CN117986181A - 一种高纯度胆红素二牛磺酸钠的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于有机物制备技术领域。本发明提供了一种高纯度胆红素二牛磺酸钠的制备方法。将胆红素、牛磺酸钠、缩合剂和活化剂加入反应溶剂中，进行脱水缩合反应；将碱水溶液和反应体系混合后分液，得到碱水层和第一有机层，有机层和碱水溶液混合后分液的步骤重复进行，每次分液得到的碱水层合并后过滤；将碱水抽提液和有机溶剂A混合后离心，收集上清液，将上清液和有机溶剂B混合后离心，沉淀进行干燥，得到的胆红素二牛磺酸钠粗品和醇溶液进行第一次重结晶，醚类溶剂进行第二次重结晶，得到高纯度胆红素二牛磺酸钠。本发明得到的胆红素二牛磺酸钠的收率达75％，纯度达99％。本发明的制备方法操作简单、收率高、纯度高、可以大批量生产。
Description
技术领域
本发明涉及有机物制备技术领域，尤其涉及一种高纯度胆红素二牛磺酸钠的制备方法。
背景技术
胆红素二牛磺酸钠(Ditaurobilirubin，DTB)是胆红素的二牛磺酸衍生物，胆红素二牛磺酸钠作为一种药物，是已知艾滋病毒蛋白酶抑制剂，另外，在临床诊断中，也被用作代替直接胆红素的质控品，其结构式如下：
胆红素二牛磺酸钠通常是通过一分子胆红素与两分子牛磺酸钠经脱水缩合反应制得。然而，由于以往合成技术中，胆红素分子中一个羧基与牛磺酸钠完成缩合反应后，另一分子羧基由于空间位阻因素，与牛磺酸钠缩合反应难度增加，反应不够完全，反应效率低，纯化困难，导致胆红素二牛磺酸钠收率低，纯度低，难以大批量生产，影响其进一步研究和使用。
因此，如何开发一种反应效率高、收率高、纯度高、可大批量生产的胆红素二牛磺酸钠的制备方法，使其更有益于应用，是目前需要解决的技术问题。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足提供一种高纯度胆红素二牛磺酸钠的制备方法。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种高纯度胆红素二牛磺酸钠的制备方法，包含如下步骤：
1)将胆红素、牛磺酸钠、缩合剂和活化剂加入反应溶剂中，进行脱水缩合反应，得到反应体系；
2)将碱水溶液和反应体系混合后分液，得到碱水层和第一有机层；将第一有机层和碱水溶液混合后分液，得到碱水层和第二有机层，有机层和碱水溶液混合后分液的步骤重复进行，每次分液得到的碱水层合并后过滤，得到碱水抽提液；
3)将碱水抽提液和有机溶剂A混合后离心，收集上清液，将上清液和有机溶剂B混合后离心，离心所得沉淀进行干燥，得到胆红素二牛磺酸钠粗品；
4)将胆红素二牛磺酸钠粗品和醇溶液进行第一次重结晶后过滤，滤饼进行干燥，干燥滤饼和醚类溶剂进行第二次重结晶后过滤，将滤饼进行干燥，得到高纯度胆红素二牛磺酸钠。
作为优选，步骤1)所述胆红素、牛磺酸钠、缩合剂和活化剂的摩尔比为1：2～6：1～6：1～6；
所述胆红素与反应溶剂的质量体积比为1g：5～100mL；
所述脱水缩合反应的温度为-10～50℃，脱水缩合反应的时间为12～48h。
作为优选，步骤1)所述缩合剂为氯甲酸异丁酯、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺、二环己基碳二亚胺和六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷中的一种或几种；
所述活化剂为三乙胺、1-羟基苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯和N-羟基丁二酰亚胺中的一种或几种；
所述反应溶剂为乙酸乙酯、醋酸丁酯、二氯甲烷、三氯甲烷、氯仿、四氯化碳或二甲基甲酰胺。
作为优选，步骤2)所述碱水溶液中的碱为乙酸钠或碳酸氢钠；碱水溶液的质量浓度为1～5％。
作为优选，步骤2)中每次加入的碱水溶液与步骤1)所述牛磺酸钠的体积质量比独立的为50～200mL：1g；有机层和碱水溶液混合后分液的步骤重复进行的次数为1～3次。
