CN1248908A - 抗皮脂和抗氧化剂的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明描述了古古脂(穆库尔没药或美丽桐没药的亲油乙酸乙酯提取物)或古古脂的醇馏份或古古脂的低分子量馏份作为抗皮脂和/或抗氧化剂活性成分的美容皮肤护理组合物和方法。从穆库尔没药得到的古古脂、它的醇和低分子量馏份能够提供对皮肤的双重益处;控制或防止皮脂分泌(油性皮肤状态)和保护皮肤免受自由基的伤害。
Description
发明领域
本发明涉及用于控制或防止皮脂细胞的皮脂分泌、控制或防止油性皮肤状态和保护皮肤免受自由基活性的伤害的方法和组合物。
发明背景
皮脂是由皮脂细胞(皮肤中的皮脂腺的细胞)制造的皮肤油脂，然后分泌到皮肤表面。在皮肤表面的过量皮脂导致公知为“油性皮肤”的状态。油性皮肤具有发亮、不理想的外表和讨厌的触觉。有很多现存的方法和组合物都尝试过控制过量的皮脂分泌，但没有一种可以完全提供满意的效果。
皮肤中自由基的形成似乎并不与皮脂分泌有关。低水平的自由基在皮肤中作为自然代谢途径的一部分形成。自由基水平的增高是受紫外照射和其它环境的氧化剂的影响，例如污染物和香烟。自由基浓度的增高导致皮肤细胞中的油脂过氧化和细胞被伤害，因此导致皮肤过早老化和稳固性与弹性的损失、皱纹、退色、老人斑和干燥。抗氧化剂，如维生素E(α-生育酚)可降低在皮肤中自由基的水平。
从制造商和购买者的角度来看，可提供多于一种优点的美容活性成分是十分理想的。
Guggal是从穆库尔(mukul)没药或美丽桐(wightii)没药植物的树胶/树脂得到的。Guggal包含萜烯、固醇、酯和高级醇的复杂混合物。树脂的乙酸乙酯提取物是一种油性树脂物质，公知为“古古脂(Gugulipid)”或“guggal lipid”。在治疗肥胖和高胆固醇水平的方法中已经将古古脂作为药物使用。古古脂的药物活性是由两种公知的酮的类固醇(古古甾酮(guggulsterones))提供。
Bombardelli等人(美国专利5,273,747)公开了古古脂和其富含古古甾酮的馏份的抗炎活性、以及它们在治疗良性前列腺肥大和痤疮的方法中的用途。在这方面，必须注意到虽然皮脂产生的增加可能是导致痤疮形成的许多因素之一，但是抗痤疮剂不需要有抗皮脂活性。例如，过氧化苯甲酰和水杨酸都公知确认为良好的抗痤疮剂，但它们并没有降低皮脂的产生。参见Cunliffe等人的“TopicalBenzoyl Peroxide Increases The Sebum Excretion Rate In PatientsWith Acne”，British Journal of Dermatology(1983)109，577-579；William J.Cunliffe，“Acne”，p.256，Martin DunitzLtd.(1989)。也可参见下文的对比实施例3。此外，Bombardelli描述的富含古古甾酮的馏份是用乙酸乙酯得到的，而且没有用分子量分离化合物。相反，本发明优选采用了醇馏份和/或低分子量馏份。
Bissett等人(美国专利4,847,071和4,847069)和Piazza等人(美国专利5,521,223)公开了含作为天然抗炎药的guggal的光保护和抗皱纹组合物。虽然有一些化合物可以通过抗氧化剂途径作为抗炎药，但并不是所有的抗炎机理都是抗氧化剂促成的，所有的抗氧化剂也不都是抗炎的。另一方面，抗炎药和抗氧化剂的作用不一定是因对方而起。
上述文献没有指出对含抗皮脂和抗氧化剂活性的试剂的需要。上述文献既没有公开guggal或古古脂或其馏份的抗皮脂活性也没有公开其抗氧化剂活性。此外，就古古脂的馏份而言，上述文献只公开了富含古古甾酮(乙酸乙酯)馏份的制备方法和用途，而没有公开醇馏份或低分子量馏份的制备方法、用途和活性。
发明概述
本发明第一方面包括控制或防止尤其在面部的油性皮肤状态的美容方法，该方法通过在皮肤上涂上一种含有在美容可接受载体中的古古脂和/或其醇馏份和/或其低分子量馏份的组合物。
本发明的第二方面包括减少、防止或控制皮脂细胞的皮脂分泌的方法，该方法向皮肤使用了含在美容可接受载体中的古古脂和/或其醇馏份和/或其低分子量馏份。
本发明另外一方面是保护皮肤免受自由基活性伤害的方法(即释放皮肤中的氧化应力)，该方法向皮肤使用了含在美容可接受载体中的古古脂和/或其醇馏份和/或其低分子量馏份。
本发明还有一个方面是同时控制或防止皮脂分泌而又保护皮肤免受自由基活性伤害的美容方法，该方法使用了单一的活性试剂：古古脂和/或其醇馏份和/或其低分子量馏份。
本发明进一步提供古古脂和/或醇馏份和/或其低分子量馏份的用途，并且也提供了含这些试剂的美容组合物在控制或防止油性皮肤状态，在减少、防止或控制皮肤中皮脂细胞的皮脂分泌和/或保护皮肤免受自由基活性伤害(即释放皮肤中的氧化应力)中的用途。
本发明进一步提供古古脂和/或醇馏份和/或其低分子量馏份的用途，并且也提供了含这些试剂的美容组合物在减低或防止油性皮肤的同时而又保护皮肤免受自由基活性伤害中的用途。
本发明的另外一个方面是制备古古脂的醇馏份的方法。
本发明还有一个方面是护理皮肤的美容组合物，该组合物含在美容可接受载体中的古古脂的醇馏份和/或其低分子量馏份。
本发明的方法和组合物提供了皮脂细胞的皮脂分泌的控制、改良的油脂控制和改良的皮肤感觉，防止了皮肤发光和发粘，同时也保护皮肤免受自由基活性的伤害，导致减少了皱纹和老化皮肤的出现、改善了皮肤的颜色、改善了光老化皮肤的外表、改善了皮肤的光彩、澄澈度和表面光洁度并且皮肤整体上表现出健康和年青的外表。发明详述
本申请中使用的术语“皮肤”包括脸、颈、胸、背和头皮的皮肤。古古脂和非古古甾酮馏份：
本申请中使用的术语“古古脂”代表从穆库尔没药或美丽桐没药树木得到的树胶/树脂guggal的乙酸乙酯提取物。本申请中使用的术语“醇馏份”代表古古脂的高极性、无水馏份。该醇馏份优选是古古脂的非石油醚馏份。
本发明控制皮脂分泌、控制油性皮肤和/或保护皮肤免受自由基伤害的方法采用古古脂和/或其醇馏份和/或其低分子量馏份。已经发现了作为本发明一部分的古古脂和其醇和/或低分子量馏份具有提供用于皮肤护理的双重优点的稀有品质，即抗皮脂和抗氧化剂活性。已经发现从穆库尔没药得到的guggal的含水提取物只有少量或没有用乙酸乙酯从穆库尔没药提取得到的guggal的抗皮脂和/或抗氧化剂活性。也已经发现古古脂的抗皮脂和/或抗氧化剂活性集中在古古脂的醇馏份或低分子量馏份中，而不集中在如Bombardelli描述的富含古古甾酮的乙酸乙酯馏份中。
此外，已经发现古古脂的低分子量馏份比较容易制备，这是由于与比任何一种古古脂的馏份(醇馏份或高分子量馏份)比较，它具有较低的粘度和较好的颜色。得到的低分子量馏份的收率也可以比醇馏份高。
古古脂可以从下面的供应商购得：
穆库尔没药提取物：
Indena(80 E Route 4，Paramus，NJ，07652)
Pt.Cosmetique Java，Bogar(Campo R&D，Singapore)(也出售美丽桐没药提取物)。
本发明的方法和组合物可以采用0.001-10wt.％，优选0.001-3wt.％和最优选0.01-2wt.％的古古脂、或其醇馏份和/或其低分子量馏份。
使用醇馏份时，可以优选使用比古古脂低的含量以提供与可以用更高含量的古古脂本身所得到的相同活性。
