CN1277672A - 由从流体样品分离出的颗粒物自动形成单层的方法和装置 - Google Patents

由从流体样品分离出的颗粒物自动形成单层的方法和装置 Download PDF

Info

Publication number
CN1277672A
CN1277672A CN98810541A CN98810541A CN1277672A CN 1277672 A CN1277672 A CN 1277672A CN 98810541 A CN98810541 A CN 98810541A CN 98810541 A CN98810541 A CN 98810541A CN 1277672 A CN1277672 A CN 1277672A
Authority
CN
China
Prior art keywords
slide glass
container
group
sample
separately
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN98810541A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1108518C (zh
Inventor
R·A·圭尔圭斯
F·J·约克
R·T·斯塔福德
J·M·克里斯滕森
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
MonoGen Inc
Original Assignee
MonoGen Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by MonoGen Inc filed Critical MonoGen Inc
Publication of CN1277672A publication Critical patent/CN1277672A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1108518C publication Critical patent/CN1108518C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
    • G01N1/31—Apparatus therefor
    • G01N1/312—Apparatus therefor for samples mounted on planar substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y30/00—Nanotechnology for materials or surface science, e.g. nanocomposites
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/2813—Producing thin layers of samples on a substrate, e.g. smearing, spinning-on
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/40—Concentrating samples
    • G01N1/4077—Concentrating samples by other techniques involving separation of suspended solids

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Condensed Matter Physics & Semiconductors (AREA)
  • Composite Materials (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)
  • Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
  • Microscoopes, Condenser (AREA)
  • Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)

Abstract

一种用于批量处理在各自容器中的一组样品的方法和装置。由各样品中过滤出单层颗粒物并使其沉积在一个相应的载片上以便检验。一个控制器协调着该装置的各机构和组件,其中包括:一个用于安置一组容器(20)的容器支架;一个使容器支架前移的传送机构;在采样头台处与各自容器接合的一组头;一个泵;对应于该组头的一组过滤件,每个过滤件与各自样品流连通并包括:一片在样品流第一支路中并适于收集单层颗粒物的膜和一个设置在绕过该膜的第二支路中的玻璃料;一个按照第二布置形式安置有一组载片的载片支座;以及使该载片支座前进到一沉积台的第二传送机构。

