CN118308527A - 用于检测籽粒蛋白含量主效遗传位点QGPC.caas-7AL的分子标记及特异引物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了用于检测籽粒蛋白含量主效遗传位点QGPC.caas‑7AL的分子标记及特异引物。本发明属于生物技术领域，具体涉及用于检测籽粒蛋白含量主效遗传位点QGPC.caas‑7AL的分子标记及特异引物。本发明中的SNP位点为小麦7A染色体上的一个SNP位点，其核苷酸种类为C或T，为序列表中序列1的第36位核苷酸。检测小麦基因组中SNP的多态性或基因型的物质可应用于鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量和小麦育种。可将检测所述SNP位点多态性和基因型的物质与其他物质(如检测其他与小麦籽粒蛋白含量相关的分子标记的单核苷酸多态性或基因型的物质)联合在一起制备鉴定小麦籽粒蛋白含量高的产品。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及用于检测籽粒蛋白含量主效遗传位点QGPC.caas-7AL的分子标记及特异引物。
背景技术
小麦是世界三大粮食作物之一，改良其加工品质是重要的育种目标。影响加工品质的主要性状包括籽粒蛋白含量和质量、淀粉品质和色泽等，具体要求与食品种类和加工方式有关，但蛋白含量是国内外加工品质改良的关键目标。
蛋白含量受品种、环境及其互作效应的显著影响，其中环境效应较小，品种及品种与环境互作效应较大。提高籽粒蛋白含量是改良小麦营养和加工品质的重要育种目标。因此，籽粒蛋白含量遗传位点的挖掘和利用对于培育优质小麦品种非常重要。
KASP标记已广泛应用于检测小麦、水稻和玉米等作物的SNP位点，无需电泳，可实现高通量基因分型。利用小麦SNP芯片的基因型数据进行QTL定位和全基因组关联分析，将连锁SNP转化为KASP标记，可直接应用于分子标记辅助选择育种。
济麦22是高产、多抗、优质中筋小麦品种，分别于2006年9月和2007年1月通过山东省和国家黄淮北片审定，适宜淮北地区和黄淮冬麦区北片种植。中麦578是高产、多抗、优质强筋小麦品种，于2021年6月通过国家黄淮北片审定，适宜在黄淮冬麦区北片水地的山东省全部、河北省保定市和沧州市的南部及其以南地区、山西省运城和临汾市的盆地灌区种植。与济麦22相比，中麦578籽粒蛋白含量更高。本发明利用中麦578和济麦22构建了包括262个家系的重组近交系(RIL)群体，研究与籽粒蛋白含量相关的分子标记。
发明内容
本发明所要解决的问题是如何鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量，并进行小麦育种。
为了解决以上技术问题，本发明首先提供了检测小麦基因组中KASP的多态性或基因型的物质在如下任一中的应用，
(1)鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量；
(2)小麦育种；
(3)制备鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量的产品；
(4)制备小麦育种的产品；
所述SNP位点为小麦7A染色体上的一个位点，其核苷酸种类为C或T，为序列表中序列1的第36位核苷酸。
以普通小麦品种中国春基因组IWGSC_RefSeq_v1.0序列(https://urgi.versailles.inra.fr/jbrowseiwgsc/gmod_jbrowse/？data＝myData/IW GSC_RefSeq_v1.0)为参考基因组，所述SNP位点为小麦7A染色体675500189bp处(具体为序列表中序列1第36位)。
本发明还提供了鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量的方法，包括检测待测小麦基因组中所述SNP位点的基因型，根据所述基因型鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量，所述基因型为CC或TT，所述CC是所述SNP为C的纯合型，所述TT是所述SNP为T的纯合型。
