CN1195549C - 稳定的无定形氨磷汀组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及适宜于重新配制和非肠道给予患者的灭菌的稳定剂型，所述剂型包含无定形氨基烷基硫代磷酸二氢酯且特别是氨磷汀。本发明另外涉及制备这样剂型的方法，与现有存在的真空干燥的无定形氨磷汀相比较，剂型一般呈现增强的热稳定性。

Description

稳定的无定形氨磷汀组合物及其制备方法和用途
1.发明领域
本发明涉及S-2-(3-氨基丙基氨基)乙基硫代磷酸二氢酯(氨磷汀(amifostine))的热稳定剂型和制备相同物质的方法。本发明的重新配制剂型适合例如作为辐射防护剂或化学防护剂给予人。
2.发明背景
在U.S.专利3,892,824号中公开化合物S-2-(3-氨基丙基氨基)乙基二氢硫代磷酸酯(其也称作氨磷汀、ethiofos、Ethyol、NSC 296961和WR-2721且其在下文称作“氨磷汀”)和其它的氨基硫醇化合物。这些化合物最初是作为抗辐射药物(辐射防护剂)开发的，尤其是在暴露于x-射线或核辐射之前预先使用，以避免在军事冲突期间可能遇到的此类暴露的有害作用。
除了它的作为军事抗辐射药物的用途以外，已证实氨磷汀具有作为非军事辐射防护剂和化学防护剂的优良用途，即作为治疗前预先给予的防护剂以减少其在癌症治疗中使用化学疗法和放射治疗期间出现的不需要的副作用。Nygaard等，编辑，辐射防护剂和抗癌剂，Academic出版公司，纽约，第73-85页(1983)；Grdina等，Carcinogenesis(伦敦)6：929-931(1985)。另外，已报道当先于化学治疗剂或与化学治疗剂一起给药时，这些化合物提供保护作用以对抗化学治疗药物例如烷化剂如顺铂的副作用。Jordan等，Exp.Mol.Pathol.36：297(1982)；Doz等，Cancer Chemother.Pharmacol.28：308(1991)。相似地，已报道治疗前实验使用氨磷汀保护HIV感染的患者(AIDS)免于3’-叠氮基-3’-脱氧胸腺嘧啶核苷(AZT)疗法的有害的副作用。1990年11月29日公开的国际专利申请WO 90/14007。氨磷汀和它的衍生物已显示可发挥这些所报道的保护性作用而不影响所给予的治疗药物的有利性质。在化学疗法的情况中，人们相信这是由于保护性的硫醇和其它的代谢物选择性摄取进入到正常组织中。Yuhas，CancerRes.40：1519-1524(1980)；Yuhas，Cancer Treat.Rep.63：971-976(1979)。
氨磷汀和相关的氨基硫醇化合物也显示刺激骨髓生长。参见例如1996年8月22日公开的国际专利申请WO 96/25045和List等，Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.15：449[1403][摘要]。目前，氨磷汀作为在患有脊髓发育不良综合征的患者中的骨髓刺激剂处于II期临床试验。预先接触氨基硫醇化合物能够在化学疗法之后引起骨髓功能更迅速的恢复。List等，Semin.Oneol.23(4)增刊.8：58-63(1996)。
目前，氨磷汀表明可减少与在患有晚期卵巢癌或非小细胞肺癌患者中重复给予顺铂有关的蓄积性肾毒性。Physicians’Desk Reference第52版，第500-502页(1998)。
氨磷汀被认为是一种前药。通过经碱性磷酸酶催化的脱磷酸化，氨磷汀代谢为细胞保护性的游离的硫醇。参见例如Ryan，S.V.等，J.Clin.Pharm.36(4)：365-373(1996)。氨磷汀发挥保护作用而不显著影响所给予的治疗药物的有利性质，很大程度上是由于选择性摄取硫醇进入到正常组织中。
在其最常见的使用中，非肠道给予氨磷汀，包括通过大剂量注射和静脉输注。也将氨磷汀开发用于皮下给药。因为这些途径围绕人体的保护性屏障发生，剂型必须达到优越的纯度。由于剂型必须不含有微生物和不溶性颗粒，用于制备它的方法必须体现优良操作规范(“GMP”)，按照灭菌和治疗有效性，其将产生和维持产品所需要的质量。在治疗癌症和AIDS患者中，灭菌是特别重要的，因为在许多情况中，它们已危及免疫并因此对感染高度易感。
氨磷汀原料药(bulk)(其与剂型相区别)能够作为结晶三水合物原料药存在，其被认为是相对温度稳定的。Karle等，Acta Cryst.C44：135-138(1988)描述这样的晶形。然而，原料药并不灭菌，并因此不能重新配制为适宜于非肠道给予人的药品产物。
在雷明顿氏药剂学，第18版(1990)中描述有把原料药灭菌的几种方法。这些方法包括例如蒸汽灭菌，其中在最小温度121℃下使药物暴露于高压蒸汽。然而，这种和其它的需要加热的方法不能有效用于使原料药结晶氨磷汀灭菌。这是因为在大约70℃至大约75℃下结晶氨磷汀失去水。失去水有助于经水解反应的降解以形成磷酸和2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇。参见例如Risley，J.M.和Van Etten，R.L.，Biochem.Pharmacol.35：1453-1458(1986)。因此，通过把它溶解于水溶液中然后经膜过滤灭菌，使氨磷汀灭菌。主要的实践问题与原料药的包装有关，使用所谓“干法填充”或“粉末填充”方法的固体氨磷汀由此可避免这样的问题。这些问题包括生产灭菌的氨磷汀原料药、人工制备粉末的困难、把粉末研磨为可接受的粒子体积和流动性的需要、保持不含有颗粒、无菌条件的困难和在提供精确剂量到各个小瓶中的困难。
然而，在溶液中，氨磷汀对水解的降解仍然是敏感的。对于这个原因，先前方法已使经过滤的氨磷汀溶液灭菌，且其后在以下条件下把氨磷汀溶液冷冻干燥：在0℃下，放置在小瓶中的大约5mL的100mg/mL氨磷汀溶液和100mg/mL甘露糖醇贮存于冷冻干燥器中且然后在-45℃下固化。在-45℃下，将该小瓶保持2小时，此后，把冷冻干燥室抽真空至100μmHg。然后自身温度升至0℃达12小时，然后在0℃下维持2小时。最后自身温度升至25℃，在此温度下维持小瓶24小时。该方法产生适宜于非肠道给予患者的灭菌无定形形式的氨磷汀(其在下文称作“无定形氨磷汀I”)。Physicians’DeskReference，第51版(1997)第485-486页。该方法也易于生产含有预先确定量的灭菌、冷冻干燥氨磷汀的小瓶。
不幸的是，无定形氨磷汀I为热不稳定的，且在高于0℃的温度下放置一段时间后水解。例如，无定形氨磷汀I的一般样品在25℃下保存大约一个月形成大约6至7％重量的降解产物2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇。这就是本领域的现状，即经制订规章的当局批准氨磷汀的无定形形式在大约2℃至8℃之间贮存时，应具有24个月的贮存期限。参见例如，Ethyol欧洲产品特性概述(1997)(“EthyolSmPC”)。事实上，无定形氨磷汀I剂型通常在低于大约8℃的温度下包装、运输和贮存。另外，在美国，食品与药品管理局批准氨磷汀的无定形形式在大约2℃至8℃之间贮存时，应具有15个月的贮存期限。
