CN118319056A - 一种微生物发酵草本雾化生态液及制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及草本雾化液技术领域，尤其涉及一种微生物发酵草本雾化生态液及制备方法与应用。本发明提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮15～20份、甘草2～5份、橘红15～25份、薄荷8～12份、薰衣草1～5份、迷迭香0.5～3份、麻黄10～16份、杏仁4～8份、桔梗3～8份、紫苏2～8份和金银花5～12份；其中，所述发酵液采用由枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和植物乳植杆菌复合而成的微生物制剂发酵制得。该微生物发酵草本雾化生态液具有良好的雾化效果和更高的安全性以及改善呼吸系统不适感的作用。

Description

一种微生物发酵草本雾化生态液及制备方法与应用

技术领域

本发明涉及草本雾化液技术领域，尤其涉及一种微生物发酵草本雾化生态液及制备方法与应用。

背景技术

随着草本电子雾化产品的日益普及，草本电子雾化液作为其核心组成部分，其品质和安全性受到了广泛关注。草本电子雾化液通常利用微生物通过发酵工艺来制备，在发酵过程中，微生物能够使草本原料转化和合成特定的化合物，赋予草本电子雾化液独特的风味和香气。然而，传统的草本电子雾化液往往存在雾化效果不佳、草本成分利用率低以及安全性较差的问题。因此，有必要开发具有更好雾化效果、更高草本成分利用率以及更安全的新型草本雾化生态液。

发明内容

针对以上技术问题，本发明提供一种微生物发酵草本雾化生态液及其制备方法与应用，该微生物发酵草本雾化生态液具有更加优异的雾化效果和使用安全性，且对呼吸系统的不适感具有明显的改善效果。

为解决上述技术问题，本发明采用了如下技术方案：

本发明的第一方面提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮15～20份、甘草2～5份、橘红15～25份、薄荷8～12份、薰衣草1～5份、迷迭香0.5～3份、麻黄10～16份、杏仁4～8份、桔梗3～8份、紫苏2～8份和金银花5～12份；

其中，所述发酵液采用由枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和植物乳植杆菌复合而成的微生物制剂发酵制得。

本发明提供的微生物发酵草本雾化生态液，采用上述特定的微生物制剂和草本植物配方，利用微生物制剂、各原料本身的作用及各原料之间在发酵过程中产生的相互作用和协同效果，成功得到具有良好雾化效果和更高安全性的微生物发酵草本雾化生态液，且其还具有改善呼吸系统不适症状的作用，对呼吸系统疾病具有显著的改善效果，能够为用户提供更健康、更舒适的雾化体验。

具体地，本发明提供的微生物发酵草本雾化生态液中各原料的作用如下：

陈皮作为本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，其含有挥发油和黄酮类化合物等成分，具有舒缓呼吸道平滑肌的作用，可以帮助缓解呼吸道痉挛和咳嗽症状；陈皮中的多种化合物具有抗炎活性，可以减轻呼吸道炎症，改善呼吸道健康；黄酮类化合物和其他抗氧化物质可以清除自由基，减轻氧化应激对呼吸系统的损害；此外，陈皮还有助于促进痰液的排出，从而改善呼吸道的通畅性。

甘草作为本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，其含有的甘草酸和甘草素等活性成分具有抗炎作用，可以减轻呼吸道的炎症反应，从而缓解咳嗽、咳痰等症状，减少咳嗽次数和咳嗽强度，起到镇咳的作用；甘草中的某些成分可以促进呼吸道分泌物的排出，帮助清除痰液，从而改善呼吸道的通畅性；甘草还具有保护呼吸道黏膜的作用，减轻外界因素对黏膜的损伤，进而促进黏膜的修复；此外，虽然甘草的抗病毒和抗菌作用可能不如抗生素药物的抗病毒和抗菌作用强大，但其对病毒和细菌仍具有一定的抑制作用，可以帮助预防或辅助改善呼吸道感染。