可以将古古脂，或优选古古脂的非石油醚馏份，通过分离得到醇馏份(例如，用高极性无水溶剂抽取或洗提)。适合的典型溶剂是醇，优选低级链的(即少于6个碳原子)醇，即甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、2-丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇和1-己醇。优选干燥所得的馏份，例如用蒸发或冷冻干燥以浓缩活性含量。通常，用于本发明方法或组合物的醇馏份含少于99％，优选少于25％，最优选少于5％重量的醇馏份。
醇馏份含少量或不含Bombardelli描述的顺-古古甾酮(也称为古古甾酮E)。作为本发明的一部分，已经意想不到地发现了顺-古古甾酮既没提供抗氧化剂活性也没提供抗皮脂活性。因而，古古脂的抗皮脂和/或抗氧化剂的活性是由于顺-古古甾酮以外的活性化合物造成的，并发现这些活性集中在古古脂的醇馏份中。本发明的醇馏份含少于0.1％馏份重量的顺-古古甾酮并优选含少于0.05％的顺-古古甾酮。可以用HPLC、质谱或TLC检查馏份中的古古甾酮含量。
在极性溶液中分散或溶解古古脂以得到低分子量馏份。适合的典型溶剂是醇，优选低级链的(即少于6个碳原子)醇，即甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、2-丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇和1-己醇。然后用超过滤分离该馏份以得到1,000Da或更少，优选800Da或更少和最优选500Da或更少的馏份。然后可以在氮气气氛下通过，例如温热/蒸汽浴将溶剂蒸发。
本发明的一个优选实施方案中采用了古古脂的低分子量馏份以得到更方便的制剂(改良的颜色和更低的粘度)。得到的低分子量馏份的收率也比醇馏份高。美容可接受载体：
本发明的组合物也包括在组合物中作为古古脂和/或其醇馏份和/或低分子量馏份的稀释剂、分散剂或载体的美容可接受载体，从而当组合物涂在皮肤上时，使组合物易于分布。
载体可以含水、无水或是乳液。组合物优选含水或是乳液，尤其是油包水乳液或水包油乳液。水存在时的含量可以在5-99％，优选20-70％，最优选35-60％的重量范围。
除了水，比较易挥发的溶剂也可以在本发明的组合物中作为载体使用。最优选使用一元C1-C3烷醇。这些溶剂包括乙基醇、甲基醇和异丙基醇。一元烷醇的含量可以在1-70％、优选10-50％、最优选15-40％重量的范围。这些含量没有包括古古脂的醇馏份的醇含量。
软化剂物质也可以作为美容可接受载体。它们可以是硅酮油和合成酯的形式。软化剂的含量可以在0.1-50％，优选在1-20％重量的范围。
硅酮油可以被分为挥发性和非挥发性种类。在本申请中使用的术语“挥发性”是指在环境温度下具有可测量的蒸气压。优选挥发性的硅酮油选自含3-9，优选4-5个硅原子的环状或线性聚二甲基硅氧烷。线性挥发性硅酮物质在25℃下的粘度通常少于5厘沲，而环状物质的粘度一般少于10厘沲。可用作软化剂物质的非挥发性硅酮油包括聚烷基硅氧烷、聚烷基芳基硅氧烷和聚醚硅氧烷共聚物。可用于本申请基本上非挥发性聚烷基硅氧烷包括，例如在25℃下粘度为5-100,000厘沲的聚二甲基硅氧烷。可用于本发明组合物中的优选的非挥发性软化剂是在25℃下粘度为10-400厘沲的聚二甲基硅氧烷。
酯软化剂为：(1)10-20个碳原子的脂肪酸的烯基或烷基酯。其例子包括新戊酸异廿烷基酯、异壬酸异壬酯、十四酸油酯、硬脂酸油酯和油酸油酯。
(2)醚-酯，如乙氧基化脂肪醇的脂肪酸酯。
(3)多元醇酯。乙二醇单和双脂肪酸酯、二乙二醇单和双脂肪酸酯、聚乙二醇(200-6000)单和双脂肪酸酯、单和双脂肪酸丙二醇酯、单油酸聚丙二醇2000酯、单硬酯酸聚丙二醇2000酯、乙氧基化一硬酯酸丙二醇酯、单和双脂肪酸甘油酯、聚脂肪聚甘油酯、乙氧基化单硬酯酸甘油酯、1，3-丁二醇单硬酯酸酯、1， 3-丁二醇二硬酯酸酯、聚氧乙烯多元醇脂肪酸酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯和聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯都是令人满意的多元醇酯。
(4)蜡酯，如蜂蜡、鲸油、十四酸十四酯、硬脂酸硬脂酰酯和山嵛酸二十酯。
(5)固醇酯，其例子有胆固醇脂肪酸酯。
具有10-30个碳原子的脂肪酸也可以用作本发明的美容可接受载体。此类载体的例子为壬酸、月桂酸、蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸、羟基硬脂酸、油酸、亚油酸、蓖麻油酸、二十酸、山嵛酸和芥酸。
也可以在本发明的组合物中采用多元醇类型的湿润剂作为美容可接受载体或美容可接受载体的一部分。湿润剂有助于增加软化剂的效力、减少结垢、刺激聚集的结垢的去除和改进皮肤感觉。典型的多元醇包括甘油、聚烷二醇和优选亚烷基多元醇及它们的衍生物，包括丙二醇、二丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇及其衍生物，山梨糖醇、羟基丙基山梨糖醇、己二醇、1，3-丁二醇、1，2，6-己三醇、乙氧基化甘油、丙氧基化甘油及其混合物。湿润剂优选是丙二醇以获得最好结果。湿润剂的含量可以是组合物重量的0.5-30％，优选1-15％。
也可以在本发明的组合物中采用增稠剂作为美容可接受载体的一部分。典型的增稠剂包括交联的丙烯酸酯(例如Carbopol 982)、疏水改性的丙烯酸酯(例如Carbopol 1382)、含纤维的衍生物和天然树胶。有用的含纤维衍生物是羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、乙基纤维素和羟甲基纤维素。适用于本发明的天然树胶包括瓜尔胶、黄原胶、菌核、角叉藻聚糖、果胶和这些树胶的组合。增稠剂的含量范围可以在0.0001-5％，通常在0.001-1％，最优选在0.01-0.5％重量。
水、溶剂、硅酮、酯、脂肪酸、湿润剂和/或增稠剂的总含量占美容可接受载体的1-99.9％，优选80-99％重量。对皮肤有益的任选物质和美容助剂：
油或油性物质可以与乳剂一起存在以提供油包水或水包油的乳剂(主要取决于所用乳化剂的平均亲水亲油平衡值(HLB))。
表面活性剂也可以在本发明的美容组合物中存在。表面活性剂的总浓度为组合物重量的0.1-40％，优选1-20％，最优选1-5％。表面活性剂可以选自阴离子、非离子、阳离子和两性活性剂。特别优选的非离子表面活性剂是具有用每摩尔疏水物2-100摩尔环氧乙烷或环氧丙烷浓缩的C10-C20脂肪醇或酸疏水物的非离子表面活性剂；用2-20摩尔烯化氧浓缩的C2-C10烷基苯酚；乙二醇的单和双脂肪酸酯；单甘油脂肪酸酯；山梨糖醇酐，单和双C8-C20脂肪酸；嵌段共聚物(环氧乙烷/环氧丙烷)；和聚氧乙烯山梨糖醇酐以及其组合。烷基聚苷和糖化物脂肪酰胺(例如甲基葡糖酸酰胺(methyl gluconamides))也是适合的非离子表面活性剂。优选的阴离子表面活性剂包括肥皂、烷基醚硫酸盐和磺酸盐、烷基硫酸盐和磺酸盐、烷基苯磺酸盐、烷基和二烷基磺基丁二酸盐(sulfosuccinates)、C8-C20 acylisethionates、酰基谷氨酸酯、C8-C20烷基醚磷酸盐及其组合。
