CN1234425C - 一种可吸收纤维蛋白止血贴的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种可吸收纤维蛋白止血贴的制备方法，属于医疗器械技术领域。本方法是将核黄素、纤维蛋白原和凝血酶冻干粉按比例加入研钵中充分研细，然后加入无水乙醇搅拌成均匀的悬浮液，将均匀分布的悬浮液倒入平底盘中，使胶原海绵的一面与悬浮液接触，对黏附有混合干粉颗粒的胶原海绵抽真空干燥，消毒。本发明制备的止血贴，与机体生物相容性好，在体内可彻底降解；生化止血和机械止血相结合，大大提高了止血效能，不但能止住毛细血管的渗血，还能止住小动脉、静脉的出血，大大拓展了临床应用范围，可用于内脏手术止血和较大的体表创伤止血。还可在其中的胶原海绵中加入抗生素和抗癌药物，使本止血增加了药物缓释、局部给药的功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种可吸收纤维蛋白止血贴的制备方法，属于医疗器械技术领域。
背景技术
目前医院的手术止血敷料，多用明胶海绵，这种材料亲水性差、被机体吸收不彻底，容易产生疤痕组织，止血效果很差，已经是一种淘汰用品。还有一种近年来出现的纤维蛋白封闭剂，在临床上有一定范围的应用，但也存在以下缺点：
1、使用前需在手术台下将纤维蛋白原和凝血酶分别溶解，约耗时十多分钟，遇难溶产品还要水浴加热，溶解完后还要组装成喷雾装置，使用过程繁琐、费时，影响手术进程；
2、仅能止住毛细血管渗血，因而不能满足大部分临床所需；
3、对创面的黏附性差，易被生理盐水或组织液冲脱，器官蠕动时也易致脱落。
上述产品已在临床上使用多年，但因上述原因而限制了其在临床上的推广使用，目前还未出现更好的替代产品。
据统计，在战场和平时的创伤急救中，死亡的伤员中有超过10％死于失血过多。这是因为仅靠普通止血绷带压迫不能很好地止住动脉、静脉出血。
发明内容
本发明的目的是提出一种可吸收纤维蛋白止血贴的制备方法，将其应用于内脏的手术和体表创伤止血，以缩短手术时间、降低手术风险、加速创面愈合，挽救更多的生命。
本发明提出的可吸收纤维蛋白止血贴的制备方法，包括以下步骤：
(1)将核黄素、纤维蛋白原和凝血酶冻干粉按比例加入研钵中充分研细，颗粒度为10～50微米，其中核黄素与纤维蛋白原的重量比为：核黄素∶纤维蛋白原＝1∶900～1200，每1～5毫克纤维蛋白原中加入一个活性单位的凝血酶冻干粉；
(2)在上述混合均匀的干粉中加入无水乙醇搅拌成均匀的悬浮液，每1毫升无水乙醇中加入6～10毫克混合干粉，震荡使悬浮颗粒均匀分布；
(3)将均匀分布的悬浮液倒入平底盘中，使胶原海绵的一面与悬浮液接触，悬浮液中的颗粒黏附在胶原海绵上，每平方厘米的胶原海绵上黏附有4～8毫克混合干粉颗粒；
(4)对黏附有混合干粉颗粒的胶原海绵抽真空干燥，消毒。
上述方法中的纤维蛋白原和凝血酶从猪血、牛血、马血或人血中提取。
上述方法中的胶原海绵的制备方法包括如下步骤：
(1)取猪腿、牛腿或马腿的肌腱，粉碎至颗粒度为50～500微米；
(2)将粉碎后的肌腱浸泡于浓度为0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的乙酸溶液中加入5～8克肌腱颗粒和15～20活性单位的胃蛋白酶，充分混匀，在常温下浸泡50～100小时；
(3)对上述浸泡液进行过滤除渣，将所得胶原滤液倒入平底盘中，液体厚度为1.5～2.5厘米，将装有滤液的平底盘放入冻干机中，冷冻干燥得到医用胶原海绵。
上述制备胶原海绵的滤液中可加有青霉素或头孢拉定，加入量：青霉素为每100毫升中加入100～250万U，头孢拉定为每100毫升中加入0.75～2.5克。
上述制备胶原海绵的滤液中可加有抗肿瘤药物，加入量为每100毫升胶原滤液中加入盐酸氮芥10～15毫克，或加入盐酸平阳霉素15～20毫克，或甲氨蝶呤100～200毫克。
上述制备胶原海绵中冷冻干燥的温度控制流程为：经3小时从室温降至-40℃，保温2小时，冻实后抽真空升华16小时，经8小时升温至0℃，每小时升温5℃，0℃保温8小时，经3小时升温至15℃，15℃保温1小时，经3小时升温至25℃，紧接着经1小时升温至35℃，保温10小时，去真空。
用本发明所提出的制备方法生产的纤维蛋白止血贴中，纤维蛋白原和凝血酶已经附在固体胶原海绵上，由于不接触水，凝血酶不能与纤维蛋白原反应，当敷在伤口创面上时，纤维蛋白原和凝血酶与血、淋巴液或生理盐水接触后便会溶解，凝血酶与纤维蛋白原起反应，将可溶性的纤维蛋白原催化成不溶性的纤维蛋白(生化止血)，同时胶原海绵立即变成薄而致密的敷料紧紧地黏附在伤口或器官的表面，胶原海绵的网孔可吸附大量血小板和其它凝血因子，形成血栓(机械止血)，因此用本发明所提出的制备方法生产的纤维蛋白止血贴同时具有生化止血和机械止血的功能，大大提高了止血效果，可止住小动脉、静脉和毛细血管的出血。如在制备胶原海绵过程中将抗生素加入胶原溶液，用这种胶原海绵制成的纤维蛋白止血贴在被机体吸收的过程中可缓慢释放抗生素，增加了局部抗菌的功能。如参照临床用量在胶原滤液中加入各种抗肿瘤药物，用这种胶原海绵制成的纤维蛋白止血贴在被机体吸收的过程中则可缓慢释放抗肿瘤药物，增加了局部给抗肿瘤药的功能，专用于肿瘤切除后的创面贴敷。
本发明提出的制备方法生产的可吸收纤维蛋白止血贴具有以下优点：
1、本止血贴与机体生物相容性好、无毒副作用，在体内可彻底降解；
2、本发明制备的止血贴撕开包装即可贴敷，无需溶解，因此使用时方便、快捷；
3、生化止血和机械止血相结合，大大提高了止血效能，不但能止住毛细血管的渗血，还能止住小动脉、静脉的出血，大大拓展了临床应用范围，可用于内脏手术止血和较大的体表创伤止血。
本发明制备的止血贴在医学上可以用于止血、堵漏(瘘)、促进组织再生和创伤愈合，防止机体组织粘连。本发明的止血贴可广泛应用于普通外科、肝胆外科、妇产科、口腔科、微创外科(如腹腔镜、胸腔镜、盆腔镜)、神经外科、心胸外科、泌尿外科等需要止血、堵漏(瘘)的手术中，使手术时间缩短，降低手术风险，减少病人出血，加速创伤愈合，缩短住院时间。
具体实施方式
下面介绍本发明的实施例：
实施例一
(1)取核黄素1毫克、纤维蛋白原950毫克和凝血酶冻干粉475活性单位，加入研钵中充分研细，其中纤维蛋白原和凝血酶来自猪血；
(2)在上述混合均匀的干粉中加入无水乙醇100毫升搅拌成均匀的悬浮液，震荡使悬浮颗粒均匀分布；
(3)将均匀分布的悬浮液倒入10×20平方厘米的平底盘中，使胶原海绵的一面与悬浮液接触，悬浮液中的颗粒黏附在胶原海绵上；
(4)对黏附有混合干粉颗粒的胶原海绵抽真空干燥，按预定的规格裁剪，抽真空密封包装后钴源照射消毒。
实施例二
(1)取核黄素1毫克、纤维蛋白原1000毫克和凝血酶冻干粉250活性单位，加入研钵中充分研细，其中纤维蛋白原和凝血酶取自人血；
(2)在上述混合均匀的干粉中加入无水乙醇100毫升搅拌成均匀的悬浮液，震荡使悬浮颗粒均匀分布；
(3)将均匀分布的悬浮液倒入10×20平方厘米的平底盘中，使胶原海绵的一面与悬浮液接触，悬浮液中的颗粒黏附在胶原海绵上；
(4)对黏附有混合干粉颗粒的胶原海绵抽真空干燥，按预定的规格裁剪，抽真空密封包装后钴源照射消毒。
实施例三
(1)取核黄素1毫克、纤维蛋白原1100毫克和凝血酶冻干粉300活性单位，加入研钵中充分研细，其中纤维蛋白原和凝血酶取自牛血；
(2)在上述混合均匀的干粉中加入无水乙醇100毫升搅拌成均匀的悬浮液，震荡使悬浮颗粒均匀分布；
(3)将均匀分布的悬浮液倒入10×20平方厘米的平底盘中，使胶原海绵的一面与悬浮液接触，悬浮液中的颗粒黏附在胶原海绵上；
(4)对黏附有混合干粉颗粒的胶原海绵抽真空干燥，按预定的规格裁剪，抽真空密封包装后钴源照射消毒。
实施例四
(1)取核黄素1毫克、纤维蛋白原1000毫克和凝血酶冻干粉500活性单位，加入研钵中充分研细，其中纤维蛋白原和凝血酶取自马血；
(2)在上述混合均匀的干粉中加入无水乙醇100毫升搅拌成均匀的悬浮液，震荡使悬浮颗粒均匀分布；
(3)将均匀分布的悬浮液倒入10×20平方厘米的平底盘中，使胶原海绵的一面与悬浮液接触，悬浮液中的颗粒黏附在胶原海绵上；
(4)对黏附有混合干粉颗粒的胶原海绵抽真空干燥，按预定的规格裁剪，抽真空密封包装后钴源照射消毒。
本方法中的胶原海绵的制备实施例如下：
实施例五
(1)取猪腿的肌腱，粉碎至颗粒度为50～100微米；
(2)将粉碎后的肌腱浸泡于浓度为0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6克肌腱颗粒和18活性单位的胃蛋白酶，充分混匀，在常温下浸泡60小时；
(3)对上述浸泡液进行过滤除渣，将所得滤液倒入10×20平方厘米的平底盘中，液体厚度为1.8厘米，将装有滤液的平底盘放入冻干机中冷冻干燥，温度控制流程为：经3小时从室温降至-40℃，保温2小时，冻实后抽真空升华16小时，经8小时升温至0℃，每小时升温5℃，0℃保温8小时，经3小时升温至15℃，15℃保温1小时，经3小时升温至25℃，紧接着经1小时升温至35℃，保温10小时，去真空，将平底盘从冻干机中取出，用密封袋封严实，避免受潮，密封好的胶原海绵一周之内可在室温下保存，如长期保存则应置于2～8℃。
实施例六
(1)取马腿的肌腱，粉碎至颗粒度为50～100微米；
(2)将粉碎后的肌腱浸泡于浓度为0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入7克肌腱颗粒和16活性单位的胃蛋白酶，充分混匀，在常温下浸泡90小时；
(3)对上述浸泡液进行过滤除渣，在所得胶原滤液中加入青霉素，每100毫升胶原滤液中加入150万单位，充分混匀后倒入10×20平方厘米的平底盘中，液体厚度为1.8厘米，将装有滤液的平底盘放入冻干机中冷冻干燥，温度控制流程为：经3小时从室温降至-40℃，保温2小时，冻实后抽真空升华16小时，经8小时升温至0℃，每小时升温5℃，0℃保温8小时，经3小时升温至15℃，15℃保温1小时，经3小时升温至25℃，紧接着经1小时升温至35℃，保温10小时，去真空，将平底盘从冻干机中取出，用密封袋封严实，避免受潮，密封好的胶原海绵一周之内可在室温下保存，如长期保存则应置于2～8℃。
实施例七
(1)取牛腿的肌腱，粉碎至颗粒度为50～100微米；
(2)将粉碎后的肌腱浸泡于浓度为0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6.5克肌腱颗粒和19活性单位的胃蛋白酶，充分混匀，在常温下浸泡90小时；
(3)对上述浸泡液进行过滤除渣，在所得胶原滤液中加入头孢拉定，每100毫升胶原滤液中加入0.8克，充分混匀后倒入10×20平方厘米的平底盘中，液体厚度为1.8厘米，将装有滤液的平底盘放入冻干机中冷冻干燥，温度控制流程为：经3小时从室温降至-40℃，保温2小时，冻实后抽真空升华16小时，经8小时升温至0℃，每小时升温5℃，0℃保温8小时，经3小时升温至15℃，15℃保温1小时，经3小时升温至25℃，紧接着经1小时升温至35℃，保温10小时，去真空，将平底盘从冻干机中取出，用密封袋封严实，避免受潮，密封好的胶原海绵一周之内可在室温下保存，如长期保存则应置于2～8℃。
实施例八
(1)取牛腿的肌腱，粉碎至颗粒度为50～100微米；
(2)将粉碎后的肌腱浸泡于浓度为0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6.5克肌腱颗粒和19活性单位的胃蛋白酶，充分混匀，在常温下浸泡90小时；
(3)对上述浸泡液进行过滤除渣，在所得胶原滤液中加入抗癌药盐酸氮芥，每100毫升胶原滤液中加入13毫克，充分混匀后倒入10×20平方厘米的平底盘中，液体厚度为2.0厘米，将装有滤液的平底盘放入冻干机中冷冻干燥，温度控制流程为：经3小时从室温降至-40℃，保温2小时，冻实后抽真空升华16小时，经8小时升温至0℃，每小时升温5℃，0℃保温8小时，经3小时升温至15℃，15℃保温1小时，经3小时升温至25℃，紧接着经1小时升温至35℃，保温10小时，去真空，将平底盘从冻干机中取出，用密封袋封严实，避免受潮，密封好的胶原海绵一周之内可在室温下保存，如长期保存则应置于2～8℃。
实施例九
(1)取牛腿的肌腱，粉碎至颗粒度为50～100微米；
(2)将粉碎后的肌腱浸泡于浓度为0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6.5克肌腱颗粒和19活性单位的胃蛋白酶，充分混匀，在常温下浸泡90小时；
(3)对上述浸泡液进行过滤除渣，在所得胶原滤液中加入抗癌抗生素盐酸平阳霉素，每100毫升胶原滤液中加入18毫克，充分混匀后倒入10×20平方厘米的平底盘中，液体厚度为2.3厘米，将装有滤液的平底盘放入冻干机中冷冻干燥，温度控制流程为：经3小时从室温降至-40℃，保温2小时，冻实后抽真空升华16小时，经8小时升温至0℃，每小时升温5℃，0℃保温8小时，经3小时升温至15℃，15℃保温1小时，经3小时升温至25℃，紧接着经1小时升温至35℃，保温10小时，去真空，将平底盘从冻干机中取出，用密封袋封严实，避免受潮，密封好的胶原海绵一周之内可在室温下保存，如长期保存则应置于2～8℃。
实施例十
(1)取牛腿的肌腱，粉碎至颗粒度为50～100微米；
(2)将粉碎后的肌腱浸泡于浓度为0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6.5克肌腱颗粒和19活性单位的胃蛋白酶，充分混匀，在常温下浸泡90小时；
(3)对上述浸泡液进行过滤除渣，在所得胶原滤液中加入头孢拉定和甲氨蝶呤，每100毫升胶原滤液中加入头孢拉定2.3克，甲氨蝶呤180毫克，充分混匀后倒入10×20平方厘米的平底盘中，液体厚度为1.9厘米，将装有滤液的平底盘放入冻干机中冷冻干燥，温度控制流程为：经3小时从室温降至-40℃，保温2小时，冻实后抽真空升华16小时，经8小时升温至0℃，每小时升温5℃，0℃保温8小时，经3小时升温至15℃，15℃保温1小时，经3小时升温至25℃，紧接着经1小时升温至35℃，保温10小时，去真空，将平底盘从冻干机中取出，用密封袋封严实，避免受潮，密封好的胶原海绵一周之内可在室温下保存，如长期保存则应置于2～8℃。
本发明所提出的制备方法生产的可吸收纤维蛋白止血贴与可吸收缝合线编织成的孔径3～5毫米的网兜结合使用，可处理和治疗肝脏、脾脏破裂，即将纤维蛋白止血贴粘贴于破裂的肝脏、脾脏表面，再用适宜大小的可吸收网兜包回在外层。将本发明制备的止血贴与普通绷带相结合，即可得到可吸收纤维蛋白止血绷带，用于外伤。使用该发明时先将可吸收纤维蛋白止血贴敷于伤口，再用普通绷带包扎，这样可迅速止住动脉、静脉和毛细血管出血，普通绷带不会与伤口组织粘连。本发明的绷带可用作战伤救治和平时创伤急救，大幅度降低死亡率。
Claims (6)
1、一种可吸收纤维蛋白止血贴的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
(1)将核黄素、纤维蛋白原和凝血酶冻干粉按比例加入研钵中充分研细，颗粒度为10～50微米，其中核黄素与纤维蛋白原的重量比为：核黄素∶纤维蛋白原＝1∶900～1200，每1～5毫克纤维蛋白原中加入一个活性单位的凝血酶冻干粉；
(2)在上述混合均匀的干粉中加入无水乙醇搅拌成均匀的悬浮液，每1毫升无水乙醇中加入6～10毫克混合干粉，震荡使悬浮颗粒均匀分布；
(3)将均匀分布的悬浮液倒入平底盘中，使胶原海绵的一面与悬浮液接触，悬浮液中的颗粒黏附在胶原海绵上，每平方厘米的胶原海绵上黏附有4～8毫克混合干粉颗粒；
(4)对黏附有混合干粉颗粒的胶原海绵抽真空干燥，消毒。
2、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于其中的纤维蛋白原和凝血酶从猪血、牛血、马血或人血中提取。
3、如权利要求1所述的制备方法，其中所述的胶原海绵的制备方法包括如下步骤：
(1)取猪腿、牛腿或马腿的肌腱，粉碎至颗粒度为50～500微米；
(2)将粉碎后的肌腱浸泡于浓度为0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的乙酸溶液中加入5～8克肌腱颗粒和15～20活性单位的胃蛋白酶，充分混匀，在常温下浸泡50～100小时；
(3)对上述浸泡液进行过滤除渣，将所得胶原滤液倒入平底盘中，液体厚度为1.5～2.5厘米，将装有滤液的平底盘放入冻干机中，冷冻干燥得到医用胶原海绵。
4、如权利要求3所述的制备方法，其特征在于步骤(3)的滤液中加有青霉素或头孢拉定，加入量：青霉素为每100毫升中加入100～250万U，头孢拉定为每100毫升中加入0.75～2.5克。
5、如权利要求3所述的制备方法，其特征在于步骤(3)的滤液中加有抗肿瘤药物，加入量为每100毫升胶原滤液中加入盐酸氮芥10～15毫克，或加入盐酸平阳霉素15～20毫克，或甲氨蝶呤100～200毫克。
6、如权利要求3所述的制备方法，其特征在于其中冷冻干燥的温度控制流程为：经3小时从室温降至-40℃，保温2小时，冻实后抽真空升华16小时，经8小时升温至0℃，每小时升温5℃，0℃保温8小时，经3小时升温至15℃，15℃保温1小时，经3小时升温至25℃，紧接着经1小时升温至35℃，保温10小时，去真空。
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