CN118028415A - 一种细胞黏附物的培育方法及其细胞检测方法、装置 - Google Patents
一种细胞黏附物的培育方法及其细胞检测方法、装置 Download PDFInfo
- Publication number
- CN118028415A CN118028415A CN202410033637.4A CN202410033637A CN118028415A CN 118028415 A CN118028415 A CN 118028415A CN 202410033637 A CN202410033637 A CN 202410033637A CN 118028415 A CN118028415 A CN 118028415A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cell
- adhesion
- cells
- detection device
- carrier
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 68
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 title claims abstract description 47
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 title description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 31
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims abstract description 25
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 25
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 25
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 23
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 105
- 230000004956 cell adhesive effect Effects 0.000 claims description 28
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 claims description 23
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 13
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 12
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 claims description 10
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 8
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 claims description 7
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 claims description 7
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 6
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 3
- 210000002445 nipple Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 3
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 5
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 3
- -1 TNF- β Chemical compound 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007760 Iscove's Modified Dulbecco's Medium Substances 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 229940036811 bone meal Drugs 0.000 description 2
- 239000002374 bone meal Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 2
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003451 Vitamin B1 Natural products 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 229930003471 Vitamin B2 Natural products 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005258 dental pulp stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229940028444 muse Drugs 0.000 description 1
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 210000000944 nerve tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000001178 neural stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002379 periodontal ligament Anatomy 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N pyridoxal hydrochloride Natural products CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000010374 vitamin B1 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011691 vitamin B1 Substances 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 235000019164 vitamin B2 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011716 vitamin B2 Substances 0.000 description 1
- 235000019158 vitamin B6 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011726 vitamin B6 Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/06—Tubular
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/44—Multiple separable units; Modules
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
本申请涉及一种细胞黏附物的培育方法,其包括:准备黏附载体;拉出黏附检测装置的推注杆,放入所述黏附载体;制备细胞悬液;利用所述黏附检测装置吸取所述细胞悬液,经倒置、轻微震荡、排除气泡步骤,黏附细胞与所述黏附载体接触,所述黏附细胞黏附在所述黏附载体表面,初步形成细胞黏附物,等待所述细胞黏附物下沉;绑定多组所述黏附检测装置,将推注杆朝向细胞培养瓶底部放入所述细胞培养瓶中,而后将所述细胞培养瓶垂直放入细胞培养箱孵育1~24小时。以及一种细胞检测方法、装置。本申请用于评价材料的生物相容性和生物活性,为进一步的临床应用提供了重要的预测信息。
Description
技术领域
本发明涉及一种细胞黏附物及其培育方法,以及一种细胞检测方法、装置。
背景技术
生物材料的设计和应用在组织工程和再生医学中扮演着至关重要的角色。它们不仅为细胞提供了一个模拟自然生理环境的平台,以促进细胞的生长和黏附,还通过其表面特性和生物活性分子来维持细胞的活力和功能,从而支持受损组织的重建和修复。因此,评价细胞在生物材料表面的黏附铺展情况,包括细胞的数量、分布、形态以及黏附的速度,是体外评价生物材料生物相容性和功能性的一个重要环节。这些评价指标不仅反映了材料的生物相容性和生物活性,也为进一步的临床应用提供了重要的预测信息。
现有技术中存在由于载体形状不规则,难操作,载体在孔板中面积大,容易散开等问题。还存在,洗涤时载体容易被吸走。细胞更容易黏附在孔板上等问题。故载体难以全部转移到新的检测孔板上,这会直接导致检测结果不准。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供一种细胞黏附物的培育方法及其细胞检测方法、装置,能够满足细胞黏附物培养、细胞检测的条件,提供更高效、更精准的细胞黏附检测。
为实现上述技术目的,采用如下技术方案:
一种细胞黏附物的培育方法,其包括:
S1:准备黏附载体0.1~0.5ml;
S2:拉出黏附检测装置的推注杆,放入所述黏附载体;
S3:制备细胞悬液,所述细胞悬液包括黏附细胞及培养基;
