CN117925752A - 一种石斛处理方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种石斛处理方法及其应用。本发明所述石斛处理方法采用复合酶对石斛粉进行酶解0.5～3小时，所述复合酶为质量比为1：(0.2～3)的纤维素酶和无花果蛋白酶；并将酶解液固液分离得到石斛水提液和滤渣，将石斛水提液和白酒基酒混合静置沉淀去除不稳定物质；再与石斛醇提液进行混合，制得的石斛酒中均不低于200mg/L，且风味、口感和色泽质地均较佳。

Description

一种石斛处理方法及其应用

技术领域

本发明属于制酒技术领域，更具体地，涉及一种石斛处理方法及其应用。

背景技术

石斛为我国传统名贵中药，主要分布用于我国的云南、贵州、安徽等地，有铁吊兰、铁皮兰和黑节草之称，具有益胃生津，滋阴清热，润肺止咳的功效。《神农本草经》首次记载石斛并将其列为上品言：“味甘，主伤中，除痹，下气，强阴，补五脏虚劳羸弱，久服厚肠胃”，有“药中黄金”、“救命仙草”、“九大仙草之首”之美誉。目前，通过科学手段已从石斛中分离鉴定了百余种化学成分，主要包括多糖、生物碱类、黄酮类、苯丙素类等。但其含量最多的有效成分为石斛多糖，目前文献报道中针对铁皮石斛药理活性的研究也主要集中于多糖上。

目前石斛酒等养生酒制备主要采用的白酒直接浸渍提取，但是类似于石斛中主要有效成分石斛多糖或其他分子量较大的活性物质无法直接溶于白酒，仅仅是药材中色素或其他小分子物质溶出，导致药材浪费，药酒中有效物质含量低。因此，本领域需要开发一种新的石斛处理方法及其应用。

发明内容

本发明的目的在于克服上述不足，提供一种石斛处理方法，所述处理方法处理可提高多糖含量，且将其应用于制备石斛酒，制得的石斛酒的多糖含量较高，且风味、口感和色泽质地均较佳。

本发明的另一目的在于提供一种石斛酒的制备方法。

本发明的另一目的在于提供所述制备方法制备的石斛酒。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种石斛处理方法，采用复合酶对石斛粉进行酶解0.5～3小时，所述复合酶为质量比为1：(0.2～3)的纤维素酶和无花果蛋白酶。

上述方案中，采用特定复合酶对石斛粉进行酶解提取，发明人经过大量的实验研究发现，复合酶的种类以及比例对体系中多糖含量有较大影响，猜测可能是由于复合酶中的纤维素酶比例过高会使得石斛多糖过多的分解为还原糖使多糖含量下降；若无花果蛋白酶比例过高，会使得石斛水提液中石斛大分子量多糖含量占比过高，无法使石斛中的多糖较为完全释放，含量较低。

进一步地，将石斛粉与水混合后，再加入复合酶进行酶解。

具体地，所述石斛粉和水的质量比为1：(10～40)。

具体地，所述石斛粉由石斛经粉碎得到，所述粉碎方式可以参考现有技术，例如但不限于研钵粉碎或研磨机粉碎。

在具体实施方式中，所述石斛粉采用研磨机对干燥石斛粉碎并经5～50目筛得到。这样有利于石斛与水充分混合有利于复合酶发挥酶解反应，使石斛香气成分与功能物质充分释放。

具体地，所述石斛可以为铁皮石斛、金钗石斛或霍山石斛中的一种或几种。

进一步地，所述酶解的温度为30～55℃。

本发明还提供一种石斛酒的制备方法，包括如下步骤：

S1.采用复合酶对石斛粉进行酶解0.5～3小时，所述复合酶为质量比为1：(0.2～3)的纤维素酶和无花果蛋白酶，酶解结束后灭酶、固液分离得到滤液和滤渣；

S2.S1所得滤渣在室温采用白酒基酒对进行浸泡，得到石斛醇提液；S1所得滤液按照相对白酒基酒体积的0.5～5％的比例与白酒基酒混合，静置沉淀过滤得到石斛酒基酒；

S3.将步骤S2中的石斛醇提液按照石斛酒基酒体积的1～10％和石斛酒基酒混合得到石斛酒。

通过采用特定复合酶对石斛进行处理，可以有效提高滤液中多糖含量，且多糖能够更有效的溶于白酒基酒中，有助于石斛酒中多糖含量的提高，另外首先将石斛水提液和白酒基酒混合静置沉淀去除不稳定物质；再与石斛醇提液进行混合可以更有效的保证石斛酒的色泽和风味。