橘红作为本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，其主要功效包括燥湿化痰、理气宽中，归肺、脾经。无论是肺热引起的热咳还是受寒引起的寒咳，均可以用橘红缓解，这主要得益于橘红中含有的柠檬烯成分，柠檬烯具有化痰镇咳的作用，有助于减少咳嗽次数、稀释痰液以及湿润咽喉部，进而帮助缓解咳嗽、清除痰液，改善呼吸道的通畅性。

薄荷作为本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，具有帮助缓解由呼吸道感染引起的各种不适症状，如咳嗽、头痛、发热等；同时还可减轻喉咙不适、舒缓咽喉疼痛的作用；此外，薄荷在微生物发酵草本雾化生态液中还具有改善鼻腔通气、缓解鼻塞的作用。

薰衣草作为本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，其活性成分具有抗炎作用，可以减轻呼吸道炎症，缓解因炎症引起的咳嗽、气喘等症状；还可以舒缓呼吸道平滑肌，改善因支气管痉挛引起的呼吸困难等症状，使哮喘等呼吸系统疾病得到缓解；同时，薰衣草也能够促进呼吸道分泌物的排出，有助于清除呼吸道内的痰液，从而改善呼吸道的通畅性。

迷迭香作为本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，对人类的呼吸系统有很好的保护作用，可以消除呼吸道中的炎症，对感冒和气管炎等呼吸道疾病有出色的治疗效果；而且，迷迭香本身是一种可以增强人体脑细胞再生的药物，能使头脑更加清醒，从而大大提高记忆力；此外，迷迭香还具有快速消除疲劳的作用，从而使人能够快速振奋精神，重新充满活力，发挥与传统卷烟相当的消除疲劳感的作用。

麻黄作为本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，具有宣肺平喘的作用，能够宣通肺气，使呼吸道畅通，从而缓解气喘、咳嗽等症状；麻黄中的有效成分还能够抑制炎症反应，减轻呼吸道炎症，从而缓解咳嗽、咳痰等症状；此外，其还具有抗过敏作用，能够减轻过敏反应引起的呼吸道症状，如鼻塞、流涕、打喷嚏等。

杏仁作为本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，具有显著的止咳平喘作用，对于咳嗽、气喘等症状有明显的缓解效果；还具有滋润肺部、化解痰液的作用，从而使呼吸道保持通畅；此外，杏仁还具有抗炎作用，能够减轻呼吸道炎症，达到缓解咳嗽、咳痰等症状的效果，进而对治疗慢性支气管炎、肺炎等炎症性疾病产生一定作用。

桔梗作为一种本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，具有清热解毒的作用，能够消除人体内的热毒，清除呼吸道中的热邪，缓解呼吸道感染等症状；而且，桔梗还能够刺激呼吸系统分泌腺，增加分泌物的分泌量，从而起到润肺化痰的作用，使痰更容易咳出，缓解因痰液黏稠而引起的咳嗽、气喘等症状；此外，桔梗中的有效成分还能够舒张支气管，增加呼吸道的通畅度，从而缓解咳嗽、气喘等症状，达到止咳平喘的作用，将其用于微生物发酵草本雾化生态液，可以快速缓解呼吸道痉挛，减轻咳嗽、气喘等不适感。

紫苏作为一种本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，可以缓解因风寒感冒引起的咳嗽、流涕等症状；紫苏还具有抑制过敏反应的作用，有助于缓解过敏引起的呼吸道疾病的症状。

金银花作为一种本发明微生物发酵草本雾化生态液的成分之一，具有显著的清热解毒作用，能够清除体内的热邪和毒素，缓解因热毒引起的呼吸道症状，如喉咙痛、咳嗽、发热；其还能够疏散风热，透热达表，将其用于微生物发酵草本雾化生态液中有助于改善风热感冒引起的呼吸道不适；金银花还具有一定的抗菌消炎作用，能够抑制细菌的生长和繁殖，减轻呼吸道的炎症反应，缓解咳嗽、咳痰等症状。

优选地，所述微生物发酵草本雾化生态液包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮16～20份、甘草3～4份、橘红16～20份、薄荷9～11份、薰衣草2～4份、迷迭香1～2.5份、麻黄11～15份、杏仁5～7份、桔梗5～7份、紫苏4～7份和金银花6～11份。