S4:利用所述黏附检测装置取0.1ml所述细胞悬液,经倒置、轻微震荡、排除气泡步骤,黏附细胞与所述黏附载体接触,所述黏附细胞黏附在所述黏附载体表面,初步形成细胞黏附物,等待所述细胞黏附物下沉;
S5:绑定多组所述黏附检测装置,将推注杆朝向细胞培养瓶底部放入细胞培养瓶中,而后将所述细胞培养瓶垂直放入细胞培养箱孵育1~24小时。
根据[1]所述的细胞黏附物的培育方法,其中,
所述黏附载体为多孔物质。
根据[2]所述的细胞黏附物的培育方法,其中,
所述黏附载体为骨粉颗粒。
一种细胞检测方法,用以检测[1]所述的细胞黏附物,其包括:
将置于黏附检测装置中的培养完成的所述细胞黏附物,推动所述推注杆,排除含有细胞悬浮液的培养基;
重新吸取不含细胞的培养基进行润洗涤,重复3次;
将所述细胞黏附物从黏附检测装置中取出,在孔板中收获培养完成的所述细胞黏附物:
经过培养基润洗涤后,进行1mg/ml MTT孵育2小时,按照MTT实验方法洗脱,收获上清液测量OD570,以反映细胞黏附数量。
根据[4]所述的细胞检测方法,其中,
所述润洗涤包括改性处理。
根据[4]所述的细胞检测方法,其中,
所述细胞黏附物取出方式为,拔出所述推注杆,从所述黏附检测装置下方取出。
根据[4]所述的细胞检测方法,其中,
所述细胞黏附物取出方式为,分离所述黏附检测装置上部,推动所述推注杆,从所述黏附检测装置上方取出。
一种细胞黏附检测装置,应用于[1]~[7]所述的任一种方法,其包括,
空管,所述空管上部具有乳头结构;
推注杆,所述推注杆底部设有推注柄,所述推注杆设于空管内部;
胶塞,所述胶塞与所述推注杆连接,并于空管接触,使空管内部形成密闭结构。
根据[8]所述的细胞黏附检测装置,其中,
所述空管具有分离式结构。
一种细胞组合物,其含有黏附细胞。
发明效果:
根据本公开,能够提供更高效、更精准的细胞黏附检测装置,并能提供细胞黏附物培养方法、细胞检测方法、细胞黏附物以适用。
应当理解的是,以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性和解释性的,并不能限制本说明书。
附图说明
图1为本发明黏附检测装置结构示意图;
图2为本发明黏附检测装置置培养瓶中培养图示;
图3为本发明细胞黏附示意图;
图4为本发明细胞黏附物显微镜图。
具体实施方式
本说明书中,使用“~”表示的数值范围表示包含“~”前后记载的数值分别作为最小值和最大值的范围。在本说明书中阶段性地记载的数值范围中,某阶段性数值范围的上限值或下限值可以与其他阶段性数值范围的上限值或下限值任意组合。在本说明书所记载的数值范围中,该数值范围的上限值或下限值可以置换为实施例所示的值。本说明书中,在组合物中存在多种相当于各成分的物质的情况下,只要没有特别说明,则组合物中的各成分的含量是指存在于组合物中的该多种物质的合计量。在本说明书中,“步骤”这一术语不仅包含独立的步骤,即使在无法与其他步骤明确区别的情况下,只要能够实现该步骤的所期望的作用,则也包含在本术语中。只要没有特别说明,要素表示单个或多个要素。
以下,对本公开的实施方式进行说明。本发明并不限定于以下的实施方式中的例示。以下说明中的术语及表述并不受后述的实施例的具体例限定。
细胞黏附物的培育方法,
本公开的实施方式的培养物的制造方法可以包括:
S1:准备黏附载体0.1~0.5ml;
S2:拉出黏附检测装置的推注杆,放入黏附载体;
S3:制备细胞悬液,细胞悬液包括黏附细胞及培养基;
S4:利用黏附检测装置取0.1ml细胞悬液,经倒置、轻微震荡、排除气泡步骤,黏附细胞与黏附载体接触,黏附细胞黏附在黏附载体表面,初步形成细胞黏附物,等待细胞黏附物下沉;
S5:绑定多组黏附检测装置,将推注杆朝向细胞培养底部放入细胞培养瓶中,而后将细胞培养瓶垂直放入细胞培养箱孵育1~24小时。
该培养方法运用黏附检测装置,便于吸取培养基,便于定量,能够最大程度上减少杂质混入,运用该培养方法培养的细胞黏附物,更便于后续细胞检测处理。
在以下说明中,细胞黏附物是指含有黏附细胞和黏附载体,且黏附细胞黏附于黏附载体表面的材料。细胞悬液是指含有黏附细胞的液体。
黏附细胞可以是能够黏附在黏附载体表面,且在黏附载体表面状态下能够促进细胞生长的细胞,黏附细胞可以与与水性介质一起构成细胞悬液,作为构成细胞悬液的水性介质,可以为培养基、生理盐水、磷酸缓冲液等。
细胞优选为源自动物的细胞,更优选为源自哺乳动物的细胞。作为哺乳动物,可列举例如:人、猴子、黑猩猩、牛、猪、马、绵羊、山羊、兔、大鼠、小鼠、豚鼠、狗、猫等。细胞来源的组织没有特别限定,例如可以是皮肤、肝脏、肾脏、肌肉、骨、血管、血液、神经组织等。细胞可以是原代培养细胞、培养细胞株、重组培养细胞株等。
作为干细胞,例如可举出间充质干细胞、造血干细胞、神经干细胞、骨髓干细胞、生殖干细胞、牙髓干细胞等成体干细胞等,优选为间充质干细胞。间充质干细胞广义上是指存在于个体的各种组织中,能够分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞等间充质细胞中的全部或几种的成体干细胞。作为间充质干细胞,可列举源自骨髓的间充质干细胞、源自脐带的间充质干细胞、源自脂肪组织的间充质干细胞等。