进一步地，所述复合酶为质量比为1：(0.25～0.5)的纤维素酶和无花果蛋白酶。

进一步地，所述酶解的时间为1～2小时。

具体地，步骤S1中所述灭酶可以参考现有技术，例如但不限于在95～100℃处理5～15min。

具体地，步骤S1中所述固液分离可以参考现有技术，例如但不限于过滤或离心。

具体地，步骤S1中所述滤液中的多糖重均分子量为3800～4800Da。

更具体地，步骤S1中所述滤液中的多糖重均分子量为4000～4500Da。

具体地，步骤S2中滤渣采用白酒基酒浸泡前可以先进行干燥。干燥后的滤渣可以使得其采用白酒基酒浸泡时不额外引入水分影响浸提效果。

具体地，步骤S2中所述浸泡时间为20～180min。

具体地，步骤S2中所述浸泡滤渣和白酒基酒的重量体积比为(2～5)：100。

在具体实施方式中，步骤S2中滤液先离心再与白酒基酒混合，所述离心的转速为2000～8000r/min。

具体地，步骤S2中所述去除不溶物采用低温离心。

具体地，所述离心的转速为2000～8000r/min。

具体地，步骤S2中所述过滤的目的是去除析出的大分子量多糖就不稳定物质，过滤的方法可以采用现有技术常见的过滤方法，优选地，所述过滤为采用硅藻土过滤。

具体地，步骤S2中所述静置时间为2～7天。

进一步地，步骤S2中所述白酒基酒为酱香型白酒、清香型白酒或浓香型白酒中的一种或几种。

在具体实施方式中，所述白酒基酒的酒精度为40～65度。

本发明还保护上述制备方法制得的富含多糖的石斛酒。

上述富含多糖的石斛酒可以经过存储、过滤和包装工艺，并不影响其活性物质含量以及总和品质。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明提供了一种石斛处理方法，所述处理方法采用特定的复合酶对石斛粉进行酶解，能够有效调整滤液中多糖含量及分子量；并将酶解液固液分离得到石斛水提液和滤渣，将石斛水提液和白酒基酒混合静置沉淀去除不稳定物质；再与石斛醇提液进行混合，制得的石斛酒中均不低于200mg/L，且风味、口感和色泽质地均较佳。

附图说明

图1为实施例1、对比例1和对比例2制备过程中滤液的实物图，从左到右依次为对比例1、实施例1和对比例2中滤液的实物图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

本发明实施例和对比例中所用的纤维素酶、无花果蛋白酶、果胶酶、木瓜蛋白酶购买于东恒华道生物科技有限公司。

白酒基酒：

酱香型白酒，酒精度53度，购买于无锡玖优酒业有限公司；

浓香型白酒，酒精度52度，购买于无锡玖优酒业有限公司；

清香型白酒，酒精度60度，购买于无锡玖优酒业有限公司；

铁皮石斛，市售。

实施例1

一种石斛酒的制备方法，包括以下步骤：

S1.将铁皮石斛粉碎过20目筛得到石斛粉，加入石斛粉30倍质量的水搅拌均匀；加入石斛粉重量的10％的复合酶在45℃酶解1.5小时得酶解液；随后将酶解液在100℃处理5min，采用纱布过滤得到滤液和滤渣；所述复合酶为质量比1：0.3的纤维素酶和无花果蛋白酶；