作为优选，步骤3)所述有机溶剂A和有机溶剂B独立的为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、甲酸、乙酸、丙酮和氯仿中的一种或几种。
作为优选，步骤3)所述有机溶剂A的体积为碱水抽提液体积的30～50％；有机溶剂A和有机溶剂B的总体积为碱水抽提液体积的60～80％。
作为优选，步骤4)所述胆红素二牛磺酸钠粗品和醇溶液的质量体积比为1g：8～50mL；
第一次重结晶的温度为40～70℃，第二次重结晶的温度为35～65℃，第一次重结晶和第二次重结晶的时间独立的为1～6h。
作为优选，步骤4)所述醇溶液中的醇为甲醇、无水乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或异丁醇，醇溶液中的溶剂为水；醇溶液中醇的体积分数为80～95％；醚类溶剂为甲醚、乙醚、正丙醚、异丙醚或石油醚。
本发明的有益效果为：
本发明的方法制备得到的胆红素二牛磺酸钠的总收率达75％，纯度达99％。本发明的制备方法操作简单、收率高、纯度高、可以大批量生产，有益于进一步研究和应用。
具体实施方式
本发明提供了一种高纯度胆红素二牛磺酸钠的制备方法，包含如下步骤：
1)将胆红素、牛磺酸钠、缩合剂和活化剂加入反应溶剂中，进行脱水缩合反应，得到反应体系；
2)将碱水溶液和反应体系混合后分液，得到碱水层和第一有机层；将第一有机层和碱水溶液混合后分液，得到碱水层和第二有机层，有机层和碱水溶液混合后分液的步骤重复进行，每次分液得到的碱水层合并后过滤，得到碱水抽提液；
3)将碱水抽提液和有机溶剂A混合后离心，收集上清液，将上清液和有机溶剂B混合后离心，离心所得沉淀进行干燥，得到胆红素二牛磺酸钠粗品；
4)将胆红素二牛磺酸钠粗品和醇溶液进行第一次重结晶后过滤，滤饼进行干燥，干燥滤饼和醚类溶剂进行第二次重结晶后过滤，将滤饼进行干燥，得到高纯度胆红素二牛磺酸钠。
本发明中，胆红素二牛磺酸钠的合成路线如下所示：
本发明中，步骤1)是脱水缩合反应，本发明将胆红素和牛磺酸经活化剂活化，缩合剂催化，发生缩合反应，制得胆红素二牛磺酸钠；本发明与以往合成技术不同的是，不仅选用缩合剂，还引入活化剂，并且选用的反应溶剂大大提高了反应效率。
本发明中，步骤1)所述胆红素、牛磺酸钠、缩合剂和活化剂的摩尔比优选为1：2～6：1～6：1～6，进一步优选为1：2.5～5：2～5：2～5，更优选为1：3～4：3～4：3～4；
所述胆红素与反应溶剂的质量体积比优选为1g：5～100mL，进一步优选为1g：10～80mL，更优选为1g：20～50mL。
本发明中，牛磺酸钠是相对过量的物质，牛磺素钠反应当量过低，反应不够完全，反应收率低，纯度低；反应当量过高，浪费试剂，还得在后续纯化步骤中去除，本发明所述的胆红素与牛磺酸钠的摩尔比为1：2～6，收率较高，纯度较高，效果较好。
本发明中，缩合剂反应当量过低，反应不够完全，反应收率低，纯度低；反应当量过高，副反应增加，浪费试剂；本发明所述的胆红素与缩合剂的摩尔比为1：1～6，收率较高，纯度较高，效果较好。
本发明中，活化剂反应当量过低，活化反应不够完全，反应收率低；反应当量过高，副反应增加；本发明所述的胆红素与活化剂的摩尔比为1：1～6，收率较高，纯度较高，效果较好。
本发明中，所述脱水缩合反应的温度优选为-10～50℃，进一步优选为0～40℃，更优选为10～30℃；脱水缩合反应的时间优选为12～48h，进一步优选为15～40h，更优选为20～30h。
本发明中，所述脱水缩合反应的温度低于-10℃时，反应效率较低，产物收率低；当脱水缩合反应的温度高于50℃时，副反应增加，产物纯度低；反应温度为-10～50℃，收率较高，纯度较高，效果较好。所述脱水缩合反应的时间为12h以下时，反应不够完全，产物收率低，纯度低；反应时间超过48h时，反应时间过长，副反应增加，产物纯度低；脱水缩合反应时间为12～48h，产物收率高，纯度高，效果较好。