作为干细胞,例如可以使用人工多能干细胞(iPS细胞)、胚胎干细胞(ES细胞)、胚胎生殖干细胞(EG细胞)、多能生殖干细胞(mGS细胞)、胚胎癌细胞(EC细胞)、Muse细胞等多能干细胞。
作为细胞,例如可以是内皮细胞、表皮细胞、上皮细胞、心肌细胞、成肌细胞、神经细胞、骨细胞、成骨细胞、成纤维细胞、脂肪细胞、肝细胞、肾细胞、胰细胞、肾上腺细胞、牙周膜细胞、牙龈细胞、骨膜细胞、皮肤细胞、树突状细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等分化后的细胞;处于从干细胞向这些分化后的细胞的前阶段的前体细胞等。
上述细胞可以单独使用1种或组合使用2种以上。
黏附载体主要起黏附、支撑作用,黏附载体能够在表面黏附细胞,能够形成黏附细胞和黏附载体的组合,优选为多孔结构,更优选为骨粉颗粒。
用于培养黏附细胞的培养基优选含有无机盐、氨基酸、糖和水。培养基可以进一步含有血清、维生素、激素、抗生素、生长因子、黏附因子等任意成分。作为培养基,可以使用作为细胞培养用的基础培养基而已知的培养基。即,作为培养基,只要是已知用于培养所选择的细胞的培养基,就可以没有特别限制地使用。
作为培养基,并不限定于此,例如可举出DMEM(Dulbecco’s改良Eagle培养基)、MEM(Eagle最小必需培养基)、αMEM培养基(Eagle最小必需培养基α改良型)、GMEM(Glasgow最小必需培养基)、IMDM(Iscove's改良Dulbecco’s培养基)、Ham’s F12(营养混合物F-12ham)、RPMI-1640(RPMI-1640培养基)、McCoy’s 5A(McCoy’s 5A培养基)、MSC生长培养基2型(Promocell公司)、Prime XV XSFM(Irvine Scientific公司)等。它们可以单独使用或组合2种以上使用。
培养基中可以根据需要添加添加剂。作为添加剂,可列举例如:维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D等维生素;叶酸等辅酶;甘氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、异亮氨酸、亮氨酸等氨基酸;乳酸等作为碳源的糖或有机酸;EGF、FGF、PFGF、TGF-β等生长因子;IL-1、IL-6等白细胞介素;TNF-α、TNF-β、瘦素等细胞因子;转铁蛋白等金属转运蛋白;铁离子、硒离子、锌离子等金属离子;β-巯基乙醇、谷胱甘肽等SH试剂;白蛋白等蛋白质等。
细胞培养方法没有特别限定,使用适合于各细胞的方法即可。细胞培养的温度为细胞悬液的温度,例如可以为20~45℃、或30~40℃的范围内,优选为36~37℃。细胞培养的pH为细胞悬液的pH,例如可以在6.2~7.7的范围内,优选为7.4。细胞培养的CO2浓度为细胞悬液的CO2浓度,例如可以为1~20体积%的范围内、4~10体积%、优选为5~7体积%,在培养哺乳动物来源细胞的情况下,通常使用37℃的温度、5%(v/v)的二氧化碳浓度。
细胞检测方法,
用以检测权利要求1的细胞黏附物,本公开的实施方式的细胞检测方法可以包括:
推动推注杆,将置于黏附检测装置中的培养完成的细胞黏附物排除含有细胞悬浮液的培养基;
重新吸取不含细胞的培养基进行润洗涤,重复3次;
将细胞黏附物从黏附检测装置中取出,置于孔板中收获培养完成的细胞黏附物;
经过培养基润洗涤后,进行1mg/ml MTT孵育2小时,按照MTT实验方法洗脱,收获上清液测量OD570,以反映细胞黏附数量。
根据该细胞检测方法,能够将黏附于黏附载体的表面的黏附细胞高效地从黏附载体分离,防止现有技术运用孔板方法,颗粒在孔板中被吸走,或细胞黏附在孔板上,本公开细胞检测方法便于后续检测处理,以增加检测准确性。
本公开的细胞检测方法可以包括改性处理步骤。
本公开的润洗涤处理可以使用PBS缓冲液清洗。
本公开的一个实施方式的细胞黏附物取出方式为,拔出推注杆,从黏附检测装置下方取出。
本公开的另一实施方式的细胞黏附物取出方式为,分离黏附检测装置上部,推动推注杆,从黏附检测装置上方取出。
更优选的实施方式是分离黏附检测装置上部,推动推注杆,从黏附检测装置上方取出,该方式不会对黏附细胞施加额外的力,能够保证细胞的存活率。
细胞黏附检测装置,
如图1所示,本公开的实施方式的细胞黏附检测装置可以包括:
空管,空管上部具有乳头结构;
推注杆,推注杆底部设有推注柄,推注杆设于空管内部;
胶塞,胶塞与推注杆连接,并与空管接触,使空管内部形成密闭结构。
本公开的细胞黏附检测装置方便液体吸排,方便定量,且能有效隔绝杂菌污染,应用该黏附检测装置可以实现细胞检测、细胞黏附物的培育。
本公开的细胞黏附检测装置的一个实施方式为,空管具有分离式结构,便于上方提取。
细胞组合物,
本公开的实施方式的细胞组合物含有黏附细胞。
在此,细胞组合物只要是将黏附细胞与黏附载体一起培养后与黏附载体分离而得到的组合物即可。
实施例
(1)细胞黏附物培育
准备骨粉0.1ml;拉出黏附检测装置的推注杆,放入骨粉;
制备细胞悬液,采用MC3T3-E1小鼠前成骨细胞和aMEM培养基;