作为一种实施方案，所述鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量的方法可包括如下步骤：
(1)以待测小麦的基因组DNA为模板，采用引物组合物进行KASP分子标记检测；所述引物组合物由引物A、引物B和引物C组成；
所述引物A为核苷酸序列是序列表中序列2的单链DNA分子或核苷酸序列是序列表中序列2的第22-41位的单链DNA；
所述引物B为核苷酸序列是序列表中序列3的单链DNA分子或核苷酸序列是序列表中序列3的第22-41位的单链DNA；
所述引物C为核苷酸序列是序列表中序列4的单链DNA分子；
(2)完成步骤(1)后，进行荧光检测，确定待测小麦的所述SNP的基因型；
(3)根据基因型结果进行鉴定待测小麦的籽粒蛋白含量：所述SNP的基因型为TT的待测小麦的籽粒蛋白含量优于所述SNP的基因型为CC的待测小麦。
本发明还提供了小麦育种的方法。
本发明所提供的小麦育种的方法，包括检测小麦基因组中所述SNP位点的基因型，选择所述SNP的基因型为TT的小麦作为亲本进行育种，所述TT是所述SNP为T的纯合型。
作为一种实施方法，小麦育种的方法可包括如下步骤：
(1)以待测小麦的基因组DNA为模板，采用上述引物组进行KASP分子标记检测；
(2)完成步骤(1)后，进行荧光检测，确定待测小麦所述SNP位点的基因型；
(3)选择TT基因型小麦作为籽粒蛋白含量高的小麦育种。
上述方法中，引物溶解与配制方法可为：先将3条引物分别用ddH2O稀释成100μM，再按如下配制引物工作液：引物A12μL、引物B12μL、引物C 30μL、ddH2O 46μL，作为KASP标记的引物工作液，-20℃保存备用。
上述方法中，KASP的反应体系可为：模板DNA 1.0μL，引物工作液0.0336μL，2×KASP Master Mix(LGC公司，Lot No.13426773)1.5μL，用无菌超纯水补充反应体系至3μL。
上述方法中，KASP标记可在384孔PCR仪(BIO-RAD,S1000TM Thermal Cycler)上进行。
上述方法中，KASP标记的反应程序可为：
第一步：94℃预变性15min；
第二步：94℃变性20s、复性20s(第一次的复性温度为65℃，每个循环降温1℃)共10个循环；94℃变性20s、55℃复性1min共32个循环；
第三步：72℃延伸10min、4℃保存。
上述方法中，确定待测小麦所述SNP的基因型的方法可为：PCR反应完成后，利用荧光信号阅读仪(Omega)和荧光检测系统(Araya)将荧光信号转变为可分析的数值对反应产物进行荧光数据读取。采用终末端读取荧光值进行基因分型，荧光扫描结果利用R软件包进行图形化展示，C碱基类型带有FAM荧光，分布于x轴附近；T碱基类型带有HEX荧光，分布于y轴附近；无检出信号的样本分布于原点附近。
上述方法在小麦育种中的应用也属于本发明的保护范围。
本发明还提供了用于检测小麦基因组中SNP位点的多态性或基因型的产品。
本发明所提供的用于检测小麦基因组中所述SNP位点的多态性或基因型的产品，含有上述检测小麦基因组中SNP位点的多态性或基因型的物质，所述产品为任一种：
C1)检测小麦籽粒蛋白含量相关的单核苷酸多态性或基因型的产品；
C2)鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量的产品；
C3)用于小麦育种的产品。
上述应用、方法和产品中，所述物质可为通过下述至少一种方法确定所述SNP位点的多态性或基因型所需的试剂和/或仪器：DNA测序、限制性酶切片段长度多态性、单链构象多态性、变性高效液相色谱和SNP芯片。其中，SNP芯片包括基于核酸杂交反应的芯片、基于单碱基延伸反应的芯片、基于等位基因特异性引物延伸反应的芯片、基于“一步法”反应的芯片、基于引物连接反应的芯片、基于限制性内切酶反应的芯片、基于蛋白DNA结合反应的芯片，及基于荧光分子DNA结合反应的芯片。
可选地，所述物质可为如下D1)、D2)或D3)：
D1)所述物质为扩增包括所述SNP位点在内的小麦基因组DNA片段的引物组合物；
D2)所述物质为含有D1)所述引物组合物的PCR试剂；
D3)所述物质为含有D1)所述引物组合物或D2)所述PCR试剂的试剂盒。
可选地，所述扩增可为PCR扩增。所述引物组合物由所述引物A、所述引物B和所述引物C组成。
