CN117982523A - 鸟苷在制备防治急性感染性子宫内膜炎的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了鸟苷在制备防治急性感染性子宫内膜炎的药物中的应用，鸟苷对子宫内膜炎具有防治作用，特别是急性感染性子宫内膜炎。通过动物实验证明，鸟苷的确可减轻致病性大肠杆菌诱导的急性感染性子宫内膜炎。将鸟苷用于防治子宫内膜炎药物,可谓治疗子宫内膜炎提供一种生物体内合成物质，从而降低使用抗生素药物造成的不良反应。鸟苷治疗急性感染性子宫内膜炎的机理需进一步研究。本发明为鸟苷用于急性感染性子宫内膜炎的后续研究提供了基础药理学依据，同时为进一步开发生物自体物质的新功能提供了研究策略，将促进医药业的现代化发展。
Description
技术领域
本发明涉及鸟苷在医药领域中的新用途，尤其是公开了鸟苷在制备防治急性感染性子宫内膜炎的药物中的应用，属于生物医药领域。
背景技术
奶牛子宫内膜炎（Cow Endometritis）是一种粘液性或化脓性子宫炎症，通常是由机会致病菌如大肠杆菌引起，并表现出典型的炎症症状。子宫内膜炎是造成奶牛不孕症的主要病因，有60％-90％的不孕症是由子宫内膜炎造成，导致推迟繁殖周期，降低生产能力，给养殖场带来巨大的经济损失。
牛子宫内膜炎的临床防治大多依赖抗生素，但抗生素的使用导致耐药性和药物残留增加，这问题已成为奶牛养殖业的一大隐患。急需安全有效的药物防治子宫内膜炎。
本发明涉及的鸟苷(Guanosine)是一种分子式为C10H13N5O5，分子量为 267.24 g/mol 的核苷类化合物。广泛存在于生物体内且用途十分广泛，是食品和医药产品的重要中间体，可用于合成核苷类抗病毒药物如利巴韦林、阿昔洛韦等，也是用于制造无环鸟苷(Acyclovir)、三氮唑核苷(ATC)、三磷酸鸟苷钠(GTP)等药物的主要原料。 鸟苷是一种难溶于冷水，易溶于温水的白色粉末。鸟苷(Guanosine)是一种广泛存在于生物体内且用途十分广泛的核苷类化合物，是食品和医药产品的重要中间体，可用于合成核苷类抗病毒药物；当前鸟苷的研究仅限于在能量代谢、蛋白质合成和信号传导等生物过程中的作用。
目前，在畜牧业中牛子宫内膜炎的临床防治大多依赖抗生素，但抗生素的使用导致耐药性和药物残留增加，这问题已成为奶牛养殖业的一大隐患，也正是本发明的目的所在。
发明内容
本发明提供了一种鸟苷在制备用于防治子宫内膜炎的药物中的应用，特别是急性感染性子宫内膜炎，具有显著的医疗效果。
本发明所述的鸟苷结构式如下：
分子式为C10H13N5O5，分子量为 267.24 g/mol 。
为了解决上述技术问题,本发明采用的技术方案如下：鸟苷在制备防治子宫内膜炎的药物中的应用。
所述子宫炎为急性感染性子宫内膜炎。
所述药物为含鸟苷并以鸟苷为活性成分的药物组合物。
本发明通过采用子宫内注射致病性大肠杆菌诱导小鼠急性感染性子宫内膜炎模型，观察了红景天对该模型的防治效果。
本发明采用子宫内注射致病性大肠杆菌诱导小鼠急性感染性子宫内膜炎模型，观察子宫组织外形变化，病理改变切片，菌载量变化，检测致炎细胞因子TNF-α、IL-1β的转录水平的变化。本发明的研究表明，鸟苷有良好的抗炎功效，无不良反应。