如图3所示,利用黏附检测装置取0.1ml上述制备的细胞悬液,经倒置、轻微震荡、排除气泡步骤,使MC3T3-E1小鼠前成骨细胞与骨粉充分接触,MC3T3-E1小鼠前成骨细胞黏附在骨粉表面,初步形成MC3T3-E1小鼠前成骨细胞细胞黏附物,等待上述细胞黏附物下沉;
如图2所示,绑定多组上述黏附检测装置,将推注杆朝向细胞培养瓶底部放入细胞培养瓶中,而后将上述细胞培养瓶垂直放入细胞培养箱孵育24小时。
(2)细胞检测
将置于黏附检测装置中的培养完成的上述细胞黏附物,推动推注杆,排除含有细胞悬浮液的培养基;
重新吸取不含细胞的aMEM培养基进行润洗涤,重复3次;
分离黏附检测装置上部,推动推注杆,从黏附检测装置上方将上述细胞黏附物从黏附检测装置中取出,在孔板中收获培养完成的细胞黏附物:
经过培养基润洗涤后,进行1mg/ml MTT孵育2小时,按照MTT实验方法洗脱,收获上清液测量OD570,以反映细胞黏附数量。
比较例1
(1)细胞黏附物培育
直接培养:称量取0.1ml骨粉于孔板中,直接加入上述细胞悬液培养,经震荡、排除气泡步骤,放入细胞培养箱孵育24小时。
(2)细胞检测
吸取含有细胞悬浮液的培养基;
重新吸取不含细胞的aMEM培养基进行润洗涤,重复3次;
将细胞黏附物转移到新的孔板;
经过培养基润洗涤后,进行1mg/ml MTT孵育2小时,按照MTT实验方法洗脱,收获上清液测量OD570,以反映细胞黏附数量。
MTT方法:
先将细胞黏附物转移到48孔板中,再用无血清培养基润洗非黏附的细胞。吸弃上清液,加入1mg/ml MTT应用液,300ul/孔。孵育两小时,去除MTT孵育液,加入300ul异丙醇,洗脱摇匀30min。取100ul于96孔板在酶标仪中检测波长:OD570。
比较例2
将骨粉颗粒不加入上述细胞,与实施例1同等实验条件,进行MTT实验。
[表1]
通过上述数据可知,通过比较例1即现有培养方法对于细胞检测,由于细胞更容易黏附在孔板上等问题,极大的影响了检测结果,导致检测结果OD值过高,采用本申请的实施方式才能准确显示细胞结果。
如图4所示,采用MC3T3-E1小鼠前成骨细胞为黏附细胞模型,分别采用传统方法(直接培养:称量取0.1ml骨粉于孔板中,直接加入细胞悬液)和本实施例方法进行实验,采用MTT指示剂显示细胞活力(数量)。
实施例:从图4-A中可以看出细胞(蓝色即为活细胞)均匀地黏附在颗粒上;
比较例1:比较例1采用传统培养方法,图4-B颗粒显示不均匀斑点,为孔板底部细胞在润洗涤过程中浮起来导致;图4-D为40X下细胞和颗粒状态,大部分细胞黏附在孔板中。
比较例2:图4-C为颗粒上没有细胞,但是也同样孵育了MTT检测试剂,结果表明,没有活细胞颗粒不会显示颜色。
本实施例中的颗粒上附着有活细胞。传统方法颗粒上也有细胞,但是大部分细胞在孔板上。本实施例实验采用MTT试剂显示细胞活性,具有组间可比性和良好的操作性。采用本发明专利提供的方法只显示被测颗粒上黏附的细胞活性,彻底杜绝孔板中非特异性黏附的细胞干扰,并且可操作性好,方便得到黏附有细胞的颗粒物。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到其各种变化或替换,这些都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。
Claims (10)
1.一种细胞黏附物的培育方法,其包括:
S1:准备黏附载体0.1~0.5ml;
S2:拉出黏附检测装置的推注杆,放入所述黏附载体;
S3:制备细胞悬液,所述细胞悬液包括黏附细胞及培养基;
S4:利用所述黏附检测装置取0.1ml所述细胞悬液,经倒置、轻微震荡、排除气泡步骤,所述黏附细胞与所述黏附载体接触,所述黏附细胞黏附在所述黏附载体表面,初步形成细胞黏附物,等待所述细胞黏附物下沉;
S5:绑定多组所述黏附检测装置,将推注杆朝向细胞培养瓶盖部放入细胞培养瓶中,而后将所述细胞培养瓶放入细胞培养箱孵育1~24小时。
2.根据权利要求1所述的细胞黏附物的培育方法,其中,
所述黏附载体为多孔物质。
3.根据权利要求2所述的细胞黏附物的培育方法,其中,
所述黏附载体为骨粉颗粒。
4.一种细胞检测方法,用以检测权利要求1所述的细胞黏附物,其包括:
推动所述推注杆,将置于所述黏附检测装置中的培养完成的所述细胞黏附物排除含有细胞悬浮液的培养基;
重新吸取不含细胞的培养基进行润洗涤,重复3次;
将所述细胞黏附物从所述黏附检测装置中取出,置于孔板中收获培养完成的所述细胞黏附物;
经过培养基润洗涤后,进行1mg/ml MTT孵育2小时,按照MTT实验方法洗脱,收获上清液测量OD570,以反映细胞黏附数量。
5.根据权利要求4所述的细胞检测方法,其中,
所述润洗涤步骤包括改性处理。
6.根据权利要求4所述的细胞检测方法,其中,
所述细胞黏附物取出方式为,拔出所述推注杆,从所述黏附检测装置下方取出。
7.根据权利要求4所述的细胞检测方法,其中,
所述细胞黏附物取出方式为,分离所述黏附检测装置上部,推动所述推注杆,从所述黏附检测装置上方取出。
8.一种细胞黏附检测装置,应用于权利要求1~7所述的任一种方法,其包括,
空管,所述空管上部具有乳头结构;
推注杆,所述推注杆底部设有推注柄,所述推注杆设于空管内部;