S2.将步骤S1中的滤渣采用酱香型白酒(滤渣和酱香型白酒的质量体积比为3：100)在室温下浸泡2小时，然后采用离心在4000r/min转速下去除不溶物得到石斛醇提液；将步骤S1的滤液在5000r/min转速下离心后按照酱香型白酒体积的2％和酱香型白酒混合，静置沉淀7天，然后采用硅藻土进行过滤得到石斛酒基酒；

S3.将步骤S2中的石斛醇提液按照石斛酒基酒体积的5％和石斛酒基酒混合得到富含多糖的石斛酒。

实施例2

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述复合酶为质量比为1：0.25的纤维素酶和无花果蛋白酶。

实施例3

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述复合酶为质量比为1：0.5的纤维素酶和无花果蛋白酶。

实施例4

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述复合酶为质量比为1：3的纤维素酶和无花果蛋白酶。

实施例5

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述复合酶为质量比为1：0.2的纤维素酶和无花果蛋白酶。

实施例6

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述酶解时间为1小时。

实施例7

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述酶解时间为2小时。

实施例8

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述酶解时间为3小时。

实施例9

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述酶解时间为0.5小时。

实施例10

一种石斛酒的制备方法，包括以下步骤：

S1.将铁皮石斛粉碎过10目筛得到石斛粉，加入石斛粉10倍质量的水搅拌均匀；加入石斛粉重量的1％的复合酶在30℃酶解0.5小时得酶解液；随后将酶解液在95℃处理5min，采用纱布过滤得到滤液和滤渣；所述复合酶为质量比1：0.2的纤维素酶和无花果蛋白酶；

S2.将步骤S1中的滤渣采用酱香型白酒(滤渣和酱香型白酒的质量体积比为5：100)在室温浸泡2.5小时，然后采用离心在8000r/min转速下去除不溶物得到石斛醇提液；将步骤S1的滤液在2000r/min转速下离心后按照酱香型白酒体积的2.5％和酱香型白酒混合，静置沉淀5天，然后采用硅藻土进行过滤得到石斛酒基酒；

S3.将步骤S2中的石斛醇提液按照石斛酒基酒体积的10％和石斛酒基酒混合得到富含多糖的石斛酒。

实施例11

一种石斛酒的制备方法，包括以下步骤：

S1.将铁皮石斛粉碎过50目筛得到石斛粉，加入石斛粉40倍质量的水搅拌均匀；加入石斛粉重量的15％的复合酶在55℃酶解3小时得酶解液；随后将酶解液在100℃处理5min，采用纱布过滤得到滤液和滤渣；所述复合酶为质量比1：3的纤维素酶和无花果蛋白酶；

S2.将步骤S1中的滤渣采用酱香型白酒(滤渣和酱香型白酒的质量体积比为2：100)在室温浸泡3小时，然后采用离心在2000r/min转速下去除不溶物得到石斛醇提液；将步骤S1的滤液在8000r/min转速下离心后按照酱香型白酒体积的5％和酱香型白酒混合，静置沉淀3天，然后采用硅藻土进行过滤得到石斛酒基酒；

S3.将步骤S2中的石斛醇提液按照石斛酒基酒体积的10％和石斛酒基酒混合得到富含多糖的石斛酒。

实施例12

步骤同实施例1，区别在于，采用的白酒基酒为浓香型白酒。

实施例13

步骤同实施例1，区别在于，采用的白酒基酒为清香型白酒。

对比例1

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述复合酶为质量比为1：0.1的纤维素酶和无花果蛋白酶。

对比例2

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述复合酶为质量比为1：4的纤维素酶和无花果蛋白酶。

对比例3

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述复合酶为质量比为1：0.3的纤维素酶和木瓜蛋白酶。

对比例4

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述复合酶为质量比为1：0.3的果胶酶和无花果蛋白酶。

对比例5

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述酶解时间为0.3小时。

对比例6

步骤同实施例1，区别在于，步骤S1中所述酶解时间为5小时。

对比例7

一种石斛酒的制备方法，包括以下步骤：

S1.将铁皮石斛粉碎过20目筛得到石斛粉，加入石斛粉30倍质量的水搅拌均匀；加入石斛粉重量的10％的复合酶在45℃酶解1.5小时得酶解液；随后将酶解液在100℃处理5min，采用纱布过滤得到滤液和滤渣；将滤液在5000r/min转速下离心得到石斛水提液；所述复合酶为质量比1：0.3的纤维素酶和无花果蛋白酶；

