CN118078864A - 副干酪乳杆菌k56在制备用于预防或缓解上呼吸道不适症状的组合物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了副干酪乳杆菌K56在制备用于预防或缓解上呼吸道不适症状的组合物中的应用。本发明发现副干酪乳杆菌K56菌株具有能够减轻哮喘，降低T淋巴细胞、嗜酸粒细胞及巨噬细胞数量以预防上呼吸道不适症状。从而，本发明提供了副干酪乳杆菌K56在制备用于预防上呼吸道不适症状的组合物中的应用，所述副干酪乳杆菌的保藏编号为CGMCC No.15139或DSM27447。可用于制备具有预防上呼吸道不适症状的产品，例如特殊食品、饲料及药物，具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，尤其是涉及一种副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei subsp.paracasei)K56(保藏编号CGMCC No.15139或DSM27447)在制备用于预防或缓解上呼吸道不适症状的组合物中的应用。
背景技术
过敏是身体免疫系统对环境中无害物质有过度免疫反应的现象，包括尘螨、花粉、食物和药物等都会引起过敏反应。据统计，全球有超过2.5亿哮喘患者，其哮喘过敏原可能是由污染的空气、饲养宠物、灰尘刺激，食用含有过敏原的食物等因素引起。目前治疗哮喘的常用药物主要包括支气管扩张剂、糖皮质激素、白三烯受体拮抗剂和免疫调节剂。现有的治疗方法和治疗药物多针对疾病症状本身，起到暂时缓解的作用，但哮喘治疗周期长，长期使用会出现毒副作用、依赖性、毛细血管损伤等众多问题。
肠和肺之间的双向通讯枢纽被称为“肠-肺”轴，它能同时影响肠、肺两个器官的免疫状态。现已证实，通过使用益生菌调节“肠-肺”轴来塑造肺肠道微生物群正成为调节机体免疫和改善过敏症状的重要辅助方法之一。研究表明，益生菌参与调节哮喘患者的“肠-肺”轴的过程主要是通过调节肠道微生物菌群的丰度和代谢产物来影响肺部微生物的组成和免疫反应。
CN107916236A公开了一种副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracaseisubsp.paracasei)K56(保藏编号CGMCC No.15139或DSM27447)。
发明内容
本发明的一个目的在于提供一种副干酪乳杆菌K56的用途。
副干酪乳杆菌K56菌株已于2013年6月27日保存于德国微生物及细胞培养物收集中心(German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)，保藏编号DSM27447；另外，副干酪乳杆菌K56菌株也已于2017年12月29日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(China General Microbiological Culture Collection Center,CGMCC)，保藏编号CGMCC No.15139。
本发明发现副干酪乳杆菌K56菌株能够减少小鼠挠鼻次数，改善小鼠肺部病理损伤及提升肺功能，降低T淋巴细胞、嗜酸粒细胞及巨噬细胞数量以预防上呼吸道不适症状。
从而，本发明提供了副干酪乳杆菌K56在制备用于预防或缓解上呼吸道不适症状的组合物中的应用，所述副干酪乳杆菌的保藏编号为CGMCC No.15139或DSM27447。
根据本发明的具体实施方案，其中，所述上呼吸道不适症状包括过敏引发的上呼吸道症状，如：挠鼻、打喷嚏、鼻子堵塞。
根据本发明的具体实施方案，所述组合物可以包括特殊食品组合物、动物饲料组合物或药品组合物。
在本发明的一具体实施方案中，所述特殊食品选自配方食品、特殊医学用途婴儿配方食品、特殊医学用途配方食品或保健食品。
在本发明的一具体实施方案中，所述组合物为饲料组合物。所述饲料组合物中的其他组分可以参照益生菌饲料领域的常规技术进行选择。
在本发明的一具体实施方案中，所述组合物为药物组合物。所述药物组合物中的其他组分可以参照益生菌药物领域的常规技术进行选择。
根据本发明的具体实施方案，所述组合物可适用于动物或人类。
根据本发明的具体实施方案，所述组合物是用于减轻哮喘。具体应用时，所述的副干酪乳杆菌的应用量为1×106-1×1013CFU/天，优选为1×1012CFU/天。
根据本发明的具体实施方案，所述组合物是用于降低T淋巴细胞、嗜酸粒细胞及巨噬细胞数量。具体应用时，所述的副干酪乳杆菌的应用量为1×106-1×1013CFU/天，优选为1×1012CFU/天。
在本发明的一具体实施方案中，所述组合物除副干酪乳杆菌K56外，也可以包括生物可兼容的赋形剂，以制备不同剂型，供一般应用或医药使用。
根据本发明的具体实施方案，其中，所述副干酪乳杆菌以固态或液态菌制剂的形式用于制备所述组合物。
综上所述，本发明提供了副干酪乳杆菌K56的新用途，该菌具有预防上呼吸道不适症状的功效，能够减轻哮喘，降低T淋巴细胞、嗜酸粒细胞及巨噬细胞数量。可用于制备具有预防上呼吸道不适症状的产品，例如特殊食品、饲料及药物，具有广泛的应用前景。
附图说明
图1显示在过敏模式下K56对小鼠挠鼻次数的影响。
图2显示在过敏模式下K56改善小鼠肺部病理损伤及提升肺功能的影响。
图3显示在过敏模式下K56对小鼠肺泡灌洗液中T淋巴细胞、嗜酸粒细胞及巨噬细胞数量的影响。
