CN117941742B - 一种促进蛋白质吸收的营养组合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进蛋白质吸收的营养组合物及其用途，具体地，所述的营养组合物包括α‑乳清蛋白、β‑酪蛋白和镁盐，α‑乳清蛋白、β‑酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（0.9‑9.2）：（1.1‑9.0）：（0.02‑0.08），α‑乳清蛋白占总蛋白含量的9%‑50%、β‑酪蛋白占总蛋白含量的10.5%‑60%。该营养组合物可促进蛋白质吸收、增加游离氨基酸吸收总量、促进氨基酸转运蛋白（SLC6A14）和寡肽转运蛋白（PEPT1）的表达。
Description
技术领域
本发明属于营养组合物技术领域，具体涉及一种促进蛋白质吸收的营养组合物及其用途。
背景技术
母乳是婴儿最理想的天然食品，世界卫生组织建议在婴儿出生前6个月对婴儿进行纯母乳喂养，但在母乳不足或不能母乳时，婴幼儿配方食品是最佳的母乳替代品。婴儿配方食品是以牛乳为乳基，添加多种营养成分调配而成，满足婴儿生长所需的蛋白脂质等含量基础要求。
蛋白质是生命早期生长发育的重要物质基础，蛋白质的消化吸收对婴儿的生长发育和各项生理功能具有非常重要的意义。目前对婴儿配方奶粉蛋白部分已经完成乳清蛋白和酪蛋白配比的优化，但是在蛋白质亚组分组成如α-乳清蛋白（又名α-乳白蛋白，α-La）和β-酪蛋白（β-CN）以及消化吸收特性方面跟母乳仍有差距。蛋白质胃肠消化率有差异的原因可能是样品中蛋白质组分不同所致。乳清蛋白主要由α-乳清蛋白和β-乳球蛋白构成，其中α-乳清蛋白比β-乳球蛋白更易被消化吸收。也有研究显示β-乳球蛋白的消化率与奶中αs1-酪蛋白的含量成负相关，α s1-酪蛋白的存在会增加机体内β-乳球蛋白的抗体，不利于β-乳球蛋白的消化吸收。同时，脂肪、矿物质、碳水化合物等物质可影响蛋白质的消化率。
蛋白质被机体吸收利用的程度将直接影响其营养价值，而蛋白质的消化吸收受多种蛋白组分组成和相互作用的影响，其它成分如脂肪、矿物质以及碳水化合物等会影响其消化吸收特性。
目前未见针对调整蛋白质亚组分对蛋白质吸收效果的报道，以及蛋白质组成和镁盐组合对蛋白质吸收特性的研究。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种促进蛋白质吸收的组合物。
本发明的第二目的在于提供一种促进蛋白质吸收的食品。
本发明的第三目的在于提供所述组合物在促进蛋白质吸收方面的应用。
为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
一方面，本发明提供了一种营养组合物，其包括α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（0.9-9.2）：（1.1-9.0）：（0.02-0.08），α-乳清蛋白占总蛋白含量的9%-50%，β-酪蛋白占总蛋白含量的10.5%-60%。
作为一种优选的实施方式，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（0.9-9.0）：（1.1-8.5）：（0.023-0.075），α-乳清蛋白占总蛋白含量的9%-45%，β-酪蛋白占总蛋白含量的10.5%-56%；
作为一种更为优选的实施方式，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（1.0-8.0）：（1.1-8.5）：（0.023-0.07），α-乳清蛋白占总蛋白含量的10%-44%，β-酪蛋白占总蛋白含量的10.5%-56%。
作为一种更为优选的实施方式，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（1.2-8.0）：（1.2-8.5）：（0.023-0.07），α-乳清蛋白占总蛋白含量的12%-44%，β-酪蛋白占总蛋白含量的12%-56%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（1.4-8.5）：（1.4-8.0）：（0.025-0.065）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（1.6-8.5）：（1.6-8.0）：（0.025-0.065）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（1.8-8.0）：（1.8-7.5）：（0.026-0.060）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.0-7.5）：（2.0-7.0）：（0.027-0.058）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.1-7.0）：（2.1-6.5）：（0.028-0.055）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.2-6.5）：（2.2-6.4）：（0.029-0.054）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.3-6.0）：（2.3-6.3）：（0.030-0.053）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.4-5.5）：（2.4-6.2）：（0.031-0.052）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.5-5.0）：（2.5-6.1）：（0.032-0.050）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.6-4.9）：（2.6-6.0）：（0.033-0.049）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.7-4.7）：（2.7-5.9）：（0.034-0.048）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.8-4.4）：（2.8-5.5）：（0.035-0.047）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.9-4.0）：（2.9-5.0）：（0.035-0.046）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（3.0-3.6）：（3.0-4.5）：（0.035-0.045）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（3.0-3.4）：（3.0-4.0）：（0.036-0.044）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（3.0-3.3）：（3.0-3.5）：（0.037-0.043）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（3.0-3.2）：（3.0-3.2）：（0.038-0.042）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（3.0-3.1）：（3.0-3.1）：（0.039-0.041）。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白占总蛋白含量的14%-40%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白占总蛋白含量的15%-40%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白占总蛋白含量的18%-38%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白占总蛋白含量的20%-36%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白占总蛋白含量的22%-34%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白占总蛋白含量的24%-33%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白占总蛋白含量的26%-32%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，α-乳清蛋白占总蛋白含量的28%-30%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，β-酪蛋白占总蛋白含量的14%-52%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，β-酪蛋白占总蛋白含量的16%-48%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，β-酪蛋白占总蛋白含量的18%-45%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，β-酪蛋白占总蛋白含量的20%-42%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，β-酪蛋白占总蛋白含量的22%-38%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，β-酪蛋白占总蛋白含量的24%-36%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，β-酪蛋白占总蛋白含量的26%-34%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，β-酪蛋白占总蛋白含量的28%-32%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物中，β-酪蛋白占总蛋白含量的28%-30%。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的营养组合物，由蛋白质和矿物质组成。更具体地，所述蛋白质包括α-乳清蛋白和β-酪蛋白，还可选择性地包括其他乳蛋白，例如来自牛乳或其他哺乳动物的乳蛋白。所述矿物质包括镁盐，还可选择性地包括其他矿物质，例如婴幼儿配方食品中常规添加的矿物质种类。
在一些实施方式中，所述的α-乳清蛋白来源于脱脂乳粉、浓缩乳清蛋白粉、不同α乳清蛋白含量的乳清蛋白粉或其他可提供α-乳清蛋白的原料。
在一些实施方式中，所述的β-酪蛋白来源于脱脂乳粉、酪蛋白粉、不同β-酪蛋白含量的酪蛋白粉或其他可提供β-酪蛋白的原料。
在一些实施方式中，所述的镁盐包括硫酸镁、氯化镁、氧化镁、碳酸镁、磷酸氢镁、葡萄糖酸镁、乳酸镁、L-苏糖酸镁、柠檬酸镁、甘氨酸镁中的一种或多种。
另一方面，本发明提供了一种食品，其包括前面所述的营养组合物。
在一些实施方式中，所述的食品为婴儿配方食品、较大婴儿配方食品、幼儿配方食品、儿童奶粉、特殊医学用途婴儿配方食品。
在一些实施方式中，所述的食品为固态乳制品或液态乳制品。
另一方面，本发明提供了前面所述的营养组合物或前面所述的食品在制备促进蛋白质吸收的产品中的应用。
根据本发明的具体实施方式，所述的产品为食品。作为一种优选的实施方式，所述的食品为乳制品。
在一些实施方式中，本发明所述的产品还可以根据最终产品的需要，包括其他成分，可以例举的包括：其他乳蛋白，脂肪，碳水化合物，维生素和矿物质等营养素中的一种或多种。这些具体成分的选择和用量可参照相关标准进行。
根据本发明的具体实施方式，所述的促进蛋白质吸收包括增加游离氨基酸吸收总量。
根据本发明的具体实施方式，所述的促进蛋白质吸收包括增加可促进肠道细胞吸收的游离氨基酸。
根据本发明的具体实施方式，所述的肠道细胞为Caco-2。
另一方面，本发明提供了前面所述的营养组合物或前面所述的食品在制备促进氨基酸转运蛋白和/或寡肽转运蛋白表达的产品中的应用，其中，所述的氨基酸转运蛋白包括SLC6A14，所述寡肽转运蛋白包括PEPT1。
根据本发明的具体实施方式，所述的产品为食品。所述的食品例如可以为婴儿配方食品、较大婴儿配方食品、幼儿配方食品或特殊医学用途婴儿配方食品。
作为一种优选的实施方式，所述的食品为乳制品。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的食品中，以婴幼儿配方食品（婴儿配方食品、较大婴儿配方食品、幼儿配方食品或特殊医学用途婴儿配方食品）为例，以食品干物质的量计，α-乳清蛋白的含量为0.9-9.2g/100g，β-酪蛋白的含量为1.1-9.0g/100g，镁盐中镁的含量为0.02-0.08 g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为0.9-9.0g/100g，β-酪蛋白的含量为1.1-8.5g/100g，镁盐中镁的含量为0.023-0.075g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为1.0-8.0g/100g，β-酪蛋白的含量为1.1-8.5g/100g，镁盐中镁的含量为0.023-0.07g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为1.2-8.0g/100g，β-酪蛋白的含量为1.2-8.5g/100g，镁盐中镁的含量为0.023-0.07g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为1.3-8.0g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为1.4-8.0g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为1.6-8.0g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为1.8-8.0g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为2.0-7.5g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为2.1-7.0g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为2.2-6.5g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为2.3-6.0g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，α-乳清蛋白的含量为2.4-5.5g/100g，进一步优选为2.5-5.0g/100g，进一步优选为2.6-4.9g/100g，进一步优选为2.7-4.7g/100g，进一步优选为2.8-4.4g/100g，进一步优选为2.9-4.0g/100g，进一步优选为3.0-3.6g/100g，进一步优选为3.0-3.4g/100g，进一步优选为3.0-3.3g/100g，进一步优选为3.0-3.2g/100g，进一步优选为3.0-3.1g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为1.3-8.3g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为1.4-8.3g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为1.6-8.0g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为1.8-7.5g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为2.0-7.0g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为2.1-6.5g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为2.2-6.4g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为2.3-6.3g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为2.4-6.2g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为2.5-6.1g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为2.6-6.0g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，β-酪蛋白的含量为2.7-5.9g/100g，进一步优选为2.8-5.5g/100g，进一步优选为2.9-5.0g/100g，进一步优选为3.0-4.5g/100g，进一步优选为3.0-4.0g/100g，进一步优选为3.0-3.5g/100g，进一步优选为3.0-3.2g/100g，进一步优选为3.0-3.1g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，镁盐中镁的含量为0.025-0.065g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，镁盐中镁的含量为0.026-0.060g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，镁盐中镁的含量为0.027-0.058g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，镁盐中镁的含量为0.028-0.055g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，镁盐中镁的含量为0.029-0.054g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，镁盐中镁的含量为0.030-0.053g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，镁盐中镁的含量为0.031-0.052g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，镁盐中镁的含量为0.032-0.050g/100g。
根据本发明的一些具体实施方案，本发明的婴幼儿配方食品中，镁盐中镁的含量为0.033-0.049g/100g，进一步优选为0.034-0.048g/100g，进一步优选为0.035-0.047g/100g，进一步优选为0.035-0.046g/100g，进一步优选为0.035-0.045g/100g，进一步优选为0.036-0.044g/100g，进一步优选为0.037-0.043g/100g，进一步优选为0.038-0.042g/100g，进一步优选为0.039-0.041g/100g。
在本发明中，营养组合物或食品中的总蛋白为所述营养组合物或食品中所有蛋白质的总和。除非另外说明，当本发明中的营养组合物或食品还包含除α-乳清蛋白、β-酪蛋白以外的其他蛋白时，所述的总蛋白为α-乳清蛋白、β-酪蛋白和该其他蛋白的总和。当本发明中的营养组合物或食品中的蛋白仅包含α-乳清蛋白、β-酪蛋白时，所述的总蛋白为α-乳清蛋白与β-酪蛋白之和。
另一方面，本发明提供了α-乳清蛋白、β-酪蛋白和/或镁盐在促进氨基酸转运蛋白和/或寡肽转运蛋白表达中的应用，其中，所述的氨基酸转运蛋白包括SLC6A14，所述寡肽转运蛋白包括PEPT1。
根据本发明的具体实施方式，所属的促进氨基酸转运蛋白和/或寡肽转运蛋白表达包括促进肠道细胞中氨基酸转运蛋白和/或寡肽转运蛋白表达。
有益效果：
本发明提供了一种促进蛋白质吸收的营养组合物及其用途，该营养组合物由α-乳清蛋白、β-酪蛋白、镁盐组成，该营养组合物能够促进蛋白质吸收，具体技术效果为增加游离氨基酸吸收总量、促进氨基酸转运蛋白（SLC6A14）和寡肽转运蛋白（PEPT1）的表达。
本发明通过调整蛋白质亚组分α-乳清蛋白、β-酪蛋白的含量，以及镁盐中镁的含量，实现了促进蛋白质吸收的效果，组合物中α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁同步增加可进一步促进蛋白质吸收，提示存在一定的协同作用。
附图说明
图1为细胞转运游离氨基酸总量统计结果；
图2为氨基酸吸收增加百分比统计结果。
具体实施方式
在进一步描述本发明具体实施方案之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。
本说明书中，使用“可以”表示的含义包括了进行某种处理以及不进行某种处理两方面的含义。
本说明书中，使用“任选”或“任选的”表示某些物质、组分、执行步骤、施加条件等因素使用或者不使用。
本说明书中，所使用“婴幼儿”表示年龄3岁以下的人类群体。
本说明书中，所使用“婴儿”表示0~不满6月龄的人类群体。
本说明书中，所使用“较大婴儿”表示6～不满12月龄的人类群体。
本说明书中，所使用的“儿童”表示年龄大于3岁，且小于12岁，处于生长发育期的人类生活群体。
除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
除非另外说明，本发明中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本技术领域常规技术。
本发明提供了一种促进蛋白质吸收的营养组合物及其用途，该营养组合物由α-乳清蛋白、β-酪蛋白、镁盐组成，其技术效果为增加游离氨基酸吸收总量、促进氨基酸转运蛋白（SLC6A14）和寡肽转运蛋白（PEPT1）的表达。
本发明提供了7个实验例，采用体外胃肠消化模型和Caco-2细胞体外吸收模型，评估了不同α-乳清蛋白、β-酪蛋白、镁盐含量的营养组合物对蛋白质吸收相关指标的影响。
与实验例1相比，实验例2在总蛋白质浓度不变的情况下，强化了α-乳清蛋白、β-酪蛋白的含量，结果提示通过强化α-乳清蛋白和β-酪蛋白含量，调整蛋白质亚组分构成，可影响蛋白质吸收相关指标，具体体现在增加游离氨基酸吸收总量、促进氨基酸转运蛋白（SLC6A14）和寡肽转运蛋白（PEPT1）的表达。
与实验例2相比，实验例3仅增加了镁盐，结果提示在蛋白质总量和α-乳清蛋白、β-酪蛋白的含量不变的情况下，通过增加体系中镁的含量，也可影响蛋白质吸收相关指标，具体体现在可进一步增加游离氨基酸吸收总量。
与实验例3相比，实验例4和实验例5进一步强化α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁含量，结果显示蛋白质吸收相关指标进一步提升，具体体现在增加游离氨基酸吸收总量、促进氨基酸转运蛋白（SLC6A14）和寡肽转运蛋白（PEPT1）的表达。但与实验例4相比，实验例5的游离氨基酸吸收总量、氨基酸转运蛋白（SLC6A14）和寡肽转运蛋白（PEPT1）的表达量均有下降趋势，但差异无显著性。
与实验例4和实验例5相比，实验例6和实验例7进一步强化了α-乳清蛋白或β-酪蛋白的含量，使α-乳清蛋白和β-酪蛋白占总蛋白的含量分别达到90%和88%，结果显示蛋白质吸收相关指标没有进一步升高。
（一）实验样品和实验方法
1、乳蛋白和镁盐组合物制备
按照样本蛋白含量，用去离子水调整总蛋白质浓度为10 mg/mL，制备50 mL的乳蛋白样品，在此基础上，根据镁含量，添加氯化镁制备蛋白质和镁盐的营养组合物。
各实验例（实验例2-5为实施例和实验例1、6、7为对比例）中营养组合物含量情况如表1所示。
表1 各实施例和对比例中营养组合物含量情况
2、体外胃肠消化实验
模拟胃液的配制和胃消化实验过程：称取4.35 mg胃蛋白酶和23.755 mg胃脂肪酶，加入45 mL浓度为0.15M的NaCl溶液，利用1M盐酸调节pH至4.0，定容至50 mL组成模拟胃液，使体系中胃蛋白酶浓度为113.75U/mL，胃脂肪酶终浓度为21U/mL。
模拟胃液在37℃水浴锅中预热20min。于酶反应器（37℃）中将25 mL乳样加入至25mL胃消化液中，在消化的0 min取样，取样5mL，所取样用1M NaOH调节pH至7.0终止反应。
模拟肠消化液配制和肠消化液实验过程：将胰蛋白酶、胆盐溶解在由50 mmol/LKH2PO4、20mM CaCl2、0.15 mol/L NaCl组成混合溶液中，体系酶的浓度分别为17.26U/mL、2.64mg/mL，将溶液的pH调至6.5。
将胃消化结束样品pH调至6.5，等体积加入模拟肠消化液，在消化的120 min将样品置于95℃加热5min使酶失活，停止反应。
3、Caco-2细胞体外吸收实验
Caco-2细胞体外吸收建模：在Transwell板的上室加入（105个/mL）的细胞悬液0.3mL、下室加入1.3-1.5mL含20%FBS的新鲜培养基，待细胞贴壁后，隔一天换一次液，换液时测定电阻值，培养21天时，测定电阻值，电阻值达到400Ω·cm2以上表示建模成功。
细胞转运：将旧培养基倒掉，换成Hanks平衡溶液，放培养箱孵育30min。上下室各用Hanks平衡溶液清洗3次，下室加入1.5mLHanks平衡溶液，上室加入0.3mL样品溶液，计时2h，吸取下层溶液进行后续指标测定。
4、蛋白质吸收相关指标测定
（1）游离氨基酸的测定：采用液相色谱-质谱联用法测定下室中的游离氨基酸，色谱柱为Agilent Poroshell 120 HILIC-Z柱（2.7μm, 2.1×100mm），进样体积为2μL，流速为0.30 L/min。流动相A为20mM甲酸铵和水。流动相B: 20mM甲酸铵和90%乙腈水。
（2）氨基酸和寡肽转运载体蛋白表达量的测定
Caco-2细胞裂解：PBS冲洗3次后，加入0.6mL培养基和0.6mL样品，干预24h后倒掉液体，用PBS清洗3次，加入200μL细胞裂解液（含1mMPMSF），处理1-2s后吸取液体到离心管中。全程在冰上进行，4℃，5000g离心5min，取上清。
采用BCA法测上清液中蛋白质浓度，按照ELISA试剂盒操作说明进行实验操作测定上清液中转运蛋白含量。
（二）实验结果
游离氨基酸吸收总量
实验例1-7总蛋白质浓度相同，经体外胃肠消化模型消化后，取等量消化液经Caco-2细胞体外吸收模型，转运到下室的游离氨基酸总量结果如图1。结果显示，与实验例1相比，实验例2转运到下室的游离氨基酸总量增加，提示通过调整蛋白质亚组分可以改善蛋白质吸收；实验例3在实验例2的基础上在体外消化吸收体系中增加了镁盐含量，结果显示，与实验例2相比，实验例3转运到下室的游离氨基酸总量进一步提升，提示镁可能对促进蛋白质吸收有促进作用；实验例4和实验例5在实验例3的基础上，进一步增加α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁的含量，结果显示游离氨基酸吸收总量进一步提升，但实验例5有下降趋势。在此基础上，继续增加α-乳清蛋白的含量、或增加β-酪蛋白的含量，游离氨基酸总量反而下降。在总蛋白质浓度不变的情况下，强化了α-乳清蛋白、β-酪蛋白的含量，可增加游离氨基酸吸收总量；在此基础上，通过增加体系中镁的含量，可进一步增加游离氨基酸吸收总量；同步强化了α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁的含量在一定含量范围内可进一步提升游离氨基酸吸收总量。
将实验例2-7的游离氨基酸总量与实验例1进行对比，以对照组为基准（100%）得到增加百分比。结果显示实验例2-7相对于实验例1，氨基酸转运总量分别增加了20%、56%、180%、145%、20%和17%，表明α-乳清蛋白、β-酪蛋白、镁盐的营养组合物可促进细胞吸收的游离氨基酸增加。结果如图2所示。
氨基酸和寡肽转运蛋白表达量
小肠上皮细胞对肽和氨基酸的吸收有三种方式：主动转运、胞吞胞吐和被动扩散三种。氨基酸和寡肽主要吸收方式为主动转运，即利用转运载体进入机体。
SLC6A14是一种具有独特性的氨基酸转运蛋白，转运除谷氨酸和天冬氨酸以外所有的氨基酸，具有广泛的底物特异性，也是目前研究较为明确的一种氨基酸转运蛋白。寡肽转运蛋白包括PEPT1和PEPT2两种，其中 PEPT1是高等动物体内研究较多的寡肽转运蛋白。
转运蛋白表达量受底物调节，分别分析不同α-乳清蛋白、β-酪蛋白、镁盐的营养组合物样品干预细胞后，对氨基酸转运蛋白和寡肽转运蛋白表达量的影响。
氨基酸转运蛋白的实验结果发现与实验例1和实验例2相比，实验例3、实验例4和实验例5的SLC6A14的表达量均增加，这与游离氨基酸增加的趋势也是一致的。与实验例4相比，实验例5-6的SLC6A14的表达量有下降趋势，但差异无显著性，实验例7的表达量显著下降。结果如表2所示。
表2 氨基酸转运蛋白表达量
寡肽转运蛋白的实验结果发现与实验例1和实验例2相比，实验例3、实验例4和实验例5的PEPT1的表达量均增加。与实验例4相比，实验例5-7的PEPT1的表达量有下降趋势，但差异没有显著性。结果如表3所示。
表3 寡肽转运蛋白表达量
通过以上实验例的比较结果，提示α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐的营养组合物可以促进蛋白质的吸收，增加游离氨基酸吸收总量、促进氨基酸转运蛋白SLC6A14和寡肽转运蛋白PEPT1的表达。
上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种营养组合物或包括该营养组合物的食品在制备促进蛋白质吸收的产品中的应用，所述的营养组合物包括α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.2-6.5）：（2.2-6.4）：（0.02-0.08），α-乳清蛋白占总蛋白含量的21%-44%，β-酪蛋白占总蛋白含量的26%-56%，所述的促进蛋白质吸收包括增加游离氨基酸吸收总量；所述的镁盐为氯化镁。
2.一种营养组合物或包括该营养组合物的食品在制备促进氨基酸转运蛋白表达的产品中的应用，其中，所述的氨基酸转运蛋白包括SLC6A14，所述的营养组合物包括α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.2-6.5）：（2.2-6.4）：（0.02-0.08），α-乳清蛋白占总蛋白含量的21%-44%，β-酪蛋白占总蛋白含量的26%-56%；所述的镁盐为氯化镁。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.2-6.5）：（2.2-6.4）：（0.023-0.075），α-乳清蛋白占总蛋白含量的21%-44%，β-酪蛋白占总蛋白含量的26%-56%。
4.根据权利要求1或2所述的应用，其中，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.2-6.5）：（2.2-6.4）：（0.023-0.07），α-乳清蛋白占总蛋白含量的21%-44%，β-酪蛋白占总蛋白含量的26%-56%。
5.根据权利要求1或2所述的应用，其中，所述的α-乳清蛋白来源于脱脂乳粉、不同α-乳清蛋白含量的乳清蛋白粉或其他能提供α-乳清蛋白的原料；所述的β-酪蛋白来源于脱脂乳粉、不同β-酪蛋白含量的酪蛋白粉或其他能提供β-酪蛋白的原料。
6.根据权利要求1或2所述的应用，其中，所述的食品为固态乳制品或液态乳制品。
7.根据权利要求1或2所述的应用，其中，所述的食品为婴儿配方食品、较大婴儿配方食品、幼儿配方食品、儿童奶粉或特殊医学用途婴儿配方食品。
8.α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐在促进氨基酸转运蛋白表达中的应用，其中，所述的氨基酸转运蛋白包括SLC6A14，α-乳清蛋白、β-酪蛋白和镁盐中镁的质量比为（2.2-6.5）：（2.2-6.4）：（0.02-0.08），α-乳清蛋白占总蛋白含量的21%-44%，β-酪蛋白占总蛋白含量的26%-56%；所述的镁盐为氯化镁。
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