各种类型的其它活性成分也可以在本发明的美容组合物中存在。活性成分被限定为对皮肤有益的试剂，而不是那些只改良组合物物理特征的软化剂和成分。尽管没限制在此种类之中，一般的例子包括抗痤疮剂、附加的抗皮脂剂和防晒剂。
抗痤疮剂包括，但不限于：过氧化苯甲酰(可以含有高至20wt.％)、类视色素(一般为0.025％-0.05％)、水杨酸(一般多至2wt.％)和硫(多至8wt.％)。
也可以包括其它抗皮脂活性成分，最优选含量高至10wt.％的水杨酸十三酯(或zinc pyriphione)。
可以包括视黄醇或其酯以提供多种对皮肤的好处。适用的视黄醇酯包括视黄醇棕榈酸酯、视黄醇乙酸酯和视黄醇亚油酸酯。特别优选视黄醇亚油酸酯以提供另外的抗皮脂活性和抗老化的优点。视黄醇和/或视黄醇酯的含量为组合物重量的0.001-3wt.％，优选0.001-0.5wt.％。
特别优选的活性成分(古古脂和/或其醇馏份和/或其低分子量馏份)组合是与一种任选成分组合，该任选成分选自水杨酸十三烷基酯、亚油酸视黄醇酯及其混合物，以提供最高的抗皮脂活性、抗老化和/或最健康外表的皮肤。
防晒剂包括一般用于阻挡紫外光的物质。化合物的例子是PABA、肉桂酸酯和水杨酸酯的衍生物。例如，可以使用甲氧基肉桂酸辛酯和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮(也称为氧苯酮)。甲氧基肉桂酸辛酯和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的市售商标分别是Parsol MCX和Benzophenone-3。在组合物中使用的防晒剂的实际含量可以根据对太阳紫外光的所需保护程度而变化。
可以在本发明的组合物中包括防腐剂以防止在组合物中潜在的有害微生物的生长。适合的防腐剂包括对羟基苯甲酸的烷基酯、海因衍生物、丙酸盐和多种季铵化合物。本发明特别优选的防腐剂是对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯氧乙醇和苯甲醇。防腐剂的使用量通常为组合物重量的0.1％-2％。
可以向本发明的美容组合物中加入粉剂。这些粉剂包括白垩、滑石、高岭土、淀粉、绿土、化学改性镁铝硅酸盐、有机改性的蒙脱土、水化合的硅酸铝、发烟硅石、铝淀粉丁二酸辛烯酯及其混合物。
也可以向本发明的美容组合物中加入少量的其它助剂。这些成分可以包括着色剂、遮光剂和香料。这些其它助剂的少量成分的含量可以是组合物重量的0.001％-20％。组合物的用途：
本发明的组合物主要是作为用于向人类皮肤局部施用的产品，尤其作为控制或防止油性皮肤的试剂，用于改善皮肤的光彩、澄澈度和表面光洁度，并且用于防止或减少外表起皱、干燥、老化或光老化的皮肤。
在使用时，用适合的容器或涂抹器向皮肤表面涂覆一定量的组合物，如1-100ml，然后如果需要，用手或手指或适合的装置将该组合物涂遍和/或摩擦入皮肤。产物形式和包装：
本发明的局部皮肤组合物可以作为任何形式，例如制备成护肤露、流体霜或霜。可以将组合物包装在适合的容器中以符合其粘度和适合消费者使用。例如，可以将护肤露或霜包装在瓶子或走珠涂抹器或推进器驱动的气溶胶装置或装配了适用于手指操作的泵的容器中。当组合物是霜时，可以将它保存在不变形的瓶子或挤压容器中，如管子或有盖的罐子。因此，本发明也提供了含本申请限定的美容可接受组合物的密封容器。
也可以将组合物包装在如美国专利5,063,057中描述的囊中，该专利纳入本申请中作为参考。
以下的具体实施例进一步说明了本发明，但本发明不受此限制。
除非另外指明，在本申请和所附的权利要求书中引用的所有份数、百分比和比例都以组合物的重量计算。
实施例1
该实施例说明了将古古脂分馏为极性增加的馏份的程序(程序A)和制备古古脂的低分子量馏份的程序(程序B)。程序A原料：古古脂(批号42941，Lipo Chemicals Inc.Paterson NJ)中型压力柱(5cm内直径X 62cm长)二氧化硅(凝胶，Merck)，Aldrich，Cat no.22，719-6，Grade9385，230，400，mesh 60A。薄层色谱板，LHP-kk 20×10cc批号004966，Cat#4805-711Whatman。己烷，HPLC等级(Fisher)乙醇乙酯，HPLC等级(Fisher)甲醇，HPLC等级(Fisher)三氯甲烷，HPLC等级(Fisher)磷酸(Fisher)硫酸铜CuSO4(Fisher)石油醚(Fisher)24个烧杯(400ml)闪烁管毛细管(5μl)2个量筒(2000ml)1个展开皿1个烘箱(Napco型420)1个热/搅拌盘2个圆底烧瓶(500ml)旋转蒸发仪水(Milli-Q水)方法：
1.称5.0672g重量的古古脂加入500ml圆底烧瓶。(A)在100ml的乙酸乙酯中溶解古古脂(以制成浆液)。(B)用旋转蒸发仪将乙酸乙酯蒸出。(C)向烧瓶加入350ml的石油醚。(D)让混合物搅拌过夜。
2.用二氧化硅(Merck)将中型压力柱充填至75％，用700ml的已烷/乙酸乙酯(10∶1比例)冲洗以准备该柱。
3.从搅拌盘上移走烧瓶，并将石油醚倒入500ml的圆底烧瓶中。(A)用旋转蒸发仪将石油醚蒸出直至剩下约3ml。(B)将余下的3ml定量输入闪烁管，已经在之前记录了该闪烁管的毛重。(C)在通风橱中将样品蒸干。(D)记录最终的毛量，并标明(石油醚非极性馏份#1)。
4.将从石油醚萃取液得到的残余物溶解在50ml的乙酸乙酯中，然后用玻璃巴斯德吸移管转移到中型压力柱中。
5.用800ml 7∶1比例的己烷/乙酸乙酯从柱中洗提出馏份2。
6.用5∶1比例的己烷/乙酸乙酯洗提出馏份3-5。各馏份都约为200ml。
7.用1500ml 2∶1比例的己烷/乙酸乙酯洗提出馏份6-12。
8.用2000ml 1∶1比例的己烷/乙酸乙酯从柱中洗提出馏份13-19。
9.用3000ml 1∶2比例的己烷/乙酸乙酯洗提出馏份20-29。
10.用2000ml 1∶3比例的己烷/乙酸乙酯洗提出馏份30-37。
11.用100％乙酸乙酯洗提出馏份38-41。
12.用100％甲醇(1000ml)洗提出馏份42。
13.用100％甲醇(1000ml)洗提出馏份43和44。
14.用蒸汽浴将所有的馏份蒸发剩下约10ml，然后输入闪烁管。
15.用薄层色谱法(TLC)分析馏份1-44。(A)用9∶1比例的三氯甲烷/甲醇展开薄层色谱板。(B)用8％磷酸中的10％硫酸铜将薄层色谱板染色。
16.由于馏份26-39的薄层色谱板的结果差，所以将它们浓缩和重新分析。
17.将薄层色谱图形类似的馏份合并在一起。合并了以下的馏份。
馏份9、10和11
馏份13和14
馏份16、17和18
馏份19和20
馏份22、23和24
馏份40、41和42(但由于馏份40和41的试样量非常少
所以此组馏份含99％的馏份42)
18.重新用TLC分析馏份26-39和合并的馏份。
19.将薄层色谱图形类似的馏份结合：
馏份26和27
馏份30、31和32
馏份34和35
20.将余下的馏份在通风橱中蒸干。得到总共18个样品馏份。
21.放弃在TLC板上没有任何点的馏份。结果：
