CN117942355A - 抗过敏药物组合物以及预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种抗过敏药物组合物以及预防和/或治疗过敏反应引起的疾病的药物，涉及芽孢杆菌作为唯一益生菌活性成分在制备预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物中的用途以及包含作为唯一益生菌活性成分的芽孢杆菌和变应原的抗过敏药物组合物。本发明进一步提供预防和/或治疗过敏反应引起的疾病的试剂盒，其包含根据本发明的抗过敏药物组合物，以及根据本发明的抗过敏药物组合物在制备预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物中的用途。本发明的抗过敏药物组合物或抗过敏药物可有效地对抗过敏反应，充分抵御外界过敏原入侵，降低机体发生过敏性疾病的几率，预防和/或治疗过敏反应引起的疾病，同时还对身体无副作用。

Description

抗过敏药物组合物以及预防和/或治疗由过敏反应引起的疾 病的药物

技术领域

本发明属于药物领域，涉及一种抗过敏药物组合物以及预防和/或治疗过敏反应引起的疾病的药物。

背景技术

目前，过敏性疾病已成为一种普遍的公共健康问题。2005年，世界变态反应组织(WAO)对30个国家的过敏性疾病流行病学调查显示，在这些国家的总人口中，22％的人患有过敏性疾病，如过敏性鼻炎、哮喘、结膜炎、湿疹、食物过敏、药物过敏等。而且，过敏性疾病的发生率正逐年增高，造成了巨大的医疗负担。如何有效预防及治疗过敏性疾病已成为当下的研究热点。

过敏是指机体对环境中原本无害的物质产生的不适当的免疫反应，属于全身性疾病，具有以下特点：儿童多发、反复发作、多种过敏原、多器官受累。工业化发达国家中过敏性疾病发生率很高，原因之一在于家庭规模小型化和儿童感染发生率降低，减少了微生物的接触机会，而这些微生物在婴幼儿宿主免疫成熟过程中发挥了重要作用。常见的过敏原有花粉、屋尘螨、霉菌、药物、食物和动物毛发及皮屑。最常见的过敏疾病有鼻炎、哮喘和特应性皮炎。目前常见的过敏反应引起的副反应包括：水肿、血管通透性增加、气管阻塞、局部充血、鼻黏膜水肿、鼻黏膜刺激、支气管收缩、黏液分泌增多、气道炎症、呕吐、腹泻、瘙痒、荨麻疹、皮疹。

过敏性哮喘是一种慢性炎症性疾病。通过使用抗组胺剂、β-激动剂及皮质类固醇能改善过敏症状，从而达到过敏性哮喘的对症治疗。许多症状难以控制的哮喘患者的主要治疗方法是频繁地口服糖皮质激素，而口服糖皮质激素会导致许多不良反应。在世界上有很多国家的儿童患有哮喘的几率在10％左右，儿童患有哮喘是由多种因素引起的，该病容易出现反复发作，严重影响了儿童的身体健康和正常学习。目前，临床常通过吸入糖皮质激素和长效β受体激动剂来治疗此类患儿，但效果仍不理想，亟需寻找更有效的治疗方案。

针对过敏疾病的免疫治疗方式包括：皮下免疫治疗，如在美国、日本用于皮下免疫治疗的美国TO-204尘螨提取制剂、丹麦安脱达-屋尘螨过敏原制剂、德国阿罗格-螨过敏原注射液；舌下免疫治疗，如畅迪-粉尘螨滴剂、美国OdaCtra户尘螨抑制剂；口服免疫治疗方式，如豚草、桦花粉制剂；鼻内局部特异性免疫治疗；淋巴管内免疫治疗等。

