量接入到沤麻容器中，此时亚麻原茎已经经过2～4小时温水的浸泡，然后用清水加满沤麻容器，并加温至30℃～37℃，加温的同时向沤麻容器中加入氯化钠和尿素，加入量为每立方米沤麻容器加46.3～74克氯化钠和92.6～129.6克尿素，72～88个小时后，沤麻结束。
2.根据权利要求1所述的加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法，其特征在于所述菌种的制备过程如下：沤麻液接种在富集培养基中，37℃静止培养，24小时后，用无菌移液管吸取5mL菌液转至另外装有100mL富集培养基的三角瓶中培养24h，连续转接2～3次，所加的果胶量随着转接次数逐渐增加；然后将菌液用平板稀释法在分离培养基上涂布，37℃静止培养48h，将获得的单菌落保存后在分离培养基上利用“三区划线”的方法反复纯化后，即得到所述的菌种。
3.根据权利要求1所述的加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法，其特征在于所述活化用的固体培养基为牛肉膏蛋白胨培养基：按牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH7.0～7.2，121℃灭菌30min。
4.根据权利要求2所述的加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法，其特征在于所述沤麻液接种的富集培养基：按牛肉膏3g、蛋白胨4g、NaCl 5g、果胶3g～15g、加水至1000mL的比例配制，pH7.0～7.2，112℃灭菌30min。
5.根据权利要求2所述的加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法，其特征在于所述涂布所用的分离培养基：按果胶4g、蛋白胨4g、NaCl 5g、琼脂15g～20g、加水至1000mL的比例配制，pH7.0～7.2，112℃灭菌30min。
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