Description

由从流体样品分离出的颗粒物自动形成单层的方法和装置
发明背景发明领域
本发明涉及一种用于收集均匀的单层颗粒物的方法和装置。确切地说，本发明涉及用于从体液中收集均匀的单层细胞并制备单层细胞以便用于细胞学协议的半自动化或自动化装置和方法。相关技术描述
在许多技术领域中，从流体中分离出物质并且一般分离出颗粒物的设施和/或能力是检验在流体中是否存在该物质的能力的重要组成部分。与样品制备有关的干扰经常使靶细胞模糊不清，以致该方法不够可靠或成本太高。
这样的情况适用于许多个涉及到探测和/或诊断的领域，其中包括环境检验、辐射研究、癌症筛选、微生物检验、细胞学检验、危险废物污染等等。
在细胞学检验的情况下，从病人那里得到细胞样品。这一般是通过刮擦区域(如在颈部样品的情况下)或者通过收集体液如那些来自胸腔、膀胱或脊髓腔的液体或通过微针穿刺抽吸来实现。在传统的人工细胞学检验中，包括液体中的细胞和碎屑在内的颗粒物通过涂抹方式被转移到载玻片上并随后在空气中干燥。涂抹导致细胞碎屑的不均匀密度和不均匀分布，这经常使靶细胞模糊。用空气干燥造成细胞畸变并进一步防碍了精确检验。而在传统的自动细胞学检验中，必须使样品在离心机中转动以便浓缩细胞并且必须抽去潜伏物质并接着把细胞混入载体液中。这个过程很费时，即通常每份样品至少需要30分钟，而且它需要将靶细胞转移到几个对于每份样品来说必须经过清理或被丢弃的容器中，由此增加了受到污染的可能性。另外，需要有经验的工作人员来主观评价所形成的悬浮液并决定是否需要重复上述过程。接着，将一个过滤器件放在悬浮液中以便分散并在过滤件上截留细胞，这又增加了受到污染的危险性。接着，取出过滤件并使其接触显微镜载片以便观察。
在所有这些尝试中，样品制备协议的限制因素包括使颗粒物充分脱离其流动载体(如生理液、生物液和环境流体)并轻松有效地按照便于显微镜检验的方式收集和浓缩颗粒物。
现有技术包含了许多种用于在流体中分散细胞的方法、装置和结构。例如，US5,143,627开启样品容器并将分散件插入悬浮液中并使分散件转动几分钟。在现有技术的另一个例子中，萨克曼诺(saccomanno)方法被用于处理痰，这是一个既费时又需要许多处理步骤的方法。
人们已经发现，即时处理尿来获得新鲜细胞保证了定量培养产物、尿分析和显微镜学的精度。新鲜细胞要比存留尿细胞更倾向于粘附在载玻片上，这能够更顺利地使细胞展开到玻璃体上。处理延误、对住院病人或出院病人的粗心看护、以及缺乏冷冻作用可能导致不是最佳的载片制备。一个用于解决延误问题的方案是使用尿的化学保鲜剂。但在尿样品中存在保鲜液使得样品自重增大到不可测的水平并可能限制了尿被用于各种传统定量分析如载片显微镜学的潜在有效性。
尤其是临床病理学领域内的诊断微生物学和/细胞学是以细胞显微镜检验和其它显微镜分析为基础的。诊断精确性和可最佳破译样品的制备一般取决于样品的充分准备。新的方法学如免疫细胞化学和图象分析需要可重复、快速、无生物危害且便宜的制备。传统的细胞制备技术无法充分解决细胞密度不均匀、细胞分布不均匀和空气干燥产物的问题。
已经研究出了许多尿或其它生物液体样品的容器来在不用除去尿或生物液体容器的盖子的情况下即可对生物液体样品进行检验。现有技术没有解决在保留细胞母液的同时将细胞以单层转送至检验载片的问题。
过去，通过使用容器来收集液体样品以便作细胞学检验，所述容器含有保鲜液以便在从收集位置运到细胞学实验室的过程中保藏细胞学样品。另外，利用刷子、擦布、拭子或涂刷从体腔收集到的细胞学样品也在将该细胞转移到载片或膜上以便进行染色或检验之前通过固定剂(如酒精或丙酮固定剂)保存在容器中。
最好提供能够不用除去尿或生物液的容器盖子就能检验生物样品的用于尿或其它生物液体样品的容器。但现有技术没有解决无需把装置局部浸在样品中(这提高了受污染的危险)就能把细胞以单层转移到检验载片上并在显微镜载片上连续并重复地形成了高质量单层并处理样品以保存细胞母液的问题。
最佳制备颗粒物以便于显微镜检验的另一个限制因素涉及将颗粒物固定到显微镜载片等上的溶液。
构成细胞学检验材料的细胞学样品可以通过众所周知的刮擦或流体技术而制备得到。但由于可能在这些样品得到染色、加盖片等进一步处理前要等很长时间，所以将固定剂涂敷到细胞学材料上以作为保藏和固定细胞所用的试剂是很重要的。
正确固定(即保藏)细胞学材料如细胞、细胞团和得自人体或动物组织的细胞学收集物的组织碎片是精确诊断疾病且尤其是癌症的前提。必须在获得材料前尽可能固定住细胞学材料以防止细胞畸变。
通常在美国不使用经空气干燥并用四色染剂染色的细胞学样品，尽管这在美国以外地区很流行。通过将载片浸入酒精溶液或通过使载片饱含喷涂固定剂或通过直接将细胞学材料排放入酒精溶液的湿固定方式是一种已知的细胞固定方法。细胞固定是可破译的帕潘尼卡罗(Papanicolaou)、苏木精(HematoxyLin)和曙红(Eosin)或其它染色细胞学样品载片的前提。
通常，不含或以50％-95％(v/v：甲醇，乙醇，异丙醇)的比例含有其它添加剂如聚乙二醇的酒精溶液众所周知地被用作湿固定溶液。但当高于50％(v/v)的酒精溶液被用于收集并固定蛋白质流体时，形成了蛋白质沉积物并且它随后变硬了。蛋白质沉积使得固定的细胞学材料难于被转移到检验载玻片上，无论转移是否是通过直接将它涂覆到载玻片上、通过小孔过滤件的细胞过滤或通过细胞离心到涂有粘结剂如铬矾明胶的载玻片上而实现的。
经过了一个多世纪，用于保藏和制备组织以便分析鉴定的组织固定剂成分仍然是以甲醛为基础。被用于显微镜检验用的组织保藏和薄切片组织制备的标准成分是福尔马林。福尔马林是3％-10％的甲醛水溶液，它通常含大约15％的甲醇。酒精提高了溶液保藏性能。尽管有许多缺点如很明显的毒性和刺激性，但福尔马林仍然是一般实验室首选的固定剂，因为它能够与暴露的组织表面快速反应并随后尽可能长久地保藏细胞。甲醇可能不利地影响了组织结构，它使组织太脆或者通常使它太软而不易作成制备载片用的切片。它还可能产生染色制品或影响染色的杂质。尽管如此，含甲醇的福尔马林仍然可令人满意地提供了被切开并染色以便显微镜检验的保藏组织。
组织学专家长期致力于研究一种有效的免疫组织化学固定剂和组织形态学固定剂。另外，最好保留组织形态的局部保留组织抗原以便进行抗原在组织中的免疫组织化学探测和定位。
这样的固定剂提供了不可溶蛋白质。例如，甲醛可以被用做交联剂，它在醛基与特殊氨基酸之间构成了共价键以稳定蛋白质结构并将细胞质转变成一种阻止自溶酶移动的胶。或者，酒精可以被用作固定剂以便通过变性来沉淀蛋白质。
固定剂最好延迟自溶和腐败并且保留了组织局部和抗原性。遗憾的是，有效的组织固定剂不必是一种有效的免疫组织化学固定剂。
与传统技术相比，本发明的固体物质制备技术致力于解决物质密度不均匀、物质分布不均匀且样品损失和因样品制备过程步骤多而造成污染的问题。因此，本发明的制备导致了固体均匀分布，它们具有非常好的组织形态和改进的可视效果并且容易定位并能够用于光吸收分析，而无须进一步处理或制备样品。发明概述
本发明涉及一种用于收集物质以便探测、分析、定量和/或目测的装置和方法。本发明的自动化装置和方法尤其适用于使物质从生物液、生理液和环境流体中分离并更好地显现出颗粒物以便进行细胞学检验。
本发明涉及用于从一个收集装置或分析组件中的流体样品中收集一层均匀的颗粒物并将均匀的颗粒物层转移到载片上的半自动化或自动化装置和方法。这样的本发明装置通过提供一种其结构和操作比较简单的机构而克服了与收集细胞和其它细胞学颗粒的传统设备有关的问题，所述机构能够从溶液中分离出颗粒并以单层收集数量大约已知的细胞并将收集细胞转移给显微镜载片。在本发明的某些实施例中，装置中没有一个部件处在液体样品中，于是防止了不必要的样品污染。另外，在本发明的某些实施例中，样品容器不在收集和转移细胞的过程中开启，于是消除了样品被装置污染的可能性。在本发明的所有实施例中，样品中的单层颗粒物如细胞经过两个贯穿并环绕过滤件的分支流道被收集到一个过滤件上。这样的过滤件在US5,139,031、US5,301,685、US5,471,994中披露了。
根据本发明的一个实施例，收集单层细胞以便进行细胞学检验，这能在保藏剂、工作人员或外界材料不污染细胞的前提下获得均匀的细胞载片。细胞从样品容器转移到细胞学收集装置中可以是在没有浇入或滴入所收集样品的情况下进行的。
本发明涉及一种细胞收集容器系统，它可被轻松地拆开以便能面对面地从装置中将细胞转移到显微镜检验用的载片上。根据本发明一个实施例的细胞收集容器提供了一种用于收集可被转移到显微镜载片上的单层细胞的装置和方法。
本发明的装置和方法不需要经过培训的技术人员来正确地制备样品基片。因此，作为样品制备协议中的一个重要因素，不需要或减少了时间、费用和专家。
本发明的装置和方法还在样品制备方面带来了优点，因为它们适用于未经过处理的新细胞、未改性细胞并且尤其被设计用来提供均匀的薄薄一层固体物质(至少约40微米厚)。本发明的一个实施例对于收集用于帕氏涂片的细胞很有效。
根据本发明的另一个特征，物质收集装置还可以包括其它可拆卸的或整体式的组件，它们被用于处理样品流体。例如，可以利用物质收集组件、碎屑去除组件、色谱分色组件、分析组件或联合使用这些和其它仪器来处理样品流体。所有组件或处理协议提供了可理想地加入本发明的样品制备装置中的特征。适当仪器的例子包括US4,953,561、US5,224,489、US5,016,644、US5,139,031、US5,301,685、US5,042,502、US5,137,031所述的装置。
例如，本发明的装置和方法具有许多传统显微学和血液学的优点。所收集的细胞位于容易接近辐射光源和波长吸收计的预定区域内。由于细胞浓缩在单层内，所以它们几乎总是处在一个焦点平面内，由此消除或减少了其它颗粒的干扰并在进行正确读数方面减少了对工艺时间和专家的需求。本发明所获得的最小颗粒重叠保证了重要固体没有机会被大团重叠固体或碎屑遮蔽，从而可轻松地检验所有物质。本发明装置的某些实施例可以与其它用于探测、分析给定人口的任何固体物质的自动化装置联合使用。它们还能够具体地分析物质化学成分。
在利用本发明进行检验时，将单层细胞从过滤件转移到显微镜载片上被证明是非常有效的，而且没有不同的细胞损失。显微镜检验显示出在载片上的细胞的分布与在过滤件上基本相同。
根据本发明某些实施例的自动化装置同时处理许多个装于同一支架上的样品容器。在本发明的优选实施例中，样品容器盖子可以包括一个带有或不带有可转动分散件的空心管。本发明搅拌容器中的样品以便保证使大颗粒物如痰样中的类粘蛋白体破碎并且使细胞均匀分布在流体中。搅拌可以因样品容器部件之间的相对移动、样品容器的不一致动作和/或容器施加在样品上的内作用力而发生。
根据本发明的优选自动化实施例，样品、其容器和过滤件受到许多不同动作，其中包括分散件相对于样品流体的相对转动。另外，本发明的这些优选实施方案可以使容器如通过转动和/或平移而移向和离开细胞转移处理台并可以提供进一步取出过滤器件并使过滤器件与显微镜载片接触定位的动作。在本发明的一个优选实施例中，自动化装置包括一个具有许多过滤器件的平台、一个用于定位许多样品容器的平台、一个用于定位许多显微镜载片和/或过滤件的平台、一个靠近过滤件平台的过滤件装载机构、一个靠近显微镜载片平台的显微镜载片装载机构、一个靠近显微镜载片平台的显微镜载片卸载机构、和一个用于对各装置进行操作、监视和排序的控制系统。
控制系统通过监视液流参数来监视颗粒物收集工作以决定何时在过滤件上收集到了预定数量的颗粒。仪器的上部构件在所收集细胞位于过滤件表面上的情况下将过滤器件定位以便抵靠着显微镜载片。
对于本发明的方法和装置来说，细胞保持单层分布是很重要的，当细胞从过滤器件被转移到显微镜载片上时，细胞以这样的分布形态被收集在过滤件上。本发明由此提供了在显微镜载片上产生单层细胞的细胞收集和转移装置。
本发明的装置最好为各细胞样品采用新鲜样品管形瓶、新过滤器件、新显微镜载片。另外，比较简单的操作和装置的众多功能尽可能减少了对操作人员的到场要求和时间并且减少了保养和准备工作。
本发明的一个实施例包括一个可活动的样品容器平台、一个具有适于配合地连接过滤器件的样品容器、一个可活动的过滤器件平台、一个或多个适于连接过滤件的显微镜载片装载机构/卸载机构、一个定位于显微镜载片装载机构/卸载机构上的显微镜载片。本发明的一个优选实施例多次重复了上述各组件，从而本发明的一个优选自动化装置可以同时或先后处理至少两个一般是五个或更多的样品。
本发明的其它目的和优点在以下说明书中陈述了并且其中一部分将从说明书中看到或者可以从本发明的实践中知晓。可以通过尤其是在后续权利要求书中指出的组合方案和手段来实现和获得本发明的目的和优点。图面简述
引入并构成本说明书组成部分的附图示出了本发明目前优选的实施例，并且它们与上述概述部分以及以下对优选实施例的具体描述部分一起用来解释本发明的工作原理。