D3)所述试剂盒还可包括KASP Master Mix。
上述应用、方法和产品中，所述引物组合物可被标记物标记也可不被标记物标记。所述标记物指可用于提供可检测的效果且可以连接至核酸的任何原子或分子。标记物包括但不限于染料；放射性标记，诸如32P；结合部分，诸如生物素(biotin)；半抗原，诸如地高辛(DIG)；发光、发磷光或发荧光部分；和单独的荧光染料或与可以通过荧光共振能量转移(FRET)抑制或移动发射光谱的部分组合的荧光染料。标记可以提供可通过荧光、放射性、比色、重量测定、X射线衍射或吸收、磁性、酶活性等检测的信号。标记可以是带电荷的部分(正电荷或负电荷)或可选地，可以是电荷中性的。标记可以包括核酸或蛋白序列或由其组合，只要包含标记的序列是可检测的。在一些实施方案中，核酸在没有标记的情况下直接检测(例如，直接读取序列)。如所述引物组合物可为由核苷酸序列是序列表中序列2的第22-41的单链DNA、核苷酸序列是序列表中序列3的第22-41位的单链DNA和核苷酸序列是序列表中序列4的单链DNA组成的引物组合物，所述引物组合物也可为由序列表中序列2所示的单链DNA、序列表中序列3所示的单链DNA和由序列表中序列4所示的单链DNA的引物组。序列表中序列2由41个核苷酸组成，第1-21位核苷酸为FAM接头序列(作为标记物)，第22-41位核苷酸为特异序列；序列表中序列3由41个核苷酸组成，第1-21位核苷酸为HEX接头序列(作为标记物)，第22-41位核苷酸为特异序列。
本发明还提供了DNA分子，核苷酸序列如序列表的序列1所示。
上述的DNA分子的应用也属于本发明的保护范围之内。所述应用具体为在如下任一中的应用：
(1)鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量；
(2)小麦育种；
(3)制备鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量的产品；
(4)制备小麦育种的产品。
可选地，在上述应用中，该DNA分子作为检测靶标。
可将检测所述SNP位点多态性和基因型的物质与其他物质(如检测其他与小麦籽粒蛋白含量相关的分子标记的单核苷酸多态性或基因型的物质)联合在一起制备鉴定小麦籽粒蛋白含量高的小麦品种的产品。
本文中，所述育种的目的可包括培育籽粒蛋白含量高的小麦。
本文中，所述小麦可为小麦自交系，也可为两种小麦自交系的杂交后代，如小麦中麦578和济麦22的杂交后代。所述小麦也可为纯系。
本发明利用QTL分析的方法定位到1个与小麦籽粒蛋白含量显著相关的QTL位点QTLQGPC.caas-7AL，该位点位于小麦7A染色体，物理位置为670.33–675.50Mb(参考小麦品种中国春基因组IWGSC_RefSeq_v1.0)，右侧连锁芯片标记位点为AX-109534708。此SNP位点为C/T碱基差异，将这两种等位基因类型分别命名为QTLQGPC.caas-7ALa和QTLQGPC.caas-7ALb。携带FAM荧光、分布于x轴附近的为籽粒蛋白含量低的类型(QTLQGPC.caas-7ALa)；携带HEX荧光、分布于y轴附近的为小麦籽粒蛋白含量高的类型(QTLQGPC.caas-7ALb)。通过利用两组共163份中国小麦种质资源对该标记进行验证，显示该标记可以对QTLQGPC.caas-7ALa和QTLQGPC.caas-7ALb两种等位基因类型进行准确分型，可用于分子标记辅助育种。
附图说明
图1为中麦578×济麦22RIL群体中定位的QGPC.caas-7AL曲线图。
图2为KASP标记KaspAX-109534708对163份小麦品种的基因分型结果。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
以下实施例中的定量实验，如无特别说明，均设置三次重复实验。
下述实施例中的中麦578和济麦22已记载于:Liu D,Zhao D,Zeng J,Sani S R,Tong J,Li M,Li F,Zhou S,Hu W,Xia X,Tian Y,Zhu Q,Wang C,Wang D,He Z,Liu J,Zhang Y.Identification of genetic loci for grain yield-related traits in thewheat population Zhongmai 578/Jimai 22.Journal of IntegrativeAgriculture.2023,22:1985-1999。公众可从申请人处获得该生物材料，该生物材料只为重复本发明的实验所用，不可作为其它用途使用。