用5.06g的古古脂(350ml石油醚)作为起始原料，得到作为石油醚可溶解馏份的馏份1(1.7469g)。将在石油醚中不溶解的馏份溶解在50ml乙酸乙酯中，然后输入二氧化硅柱(5cm内直径X 62cm长)，并用极性逐渐增加的溶剂梯度洗提。这样再产生了43个馏份。根据相似的TLC图形，将数个馏份合并。因为馏份26-29含非常少的物质，必须先将它们浓缩以得到TLC结果。根据TLC板上的多个谱带，大部分馏份明显含几种化合物。从TLC板上的强谱带可明显看见一些馏份的浓度比其它馏份的浓度高。得到18个馏份。
只有馏份43和44是只含甲醇提取物的馏份。虽然馏份42是用甲醇洗提的，但该馏份与馏份40和41合并(用乙酸乙酯洗提，但其份量十分少)。事实上，馏份42含约99％的馏份42和约1％的馏份40和41。因为馏份44是醇馏份的最后部分，所以它基本上含有比馏份42和43少的活性成分。程序B
在制备古古脂的低分子量馏份时，将全部古古脂通过50,000MW的滤纸。收集滤液并将该滤液通过10,000MW的滤纸。然后顺序用5000MW和500MW的滤纸过滤该滤液。用高性能薄层色谱将每一个馏份显色进行分析。换句话说，在500MW滤液中存在的化合物可在其它馏份中出现。然而，在50,000MW滤液中存在的组份没在较低MW的滤液中出现。相信是由于较大、有可能聚合的组份与滤液之间有效的相互作用所以保留了小MW的组份。
在第二个实验中，只用了500MW的滤纸过滤全部古古脂。下文更详细地描述了第二个实验的内容。以下的实施例使用了从第二个实验中得到的低分子量馏份。原料
标准化至10％总古古甾酮的古古脂(批号42941-38285)购自Indena(Seattle，WA)，HPLC等级的甲醇购自Fischer Scientific(Fair Lawn，NJ)。超过滤设备是50ml Amicon 8050超过滤容器，薄膜为YC05 500 Da断流滤纸(cutoff filter)(Cat.No.13022)，两者都是购自Millipore(Bedford，MA)。向过滤容器提供压力的气罐为T(高)尺码氮气罐，该气罐装备了Fischer Scientific FS-700氮气压力计。压力计总是预设至供应35psi的最高压力，然后按需要增加。过滤设备本身在高于75psi压力下不可以安全操作。
应该注意的是，500Da断流滤纸可以有潜在误差或+300Da的误差。因此，所用的滤纸可能会使大至800Da的分子通过。滤纸的制备：
将YC05滤纸在含1.0 L Milli-Q水的1.0 L烧杯中浮动30分钟(发光面向下，该面最终会向着样品)。然后将滤纸放在过滤设备的滤纸架中(发光面向上)，并放置好密封橡胶“O”形环。将过滤设备的溶剂保留槽放置在滤纸架的上方，然后用手将锁板锁紧。
在过滤古古脂样品之前用25-30ml的HPLC等级的甲醇冲洗薄膜。用带有刻度的50ml移液管加入醇，并将磁性搅拌部件放置在溶剂保留区。然后固定过滤设备的上部以允许搅拌部件的正常活动，并且将整个设备放在金属座架中。然后将整个装置放在磁性搅拌盘上，并连上氮气罐的管线。
打开通向氮气罐的主阀(预设至供应35psi)并将磁性搅拌盘设定至4(调节刻度为1[慢]至6[快])。当甲醇开始流过薄膜和流出流出物管线时，将压力缓慢增至55psi的最高值，以达到3-4mLs/min的最终流速。由于不建议将薄膜完全干燥，所以在滤纸薄膜上剩下1-2ml的溶剂时终止甲醇冲洗。这是通过在溶剂已经减少至所需量时，将与罐连接的主阀关闭而完成的，然后用泄气阀释放过滤容器的压力。古古脂的过滤：
将古古脂提取物用特定的HPLC等级的甲醇溶解至古古脂的最终浓度为6.5％(w/v)。10-15分钟后，将古古脂在溶剂中溶解，以产生清澈、中褐色的溶液(与冻茶相似的颜色)。经过静止，观察到细分的滑石状白色沉淀物在容器的底部形成了一层薄涂层。溶液经过缓和地打旋后，沉淀物就使溶液变得稍微不透明，但如果使溶液不搅拌静止数分钟，该溶液会重新变得清澈。
使用与制备滤纸相同的方法过滤古古脂。在移除样品期间激烈搅拌溶液以移除溶液具代表性的部分和沉淀物。用带有刻度的移液管将总容量为50ml的溶液输送进溶剂保留槽中，并用上述的方法重新组装设备。用于过滤古古脂的最高压力不超过55psi。一旦当样品已经被减少至1-2ml时，将系统放空，并向溶剂保留槽中加入25ml干净的甲醇。然后将该溶液通过滤纸至同样的量并用15ml的甲醇重复进行。
所有的流出物都是在相同的容器(约90ml)中收集的，并代表低分子量馏份。通过用甲醇大量冲洗滤纸和保留槽来收集保留的物质(仍然在溶剂保留槽中或滤纸上残留的物质)。然后将这些物质收集在一起，代表高分子量馏份物质。
将含上述两种馏份的容器放在装备有Reacti-vap III氮气干燥组件的Pierce Reacti-therm III加热模件上。在2psi恒压的氮气流下，用20分钟慢慢地加热至4-5的最大刻度(刻度范围为1[低]至10[高]。保持这些条件直至样品完全干燥。将容器冷却至室温后，将样品在少量的甲醇中重新溶解并定量转移至预配衡的试管中以测量质量。
在低分子量馏份中回收了84％的古古脂。回收馏份的不同特征：
发现了醇、高分子量和低分子量馏份的物理特征是十分不同的。高分子量馏份与起始古古脂物质更相似：它仍然具有类似黑焦油的颜色并且在室温下是固体。醇馏份为深褐色并且在室温下也是固体。低分子量馏份是金黄/琥珀色的，虽然它十分粘，但它在室温下有一定的流体特征。
实施例2
该实施例报告了对古古脂及其多种馏份的皮脂抑制作用的活体外分析。
活体外皮脂细胞形成脂肪的测试
从男性(60岁)的鼻子中分离出人类皮脂腺并用浸泡组织培养技术培养(Bajor et al，J.Invest Dermatol.102：1994，P.564)。这些皮脂细胞聚集了成熟人类皮脂的胞内油脂小滴的特征。
将收获的和传代的皮脂细胞加入48孔组织培养盘的每一个孔中，并在7.5％CO2的存在下和37℃下培养10天。在实验当天，将生长培养基移除并用磷酸盐缓冲盐水(PBS)清洗皮脂细胞三次。以表1中所示的各种浓度向各孔中加入0.5ml新鲜的PBS，并加入10μl的待测试剂。三个孔用同一样品。对照样品由磷酸盐缓冲盐水、用于增溶亲油化合物的二甲基亚砜(DMSO)和酚红组成，酚红是具有与雌激素相似活性的化合物(酚红降低了皮脂分泌并被用作对照物以证明皮脂细胞测验的完整性)。将培养物在37℃/7.5％CO2下培养30分钟。通过向10ml的50mM乙酸钠缓冲剂中加入100μl的14C标记乙酸(Amersham，钠盐，特定活性为56mCi/mmol)制备放射性的标记液。然后，向每一个含皮脂细胞和待测试剂的孔加入50μl的标记液。将培养物送回培养器保留4小时。之后，用新的PBS冲洗皮脂细胞三次除去未结合的活性成分和放射性标记液。用Beckman闪烁计数仪计算在培养的皮脂细胞中保留的放射性标记液。结果用相对于对照实验(DMSO)的减少率％表示。
为了确定馏份是否含有顺-古古甾酮，向分开的10×10cm的高性能硅胶板的左下角涂上各馏份的样品。首先将样品在己烷∶乙酸乙酯(50∶50)的流动相中展开至9cm，风干，转动90度，然后在三氯甲烷∶甲醇(95∶5)中展开至9cm。将板干燥，并浸入10％硫酸铜/8％磷酸的溶液中，加热至185℃，在185℃下保持10分钟。顺-古古甾酮(Steraloids，Inc.)标准用作为参考。
在表1中总结了上述实验得到的结果。
表1
*对比在p＜0.01下的对照实验(DMSO)，统计结果的显著性(用学生T-试验计算)。1 “？”表示在色谱中移动至相似的区域，但不清楚它是不是顺-古古甾酮(它碳化成不同的颜色)。存在的量非常低。