图1是根据本发明的一个实施例的过滤器件的分解侧视图。
图2是根据本发明的一个实施例的处于封闭位置的过滤器件的侧视图。
图3是一个根据本发明一实施例的样品容器的侧视图，所述容器包括搅拌机构。
图4是根据本发明的一个实施例的过滤器件的局部俯视图。
图5是根据本发明的一个实施例的过滤器件的仰视图。
图6是本发明第一实施例的俯视图。
图7是图6所示第一实施例的侧视图。
图8是根据图6所示的本发明第一实施例的样品容器支座组件的俯视图。
图9是图8所示组件的侧视图。
图10是根据图6所示的本发明第一实施例的显微镜载片转台组件的俯视图。
图11是图10所示组件的侧视图。
图12是根据图6所示的本发明第一实施例的过滤件装载机构的俯视图。
图13是图12所示机构的侧视图。
图14a是根据图6所示的本发明第一实施例的显微镜载片卸载机构的俯视图。
图14b是图14a所示机构的侧视图。
图15是根据图6所示的本发明第一实施例的样品容器与过滤器件的详细分解侧视图。
图16是根据图6所示的本发明第一实施例的显微镜载片卸载机构的俯视图。
图17图16所示机构的侧视图。
图18是根据图6所示的本发明第一实施例的搅拌器件的俯视图。
图19是根据本发明第二实施例的透视图。
图20是图19所示第二实施例的前视图。
图21是图19所示第二实施例的右视图。
图22是图19所示第二实施例的左视图。
图23是图19所示第二实施例的后视图。
图24是图19所示第二实施例的俯视图。
图25是图19所示第二实施例的容器支架的详细透视图。
图26是图19所示第二实施例的第一传送机的详细前视图。
图27是图19所示第二实施例的采样台的详细前视图。
图28是图27所示采样台的详细横截面图。
图29是根据图19所示第二实施例的载片装载机构的详细俯视图。
图30是图29所示载片装载机构的详细透视图。
图31是根据图19所示第二实施例的吸收件(blotter)的详细透视图。
图32A示意地示出了前进到根据图19所示第二实施例的采样台的一组容器。
图32B示意地示出了与在图19所示第二实施例的采样台上的相应容器以流体方式连通的一组采样头。
图32C示意地示出了对应于图19所示第二实施例的各采样头被传送给一组载片的各样品中的单层颗粒物。
图33是根据图6所示第一实施例的流体控制系统的示意图。
图34是根据图19所示第二实施例的流体控制系统的示意图。
图35是图34所示流体控制系统的详细示意图。
图36是根据图19所示第二实施例的流体控制系统的详细示意图。
图37是本发明示例性控制系统的示意图。
图38是根据本发明一个示范实施例的工作流程图。
图39是根据本发明第三实施例的横截面图。
图40是根据图39所示第三实施例的详细俯视平面图。
图41是根据图39所示第三实施例的详细俯视平面图。详细描述
本发明的装置是一种用于批量处理样品的自动化收集装置或机构。本发明的装置对于从液体中除去颗粒物并将颗粒物转移到显微镜载片上或其它细胞学实验件上很有效。在自动化装置的工作过程中，液体、颗粒物或样品容器的处理可能包括或牵涉到至少以下一个步骤：将用于把样品装运到自动化装置安装地的容器开启；安装一个伸入样品中的样品容器盖子；采用与样品以流体方式连通的方式相对于该容器盖子固定一个过滤器件；从容器中经过滤器件抽出至少一部分样品，由此样品中所含的部分颗粒物被吸附在过滤器件的膜上；设置一个显微镜载片，使其可移动到与过滤器件的一部分相邻、对准和/或压靠在所述部分上的一个位置。另外，所述机构和/或组件可能还包括：至少一个用于用新显微镜载片替换旧显微镜载片的组件；一个用于搅拌样品的传动机构；至少一个过滤器件装载机构；至少一个过滤器件卸载机构；至少一个显微镜载片装载机构；至少一个显微镜载片卸载机构；至少一个条形码读取器；至少一个条形码打印机；至少一个用于移动和/或定位其中一个上述机构的传送机构；至少一个用于限制、定位或移动至少一个上述机构的支架；至少一个用于驱动或定位至少一个上述机构的马达；以及至少一个用于操作且优选是有选择地和/或按顺序地操作至少一个上述机构的控制系统。
本发明还涉及一种用于处理含颗粒物如细胞的液体的方法，它利用了根据本发明而设计出来的自动化装置。本发明还涉及从液体中除去颗粒物并在一个适于颗粒物细胞学检验的介质上收集颗粒物。
本发明也包括收集流体如生物、生理或环境流体、无需离心即可从液体中除去颗粒物并对颗粒物进行分析和检验颗粒物的自动化装置和方法。
如本文所述，术语“样品”是指任何含固体物质如颗粒物的流体，需要从样品中收集颗粒成分以便确认其是否存在于样品中或确认其身份。样品的流体成分一般是液体。但是，流体也可以是空气或气体。例如，需要确认在生物流体如尿中是否存在癌细胞或某种蛋白质。又例如，可以估计出在电子学领域所用的超纯水中的污染物如分子污染物的性质。其它流体包括体液如血液、脊髓液或羊水；以及支气管灌洗液、痰；微针抽吸液；地下水；工业废液；电子或药用分析流体等等，但不限于此。要指出的是，接受处理的流体类型不应限制本发明。
如本文所述，术语“颗粒物”是指任何能够优选地通过细胞学检验而进行收集和计算的流体中的物质。物质的例子包括细胞或细胞碎片、蛋白质、分子、聚合物、橡胶、稳定剂、抗氧化剂、加速剂、硅氧烷、醇酸、聚硫橡胶、石蜡、热塑塑料、细菌、杀虫剂和除草剂，但不限于此。聚合物的特殊例子包括聚乙烯、聚丙烯、聚异丁烯、聚丙烯腈、聚乙二醇、聚氯乙烯、聚苯乙烯、多硫化物、聚甲基丙烯酸甲酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、双酚A(常见的环境污染物)、乙基纤维素、硝基纤维素、聚亚胺酯和尼龙，但不限于此。特殊的生物物质的例子包括：包括移位癌细胞和普通癌细胞的癌细胞、蛋白质、核酸、抗体等。但要指出的是，这种接受处理的物质不限制本发明。
如本文所述，“适于连通”、“流通”或类似术语是指任何用于使流体流过系统的装置、结构或方法，本领域的工作人员对此很熟悉。结构的例子在图中示出了。例如，导管可能具有一个适于容纳或连接在另一个导管上的配合接头的接头。如本文所述，接头是指任何被用来形成一个接头或使其本身与另一个部件相连的结构。这些结构或连接件建立了一条经过装置各部件、组件或系统的流道。一般的接头包括配合接头如路厄型(Luer)接头、螺纹型接头、摩擦型接头或彼此接合的连接件，但不限于此。
如本文所述，“适于连接”、“连接”、“配合”或类似术语是指可以对准、啮合、匹配或相互压靠、压坐的形状互补结构。示例性的结构包括上述接头。
如本文所述，“批量处理”是指能够在至少一个样品上独立和同时进行而在样品之间没有交叉污染的操作。
如本文所述，“组”是指在批量处理中相同并同时受到作用或使用的一个特征的多个例子。部分组是指至少一个但小于最大极限数目的特征例子，整个组是指最大极限数目的特征的例子。样品容器和容器盖子
根据本发明，利用传统技术收集样品，如通过在样品容器中收集尿或其它生物液或者通过将一个拭子或刷子放入样品容器的适当流体中(帕氏涂片一般用这种方式)。在本发明的一个最优选的实施例中，样品被收集在一个其形状和功能如以下所述的样品容器中。样品容器一般带盖子并且具有一个适于与一个以下将要描述的过滤器件配合的部分。
在本发明的优选实施例中，样品杯包括一个液体样品收集腔和一个使该收集腔与一个过滤器件实现流体连通以便从流体中分离出颗粒物质并在收集部位收集该颗粒物的盖子。在本发明的最优选实施例中，分离出的颗粒物根据本发明以一单层方式被收集在一片膜上。本发明的最优选实施例还包括一个具有空心管的盖子，空心管使样品与过滤器件相互流通。空心管最好具有用于混合样品和/或在样品中分散颗粒物的装置。
根据本发明的优选实施例，样品容器20包括任何适用于储存流体且尤其是生物液的容器。容器20包括侧壁21和底壁22，它们一起构成了一个具有开口端24的内腔23以便收集、容纳或储存流体。一般的流体包括生物液如体液、废水等，但不限于此。一般的体液包括尿或其它生物液如血液、脑脊髓液(CSF)、支气管灌洗液、痰或微针穿孔抽吸液。
被用来形成样品杯的形状和材料可以是任何材料、尺寸和形状。例如，样品杯可以由任何与待处理液体兼容的材料制成。人们将认识到，容器和侧壁及底壁组件可以是任何传统组件。在本发明的优选实施例中，底壁22如图3所示地是锥形件。底壁22或侧壁21可以选择性地包括至少一个伸入腔中的翅片或类似物(未示出)。在以下将具体描述的本发明的一个实施例中，可能需要这样的翅片，其中容器中的样品通过转动容器来混合。
在本发明的一个优选实施例中，容器盖子包括一个适于容纳过滤器件的中心凹部。在本发明的某些实施例中，中心凹部还与一个伸入样品容器中的空心管连通或连接。管子的一部分可以选择性地包括一个搅拌件或分散件。
如图3所示，样品容器20包括一个用于从容器中20抽出样品的管子25等类似部件。管子25最好是空心的并且是两端开口的或可开启的。所示的管子25靠近于容器的底壁包括开口端26并可以具有至少一个通向管子25的开孔27。开口端26和/或开孔27允许不同流体层以及颗粒物和沉积物在样品被抽出收集腔23的同时接受检验。
在本发明的其它优选实施例中，一个适配接头设置在容器和相应的采样头之间并构成了过滤腔的至少一部分。在每个容器中都可以有这样的适配接头，或者可以分别将一组适配接头与相应的采样头组相连。
设置用以相对于容器和/或容器中的样品使搅拌件转动的结构和装置也很重要。如以下将具体描述的那样，本发明的一个示例性装置可以包括一个盖中盖的结构，其中搅拌件被固定在一个固定不动的内盖上，而容器和外盖可以自由转动。这样的相对运动使搅拌件相对于样品转动并使颗粒物分散到液体中。
本发明的装置也可以包括被设计成和/或适用于混合收集于收集腔内的样品的结构。这样的结构的例子包括一个具有一转动盖的收集腔或者一个转动盖子的一部分、一个可相对收集容器移动的盖子或盖部分、以及一个伸入收集容器中的管子等类似部件，所述管子包括至少一个用于混合样品的部件，但不限于此。盖子还可以包括一个与盖子的部分以液体密封方式牢固接合的部分。盖子还包括一个与盖子的一部分以液体密封但非流体密封的方式接合的部分。
在本发明的一个优选实施例中，样品杯包括一个样品收集腔和一个与该腔连通的颗粒物分离腔或用于分离流体中的颗粒物并在收集区内收集所分离出的颗粒物的组件。在本发明的一个最优选实施例中，在收集区上以单层方式收集分离出的颗粒物。本发明的一个优选实施例还包括一个与颗粒物分离腔连通的空心管。空心管最好包括用于混合样品和/或在样品中分散颗粒物的装置。装置的例子包括一个搅拌件、翅片、刷子、拭子、扫帚、刮刀等，但不限于此。本发明的一个优选实施例包括一个带刷子的管子。刷子的一个例子在US4,759,376中描述了。
根据本发明，空心管25如图20所示地包括至少一个搅拌突起件或翅片28等。在一个本发明的优选实施例中，空心管25是可以转动的并且搅拌件28搅拌液体样品，在一个最优选的实施例中，它使细胞和/或颗粒物质分散和/或破碎任何大的颗粒物质如类粘蛋白体。搅拌件28也可以包括一个独立于管子25的搅拌体并且通过磁场或电场启动该搅拌件来搅拌样品。
在本发明的一个替换实施例中，搅拌件28可以包括纤维、刷子、拭子或扫帚等。这样的纤维或刷子最好适用于在使样品相对于搅拌件、刷子或扫帚旋流转动时在容器中分散颗粒物。在本发明的一个最优选实施例中，刷子或扫帚还适用于从病人那里收集颗粒物质，如颈刷或扫帚等。要指出的是，刷子可被固定在盖子的一部分上，或者盖子可以包括一个缝隙等以便与在刷子另一端上的把手部分配合连接。
在本发明的一个优选实施例中，盖子中的缝隙或开口可以被一个可除去的或可刺透的盖膜覆盖住，所述盖膜使容器内部不受污染，直到容器作好使用准备为止。例如，刷子等可被用来收集颈部样品，可以从盖子上除取盖膜并且将刷子放在容器中。
如上所述，容器上部和各采样头组件相配合地构成了一个过滤腔。容器和采样头可以是各种形状的。在图2-5中举例示出了这样的形状。在本发明的优选实施例中，腔30包括一个局部由样品容器20的盖子形成或与该盖子配合的底部31。
底部31还限定出一个适用于支撑一个过滤器件33的凹部32。凹部32设有与空心管25连通的槽34等类似结构。凹部32可以与底部31成一体或者是一个独立构件。在本发明的优选实施例中，凹部32是一个独立结构，它能够在底部31中转动。为了在保持组件不透流体的同时使相对转动简单化，凹部32可以通过一个榫舌-凹槽结构(图2)与底部31配合连接。
如图2、3所示，过滤腔30最好是由一个两件式壳体构成，即由在采样头下端的顶部41和在样品容器一部分上的底部31构成。在本发明的优选实施例中，顶部41可拆卸地与底部31相连，任何能够通向多孔构件35的腔室结构或组件都是适用的。顶部41和底部31可以通过任何配合的连接结构或部件相连或固定，这些连接部件产生了不透流体的装配如路厄型(带螺纹或没有螺纹)、螺纹型、摩擦型、锥型配合连接或卡接(如图所示)。