本发明中，步骤1)所述缩合剂优选为氯甲酸异丁酯、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺、二环己基碳二亚胺和六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷中的一种或几种；
所述活化剂优选为三乙胺、1-羟基苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯和N-羟基丁二酰亚胺中的一种或几种；
所述反应溶剂优选为乙酸乙酯、醋酸丁酯、二氯甲烷、三氯甲烷、氯仿、四氯化碳或二甲基甲酰胺。
本发明通过合理选择缩合剂、活化剂、反应溶剂，合理控制胆红素、牛磺酸钠、缩合剂和活化剂的摩尔比，胆红素和反应溶剂的比例，合理控制反应温度和反应时间，能够使胆红素二牛磺酸钠的生成率高于90％，反应体系中只含有微量未反应的胆红素，低于10％的胆红素单牛磺酸钠。
本发明中，步骤2)是碱水抽提反应，本发明将胆红素二牛磺酸钠反应体系溶解到碱水中，通过分液，从反应液中分离出来，达到提取和纯化的效果。
本发明中，步骤2)所述碱水溶液中的碱优选为乙酸钠或碳酸氢钠；碱水溶液的质量浓度优选为1～5％，进一步优选为2～4％，更优选为3％。
本发明中，加入的碱带入的碱金属离子需要与胆红素二牛磺酸钠保持一致，否则，容易引入其它碱金属离子，产生胆红素二牛磺酸的其它碱金属盐；碳酸钠或氢氧化钠，碱性过强，容易水解开胆红素上反应生成的酰胺键；本发明选用乙酸钠或碳酸氢钠，碱性适中，产物收率高，纯度高，碱提效果较好。碱水溶液质量浓度过低，碱提效率低，收率低；碱水溶液质量浓度过高，碱提效率低，收率低；碱水溶液的质量浓度为1～5％，收率较高，纯度较高，碱提效果较好。
本发明中，步骤2)中每次加入的碱水溶液与步骤1)所述牛磺酸钠的体积质量比独立的优选为50～200mL：1g，进一步优选为100～150mL：1g；有机层和碱水溶液混合后分液的步骤重复进行的次数优选为1～3次。
碱水溶液加入体积过小，碱提效率低，收率低；碱水溶液加入体积过大，纯度较低；牛磺酸钠与每次加入的碱水溶液的质量体积比为1g：50～200mL，收率较高，纯度较高，碱提效果较好。
本发明碱水抽提后，胆红素二牛磺酸钠、胆红素单牛磺酸钠以及一些溶于碱水的杂质被碱水抽提，从反应溶剂中充分分离出来，而少量未反应的胆红素及其它不溶于碱水的杂质保留在反应母液中，进而实现提取纯化分离的效果，胆红素二牛磺酸钠的提取效率达98％以上，纯度达90％(HPLC，下同)。
本发明中，步骤3)是溶剂沉淀反应，本发明通过向碱水抽提液中第一次加入有机溶剂将杂质沉淀分离出去，通过第二次加入有机溶剂，将胆红素二牛磺酸钠沉淀分离出来，进而实现纯化的效果。
本发明中，步骤3)所述有机溶剂A和有机溶剂B独立的优选为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、甲酸、乙酸、丙酮和氯仿中的一种或几种。
本发明中，步骤3)所述有机溶剂A的体积优选为碱水抽提液体积的30～50％，进一步优选为40％；有机溶剂A和有机溶剂B的总体积为碱水抽提液体积的60～80％，进一步优选为70％。
第一次加入的有机溶剂A体积过小，胆红素单牛磺酸钠及杂质沉淀不够充分，产物纯度低；有机溶剂加入体积过大，容易带出胆红素二牛磺酸钠，产物收率低；第一次加入有机溶剂A后，有机溶剂与碱水抽提液的体积比为30～50％，收率较高，纯度较高，效果较好；第二次加入的有机溶剂B体积过小，胆红素二牛磺酸钠沉淀不够充分，产物收率低；有机溶剂加入体积过大，容易带出更多的杂质，产物纯度低；第一次和第二次加入的有机溶剂总体积为碱水抽提液体积的60～80％，收率较高，纯度较高，效果较好。
本发明的有机溶剂能够与碱水互溶，通过控制有机溶剂A与碱水抽提液的体积比，能够把胆红素单牛磺酸钠和一些小极性的杂质沉淀出来；通过控制有机溶剂B与碱水抽提液的体积比，能够把胆红素二牛磺酸钠和少量杂质沉淀出来，进而实现胆红素二牛磺酸钠提取分离纯化的效果，胆红素二牛磺酸钠的沉淀效率在95％以上，胆红素二牛磺酸钠纯度达95％。