下述实施例中的163份小麦品种已记载于:Li F,Wen W,Liu J,Zhang Y,Cao S,HeZ,Rasheed A,Jin H,Zhang C,Yan J,Zhang P,Wan Y,Xia X.Genetic architecture ofgrain yield in bread wheat based on genome-wide association studies.BMC PlantBiology 2019,19:168。公众可从申请人处获得该生物材料，该生物材料只为重复本发明的实验所用，不可作为其它用途使用。
下述实施例采用SPSS11.5统计软件对数据进行处理，实验结果以平均值表示，采用One-way ANOVA检验，P＜0.05(*)表示具有显著性差异。
实施例1、籽粒蛋白含量相关QTL的发掘及其KASP标记的获得
一、籽粒蛋白含量表型研究
利用中麦578和济麦22构建包括262个家系的重组近交系(RIL)群体。中麦578/济麦22RIL群体于2020-2021年度种植于河南新乡、商丘、洛阳和河北高邑，采用完全随机区组设计，三次重复，单行区，行长1m，行宽0.25m，每行均匀撒播30粒种子，常规管理。成熟后收获籽粒，近红外分析仪(DA 7250，Perten)测定籽粒蛋白含量。具体检测方法参照国家标准GB/T 5506.4-2008，蛋白含量(14％湿基)＝蛋白(干基)含量×(1-14％)。
采用改良CTAB法，提取上述262个家系幼叶基因组DNA，用NanoDropTM 2000c分光光度计测定DNA浓度，并将DNA样品调至标准浓度50ng/μL，然后用0.8％的琼脂糖凝胶检测DNA质量，质量合格DNA进行SNP分型。利用中国农业科学院作物科学研究所和AffymetrixAxiom公司合作开发的50K SNP芯片进行SNP分析。
二、连锁图谱构建
50K SNP芯片共包含54680个标记，亲本间有差异的标记为11526个。去除亲本间杂合、缺失率大于10％的标记后剩余10631个。利用IciMapping 4.1bin功能去除冗余标记后剩余9354个。将这9354个标记数据导入在线工具MSTMap，选择SingleGL参数，构建一个大的连锁群，然后根据标记间的遗传距离和染色体位置信息分群，构建连锁群有34个，共包含1507个标记。
三、QTL分析
采用IciMapping 4.1ICIM-ADD方法对4个环境和最优线性无偏性(best linearunbiased estimate，Blue)值的籽粒蛋白含量进行QTL分析，LOD值选取2.5，在7AL染色体定位到1个稳定的QTL，将其命名为QGPC.caas-7AL(图1)。连锁最紧密的两侧翼标记为AX-110942203和AX-109534708，物理区间为670.33Mb-675.50Mb。在不同环境条件下，可解释表型变异的4.7-10.2％(表1，图1)。SNP位点AX-109534708为序列1的第36位，其核苷酸种类为C或T。序列1的核苷酸序列为小麦IWGSC Refseq v1.0的7A染色体物理位置675500154bp-675500224bp的序列。序列表中序列1的y表示c或t。将侧翼标记AX-109534708转化为KaspAX-109534708，用于分子标记辅助选择育种。
表1、复合区间作图法检测中麦578×济麦22RIL群体的籽粒蛋白含量遗传位点QGPC.caas-7AL
四、KASP标记KaspAX-109534708的鉴定引物组的获得
设计基于KASP技术检测SNP多态性位点(即KASP标记KaspAX-109534708)的引物组，简称KASP引物组。KASP引物组由两条上游引物(引物A和引物B)和一条下游引物(引物C)组成，具体序列见表3。
表2、分子标记AX-109534708序列信息
表3、检测籽粒蛋白含量QTLQGPC.caas-7AL的KASP引物信息