进一步优选地，所述微生物发酵草本雾化生态液包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮18份、甘草3份、橘红17份、薄荷10份、薰衣草3份、迷迭香2份、麻黄12份、杏仁6份、桔梗6份、紫苏6份和金银花10份。

电子雾化液多采用微生物发酵的方法获得，但是现有的微生物制剂在实际应用中存在发酵效率较低、易受环境影响进而导致发酵的稳定性不足以及可能产生有毒有害的代谢产物进而对草本电子雾化液的安全构成威胁的问题。

本发明提供的微生物发酵草本雾化生态液所用的发酵液采用由枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和植物乳植杆菌复合而成的微生物制剂发酵制得，其中，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC NO：M 2020237，所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为CCTCCNO：M 20191088，二者均保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉大学。

本发明采用的微生物制剂中的微生物具有较快的生长速度和高效的代谢活性，能够在较短时间内达到理想的发酵效果，显著提高了发酵效率；而且，该微生物制剂中的微生物对温度、pH值和氧气浓度等环境因素的适应能力较强，能够保持稳定的发酵性能，进而降低发酵失败的风险；同时，本发明选用的微生物均经过严格筛选和安全性评估，在发酵过程中不会产生有毒有害的代谢产物，保证了所得发酵液的安全性；此外，本发明通过组合使用上述4种微生物，在发酵过中能够产生更加丰富、风味层次更多的化合物和香气化合物，赋予了所得发酵液独特的风味特征。

本发明的第二方面提供一种上述微生物发酵草本雾化生态液的制备方法，步骤包括：

S1、预处理：将原料进行清洗、干燥和粉碎；

S2、发酵处理：将经预处理的原料与水混合，加入所述微生物制剂进行发酵，得发酵液；

S3、后处理：将所述发酵液过滤、浓缩，得微生物发酵草本雾化生态液。

本发明采用发酵的方法制备微生物发酵草本雾化生态液，发酵能够使各原料在发酵过程中产生相互作用并达到协同效果，进而获得对于呼吸系统具有更强改善效果的微生物发酵草本雾化生态液。并且，采用上述特定的微生物制剂同时进行发酵还有助于各原料中有效成分的释放，使各草本成分的利用率得以提高，同时可能在发酵过程中产生新的活性物质，从而提高微生物发酵草本雾化生态液的对呼吸系统的改善效果。此外，在经发酵后，微生物发酵草本雾化生态液中的紫苏和桔梗能够发挥更强的戒烟作用，从而有助于降低烟民对香烟的依赖，而且，发酵还可消除或降低各原料本身的毒性或刺激性，使微生物发酵草本雾化生态液的安全性进一步提高。

优选地，步骤S1中，将所述原料粉碎至10～20目，以便原料中的各成分更易析出，提高原料利用率。

优选地，步骤S2中，所述经预处理的原料与水按照1：20～30的质量比混合。

优选地，步骤S2中，所述发酵的温度保持在30～35℃，此温度范围有助于使发酵剂中的微生物处于活跃状态，从而促进发酵反应的进行。需要注意的是，发酵过程中应避免温度的急剧变化，以免影响发酵效果。

优选地，步骤S2中，所述发酵过程中发酵液的pH保持在3.0～4.0，该pH值范围有利于保证发酵液的稳定性，防止发酵过程中产生有害物质。此外，在发酵过程中可以定期检测发酵液的pH值，并根据实际情况进行及时调整。

优选地，步骤S2中，所述发酵的时间为2～14天，该发酵时间可以保证发酵液达到最佳发酵效果。

进一步优选地，步骤S2中，所述发酵的发酵时间为2～7天。

在发酵过程中，氧气供应也十分重要，在发酵初期，微生物需要充足的氧气进行繁殖。因此，在发酵初期可采用搅拌或通气的方式来增加发酵液中的氧气含量；随着发酵过程的进行，微生物逐渐消耗氧气同时产生二氧化碳，此时应适当减少氧气供应，确保发酵过程结束时达到完全厌氧条件。

优选地，步骤S2中，所述发酵剂的添加量为经预处理的原料的1wt％～5wt％。该范围的发酵剂添加量既可保证发酵完全，又能避免发酵过程的剧烈反应，从而保证获得高质量的发酵液。