温度不稳定性对制造商和使用者的包装、贮存和运输需要施加影响，这增加加工药物的费用并使它由医院和临床使用变得更加困难，并可甚至阻碍它在经常缺乏温度控制贮存维持能力的发展中国家的使用。
在公认需要比无定形氨磷汀I更加热稳定的氨磷汀的剂型中，研究已针对发现新的稳定的和灭菌的氨磷汀的剂型。例如，Jahansouz和同事研究氨磷汀的稳定性并提出无定形氨磷汀I的热不稳定性与其水含量的程度有关。Jahansouz，H.，等.Pharm.Res.7(9)：S195(1990)[摘要]。
最近，除尝试增加无定形氨磷汀例如无定形氨磷汀I剂型的稳定性以外，研究集中在产生稳定的和灭菌的结晶剂型。例如，据报道氨磷汀“通过伴随改变湿度处理冷冻干燥产物在从无定形至结晶相中经历固体状态的跃迁”。另外，据称通过加入一定的赋形剂增加氨磷汀重新水合形式的稳定性。Zadeii，J.M.，等.Pharm.Res.8(10)：S172(1991)[摘要]。然而，该摘要未详细描述任何重新水合方法，它也未描述由它公开的两种赋形剂提供的稳定程度。另外，该摘要未详细提供具体关于赋形剂应如何和何时与氨磷汀联合以得到据称更稳定的重新水合形式(即无论赋形剂是否在氨磷汀水合前、水合中间或水合后与其联合)，或者该方法对不同的赋形剂是否应为不同的。最后，人们发现灭菌的、热稳定的结晶氨磷汀的新的剂型。U.S.专利5,424,471号和5,591,731号。
目前，氨磷汀的灭菌结晶剂型以商品名Ethyol销售。Physicians’Desk Reference，第52版(1998)第500-502页。U.S.专利5,424,471号和5,591,731号描述剂型的结晶结构和制备，该剂型呈现比无定形氨磷汀I更大的热稳定性。通常将原料药氨磷汀溶解在溶剂溶液(在低于0℃下冷却使氨磷汀沉淀出来)中，随后通过化合物的灭菌、沉淀和冷冻干燥来制备该热稳定结晶剂型。由于结晶性和因此而来的稳定性，在氨磷汀的剂型中每分子需要三个水分子，用于提供最终产品的冷冻干燥必须小心控制以确保所需要的水合程度。一旦制备，稳定的结晶剂型必须在室温下贮存以维持最小的降解：当在40℃下保存14天时，它呈现小于2％重量的降解。U.S.专利5,591,731号。
尽管新开发的氨磷汀的灭菌结晶剂型减少或消除许多与无定形氨磷汀I有关的问题，这样的生产是昂贵的、困难的和/或危险的。例如，产生结晶Ethyol需要使用易爆溶剂，其必须小心操作并严格与氧隔绝。这样的溶剂也含有通常在水中未发现的杂质，这样的杂质必须除去以确保所述剂型适宜于重新配制并给予患者。例如，乙醇经常含有丙酮、甲醇、H2SO4、MnO4和其它的毒性残留物。参见例如Aldrich目录(1998-1999)，第746-747页。结晶氨磷汀剂型的生产另外需要长的冷冻干燥时间以确保精确的氨磷汀水合。
鉴于以上描述的那样和其它的与产生氨磷汀的灭菌结晶剂型有关的困难，存在需要稳定的、灭菌的无定形剂型、以及它的生产的有效的和便宜的方法。
本发明也包括非灭菌和/或原料药热稳定的无定形氨磷汀。就申请人的知识而言，迄今为止并未公开无定形热稳定的氨磷汀。在优选实施方案中，本发明包括氨磷汀的热稳定剂型。
3.发明概述
本发明包括非灭菌和/或原料药热稳定的无定形氨磷汀。就申请人知识而言，先前并未公开无定形热稳定的氨磷汀。在优选实施方案中，本发明包括氨磷汀的热稳定剂型。
本发明包括以下热稳定和灭菌剂型：其包含无定形氨磷汀的剂型；其包含氨磷汀的无定形剂型；和用适宜用药学上可接受的溶媒重新配制为适用于非肠道给予受治疗者的注射用无颗粒药用产品的剂型，其包含无定形氨磷汀。
本发明也包括含有灭菌无定形氨磷汀的室温稳定剂型。
本发明也包括含有灭菌无定形氨磷汀的室温稳定无定形剂型。
本发明另外涉及含有灭菌无定形氨磷汀的冷冻稳定剂型。
本发明剂型可包含稳定剂。稳定剂与氨磷汀的摩尔比优选为大约0.05至5.0之间，更优选为大约0.1至1.0之间，且最优选为大约0.2至0.5之间。优选稳定剂为具有酰胺或氨基酸部分的化合物。特别优选的稳定剂为烟酰胺。
本发明剂型也可包含赋形剂，适宜的赋形剂包括(但不局限于)氯化钠、枸橼酸、酒石酸、明胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠和烃类例如(但不局限于)葡萄糖、蔗糖、山梨醇、肌醇、葡聚糖、甘露糖醇和羧甲基纤维素钠盐。最后，所述剂型也可包含多达约20％的水而不明显丧失热稳定性。
本发明的优选剂型包含无定形氨磷汀、烟酰胺和PVP。
本发明另外涉及制备氨磷汀的热稳定和灭菌无定形剂型的方法，并涉及该方法的产品。
3.1定义
如在此使用的术语“原料药氨磷汀”或“原料药”意指其用于制备剂型但不适用于非肠道给予患者的氨磷汀的形式。所述术语包括如由U.S.专利3,892,824号公开的氨磷汀，包括(但不局限于)氨磷汀的单-、二-和三水合物形式。
如在此使用的那样，当用于描述成分或产物时，术语“结晶”意指该成分或产物是用X-射线衍射测定的结晶。参阅如雷明顿氏药剂学，第18版第173页；美国药典，第23版(1995)第1843-1844。
如在此使用的那样，术语“无定形”意指如由X-射线衍射测定的那样，所提及的成分或产物不是结晶。
人们将意识到多成分产物例如含有氨磷汀和赋形剂和/或稳定剂的产物可具有结晶和无定形成分，例如无定形氨磷汀和结晶赋形剂和/或稳定剂。
如在此使用的那样，当与氨磷汀联合使用时，术语“降解”和“分解”指的是由氨磷汀产生2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇(WR 1065)和磷酸。
如在此使用的术语“无定形氨磷汀I”意指氨磷汀的剂型，它包含无定形氨磷汀且在大约5℃下2年内其给出平均大约3.5％的降解产物(即2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇)。如在以上本发明的背景部分描述的制备无定形氨磷汀I的实例。
如在此使用的术语“无定形氨磷汀II”指的是本发明的剂型，它适宜于重新配制和非肠道给予患者。特别是无定形氨磷汀II指的是如在此描述的无定形氨磷汀的剂型。
如在此使用的术语“稳定性”和“热稳定性”指的是组合物当在特别温度下保持指定的时间期内抵御降解或分解的能力，优选在惰性气氛下。测定稳定性的适宜的方法在此定义。
如在此使用的术语“热稳定”意指比无定形氨磷汀I(即在以上本发明背景部分描述的先前市售的无定形剂型)更稳定。
如在此使用的术语“稳定剂”意指其当以足够量与原料药氨磷汀混合时且用于产生氨磷汀剂型的一种化合物或化合物的混合物，以增加所述剂型的热稳定性，例如通过减少由它在额外的时间形成的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇的量。
如在此使用的那样，通过使用术语“之间”定义的数目或值的范围包括用于描述该范围的具体数目或值。
