CN1270735C - 一种治疗小儿腹泻的外用软膏剂 - Google Patents

Abstract

一种治疗小儿腹泻的外用软膏剂，包括(用量为重量份)：苦参30～50份、木香3～8份、冰片0.1～0.6份。本发明药物经药效试验证明，本发明药物具有抗菌、抗炎、止泻、镇痛作用，促进肠功能正常小鼠的小肠推进运动，减慢肠功能亢进小鼠的小肠推进运动，还可促进胃液和胃酸分泌。

Description

一种治疗小儿腹泻的外用软膏剂

技术领域

本发明属于含有原料或其与不明结构之反应产物的医用配制品技术领域，具体涉及到来源于植物的材料。

背景技术

小儿腹泻是儿科常见病、多发病之一，6个月至2岁婴幼儿发病率更高，四季均可发生，尤以夏秋季节较多。其症状多见大便次数增多，粪质稀薄或如水样，伴有呕吐，或恶寒发热等，对儿童健康危害较大，若治疗不及时时或治疗不当，可转成慢性，出现伤阴、伤阳或阴阳两伤等危重变证，甚至气脱液竭而死亡。迁延不愈者，可引起营养不良，影响小儿生长发育，成为疳证。

目前在临床上用于治疗小儿腹泻常以口服药物治疗，因口感不佳，患儿惧怕服药，不易被接受。治疗小儿腹泻常以口服药物为主，口服药物主要以抗菌素为主，有绿酶素、四环素、金霉素、黄连素、增效黄连素等，抗菌素对小儿患者的胃刺激很大，患者服药后经常出现呕吐，不进食，有的患者还出现皮肤过敏，长期多次服用抗菌素，还会引起白血球下降，免疫功能下降等疾病，严重着还会引起白血病。肌肉注射的药物较少，而且不易为患儿和家长所接受。静脉注射的药物仍然以抗菌素为主，同样存在上述的副作用，另外由于患儿血管细较细，暴露不清，针头不易扎入，常常反复多次，有时还在头部或足部静脉注射，每注射一次花费的时间较多，而且患儿的家长不易接受。

目前在临床使用的外用贴膏剂只有丁桂儿泻贴(原名宝宝一贴灵)，主要是针对小儿体质虚弱使用而不是针对湿热证者使用，目前临床尚未见有相关用于治疗小儿腹泻的外用软膏剂。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于克服上述药物的缺点，提供一种疗效显著的治疗小儿腹泻的外用软膏剂。

解决上述技术问题所采用的技术方案它是以下述重量份配比的中药原料按常规制剂方法制成的外用软膏剂：

苦参                              20～60份

木香                              2～10份

冰片                              0.1～1份

制备本发明药物的优选中药原料重量份配比是：

苦参                              30～50份

木香                              3～8份

冰片                              0.1～0.6份

制备本发明药物的最佳中药原料重量份配比是：

苦参                              40份

木香                              6份

冰片                              0.4份

在本发明的配比中选用了苦参、木香、冰片中药原料。苦参有清热燥湿，祛风杀虫的功效，主治湿热泻痢，肠风便血。苦参在方中为君药，针对小儿腹泻湿热主病证而设。木香味辛，性温，归脾、胃、肝、肺经，有行气止痛，调中导滞的功效，主治胸胁胀满，脘腹胀痛，呕吐泄泻，痢疾后重，木香辅助苦参加强治疗腹泻及腹泻所出现的腹痛等症，方中为臣药。

冰片味辛、苦，性凉，有开窍醒神，散热止痛的功效，主治中风口噤，热病神昏，惊痫痰迷，冰片在方中可辅助君、臣药以加强治疗作用，为佐使药。

本发明药物的制备工艺如下：

木香粉碎成细粉，过100目筛，备用。

冰片研细，备用。

苦参每次加10倍量的水提取3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.35～1.40(70℃)，减压干燥(70℃，0.09Mpa)，粉碎成细粉，备用。