此外，步骤S3中的过滤操作可以去除发酵液中的固体颗粒、微生物残体等杂质，确保发酵液的清澈透明；浓缩操作可以去除发酵液中的水分和微量杂质，同时提高所得微生物发酵草本雾化生态液的纯度。本发明通过对发酵液进行过滤和浓缩，得到了具有较高纯度的微生物发酵草本雾化生态液，并能够满足对原料纯净度的要求。

本发明的第三方面提供一种上述微生物发酵草本雾化生态液在制备用于改善呼吸的系统产品中的应用，改善呼吸系统产品包括口服液、片剂、糖浆体和混悬液等。

本发明的第四方面提供一种上述微生物发酵草本雾化生态液在制备电子雾化液产品中的应用。

本发明的有益效果在于：本发明提供的微生物制剂具有更高的发酵效率、稳定性和安全性，且能够赋予发酵液独特的风味特征，将其用于发酵制备微生物发酵草本雾化生态液，不仅大大提高了各草本原料的利用率，还使微生物发酵草本雾化生态液具有良好的电子雾化效果和改善呼吸系统不适症状、缓解咳嗽的作用。而且，该微生物发酵草本雾化生态液采用发酵的制备方法，使各草本原料的安全性得以提高。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明，并不用于限定本发明。

鉴于传统的草本电子雾化液往往存在雾化效果不佳、草本成分利用率低以及安全性较差的问题，本发明提供一种新型微生物发酵草本雾化生态液，以提高雾化效果、草本成分的利用率以及安全性。

以下通过具体实施例加以说明。本发明以下实施例中所用的原辅料均为常规市售产品。

本发明以下实施例中所用的微生物制剂，包括枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)HMJZ-B1005S、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)HMJZ-B1003A、嗜酸乳杆菌和植物乳植杆菌；其中，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC NO：M 2020237，保藏日期为2020年06月28日；所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC NO：M 20191088，保藏日期为2019年12月23日；二者均保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉大学。其中，所述枯草芽孢杆菌呈短杆状，大小为(0.7～0.8)μm×(2～3)μm，菌落表面粗糙不透明，颜色为微黄色；解淀粉芽孢杆菌呈杆状，表面粗糙、有隆起，边缘不规则，芽孢呈椭圆形，两端钝圆。

所述嗜酸乳杆菌的保藏编号为CCTCC AB 2010208，所述植物乳植杆菌的保藏编号为CCTCC AB 206134，二者均来自于中国典型培养物保藏中心，地址为中国武汉大学。

上述微生物制剂按照如下方法制备得到：

1、培养基配制：

准确称取20g葡萄糖(碳源)、10g蛋白胨、5g酵母提取物、5g氯化钠、3g磷酸氢二钾、0.5g七水合硫酸镁于1L去离子水中，充分搅拌使其溶解，并调整pH在6.5～7.5之间。

2、灭菌：

将配制好的培养基在121℃下进行高压蒸汽灭菌20分钟，以确保培养基为无菌状态。

3、接种：

在无菌环境下，将上述微生物枯草芽孢杆菌HMJZ-B1005S、解淀粉芽孢杆菌HMJZ-B1003A、嗜酸乳杆菌和植物乳植杆菌分别依次按照0.05％～0.2％、0.05％～0.2％、0.01％～0.1％和0.1％～0.5％的质量比(微生物质量(以干重计)/培养基质量)接种到培养基中。

4、发酵：

将接种后的培养基转移至发酵罐中，设置发酵温度为30～35℃，发酵过程中发酵液的pH值控制在2.0～4.0之间，同时控制搅拌速度，进行厌氧发酵。

5、收获与处理：

监控发酵进度，当发酵至第7天后，上述微生物生长达到稳定期，停止发酵，对发酵液进行离心和过滤，去除微生物细胞和其他杂质，得到澄清的发酵液。

6、储存与包装：

将处理后得到的发酵液密封包装后在低温、避光条件下保存，备用。

实施例1

本实施例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮18份、甘草3份、橘红17份、薄荷10份、薰衣草3份、迷迭香2份、麻黄12份、杏仁6份、桔梗6份、紫苏6份和金银花10份。