如在此使用的那样，术语“月”意指大约26天至大约33天的时间期。
如在此使用的那样，术语“重量百分数”当用于描述在剂型中降解产物的量时意指基于该剂型中最初的氨磷汀的重量的降解产物的重量。
如本领域技术人员已知的那样，加速研究能够用于测定稳定性和这些温度。参见例如L.Lachman，等。工业药剂学的理论和实践，第766-67页(1986)。当在特定的温度下保持特定的时间时，化合物或化合物的混合物降解越少，热稳定性越高。
如在此使用的术语“冷冻”或“冷冻条件”意指维持温度在大约1℃至大约8℃之间。
如在此使用的术语“冰冻”或“冰冻条件”意指维持温度在大约0℃以下，特别是在大约0℃至大约-20℃之间。
如在此使用的术语“无颗粒”意指为灭菌的、适宜用于原料药注射、静脉输注或皮下给药且满足在美国药典第1816页(第23版，1995)中描述的颗粒物质试验的溶液。具体说来，如果在溶液中具有大于10μm直径的颗粒的平均数目不超过每容器6000个并且在溶液中具有大于25μm直径的颗粒的平均数目不超过每容器600个，那么溶液即为无颗粒的。
3.2图
图1.如由U.S.专利5,591,731号描述制备结晶氨磷汀的粉末x-射线衍射图。
图2.其中烟酰胺用作稳定剂(8∶1氨磷汀对烟酰胺的重量比)的本发明无定形氨磷汀的剂型的粉末x-射线衍射图。该衍射图含有可清晰分辨的峰，其中2θ大约等于以下值：7.9、13.0、16.1、27.4和32.8。
图3.烟酰胺的粉末x-射线衍射图。
图4.如由U.S.专利5,591,731号描述制备的(A)结晶氨磷汀的粉末x-射线衍射图与其中烟酰胺用作稳定剂(8∶1氨磷汀对烟酰胺的重量比)的(B)本发明无定形氨磷汀的剂型的比较。
4.发明的详细描述
在本发明之前，无定形氨磷汀(无定形氨磷汀I)的可获得的药学上有用的剂型为热不稳定的，且例如当在25℃下保持一个月时，一般得到大约6％重量的降解产物(即2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇)。由于它的温度不稳定性，无定形氨磷汀I一般在低温(通常在8℃下，例如大约5±3℃)下运输和贮存以预防它的降解。现在，本发明提供无定形氨磷汀(无定形氨磷汀II)的剂型，其意想不到的比无定形氨磷汀I更加热稳定。
本发明能够应用于其它的氨基烷基磷酸二氢酯，且因此提供这些氨基烷基磷酸二氢酯的更稳定的剂型。在本发明中适宜于使用的氨基烷基磷酸二氢酯包括(但不局限于)S-2-(3-氨基丙基氨基)乙基硫代磷酸二氢酯(氨磷汀)、S-2-(3-甲基氨基丙基氨基)乙基硫代磷酸二氢酯(WR-3689)、S-2-(3-乙基氨基丙基氨基)乙基硫代磷酸二氢酯、S-2-(3-氨基丙基氨基)-2-甲基丙基硫代磷酸二氢酯、S-2-(2-氨基乙基氨基)-2-二氢硫代乙基磷酸酯、S-2-(4-氨基丁基氨基)-2-乙基硫代磷酸二氢酯、S-2-(5-氨基戊基氨基)-2-乙基硫代磷酸二氢酯、S-2-(6-氨基己基氨基)-2-乙基硫代磷酸二氢酯、S-2-(2-甲基氨基乙基氨基)-2-乙基硫代磷酸二氢酯、S-2-(3-甲基氨基丙基氨基)-2-乙基硫代磷酸二氢酯、1-丙硫醇-3-[[3-(甲基氨基)丙基]氨基]-硫代磷酸二氢酯(WR-151327)和它的游离的硫醇形式(WR-151326)和二硫醚(disulfide)[2-[(氨基丙基)氨基]乙硫醇]-N，N’-二硫醇二-2，1-乙二基)双-1，3-丙二胺)(WR-33278)。在本发明优选实施方案中，所述氨基烷基磷酸二氢酯为氨磷汀。
本发明尤其提供适宜于重新配制和非肠道给予患者的无定形氨磷汀的药用剂型，其能够在室温和冷冻温度下便利地运输、贮存和加工而具有比无定形氨磷汀I更少的降解产物。因此本发明(无定形氨磷汀II)剂型提供溶液至长期需要：本发明使相对低的费用的氨磷汀剂型更易于运输至和更易于贮存在缺乏对无定形氨磷汀I需要的温度控制贮存和维持能力的医院和诊所中。
本发明部分基于意想不到的发现，即当与氨磷汀一起混合时，具体量的特定化合物能够用于产生具有减少的降解速率的无定形剂型。这些特定的化合物在此称作“稳定剂”。不受到理论的限制，人们相信这些稳定剂与氨磷汀的硫原子形成范德华力或相似的弱分子内作用力。这些相互作用可阻止硫原子的活化(例如，质子化作用)。这些稳定剂也可抑制水与氨磷汀的磷原子的相互作用，且防止亲核试剂进攻氨磷汀的磷原子。
由于已发现一些稳定剂的存在干扰剂型样品中氨磷汀的含量测定，通过测量作为温度和时间函数的氨磷汀降解或分解产物的形成，优选测定包含稳定剂的剂型的稳定性。这样的产物包括(但不局限于)2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇(氨磷汀的主要降解产物)和磷酸。
人们也发现无定形氨磷汀的剂型的稳定性依赖用于制备它的冷冻干燥方法，且混合有氨磷汀和稳定剂的样品不必得到更稳定的剂型。甚至更意想不到的发现是与先有技术的教义相反，包含不同量水的无定形氨磷汀的剂型可为热稳定的。
结果，本发明涉及氨磷汀的热稳定剂型。特别是它涉及其当在40℃下贮存一周时呈现小于5％重量的降解的剂型，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量；优选当在40℃下维持一周时呈现小于4％重量的降解，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量；且更优选当在40℃下维持一周时呈现小于3％重量的降解，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
在另一个实施方案中，当在25℃下维持一个月时本发明的剂型呈现小于5％重量的降解，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量；优选当在25℃下维持一个月时呈现小于4％重量的降解，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量；更优选当在25℃下维持一个月时呈现小于3％重量的降解，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量；且最优选当在25℃下维持一个月时呈现小于2％重量的降解，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
在另一个实施方案中，当在5℃下维持大约两年时本发明的剂型呈现小于3％重量的降解，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量；优选当在5℃下维持大约两年时呈现小于2％重量的降解，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量；且更优选当在5℃下维持大约两年时呈现小于1％重量的降解，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