S2.将步骤S1中的滤渣采用酱香型白酒浸泡2小时，然后采用离心在4000r/min转速下去除不溶物得到石斛醇提液；

S3.将步骤S2中的石斛醇提液按照石斛酒基酒体积的5％、石斛水提液按照酱香型白酒体积的2％和酱香型白酒混合，静置沉淀7天，然后采用硅藻土进行过滤得到石斛酒。

对比例8

一种石斛酒的制备方法，包括以下步骤：

S1.将铁皮石斛粉碎过20目筛得到石斛粉，加入石斛粉30倍质量的水搅拌均匀；加入石斛粉重量的10％的复合酶在45℃酶解1.5小时得酶解液；随后将酶解液在100℃处理5min，采用纱布过滤得到滤液和滤渣；将滤液在5000r/min转速下离心得到石斛水提液；所述复合酶为质量比1：0.3的纤维素酶和无花果蛋白酶；

S2.将步骤S1中的滤渣采用酱香型白酒浸泡2小时，然后采用离心在4000r/min转速下去除不溶物得到石斛醇提液；

S3.将步骤S2中的石斛醇提液按照石斛酒基酒体积的5％、石斛水提液按照酱香型白酒体积的2％和酱香型白酒混合得到石斛酒。

实验1滤液及石斛酒性能测定

1.测试方法：

(1)多糖含量测定：采用苯酚-硫酸法方法对上述实施例和对比例制备过程中的滤液和制备得到的石斛酒中的总糖含量进行测定；采用DNS比色法对还原糖进行测定，按照多糖含量＝总糖含量-还原糖含量进行计算。

(2)多糖分子量测定：采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法对实施例和对比例制备过程中的滤液的多糖分子量进行测定，具体方法为：流动相为0.2mol/L氯化钠溶液，冰醋酸调节pH至4.0。将测试样品利用流动相进行充分溶解，控制待测样本中多糖含量为1.0mg/L左右。色谱条件：流速0.5mL/min，进样量100μL，等度洗脱。检测器为示差折光检测器，检测波长210nm，色谱柱型号为Shodex SB-806HQ(13μm，300×8mm)，柱温35℃。

(3)感官评价：由8位品酒师对实施例和对比例制备的石斛酒进行品评打分，取平均值(结果保留2位小数)，感官品评标准如下：

2.测试结果：

各实施例和对比例的实验结果如表1和图1所示。

表1实施例和对比例中石斛酒的测试结果

从表1中可以看出，本发明制得的石斛酒中多糖含量较高，且制得的石斛酒多糖含量均不低于200mg/L，且风味、口感和色泽质地均较佳。

从实施例1～5中可以看出，随着纤维素酶和无花果蛋白酶的质量比增加，滤液中的多糖含量逐渐增加，但是制得的石斛酒中的多糖含量逐渐增加后降低；这可能是由于随着无花果蛋白酶的用量增加，多糖含量释放不完全，且在实验过程中可以观察到滤液变粘稠，可能是由于多糖分子量较高，无法较好的溶于后续白酒基酒中使得石斛酒中的多糖含量下降。当调整复合酶中纤维素酶和无花果蛋白酶的质量比为1：(0.25～0.5)时，制得的石斛酒的综合性能更佳，多糖含量不低于450mg/L，且风味、口感和色泽质地的评分均不低于8分，更优选纤维素酶和无花果蛋白酶的质量比为1：(0.25～0.3)。

从实施例1和实施例6～9中可以看出，随着酶解时间的增加，滤液中多糖含量先增加后降低，这可能是由于当酶解时间较短时，无法使多糖较为完全的释放，而酶解时间较长时会存在一些多糖被分解为还原糖使多糖含量下降；当酶解时间为1～3h时，制得的石斛酒中多糖含量不低于350mg/L，且风味、口感和色泽质地的评分均不低于7分，更优选地酶解时间为1.5～2h。

从对比例1中可以看出，当复合酶中纤维素酶和无花果蛋白酶的质量比过大时，滤液和石斛酒中多糖含量均降低，可能是由于纤维素酶比例过高导致多糖存在部分被分解为还原糖，无法有效的提高多糖含量，且最终制得的石斛酒风味和口感均下降。

从对比例2中可以看出，当复合酶中纤维素酶和无花果蛋白酶的质量比过大时，滤液中多糖含量下降，猜测可能是由于复合酶中纤维素酶占比过小无法有效的使多糖释放，且实验过程中滤液较为粘稠，多糖分子量较大使制得的石斛酒中多糖含量显著降低，分子量较大的多糖无法很好的溶解于白酒基酒中，且制得的石斛酒风味不协调，且口感和色泽质地也变差。从图1中可以看出多糖分子量较低时，滤液较稀；多糖分子量较高时，滤液相对粘稠。

从对比例3和对比例4中可以看出，当采用其他复合酶进行酶解时，无法有效的协同提高滤液和石斛酒中的多糖含量，且制得的石斛酒风味、色泽和口感均下降。

从对比例5和对比例6中可以看出，当酶解时间过短或过长时，滤液中多糖含量较低，且制得的石斛酒的综合性能下降。

从对比例7中可以看出，如果直接将石斛醇提液、石斛水提液和白酒基酒混合后静置过滤，制得的石斛酒中虽然多糖含量较高，但是其风味和色泽质地明显降低，这可能是由于在过滤过程中石斛醇提液中的部分色素和风味物质损失，使得石斛酒的综合性能降低。

从对比例8看出，若不先将石斛水提液和白酒基酒混合静置去除不稳定物质，制得的石斛酒中虽然多糖含量较高，但由于大分子多糖在酒中形成沉淀，导致酒体浑浊，使得石斛酒无法达到产品要求。显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的。

Claims (10)

1.一种石斛处理方法，其特征在于，采用复合酶对石斛粉进行酶解0.5～3小时，所述复合酶为质量比为1：(0.2～3)的纤维素酶和无花果蛋白酶。

2.根据权利要求1所述石斛处理方法，其特征在于，所述复合酶的添加量为石斛粉重量的1％～15％。

3.根据权利要求1所述石斛处理方法，其特征在于，将石斛粉与水混合后，再加入复合酶进行酶解。

4.根据权利要求1所述石斛处理方法，其特征在于，所述酶解的温度为30～55℃。

5.一种石斛酒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.采用复合酶对石斛粉进行酶解0.5～3小时，所述复合酶为质量比为1：(0.2～3)的纤维素酶和无花果蛋白酶，酶解结束后灭酶、固液分离得到滤液和滤渣；

S2.S1所得滤渣在室温采用白酒基酒对进行浸泡，得到石斛醇提液；S1所得滤液按照相对白酒基酒体积的0.5～5％的比例与白酒基酒混合，静置沉淀过滤得到石斛酒基酒；

S3.将步骤S2中的石斛醇提液按照石斛酒基酒体积的1～10％和石斛酒基酒混合得到石斛酒。

6.根据权利要求5所述石斛处理方法，其特征在于，所述复合酶为质量比为1：(0.25～0.5)的纤维素酶和无花果蛋白酶。

7.根据权利要求5所述石斛处理方法，其特征在于，所述酶解的时间为1～2小时。

8.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤S1中所述固液分离得方式采用过滤和/或离心。

9.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤S2中所述白酒基酒为酱香型白酒、清香型白酒或浓香型白酒中的一种或几种。

10.一种富含多糖的石斛酒，其特征在于，采用权利要求5～9任一项所述制备方法制得。