具体实施方式
为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现结合具体实施例及对本发明的技术方案进行以下详细说明，应理解这些实例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例中，各原始试剂材料均可商购获得，未注明具体条件的实验方法为所属领域熟知的常规方法和常规条件，或按照仪器制造商所建议的条件。
实施例1
本实施例提供副干酪乳杆菌K56预防上呼吸道不适症状的功效实验。
实验小鼠模型建立：雌性8周龄BALB/c小鼠(体重18～20g)，组别共分为4组：正常对照组、模型组、K56预防组、K56治疗组。适应性饲养1周后，除对照组外，其余各组于第0天和第14天腹腔注射100μg/mL卵白蛋白(Ovalbumin，OVA)和10mg/mL氢氧化铝佐剂混合液0.2mL以致敏小鼠，并于第21天到第29天给予1％OVA雾化吸入30min以诱发症状。K56预防组从第8天到第29天给予活性菌株溶液200μL灌胃(K56菌株应用量为1×1011CFU/天)，K56治疗组从第21天到第29天给予K56菌株溶液200μL灌胃(K56菌株应用量为1×1011CFU/天)，对照组和模型组以等量生理盐水灌胃，直至造模结束。
造模第21到29天期间，雾化开始10min内观察并记录小鼠的挠鼻次数。记录结果如图1所示，可知，与模型组比较，K56预防组(P<0.05)和治疗组(P<0.05)在雾化第7天开始对小鼠的挠鼻次数有改善作用。
肺组织病理学检测及病理评分：末次给菌24小时后，麻醉处死小鼠，取出全肺组织于10％甲醛溶液中固定72小时，梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，制作病理切片。染色后在光学显微镜下观察，利用组织扫描机拍照。H&E染色评定支气管周围的炎症细胞浸润情况，并按照肺组织病理评分标准对病理情况进行评分及统计分析。结果如图2所示，可知，与模型组比较，K56预防组可以明显改善炎性细胞浸润程度。根据肺组织病理评分规则，对各组肺组织病理进行评分并进行统计分析发现，与模型组比较，K56预防组(P<0.001)和治疗组(P<0.05)病理评分明显下降，说明K56能有效改善小鼠的肺部病理损伤。
肺泡灌洗液中炎症细胞数量检测：末次给菌24小时后，麻醉处死小鼠，手术剪开颈部暴露气管及肺脏，分离气管，剪开一个小口，将气管插管头小心插入气管中1cm固定。注射器吸取含1％BSA的PBS溶液0.8mL，缓慢注入肺组织中，回抽注射器，确保回收率在80％以上，重复连续灌洗全肺3次。将收集的全部肺泡灌洗液在4℃下，1800转，离心5min，收集上清和沉淀细胞。取制备好的BALF细胞，利用流式细胞术分析免疫细胞表型。加入Fc受体阻断剂孵育后，加入相应的荧光抗体冰上避光孵育30min，同时做unstained、同型对照以及补偿管，最后上流式细胞仪检测小鼠肺泡灌洗液中T淋巴细胞、嗜酸粒细胞及巨噬细胞数量。结果如图3所示，与模型组比较，K56预防组(P<0.001)和治疗组(P<0.01)可以降低T淋巴细胞、嗜酸粒细胞及巨噬细胞数量，表明K56可以减少模型小鼠肺泡灌洗液中炎性细胞渗出进而预防上呼吸道不适症状。
综上所述，在小鼠模型中，小鼠挠鼻次数、肺部病理损伤及肺功能、炎性细胞数量结果都证实了K56可以预防或缓解上呼吸道不适症状。因此，副干酪乳杆菌K56可作为特殊食品，并发挥功能。此外，副干酪乳杆菌K56也可以和包括生物可兼容的赋形剂混合，以制备不同剂型，供一般应用或医药使用。
Claims (10)
1.一种副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)K56在制备用于预防或缓解上呼吸道不适症状的组合物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述上呼吸道不适症状包括过敏引发的上呼吸道症状，如：挠鼻、打喷嚏、鼻子堵塞。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其中，所述组合物包括特殊食品组合物、动物饲料组合物或药品组合物。
4.根据权利要求3所述的应用，其中，所述特殊食品选自配方食品、特殊医学用途婴儿配方食品、特殊医学用途配方食品或保健食品。
5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其中，所述组合物是用于减轻哮喘。
6.根据权利要求5所述的应用，其中，所述的副干酪乳杆菌的应用量为1×106-1×1013CFU/天。
7.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其中，所述组合物是用于降低T淋巴细胞、嗜酸粒细胞及巨噬细胞数量。
8.根据权利要求7所述的应用，其中，所述的副干酪乳杆菌的应用量为1×106-1×1013CFU/天。
9.根据权利要求1-8任一项所述的应用，其中，所述组合物还包括生物可兼容的赋形剂。
10.根据权利要求1-9任一项所述的应用，其中，所述副干酪乳杆菌以固态或液态菌制剂的形式用于制备所述组合物。
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