引物A为5’端带有FAM荧光标签序列(下划线部分的碱基)的引物，和引物C扩增SNP位点AX-109534708为C的片段，用酶标仪或荧光定量PCR仪可读取到FAM基团的荧光信号；
引物B为5’端带有HEX荧光标签序列(下划线部分的碱基)的引物，和引物C扩增SNP位点AX-109534708为T的片段，用酶标仪或荧光定量PCR仪可读取到HEX基团的荧光信号。
利用KASP标记KaspAX-109534708检测小麦籽粒蛋白含量相关QGPC.caas-7AL在7A染色体物理位置675508361bp(SNP位点AX-109534708)处不同等位基因类型。此SNP位点AX-109534708为C/T碱基差异，将这两种等位基因类型分别命名为QTLQGPC.caas-7ALa和QTLQGPC.caas-7ALb。其中携带FAM荧光、分布于x轴附近的等位基因类型为QTLQGPC.caas-7Ala，SNP位点的核苷酸为C；携带HEX荧光、分布于y轴附近的等位基因类型为QTLQGPC.caas-7Alb，SNP位点的核苷酸为T。
1、KASP扩增体系及程序
KASP标记引物工作液制备：引物A(100μmol/L)12μL、引物B(100μmol/L)12μL、引物C(100μmol/L)30μL、ddH2O 46μL，作为KASP标记的引物工作液，-20℃保存备用。
PCR扩增体系为：模板DNA 1.0μL，引物工作液0.0336μL，2×KASP Master Mix(LGC公司，Lot No.13426773)1.5μL，用无菌超纯水补充反应体系至3μL。
PCR反应程序为：第一步：94℃预变性15min；
第二步：94℃变性20s、复性20s(第一次的复性温度为65℃，每个循环降温1℃)共10个循环；94℃变性20s、55℃复性1min共32个循环；
第三步：72℃延伸10min、4℃保存。
实验同时设置反应体系中不添加模板DNA的空白对照(CK)，每个板设置2个对照。
2、基因分型
PCR反应完成后利用荧光信号阅读仪(Omega)和荧光检测系统(Araya)将荧光信号转变为可分析的数值对反应产物进行荧光数据读取。荧光扫描结果利用R软件包进行图形化展示，C碱基类型(QGPC.caas-7ALa)带有FAM荧光，分布于x轴附近；T碱基类型(QGPC.caas-7ALb)带有HEX荧光，分布于y轴附近；无检出信号的样本分布于原点附近。FAM激发波长为485nm，发射波长为520nm。HEX激发波长为535nm，发射波长为556nm。系统参比荧光ROX激发波长为575nm，发射波长为610nm。
结果如图2所示，若显示只有FAM基团的荧光信号，则所述待测小麦的AX-109534708的基因型为CC(即小麦基因组中SNP位点AX-109534708为C的纯合型)；若显示只有HEX基团的荧光信号，则所述待测小麦的AX-109534708基因型为TT(即小麦基因组中SNP位点AX-109534708为T的纯合型)。
实施例2、籽粒蛋白含量相关的分子标记KaspAX-109534708及鉴定引物组的应用待测实验材料为163个小麦品种，具体见表4。
1、将各个实验材料于2012-2013和2013-2014年度种植于河南安阳，每个材料4行、1.5m行长，常规管理，成熟后收获籽粒，近红外分析仪(DA 7250，Perten)测定籽粒蛋白含量，具体检测方法参照国家标准GB/T 5506.4-2008。蛋白含量(14％湿基)＝蛋白(干基)含量×(1-14％)。具体籽粒蛋白含量见表4。
2、利用KaspAX-109534708标记检测小麦SNP位点AX-109534708的基因型，具体实验步骤参照实施例1中步骤四。基因型分析结果见表4。
表4、163份小麦品种的基因型检测结果和籽粒蛋白含量
表5、小麦SNP位点AX-109534708的基因类型与籽粒蛋白含量统计分析结果
注：统计分析采用双尾t-test检验(P<0.05代表差异达到显著水平)。
结果见表4、表5和图2。图2中，TT表示小麦材料的SNP位点AX-109534708的基因型为TT，CC表示小麦材料的SNP位点AX-109534708基因型为CC，CK为反应体系中不添加模板DNA的空白对照。