该微生物发酵草本雾化生态液按照如下方法制备：

S1、预处理：将原料进行清洗、干燥，粉碎后过20目筛；

S2、发酵处理：将经预处理的原料与水按照1：25的质量比混合后置于发酵罐中，加入占经预处理的原料质量3％的实施例1制得的微生物制剂，搅拌通气后于30℃下发酵7天，期间保证发酵液的pH值在3.0～4.0之间，得发酵液；

S3、后处理：将发酵液经0.45μm滤膜过滤、浓缩，即得微生物发酵草本雾化生态液。

实施例2

本实施例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮16份、甘草4份、橘红20份、薄荷11份、薰衣草4份、迷迭香2.5份、麻黄15份、杏仁7份、桔梗7份、紫苏7份和金银花6份。

该微生物发酵草本雾化生态液按照如下方法制备：

S1、预处理：将原料进行清洗、干燥，粉碎后过20目筛；

S2、发酵处理：将经预处理的原料与水按照1：20的质量比混合后置于发酵罐中，加入占经预处理的原料质量1％的实施例1制得的微生物制剂，搅拌通气后于32℃下发酵10天，期间保证发酵液的pH值在3.0～4.0之间，得发酵液；

S3、后处理：将发酵液经0.45μm滤膜过滤、浓缩，即得微生物发酵草本雾化生态液。

实施例3

本实施例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮20份、甘草5份、橘红16份、薄荷9份、薰衣草2份、迷迭香1份、麻黄11份、杏仁5份、桔梗5份、紫苏4份和金银花11份。

该微生物发酵草本雾化生态液按照如下方法制备：

S1、预处理：将原料进行清洗、干燥，粉碎后过10目筛；

S2、发酵处理：将经预处理的原料与水按照1：30的质量比混合后置于发酵罐中，加入占经预处理的原料质量5％的实施例1制得的微生物制剂，搅拌通气后于35℃下发酵14天，期间保证发酵液的pH值在3.0～4.0之间，得发酵液；

S3、后处理：将发酵液经0.45μm滤膜过滤、浓缩，即得微生物发酵草本雾化生态液。

实施例4

本实施例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮15份、甘草2份、橘红25份、薄荷12份、薰衣草1份、迷迭香3份、麻黄10份、杏仁8份、桔梗3份、紫苏2份和金银花12份。

制备方法与实施例1的制备方法相似，区别仅在于发酵时间为2天。

实施例5

本实施例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮15份、甘草2份、橘红15份、薄荷8份、薰衣草5份、迷迭香0.5份、麻黄16份、杏仁4份、桔梗8份、紫苏8份和金银花5份。

制备方法同实施例1的制备方法，区别仅在于发酵时间为5天。

对比例1

本对比例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：洋甘菊18份、甘草3份、橘红17份、薄荷10份、薰衣草3份、迷迭香2份、麻黄12份、杏仁6份、桔梗6份、紫苏6份、金银花10份。即，将实施例1中的陈皮替换为洋甘菊，其余组成及重量份数不变。

制备方法同实施例1的制备方法。

对比例2

本对比例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮18份、甘草3份、洋甘菊17份、薄荷10份、薰衣草3份、迷迭香2份、麻黄12份、杏仁6份、桔梗6份、紫苏6份、金银花10份。即，将实施例1中的橘红替换为洋甘菊，其余组成及重量份数不变。

制备方法同实施例1的制备方法。

对比例3

本对比例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮18份、甘草3份、洋甘菊17份、薄荷10份、迷迭香2份、麻黄12份、杏仁6份、桔梗6份、金银花10份。即，将紫苏和薰衣草两种成分舍去，其余其余组成及重量份数不变。

制备方法同实施例1的制备方法。

对比例4

本对比例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，包括如下重量份数原料的发酵液：洋甘菊18份、甘草3份、橘红17份、薄荷10份、薰衣草3份、迷迭香2份、麻黄12份、杏仁6份、桔梗6份、紫苏6份、金银花10份、洋甘菊15份。即，在实施例1的基础上增加洋甘菊15份，其余组成及重量份数不变。

制备方法同实施例1的制备方法。

对比例5

本对比例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，其中微生物发酵草本雾化生态液的组成成分与实施例1相同，但其制备方法与实施例1的制备方法不同：本对比例采用市售的草本电子雾化液发酵用微生物制剂制备微生物发酵草本雾化生态液，所需的发酵时间为25天。

对比例6

本对比例提供一种微生物发酵草本雾化生态液，其中微生物发酵草本雾化生态液的组成成分与实施例1相同，但其制备方法与实施例1的制备方法不同：本对比例未采用发酵的方法制备微生物发酵草本雾化生态液，而是直接将各原料对应的浓缩提取物按照上述微生物制剂中的质量占比进行混合，得到微生物发酵草本雾化生态液。

其中，分别在发酵过程中和发酵结束后对实施例1～5和对比例1～5的微生物发酵草本雾化生态液采用高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)进行活性成分检测，确保所得微生物发酵草本雾化生态液的活性成分含量符合产品要求。

检验例1

对本发明提供的上述微生物制剂的存储稳定性进行研究：

将上述制得的微生物制剂分别置于不同温度和湿度环境中，模拟不同的存储环境。分别将在不同环境下存储不同时间后的微生物制剂按照上述步骤进行接种与培养，并观察微生物的生长情况，在微生物生长达到稳定期后，使用显微镜或计数工具对活菌数进行计数。具体结果如表1所示。

表1

检验例2

邀请50位评价员分别对实施例1～5和对比例5～6所得的微生物发酵草本雾化生态液进行雾化效果和感官评价，具体为：利用专用的雾化设备，对每种微生物发酵草本雾化生态液进行雾化，观察其雾化颗粒的均匀性、细腻度以及雾化速度；通过嗅闻雾化后的微生物发酵草本雾化生态液，对其气味进行投票评价，评价标准包括气味的清新度、柔和度以及持久性；口感评价：评价员通过吸入雾化后的微生物发酵草本雾化生态液，对其口感进行评价，评价标准包括口感的清爽度、甜度、冰凉度以及留香感；综合感受评价：评价员在吸入雾化后的微生物发酵草本雾化生态液后，对其综合感受进行评价，评价标准包括整体舒适度、缓解疲劳感以及提神醒脑效果。

评价结果的判断：获得45名及以上评价员投票认可的结果记为“优”或“快”，获得40～45名(包括40名)评价员投票认可的结果记为“良”，获得35～40名(包括35名)评价员投票认可的结果记为“中”，获得35名(不包括35名)评价员投票认可的结果记为“差”或“慢”，具体评价结果如2所示。

表2

由以上数据可见，本发明实施例1～5提供的微生物发酵草本雾化生态液具有优异的雾化效果和快速的雾化速度，且气味、口感和综合感受均优于采用现有的微生物制剂或不经过发酵制得的生态液。

检验例3

为了验证本发明提供的微生物发酵草本雾化生态液的安全性，对实施例1所得的微生物发酵草本雾化生态液进行急性毒性和皮肤刺激性评价实验。

1、急性毒性实验

将20只健康、体重相近的成年小鼠随机分为2组(实验组和对照组)，每组10只，在相同的饲养条件下，同时分别对实验组小鼠按照预定剂量(如最大耐受剂量)腹腔注射实施例1得到的微生物发酵草本雾化生态液，对对照组小鼠注射等量生理盐水。观察并记录给药后24小时内小鼠的行为变化、中毒症状及死亡情况，结果如表3所示。

表3

2、皮肤刺激性评价实验

选取健康成年小鼠，剃去背部毛发，露出皮肤，将实施例1所得的微生物发酵草本雾化生态液均匀涂抹于小鼠背部皮肤上，覆盖面积约2cm²，用纱布和胶带固定涂抹区域，避免微生物发酵草本雾化生态液流散。观察并记录给药后1小时、4小时、24小时的皮肤反应情况，记录是否出现红肿、瘙痒、水疱症状，结果如表4所示。