在另一个实施方案中，本发明涉及包含基本上无定形氨磷汀的热稳定剂型。热稳定剂型优选包含至少80％(重量)无定形的氨磷汀。热稳定剂型更优选包含至少90％(重量)无定形的氨磷汀。本发明也涉及含有无定形氨磷汀的热稳定剂型。
在另一个实施方案中，本发明涉及包含氨磷汀的热稳定、基本上无定形的剂型。热稳定剂型优选为至少80％(重量)的无定形氨磷汀。热稳定剂型更优选为至少90％(重量)的无定形氨磷汀。本发明也涉及包含氨磷汀的无定形热稳定剂型。
本发明另一个实施方案提供包含在大约0至大约20％重量之间的水量的热稳定剂型，优选在大约0至大约15％重量之间，且更优选在大约0.5至大约6％重量之间。
本发明另外涉及包含一种或多种稳定剂和任选一种或多种赋形剂的氨磷汀的热稳定剂型。稳定剂对氨磷汀的摩尔比优选在大约0.05至大约5.0之间，更优选在大约0.1至大约1.0之间，且最优选在大约0.2至大约0.5％重量之间。
如以上那样，包含一种或多种稳定剂和任选一种或多种赋形剂的热稳定剂型也可包含在大约0至大约20％重量之间的水量，优选在大约0至大约15％重量之间，且更优选在大约0.5至大约6％重量之间。每一个本发明的剂型能够作为精制的饼状(elegant cake)产物(例如在小于60秒内溶解)来产生。
本发明另外涉及制备无定形氨磷汀的热稳定剂型的方法。在该方法中，氨磷汀可与一种或多种稳定剂和/或一种或多种赋形剂混合。如以下清楚描述的那样，该方法包含借助这些方法可将氨磷汀、水、稳定剂和赋形剂混合的所有的方法。例如，在冷冻干燥原料药氨磷汀之前、冷冻干燥期间、就地形成或冷冻干燥之后，氨磷汀可以任何顺序与稳定剂混合。因为几种不同的稳定剂可用于制备本发明的剂型，在其制备期间每一种可以任何顺序与氨磷汀一起或分开混合。
然而，已发现创制无定形氨磷汀的热稳定剂型(例如无定形氨磷汀II)的特别经济和有效的方法包括形成包含原料药氨磷汀、稳定剂和任选赋形剂的单一溶液。按照本发明，小瓶填充包含氨磷汀和任选的稳定剂和/或赋形剂的灭菌过滤的溶液。该方法特别有利之处是用于形成溶液的溶剂可为纯水，它替代用于产生灭菌结晶氨磷汀组合物所需要的乙醇/水混合物。然而，本发明包括使用其它的溶剂，且特别是具有pHs在大约3至大约11之间的含水溶剂，更优选在大约6至大约9之间，且最优选在大约7至大约8之间。已知原料药氨磷汀在碱性溶液中更稳定。Risley，J.M.和Etten，R.L.，Biochem.Pharmacol.35：1453-1458(1986)。
在填充氨磷汀溶液之后，把小瓶放入冷冻干燥器中然后抽真空。冷冻干燥器可预先冷冻。将小瓶保持在足以除去明显的溶剂部分的温度和压力下。一般并且如本领域技术人员熟知的那样，在接近冷冻干燥循环结束时增加小瓶的温度以确保除去要求量的溶剂。然而，已发现以下详细描述的新的干燥方法形成先前认为不可能用于非结晶剂型的具有均匀性(consistencies)和稳定性的饼状产物。此外，本发明的干燥方法有助于确保如果本发明剂型(倒如，无定形氨磷汀II)含有稳定剂，那么可得到稳定剂的最大稳定效果。
尽管以下冷冻干燥条件并不意味着限制，已发现当冷冻干燥或冻干时最易于形成无定形氨磷汀II，方法包括以下步骤：在冷冻循环期间冷冻氨磷汀溶液以形成冷冻混合物；抽真空(真空)冷冻干燥室；在一级干燥循环期间(primary drying cycle)干燥冷冻的混合物，它包括至少一次一级干燥阶段。该方法可另外包括使用二级干燥循环进一步干燥，它包括至少一次二级干燥阶段、和/或干燥方法，例如使用干燥剂、干燥器、干燥塞(stoppers)等。一旦完成冷冻干燥，优选将惰性气体例如氮充入到含有冻干剂型的小瓶中。
冷冻循环优选持续大约1小时至大约15小时，更优选为大约2小时至大约10小时，且最优选为大约5小时至大约8小时。冷冻循环期间冷冻干燥器的温度优选保持在大约-70℃至大约-10℃之间的平均范围内，更优选在大约-65℃至大约-30℃之间，且最优选在大约-55℃至大约-40℃之间。
冷冻循环临近结束或刚好完成，将冷冻干燥器抽真空以便在初级干燥循环的平均温度下把冷冻的混合物暴露于足以除去溶剂(其以液相和/或固相形式存在)的压力(真空)下。当溶剂为水时，优选压力为在特定的干燥循环温度下低于水的蒸气压。通过 CRC化学和物理 手册，第D-198页(64版；1983-1984)提供这样的蒸气压。
在初级干燥循环发生时或发生后，冷冻干燥器可被抽真空替代。在该循环期间除去冷冻混合物中的大多数水或溶剂。该循环特征为平均压力、平均温度和持续时间，但是可含有一个或多个阶段，它们的每一阶段特征为平均压力、平均温度和持续时间。然而，一般优选初级干燥循环仅包含一个持续大约8小时至大约100小时之间的阶段，更优选为大约16小时至大约86小时之间，且最优选为大约24小时至大约72小时之间。冷冻干燥器在初级干燥循环期间优选温度维持在平均大约-45℃至大约10℃之间，更优选在大约-35℃至大约0℃之间，且最优选在大约-30℃至大约-10℃之间。
初级干燥循环后任选接着二级干燥循环，在此期间除去残余的水或溶剂。该循环特征为平均压力、平均温度和持续时间，但可含有一个或多个阶段，它们的每一阶段特征为平均压力、平均温度和持续时间。然而，一般优选二级干燥循环仅包含一个持续大约0.5小时至大约48小时之间的阶段，更优选为大约2小时至大约36小时之间，且最优选为大约6小时至大约24小时之间。优选冷冻干燥器在二级干燥循环期间的温度保持在平均大约-25℃至大约40℃之间，更优选在大约-15℃至大约40℃之间，且最优选在大约0℃至大约35℃之间。
替代二级干燥循环，或除它们以外，可使用任选的干燥方法以进一步干燥剂型。干燥方法包括(但不局限于)使用于燥剂、干燥器、干燥塞等。
例如，如果最初把小瓶置于保持在大约-20℃至大约15℃之间温度下的冷冻干燥室中，已发现饼状产物形成，之后，于一段时间内将冷冻干燥室的搁板温度降至大约-70℃至大约-30℃之间，以使氨磷汀/稳定剂溶液均匀冷冻。然后将冷冻干燥室抽真空以除去溶剂。如果溶剂为水时，优选把压力维持在大约10μmHg至大约500μmHg之间，更优选为大约75μmHg至大约200μmHg之间。一般在压力达到平衡后，于一定时间内把室的温度增加至大约-35℃至大约25℃之间使足以除去大部分溶剂。如在以下更详细描述的那样，已发现在几分钟至几天的时间范围的期间内，通过把小瓶暴露于多种不同的温度和压力范围可最佳形成适宜的饼状产物。
完成冷冻干燥过程得到包含无定形氨磷汀的稳定的氨磷汀剂型，其适宜于重新配制为适用于非肠道给予患者的无颗粒溶液。然而，优选在小瓶密封前冷冻干燥室应填充惰性气体例如氮气、氩气或氙气。已发现这有助于剂型的稳定性。然后在依所述剂型的要求的贮存期限而定的温度下将小瓶贮存和运输。特别适宜的温度为大约0℃至大约25℃之间，最优选为大约4℃。
已发现通过变化温度、时间和干燥循环的次数，能够得到具有不同稳定性和水分含量的产物，所有这些包括在本发明范围内。例如，Karl Fisher滴定可用于测定水分含量。