根据本发明的优选实施例，底部31的凹部32包括一个带有至少一个间隔开的突起61等的支座60。突起61的尺寸和形状最好足以防止多孔构件35平齐地接触支座47。在所示实施例中，突起61是同心环(图4)。如以下将具体描述的那样，突起61中断了多孔构件35与支座60之间的表面张力，从而在使用过程中，当多孔构件35被抽出支座60之外时，第一多孔介质36没有继续与支座60接触。
在本发明的优选实施例中，突起60按照至少以下一种方式发挥作用：突起60可以中断多孔构件35与支座39之间的表面张力，从而在使用过程中，当多孔构件35被抽出支座39以外时，第一多孔介质36不再与支座39接触；突起60可以在外壳中均匀地分散多孔构件的压力；突起60可以防止或抑制多孔构件受压；并且突起60可以被设计成按照预定形状或空间分布形态分散任何收集到的颗粒物。
根据本发明，支座39的表面可能包括至少一个促进多孔构件离开支座并促进颗粒物在收集位置以预定空间分布和/或防止或抑制多孔构件受压的结构、形状或表面组织。本发明的一个实施例包括同心突起如上述突起60。在本发明的一个最优选实施例中，支座表面被设计成日规或钟面结构。这些实施例以及所述的其它表面结构促进了在收集位置上按照预定空间结构收集颗粒物。其它构造包括网格、格栅等、同心方形或矩形或一系列连续或分隔开的结构、节、突起、颗粒等，但不限于此。要指出的是，任何部件、结构或在支座表面上形成组织的化学原理都适用于本发明。
根据本发明的另一个实施例，支座39和/或底部32可能选择性地包括一个槽等。在本发明的一个优选实施例中，支座39向着槽往外倾斜。支座的小斜面和槽促进了流体流过外壳并降低了支座的表面张力，这都提高了多孔构件离开多孔构件外壳的底部32。本发明的这个方案是另一个促使脱开多孔构件的结构。
在图5所示的本发明的一个优选实施例中，过滤腔组件包括一个与底部31配合的顶部41并且它们构成了过滤腔30。孔41包括一个被构造成与多孔构件35配合的支座42。在本发明的优选实施例中，支座42将多孔构件35定位在凹部32中，从而多孔构件35在样品从其各自的容器中被抽出时不会移动。在本发明的最优选实施例中，支座42包括许多个其尺寸、形状和数目能够将过滤器件定位在过滤腔中的突起或支撑43，从而促成了在多孔构件上的基本均匀的压力分布并减少或防止了可能会干扰流体流过多孔构件的多孔构件受压。作为替换方式或除此之外，多孔构件35可能包括一个齿形部63，它如图2、3所示地减少或防止了多孔构件受压。过滤器件
根据本发明，过滤腔30被构造成能够容纳多孔构件35，所述多孔构件具有一个适于在含颗粒物的样品经过腔30时收集颗粒物的颗粒物收集位置36。
具有适于收集颗粒物的收集位置36的多孔构件35可以设置在流体通道中，从而收集位置36与空心管35连通。在过滤腔中的多孔构件35最好适于确定出第一流体流动支路和第二流体流动支路。第一流体流动支路39a穿过收集位置36，第二流体流动支路39b绕过收集位置36(图1)。
在本发明的优选实施例中，多孔构件35包括适于防止颗粒物从中经过的第一多孔介质37和适于允许样品从中经过的第二多孔介质38。根据特殊仪器的要求，第二多孔介质可能或不能从样品中除去颗粒物。在本发明的最优选实施例中，第一多孔介质适于截留或收集颗粒物，或最好以一个均匀的单层收集或截留固体颗粒。最优选的实施例还包括适于作为第一多孔介质支承体的第二多孔介质。
US5,301,685和US5,471,994披露了优选的多孔介质。
被用于制造多孔介质的材料的性质、所选多孔介质材料彼此的兼容性以及其与待处理流体的兼容性是要在根据预定用途选择多孔介质特殊材料时所要考虑的因素。
第一多孔介质和第二多孔介质可以按照象上述那样发挥作用的方式设置。如本领域技术人员将认识到的那样，多孔构件可以有各种结构并可以根据需要定位以获得特殊结果。例如，第一多孔介质和第二多孔介质可以是独立的间隔介质，这两种介质可以被层压在一起，第一介质可以与第二多孔介质成一体或者可拆开地与其相连，或者收集部件可以包括一个模仿第二多孔介质上述功能的高密度区。选择这些不同的结构是在本领域从业人员的知识范围以内。以下将具体描述改变多孔构件的结构和成分。
多孔构件35可以包括一整体结构，它具有适于防止细胞流过其中的第一部分的密度和/或孔径和适于使流体流经其中的第二部分的密度和/或孔径。
在优选实施例中，多孔构件包括第一多孔介质，它具有一个适于防止细胞流经其中的聚碳酸酯多孔膜。多孔构件还可以包括第二多孔介质，它具有一个滤芯或玻璃料(frit)，玻璃料可以是由聚丙烯或高密聚乙烯PROEX7多孔塑料构成的。
应该注意的是，可以与本发明的部件互换地使用各种多孔构件。尽管聚碳酸酯膜尤其适用于本发明的细胞学收集仪器，但是其它多孔膜也是适当的。
多孔膜最好具有一个从0.22微米-8微米且最好为1微米-6微米并最优选地约为2微米的孔径，这使它能截住大于3微米的细胞。膜适于使流体经过但防止了颗粒物经过。第二多孔介质适于使流体经过并也能够从样品中除去颗粒物。第二多孔介质的孔径可以约为5微米-60微米且最好为约15微米-45微米并最优选地约为35微米。
如本领域普通技术人员将认识到的那样，根据待收集的颗粒物的大小和/或类型来调节多孔膜和多孔滤芯的孔径，这能够在收集位置14上收集颗粒物。在本发明的优选实施例中，孔径被选择成在收集位置上只形成了一层均匀的颗粒物且最好是单颗粒的层。例如，事实证明约3微米-40微米或更大的的尺寸是有效的，但要指出的是，本发明不被局限于某个特定孔径范围内。
在本发明的优选实施例中，第一多孔介质37可以通过溶于样品中的粘结剂被连接在第二多孔介质38上。这样的可溶粘结剂包括糖类组成、凝胶等，但不限于此。
尽管细胞学收集仪器10可被用于任何生物流体，但它特别适用于从尿和与其有关的细胞中制备样品且特别适用于帕氏涂片。样品容器支架
用手或通过机械将一组样品容器定位在一个容器支架上以便在本发明的自动化装置中进行进一步处理。容器支架最好是一个基本平坦的平台、圆盘、板、搁架、托盘等。在本发明的优选实施例中，样品容器具有适于定位和/或保持至少一个样品容器的导向件。在本发明的最优选实施例中，容器支架包括至少一个适于容纳至少一种尺寸的样品容器的凹槽或孔腔。在本发明的一个优选实施例中，容器支架包括至少两个用于容纳至少两种尺寸不同的样品容器的凹槽。容器支架最好是可活动的，即它适于绕一个轴线转动或者可以沿一条路线平移。根据本发明，容器支架可以移动到预定位置或工作台，其中包括至少一个用于调节靠近或邻近于自动化装置另一个部件如采样头、装载机构或卸载机构的容器支架部分。
根据本发明的一个优选实施例，样品容器可以在容器支架内转动，与搅拌件牢固连接的容器盖子的一部分可以相对于容器的转动而被相对固定地保持着。搅拌器件
根据本发明优选实施例的混合器件可包括一个用于在相应的样品容器中搅拌各样品的搅拌件。如上所述，各采样头可以包括一个与伸入样品中的搅拌件配合的部分。每个采样头的该部分适于与一个传动机构如驱动皮带的马达等相连，它将使各采样头部分转动起来。传动机构可以与单个采样头相连，或者最好与所有采样头相连。传动机构的皮带或者可以通过样品容器支架绕一轴线的转动而被带动。
根据本发明的一个优选实施例，结构与收集容器盖子的一部分连接，至少一个结构使收集容器转动。该装置可以被构造成处理至少一个样品容器并可以半自动化或自动化工作。
在本发明的某些实施例中，盖子可以包括一个外固定盖和一个内转动盖。在本发明的一个优选实施例中，内、外盖不会在第一位置上相对转动，但可以在第二位置上相对转动。
根据本发明的一个优选实施例，一个结构或部件使样品容器转动，另一个结构或部件与样品容器的一部分连接，例如与盖子的一部分连接以便相对静止地固定该部分。
本发明的最优选实施例包括一个盖子，它具有一个内部或内盖和一个外部或外盖，其中封闭盖子并松脱开其中一个盖子而使它可以自由转动是分阶段实现的。当内、外盖被用来封闭容器时，内、外盖最好不能彼此相对自由转动。这两个盖子在接近第一位置的状态下封闭了容器。在第二位置上，例如通过附加地使外盖转动而使一个连锁件或密封件等破裂，从而使外盖不再与内盖连接。在第二位置上，外盖相对于内盖自由转动。
在本发明的优选实施例中，盖子包括固定式连接容器的第一部分和可相对于容器转动的第二部分。如本文所述，可相对于容器转动是指第一部分与第二部分之间的相对运动，第一部分可以是固定的而第二部分是活动的，或者第一部分可以是活动的而第二部分是固定的。在一个最优选的实施例中，盖子的第二部分或内部是固定的，而第一部分或外部是可转动的。在本发明的一个优选实施例中，搅拌件与盖子的第二部分连接或被固定在该第二部分上。
根据本发明，第一、第二部分可以是相互配合的独立盖子。例如，参见图39，内盖72可被用来密封容器而外盖71可以卡接在内盖上。在本发明的该实施例中，在外盖内侧上的接片等可以防止内、外盖在各盖子处于第一位置时产生相对移动。
如通过撕掉接片或除去一个使内、外盖产生轴向相对移动的垫块而使外盖移动到第二位置上，这能使外盖相对于内盖转动。
本发明的装置可以被构造成能够支撑、连接并转动收集容器的一部分，从而根据本发明混合样品。一个收集容器的例子包括一个适于收集和储存样品的容器或杯子、一个具有不可相对于容器转动的第一部分和可相对于容器转动的第二部分的盖子和一个与盖子的一部分连接或固定在该部分上的并伸入容器中的搅拌器件。
如本文所述，被构造成能够支撑、连接和转动是指可以适于进行特殊功能的各种结构。例如，本发明的装置包括一个用于定位至少一个样品容器并转动容器腔室部分的容器支架、一个用于连接和固定与一分散件连通的盖子部分的套管或夹具。或者，支架可以在固定位置上支承容器并且一个皮带轮、套管或夹具可以连接并转动与搅拌器件相连的盖子部分。在本发明的一个优选实施例中，套管接合盖子的内部或第二部分并在一个相对于盖子的第一部分固定的位置上固定盖子的第二部分。
如图39所示，盖子31包括能使盖子外部相对于内部移动的结构和装置。如图所示，盖子31包括外盖71和内盖72。内盖72最好固定在管子50上或与管子连通。在本发明的一个优选实施例中，盖71在被拧到容器23上时使内盖72和管子50转动。内、外盖71、72之间的这样的相对运动使容器中的样品相对于搅拌器件移动。
在本发明的一个优选实施例中，盖子中的缝隙或开口可以被一个可除去的或可刺透的覆膜盖住，所述覆膜使容器内部不受污染，直到容器处于备用状态为止。例如，一个刷子等类似物可被用于收集颈部样品，可以从盖子上除去覆膜并将刷子放在容器中。在US4,759,376中描述了这种刷子的一个例子。采样台
本发明的装置还包括一组适于与一部分相应样品容器相连的采样头器件。根据本发明的优选实施例，该采样头组和样品容器的数目、布局或形式是相互对应的。在本发明的优选实施例中，各采样头器件包括一个具有一用于容纳或连接下述过滤件的孔腔的部分。在最优选实施例中，采样头器件的一部分可拆卸地与盖子的一部分配合连接并且在配合连接状态下形成了一个适于定位和容放过滤器件的腔。根据本发明，过滤器件和过滤腔提供了至少两条流过该腔的流体流动支路。采样头器件的一部分最好可以在一个方向上移动以便与容器支架上的样品容器相接合。根据本发明的优选实施例，使容器支架相对于一固定基架按顺序地移动到一个将由采样头占据的位置上。
在本发明的其它优选实施例中，在容器和各采样头之间设置了一个适配接头，它至少构成了过滤腔的一部分。每个容器都可以有适配接头，或者一组适配接头分别与相应的采样头组相连。
各采样头器件与一个泵之类的部件相连。在本发明的该实施例中，各种结构产生了一个来自样品容器并经过过滤腔中的过滤器件且离开样品容器而流向泵的流道。载片处理
本发明的装置还包括至少一个载片支座。于是，用手或通过机械方式将一组载片固定在一载片支座上以便在本发明自动化装置中进行进一步处理。在本发明的优选实施例中，载片支座包括适于定位和/或保持至少一个载片的导向件。载片支座最好是可以移动的，即它适于绕一个轴线转动或可以沿一个路线平移。根据本发明，载片支座可以移动到预定位置或工台，其中包括至少一个与自动化装置的另一个部件如装载机构或卸载机构靠近或接近的支座的一部分对准的工作台。固定剂
一种根据本发明的成分包括至少一种体积百分比约为35％-45％的溶剂且最好是链烷醇、体积百分比约为2％-3％的酮、体积百分比约为1％-3％的稀释剂且最好是二醇或三醇、体积百分比约为0.4％-3％的交联剂且最好是醛类、体积百分比约为0.5％-2％的甘油、至少一种体积百分比约为0.01％-0.05％的洗涤剂和/或分散剂且最好是非离子型的、以及一种体积百分比约为45％-65％的缓冲液。在本发明的优选实施例中，成分的pH值约为4-7。
本发明还包括一种制备颗粒物如细胞等以便进行细胞学检验或有机检验的方法，它包括以一均匀层且最好是以一单层收集颗粒物并在本发明的成分中固定细胞。
表1总结了本发明固定剂配方成分的优选浓度和范围。