本发明的有益效果在于：公开了鸟苷对子宫内膜炎具有防治作用，特别是急性感染性子宫内膜炎。通过动物实验证明，鸟苷的确可减轻致病性大肠杆菌诱导的急性感染性子宫内膜炎。将鸟苷用于防治子宫内膜炎药物,可谓治疗子宫内膜炎提供一种生物体内合成物质，从而降低使用抗生素药物造成的不良反应。鸟苷治疗急性感染性子宫内膜炎的机理需进一步研究。本发明为鸟苷用于急性感染性子宫内膜炎的后续研究提供了基础药理学依据，同时为进一步开发生物自体物质的新功能提供了研究策略，将促进医药业的现代化发展。
附图说明
图1为鸟苷对致病性大肠杆菌诱导急性感染性子宫内膜炎影响的代表性眼观图片；
图2为鸟苷对致病性大肠杆菌诱导急性感染性子宫内膜炎影响的子宫组织HE 染色代表性图片；
图3为鸟苷降低子宫中细菌载量的结果示意图；
图4为鸟苷降低子宫中致炎细胞因子IL-1β转录水平变化和表达水平的结果示意图；
图5为鸟苷降低子宫中致炎细胞因子TNF-α转录水平和表达水平变化的结果图；
图6为鸟苷提高子宫中紧密连接蛋白ZO-1表达水平变化的结果示意图；
图7为鸟苷提高子宫中紧密连接蛋白Occludin表达水平变化的结果示意图。
实施方式
除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为可从商业公司获取的常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中在不背离本发明精神的情况下，本领域技术人员结合公知技术，可以对本发明作出诸多修改，这样的修改也落入本发明的保护范围之内。
本发明提供了一种鸟苷在制备用于防治子宫内膜炎的药物中的应用，鸟苷的结构如下：
分子式为C10H13N5O5，分子量为 267.24 g/mol 。
下面结合实验例及附图来详细说明本发明。
实验例1
急性感染性子宫内膜炎动物模型制备：取Balb/c小鼠(周龄9-10周)，将OD值为1的致病性大肠杆菌离心后PBS重悬，给予小鼠腹腔注射麻醉后，从子宫注入重悬于PBS的治病性大肠杆菌（108个菌每只）。
分组情况：
对照组(氯化钠组)腹腔注射同体积的生理盐水(质量分数为0.9％NaCL)一周，最后一天往子宫中注射同体积的PBS；鸟苷对照组腹腔注射7.5 mg/kg的鸟苷200ul（溶解于质量分数为0.9％NaCL中）一周，并在最后一天往子宫中注射同体积的PBS；造模组腹腔注射同体积的生理盐水(质量分数为0.9％NaCL) 一周，最后一天往子宫中注射重悬于PBS的治病性大肠杆菌（108个菌每只）。鸟苷治疗组腹腔注射15mg/ml的鸟苷200ul（溶解于质量分数为0.9％NaCL中）一周，最后一天往子宫中注射重悬于PBS的治病性大肠杆菌（108个菌每只）。第8天时取子宫组织检测。
HE染色观察组织形态：将固定好的子宫组织修剪平整，组织经酒精脱水后进行组织透明，使石蜡顺利深入组织。将浸透蜡的组织包裹在石蜡块中，进行切片与烤片。苏木精-伊红(HE)染色，子宫组织切片组织病理学检查。使用显微镜拍摄200倍，观察肿瘤组织病理结构改变。
细菌载量计数检测：取各组子宫加入10倍生理盐水体积研磨成组织匀浆，分别用生理盐水稀释为2倍、20倍和200倍稀释菌液，取50ul涂板于LB固体培养基平板，37度培养16h后数出菌落数，计算细菌载量。
致炎细胞因子和紧密连接蛋白转录水平的检测：取各组子宫提取RNA，反转录成cDNA后加入水、酶、对应引物用于Q-PCR检测。
致炎细胞因子表达水平的检测：取各组子宫加入质量的十倍体积的PBS研磨，制备成组织匀浆，运用相应的Elisa试剂盒检测水平变化。
实验结果如下所示：