按照本发明，任何量的稳定剂可与氨磷汀联合，只要该量恰好足以增加冷冻干燥产物的热稳定性。然而，优选每1.0mol纯原料药结晶氨磷汀三水合物(FW＝268g/mol)应使用大约0.05mol至大约5.0mol之间的稳定剂。该量更优选为在大约0.1mol至大约1.0mol之间，且最优选为在大约0.2mol至大约0.5mol之间的原料药结晶氨磷汀三水合物。然而，如本领域技术人员认识到的那样，所加入稳定剂确切的量依多种因素而定，包括稳定剂的化学和物理性质和原料药氨磷汀的纯度和水分。后者是特别值得注意的，因为原料药氨磷汀是以结晶形式和以变化的水合程度存在的。已描述原料药氨磷汀作为每分子具有一至三个水分子的结晶形式存在，但也可以其它的形式存在。通过在U.S.专利3,892,824号中公开的方法，可制备原料药氨磷汀，其通过引用结合到本文中。
本发明的稳定剂是其为药学上可接受的化合物或化合物的混合物且当与氨磷汀联合时并不促进它在溶液中的降解，因此当室温下作为固体贮存时也增强它的稳定性。适宜的化合物包括酰胺和胺例如(但不局限于)烟酰胺、烟酰胺衍生物、烟酸、烟酸衍生物和多种天然的和合成的氨基酸和氨基酸衍生物，包括(但不局限于)甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和天冬酰胺。
优选稳定剂为烟酰胺、烟酰胺衍生物、烟酸和烟酸衍生物。当烟酰胺用作稳定剂时，其优选以氨磷汀对烟酰胺的大约2∶1至大约12∶1之间的重量比来使用，更优选为大约4∶1至大约10∶1之间。最优选重量比为大约8∶1(氨磷汀对烟酰胺)。
已发现为了通过冷冻干燥氨磷汀/稳定剂溶液得到精致的饼状物，原料药氨磷汀的浓度应在大约10mg/mL至大约200mg/mL之间，更优选在大约50mg/mL至大约150mg/mL之间，且最优选为大约75mg/mL至大约125mg/mL之间。从以上提供的优选的氨磷汀对稳定剂的摩尔比，可测定优选浓度的稳定剂。如本领域技术人员很快认识到的那样，易于从文献中确定的所需稳定剂的溶解度也可在测所需的浓度中起作用。
值得一提的是当与一定的冷冻干燥方法联合使用时，一些稳定剂和一些浓度的稳定剂能够得到结晶或部分结晶而不能得到纯的无定形产物是重要的。例如，当在本发明包括的冷冻干燥条件下，将烟酰胺以4∶1的重量比用作稳定剂时，有时能够得到结晶剂型。另外，也能够得到具有结晶或部分结晶稳定剂和/或赋形剂的剂型。然而，本发明涉及无定形剂型或含有无定形氨磷汀的剂型。
如以上提及的那样，在不存在稳定剂的情况下，原料药氨磷汀的冷冻干燥可任选发生。如果在不存在稳定剂的情况下冷冻干燥的话，可在冷冻干燥之后加入稳定剂。相似地，在原料药氨磷汀灭菌和冷冻干燥之前、灭菌和冷冻干燥期间或灭菌和冷冻干燥之后可将赋形剂加入到本发明剂型中。人们发现用于该目的的经常以联合形式使用的赋形剂包括(但不局限于)氯化钠、枸橼酸、酒石酸、明胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠和烃类例如(但不局限于)葡萄糖、蔗糖、山梨醇、肌醇、葡聚糖、甘露糖醇和羧甲基纤维素钠盐。尽管甘露糖醇不是优选。
特别优选的赋形剂为PVP，它以多种不同粘度-平均分子量从市场上得到。具有粘度-平均分子量30(PVP30)的聚乙烯吡咯烷酮为特别优选的赋形剂。当PVP用作赋形剂时，其优选以氨磷汀对PVP的大约2∶1至大约50∶1之间的重量比来使用，更优选为大约5∶1至大约15∶1。最优选重量比为大约10∶1(氨磷汀对PVP)。
除在此提到的赋形剂以外，能够使用其它的本领域的技术人员已知的赋形剂。然而，优选的是赋形剂并非游离磷酸盐的来源，因为已报道这促进氨磷汀的降解。参见例如，Zadeii，J.M.，等.Pharm.Res.8(10)：S172(1991)。
无论何种赋形剂掺入到本发明制剂中，当加入时赋形剂必须灭菌，或在对氨磷汀灭菌的相同方法期间灭菌。本发明一个实施方案包括灭菌步骤。例如，通过灭菌过滤溶液，例如通过0.2μm孔大小的滤膜，可影响灭菌。也可使用本领域技术人员已知的其它的灭菌方法。适宜的灭菌和非灭菌赋形剂可从下列厂商购得：EM工业公司，Hawthome，NY；J.T.Baker公司，Hayward，CA；Spectrum QualityProducts公司，Gardena GA；Fisher科学国际公司，Hampton NH；Aldrich化学公司，Milwaukee WI；艾博特实验室公司，北芝加哥IL；BaxterHealthcare公司，Deerfield IL和Amresco公司，Cleveland OH。
可通过无菌填充适宜的含有灭菌溶液的容器以开出如上描述的氨磷汀含量的处方，以单一剂量容器形式或多剂量容器提供本发明剂型。人们打算在用适宜的灭菌稀释剂就地重新配制时这些填充的容器将使固体组合物迅速溶解，给出用于给药所要求的氨磷汀浓度的适宜的灭菌溶液。如在此使用的那样，术语“适宜的容器”意指能够维持灭菌环境的容器例如小瓶，其能够传递通过加塞的方法密封的真空干燥的产物。另外，适宜的容器意指体积的适宜性(考虑溶液的体积以容纳(held upon)真空干燥组合物的重新配制)和容器材料的适宜性(一般为I型玻璃)。所使用的加塞剂方法，例如灭菌橡胶密封物或等价物，应理解为虽然提供以上提及的密封，但却允许用于导入稀释剂例如用于注射的灭菌水(USP)、生理盐水(USP)、或在水中的5％葡聚糖(USP)的目的之入口，用于重新配制所要求的氨磷汀溶液。用于药用产物例如本发明那些物质的这些和其它的容器适宜性方面对药学领域实践中的技术人员是熟知的。
本发明灭菌、热稳定的药用组合物(剂型)适用于非肠道给药，例如静脉、肌内、腔内、鞘内和皮下注射。这些剂型已增强超过先前的无定形氨磷汀剂型的温度稳定性，具有良好的物理外观且在预防和治疗辐射损伤和化学治疗损伤中是有效的。
5.实施例
以下实施例打算举例说明本发明并且不以任何方式构成对它们的限制。
5.1.实施例1
包含烟酰胺的稳定的无定形氨磷汀剂型
在25℃下，通过0.2μm滤膜将100mg/mL氨磷汀和12.5mg/mL烟酰胺(Aldrich)的水溶液灭菌过滤，且然后分成5mL等分试样，把它们中的每一个转移至10mL小瓶中。将冷冻干燥塞放于小瓶中并把样品置于冷冻干燥器的搁板上维持在5℃。于60分钟内把搁板温度降低至-45℃，在此温度下保持大约3小时。然后把冷冻干燥器的冷凝器打开并把室抽真空至大约100μmHg。在室真空已达到平衡后，于60分钟内把搁板温度跃升至-25℃，其间保持真空度恒定。将搁板温度在-25℃保持大约48小时。然后于60分钟内把搁板温度跃升至-10℃，再在-10℃下保持24小时。最后，于60分钟内把搁板温度跃升至约35℃且然后在该温度下维持大约24小时。此时，将室内充满氮气以达到大约650mmHg的压力并将小瓶机械加塞。该方法得到热稳定的、真空干燥的单一剂量小瓶，其含有为精致的饼状物的大约500mg氨磷汀(无水基础)和62.5mg烟酰胺稳定剂。
把根据本方法制备的剂型进行稳定性试验，并得到以下表1中所提供的结果。