螨虫是我国儿童最常见的过敏原之一，可引起过敏性鼻炎和哮喘。变应性鼻炎、哮喘的治疗包括避免接触变应原、药物控制、AIT、患者教育等。使用以吸入糖皮质激素为主的药物治疗可迅速有效地缓解症状，但不能改变变应原所引起的鼻炎和哮喘的自然病程。特异性免疫治疗(specific immunotherapy，SIT)是目前唯一可以影响过敏自然进程的病因治疗，但仍有报道这一治疗有不良反应发生。例如，局部反应表现为注射部位周围局部红肿和瘙痒；全身反应表现为哮喘相关症状(咳嗽、喘息、胸闷、呼气峰流速下降)、上呼吸道症状(咽痒)、呕吐、腹痛等。螨变应原制剂系以灭活的螨虫纯种培养物，例如螨虫虫体、虫体碎片、螨虫排泄物、幼虫、虫卵等为原材料制备而成的螨变应原活性物质，可用于螨变应原引起的变态反应性疾病的体内诊断或脱敏治疗。目前，市售的尘螨变应原制剂安脱达系包含螨变应原提取物的制剂，其适应症为用于有屋尘螨致敏史的轻中度过敏性哮喘及/或过敏性鼻炎患者的脱敏治疗。其治疗分两个阶段进行，即起始治疗阶段和维持治疗阶段，其中起始治疗阶段为1-15周，维持治疗阶段为17-51周，治疗周期过长，不利于临床应用，给患者带来不便。另外，采用尘螨变应原制剂安脱达治疗可能会产生一些不良反应，例如局部过敏反应、全身过敏反应和过敏性休克等，如局部过敏反应主要表现为药物注射部位局部肿胀，发红和瘙痒；全身过敏反应轻度表现为枯草热症状，中度表现为荨麻疹或哮喘；过敏性休克表现为呼吸困难、全身性荨麻疹，血管性水肿，喉水肿伴喘鸣、哮喘、低血压、恶心、呕吐、腹泻、腹痛、意识丧失、惊厥和昏迷等。现有技术还没有报道在治疗抗过敏反应的同时能够降低不良反应的药物。

乳杆菌属于公认安全(Generally Regarded as Safe，G.R.A.S)的菌属，目前已知乳杆菌是一群生活在机体内有益于宿主健康的微生物，能发挥维护人体健康和调节免疫功能的作用。乳杆菌属的特定菌株已被发现能够定殖于肠道粘膜，并协助维持人类和动物的健康，一般使用浓度在10亿以上的活菌含量水平。近年来，国内外研制出多种益生菌活菌制剂，其基本指导思想就是用人或动物的正常生理菌群的菌株，经过筛选和培养，通过各种途径制成各种剂型的活菌制剂，然后再以投入方式使其回到原来环境，从而发挥其自然的生理作用。我国对益生菌用于保健食品和药品的研究起步较晚，20世纪90年代才开始将双歧杆菌用于各种保健食品中。目前市场上出现的益生菌药品剂型大致分为三类，即胶囊剂，如美常安、聚克、整肠生、贝飞达、丽珠肠乐等；颗粒剂和散剂，如妈咪爱、培菲康、常乐康等；片剂，如促菌生、金双歧、益生菌组合物、乳酸菌素等，这些益生菌产品主要用于肠道相关的消化系统疾病。

对于某些过敏原，目前尚未研制出治疗其对应的过敏性疾病的药物，最主要的治疗方式是采用药物来控制过敏症状(即对症用药)；但药物并不能改变过敏性疾病的进程，因而也就不能从根本上达到治愈效果。

发明内容

针对以上问题，本发明的目的是提供一种抗过敏药物组合物以及预防和/或治疗过敏反应引起的疾病的药物，它们可有效地对抗过敏反应，充分抵御外界过敏原入侵，降低机体发生过敏性疾病的几率，预防和/或治疗过敏反应引起的疾病，同时还对身体无副作用。

人体体内免疫反应的程度主要由T辅助细胞(Th细胞)来调节，Th细胞又分为Th1和Th2两大主要类型。两种T辅助细胞之间相互影响并达到一定的平衡状态。其中，Th2细胞可以促使体内合成更多的免疫球蛋白E(IgE)，这类免疫球蛋白可以识别外界特定的过敏原并与之结合，并触发后续的过敏反应。