                              表1
成分 范围(体积百分比) 优选(体积百分比) 例子
溶剂     35-45     37-42 链烷醇
酮     2-3     2.1-2.4 丙酮
稀释剂     1-3     1.6-1.9 二醇，三醇
甘油     0.5-2     0.8-1.2 甘油
交联剂     0.4-3     0.6-0.8 醛类
洗涤剂     0.01-0.05     0.02 诺乃洗涤剂(Nonidet)P40
缓冲液     45-65     50-55 三羟甲基氨基甲烷
本发明的成分包括至少一种溶剂来渗透组织或细胞、使细胞脱水和/或阻止细菌和生命活动性。在本发明的一个优选实施例中，溶剂是链烷醇的混合物，它缓慢地渗透并且与其它试剂一起快速地固定样品。它通过沉淀使蛋白质变性并使糖原沉淀并溶解脂肪和类脂体。链烷醇可以是任何众所周知的具有1-4个碳的酒精，例如甲醇、乙醇、n-丙醇、异丙醇、n-丁醇和各支链丁醇。最优选的溶剂是甲醇与异丙醇的混合物，它们的体积百分比一般分别约为30％和10％。
酮是其作用与酒精相似的固定剂，但是没有良好地保存糖原。酮的作用就象是固定剂并使整个成分能渗透细胞。酮优选为丙酮。
稀释剂在样品上形成了一涂层并且有助于防止被烘干。优选的稀释剂是二醇或三醇，最优选地是聚乙二醇(PEG)，如PEG-1500(平均分子量约为1450)，它也被称为Carbowax。
甘油防止了细胞在样品处理过程中被烘干。长期保持在固定剂溶液中的细胞一般因固定过程而变硬并不能在载片上展开。甘油有助于细胞在载片上展开。
交联剂与蛋白质端基反应而使分子交联并产生了不可溶产品。所涉及的蛋白质基包括氨基、亚氨基、酰氨基、肽、羟基、羧基、硫基。在相似组如NH2、NH之间也形成了亚甲基桥，但它可以通过水洗而逆转。某些交联剂如甲醛是防腐剂。
优选的交联剂是醛类，最好是甲醛。
洗涤剂是非离子型洗涤剂和分散剂，它们被用于增加蛋白质和膜成分的溶解以便减小细胞聚集。优选的洗涤剂是诺乃洗涤剂(Nonidet)P40、Triton X-100，它们都是众所周知的洗涤剂。
缓冲液使溶液的pH值大约保持在4到7之间并且提供了转移介质。优选的缓冲液是众所周知的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。根据本发明，缓冲液也可以包括一种沉淀核蛋白的固定剂和至少一种渗透性维持剂。优选的核蛋白沉淀剂是重量百分比一般约为0.2％-0.3％的乙酸冰并且有助于使缓冲液的pH值保持在约7.4到7.8之间。优选的渗透性维持剂是重量百分比一般约为0.1％-0.2％的葡萄糖和重量百分比一般约为0.7％-0.8％的氯化钠。
在优选实施例中，上述活性固定剂成分可以溶解在适当溶剂如蒸馏水中，这样的溶液接着按照许多方式被用作固定剂，这对本领域技术人员来说是显而易见的。例如，固定剂溶液可被用来保藏正被船运或运送到检验地点的组织样品。在此过程中，具有液密封件的小管形瓶或瓶子充满了本发明的试剂，组织样品放在盛装有试剂的瓶子中以便保藏样品，直到它们到达可进行进一步处理的地点位置。也可以按照体积百分比约为80％-90％的数量使用水或其它稀释液。可以采用任何不改变配方的重要化学物理特性的适用稀释液。
为了研究，通过本发明的固定剂制备的组织可以按照任何已知的传统方式被准备用于组织学研究中，如通过使用石蜡、切片设备、染色、载片安装或其它在显微镜检验或其它检验前使用的常见步骤。本发明因此提供一种安全、方便、有效的固定剂溶液，它可以被用于许多已知的使用这样溶液的组织学处理中。流体运动结构
根据本发明的实施例，自动化装置包括至少一个改变装置内压差的部件，从而样品可以移动经过自动化装置的一部分。根据本发明的实施例，样品的流体成分可以是气态的或液态的，这取决于用途。例如，在与样品容器连通的导管中形成真空将使容器中的样品经过过滤器件。形成一个正压以使未被收集的样品部分返回样品容器或者使过滤液体流向处理容器或处理腔也是所需要的。一个可逆式泵是优选的真空/压力件的例子。
另外，需要对组件的一部分如采样头器件的一部分进行清理或清洗。在本发明的优选实施例中，泵等可以使清洗液从供应源容器经过一个导管流向采样头器件。在本发明范围内，包括许多种供应源容器、压差发生器和用于在各自动化装置预定部件之间或与之建立流通关系的导管。
经过该系统的流体运动可以通过保持流体源与流体终点之间的压差来实现。建立这种压差的示范方式可以是给过滤腔入口侧的任何系统部件施加压力，使过滤腔出口侧的任何系统部件处于真空，或者通过任何形式的泵、如自动管玻璃丝过滤件(autovialspunglassfilter)(由Genex公司制造)；重力压头或柔软的可折叠容器如样品容器，可以挤压该容器以迫使样品流经过滤件。控制器
根据本发明的优选实施例，自动化装置可以包括至少一个控制器以便有选择地移动和定位自动化装置部件，从而启动或中断自动化装置的工作或者监视自动化装置的工作进程。优选控制器的例子是计算机和计算机程序。使用其它控制器对本领域技术人员来说是显而易见的，并且这些控制器也包含在本发明内。以下将具体描述控制器的例子。装载机构
根据本发明的优选实施例，至少一个装载机构可以靠近于或是自动化装置的一部分。要指出的是，许多装载机构可以与自动化装置的工作结合使用。例如，一个自动化装置可以包括至少一个以下部分：一个过滤件装载机构；一个显微镜载片装载机构；一个样品容器装载机构；一个被设计用来将一个盖子定位和安放在开口样品容器上的封盖机；一个用于将采样头的一部分定位和配合地连接在一组样品容器上的装载机构；一个用于将各过滤器件的一部分定位和配合地连接到各载片上的装载机构。以下将具体描述装载机构的例子。卸载机构
根据本发明的优选实施例，至少一个卸载机构可以靠近于或是自动化装置的一部分。要指出的是，可以与自动化装置的工作联合地使用各种卸载机构。例如，可以如上所述地针对使用装载机构的部件使用卸载机构。以下将具体描述卸载机构的例子。跟踪机构
根据本发明的优选实施例，自动化装置可以包括至少一个用于跟踪样品在自动化装置中的进程和/或在样品已经经过自动化装置处理后用于跟踪样品的跟踪机构。跟踪机构的一个例子涉及使用条形码。在本发明的此实施例中，自动化装置可以包括至少一个条形码读取器和一个打印机。以下将具体描述跟踪机构的一个例子。各种构件
本发明的自动化装置可以包括各种驱动机构，其中包括皮带、马达、皮带轮、耐磨件、升降机构、运输工具和支撑件以及导管、清洗或清理头及清洗或清理液的供给源或供给机构(如容器)、固定剂涂覆器及其固定剂供给源或供给容器(如容器)等以便实现自动化装置部件的工作。其它附加或替代构件对本领域技术人员来说是显而易见的并且它们也落在本发明的范围内。以下将详细描述构件的例子。工作方法
根据对自动化装置各部件的描述，显然可以采用许多种工作方法。以下描述了一种工作方式的例子，要指出的是，步骤的数目、性质和顺序只是示范性的。
一组含有相应样品的样品容器用手动或通过装载机构被布置在一个容器支架上。在本发明的某些实施例中，技术人员将各样品容器的至少以下一个参数输入控制器：样品类型(如痰、血液、尿、脊髓液等)，混合速度，混合时间，抽吸级，抽吸时间，固定剂(如有或无)和干燥时间。在适当参数被输入自动化装置中后，该装置启动样品处理程序。在本发明的优选实施例中，条形码读取器探测到在各容器上的条形码，控制器根据各容器上的条形码选择适当的参数。
可以使用过滤器件装载机构将一个适当的过滤器件(根据来自条形码和预选参数的信息)定位到各样品的过滤腔中。
接着使容器支架前进到采样台，即相对于采样头器件移动到一预定位置。接着使该组采样头与相应组的容器接合。
同时，一组载片按照对应于该采样头组的形式被布置在载片支座上。使该组载片前进到一个沉积台，在此将来自各相应样品的各单层颗粒物从其各自的过滤器件转移到载片上。
控制器启动混合器件，由此驱动搅拌器件搅拌各自的样品。控制器接着启动泵使各采样头处于适当的真空状态下，由此将各样品的至少一部分从各容器中抽出。
在各样品经各自过滤器件来到容器外之后，控制器中断泵的工作，该组采样头脱离开对应的容器组。
该组过滤件离开各自的样品而与对应的载片组接合，由此将各单层颗粒物转移给各自的载片，接着使过滤件离开各自的载片。在本发明的某些实施例中，过滤器件的一部分且通常是膜部分仍与显微镜载片接合，在其它实施例中，整个过滤器件都与显微镜载片脱离开。
在本发明的优选实施例中，固定剂涂覆器涂抹固定剂，从而将单层颗粒物粘附到各自的载片上。控制器启动固定剂涂覆器，使适当数量(如四滴)的固定剂分散在显微镜载片上。可以使用一个吸收件来吸收多余的固定剂并除去任何留在载片上的过滤件部分。
在本发明的优选实施例中，单层颗粒物堆覆在其上的各显微镜载片例如通过条形码进行标记，并且显示出在容器和载片上的相应条形码，如通过打印机打印。于是，可以采用载片和容器上的条形码来将各单层颗粒物与各自的样品联系起来。
在本发明的优选实施例中，使载片支座前进并且通过人力或卸载机构从装置中取出该组载片。
本发明的优选实施例还包括一个用于干燥各显微镜载片表面和/或除去即吹掉任何过滤件残余部分如膜(如果有的话)的吹风机或烘干机。另外，控制器可以将吹风机/烘干机的工作与该装置其它机构和组件的工作协调起来。
本发明的优选实施例还可以包括一个随后与各过滤头对准的清洗杯。控制器启动清洗程序，从而使需要清洗或清理的各过滤头部位与清洗液接触。
优选实施例还可以包括一个用于将各容器重新装上原来盖子或新盖子的组件。旧盖子可以被移到处理区。带盖的样品容器可以接着通过人力或卸载机构从自动化装置中被取出以便存放起来。控制器又将协调所有与重新加盖和存放容器有关的自动化工作。本发明的第一示范实施例
根据图6-18所示的本发明第一示范实施例，一台自动化装置10包括一组布置在样品容器平台100上的样品容器20、一个定位于过滤头支座200上的过滤头器件40、一个显微镜载片支座300。在此第一示范实施例中，样品容器支架100、过滤头支座200和显微镜载片支座300绕一个中心轴线或轴11转动。如图6、7所示，自动化装置10还可以包括至少一个过滤件装载机构50、显微镜载片装载机构70、显微镜载片卸载机构80、条形码打印机90、条形码读取器91、固定剂容器92、气体容器93、清洗液容器94、清理液容器95和废料容器96以及控制器400。
以下将详细描述各部件。
所示的样品容器支架100包括一组五个凹槽101，它们适于容纳和定位一个样品容器20。如图8所示，凹槽可以被构造成容纳至少一种型号的样品容器，即大尺寸容器101和小尺寸容器102。在图8、9所示的实施例中，样品容器支架100是圆形的并且可以上下移动并绕一个中心轴线或轴11轴向移动。为了适应这种运动，自动化装置可以包括至少一个轴承103等类似件以及一个用于使支架100移动到轴11上下的步进机构(stepper)104或类似件。样品杯支架100可以利用一个皮带驱动机构105或齿轮等绕轴线径向移动。
图15所示的过滤头组件200可以包括一个适于连接、定位和可除去地保持一个过滤器件33的底部41。在本发明的第一示范实施例中，底部41适于不透流体地或不透液体地来与过滤器件接合，但是这样的接合最好是可以拆开的，从而可以在自动化装置的其它工序中从底部41中取出过滤器件。
过滤头组件200的一部分可能包括一个适于连接一条皮带或类似件的齿轮或齿201，从而底部41是可以转动的。如上所述，皮带驱动机构的转动动力被传递给样品杯盖子的一部分，从而伸入容器中的搅拌件搅拌样品。
过滤头组件200最好还包括一个适于与气体容器93、清洗液容器94、清理液容器95和废料容器96中的至少一个建立起连通关系的至少一个导管的接头202。与气体容器93的连通可被用来使过滤器件33在自动化装置10的其它工序中脱离底部41，或者可被用来推动塞杆等，所述塞杆又将过滤器件推出底部41以外。
如图15所示，过滤头组件还可以包括至少一个用于与样品容器的一部分或盖子97相接合的弹簧203、至少一个使过滤头组件的一部分41弹性移动的弹簧204、至少一个使过滤头组件的一部分转动的轴承205。在本发明的最优选实施例中，过滤头组件200具有一个圆筒形缸体。
在本发明的优选实施例中，载片支座包括许多个适于容纳带有或不带有过滤件的显微镜载片的径向突起。载片支座可以绕与容器支架相同的轴线转动。
根据本发明的优选实施例，载片支座可以定位在容器支架和过滤头组件之间的中间高度上。根据本发明，显微镜载片支座可以移动到预定位置，这其中包括至少一个与靠近或接近于各自过滤件的支座部分对准的位置。
显微镜载片支座300如图10-12所示地适于容纳一组显微镜载片和一组过滤器件33。在本发明的一个优选实施例中，支座300包括径向延伸的突起301。在一个最优选的实施例中，各突起301包括一个适于容纳和定位一显微镜载片的孔腔或凹槽302，各突起具有一个适于容纳和定位过滤器件33的孔腔或凹槽303。