5.2.实施例2
包含烟酰胺和PVP的稳定的无定形氨磷汀剂型
在25℃下，通过0.2μm滤膜将100mg/mL氨磷汀、12.5mg/mL烟酰胺(Aldrich)和10mg/mL聚乙烯吡咯烷酮30(PVP30：BASFAktiengesellschaft，Feinchemie，0-6700 Ludwigshafen，德国)的水溶液灭菌过滤，且然后分成5mL等分试样，把它们中的每一个转移至10mL小瓶中。将冷冻干燥塞放于小瓶中并把样品置于冷冻干燥器的搁板上维持在5℃。于60分钟内把搁板温度降低至-45℃，在此温度下保持大约3小时。然后把冷冻干燥器的冷凝器打开并把室抽真空至大约100μmHg。在室真空已达到平衡后，于60分钟内把搁板温度跃升至-25℃，其间保持真空度恒定。将搁板温度在-25℃下保持大约12小时。然后于60分钟内把搁板温度跃升至-10℃，且然后在-10℃下保持12小时。最后，于60分钟内把搁板温度跃升至35℃且在该温度下维持大约6小时。此时，将室内充满氮气以达到大约650mmHg的压力并将小瓶机械加塞。该方法得到热稳定的、真空干燥的单一剂量小瓶，其含有为精致的饼状物的大约500mg氨磷汀(无水基础)、62.5mg烟酰胺和50mg PVP30。
把根据本方法制备的剂型进行稳定性试验，并得到以下表4中所提供的结果。
5.3.实施例3
结晶度的测定
如同例如在雷明顿氏药剂学，第18版第173页；美国药典，第23版(1995)第1843-1844中描述的那样，通过粉末x-射线衍射可测定本发明剂型的结晶度。
图2显示按照实施例1的方法制备的无定形氨磷汀剂型的一般粉末x-射线衍射谱，使用镍-过滤CuKα辐射线用Geiger-Muller检测器测量。该衍射图含有无定形材料的宽基线性质。在2θ≈14.8、25.6和26.3处的峰归因于烟酰胺和/或噪声。从图3来看，该排布是清晰的。它显示结晶烟酰胺的x-射线粉末衍射图。
图4显示如由U.S.专利5,591,731号描述的那样制备的结晶氨磷汀x-射线衍射图与本发明无定形氨磷汀剂型之间的差异，其中烟酰胺用作稳定剂(8∶1氨磷汀对烟酰胺的重量比)。
5.4.实施例4
进行稳定的无定形氨磷汀剂型的稳定性试验的优选方法
在5℃和25℃下，对如在实施例1中所述得到的灭菌无定形氨磷汀剂型的稳定性进行。将样品贮存在密封的、充满氮的10mL试管小瓶中。
这些试验的结果可与经常规方法测定的在其它的温度下的稳定性相关联。参见例如，L.Lachman，等.工业药剂学的理论和实践，第766-67页(1986)，用于稳定性预测一般性讨论。从在此进行的试验结果，在25℃下保持一个月的剂型的分解物一般等于在5℃下保持两年的同一剂型的分解物的大约一半。
在每一个试验阶段结束时，测定在小瓶中的无定形氨磷汀的水分的含量、硫醇的含量和/或氨磷汀的含量。在一些情况中，经KarlFischer滴定测定含水量。由于在压力下氨磷汀可经历水解产生2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇(“WR-1065”)和磷酸，测定该硫醇的量得到氨磷汀的稳定性的指标。然而，测量氨磷汀的量并非优选，因为已发现稳定剂例如烟酰胺干扰测定样品中的氨磷汀量的试验。其后，通过分析分解产物且特别是WR-1065来测定样品的分解物为优选。使用以下方法，经高效液相色谱法(HPLC)进行硫醇含量的分析：
1.标准品和样品的制备
可调整重量和体积，使保持相同的最终浓度。制备后，立即将溶液在冷冻下贮存和/或贮存到冷冻的自动进样器中。贮存期限：24小时。
1.1氨磷汀标准溶液的制备
准确称重大约30.0mg氨磷汀标准品到10mL体积的烧瓶中。溶解在5mL水中并用甲醇稀释至体积。
1.2 2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇二盐酸盐(WR-1065)标准溶液的制备
准确称重大约7mg WR-1065标准品到100mL体积的烧瓶中。溶解并用流动相稀释至体积。
1.3用于氨磷汀含量分析的氨磷汀(药物物质)的制备
准确称重大约30.0mg氨磷汀到10mL体积的烧瓶中。溶解在5mL水中并用甲醇稀释至体积。
1.4用于相关物质的氨磷汀(药物物质)的制备
准确称重大约150.0mg氨磷汀标准品到10mL体积的烧瓶中。溶解并用水稀释至体积。
1.5用于注射的氨磷汀的制备
借助大约9mL水溶解一种药物产品的含量。定量转移样品至50mL体积的烧瓶中并用水稀释至体积。转移6mL该溶液至25mL体积的烧瓶中，加入6.5mL水并用甲醇稀释至体积。
2.系统适宜性(使用标准溶液)
氨磷汀(使用标准溶液1.1)
6次重复注射氨磷汀的％RSD      ≤％
拖尾因子                      ≤2
理论塔板数                    ≥1,000
WR-1065(使用标准溶液1.2)
6次注射的％RSD                ≤4
拖尾因子                      ≤2
理论塔板数                   ≥7,000
3.装重和材料(如下所述或等价物)
装置：配备UV检测器的HPLC系统
材料：氨磷汀标准品、WR-1065标准品、浓磷酸(H3PO4)(HPLC级)、甲醇(MeOH)(HPLC级)、纯水(16-meg-ohm或更大)和1-辛磺酸钠盐(OSA)(HPLC级)。
HPLC层析条件
柱特性：
填充材料：Beckman Ultrasphere ODS (USP L1)
尺寸：4.6×250mm
粒子大小：5μm
流动相：甲醇/磷酸水溶液，pH2.5，5mM OSA(50/50)
1.将0.54g OSA溶于500ml水中，用磷酸调至pH2.5。
2.用甲醇稀释至1000mL。
3.过滤并把流动相脱气。
检测：220nm吸收
流速：1.0mL/min
注射体积：10μL
柱温：环境
样品温度：4℃
4.方法
注射样品和标准溶液，记录氨磷汀峰的保留时间(大约4分钟)。标准氨磷汀峰和样品制备液峰的保留时间应在10％之内相一致以证实氨磷汀在样品中的定性。
5.计算
用于测定样品分解程度的计算与在U.S.专利5,591,731号中描述的那些方法相同，其通过引用结合到本文中。
5.5实施例5
无定形氨磷汀II的稳定性结果
使用在实施例4中描述的方法，经对本发明剂型进行试验得到的典型结果概述如下。通过在实施例1中描述的方法制备在表1中提供的数据的剂型。因为核查的数据清楚，本发明剂型的稳定性令人惊奇地不依赖于它们的含水量。
表1
温度t(℃)   稳定性的时间(天) ％WR-1065 含水量(％)
    55     2020     1.321.43     0.520.50
    25     20     3.02     0.75
    25     20     3.07     0.86
    2525     9797     5.735.94     n.d.n.d.