表4

时间点	红肿情况	瘙痒情况	水疱情况
				1小时	无	无	无
4小时	无	无	无
				24小时	无	无	无

根据表3中急性毒性和表4中皮肤刺激性评价实验的结果可知，本发明提供的微生物发酵草本雾化生态液在预定的剂量和条件下对小鼠无明显毒性和皮肤刺激性：实验小鼠在给药后行为正常，无中毒症状或死亡情况发生；在皮肤刺激性评价实验中，小鼠背部皮肤未出现红肿、瘙痒、水疱等刺激性反应。因此，本发明提供的微生物发酵草本雾化生态液的使用安全可靠。

检验例4

为了验证本发明提供的微生物发酵草本雾化生态液在雾化之后对呼吸系统不适感的改善效果，分别将实施例1和对比例1～4所得的微生物发酵草本雾化生态液制备成电子雾化液，考察其对呼吸系统不适感的改善效果。

招募有呼吸系统不适感(如咳嗽、气喘、胸闷等)的志愿者100名，将其随机分为5组，每组20人，各组志愿者各自对应吸入由实施例1和对比例1～4所得的微生物发酵草本雾化生态液经电子雾化设备雾化的雾化液，并记录吸入相应雾化液不同时间后的志愿者呼吸系统不适感的症状及程度变化，结果如表5所示。

表5

由表5中的数据可以看出，本发明实施例2提供的微生物发酵草本雾化生态液在雾化后对呼吸系统不适感的改善效果最为显著。在使用1小时后症状即有明显减轻，4小时后显著改善，24小时后症状基本消失。而对比例1～4的微生物发酵草本雾化生态液在改善呼吸系统不适感方面效果较差或无效，24小时后症状基本仍然存在。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种微生物发酵草本雾化生态液，其特征在于，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮15～20份、甘草2～5份、橘红15～25份、薄荷8～12份、薰衣草1～5份、迷迭香0.5～3份、麻黄10～16份、杏仁4～8份、桔梗3～8份、紫苏2～8份和金银花5～12份；

其中，所述发酵液采用由枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和植物乳植杆菌复合而成的微生物制剂发酵制得。

2.如权利要求1所述的微生物发酵草本雾化生态液，其特征在于，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮16～20份、甘草3～4份、橘红16～20份、薄荷9～11份、薰衣草2～4份、迷迭香1～2.5份、麻黄11～15份、杏仁5～7份、桔梗5～7份、紫苏4～7份、金银花6～11份。

3.如权利要求2所述的微生物发酵草本雾化生态液，其特征在于，包括如下重量份数原料的发酵液：陈皮18份、甘草3份、橘红17份、薄荷10份、薰衣草3份、迷迭香2份、麻黄12份、杏仁6份、桔梗6份、紫苏6份和金银花10份。

4.如权利要求1所述的微生物发酵草本雾化生态液，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC NO：M 2020237，所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC NO：M20191088，二者均保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉大学。

5.一种权利要求1～4任一项所述的微生物发酵草本雾化生态液的制备方法，其特征在于，步骤包括：

S1、预处理：将原料进行清洗、干燥和粉碎；

S2、发酵处理：将经预处理的原料与水混合，加入所述微生物制剂进行发酵，得发酵液；

S3、后处理：将所述发酵液过滤、浓缩，得微生物发酵草本雾化生态液。

6.如权利要求5所述的微生物发酵草本雾化生态液的制备方法，其特征在于，步骤S1中，将所述原料粉碎至10～20目；

步骤S2中，所述经预处理的原料与水按照1：20～30的质量比混合。

7.如权利要求5所述的微生物发酵草本雾化生态液的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述发酵的温度保持在30～35℃，发酵过程中发酵液的pH保持在3.0～4.0，发酵时间为2～14天；

其中，所述微生物制剂的添加量为经预处理的原料的1wt％～5wt％。

8.如权利要求7所述的微生物发酵草本雾化生态液的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述发酵的发酵时间为2～7天。

9.权利要求1～4任一项所述的微生物发酵草本雾化生态液在制备用于改善呼吸系统产品中的应用。

10.权利要求1～4任一项所述的微生物发酵草本雾化生态液在制备电子雾化液产品中的应用。