胶塞,所述胶塞与所述推注杆连接,并与所述空管接触,使所述空管内部形成密闭结构。
9.根据权利要求8所述的细胞黏附检测装置,其中,
所述空管具有分离式结构。
10.一种细胞组合物,其含有黏附细胞。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202410033637.4A CN118028415A (zh) | 2024-01-10 | 2024-01-10 | 一种细胞黏附物的培育方法及其细胞检测方法、装置 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202410033637.4A CN118028415A (zh) | 2024-01-10 | 2024-01-10 | 一种细胞黏附物的培育方法及其细胞检测方法、装置 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN118028415A true CN118028415A (zh) | 2024-05-14 |
Family
ID=90984901
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202410033637.4A Pending CN118028415A (zh) | 2024-01-10 | 2024-01-10 | 一种细胞黏附物的培育方法及其细胞检测方法、装置 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN118028415A (zh) |
-
2024
- 2024-01-10 CN CN202410033637.4A patent/CN118028415A/zh active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101300343B (zh) | 来自人类脂肪组织的多能干细胞和包含该多能干细胞的细胞治疗剂 | |
CN102925409B (zh) | 尿液间充质干细胞的提取及扩增培养方法和应用 | |
US11685899B2 (en) | Cell culture method for mesenchymal stem cells | |
CN107494517B (zh) | 无血清冻存液及其在冻存间充质干细胞中的应用 | |
CN102618491B (zh) | 诱导脂肪间充质干细胞向胰岛样细胞分化的培养液及诱导方法和用途 | |
CN103805562B (zh) | 培养胎盘间充质干细胞的无血清培养基 | |
KR100908481B1 (ko) | 중간엽 줄기세포 배양 배지 및 이를 이용한 중간엽줄기세포의 배양 방법 | |
KR101211913B1 (ko) | 양막유래 중간엽 줄기세포 배양을 위한 배지조성물 및 이를 이용한 양막유래 중간엽 줄기세포의 배양방법 | |
KR100802011B1 (ko) | 층분리배양법을 이용한 골수에서의 중간엽 줄기세포분리방법 | |
CN110475856B (zh) | 使用纳米纤维的细胞培养 | |
KR102292132B1 (ko) | 무혈청 배지 조성물 | |
CN109943526B (zh) | 一种促间充质干细胞增殖的无血清多肽组合物 | |
CN104651305A (zh) | 一种利用脐带间充质干细胞获取生物活性蛋白的方法 | |
KR101896803B1 (ko) | 인간 만능줄기세포로부터 중간엽 줄기세포로의 분화 유도 생산율을 증가시키는 방법 및 이에 의해 생성된 중간엽 줄기세포 | |
CN102282250A (zh) | 使哺乳动物祖细胞分化为产生胰岛素的胰岛细胞的方法 | |
CN104988111A (zh) | 用于将uc-msc转化为胰岛细胞的诱导液及其应用 | |
CN118028415A (zh) | 一种细胞黏附物的培育方法及其细胞检测方法、装置 | |
CN103184191A (zh) | 大鼠大网膜脂肪来源间充质干细胞的提取方法和专用培养基 | |
CN116396930B (zh) | 间充质干细胞无血清培养基及其应用 | |
CN110592007A (zh) | 一种间充质干细胞及其制备方法和应用 | |
CN116426470B (zh) | 间充质干细胞无血清培养基及其应用 | |
CN117187174B (zh) | 一种Muse细胞培养基以及一种脂肪Muse细胞的提取方法 | |
Cebo | Characterization of bovine adipose-derived stem cells | |
CN116023436A (zh) | 一种间充质干细胞高密度高活性的增殖方法及培养基 | |
WO2018067036A1 (en) | Method of cultivation of human salivary gland cells |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |