CN1210740A - 鸡新城疫油佐剂灭活苗及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及鸡新城免疫苗及其制备方法,该疫苗是一种用含硒的抗原液(水相)与矿物油(油相)按1∶3的比例充分混合后获得的油包水乳剂,其制备方法主要包括取NDV接种鸡胚后回收鸡胚尿囊液,经灭活后加入吐温-80和硒,再与矿物油经胶体磨充分混合制成乳剂,使用本发明提供的疫苗给鸡注射,乳剂油滴会在鸡体内逐渐吸收,从而将抗原缓慢释放,以达到刺激和维持鸡体免疫反应的作用,制备方法操作简便,疫苗免疫效果可靠。

Description

鸡新城疫油佐剂灭活苗 及其制备方法
本发明涉及含有抗原或抗体的医制品,具体讲是鸡新城疫疫苗及其制备方法。
鸡新城疫(ND)是严重危害养鸡业发展的主要疫病之一。目前,在养鸡生产中主要应用ND弱毒冻干苗,该苗免疫效果易受母源抗体影响,免疫后出现鸡群抗体不高或参差不齐,并且有相当一部分鸡抗体水平在免疫保护的临界线以下,一旦有强毒侵入便会导致鸡新城疫在鸡群中爆发流行。此外,现有饲料原粮中硒的含量低于0.03~0.05PPm。硒具有加强原发性免疫反应,促进动物体产生的IgM抗体与中和抗体等功能。
本发明的目的在于提供一种鸡新城疫油佐剂灭活苗及其制备方法,所制得的疫苗给鸡注射后在体内缓慢释放,促进鸡产生免疫反应。
为实现上述目的,本发明所采用的技术方案是:一种鸡新城疫油佐剂灭活苗,该疫苗由矿物油佐剂包裹着含鸡新城疫病毒(NDV)抗原的水相。
上述疫苗的制备方法是:取鸡新城疫病毒(NDV)给健康鸡胚(9~10日龄)接种,72小时后收集鸡胚尿囊液,经灭活后加入吐温--80和亚硒酸钠制成水相,再与矿物油(油相)按1∶3比例经胶体磨充分混合后制成油包水乳剂。
将NDV经鸡胚接种后收集鸡胚尿囊液,经灭活后加硒,再与油相混合成油包水乳剂,使用本发明提供的疫苗给鸡免疫注射后,乳剂的油滴会在鸡体内逐渐释放出来,从而起到少量多次抗原刺激作用,增强并维持鸡体内免疫反应。
以下结合实施例对本发明作进一步的详细说明。
实施例
鸡新城疫油佐剂灭活苗,是由矿物油佐剂包裹着含鸡新城疫病毒(NDV)抗原的水相,该疫苗中含有硒,其外观特征为白色乳剂,且无分层现象。
上述鸡新城疫油佐剂灭活苗,是采用以下方法制得的:取鸡新城疫病毒(NDV)给健康鸡胚(9~10日龄)接种,72小时后收集鸡胚尿囊液,经灭活后加入吐温--80和亚硒酸钠制成水相,再与矿物油(油相)按1∶3比例经胶体磨充分混合后制成油包水乳剂。
上述制备方法的具体实施过程如下:
步骤一
以NDV毒株按常规法接种9~10龄鸡胚,72小时后收集鸡胚尿囊液,加入4%的甲醛灭活,随加随摇,使甲醛最终浓度为0.1%。
该步骤主要是用于灭活鸡胚尿囊液病毒。另外,还可采用其它一些制剂进行灭活,具体内容有:
a:β--丙内脂灭活:在鸡胚尿囊液中加入10%的β--丙内脂,使其最终浓度为1/1500;
b:乙酰苯乙烯亚胺(Acety lethy lenimine-AEI)灭活:在尿囊液中加入10%的AEI,使最终浓度为0.1%,置30℃温箱中灭活8小时取出,加入20%的Na2SO3·5H2O溶液,使最终含量为0.5%,以中和AEI。
步骤二
取灭活后的鸡胚尿囊液,该菌液每100份加入4份的吐温--80,然后加入1%的亚硒酸钠,使亚硒酸钠的浓度为5PPm,制成水相。
此过程一方面用于提供硒源,另一方面,吐温--80(TWeen--80)属免疫增强剂、稳定剂。化学名为聚山梨醇脂--80,同类品有吐温--20。
步骤三
制备油相,以10#白油94份加6份司本--80混合后,每100毫升混合溶液再加2克硬脂酸铝为油佐剂。司本--80(SPan),用作乳化剂和增溶剂,化学名为失水山梨醇单油酸脂,SPan--80的同类品有SPan--20,SPan--40,SPan-60。所述硬脂酸铝属油质注射剂的助悬剂。
步骤四
将上述水相与油相按1∶3的比例经胶体磨充分混合制成油包水灭活苗。
本发明制得的油佐剂灭活苗,使用该疫苗给鸡进行免疫注射后,乳剂油滴会在鸡体内逐渐吸收,从而将抗原缓慢释放,以达到刺激和维持鸡体免疫反应的效果。

Claims (5)

1.一种鸡新城疫油佐剂灭活苗,其特征在于:该疫苗由矿物油佐剂包裹着含鸡新城疫病毒(NDV)抗原的水相。
2.根据权利要求1所述的鸡新城疫油佐剂灭活苗,其特征在于:疫苗中含有硒。
3.一种制备权利要求1所述的鸡新城疫油佐剂灭活苗的方法,其特征在于:取鸡新城疫病毒(NDV)给健康鸡胚(9~10日龄)接种,72小时后收集鸡胚尿囊液,经灭活后加入吐温--80和亚硒酸钠制成水相,再与矿物油(油相)按1∶3比例经胶体磨充分混合后制成油包水乳剂。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:将收集的鸡胚尿囊液,加入4%的甲醛灭活,使甲醛最终浓度为0.1%。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于:取灭活后的鸡胚尿囊液,该菌液每100份加入4份的吐温--80,然后加入1%的亚硒酸钠并使其最终浓度为5PPm,制成水相;以10#白油94份加6份司本--80混合后,每100毫升混合液再加2克硬脂酸铝为油佐剂制得油相;将上述水相与油相接1∶3的比例经胶体磨充分混合制成油包水灭活苗。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN102580082A (zh) * 2012-02-28 2012-07-18 肇庆大华农生物药品有限公司 一种禽用灭活疫苗及其制备方法
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