取1/9中药原料重量的明胶加5倍量水使充分溶胀，沥去多余的水，加甘油，60℃加热使充分溶解，蒸去水份，加入苦参提取物细粉、木香细粉以及冰片细粉，充分混匀，搅拌至软硬适中，色泽一致的软膏状，制丸，贴于无纺布上，即得。

本发明经药效试验证明：本发明药物体外对肠道感染常见细菌大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、肠产毒型大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、变形杆菌、粪链球菌、白色假丝酵母菌有较明显的抑制和灭活作用，改变pH和细菌接种量不影响本发明药物对大肠埃希氏菌和痢疾志贺氏菌的抗菌作用；灌胃给药，体内对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠有保护作用。本发明药物腹部涂抹给药，抑制醋酸刺激的小鼠急性渗出性炎症反应和扭体反应，减少番泻叶刺激的小鼠腹泻次数，促进正常小鼠小肠推进运动，减慢肠功能亢进小鼠小肠推进运动。本发明药物腹部涂抹给药，增加大鼠胃液分泌量、胃总酸度和总酸排出量。结果说明，本发明药物具有抗菌、抗炎、止泻、镇痛作用，促进肠功能正常小鼠的小肠推进运动，减慢肠功能亢进小鼠的小肠推进运动，还可促进胃液和胃酸分泌。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进一步详细说明，但本发明不限于这些实施例。

实施例1

以生产本发明药物软膏剂1000贴为例所用中药原料和辅料及其重量配比为：

苦参                              3827.59g

木香                              574.14g

冰片                              38.28g

明胶                              100g

甘油                              加至2000g

其制备工艺按本发明软膏剂的制备工艺进行。每贴重2g，每克含生药2.22g，每次贴1贴，贴于神阙穴位，每日贴1次，2个月至1周岁的婴幼儿每天贴3～6小时。

在本实施例的配比中，中药原料各组分的重量份为：

苦参                              40份

木香                              6份

冰片                              0.4份

实施例2

以生产本发明药物软膏剂1000贴为例所用中药原料和辅料及其重量配比为：

苦参                              4018.10g

木香                              401.81g

冰片                              20.09g

明胶                              100g

甘油                              加至2000g

其制备工艺按本发明软膏剂的制备工艺进行。每贴重2g，每克含生药2.22g，每次贴1贴，贴于神阙穴位，每日贴1次，2个月至1周岁的婴幼儿每天贴3～6小时。

在本实施例的配比中，中药原料各组分的重量份为：

苦参                              20份

木香                              2份

冰片                              0.1份

实施例3

以生产本发明药物软膏剂1000贴为例所用中药原料和辅料及其重量配比为：

苦参                              3752.11g

木香                              625.35g

冰片                              62.54g

明胶                              100g

甘油                              加至2000g

其制备工艺按本发明软膏剂的制备工艺进行。每贴重2g，每克含生药2.22g，每次贴1贴，贴于神阙穴位，每日贴1次，2个月至1周岁的婴幼儿每天贴3～6小时。

在本实施例的配比中，中药原料各组分的重量份为：

苦参                              60份

木香                              10份

冰片                              1份

为了验证本发明药物对小儿腹泻的治疗效果，申请人委托西安集贤药业有限公司采用本发明实施例1配比制备的本发明药物(试验时名称为小儿参香止泻贴)软膏剂，委托西安交通大学药学院进行了药效学试验，各种试验情况如下：

试验药物：本发明药物软膏剂，每贴重2g，每贴含生药4.44g，试验用浸膏每克含生药2.22g，由西安集贤药业有限公司生产，批号20030601。

对照药和主要试剂以及细菌：结肠炎丸，陕西中医学院制药厂生产，批号011105；丁桂儿脐贴(宝宝一贴灵)，山西亚宝药业集团股份有限公司生产，批号030415；甲硫酸新斯的明注射液，上海信谊药厂生产，批号990501。标准菌株购自中国医学科学院北京药品生物制品鉴定所中国医学细菌保藏中心，临床分离菌株由西安交通大学第一医院检验科、西安交通大学第二医院检验科、陕西省人民医院检验科提供，均经TAXK-II全自动数字细菌鉴定仪鉴定。