抗过敏的过程是调节免疫Th1与Th2细胞平衡的过程。其中，IL-4、IL-2及IFN-γ间的相互作用是维持Thl/Th2平衡的关键。IL-2是诱导Th1细胞分化的主要因子，而IL-4则是诱导Th2细胞分化的主要细胞因子，IL-2和IL-4可分别促使Th1和Th2增殖分化。IFN-γ在Th1和Th2增殖分化中也起着特殊的作用，因为IFN-γ可拮抗IL-4的作用。正常人Th1细胞分泌IFN-γ等细胞因子能促进Th0细胞向Th1分化，同时选择性抑制Th2型细胞因子的分泌。

IL-2细胞因子是能够特异性扩大和激活调节性T细胞(Treg)的关键因子，IL-2细胞因子能够特异且安全地激活人体Treg细胞；Treg细胞在体内与效应T细胞的平衡控制着免疫性疾病发生，Treg细胞大量消耗减少会使效应T细胞因缺乏抑制而引发过敏和一系列炎症反应。因此，IL-2细胞因子的上调能够抑制或减轻过敏反应。

于是，本发明对IL-2和IFN-γ的机体水平进行了研究，以考察药物在治疗过敏症状的同时对机体防护免疫功能的影响。

本发明的发明人意外地发现，芽孢杆菌，尤其是蜡样芽孢杆菌，作为抗过敏药物中的唯一活性成分时具有显著的抗过敏活性，可用于预防和治疗过敏性疾病，而且该菌株无有害成分，对人体无副作用。本发明的发明人还出乎意料地发现，将该菌株与变应原制剂联用能够改变过敏性疾病的进程，成为过敏反应的最佳治疗手段，因而能够从根本上达到治愈效果。此外，采用本发明的药物在治疗过敏反应过程中还能够显著降低不良反应的发生，为抗过敏治疗提供了极大的有利条件。

本发明的上述目的是通过提供以下技术方案实现的：

第一方面，本发明提供芽孢杆菌作为唯一益生菌活性成分在制备预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物中的用途。

优选地，所述由过敏反应引起的疾病选自全身性过敏、风团、过敏性鼻炎、过敏性哮喘或食物过敏中的一种或多种。

优选地，所述药物中的芽孢杆菌的活菌数不低于1×10⁵cfu/g，优选为1×10⁵至1×10⁹cfu/g。

优选地，所述芽孢杆菌(Bacillus)为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和/或凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)，更优选为蜡样芽孢杆菌。

进一步优选地，所述蜡样芽孢杆菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.4的蜡样芽孢杆菌。

优选地，所述由过敏反应由一种或多种选自以下的过敏原引起：花粉过敏原、牛奶过敏原、毒液过敏原、蛋过敏原、野草过敏原、牧草过敏原、树过敏原、灌木过敏原、花卉过敏原、蔬菜过敏原、谷物过敏原、真菌过敏原、水果过敏原、浆果过敏原、坚果过敏原、种子过敏原、大豆过敏原、鱼过敏原、贝类过敏原、海鲜过敏原、肉过敏原、香料过敏原、昆虫过敏原、螨过敏原(例如屋尘螨)、霉菌过敏原、动物变应原、鸽蜱过敏原、蠕虫过敏原、软珊瑚过敏原、动物皮屑过敏原、线虫过敏原或橡胶树过敏原。

优选地，所述药物还包括变应原。

优选地，所述芽孢杆菌与变应原的比例为(1×10³至1×10⁷cfu)∶(20至2×10⁵SQ-U)，优选为(1×10⁴至1×10⁶cfu)∶(1000至2×10⁵SQ-U)。