根据本发明，显微镜载片支座300可以绕轴线11转动并可以沿轴线11垂直移动。可以设置有助于支座300运动的轴承。支座300还可以通过传动机构如皮带驱动机构、齿轮等转动并可以利用一个步进机构等垂直移动。
过滤件装载机构50如图7、13所示地最好容纳和定位多组过滤器件33并适于将一个过滤器件33安放在显微镜载片支座的一个凹槽中。在第一示范实施例中，过滤器件33被堆叠在一个管或槽中，一个马达或螺线管使一带孔板离开过滤件叠层被封闭的第一位置而移向该过滤件叠层敞开的第二位置。在敞开位置上，一个弹簧等可以推动单个过滤件而使其穿过孔移动到显微镜载片支座上。或者，弹簧可被用于除一个过滤器件之外来固定所有其它过滤器件，从而当孔对准过滤件叠层时，能使不受固定的过滤件掉到显微镜载片支座上。
显微镜载片装载机构70最好保持并定位这些组显微镜载片并且它适于使单个显微镜载片移动到显微镜载片支座的一个凹槽中。在优选实施例中，载片被布置在一个具有封闭底端的管子中，所述管子在靠近底端的部位具有至少一个允许单个显微镜载片通过的缝隙81。载片装置机构的一个臂件推动一个载片离开载片叠层并将它推到显微镜载片支座上。当臂件缩回时，下一个显微镜载片下落到位。
本发明还包括一种从样品中除去颗粒物并将单层颗粒物如细胞转移到一个显微镜载片上的方法。根据本发明的优选实施例，膜过滤提出了一种在细胞重叠最少的情况下将细胞均匀沉积在显微镜载片上的方法。这能够进行清楚的观察并具有最佳的诊断精度。
采用本发明的一个示例性方法包括在收集容器20中收集含颗粒物的样品。容器接着被盖上盖子500，所述盖子包括至少以下一个部分：底部31、凹部501和过滤腔30的至少一部分。
当从容器20中抽出样品时，流体将如图1、2所示地流过多孔构件35，从而在收集位置36形成了单层颗粒物。一旦单层细胞形成了，则在多孔构件35中心的流体流动减少了并且朝向多孔构件边缘的流体流动增加了。这至少在某种程度上是因为所收集到的细胞在多孔构件表面上形成单层时阻碍了流动的缘故。当单层颗粒物大多覆盖住多孔构件表面45时，流体绕过第一多孔介质并流过第二多孔介质的加长侧边。于是，超过上部裙边或端壁的第二多孔介质区起到了排出孔的作用(流动阻力低)，它防止了细胞堆覆或收集成多层。可以根据需要使流体多次来回流过多孔构件。
接着，使第一多孔介质被压在显微镜载片上以便将单层颗粒物转移到载片的收集位置上。这允许工作人员对细胞进行细胞学检验而不会因处理需要而干扰膜孔隙或有所延误。
图33示出了根据本发明第一优选实施例的流体流程图的例子。图37示出了根据第一优选实施例的过程控制方案的例子。本发明的第二示范实施例
图19-31C示出了本发明的第二示范实施例。在容器支架100’上，成直线地布置了一组三个的容器20。容器支架100’协同操作地固定了容器20，从而防止了容器20与容器支架100’之间的相对运动。或者，如果要转动容器20，则容器支架可以通过给容器20(如可以在底部设置一个孔，通过此孔插入提供销以给容器提供转轴)设置通道以便转动。
设置了一个用于使在各自容器支架100’内的容器组前进的容器传送系统600。包括驱动至少一条皮带(在图19-24中示出了两条，在图6中是三条)的马达M1的第一传动机构使容器支架100’前移向传送系统600的前面602。
在传送系统600的前面602，搅拌容器20中的样品。根据一个优选实施例，由马达M2驱动的传动机构使容器20升高而与对应于每个容器20的相应搅拌马达M2A接合。相应的搅拌头610与容器20的盖子接合。使容器20相对固定不动，或者可以允许它们因搅拌马达M2A转动其盖子而产生转动。
搅拌程度是根据接受检验的样品而定的。可以根据各种常规或其组合来驱动马达M2A，这其中包括：加速到理想的常速，这种常速在减速前保持预定时间；变加速和减速；使转向反向，但不限于此。在完成搅拌后，容器通过受马达M2驱动的传动结构被降低到容器支架100’中。
另一个包括驱动至少一条皮带的马达M3在内的传动机构接着使各容器支架100’移出传送系统600以外并前进到采样台620。
如图27清楚示出的那样，采样台620包括一组采样头622(示出了三个)，它们的数目对应于每批处理的容器20的数目。采样头622的布局也对应于容器支架100’中的容器布局，从而在每个采样头622下使各容器20对准。采样头622可以成组地通过由马达M4驱动的传动机构(即丝杠)垂直移动。一弹簧系统保证了采样头622充分地与容器20接合起来。
如图28所示，一个适配器接头700与容器20配合连接。适配器接头700固定住过滤件33的位置并且其依靠摩擦相对于容器20被固定住。各采样头622包括三个孔：通过适配器接头700与样品连通的第一孔，与泵连通的第二孔，可拆卸地使适配器接头700与采样头622连接的第三孔。将一个真空源与第三孔连接将造成适配器接头700被吸附在采样头622上，这使得采样头622能够使适配器接头700克服将适配器接头700相对于容器200固定的摩擦阻力而脱离容器20。真空源的断开将使得通过重力使适配器接头700脱离采样头622，由此使过滤件33被定位在其各自的载片上。
载片装载系统630包括一个按照预定形式在至少一条载片传送带300’(示出了两个)上提供新载片的片盒310。载片传送带上的突起301’按顺序地从载片盒310中取出载片。在传送带300’上的载片间距和线性布局对应于容器组20在各容器支架100’中的间距和线性布局。
一个载片卸载系统640包括另一组用于一旦单层颗粒物被转移到载片上后马上收集载片的载片传送带304。载片传送带304具有另一组突起305，它们之间的间隔比传送带上的突起301’之间的间隔更小。以不同的相对速度前后驱动这几组传送带300’、304以便将传送带300’上的较宽间隔的载片转变为传送带304上的较窄间距。在传送带304上的小载片间距延长了固定剂的固着时间，为了方便将单层颗粒物转移到载片上，这些固定剂是早就涂上的。
传送带304使载片移向收集系统307。收集系统307可能包括至少一个用于在一个盒子或其它后续处理装置中如染色装置中定位载片的装卸机构。
一个容器卸载系统650包括另一个由马达M5驱动的传动机构以便将许多容器支架100’排列。从容器卸载系统650出来后，用手动或通过机械方式使容器20脱离容器支架100’。接着，重新使用容器支架100’并且使容器20前进以便存放或丢弃。
在图32A-32C中示出了一种采用第二示范实施例的方法。在图32A中，在容器支架100’中的一组容器20被第二传动机构带向采样台。将对应于容器组的该组采样头622对准并使其与其各自的适配器接头700分隔开。载片传送带300’平行于容器组和载片延伸并且沿横向位于该组适配器接头700的相对侧。
在图32B中，已经使该组采样头622移动以便与其各自的适配器接头700接合。一真空源与第三孔相连以便牢固地将各采样头622与其各自的适配器接头700牢固连接起来。可以通过将各采样头622相对于各自容器20转动来混合样品，由此造成进一步混合各样品，于是使颗粒物分散。使一个真空源与各采样头622的第二孔相连以便经过相应过滤件33抽出在各容器20中的至少一部分样品，由此收集了单层颗粒物。
在图32C中，使采样头622离开其各自的容器20。通过与各采样头622的第三孔相连的真空源使各适配器接头700相对其各自的采样头被牢固固定住。启动载片传送带300’以便在各采样头622下对准各载片。降低采样头622以使单层颗粒物接触并转移到各载片上。
图34-36示出了根据第二优选实施例的流体流动情况的例子。图37、38示出了根据本发明第二优选实施例的过程控制方案的例子。自动化过程的替代方案
此外，固定剂可以在将单层颗粒物转移到载片上之前和/或之后被涂在载片上。根据本发明的一个优选实施例，在将单层颗粒物转移到各自载片上之前，固定剂分散剂至少将一滴固定剂涂覆在位于传送带300’上的每个载片上。可以选择性地在把单层颗粒物转移到各自载片上后将第二滴固定剂涂覆在位于传送带304上的每个载片上。
如图31清楚示出的那样，可以在收集系统307前安装一个吸收系统(blotter system)635。吸收系统635包括至少一个用于吸收多余固定剂的条带机构636。另外，第二条带机构637可以依靠粘性收集任何仍依附在单层上的膜。当然，可以在接触另一个载片前使这两条带636、637前移，于是避免了单层颗粒物的交叉污染。
上述的颗粒物收集装置或组件可以与其它适当的过滤或处理器件联合使用。这样的器件例如包括其它碎屑和/或分析仪器或组件，它们可以与外壳10相连。这些附件一般将具有一个具有入口和出口的外壳并将具有一个横跨外壳中的流道的过滤器件、分析部件或探测件。例如，装置可能包括一个具有入口和出口的外壳，它在入口和出口之间限定出一个流道，所述装置还包括一个横跨流道的过滤件、一个位于过滤件输出侧的可自由活动的色谱/分析件如基材颗粒。色谱/分析件可以自由地与流体中的颗粒物混合，它们截留物质并可以进行分析以便查出是否存在物质。适当的器件包括US4,953,561、US5,224,489、US5,016,644、US5,139,031、US5,301,685、US5,042,502、US5,137,031所述的器件。
本发明的细胞学收集装置10还允许分离和收集来自生物流体的活细胞和/或显微组织，从而一旦通过适当的缓冲液使细胞溶血，则进行DNA检查和色谱分析。
在细胞学中被最广泛地用于观察细胞变化的染色法是帕潘尼卡罗(Papanicolaou)染色法。被用于基因学和非基因学用途的这种染色法基本上由蓝色核和组织、红色和绿色的细胞质对比染色构成。核染色显示出与正常和异常细胞有关的色谱图纹，而细胞质染色有助于显示细胞起源。这种方法的成功可能要归功于能够观察许多因素，这其中包括核局部界限与细胞差异。这种染色法还导致了彩色制备，它美观并且可以减轻眼睛疲劳。
由于细胞部分取决于固定剂，所以细胞最好在沉积于载片上之后马上被固定住。准备期和固定期之间的间隔太长可能使细胞干燥，这可能对细胞组织不利。另外，空气干燥制品可能不利地影响了随后的染色结果。除非细胞是通过Wright-Giemsa Staiu方式进行染色的，其中空气干燥被用作固定步骤。
在本发明的另一个实施例中，单层细胞可被直接固定在收集位置上。这可以通过先把单层细胞沉积在上述细胞学收集装置的收集位置上并随后使含固定剂的溶液如酒精或丙酮流过细胞学收集装置而实现。
由单个病人样品生产出许多份样品的方法也在本发明的范围内。用于其它染色装置的附加载片是很容易制成的。例如，可以对附加载片进行利用新方法如免疫细胞化学或现场杂化的人体乳头状瘤病毒检验。由于发展出了致癌基因产品或其它免疫细胞化学实验，所以可能需要更多的载片。这些实验可能需要的不同固定剂可以很容易地被加入程序中，因为本发明不需要只通过一种方式固定载片。
相同的载片制备方法可以被用于实际上所有形式的细胞学。另外，使用完全包含可丢弃成分解决了对生物危害的问题。最终，提善了细胞破译的细胞集中显示可以通过提供更连续和可靠的病人诊断而扩展细胞学的作用。
另外，被截留的显微组织可以在培养基中进行繁殖。在单层细胞被收集在细胞学收集容器中后，可以利用流体回洗收集位置，由此使任何收集的显微组织离开收集位置。
在细菌检验中，第一多孔介质可被用于Qualture仪器(未示出)培养以决定是否存在特殊菌落。Qualture仪器是包含过滤膜和由脱水的选定介质构成的四个营养片的塑料囊。
Qualture技术比琼脂平面培养法更敏感并且在确定假设诊断方面更迅速。该仪器在一个步骤中筛除、分离并推定地诊断细菌分离物，通常这需要4小时-6小时。实验结果表明，回收五十毫升流体是非常好并且灵敏的。半自动化装置
另一个一次性处理单个样品的装置在图39-41中示出了。一种连接盖子部分或容器的构件或结构一般包括用以定位、固定和/或移动盖子部分或容器的任何部件。这样的部件例如包括套管、至少一条皮带、至少一个皮带轮、至少一个弹性条带等，但不限于此。
本发明的一个优选实施例包括一个用于定位和转动容器及外盖的支撑套管A。在本发明的一个最优选实施例中，盖子外部还包括至少一个弹性条带B，它在松弛位置或第一位置上(图40)不接触外盖71，而在张紧位置或第二位置上(图41)接合并定位外盖71，而外盖和容器正在转动。在一个替换实施例中，皮带B可以是使外盖和容器绕内盖72和/或管/搅拌件52转动的驱动带。
尽管根据特殊的优选实施例描述了本发明，但是本发明不局限于此。本领域的技术人员尤其是可以根据上述教导设想出仍在本发明范围内的替代实施例、例子和修改方案。
对于本领域技术人员来说，其它优点和修改方案是显而易见的。因此，广泛地讲，本发明不局限于所述和所示的具体细节和示例性仪器。因此，可以在不超出由后续权利要求书和其等同例限定的本发明总体构思的范围和精神的前提下作出各种修改。