试验仪器：JA1003电子天平，由上海精密科学仪器有限公司生产；DCCO-20普通培养仪，由日本DICCO株式会社生产；752C型紫外可见分光光度计，由上海第三分析仪器厂生产；游标卡尺，精度0.02mm，由上海精美量具厂生产。

试验动物：ICR品系小白鼠，雌雄各半，体重18～22g，质量合格证“陕医动证字第08-004号”；SD品系大白鼠，雌雄各半，体重200～250gkg，质量合格证“陕医动证字第08-005号”，均由西安交通大学医学院实验动物中心提供。

动物分笼饲养，食固体饲料，食水自由，饲料由西安交通大学医学院实验动物中心负责。室温18～20℃，相对湿度60％～70％。

统计处理：进行组间比较或自身比较的t检验。

一、体外抗菌试验

参照卫生部药政局《新药临床前研究指导原则》中“抗菌药体外抗菌试验原则”、《微生物学检验技术》和《现代药理学实验研究技术》中“抗菌、抗病毒药物的实验方法与技术”，采用微量连续二倍稀释法测定本发明药物对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、肠产毒型大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、变形杆菌、粪链球菌、白色假丝酵母菌的标准株，以及大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、变形杆菌、白色假丝酵母菌临床分离株的最小抑菌浓度(MIC)，采用平板转染法测定本发明药物对上述细菌的最小杀菌浓度(MBC)。将大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、变形杆菌接种于肉汤，置普通培养箱37℃培养24小时；白色假丝酵母菌接种于沙保弱氏肉汤，置普通培养箱37℃培养48小时；粪链球菌接种于TPY肉汤(厌氧菌营养肉汤)，置厌氧培养箱37℃培养48小时。用比浊法计数细菌，转种于平板测定菌液中活菌数即菌落形成单位(CFU/mL)，用林格氏液调配成10⁶CFU/mL的菌液备用。

1、本发明药物的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度测定

(1)本发明药物对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、变形杆菌标准株和临床分离株MIC和MBC的测定

将本发明药物用含0.05％酚红的葡萄糖MH肉汤由10％(含生药量222mg/ml)进行连续二倍梯度稀释，各浓度药液分别加到96孔培养板，每孔0.2mL。再依次加入浓度为10⁶CFU/ml的试验菌液，每孔10μL，同时设立细菌对照以及培养基对照。置室温作用12小时，于普通培养箱37℃培养18小时观察结果。培养孔内培养基由红色变为黄色判为有细菌生长繁殖，培养液保持红色不变判为无细菌生长。无细菌生长孔中所含最小药物浓度为MIC。再依次将未见细菌生长孔的培养物分别吸取0.1mL点种于MH平板，置普通培养箱37℃培养24小时，无细菌生长接种区域对应的最小药物浓度为MBC。试验结果见表1～2。

(2)本发明药物对粪链球菌标准株MIC和MBC的测定

将本发明药物用含0.05％酚红的葡萄糖TPY肉汤由10％(含生药量222mgg/mL)进行连续二倍梯度稀释，将各浓度药液分别加到96孔培养板，每孔0.2mL。再依次加入浓度为10⁶CFU/mL的试验菌液，每孔10μL，同时设立细菌对照以及培养基对照。严密封板，置厌氧罐中室温作用12小时，于37℃厌氧培养48小时观察结果。培养孔内培养基由红色变为黄色判为有细菌生长繁殖，培养液保持红色不变判为无细菌生长。无细菌生长孔中所含最小药物浓度为MIC。再依次将未见细菌生长各孔的培养物分别吸取0.1mL转染到TPY平板，置37℃厌氧培养48小时，无细菌生长接种区域对应的最小药物浓度为MBC。试验结果见表1～2。