本发明中，步骤4)是双溶剂重结晶，本发明将胆红素二牛磺酸钠粗品先在醇水溶液中重结晶，去除一些大极性杂质，然后在醚类溶剂中重结晶，去除一些小极性杂质，进而实现胆红素二牛磺酸钠分离纯化的效果。
本发明中，步骤4)所述胆红素二牛磺酸钠粗品和醇溶液的质量体积比优选为1g：8～50mL，进一步优选为1g：10～40mL，更优选为1g：20～30mL。
本发明中，醇溶液加入体积过小，杂质去除不够充分，产物纯度低；醇溶液加入体积过大，容易溶解胆红素二牛磺酸钠，产物收率低；胆红素二牛磺酸钠与醇溶液的质量体积比为1g：8～50mL，收率较高，纯度较高，效果较好。
本发明中，第一次重结晶的温度优选为40～70℃，进一步优选为50～60℃，更优选为55℃，第二次重结晶的温度优选为35～60℃，进一步优选为40～55℃，更优选为45～50℃；第一次重结晶和第二次重结晶的时间独立的优选为1～6h，进一步优选为2～5h，更优选为3～4h。
胆红素二牛磺酸钠在醇溶液中重结晶温度低于40℃，产物纯度低，重结晶温度高于70℃，产物收率降低，胆红素二牛磺酸钠在醇溶液中重结晶温度为40℃～70℃，收率较高，纯度较高，效果较好；胆红素二牛磺酸钠在醇溶液中重结晶时间低于1h，重结晶不充分，产物纯度低，重结晶时间高于6h，副反应增加，收率降低，胆红素二牛磺酸钠在醇溶液中重结晶时间为1～6h，收率较高，纯度较高，效果较好。
胆红素二牛磺酸钠在醚类溶剂中重结晶温度低于35℃，产物纯度低，重结晶温度高于60℃，产物收率降低，胆红素二牛磺酸钠在醚类溶剂中重结晶温度为35～60℃，收率较高，纯度较高，效果较好；胆红素二牛磺酸钠在醚类溶剂中重结晶时间低于1h，重结晶不充分，产物纯度低，重结晶时间高于6h，副反应增加，收率降低，胆红素二牛磺酸钠在醚类溶剂中重结晶时间为1～6h，收率较高，纯度较高，效果较好。
本发明中，步骤4)所述醇溶液中的醇优选为甲醇、无水乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或异丁醇，醇溶液中的溶剂优选为水；醇溶液中醇的体积分数优选为80～95％，进一步优选为85～90％；醚类溶剂优选为甲醚、乙醚、正丙醚、异丙醚或石油醚。
本发明中，醇溶液中醇的比例过低，大极性杂质去除不够充分，产物纯度低；醇的比例过高，容易溶解胆红素二牛磺酸钠，产物收率低；醇的体积比例为80～95％，收率较高，纯度较高，效果较好。
本发明第一次重结晶，通过控制醇水溶液的体积比，重结晶温度和时间，能够把胆红素二牛磺酸钠充分析出，把大极性的杂质保留在结晶溶剂中，进而实现提取纯化分离的效果，第一次重结晶后胆红素二牛磺酸钠纯度达到97％；本发明第二次重结晶，通过选择醚类溶剂，控制醚类溶剂的体积比，重结晶温度和时间，能够把胆红素二牛磺酸钠充分析出，把小极性的杂质保留在结晶溶剂中，进而实现胆红素二牛磺酸钠提取分离纯化的效果，第二次重结晶后胆红素二牛磺酸钠纯度达到99％以上。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
将58.5g胆红素和60g牛磺酸钠加入1000mL醋酸丁酯中，搅拌均匀，加入61.8g二环己基碳二亚胺和40.5g 1-羟基苯并三氮唑，控温15℃反应25h，得到反应体系。
将5000mL质量分数为2％的乙酸钠水溶液加入反应体系中，充分搅拌，分液，得到碱水层和有机物，保留碱水层；有机物用质量分数为2％的乙酸钠水溶液重复抽提2次，合并碱水层，过滤，得到碱水抽提液。
向15L碱水抽提液中加入6000mL正丙醇，充分混匀后，离心，收集上清液；向上清液水层中继续加入4500mL正丙醇，充分混匀后，离心，收集沉淀，干燥，得到72.6g胆红素二牛磺酸钠粗品，收率为86.1％，纯度为95.63％。
向72.6g胆红素二牛磺酸钠粗品中加入1000mL体积分数为85％的甲醇水溶液，在40℃下搅拌进行第一次重结晶，时间为6h，然后自然冷却至室温，过滤，收集滤饼，干燥，得到干燥滤饼。向干燥滤饼中加入1000mL乙醚，在35℃下搅拌进行第二次重结晶，时间为6h，自然冷却至室温，过滤，收集滤饼，干燥，得到63.9g胆红素二牛磺酸钠。
本实施例的胆红素二牛磺酸钠的总收率为75.7％，纯度为99.12％。
实施例2
将58.5g胆红素和80g牛磺酸钠加入1500mL二氯甲烷中，搅拌均匀，加入62.2g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺和75.8g O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯，控温10℃反应30h，得到反应体系。
将5000mL质量分数为4％的碳酸氢钠水溶液加入反应体系中，充分搅拌，分液，得到碱水层和有机物，保留碱水层；有机物用质量分数为4％的碳酸氢钠水溶液重复抽提2次，合并碱水层，过滤，得到碱水抽提液。
向15L碱水抽提液中加入5250mL丙酮，充分混匀后，离心，收集上清液；向上清液水层中继续加入5250mL丙酮，充分混匀后，离心，收集沉淀，干燥，得到71.1g胆红素二牛磺酸钠粗品，收率为84.4％，纯度为95.51％。
向71.1g胆红素二牛磺酸钠粗品中加入1100mL体积分数为93％的异丙醇水溶液，在60℃下搅拌进行第一次重结晶，时间为2h，然后自然冷却至室温，过滤，收集滤饼，干燥，得到干燥滤饼。向干燥滤饼中加入1100mL石油醚，在45℃下搅拌进行第二次重结晶，时间为5h，自然冷却至室温，过滤，收集滤饼，干燥，得到64.1g胆红素二牛磺酸钠。
本实施例的胆红素二牛磺酸钠的总收率为76.1％，纯度为99.08％。
实施例3
将58.5g胆红素和31.7g牛磺酸钠加入1600mL三氯甲烷中，搅拌均匀，加入104.1g六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷和23.0g N-羟基丁二酰亚胺，控温30℃反应20h，得到反应体系。
将6000mL质量分数为3％的碳酸氢钠水溶液加入反应体系中，充分搅拌，分液，得到碱水层和有机物，保留碱水层；有机物用质量分数为3％的碳酸氢钠水溶液重复抽提2次，合并碱水层，过滤，得到碱水抽提液。
向18L碱水抽提液中加入7500mL无水乙醇，充分混匀后，离心，收集上清液；向上清液水层中继续加入4500mL无水乙醇，充分混匀后，离心，收集沉淀，干燥，得到71.5g胆红素二牛磺酸钠粗品，收率为84.8％，纯度为95.12％。
向71.5g胆红素二牛磺酸钠粗品中加入1300mL体积分数为89％的正丁醇水溶液，在60℃下搅拌进行第一次重结晶，时间为2h，然后自然冷却至室温，过滤，收集滤饼，干燥，得到干燥滤饼。向干燥滤饼中加入1300mL正丙醚，在45℃下搅拌进行第二次重结晶，时间为5h，自然冷却至室温，过滤，收集滤饼，干燥，得到63.3g胆红素二牛磺酸钠。
本实施例的胆红素二牛磺酸钠的总收率为75.1％，纯度为99.37％。
实施例4
将58.5g胆红素和31.7g牛磺酸钠加入1700mL乙酸乙酯中，搅拌均匀，加入36.7mL氯甲酸异丁酯和55.4mL三乙胺，控温20℃反应24h，得到反应体系。
将6000mL质量分数为3％的碳酸氢钠水溶液加入反应体系中，充分搅拌，分液，得到碱水层和有机物，保留碱水层；有机物用质量分数为3％的碳酸氢钠水溶液重复抽提2次，合并碱水层，过滤，得到碱水抽提液。
向18L碱水抽提液中加入6300mL无水乙醇，充分混匀后，离心，收集上清液；向上清液水层中继续加入6300mL无水乙醇，充分混匀后，离心，收集沉淀，干燥，得到72.1g胆红素二牛磺酸钠粗品，收率为85.5％，纯度为95.12％。
向72.1g胆红素二牛磺酸钠粗品中加入900mL体积分数为89％的乙醇，在70℃下搅拌进行第一次重结晶，时间为1h，然后自然冷却至室温，过滤，收集滤饼，干燥，得到干燥滤饼。向干燥滤饼中加入900mL异丙醚，在60℃下搅拌进行第二次重结晶，时间为1h，自然冷却至室温，过滤，收集滤饼，干燥，得到64.5g胆红素二牛磺酸钠。
本实施例的胆红素二牛磺酸钠的总收率为76.5％，纯度为99.21％。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种高纯度胆红素二牛磺酸钠的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：
1)将胆红素、牛磺酸钠、缩合剂和活化剂加入反应溶剂中，进行脱水缩合反应，得到反应体系；
2)将碱水溶液和反应体系混合后分液，得到碱水层和第一有机层；将第一有机层和碱水溶液混合后分液，得到碱水层和第二有机层，有机层和碱水溶液混合后分液的步骤重复进行，每次分液得到的碱水层合并后过滤，得到碱水抽提液；
3)将碱水抽提液和有机溶剂A混合后离心，收集上清液，将上清液和有机溶剂B混合后离心，离心所得沉淀进行干燥，得到胆红素二牛磺酸钠粗品；
4)将胆红素二牛磺酸钠粗品和醇溶液进行第一次重结晶后过滤，滤饼进行干燥，干燥滤饼和醚类溶剂进行第二次重结晶后过滤，将滤饼进行干燥，得到高纯度胆红素二牛磺酸钠。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)所述胆红素、牛磺酸钠、缩合剂和活化剂的摩尔比为1：2～6：1～6：1～6；
所述胆红素与反应溶剂的质量体积比为1g：5～100mL；
所述脱水缩合反应的温度为-10～50℃，脱水缩合反应的时间为12～48h。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤1)所述缩合剂为氯甲酸异丁酯、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺、二环己基碳二亚胺和六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷中的一种或几种；
所述活化剂为三乙胺、1-羟基苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯和N-羟基丁二酰亚胺中的一种或几种；
所述反应溶剂为乙酸乙酯、醋酸丁酯、二氯甲烷、三氯甲烷、氯仿、四氯化碳或二甲基甲酰胺。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤2)所述碱水溶液中的碱为乙酸钠或碳酸氢钠；碱水溶液的质量浓度为1～5％。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中每次加入的碱水溶液与步骤1)所述牛磺酸钠的体积质量比独立的为50～200mL：1g；有机层和碱水溶液混合后分液的步骤重复进行的次数为1～3次。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤3)所述有机溶剂A和有机溶剂B独立的为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、甲酸、乙酸、丙酮和氯仿中的一种或几种。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤3)所述有机溶剂A的体积为碱水抽提液体积的30～50％；有机溶剂A和有机溶剂B的总体积为碱水抽提液体积的60～80％。
8.根据权利要求4～7任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤4)所述胆红素二牛磺酸钠粗品和醇溶液的质量体积比为1g：8～50mL；
第一次重结晶的温度为40～70℃，第二次重结晶的温度为35～60℃，第一次重结晶和第二次重结晶的时间独立的为1～6h。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，步骤4)所述醇溶液中的醇为甲醇、无水乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或异丁醇，醇溶液中的溶剂为水；醇溶液中醇的体积分数为80～95％；醚类溶剂为甲醚、乙醚、正丙醚、异丙醚或石油醚。
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