Claims (38)

1.一种用于批量处理一组在各自容器中的样品的自动化装置，从各样品中将单层颗粒物沉积在一个对应的载片上以便检验，该装置包括：
一个按照第一布置形式安装一组容器的容器支架；
使该容器支架移向一个采样头台的第一传送机构；
对应于该组容器且在该采样头台处与各自容器接合的一组头，每个头与各自的样品连通；
一个使各样品从其各自容器中流过其相应头的泵；
对应于该组头的一组过滤件，每个过滤件与各自的样品流连通并且包括：
一个设置在相应样品流的第一支路中且适于收集相应单层颗粒物的膜，以及
一个设置在绕过该膜的相应样品流的第二支路中的玻璃料；
一个按照第二布置形式安装一组载片的载片支座，该组载片对应于该组头；
使该载片支座前进到一沉积台的第二传送机构；以及
一个控制器，其用于协调使容器支架前移的第一传送机构、与该组容器接合的该组头、产生各样品流的该泵和使载片支座前移的第二传送机构；
其中控制器适于协调自动的样品流通量并使各样品容器与一个对应的载片相互关联起来。
2.如权利要求1所述的自动化装置，其特征在于，第一布置形式对应于第二布置形式。
3.如权利要求1或2所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个使各头相对于其各自容器移动的混合器件；其中控制器还协调了使各头相对于其各自容器移动的该混合器件和与该组容器接合的该组头的动作。
4.如权利要求3所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个使各头转动的驱动机构；其中每个容器相对于容器支架是固定的。
5.如权利要求3所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个使每个容器相对于容器支架转动的驱动机构；以及一个用于各容器的相应盖子；其中防止每个盖子转动。
6.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：对应于该组头的一组搅拌器件，每个搅拌器件与在各自容器中的相应样品相连通并适于搅拌相应的样品以便分散相应的颗粒物。
7.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个按照第一布置形式将该组容器安放在容器支架上的容器装载机构；其中控制器还协调了将该组容器布置在该容器支架上的该容器装载机构和使该容器支架前移的第一传送机构的动作。
8.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个在容器卸载台上从该容器支架上取下该组容器的容器卸载机构；其中第一传送机构使该容器支架从该采样头台前进到容器卸载台；并且该控制器还协调了从容器支架上取下该组容器的该容器卸载机构和使容器支架前移的第一传送机构的动作。
9.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个按照第二布置形式在该载片支座上设置该组载片的载片装载机构；其中该控制器还协调了将该组载片布置在该载片支座上的该载片装载机构和使载片支座前移的第二传送机构的动作。
10.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个在载片卸载台上从该载片支座上取下载片的载片卸载机构；其中第二传送机构使该载片支座从该沉积台前进到该载片卸载台；并且控制器还协调了从该载片支座上取下该组载片的该载片卸载机构和使载片支座前移的第二传送机构的动作。
11.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：探测在各自容器上的第一标记的第一读取器；探测在各自载片上的第二标记的第二读取器；以及一个产生对应的第一、第二标记名单的打印机；其中第一、第二标记使各自容器中的样品与在各自载片上的单层颗粒物联系起来；并且控制器还协调了探测第一、第二标记的第一、第二读取器的动作并指导打印机打印所述对应名单。
12.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，该组头沿一条路线相对于该组容器往复移动，其中该沉积台位于该路线上。
13.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：分别提供一个不同的过滤件的多个过滤件供应源；一个过滤件装载机构，其分别将每个过滤件从其中一个过滤件供应源传递给一个由与各自容器接合的每个头构成的过滤腔；其中控制器还协调了从多个过滤件供应源中传送出过滤件的过滤件装载机构和与该组容器接合的该组头的动作。
14.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个用于涂覆一种适于将单层颗粒物固定在载片上的固定剂的涂覆机构；其中控制器还协调了涂抹固定剂的涂覆机构和使载片支座前移的第二传送机构的动作。
15.如权利要求14所述的自动化装置，其特征在于，一个吸收多余固定剂的吸收件；其中控制器还协调了吸收多余固定剂的该吸收件与涂抹固定剂的涂覆机构的动作。
16.如权利要求14所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个干燥所述固定剂的吹风机；其中控制器还协调了干燥该固定剂的吹风机和涂抹固定剂的涂覆机构的动作。
17.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个使该膜脱离于载片上的单层颗粒物的条带；其中控制器还协调了使条带前进的动作。
18.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个使该膜脱离于载片上的单层颗粒物的吹风机；其中控制器还协调了使该膜脱离于载片上的单层颗粒物的吹风机和使载片支座前移的第二传送机构的动作。
19.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，它还包括：一个用于清理该组头的溶液槽；其中该控制器还协调了清理该组头的溶液槽和与该组容器接合的该组头的动作。
20.如前述权利要求之一所述的自动化装置，其特征在于，各样品流的第一、第二支路经过用于其各自样品的玻璃料。
21.一种用于批量处理在各自容器中的一组样品的自动化方法，将来自各样品的单层颗粒物沉积在一个对应的载片上以便检验，该方法包括：
将一组头连接到一组对应的样品容器上，每个头与各自的样品容器相连通；
通过各自头从相应容器中抽出一股样品流；
用一组对应于该组头的过滤件中的相应一个过滤件来过滤各样品流；该过滤过程包括：
利用一个处在各样品流第一支路内的膜来收集单层颗粒物；以及
通过一个处在各样品流第二支路内的玻璃料绕过该膜；
分别将带有各自单层颗粒物的各个所述膜转移给载片组中的一个相应载片，该组载片对应于该组头；以及
控制所述连接、抽吸、过滤和转移动作的协调性以便自动地将来自各自样品的单层颗粒物沉积在各自载片上。
22.如权利要求21所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：在所述连接、抽吸、过滤、转移操作中的不同操作中同时处理新的容器组；以及对各新的容器组重复进行所述连接、抽吸、过滤和转移操作；其中所述控制还协调了对各组容器的同时处理以及所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
23.如权利要求21或22所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：按照一种布置形式在一容器支架上布置该组容器；以及用一传送机构使容器支架前移以便进行所述接合操作；其中所述控制还协调了该组容器的布置和该容器支架的前进与所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
24.如权利要求21-23之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：从该容器支架上取下该组容器；其中所述控制还协调了该组容器的取下和所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
25.如权利要求21-24之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：按照一种布置形式在一载片支座上布置该组载片；以及利用一传送机构使该载片支座前进以便进行转移操作；其中所述控制还协调着该组载片的布置和该载片支座的前进与所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
26.如权利要求21-25之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：从该载片支座上取下该组载片；其中所述控制还协调着该组载片的取下和所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
27.如权利要求21-26之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：通过相对于其各自容器移动每个头而对各自容器内的各样品进行混合；其中所述控制还协调着所述混合动作与所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
28.如权利要求26或27所述的自动化方法，其特征在于，所述混合包括使每个头相对于其各自的容器转动。
29.如权利要求21-28之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：读取在各自容器上的第一标记；以及打印在各自载片上的第二标记；其中第一、第二标记使各自容器内的样品与在各自载片上的单层颗粒物关联起来；并且所述控制还协调了所述读取、打印动作与所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
30.如权利要求21-29之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：从许多过滤件供应源中选择该过滤件；以及将来自众多过滤件供应源之一的过滤件传送到一个过滤腔，该过滤腔由与其各自容器接合的所述组头中的每个头所构成；其中所述控制还协调了所述选择、传送动作与所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
31.如权利要求21-30之一所述的自动化方法，其特征在于，将一种固定剂涂覆到在各自载片上的单层颗粒物上；其中所述控制还协调了所述涂覆动作和所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
32.如权利要求31所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：吸收多余固定剂；其中所述控制还协调了所述吸收动作与所述连接、抽吸、过滤、转移和涂覆操作。
33.如权利要求31或32所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：用吹风机干燥所述固定剂；其中所述控制还协调了所述干燥动作和所述连接、抽吸、过滤、转移和涂覆操作。
34.如权利要求31-33之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：用一个吹风机使该膜脱离于在载片上的相应单层颗粒物；其中所述控制还协调了所述脱离动作和所述连接、抽吸、过滤、转移和涂覆操作。
35.如权利要求31-33之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：用一个条带使所述膜脱离于在载片上的相应单层颗粒物；其中所述控制还协调了所述脱离动作与所述连接、抽吸、过滤、转移和涂覆操作。
36.如权利要求31-35之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：在一个溶液槽中清理该组头；其中所述控制还协调了所述清理动作和所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
37.如权利要求31-36之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：将具有各样品的其相应未收集部分的容器存放起来；其中所述控制还协调了所述存放动作和所述连接、抽吸、过滤、转移和返回操作。
38.如权利要求31-37之一所述的自动化方法，其特征在于，它还包括：集中地布置沉积有相应单层颗粒物的载片；其中所述控制还协调了所述堆放动作和所述连接、抽吸、过滤和转移操作。
CN98810541A 1997-08-25 1998-08-25 由从流体样品分离出的颗粒物自动形成单层的方法和装置 Expired - Fee Related CN1108518C (zh)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US5644597P 1997-08-25 1997-08-25
US60/056,445 1997-08-25
US60/056445 1997-08-25
US09/053010 1998-04-01
US09/053,010 1998-04-01
US09/053,010 US6309362B1 (en) 1992-07-28 1998-04-01 Method and apparatus for automatically separating particulate matter from a fluid