(3)本发明药物对白色念珠菌标准株和临床分离MIC和MBC的测定

将本发明药物用沙保弱氏(SB)肉汤由10％(含生药量222mg/mL)进行连续二倍梯度稀释，将各浓度药液分别加到96孔培养板，每孔0.2mL。再依次加入浓度为10⁶CFU/mL的试验菌液，每孔10μL，同时设立细菌对照以及培养基对照。置室温作用12小时，于普通培养箱37℃培养48小时观察结果。培养孔内培养基由红色变为黄色判为有细菌生长繁殖，培养液保持红色不变判为无细菌生长。无细菌生长孔中所含最小药物浓度为MIC。再依次将未见细菌生长各孔的培养物分别吸取0.1mL点种于SB平板，置普通培养箱37℃培养48小时，无细菌生长接种区域所对应的最小药物浓度为MBC。试验结果见表1～2。

            表1  本发明药物对标准菌株的MIC和MBC表

菌株	MIC(mg生药/mL)	MBC(mg生药/mL)
			大肠杆菌ATCC25922株	27.75	111
金黄色葡葡球菌ATCC25925株	6.9375	13.875
			绿脓假单胞菌ATCC27853株	222	222
肠产毒型大肠埃希氏菌44824株	27.75	55.5
			伤寒沙门氏菌50098株	13.875	55.5
肠炎沙门氏菌50040株	13.875	27.75
			鼠伤寒沙门氏菌50220株	27.75	55.5
痢疾志贺氏菌51169株	6.9375	27.75
			变形杆菌49010株	27.75	55.5
粪链球菌ATCC10541株	6.9375	13.875
			白色念珠菌85021株	3.4688	6.9375

       表2  本发明药物对440株临床分离菌株的MIC、MIC₅₀、MIC₉₀和MBC(mg生药/mL)表

菌株	株数	MIC	MIC50	MIC90	MBC
						大肠杆菌	155	13.875～55.5	29.8226	34.3413	55.5～111
伤寒杆菌	35	13.875～27.75	19.4250	22.1421	27.75～55.5
						肠炎杆菌	50	6.9375～27.75	14.1525	16.7113	13.875～55.5
痢疾杆菌	50	3.4688～27.75	11.5550	14.1321	13.875～55.5
						变形杆菌	120	13.875～55.5	26.0156	31.5218	27.75～111
白念球菌	30	1.7344～13.875	5.3188	13.875	3.4688～13.875

数据处理：依照公式

MIC₅₀＝lg^-1(∑lgx/n)

MIC₉₀＝MIC₅₀+t_0.01，n-1(s/n^-2)

计算对实验菌株的MIC₅₀和MIC₉₀。

由表1可见，本发明药物对试验所选用的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、肠产毒型大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、变形杆菌、粪链球菌、白色假丝酵母菌的标准株均有较明显的抑制和灭活作用，其MBC为MIC的2～4倍。由表2可见，本发明药物对试验所选用的440株临床分离菌株均有一定的抑制和灭活作用，其MBC为MIC的2～4倍。

2、培养条件对本发明药物MIC的影响

选取大肠埃希氏菌ATCC25922株和痢疾志贺氏菌51169株，改变培养条件，分别测定本发明药物对受试细菌的MIC。

(1)pH的影响

参照试验1 MIC测定方法，将培养液的pH分别调到5.7、7.2、8.5，分别测定各自的MIC，测试结果见表3。

         表3  pH对本发明药物MIC的影响表

pH	MIC(mg生药/ml)
			大肠埃希氏菌	痢疾志贺氏菌
	ATCC25922株	51169株
			5.7	27.75	6.9375
7.2	27.75	6.9375
			8.5	27.75	6.9375

由表3可见，改变培养液的pH，不影响本发明药物对大肠埃希氏菌ATCC25922株和痢疾志贺氏菌51169株的MIC。

(2)细菌接种量对本发明药物MIC的影响

参照试验1 MIC测定方法，将试验菌液浓度依次改变为10⁶、10⁸、10¹⁰CFU/ml，每孔接种10μL，进行MIC测定，结果见表4。

       表4  细菌接种量对本发明药物MIC的影响表

细菌接种量(CFU/ml)	MIC(mg生药/ml)
			大肠埃希氏菌	痢疾志贺氏菌
	ATCC25922株	51169株
			106	27.75	6.9375
108	27.75	6.9375
			1010	27.75	6.9375

由表4可见，改变细菌接种量，不影响本发明药物对大肠埃希氏菌ATCC25922株和痢疾志贺氏菌51169株的MIC。

二、体内抗菌试验

参照《卫生部药政局新药临床前研究指导》中“体内抗菌试验原则”和《中药药理研究方法学》，采用孙氏综合法测定本发明药物对鼠伤寒沙门氏菌50220株感染小鼠的半数保护量，计算其95％可信限。

1、试验菌最小致死量的测定

将ICR/小鼠随机分组，每组10只，雌雄各半。所有小鼠用浓度为0.01mmol/L、pH为8.5的缓冲液灌胃中和胃酸，0.2mL/10g。15分钟后，将试验菌液用含5％胃膜素的生理盐水10g倍连续梯度稀释，用每一稀释菌液灌胃感染一组小鼠，感染量0.2mL/10g，以胃膜素及生理盐水为对照，观察7天，记录各组小鼠死亡情况，以致小鼠全部死亡的最小浓度细菌量作为最小致死量(MLD)。结果表明，鼠伤寒沙门氏菌50220株的最小致死量2×10⁸CFU/kg。

2、本发明药物对感染小鼠0％(ED₀)和100％(ED₁₀₀)保护量的测定

ICR小鼠随机分组，每组10只，雌雄各半。所有小鼠用浓度为0.01mmol/L、pH为8.5的缓冲液灌胃中和胃酸，0.2mL/10g。15分钟后，用试验菌100％MLD灌胃感染小鼠。感染6小时后，将本发明药物由20％(0.444g生药/mL)开始用含5％胃膜素的生理盐水做4倍连续梯度稀释，每一稀释度药液灌胃给药一组小鼠，0.2mL/10g，每日1次，连续7天，同时设立感染对照和正常对照组，观察7天内小鼠死亡情况。小鼠全部死亡的最大给药量为0％保护量，小鼠全部存活的最小给药量为100％保护量。结果表明，本发明药物对鼠伤寒沙门氏菌50220株感染小鼠的ED₁₀₀为2.222g生药/kg，ED₀为0.1388g生药/kg。

3、本发明药物对鼠伤寒沙门氏菌50220株感染小鼠50％(ED₅₀)保护量的测定

ICR小鼠随机分组，每组10只，雌雄各半。所有小鼠用浓度为0.01mmol/L、pH为8.5的缓冲液灌胃中和胃酸，0.2mL/10g。15分钟后，用鼠伤寒沙门氏菌50220株100％MLD菌液灌胃感染小鼠。感染6小时后，将本发明药物用生理盐水由5％开始做1∶2连续5个梯度稀释，每一梯度药液灌胃给药一组小鼠。给药量0.2mL/10g，每日1次，连续7天。感染对照组和正常对照组同法给等容积生理盐水，阳性对照组给结肠炎丸。观察7天内小鼠死亡情况，计算本发明药物对鼠伤寒沙门氏菌50220株感染小鼠的ED₅₀及95％可信限。

试验结果见表5。

           表5  本发明药物对鼠伤寒沙门氏菌50220株感染小鼠的保护作用

组别	剂量(g生药/kg)	对数剂量	动物数(只)	死亡数(只)	存活率(％)
						空白对照组			10	0	100
感染对照组			10	10	0
						阳性对照组	2		10	3	70
本发明药物组	2.222	0.3467	10	0	100
						本发明药物组	1.111	0.0457	10	6	40
本发明药物组	0.0457	-0.2557	10	7	30
						本发明药物组	0.2775	-0.5567	10	9	10
本发明药物组	0.1388	-0.8576	10	10	0

结果表明，本发明药物对鼠伤寒沙门氏菌50220株感染小鼠的ED₅₀为0.9024g生药/kg，95％可信限为0.6470～1.2586g生药/kg。

三、本发明药物的抗炎试验

小鼠50只，雌性，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给等容积蒸馏水；第二组为阳性对照组，给丁桂儿脐贴4.48g成药/kg；第三、四、五组为本发明药物组，分别给本发明药物3.1g生药/kg、6.2g生药/kg、12.4g生药/kg。小鼠腹部正中涂抹给药，每天1次，0.1mL/10g，连续3天。末次给药60分钟后，每鼠静脉注射0.5％伊文思蓝0.2mL，然后腹腔注射0.6％醋酸0.4mL/只，20分钟后颈椎脱臼处死，剪开腹腔，用6mL生理盐水分次冲洗腹腔，收集洗涤液并加生理盐水至10mL，3000转/分钟离心15分钟。取上清夜于590nm比色，由标准曲线计算伊文思蓝含量。

结果见表6。

           表6  本发明药物对小鼠急性腹腔渗出性炎症的影响(x±s)

组别	剂量(g/kg)	动物数(只)	伊文思蓝量(μg)	抑制率(％)
					阴性对照组		10	2.46±0.71
丁桂儿脐贴组	4.48	10	1.26±1.22*	48.78
					本发明药物小剂量组	3.1	10	2.93±2.51	-19.10
本发明药物中剂量组	6.2	10	1.92±0.88	21.95
					本发明药物大剂量组	12.4	10	1.66±0.42**	32.52

与阴性对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

由表6可见，本发明药物可使小鼠腹腔伊文思蓝渗出量减少，与阴性对照组比较，大剂量组有显著性差异(P＜0.01)，提示本发明药物可抑制醋酸刺激的小鼠急性渗出性炎症反应。阳性对照药丁桂儿脐贴也能抑制醋酸刺激的小鼠急性渗出性炎症反应。

四、本发明药物的止泻试验

小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给等容积生理盐水；第二组为阳性对照组，给丁桂儿脐贴4.48g成药/kg；第三、四、五组为本发明药物组，分别给本发明药物3.1g生药/kg、6.2g生药/kg、12.4g生药/kg。小鼠腹部正中涂抹给药，每天1次，0.1mL/10g，连续3天。末次给药60分钟后，各组小鼠灌胃给8％番泻叶粉混悬液0.4mL/10g致泻，计数6小时内小鼠排便次数，结果见表7。

                表7  本发明药物对小鼠腹泻的影响(x±s)表

组别	剂量(g/kg)	动物数(只)	排便次数(次/6h)	抑制率(％)
					阴性对照组		10	10.3±2.5
丁桂儿脐贴组	4.48	10	6.1±4.8*	40.78
					本发明药物小剂量组	3.1	10	8.9±3.7	13.59
本发明药物中剂量组	6.2	10	7.9±2.9	23.30
					本发明药物大剂量组	12.4	10	6.8±4.6*	33.98

与阴性对照组比较，^*P＜0.05。

由表7可见，本发明药物减少番泻叶刺激的小鼠腹泻次数，与阴性对照组比铰，大剂量组有显著性差异(P＜0.05)，提示本发明药物对小鼠有止泻作用。阳性对照药丁桂儿脐贴也能减少小鼠腹泻次数。

五、本发明药物对小肠推进的影响

1、本发明药物对正常动物小肠推进的影响

小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给等容积生理盐水；第二组为阳性对照组，给丁桂儿脐贴4.48g成药/kg；第三、四、五组为本发明药物组，分别给本发明药物3.1g生药/kg、6.2g生药/kg、12.4g生药/kg。小鼠腹部正中涂抹给药，0.1mL/10g，每天1次，连续2天。第二次给药后禁食不禁水24小时，然后第三次给药，给药60分钟后，灌胃给50％碳素墨水，30分钟后颈椎脱臼处死小鼠，打开腹腔，剪取幽门至回盲部消化管，轻轻将小肠拉成直线，测量小肠长度和墨汁前沿至幽门的距离，按下式计算墨汁推进率。

试验结果见表8。

              表8  本发明药物对正常小鼠小肠推进的影响(x±s)表

组别	剂量(g/kg)	动物数(只)	墨汁推进率(％)
				阴性对照组		10	69.16±13.34
丁桂儿脐贴	4.48	10	87.32±11.80**
				本发明药物小剂量	3.1	10	76.87±13.53
本发明药物中剂	6.2	10	81.76±9.98*
				本发明药物大剂量	12.4	10	82.38±7.76*

与阴性对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

由表8可见，本发明药物加快正常小鼠小肠推进运动，与阴性对照组比较，中、大剂量组有显著性差异(p＜0.05)，提示本发明药物促进正常小鼠小肠推进运动。阳性对照药丁桂儿脐贴也加快正常小鼠小肠推进运动。

2、对肠功能亢进动物小肠推进的影响

小鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，每组10只。第一组为正常对照组，给等容积生理盐水；第二组为模型对照组，给等容积生理盐水；第三组为阳性对照组，给丁桂儿脐贴4.48g成药/kg；第四、五、六组为本发明药物组，分别给本发明药物3.1g生药/kg、6.2g生药/kg、12.4g生药/kg。小鼠腹部正中涂抹给药，0.1mL/10g，每天1次，连续2天。第二次给药后禁食不禁水24小时，然后第三次给药。给药60分钟后，除正常对照组外其余各组用新斯的明制造小肠推进功能亢进模型，肌肉注射新斯的明0.5mg/kg。15分钟后灌胃给50％碳素墨水，再过15分钟后颈椎脱臼处死小鼠，打开腹腔，剪取幽门至回盲部消化管，轻轻将小肠拉成直线，测量小肠长度和墨汁前沿至幽门的距离，按下式计算墨汁推进率。

试验结果见表9。

         表9  本发明药物对肠功能亢进小鼠小肠推进的影响(x±s)表

组别	剂量(g/kg)	动物数(只)	墨汁推进率(％)
				正常对照组		10	67.64±13.63**
模型对照组		10	87.06±10.88
				丁桂儿脐贴	4.48	10	48.65±12.53**
本发明药物小剂量	3.1	10	51.29±1.37**
				本发明药物中剂量	6.2	10	51.44±12.06**
本发明药物大剂量	12.4	10	45.99±9.00**

与模型对照组比较，^*P＜0.05，^*P＜0.01。

由表9可见，肌肉注射新斯的明后，小鼠小肠推进运动加快，与正常对照组比较有显著性差异(p＜0.01)。本发明药物明显减慢肠功能亢进小鼠小肠推进运动，与模型对照组比较，各剂量组均有显著性差异(p＜0.01)，提示本发明药物抑制肠功能亢进小鼠的小肠推进运动。阳性对照药丁桂儿脐贴也明显抑制肠功能亢进小鼠小肠推进运动。

六、对大鼠胃酸分泌的影响

大鼠40只，雌雄各半，随机分为5组，每组8只。第一组为阴性对照组，给等容积生理盐水；第二组为阳性对照组，给丁桂儿脐贴3.14g成药/kg；第三、四、五组为本发明药物组，分别给本发明药物2.18g生药/kg、4.36g生药/kg、8.72g生药/kg。大鼠腹部正中涂抹给药，0.1mL/10g，每天1次，连续5天。末次给药后禁食不禁水24小时，然后在乙醚麻醉下手术，结扎幽门，十二指肠再给药一次，然后缝合腹壁，2小时后打开腹腔，结扎贲门，取出全胃，沿胃大弯剪开胃，收集胃内容物，记录胃液分泌量，2000转/分钟离心15分钟，按文献方法测定总酸度、总酸排出量，结果见表10。

  ?          表10  本发明药物对大鼠胃酸分泌的影响(x±s)表

组别	剂量(g/kg)	动物数(只)	胃液量(mL)	总酸度(mmoL/L)	总酸排出量(mmoL/L.h)
						阴性对照组		8	1.67±0.53	0.62±0.11	0.51±0.18
丁桂儿脐贴组	3.14	8	2.12±1.13	0.96±0.35**	1.17±0.97*
						本发明药物小剂量组	2.18	8	1.68±0.95	0.98±0.16**	0.86±0.43*
本发明药物中剂量组	4.36	8	1.83±0.74	0.84±0.18**	0.73±0.26*
						本发明药物大剂量组	8.72	8	2.36±1.04	0.97±0.34**	1.21±0.79*