| 馏份# | 古古甾酮的存在 | 0.005％减少率％(标准误差) | 0.01％减少率％(标准误差) | 0.05％减少率％(标准误差) | 0.10％减少率％(标准误差) |
| 完整的古古脂 | ++ | 37.8*(8.1) | 52.8*(7.2) | 62.6*(6.0) | 66.3*(4.0) |
| 0(石油醚) | ++ | -1.8(13.6) | 47.1*(16.3) | 63.6*(1.4) | 78.2*(0.9) |
| 10 | ++ | - | - | -3.8(3.5) | 19.2*(4.5) |
| 14 | ++ | - | - | 18.1(4.3) | 13.1(8.1) |
| 15 | +++ | - | - | 17.8(5.6) | 20.0*(4.3) |
| 16 | ++++ | - | - | 39.9*(0.1) | 38.6*(2.3) |
| 20 | + | - | - | 27.5*(3.3) | 32.1*(3.0) |
| 21 | ？1 | 23.9*(3.9) | 26.3*(4.3) | 62.6*(5.8) | 64.3*(6.6) |
| 22 | ？ | 31*(4.9) | 46.1*(4.9) | 65.9*(3.8) | - |
| 24 | ？ | 35.5*(3.8) | 43.9*(9.1) | 50.6*(5.2) | 67.5*(1.1) |
| 27 | - | 38.7*(6.6) | 36.0*(11.1) | 63.5*(4.6) | 74.0*(2.3) |
| 28 | - | 38.4* | 59.6* | - | 69.0* |
| (11.4) | (6.0) | (2.5) | |||
| 32 | - | 39.3*(4.4) | 50.2*(4.9) | 65.4*(0.4) | 78.3*(0.6) |
| 33 | - | 29.1*(9.7) | 34.3*(8.2) | 65.9*(3.8) | 68.5*(2.9) |
| 35 | - | 27.8(13.7) | 32.3*(13.4) | 70.9*(2.3) | |
| 40-42(99％的42) | - | 56*(5.2) | 60.1*(12.2) | 64.3*(6.6) | 71.8*(8.6) |
| 43 | ？ | 49.4*(5.5) | 68.5*(5.5) | 64.9*(6.1) | 78.3*(0.6) |
| 44 | - | 25*(7.7) | 44.6*(9.2) | 75.1*(6.1) | 73.1*(0.9) |
| 酚红 | - | - | - | - | 40.9*(2.5) |
因为较高浓度会损害活体外的皮脂细胞的生存能力，所以在表1中，最低测试浓度下的分析结果是最有意义的。另外，在较高浓度下，可存在于非醇馏份中的甚至较差的抗皮脂活性成分也可以提供相对高的活性。在表1中的结果证明在最低测试浓度(0.005％)下的馏份42和43(醇馏份)对抑制皮脂产生最有活性。这些馏份没有含任何顺-古古甾酮。与馏份42和43比较，因为馏份44是醇馏份的最终部分，所以馏份44活性的降低可能是由于一些活性物质浓度的减少。
用美丽桐没药的油溶提取物重复活体外皮脂细胞试验。得到的结果在表1A中总结。表1A
| 治疗 | 浓度 | 减少率％ | 标准误差 |
| 美丽桐没药提取物(油溶性) | 0.01％ | 40.6 | 9.4 |
| 0.10％ | 44.9 | 4.4 |
从表1A中可以看见可油溶的美丽桐提取物也降低了皮脂的分泌。
对于用低分子量馏份(“低分子量馏份”)的进一步实验，对活体外的皮脂细胞测试方案作了以下的改变。向每一个含皮脂细胞的孔加入1μl和5μl的低分子量馏份。各测试样品采用四个孔。对照测试样品由DMSO和作为内部阳性对照物的全部古古脂组成。得到的结果在表1B中总结。
表1B
| 治疗 | 浓度 | 减少率％ | 标准误差 |
| 实验1 | |||
| 古古脂 | 0.01％ | 50.9 | 11.7 |
| 低Mw馏份 | 0.01％ | 47.9 | 8.6 |
| 低Mw馏份 | 0.04％ | 54.5 | 10.5 |
| 实验2 | |||
| 古古脂 | 0.01％ | 62 | 6.9 |
| 低Mw馏份 | 0.01％ | 53.6 | 7.0 |
| 低Mw馏份 | 0.04％ | 61.4 | 4.2 |
结果证明了低分子量馏份具有极好的抗皮脂活性。当测试高分子量馏份时，得到了相似的皮脂分泌的减少。然而，使用低分子量馏份是有利的，因为它比古古脂或其醇馏份或高分子量馏份更容易制备：低分子量馏份有较低的粘度并是金黄/琥珀色的而不是深褐/黑色的。与醇馏份比较，低分子量馏份是更优选的，因为它所得的收率比醇馏份的收率高。对比实施例3
用表2中所示的各种化合物重复实施例2中描述的皮脂细胞测试。表2中所有的化合物都在本发明以外的范围。
得到的结果在表2中总结。负值代表皮脂产生的增加。表2
| 治疗 | 浓度 | 减少率％ | 标准误差 |
| 雌二醇 | 0.0028％(100μM) | 39.7 | 7.9 |
| 双氢睾酮 | 0.00003％(1μM) | -28.8 | 4.1 |
| 水杨酸 | 0.14％(10.0mM) | 3.6 | 7.4 |
| 0.10％ | -46.6 | 12.4 | |
| 顺-古古甾酮 | 0.05 | 2.7 | 8.1 |
| 0.01％ | 2.7 | 8.8 |
表2中的结果显示出皮脂细胞测试是用于测量皮指抑制作用的一种正确和可靠的试验，因为雌二醇(类似雌激素的化合物)提供了皮脂抑制作用，这也正如其它文献所预测的，而双氢睾酮(雄激素)事实上增加了皮脂的产生，这也正如其它文献所预测的。公知的抗痤疮剂：水杨酸没有抑制皮脂的产生，表示抗痤疮剂不必具有抗皮脂分泌活性。顺-古古甾酮没有降低皮脂分泌，说明在古古脂和其醇或低分子量馏份中提供抗皮脂活性的活性成分不是顺-古古甾酮。
实施例4
该实施例报告了古古脂和其多种馏份的抗氧化活性的化学测试和活体外的分析。化学试验：
化学试验测量了表3中指出的各种试验化合物的抗氧化活性(除了低分子量馏份的测试在1.67％和0.17％的浓度下进行之外，其它都在0.08％的浓度下测试)。在磷酸盐缓冲盐水(5mmol/l，pH7.4)中增溶2.2’-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉磺酸酯)(6.1μmol/l)和间肌红蛋白(metmyoglobin)(610μmol/l)。然后加入测试物质并在基质、过氧化氢(250μmol/l)加入之前和之后测量734nm的吸收度。用含基质的吸收度减去初始的吸收度。这样就防止了由测试化合物本身所造成的吸收度差异。吸收度会随着时间改变，因此检查了多个时间的吸收度。结果用相对于含全部测试组份但用去离子水代替测试试剂的对照样品(100％氧化率)的氧化率％表示。大数目代表没有防止氧化，即是差的抗氧化剂。测量Trolox(Hoffman-LaRoche的注册商标)维生素E水溶形式的抗氧化活性以确定试验的正确性。Trolox购自Aldrich(2.5mmol/l)。美丽桐没药(亲油提取物)购自Campo。得到的结果在表3中总结。
表3