经KASP标记检测，163份中国小麦种质中，有18份种质为TT等位基因类型(即SNP位点AX-109534708基因型为TT)，145份种质为CC等位基因类型(SNP位点AX-109534708的基因型为CC)。携带QTL QGPC.caas-7AL等位基因类型为TT的小麦种质在不同年份的籽粒蛋白含量(两年籽粒蛋白含量分别为13.60％和13.36％)高于携带QTL QGPC.caas-7AL等位基因类型为CC的小麦种质的籽粒蛋白含量(两年籽粒蛋白含量分别为13.07％和12.56％)，两者达到显著差异水平(P<0.05)(表4和表5)。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。
Claims (10)
1.检测小麦基因组中SNP的多态性或基因型的物质在如下任一中的应用，
(1)鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量；
(2)小麦育种；
(3)制备鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量的产品；
(4)制备小麦育种的产品；
所述SNP位点为小麦7A染色体上的一个SNP位点，其核苷酸种类为C或T，为序列表中序列1的第36位核苷酸。
2.鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量的方法，其特征在于：包括检测待测小麦基因组中SNP位点的基因型，根据所述基因型鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量，所述SNP位点为小麦7A染色体上的一个SNP位点，其核苷酸种类为C或T，为序列表中序列1的第36位核苷酸。
3.小麦育种的方法，其特征在于：所述方法包括检测小麦基因组中权利要求1中所述SNP的基因型，选择所述SNP的基因型为TT的小麦作为亲本进行育种，所述TT是所述SNP为T的纯合型。
4.权利要求2或3所述的方法在小麦育种中的应用。
5.根据权利要求1所述的应用，或权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述SNP的基因型为CC或TT，所述CC是所述SNP为C的纯合型，所述TT是所述SNP为T的纯合型；所述SNP的基因型为TT的待测小麦的籽粒蛋白含量高于或候选高于所述SNP的基因型为CC的待测小麦。
6.产品，其特征在于：所述产品含有权利要求1中所述物质，所述产品为任一种：
C1)检测小麦籽粒蛋白含量相关的单核苷酸多态性或基因型的产品；
C2)鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量的产品；
C3)用于小麦育种的产品。
7.根据权利要求1所述的应用或权利要求6所述的产品，其特征在于：所述物质为如下D1)、D2)或D3)：
D1)所述物质为扩增包括所述SNP位点在内的小麦基因组DNA片段的引物组合物；
D2)所述物质为含有D1)所述引物组合物的PCR试剂；
D3)所述物质为含有D1)所述引物组合物或D2)所述PCR试剂的试剂盒。
8.根据权利要求7所述的应用或产品，其特征在于：所述引物组合物由引物A、引物B和引物C组成；
所述引物A为核苷酸序列是序列表中序列2的单链DNA分子或核苷酸序列是序列表中序列2的第22-41位的单链DNA；
所述引物B为核苷酸序列是序列表中序列3的单链DNA分子或核苷酸序列是序列表中序列3的第22-41位的单链DNA；
所述引物C核苷酸序列是序列表中序列4的单链DNA分子。
9.DNA分子，其特征在于：所述DNA分子的核苷酸序列是序列表中的序列1。
10.权利要求9所述的DNA分子在如下任一中的应用，
(1)鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量；
(2)小麦育种；
(3)制备鉴定或辅助鉴定小麦籽粒蛋白含量的产品；
(4)制备小麦育种的产品。
Publications (1)
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| CN118308527A true CN118308527A (zh) | 2024-07-09 |
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