温度大约准确至±3℃。
n.d.＝未测定。
已观察到通过改变在实施例1中描述的干燥阶段的时间长度可改变本发明剂型的稳定性。例如，当在-25℃下把按实施例1制备的小瓶保持12小时，然后在-10℃下维持12小时且最后在35℃下保持6小时，所产生样品的稳定性结果显示在表2中。
表2
温度t(℃)   稳定性的时间(天)   ％WR-1065 含水量(％)
    25     27     3.68     n.d.
    4040     2727     21.5114.76     n.d.n.d.
    55     5656     0.971.03     n.d.n.d.
    2525     5656     5.415.28     n.d.n.d.
    55     9191     0.961.12     5.134.35
    2525     9191     7.036.73     4.573.6
温度大约准确至±3℃。
n.d.＝未测定。
以上结果清晰表明，通过在此描述的方法生成的氨磷汀剂型增强了热稳定性。从低重量百分数的硫醇形成来看，增强的稳定性是明显的，其表明氨磷汀很少分解形成2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇(WR-1065)。
从表3中也明显看出本发明剂型的优越的和意想不到的热稳定性，其提供氨磷汀的常规剂型(无定形氨磷汀I)、本发明剂型(无定形氨磷汀II)和U.S.专利5,424,471号(“结晶Ethyol”)的结晶剂型的稳定性测量。明显的是本发明剂型具有到现在为止仅由结晶剂型呈现的稳定性。
表3
    剂型 ％水            1个月     3个月     2年
    40℃     25℃     25℃     5℃
无定形氨磷汀Ia -6％     n.d.     6.0     13.8     3.5
无定形氨磷汀IIb -1％     18.1     3.0f     5.8     n.d.
无定形氨磷汀IIc -5％     n.d.     3.7     6.9     n.d.
无定形氨磷汀IId -6％     n.d.     5.0     n.d.     n.d.
无定形氨磷汀IIe -6％     n.d.     3.3     n.d.     n.d.
结晶Ethyol -20％     0.6     n.d.     0.4     0.5
a包含作为以1∶1比例存在的赋形剂的甘露糖醇。
b包含作为以8∶1比例(氨磷汀对烟酰胺)存在的稳定剂的烟酰胺。
c包含作为以8∶1比例(氨磷汀对烟酰胺)存在的稳定剂的烟酰胺。
d包含作为以8∶1比例(氨磷汀对烟酰胺)存在的稳定剂的烟酰胺。
e通过本发明方法产生的剂型包含作为以4∶1比例(氨磷汀对烟酰胺)(结晶和无定形的混合物)存在的稳定剂的烟酰胺。
f持续时间20天。
t温度大约准确至±3℃。
n.d.＝未测定。
另外，如同能从表3所看到的那样，在干燥循环中的变化能够影响热稳定性。例如，使用以上讨论的先前的方法制备无定形氨磷汀I，而使用不同的干燥循环制备无定形氨磷汀II的实施方案。使用表3的上角标，使用实施例1的干燥循环制备无定形氨磷汀IIb，且使用表II中提供的结果的上述的干燥循环制备无定形氨磷汀IIc。使用以下干燥循环，制备无定形氨磷汀IId和无定形氨磷汀IIe两者：在约-45℃的温度下冷冻大约3小时；在约-25℃的温度下，初级干燥大约60小时；且在大约-10℃的温度下，二级干燥大约24小时；并然后在大约0℃下干燥大约6小时。
包含氨磷汀、烟酰胺和赋形剂的剂型也呈现令人惊奇的稳定性。例如，按照实施例2的方法制备的剂型，其中赋形剂为PVP30，提供在表4中显示的稳定性数据。
表4
温度(℃)   稳定性的时间(天)  ％WR-1065  含水量(％)
    525     4545     0.661.96     5.15n.d.
    525     110110     0.842.40     n.d.n.d.
温度大约准确至±3℃。
n.d.＝未测定。
简单包含氨磷汀和赋形剂的本发明氨磷汀组合物提供在表5中显示的稳定性数据。使用在实施例2中描述的冷冻干燥循环，制备这些组合物。
  赋形剂     温度t(℃) 稳定性的时间(天) ％WR-1065    含水量(％)
  PVP30a蔗糖bCMCc葡聚糖d     5555     45454545     1.260.780.931.01     3.264.953.843.87
  PVP30a蔗糖bCMCc葡聚糖d     25252525     45454545     4.804.294.215.10     n.d.n.d.n.d.n.d.
  PVP30a蔗糖bCMCc     555     110110110     1.571.551.26     n.d.n.d.n.d.
葡聚糖d     5     110     1.37     n.d.