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1277672A true CN1277672A (zh) 2000-12-20
CN1108518C CN1108518C (zh) 2003-05-14

Family

ID=26731348

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN98810541A Expired - Fee Related CN1108518C (zh) 1997-08-25 1998-08-25 由从流体样品分离出的颗粒物自动形成单层的方法和装置

Country Status (14)

Country Link
US (1) US6309362B1 (zh)
EP (1) EP1007937B1 (zh)
JP (1) JP4024476B2 (zh)
KR (2) KR100858198B1 (zh)
CN (1) CN1108518C (zh)
AT (1) ATE253216T1 (zh)
AU (1) AU755416B2 (zh)
BR (1) BR9811919B1 (zh)
CA (1) CA2301551C (zh)
DE (1) DE69819342T2 (zh)
DK (1) DK1007937T3 (zh)
NZ (1) NZ503084A (zh)
TW (1) TW372868B (zh)
WO (1) WO1999010723A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102620964A (zh) * 2012-03-26 2012-08-01 常州轻工职业技术学院 具有化学药品挥发性气体处理功能的病理组织脱水机

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6830935B1 (en) * 1998-07-07 2004-12-14 Lamina, Inc. Method for mixing and processing specimen samples
US6572824B1 (en) * 1998-09-18 2003-06-03 Cytyc Corporation Method and apparatus for preparing cytological specimens
US6562299B1 (en) * 1998-09-18 2003-05-13 Cytyc Corporation Method and apparatus for preparing cytological specimens
US20030059347A1 (en) * 1998-09-18 2003-03-27 Roy A. Ostgaard Sample vial for use in preparing cytological specimen
US6979425B1 (en) * 1999-10-04 2005-12-27 Robodesign International, Inc. High capacity microarray dispensing
AU2006201456B2 (en) * 2000-03-08 2008-05-08 Cytyc Corporation Method and apparatus for preparing cytological specimens
ATE335196T1 (de) * 2000-03-08 2006-08-15 Cytyc Corp Verfahren und vorrichtung zur vorbereitung von zellproben
JP4766789B2 (ja) * 2001-07-10 2011-09-07 トミー工業株式会社 スライドガラスの遠心機用ラック
EP1845357A1 (en) * 2001-10-19 2007-10-17 MonoGen, Inc. Apparatus and method for mixing specimens in vials
EP1845356A1 (en) * 2001-10-19 2007-10-17 MonoGen, Inc. Apparatus and method for destacking articles
US7771662B2 (en) * 2001-10-19 2010-08-10 Hologic, Inc Vial system and method for processing liquid-based specimens
US20030100125A1 (en) * 2001-10-19 2003-05-29 Monogen, Inc. Flow control metering system and method for controlling filtration of liquid-based specimens
US7211225B2 (en) * 2002-08-26 2007-05-01 Perceptronix Medical Inc. Filter devices for depositing material and density gradients of material from sample suspension
US6884341B2 (en) * 2002-10-02 2005-04-26 G6 Science Corp. Filter device to capture a desired amount of material
US6905594B2 (en) * 2002-10-11 2005-06-14 G6 Science Corp. Filter apparatus and methods to capture a desired amount of material from a sample suspension for monolayer deposition, analysis or other uses
US20050175499A1 (en) * 2004-02-06 2005-08-11 Quest Diagnostics Investments Incorporated Method of reducing cross sample contamination during filter sampling
CA2586893A1 (en) * 2004-11-09 2006-05-18 Monogen, Inc. Vial assembly, sampling apparatus and method for processing liquid-based specimens
WO2006053136A2 (en) * 2004-11-10 2006-05-18 Monogen, Inc. Liquid specimen sampling system and method
US9551635B2 (en) 2006-03-09 2017-01-24 Biogenex Laboratories Inc. Sample processing system
US20070292315A1 (en) * 2006-06-16 2007-12-20 Cytyc Corporation Mini-tray for slide processing
US7449153B2 (en) * 2006-07-21 2008-11-11 Cytyc Corporation Tray for slide processing
JP4975599B2 (ja) * 2007-12-17 2012-07-11 シスメックス株式会社 標本作製装置および標本作製方法
WO2011100075A2 (en) * 2010-02-15 2011-08-18 Carnegie Mellon University Apparatus and process for producing patterned, micron and nanometer size reaction and mixing zones for fluids deposited on smooth, rough and porous surfaces and applications of that process
WO2012176065A2 (en) * 2011-06-24 2012-12-27 Biotechnology Developers, S.A. Method compositions and device for preparing cytological specimens
AU2016246542B2 (en) 2015-04-06 2021-08-26 Nanocytomics, LLC Automated specimen deposition systems and associated methods
US10281371B2 (en) 2016-06-10 2019-05-07 Met One Instruments, Inc. Sequential air sampler with filter cassette magazine
US11460383B2 (en) 2016-06-16 2022-10-04 Nanocytomics, LLC Automated staining system
CN107954223A (zh) * 2017-12-15 2018-04-24 铜陵天奇蓝天机械设备有限公司 一种皮带机头部取料装置
DE102018111064A1 (de) * 2018-05-08 2019-11-14 Lockcon Ag Öffnungsmaschinenvorrichtung und Probenbehälter zur Verwendung mit der Öffnungsmaschinenvorrichtung
KR101985008B1 (ko) * 2018-09-08 2019-05-31 (주)바이오다인 탈락세포 처리 장치
KR102051434B1 (ko) * 2018-12-07 2019-12-03 주식회사 엘지화학 알러지 진단용 칩 및 그 알러지 진단용 칩 제조 방법
CN111220369B (zh) * 2020-02-14 2024-01-16 重庆大学 一种大型悬臂柱的受压加载装置及方法
GB2612829A (en) * 2021-11-12 2023-05-17 Ethos Enviromental Ltd A system for taking and analysing air samples
KR102698527B1 (ko) * 2023-04-18 2024-08-22 쟝쑤 유니버시티 식초 발효 정도 검사 장치
CN117606885B (zh) * 2024-01-24 2024-03-26 成都川哈工机器人及智能装备产业技术研究院有限公司 一种智能化病理成片系统及方法

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS59157531A (ja) * 1983-02-28 1984-09-06 Sankyo Co Ltd 自動標本封入装置
JPS6173054A (ja) * 1984-09-17 1986-04-15 メデイカル　テクノロジ−　コ−ポレ−シヨン 試料調整用小瓶
JPH0535316Y2 (zh) * 1985-09-04 1993-09-08
JPS62168465U (zh) * 1986-04-16 1987-10-26
JPS63275957A (ja) * 1987-05-08 1988-11-14 Toshiba Corp 自動化学分析装置
JPS646847A (en) * 1987-06-30 1989-01-11 Konishiroku Photo Ind Chemical analysis apparatus
US5429803A (en) * 1991-04-18 1995-07-04 Lamina, Inc. Liquid specimen container and attachable testing modules
US5042502A (en) 1989-09-18 1991-08-27 La Mina Ltd. Urine testing module with cytology cup
US5139031A (en) 1989-09-18 1992-08-18 La Mina Ltd. Method and device for cytology and microbiological testing
US5016644A (en) 1989-01-10 1991-05-21 La Mina Ltd. Urine testing module and method of collecting urine antigen
US4953561A (en) 1989-09-18 1990-09-04 Cancer Diagnostics, Inc. Urine testing module and method of collecting urine antigen
US5301685A (en) * 1989-01-10 1994-04-12 Guirguis Raouf A Method and apparatus for obtaining a cytology monolayer
JP2824490B2 (ja) * 1989-12-20 1998-11-11 泉工医科工業株式会社 濾過治具
JPH0351739A (ja) * 1989-07-19 1991-03-06 Kyoritsu Denki Kk シート状資料搬送装置
JP2724884B2 (ja) * 1989-09-06 1998-03-09 東亜医用電子株式会社 総合血液検査装置
AU636384B2 (en) 1989-09-06 1993-04-29 Toa Medical Electronics Co., Ltd. Synthetic apparatus for inspection of blood
US5137031A (en) 1989-09-18 1992-08-11 La Mina Ltd. Urine testing apparatus with urinary sediment device
JPH0368063U (zh) * 1989-11-06 1991-07-03
US5143627A (en) 1990-07-09 1992-09-01 Cytyc Corporation Method and apparatus for preparing cells for examination
US5282978A (en) * 1990-07-09 1994-02-01 Cytyc Corporation Specimen processor method and apparatus
US5213764A (en) * 1991-05-15 1993-05-25 Miles Inc. Metering device for slide analysis system
US5266272A (en) * 1991-10-31 1993-11-30 Baxter Diagnostics Inc. Specimen processing and analyzing systems with a station for holding specimen trays during processing
KR970010962B1 (ko) 1992-12-28 1997-07-05 조말수 액체시료 자동분석장치
JP3234370B2 (ja) * 1993-10-01 2001-12-04 タイホー工業株式会社 検体採取装置
JPH07113808A (ja) * 1993-10-19 1995-05-02 Fuji Photo Film Co Ltd 乾式分析フイルム片の搬送方法および生化学分析装置
US5441071A (en) * 1994-05-04 1995-08-15 Mclane Research Laboratories, Inc. Automated water sample collecting system
JPH0862210A (ja) * 1994-08-22 1996-03-08 Muto Kagaku Yakuhin Kk 液状検体細胞塗抹器具及びその使用方法
JP3443201B2 (ja) * 1995-03-15 2003-09-02 三洋電機株式会社 分注装置
EP0743524A1 (en) 1995-05-17 1996-11-20 COSTAR ITALIA S.r.l. Station for preparing cytological preparations

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102620964A (zh) * 2012-03-26 2012-08-01 常州轻工职业技术学院 具有化学药品挥发性气体处理功能的病理组织脱水机

Also Published As

Publication number Publication date
DE69819342T2 (de) 2004-07-29
KR20010023340A (ko) 2001-03-26
WO1999010723A1 (en) 1999-03-04
KR20010023328A (ko) 2001-03-26
CA2301551C (en) 2007-10-30
DE69819342D1 (de) 2003-12-04
BR9811919A (pt) 2001-11-20
AU9117798A (en) 1999-03-16
CA2301551A1 (en) 1999-03-04
BR9811919B1 (pt) 2010-11-30
CN1108518C (zh) 2003-05-14
NZ503084A (en) 2001-07-27
KR100858198B1 (ko) 2008-09-10
JP2001514383A (ja) 2001-09-11
AU755416B2 (en) 2002-12-12
ATE253216T1 (de) 2003-11-15
TW372868B (en) 1999-11-01
US6309362B1 (en) 2001-10-30
EP1007937A1 (en) 2000-06-14
DK1007937T3 (da) 2004-03-15
JP4024476B2 (ja) 2007-12-19
EP1007937B1 (en) 2003-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1108518C (zh) 由从流体样品分离出的颗粒物自动形成单层的方法和装置
CN1144034C (zh) 细胞学和组织学固定剂组合物及其使用方法
AU645689B2 (en) Liquid specimen container and attachable testing modules
CN1886662A (zh) 通用的显微镜载物玻片盒
CN1606696A (zh) 制品处理系统和方法
CN1272426C (zh) 由液体样本中分离颗粒物质的方法和装置
CN1526074A (zh) 检测系统
CN1136446C (zh) 用于混合和加工标本样品的改进方法
CN1324127C (zh) 培养容器和培养设备
US6830935B1 (en) Method for mixing and processing specimen samples
CN1774622A (zh) 分注用缸体、大容量分注装置以及大容量分注装置的使用方法
US20080307904A1 (en) Liquid Specimen Sampling System and Method
JP4171974B2 (ja) 抗原の分離装置並びにこれを利用した抗原の計測方法及び装置
MXPA00002019A (en) Method and apparatus for automatically forming monolayers from particulate matter separated from fluid samples
MXPA00001286A (en) Method and apparatus for separating particulate matter from a liquid specimen

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20030514

Termination date: 20120825