优选地，所述变应原选自微生物变应原、螨虫变应原、寄生虫变应原、花粉变应原、异种动物血清变应原、药物变应原或化学试剂变应原中的一种或多种；优选地，所述变应原为螨虫变应原，例如屋尘螨变应原或粉尘螨变应原。根据本发明所述药物的一个具体实施方案，所述屋尘螨变应原为螨变应原提取物，例如，螨虫虫体、虫体碎片、螨虫排泄物、幼虫、虫卵的提取物。

优选地，所述芽孢杆菌和变应原分开放置。

优选地，所述芽孢杆菌为口服制剂。

优选地，所述变应原为注射剂。

第二方面，本发明提供一种抗过敏药物组合物，其包含作为唯一益生菌活性成分的芽孢杆菌和变应原。

优选地，所述芽孢杆菌与变应原的比例为(1×10³至1×10⁷cfu)∶(20至2×10⁵SQ-U)，优选为(1×10⁴至1×10⁶cfu)∶(1000至2×10⁵SQ-U)，更优选为(1×10⁴至2×10⁴cfu)∶(8000至1.2×10⁵SQ-U)。

优选地，所述芽孢杆菌(Bacillus)为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和/或凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)，更优选为蜡样芽孢杆菌。

进一步优选地，所述蜡样芽孢杆菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.4的蜡样芽孢杆菌。

优选地，所述变应原选自微生物变应原、螨虫变应原、寄生虫变应原、花粉变应原、异种动物血清变应原、药物变应原或化学试剂变应原中的一种或多种；优选地，所述变应原为螨虫变应原，例如屋尘螨变应原或粉尘螨变应原。根据本发明所述的药物组合物的一个具体实施方案，所述屋尘螨变应原为螨变应原提取物，例如，螨虫虫体、虫体碎片、螨虫排泄物、幼虫、虫卵的提取物。

优选地，所述芽孢杆菌和变应原分开放置。

优选地，所述芽孢杆菌为口服制剂。

优选地，所述变应原为注射剂。

第三方面，本发明提供一种预防和/或治疗过敏反应引起的疾病的试剂盒，其包含根据本发明的抗过敏药物组合物。

第四方面，本发明提供根据本发明的抗过敏药物组合物在制备预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物中的用途。

优选地，所述由过敏反应引起的疾病选自全身性过敏、风团、过敏性鼻炎、过敏性哮喘或食物过敏中的一种或多种。

本发明至少具有如下有益效果：

1.本发明提供的抗过敏药物组合物或预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物以芽孢杆菌作为唯一益生菌活性成分，可有效治疗过敏反应，充分抵御外界过敏原入侵，降低机体发生过敏性疾病的几率，同时所用菌株成分无害，对身体无副作用。

2.本发明提供的抗过敏药物组合物或预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物以较低含量的芽孢杆菌活菌就能够达到较好的预防和治疗效果。

3.本发明将芽孢杆菌与变应原联用，能够改变过敏性疾病的进程，显著提升免疫治疗的药效，是针对过敏反应的最佳治疗手段，因而能从根本上达到治愈效果。同时，本发明的抗过敏药物组合物或预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物在治疗过敏反应过程中能够大大减轻现有变应原制剂治疗方案下的过敏症状，从而降低不良反应的发生。

4.本发明的抗过敏药物组合物或预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物在治疗过敏反应的同时能够显著提升IL-2和IFN-γ的水平，从而增强了机体的免疫防护能力，消除了现有过敏治疗方法通常伴随的免疫力降低的副作用，在临床抗过敏疾病的治疗以及增强免疫力方面具有较大价值。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1显示造模结束后小鼠体内Derp特异性IgE的变化；

图2显示治疗12周小鼠脾淋巴细胞分泌Derp特异性细胞因子IL-2的变化。

图3显示治疗12周小鼠脾淋巴细胞分泌Derp特异性细胞因子IFN-γ的变化。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。