温度大约准确至±3℃。
a包含作为以10∶1比例(氨磷汀对PVP30)存在的PVP30。
b包含作为以10∶1比例(氨磷汀对蔗糖)存在的蔗糖。
c包含作为以40∶1比例(氨磷汀对CMC)存在的低粘度羧甲基纤维素钠盐(CMC)。
d包含作为以10∶1比例(氨磷汀对葡聚糖)存在的葡聚糖。
n.d.＝未测定。
从这些结果，清楚地看出本发明无定形氨磷汀能够与各种赋形剂组合，得到热稳定的无定形氨磷汀组合物。
对普通技术人员显而易见的是未详细公开的其它的实施方案仍然处于本发明的范围和精神之内。因此，除非在以下权利要求中指出，在此的描述应不以任何方式限制本发明。

Claims (62)

1.一种氨磷汀的剂型，该剂型包含：热稳定的、灭菌的无定形氨磷汀，它适宜用药学上可接受的溶媒重新配制为一种可注射的无颗粒药用产品，用于非肠道给予患者；以及稳定剂。
2.权利要求1的剂型，该剂型适宜用药学上可接受的溶媒重新配制成可注射的无颗粒药用产品，以用于非肠道给予患者。
3.热稳定的无定形灭菌剂型，其包含氨磷汀。
4.权利要求1的剂型，其中稳定剂为无定形的。
5.权利要求1的无定形剂型，其中稳定剂为酰胺或氨基酸。
6.权利要求5的剂型，其中酰胺或氨基酸选自烟酰胺、烟酰胺衍生物、烟酸、烟酸衍生物、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、天冬酰胺和它们的混合物。
7.权利要求1的剂型，其中稳定剂对氨磷汀的摩尔比在0.05至5.0之间。
8.权利要求7的剂型，其中稳定剂对氨磷汀的摩尔比在0.1至1.0之间。
9.权利要求8的剂型，其中稳定剂对氨磷汀的摩尔比在0.2至0.5之间。
10.权利要求1的剂型，其还包含赋形剂。
11.权利要求10的剂型，其中赋形剂选自氯化钠、柠檬酸、酒石酸、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、二亚乙基三胺五乙酸、乙二胺四乙酸、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、肌醇、葡聚糖、甘露糖醇、羧甲基纤维素钠盐和它们的混合物。
12.权利要求1或10的剂型，所述剂型具有0％重量至20％重量的含水量。
13.权利要求12的剂型，所述剂型具有0％重量至15％重量的含水量。
14.权利要求13的剂型，所述剂型具有0.5％重量至6％重量的含水量。
15.权利要求1的剂型，其中当密封在小瓶中并在40℃的温度维持一周时，所述剂型形成少于5％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
16.权利要求15的剂型，其中当密封在小瓶中并在40℃的温度维持一周时，所述剂型形成少于4％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
17.权利要求16的剂型，其中当密封在充满惰性气体的小瓶中并在40℃的温度维持一周时，所述剂型形成少于3％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
18.权利要求1的剂型，其中当密封在小瓶中并在25℃的温度维持一个月时，所述剂型形成少于5％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
19.权利要求18的剂型，其中当密封在小瓶中并在25℃的温度维持一个月时，所述剂型形成少于4％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
20.权利要求19的剂型，其中当密封在小瓶中并在25℃的温度维持一个月时，所述剂型形成少于3％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
21.权利要求20的剂型，其中当密封在小瓶中并在25℃的温度维持一个月时，所述剂型形成少于2％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
22.权利要求1的剂型，其中当密封在小瓶中并在5℃的温度维持两年时，所述剂型形成少于3％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
23.权利要求22的剂型，其中当密封在小瓶中并在5℃的温度维持两年时，所述剂型形成少于2％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
24.权利要求23的剂型，其中当密封在小瓶中并在5℃的温度维持两年时，所述剂型形成少于1％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
25.权利要求1的剂型，它是室温稳定剂型。
26.权利要求25的剂型，它是无定形剂型。
27.权利要求1的剂型，它是冷冻剂型，其中当密封在小瓶中并在5℃的温度维持两年时，所述剂型形成少于3％重量的2-[(3-氨基丙基)氨基]乙硫醇，所述重量百分数基于氨磷汀的总重量。
28.权利要求1的剂型，其还包含氨磷汀对烟酰胺的4∶1至10∶1重量比的烟酰胺。
29.权利要求28的剂型，其中氨磷汀对烟酰胺的重量比为8∶1。
30.权利要求25或27的剂型，其还包含稳定剂。
31.权利要求25或27的剂型，其还包含赋形剂。
32.权利要求25或27的剂型，所述剂型具有0％重量至20％重量的含水量。
33.权利要求1、2、3、25、26或27的剂型，其中所述剂型为无定形的。
34.权利要求1、2、3、25、26或27的剂型，其中所述剂型为至少80％(重量)无定形。
35.权利要求1、2、3、25、26或27的剂型，其中所述剂型为至少90％(重量)无定形。
36.制备无定形氨磷汀的热稳定剂型的方法，该方法包括使氨磷汀的灭菌水溶液冷冻干燥，其中所述冷冻干燥包括：
(a)冷冻循环具有-70℃至-10℃之间的第一平均温度并且持续1小时至15小时的第一个阶段；和
(b)初级干燥循环具有-45℃至10℃之间的第二平均温度且持续8小时至100小时的第二个阶段，
其中稳定剂在冷冻干燥之前溶解于水溶液中，或者与在冷冻干燥下形成的产品混合。
37.权利要求36的方法，其中水溶液不含有乙醇。
38.权利要求36的方法，其中水溶液具有6至9之间的pH。
39.权利要求36的方法，该方法还包括在冷冻干燥之前将赋形剂溶解于水溶液
40.权利要求36的方法，该方法还包括在使冷冻干燥下形成的产物与赋形剂混合。
41.权利要求36的方法，其中稳定剂为酰胺、氨基酸或药学上可接受的碱。
42.权利要求41的方法，其中酰胺或氨基酸选自烟酰胺、烟酰胺衍生物、烟酸、烟酸衍生物、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、天冬酰胺和它们的混合物。
43.权利要求41的方法，其中稳定剂对原料药氨磷汀的摩尔比在0.05至5.0之间。
44.权利要求43的方法，其中稳定剂对原料药氨磷汀的摩尔比在0.1至1.0之间。
45.权利要求44的方法，其中稳定剂对原料药氨磷汀的摩尔比在0.2至0.5之间
46.权利要求36的方法，其中第一平均温度在-65℃至-30℃之间。
47.权利要求46的方法，其中第一平均温度在-55℃至-40℃之间。
48.权利要求36的方法，其中第一时间在2小时至10小时之间。
49.权利要求48的方法，其中第一时间在5小时至8小时之间。
50.权利要求36的方法，其中第二平均温度在-35℃至0℃之间。
51.权利要求50的方法，其中第二平均温度在-30℃至-10℃之间。
52.权利要求36的方法，其中第二时间在16小时至86小时之间。
53.权利要求52的方法，其中第二时间在24小时至72小时之间。
54.权利要求36的方法，其中冷冻干燥溶液还包括具有-25℃至40℃之间的第三平均温度和0.5小时至48小时的第三个平均时间的第二个干燥步骤。
55.权利要求54的方法，其中第三平均温度在-15℃至40℃之间。
56.权利要求55的方法，其中第三平均温度在0℃至35℃之间。
57.权利要求54的方法，其中第三个平均时间为2小时至36小时。
58.权利要求57的方法，其中第三个平均时间为6小时至24小时。
59.权利要求36的方法，其还包括冷冻干燥溶液后用干燥塞给小瓶加塞。
60.权利要求36的方法，其中水溶液在使氨磷汀的剂型具有0％重量至20％重量的水分的条件下冷冻干燥。
61.权利要求60的方法，其中水溶液在使氨磷汀的剂型具有0％重量至15％重量的水分的条件下冷冻干燥。
62.权利要求61的方法，其中水溶液在使氨磷汀的剂型具有0.5％重量至6％重量的水分的条件下冷冻干燥。
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