由图1可知，与对照组的小鼠子宫相比，造模组的小鼠子宫长度变短，肿胀明显。药物治疗组的小鼠子宫长度和肿胀程度介于正常组小鼠与造模组之间。药物对照组子宫长度和肿胀程度与对照组的小鼠子宫接近。表明成功建立了急性感染性子宫内膜炎模型。鸟苷每日腹腔注射持续一周可缓解急性感染性子宫内膜炎。
由图2可知，与对照组的小鼠子宫切片相比，造模组的小鼠子宫切片淋巴细胞和中性粒细胞增多，上皮完整性被破坏。鸟苷治疗组的小鼠子宫切片的淋巴细胞、中性粒细胞数量和上皮完整性介于正常组与造模组之间。鸟苷对照组子宫切片观测与对照组的小鼠子宫接近。鸟苷每日腹腔注射持续一周可不同程度地缓解急性感染性子宫内膜炎。
由图3可知，对照组小鼠和鸟苷对照组细菌载量在一个很低的水平，而造模后造模组子宫组织内细菌载量突增。鸟苷治疗组的小鼠子宫组织内细菌载量较造模组明显降低。鸟苷每日腹腔注射持续一周可不同程度地缓解急性感染性子宫内膜炎。
由图4可知，与对照组的小鼠相比，造模组的小鼠致炎细胞因子IL-1β转录水平和表达水平变高。鸟苷治疗组的小鼠致炎细胞因子IL-1β转录水平和表达水平介于对照组与造模组之间。药物对照组致炎细胞因子IL-1β转录水平和表达水平与对照组的小鼠子宫接近。鸟苷每日腹腔注射持续一周可不同程度地缓解急性感染性子宫内膜炎。
由图5可知，与对照组的小鼠相比，造模组的小鼠致炎细胞因子TNF-α转录水平和表达水平变高。鸟苷治疗组的小鼠致炎细胞因子TNF-α转录水平和表达水平介于对照组与造模组之间。药物对照组致炎细胞因子TNF-α转录水平和表达水平与对照组的小鼠子宫接近。鸟苷每日腹腔注射持续一周可不同程度地缓解急性感染性子宫内膜炎。
由图6可知，与对照组的小鼠相比，造模组的小鼠紧密连接蛋白ZO-1转录水平变低。鸟苷治疗组的小鼠紧密连接蛋白ZO-1转录水平介于对照组与造模组之间。药物对照组紧密连接蛋白ZO-1转录水平与对照组的小鼠子宫接近。鸟苷每日腹腔注射持续一周可不同程度地修复急性感染性子宫内膜炎的黏膜屏障功能。
由图7可知，与对照组的小鼠相比，造模组的小鼠紧密连接蛋白Occludin转录水平变低。鸟苷治疗组的小鼠紧密连接蛋白Occludin转录水平介于对照组与造模组之间。药物对照组紧密连接蛋白Occludin转录水平与对照组的小鼠子宫接近。鸟苷每日腹腔注射持续一周可不同程度地修复急性感染性子宫内膜炎的黏膜屏障功能。
综上所述，鸟苷对子宫内膜炎有良好的功效，无不良反应，可减缓致病性大肠杆菌诱导的小鼠急性感染性子宫内膜炎炎症及修复子宫内膜屏障，在预防、治疗或改善子宫内膜炎症方面具有良好的应用前景。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.鸟苷在制备防治子宫内膜炎的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的鸟苷在防治子宫内膜炎中的应用，其特征在于：所述子宫内膜炎为急性感染性子宫内膜炎。
3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述防治子宫内膜炎制剂或药物为含鸟苷并以鸟苷为活性成分的药物组合物。
4.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于：将所述药物制成医药领域中所接受的任一种剂型。
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