| 测试物质 | 在3分钟时，相对于水对照样品的氧化率％(标准误差) | 在6分钟时，相对于水对照样品的氧化率％(标准误差) | 在9分钟时，相对于水对照样品的氧化率％(标准误差) |
| Trolox(水溶性维生素E) | -0.70(0.5)* | 15.8(2.1)* | 44.6(2.1) |
| 总古古脂 | 2.8(1.1)* | 4.4(0.08)* | 5.1(0.6)* |
| 馏份#0 | 60.7(8.3) | 72.5(4.7) | 73.8(0.9) |
| 馏份#10 | 82.9(3.5) | 88.7(2.3) | 88.2(0.2) |
| 馏份#14 | 98.4(1.0) | 99.4(0.9) | 111.1(16.7) |
| 馏份#15 | 94.6(0.6) | 96.5(0.3) | 94.4(2.0) |
| 馏份#16 | 97.6(4.7) | 93.8(5.2) | 87.9(8.4) |
| 馏份#20 | 65.8(14.7) | 71.2(8.3) | 70.1(1.7)* |
| 馏份#21 | 47.7(0.54)* | 49.9(0.6)* | 50.5(2.6) |
| 馏份#24 | 46.2(6.9) | 56.9(6.2) | 60.9(3.6)* |
| 馏份#27 | 79.8(7.1) | 78.0(4.6) | 77.2(2.1)* |
| 馏份#40-42(99％的42) | 18.7(3.1)* | 10.6(1.7)* | 9.2(0.7)* |
| 馏份#43 | -33.2(21.2)* | -4.5(2.2)* | -3.2(1.6)* |
| 馏份#44 | -12.6(8.6)* | -6.5(4.9)* | -4.4(3.4)* |
| 顺-古古甾酮 | 100(10.0) | 97.9(4.1) | 97.4(6.1) |
| 美丽桐没药 | 85.6(0.0) | 98.0(5.3) | 99.9(7.1) |
*p-值＜0.05(与水对照样品相比在统计上较明显)：用Lotus 1-2-3学生t-测试计算p-值。
表3的结果显示出总古古脂和馏份42-44具有最好的抗氧化剂活性，其中馏份43有最高的活性。顺-古古甾酮具有非常差的抗氧化剂活性，因此证明了在古古脂醇馏份中提供抗氧化剂活性的活性成分是其它的活性成分，而不是顺-古古甾酮。美丽桐没药和穆库尔没药的含水提取物都没有明显的抗氧化剂活性。上述化学试验只测量通过直接自由基淬火的抗氧化剂活性，而没有测量通过抗炎途径得到的抗氧化剂活性。试验确定了古古脂和其醇馏份经直接自由基淬火用作抗氧化剂。
在分开的实验中重复以上的化学试验以测试低分子量馏份。得到的结果在表3A中总结。表3A
| 测试物质 | 在3分钟时，相对于水对照样品的氧化率％ | 在6分钟时，相对于水对照样品的氧化率％ | 在9分钟时，相对于水对照样品的氧化率％ |
| 乙醇 | 98.79 | 91.16 | 87.5 |
| 低Mw馏份(0.167％) | 49.70 | 44.86 | 42.59 |
| 低Mw馏份(1.67％) | -43.83 | -28.06 | -21.37 |
表3A中的结果证明了低分子量馏份在以上两种测试浓度下都具有极好的抗氧化剂活性。
通常，测量到的抗氧化剂能力与活体外角质形成细胞的结果化学相关(参见下表4)。活体外抗氧化剂测试：
油脂过氧反应是完全确定的细胞伤害的机理，该反应在植物和动物中发生。不饱和脂肪酸，包括薄膜油脂的分裂导致如醛的副产物的产生。醛的副产物：丙二醛(malondialdehyde)(MDA)和4-羟基烷醛可用作油脂过氧化反应的方便标记物。细胞培养：
在完全培养基(DME+f-12，1M Hepes、腺嘌呤、皮质醇、霍乱毒素、胰岛素、EGF、FBS和PennStrep)中和0.09mM的钙的存在下，使新生包皮分离的人类角质形成细胞在肌肉霉菌素(mytomycin)处理的T3T老鼠纤维原细胞的饲养层上生长。之后，在含0.09mM钙和1000μl完全KSFM(Life Technologies的皮质形成细胞无血清培养基)的12孔的组织培养板(Costar)中将胰岛素、皮质形成细胞以每孔种在15×103个细胞的方式接种。
经过96小时的培养后，将培养基移除并加入新鲜的培养基和0.01％于KSFM中的表4所示的测试试剂。在用试剂培养的48小时后，再将培养基移除并向各孔加入1ml含1mM过氧化氢的磷酸盐缓冲盐水。然后加入1mM硫酸铁开始氧化。用该氧化剂混合物培养90分钟后，加入BHT以熄火氧化反应。然后将培养板储存在-70℃下等候进一步的分析。
将油脂过氧化反应产物作为氧化应力的标记物进行测量，并归一化至细胞DNA的含量以计算细胞的繁殖。DNA测试：
从冷却器中移走培养板，吸出培养基。培养板被冻裂三次。向每一个孔加入Hoechst染料(10g/ml最终浓度)并在暗处培养该板。培养15分钟后，将该板在萤光计中读数(360nm激发和460nm的放射)。油脂过氧化反应：
将含有在PBS中氧化细胞的培养孔擦刮并取出200L的样品。在45℃的酸中将产生色度的(chromagen)N-甲基-2-苯基吲哚与测试样品反应。在已给出的条件下，MDA或4-羟基烷醛的其中一个分子会与试剂的2个分子反应产生具有586nm最高吸收度的稳定发色团。结果以(未处理细胞的吸收度＝100％油脂氧化率)/DNA吸收度表示。未处理的细胞(非抗氧化剂)具有100％+/-10.1的过氧化率。将α-生育酚用作阳性对照物。
得到的结果在表4中总结。
表4
用Lotus 1-2-3学生t-测试计算p-值。*p-值＜0.05(与水对照样品比较在统计上明显)
| 测试物质(0.01％) | 油脂氧化率/DNA％(标准误差)相对于水对照样品[100％(10.1)] |
| α-生育酚 | 61.4(8.9) |
| 总古古脂 | 85.7(15.8) |
| 馏份#0 | 85.2(3.7) |
| 馏份#10 | 155.4(19.9) |
| 馏份#14 | 205.9(13.9) |
| 馏份#15 | 118.7(19.8) |
| 馏份#21 | 159.8(22.7) |
| 馏份#24 | 82.4(5.7) |
| 馏份#42 | 53.2(21.3) |
| 馏份#43 | 74.1(2.7)* |
| 馏份#44 | 84.2(3.8) |
| 美丽桐没药 | 167.2(46.0) |
表4中的结果说明了古古脂和馏份42-44(醇馏份)具有如化学试验所预计一样的抗氧化剂活性。醇馏份42-44具有最高的抗氧化剂活性，该抗氧化剂活性与α-生育酚的活性相近。美丽桐没药仍然没有抗氧化剂活性。一些其它的馏份具有良好的抗氧化剂活性，虽然它们在化学试验中只具有边缘活性。应该注意的是在活体外的过氧化试验中测试的浓度比较高，即是皮脂细胞测试中的最低测试浓度的两倍。相信在较低浓度下，各馏份之间的活性差别更大。与馏份42和43比较，因为馏份44是醇馏份的最终部分，所以馏份44的活性降低可能是由于一些活性物质的浓度降低所致。无论上述何种情况，古古脂和其醇馏份都没有表现出抗氧化剂的活性。
实施例4中的结果显示了使用从穆库尔没药得到的古古脂而非从美丽桐没药得到的guggal以提供抗氧化剂活性的重要性。
在实施例1-4中，当测试古古脂的馏份时，醇馏份和低分子量馏份具有最高抗皮脂和抗氧化剂活性。从穆库尔没药得到的古古脂和从穆库尔没药得到的古古脂的醇和低分子量馏份具有最好的抗皮脂和抗氧化剂的双重活性。
实施例5测试产物：
用以下的成分制备含古古脂的收肤水：
主题：用皮脂计(Sebumeter)筛选自称具有油性皮肤的参加组员。女性的年龄在18-55岁之间。在该组中，选择11个符合具有现场平均得分(3个皮脂计读数))150所限定的油性皮肤条件的女性参加5星期的产品评价。
| 成分 | ％w/w |
| 水 | 加至100％ |
| 醇(SDA 40-B) | 35.00 |
| 绿茶 | 1.00 |
| PEG-40氢化蓖麻油 | 1.00 |
| PPG-5-ceteth 20(乙氧化十六醇) | 1.00 |
| 古古脂 | 0.20 |
在研究开始的一星期之前暂停使用局部痤疮药物治疗(例如，Retin A、α羟基/果酸产品、醇收肤水及面膜/剥落剂)并在整个研究的期间暂停使用。测试条件：将测试环境设定并维持在73±1EF的室温和45±10％的相对湿度。程序：在5星期期间每星期一天，每天(除了第一星期外)评价组员两次。初次评价后(用作基线结果)，指示组员向她们的半边脸上使用测试产品3星期，然后复原(不处理)1星期。在评价当天，要求组员清洁脸部并不要在AM评价期之前的至少3小时使用测试收肤水。也要求组员不要在评价的整个期间在前额上化妆。要求组员在所有评价期间都随时可接受评价，并不能在测试期间以任何方式触摸、摩擦或干扰测试部位。
在每个评价时期开始时(8：30-11：30)，必须在至少3小时之前用组员常用的面部清洁剂/肥皂清洗她们的前额。将约18cm2的测试部位区域定位于组员前额的每条眉线的紧上方。采用分离前额设计，通过在每个测试部位区域内的3个皮脂计(Courage and Kahazaka，Koln，Germany制造，型号SM810)的读数确定每个组员的上午的数值。使用10N的恒压将皮脂计箱与皮肤接触30秒。30秒后，装置发响提醒将箱放进该装置中测量读数。1秒内，测量到的数值在仪器上出现。每个部位再测量另外两个读数，并计算平均值用作组员的AM分数。然后让组员使用产品，并根据组员之间的油性程度平衡左/右部位的使用量。用426、881或502号作为用量指示处理测试部位区域。经过5小时的处理后，纪录另外的皮脂计读数。处理：每天使用测试产品一至二次。使用时包括了用棉花球将适量的产品以随机的方式分散在半边脸上。分析：用Lotus123和SAS软件分析解码和分类后的数据。每次评价时，对每个处理组中得到的数据组进行配对t-测试(处理后-未处理)。
得到的结果在下表5中总结。
表5
表5-继续
结果：在所有时期，用古古脂处理的部位的得分都比未处理部位低。用古古脂处理的部位的平均得分在183-242的范围之间(基值＝227)，而未处理部位的平均得分在197-263的范围之间(基值＝225)。根据每次评价的处理后读数-未处理读数的配对比较，使用含古古脂的收肤水的组仅在第二星期就具有与0相比有统计上(p＜0.05)显著不同的PM值，而第一星期的PM值表现出边缘的(p＜0.10)显著性。缺乏统计上的明显性可能是由于数据的高变化度及小的取样量。结论：与未处理的对照部位比较，向具有高皮脂产生的女性皮肤上涂用含古古脂的收肤水使处理后部位的油脂水平持续降低。
| 相差值 | |||||
| 组员# | 基值 | 第一星期 | 第二星期 | ||
| AM处理后-未处理 | AM处理后-未处理 | PM处理后-未处理 | AM处理后-未处理 | PM处理后-未处理 | |
| 1 | 23.7 | 46.0 | -25.7 | -6.3 | 3.7 |
| 2 | -6.7 | -61.7 | -23.7 | -74.0 | -11.3 |
| 3 | -39.0 | 33.7 | -4.7 | 33.0 | 8.0 |
| 4 | 27.7 | 17.3 | 11.7 | -68.3 | -29.0 |
| 5 | 22.3 | -28.7 | -63.7 | ||
| 6 | 23.3 | -39.0 | -84.7 | -26.7 | -24.3 |
| 7 | 52.0 | -79.3 | -65.0 | -70.0 | -52.3 |
| 8 | -19.7 | -19.3 | 6.0 | -30.3 | -39.3 |
| 9 | 12.3 | 4.7 | -18.0 | 4.7 | 13.7 |
| 10 | -37.3 | -29.3 | -10.7 | 30.7 | 10.0 |
| 11 | -17.0 | -18.3 | 8.7 | -37.0 | -64.0 |
| 平均值 | 1.5 | -14.5 | -20.6 | -24.8 | -22.6 |
| 相差值 | ||||
| 组员# | 第三星期 | 复原期 | ||
| AM处理后-未处理 | PM处理后-未处理 | AM处理后-未处理 | PM处理后-未处理 | |
| 1 | -8.0 | -121.0 | 6.0 | -51.0 |
| 2 | -25.0 | -20.0 | -25.3 | -56.0 |
| 3 | 0.3 | 10.0 | -30.7 | -11.0 |
| 4 | -79.0 | 1.3 | -24.0 | 3.7 |
| 5 | -45.0 | 19.0 | 30.0 | 0.0 |
| 6 | -7.0 | -4.3 | -26.3 | 3.0 |
| 7 | 31.0 | 39.0 | 24.3 | -29.7 |
| 8 | -15.0 | -89.0 | -19.0 | 63.0 |
| 9 | 54.7 | 33.3 | -2.0 | 0.0 |
| 10 | 44.3 | 44.7 | -17.0 | -44.0 |
| 11 | -96.0 | -9.7 | 15.0 | -12.0 |
| 平均值 | -13.2 | -6.9 | -6.3 | -12.2 |
实施例6-9举例说明了本发明的局部组合物。组合物可以用常规的方式加工。它们适用于美容的用途。具体来说，本发明的组合物适用于油性、起皱、老化和/或光损害的皮肤以改善皮肤的外表(光彩、澄澈度和表面光洁度)及其感觉，也适用于以及在健康的皮肤以防止或阻止其油性或退化。
实施例6
下文是在本发明范围内典型的抗皮脂和抗氧化剂组合物：控制油的护肤露
实施例7
| 成分 | ％w/w |
| 去离子水 | 适量 |
| 丙二醇 | 1.000 |
| 黄原胶 | 0.200 |
| 乙二胺四乙酸二钠 | 0.100 |
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.300 |
| 多乙氧基醚20 | 1.500 |
| 甲氧基肉桂酸辛酯 | 2.000 |
| 亚麻子油酸视黄醇酯 | 0.100 |
| 水杨酸十三酯 | 2.000 |
| 古古脂的低分子量馏份 | 0.001 |
| 十六醇 | 1.500 |
| PEG-165硬脂酸甘油酯 | 3.000 |
| 对羟基苯甲酸丙酯 | 0.100 |
| 环甲基硅油(Cyclomethicone) | 15.000 |
| 二甲基硅油 | 2.000 |
| 二甲基硅油醇(Dimethiconol) | 0.500 |
| 微粉化二氧化钛 | 0.500 |
| 透明质酸钠1％溶液 | 3.000 |
| 三乙醇胺99％ | 0.200 |
| 水杨酸 | 0.200 |
| 苯氧基乙醇 | 0.350 |
一种留在面部上的乳液组合物，该组合物是用常规的混合技术合并以下成分来制备的。
| 成分 | ％重量 |
| 水 | 适量 |
| 甘油 | 3.00 |
| 棕榈酸十六酯 | 3.00 |
| 十六醇 | 1.26 |
| 甘油单羟基硬脂酸酯 | 0.74 |
| 二甲基硅油 | 0.60 |
| 硬脂酸 | 0.55 |
| 十四酸辛基十二烷基酯(Octyldodecyl Myristate) | 0.30 |
| 氢氧化钾 | 0.20 |
| Carbomer 1342 | 0.125 |
| 乙二胺四乙酸四钠 | 0.125 |
| DMDM海因和Iodopropynyl | 0.10 |
| 古古脂 | 0.10 |
| Carbomer 951 | 0.075 |
该乳液对提供皮脂分泌的控制和保护皮肤免受自由基伤害是有用的。实施例8
一种留在面部上的乳液组合物，该组合物是用常规的混合技术合并以下成分来制备的。
| 成分 | ％重量 |
| 水 | 适量 |
| 甘油 | 3.00 |
| 棕榈酸十六酯 | 3.00 |
| 十六醇 | 1.26 |
| Quaternium-22 | 1.00 |
| 甘油单羟基硬脂酸酯 | 0.74 |
| 二甲基硅油 | 0.60 |
| 硬脂酸 | 0.55 |
| 环甲基硅油和二甲基硅油醇 | 0.50 |
| 十四酸辛基十二烷基酯 | 0.30 |
| 氢氧化钾 | 0.20 |
| Carbomer 1342 | 0.125 |
| 乙二胺四乙酸四钠 | 0.10 |
| DMDM海因and Iodopropynyl | 0.10 |
| 古古脂的低分子量馏份 | 0.05 |
| Carbomer 951 | 0.075 |
实施例9
下文是在本发明范围内典型的抗皮脂和抗氧化剂组合物的附加实施例：实施例9A：皮肤面霜(水包油型)化学品 ％w/w水 适量乙二胺四乙酸二钠 0.100多乙氧基醚40 2.000丁二醇 3.000甘油 5.000对羟基苯甲酸甲酯 0.300棕榈酸视黄醇酯 0.300古古脂 0.100棕榈酸异丙酯 2.000异硬脂酸异硬脂酰酯 3.000二甲基硅油，200 Cst 2.000环甲基硅油 10.00咪唑烷基尿素 0.200聚丙烯酰胺 3.000实施例9B：皮肤面霜(水包油型)化学品 ％w/w水 适量Carbopol 1382 0.300乙二胺四乙酸二钠 0.100Tween 40 5.000丙二醇 1.000甘油 3.000对羟基苯甲酸甲酯 0.300三乙醇胺99％ 0.300水杨酸十三酯 1.200视黄醇 0.100异三十烷 1.000古古脂的醇馏份 0.500牛油树脂 0.500十六醇 1.500棕榈酸辛酯 2.000苯甲酸C12-15烷酯 5.000硬脂酸辛酯 2.000硅酮344液体(环甲基硅油) 2.000咪唑烷基尿素 0.200实施例9C：皮肤面霜(水包油型)化学品 ％w/w水 适量Carbopol 1382 0.250乙二胺四乙酸二钠 0.100丁二醇 2.000甘油 3.000对羟基苯甲酸甲酯 0.250三乙醇胺99％ 0.250癸酸/辛酸三甘酯 5.000牛油树脂 0.500十六醇 1.000PEG-100甘油单硬脂酸酯 4.000苯甲酸C12-15烷酯 6.000亚麻子油酸生育酚酯 0.500古古脂的低分子量馏份 0.250硅酮200液体(二甲基硅油) 2.000咪唑烷基尿素 0.200实施例9D：微乳液化学品 ％w/wPPG-5-Ceteth-20 4.000PEG-40氢化蓖麻油 1.750聚甘油-10油酸癸酯 10.00(Polyglyceryl-10 Decaoleate)PEG-8辛酸/癸酸甘油酯 10.00SDA醇40B 12.00新戊酸异癸酯 16.00三辛酸甘油酯 8.000环甲基硅油(DC 344液体) 8.000对羟基苯甲酸丙酯 0.100异硬脂酸 2.500水杨酸十三酯 2.500古古脂的低分子量馏份 0.300苯氧乙醇 0.300去离子水 适量实施例9E：皮肤面霜(水包油型)化学品 ％w/w环甲基硅油(DC 344液体) 12.000二甲基硅油(DC 200/10液体) 2.000二甲基硅油共聚多元醇 2.500十六基二甲基硅油 0.500苯甲酸C12-15烷酯 3.000水杨酸十三酯 5.000古古脂 0.500甘油 3.000丙二醇 2.000乙二胺四乙酸二钠 0.100对羟基苯甲酸甲酯 0.250氯化钠 1.200苯氧乙醇 0.200去离子水 适量实施例9F：无水乳浆化学品 ％w/wSD醇40B(200标准强度) 20.00环甲基硅油(DC 344液体) 2.500三十碳六烯 1.000异壬酸辛酯 2.500二甲基硅油(DC 200液体) 5.200异壬酸异壬酯 30.00PEG-7可可甘油酯(Glyceryl 1.000Cocoate)蓖麻醇酸聚甘油酯 3.000古古脂 1.000丁二醇 1.000对羟基苯甲酸丙酯 0.100二甲基硅油醇 2.750实施例9G：防晒护肤露(水包油型)化学品 ％w/w水 适量乙二胺四乙酸二钠 0.100丁二醇 2.000甘油 5.000对羟基苯甲酸甲酯 0.250甲氧基肉桂酸辛酯 7.500二苯甲酮-3 2.500牛油树脂 0.500十六醇 1.500棕榈酸辛酯 2.000苯甲酸C12-15烷酯 2.000硅酮200液体(二甲基硅油) 1.000古古脂的低分子量馏份 2.000咪唑烷基尿素 0.200Laureth-7，聚丙烯酰胺 3.500
应该了解的是本申请中例证和描述的发明具体方式只用来说明本发明。在不离开公开内容的明确教导下，可以在例证的实施方案中作出包括在但不限于本说明书所暗示的变化。因此，应该用以下所附的权利要书作为参考以确定本发明的全部范围。
Claims (7)
1.一种用于皮肤护理的美容组合物，该组合物包含(a)0.0001-10wt.％的抗皮脂剂，该抗皮脂剂选自古古脂的醇馏份、古古脂的低分子量馏份及其混合物；和(b)美容可接收载体。
2.一种减少或防止油性皮肤状态的美容方法，该方法包括向皮肤涂用一种组合物，该组合物包含(a)0.0001-10wt.％的抗皮脂剂，该抗皮脂剂选自古古脂、古古脂的醇馏份、古古脂的低分子量馏份及其混合物；和(b)美容可接收载体。
3.一种减少或防止皮脂细胞的皮脂分泌的美容方法，该方法包括向皮肤涂用一种组合物，该组合物包含(a)0.0001-10wt.％的抗皮脂剂，该抗皮脂剂选自古古脂、古古脂的醇馏份、古古脂的低分子量馏份及其混合物；和(b)美容可接收载体。
4.一种保护皮肤免受自由基活性伤害的美容方法，该方法包括向皮肤涂用一种组合物，该组合物包含(a)0.0001-10wt.％的抗氧化剂，该抗氧化剂选自古古脂、古古脂的醇馏份、古古脂的低分子量馏份及其混合物；和(b)美容可接收载体。
5.根据权利要求2、3或4的方法，其中古古脂是从穆库尔没药得到的。
6.一种制备古古脂的醇馏份的方法，该方法包括用短链醇提取或洗提古古脂。
7.一种选自古古脂、古古脂的醇馏份、古古脂的低分子量馏份及其混合物的抗氧化剂/抗皮脂剂的用途，用于同时减少或防止油性皮肤状态并保护皮肤免受自由基活性的伤害。
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