以下实施例中所使用的试剂和制备方法说明如下：

1.屋尘螨变应原(Derp)生产厂家：浙江我武生物科技股份有限公司，批号190802C。

2.屋尘螨变应原制剂(AIT，生产厂家为安脱达，批号E4958，规格100000SQ-U/ml)给药剂量：每只小鼠每次给药剂量为10000SQ-U(给药剂量约等于临床人体给药剂量的十分之一)。

3.蜡样芽孢杆菌悬液一：取蜡样芽孢杆菌菌粉(杭州远大生物制药有限公司，批号BB20200663，保藏号CGMCC No.0460.4，菌株代号L)溶解于生理盐水中，得到蜡样芽孢杆菌菌悬液一；

蜡样芽孢杆菌(L)给药浓度为每只小鼠每次给药剂量1.36×10⁴cfu(以小鼠单位重量的体重计为6.8×10⁵cfu/kg，给药剂量约等于临床人体给药剂量的十分之一)。

4.蜡样芽孢杆菌悬液二：取蜡样芽孢杆菌菌粉(市售产品，菌株代号C)溶解于生理盐水中，得到蜡样芽孢杆菌菌悬液二；

蜡样芽孢杆菌(C)给药浓度为每只小鼠每次给药剂量1.36×10⁴cfu(以小鼠单位重量的体重计为6.8×10⁵cfu/kg)。

实施例1建立小鼠过敏模型

选用SPF级Balb/c小鼠，雌性，5-8周龄进行试验。将小鼠分为正常对照组和模型组。模型组采用螨变应原进行造模。小鼠经适应性饲养之后，采取皮下注射方式，给予小鼠Derp(20μg/ml，0.1ml/只)致敏。致敏周期为隔天致敏，共3次。小鼠经致敏后，间隔1周。采取滴鼻方式，给予小鼠Derp(80μg/ml，40μ1/只)激发。激发周期为1次/天，连续7天。

造模结束后，对小鼠进行面部采血，离心，分离血清，采取ELISA法检测血清中Derp特异性IgE的变化，结果见表1和图1。

表1造模结束后小鼠体内Derp特异性IgE的变化(MEAN±SD)

组别	MEAN	SD	n
				正常对照组	0.08	0.00	10
模型组	0.64	0.16	10

结果显示，小鼠经Derp致敏和激发后，与正常对照组相比，模型组小鼠血清DerpIgE水平显著升高(P＜0.001)，表明螨变应原诱导的小鼠过敏模型成功建立。

实施例2 12周治疗实验

1.按照实施例1的方法建立小鼠过敏模型。

2. 10只正常小鼠作为正常对照组，模型组小鼠随机分为模型对照组(10只)、AIT组(10只)、C+AIT组(10只)和L+AIT组(10只)，进行如下治疗(a和b在同一治疗周期内进行)：

a.皮下注射：生理盐水(正常对照组、模型对照组)或屋尘螨变应原制剂(AIT组、C+AIT组和L+AIT组)，0.1m1/只，每周1次，连续治疗12周；

b.灌胃：生理盐水(正常对照组、模型对照组和AIT组)、蜡样芽孢杆菌悬液一(L+AIT组)或蜡样芽孢杆菌悬液二(C+AIT组)，0.2ml/只，每天1次，连续治疗12周。

3.治疗结果

(1)治疗12周结束后小鼠脾淋巴细胞分泌Derp特异性IL-2

治疗12周激发后，对小鼠进行摘眼球采血，脱颈处死，获取脾淋巴细胞。采用酶联免疫斑点(enzyme-linked immunospot，ELISPOT)检测小鼠脾淋巴细胞分泌Derp特异性IL-2，结果如图2所示。从图2可以看出，经L+AIT组联合治疗后，可以显著提高小鼠脾淋巴细胞分泌Derp特异性IL-2水平。

(2)治疗12周结束后小鼠脾淋巴细胞分泌Derp特异性IFN-γ

治疗12周激发后，对小鼠进行摘眼球采血，脱颈处死，获取脾淋巴细胞。采用酶联免疫斑点(enzyme-linked immunospot，ELISPOT)检测小鼠脾淋巴细胞分泌Derp特异性IFN-γ，结果如图3所示。从图3可以看出，经L+AIT组联合治疗后，可以显著提高小鼠脾淋巴细胞分泌Derp特异性IFN-γ水平。