与阴性对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

由表10可见，本发明药物增加大鼠胃总酸度和总酸排出量，与阴性对照组比较，各剂量组均有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)；增加大鼠胃液分泌量，但与阴性对照组比较统计学无显著性意义(p＞0.05)。提示本发明药物能促进大鼠胃酸分泌。阳性对照药丁桂儿脐贴也能促进大鼠胃酸分泌。

七、镇痛试验

小鼠50只，雌性，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给等容积蒸馏水；第二组为阳性对照组，给丁桂儿脐贴4.48g成药/kg；第三、四、五组为本发明药物组，分别给本发明药物3.1g生药/kg、6.2g生药/kg、12.4g生药/kg。小鼠腹部正中涂抹给药，每天1次，0.1mL/10g，连续3天。末次给药60分钟后，腹腔注射0.6％醋酸0.1mL/10g，观察记录15分钟内小鼠扭体反应(小鼠腹部贴地、内凹、伸展后肢、扭曲)次数，结果见表11。

                 表11  本发明药物对对小鼠扭体反应的影响(x±s)

组别	剂量(g/kg)	动物数(只)	扭体反应(次/15min)
				阴性对照组		10	12.0±5.9
丁桂儿脐贴组	4.48	10	5.2±4.9*
				本发明药物小剂量组	3.1	10	6.8±4.3
本发明药物中剂量组	6.2	10	5.8±6.1*
				本发明药物大剂量组	12.4	10	4.8±4.4**

与阴性对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

由表11可见，本发明药物抑制醋酸刺激的小鼠扭体反应，与阴性对照组比较，中、大剂量组有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)，提示本发明药物对醋酸刺激的疼痛有镇痛作用。阳性对照药丁桂儿脐贴也能抑制醋酸刺激的小鼠扭体反应。

试验结论

本发明药物体外对肠道感染常见细菌大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、肠产毒型大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、变形杆菌、粪链球菌、白色假丝酵母菌有较明显的抑制和灭活作用，改变pH和细菌接种量不影响本发明药物对大肠埃希氏菌和痢疾志贺氏菌的抗菌作用；灌胃给药，体内对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠有保护作用。本发明药物腹部涂抹给药，抑制醋酸刺激的小鼠急性渗出性炎症反应和扭体反应，减少番泻叶刺激的小鼠腹泻次数，促进正常小鼠小肠推进运动，减慢肠功能亢进小鼠小肠推进运动。本发明药物腹部涂抹给药，增加大鼠胃液分泌量、胃总酸度和总酸排出量。结果说明，本发明药物具有抗菌、抗炎、止泻、镇痛作用，促进肠功能正常小鼠的小肠推进运动，减慢肠功能亢进小鼠的小肠推进运动，还可促进胃液和胃酸分泌。

本发明药物的功能：清热燥湿，行气止痛，和中止泻。

本发明药物主治：主治小儿腹泻。

本发明药物的规格：每贴重2g，每克含生药2.22g。

本发明药物的用法用量：每次贴1贴，贴于神阙穴位，每日贴1次，2个月至1周岁的婴幼儿每天贴3～6小时。

注意事项：皮肤破损者禁止使用。

本发明的有效期：两年。

Claims (3)

1、一种治疗小儿腹泻的外用软膏剂，其特征在于它是以下述重量份配比的中药原料按常规制剂方法制成的外用软膏剂：

苦参                                         20～60份

木香                                         2～10份

冰片                                         0.1～1份

上述外用软膏剂中还含有明胶和甘油辅料，明胶用量为原料药的2.25％，其余为甘油。

2、按照权利要求1所述的一种治疗小儿腹泻的外用软膏剂，其特征在于其中各中药原料的重量份配比是：

苦参                                         30～50份

木香                                         3～8份

冰片                                         0.1～0.6份

3、按照权利要求1所述的一种治疗小儿腹泻的外用软膏剂，其特征在于其中各中药原料的重量份配比是：

苦参                                         40份

木香                                         6份

冰片                                         0.4份