以上结果表明，L+AIT组可以显著提高IL-2和IFN-γ的分泌，从而调节Th1/Th2的平衡来达到脱敏治疗作用。

以上试验结果显示，采用本发明的蜡样芽孢杆菌联合螨变应原能够有效治疗或缓解过敏反应，降低过敏症状发生，降低不良反应发生率，且能够更好更快达到治疗效果，有望降低患者的治疗费用支出。

以上所述仅是本发明的几个示例性实施例，并非对本发明做任何形式的限制。虽然本发明以较佳的实施例揭示如上，然而其并非用以限制本发明。任何熟悉本专业的技术人员在不脱离本发明技术方案的范围内，利用上述揭示的技术内容做出些许的变动或修饰获得等同或等效实施例均属于本发明的范围。

Claims (10)

1.芽孢杆菌作为唯一益生菌活性成分在制备预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物中的用途；

优选地，所述由过敏反应引起的疾病选自全身性过敏、风团、过敏性鼻炎、过敏性哮喘或食物过敏中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述药物中的芽孢杆菌的活菌数不低于1×10⁵cfu/g，优选为1×10⁵至1×10⁹cfu/g。

3.根据权利要求1或2所述的用途，其中，所述芽孢杆菌为蜡样芽孢杆菌和/或凝结芽孢杆菌，优选为蜡样芽孢杆菌；

优选地，所述蜡样芽孢杆菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.4的蜡样芽孢杆菌。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的用途，其中，所述药物还包括变应原；

优选地，所述芽孢杆菌与所述变应原的比例为(1×10³至1×10⁷cfu)∶(20至2×10⁵SQ-U)，优选为(1×10⁴至1×10⁶cfu)∶(1000至2×10⁵SQ-U)；

优选地，所述变应原选自微生物变应原、螨虫变应原、寄生虫变应原、花粉变应原、异种动物血清变应原、药物变应原或化学试剂变应原中的一种或多种；更优选地，所述变应原为螨虫变应原；

优选地，所述芽孢杆菌和变应原分开放置；

优选地，所述芽孢杆菌为口服制剂；

优选地，所述变应原为注射剂。

5.一种抗过敏药物组合物，其包含作为唯一益生菌活性成分的芽孢杆菌和变应原。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其中，所述芽孢杆菌与变应原的比例为(1×10³至1×10⁷cfu)∶(20至2×10⁵SQ-U)，优选为(1×10⁴至1×10⁶cfu)∶(1000至2×10⁵SQ-U)。

7.根据权利要求5或6所述的药物组合物，其中，所述芽孢杆菌为蜡样芽孢杆菌和/或凝结芽孢杆菌，优选为蜡样芽孢杆菌；

优选地，所述蜡样芽孢杆菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.4的蜡样芽孢杆菌。

8.根据权利要求5至7中任一项所述的药物组合物，其中，所述变应原选自微生物变应原、螨虫变应原、寄生虫变应原、花粉变应原、异种动物血清变应原、药物变应原或化学试剂变应原中的一种或多种；优选地，所述变应原为螨虫变应原；

优选地，所述芽孢杆菌和变应原分开放置；

优选地，所述芽孢杆菌为口服制剂。

优选地，所述变应原为注射剂。

9.一种预防和/或治疗过敏反应引起的疾病的试剂盒，其包含根据权利要求5至8中任一项所述的药物组合物。

10.根据权利要求5至8中任一项所述的药物组合物在制备预防和/或治疗由过敏反应引起的疾病的药物中的用途；

优选地，所述由过敏反应引起的疾病选自全身性过敏、风团、过敏性鼻炎、过敏性哮喘或食物过敏中的一种或多种。