CN117916262A - Gdf15信号传导的治疗性抑制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及结合至胶质细胞源性神经营养因子家族受体α样(GFRAL)蛋白并抑制其活性的抗体。本发明还涉及作为恶病质状态以及涉及食物摄入减少和肌肉和脂肪量减少的病症的治疗靶标的GDF15‑GFRAL信号传导通路。

Description

GDF15信号传导的治疗性抑制剂

技术领域

本发明涉及结合至胶质细胞源性神经营养因子家族受体α样(GFRAL)蛋白并抑制其活性的抗体。本发明还涉及作为恶病质状态以及涉及食物摄入减少和肌肉和脂肪量减少的病症的治疗靶标的GDF15-GFRAL信号传导通路。

背景技术

称为“胶质细胞源性神经营养因子家族受体α样蛋白”的细胞表面受体由GFRAL基因编码，所述基因位于人染色体6p12.1上并且具有编码394个氨基酸的序列的9个外显子。

在发育中的小鼠脑中，已显示大脑皮层和海马体中Gfral的mRNA水平在出生时达到最大值并且后来下降，表明它可能参与神经保护和脑发育[1]。在成年小鼠中，Gfral转录物主要在中枢神经系统中发现。已发现其表达仅限于脑干的某些神经元，特别是在最后区(AP)和孤束核(孤核束，NTS)中。随后，在睾丸和脂肪组织中也检测到低水平的Gfral表达[2，3，4，5]。

GFRAL的配体已被鉴定为激素GDF15(生长和分化因子15)[2，3，4，5，6]。与GDF15相互作用后，GDF15-GFRAL复合物与RET(酪氨酸蛋白激酶受体)相互作用，并且通过激活MAPK、AKT和PLC-γ信号传导通路诱导细胞信号传导。已经显示这种信号传导具有调节食物摄入、能量消耗和体重的下游效应[2，3，4，5]。活性信号传导复合物是包含GDF15-GFRAL-RET的同二聚体的六个多肽的组装体。

GDF15是TGF-β家族的较远成员。它是应激诱导的细胞因子并且可以通过组织损伤[7]、电离辐射[8]、缺氧[9]、炎症[10]、化学毒素[42，43]和包括癌症[11]、类风湿性关节炎[12]、慢性肾衰竭[13]、心血管疾病[14]、肥胖症和糖尿病[15]在内的各种疾病状态上调。它还通过诸如化学治疗剂的组织损伤毒素加以诱导[16，17]。如小鼠[18]和非人灵长类动物模型[4]所证明的，它是压低食欲/食物摄入的应激反应性细胞因子。据报道，GDF15的循环水平在包括许多疾病状态在内的广谱病症中升高[42，44]。GDF15被认为代表对细胞应激的“前哨”激素反应，其保护作用包括限制对最近摄入的毒素的全身暴露(例如，通过涌吐)，以及通过其对条件性厌恶的诱导，促进避免将来暴露于先前导致细胞应激的药剂[42]。

高水平的GDF15与一些癌症患者的恶病质有关。体内癌症的存在可以增加GDF15的水平，驱使癌症恶病质。恶病质是多因素疾病，其特征在于骨骼肌和脂肪组织损失所致的体重减轻、代谢调节失衡和食物摄入减少[19]。据估计，恶病质影响全球多达74％的患有多种类型癌症的患者，其中在头颈癌、胰腺癌、胃癌和肝癌中发病率最高[20]。癌症恶病质不仅会对患有癌症的患者的生活质量有负面影响[21，22]，还会减弱抗癌化疗的有效性[23，24]并且增加其毒性[25，26，27]，导致癌症相关的死亡率增加[27，28，29]和医疗资源消耗增加。除癌症以外的一系列病症也与恶病质相关，包括肺和心脏病症(例如，充血性心力衰竭、慢性阻塞性肺疾病)，以及慢性肾病、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)，以及囊性纤维化、多发性硬化、运动神经元病、帕金森病、痴呆、结核病、多系统萎缩症、汞中毒、克罗恩病、类风湿性关节炎和乳糜泻的晚期状态。

在恶病质动物模型中，施用针对GDF15的单克隆抗体导致食物摄入增加，运动功能和能量消耗更好，并且能够逆转体重减轻并且恢复骨骼肌[30，31]。阻断GDF15-GFRAL通路逆转由癌症恶病质引起的体重减轻并且延长存活期[30]。据报道，抑制脑干神经元中RET信号传导复合物的抗GFRAL拮抗剂抗体在注射入荷瘤小鼠时可逆转过度脂质氧化并且预防癌症恶病质[32]。在2019年，启动了一项使用抗GFRAL单克隆抗体NGM120的临床试验，用于治疗癌症厌食/恶病质综合征(NCT04068896)。

食用鼠粮的Gfral^-/-(“敲除”)小鼠呈现正常体重，并且它们就像野生型小鼠一样，在食用高脂饮食时变得肥胖。根据一些报道，GfralGFRAL敲除小鼠在食用高脂饮食时变得比野生型小鼠略重。与媒介物治疗的小鼠相比，用GDF15治疗的野生型小鼠表现出显著减少的食物摄入和持续的体重减轻，而Gfral^-/-小鼠是GDF15的作用难治的[3，4]。这说明了GDF15-GFRAL信号传导对体重增加的抑制。此外，已示出GDF15过表达可保护小鼠免于患上肥胖症并且改善其在食用高脂饮食时的葡萄糖耐量[11，33]。在喂食鼠粮或高脂饮食的小鼠或大鼠中，GDF15施用减少食物摄入和体重。患有自发性肥胖的食蟹猴在暴露于重组HAS-GDF15 4周后显示食物摄入减少，导致显著的体重减轻[2，3，4，5，6]。在大鼠模型中，血清GDF15水平与肿瘤体积正相关，并且与食物摄入负相关，并且证明GDF15通过恶心和涌吐诱导厌食[34，35]。

还有报道称GDF15-GFRAL通路与妊娠剧吐[36]高度相关。

因此，由GDF15-GFRAL-RET复合物诱导的信号传导调节食物摄入和体重，并且其活性在诸如癌症恶病质的病症中起重要作用。通过抑制GDF15-GFRAL-RET复合物的活性，例如通过抑制该复合物在细胞表面的形成，拮抗剂提供了对这些和其他病症的潜在治疗性治疗途径。由Cimino等人,PNAS 118(27)2021描述了通过外源性和内源性GDF15对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的激活，其内容通过引用并入本文。

发明内容

本发明提供了针对人GFRAL的抗体。我们产生并且选定了针对GFRAL蛋白的抗体，所述抗体以高效力抑制GFRAL的活性，拮抗其下游信号传导。这些抗体展现了与表达GFRAL的细胞表面上的GFRAL的高亲和力结合，并且在表达GFRAL的细胞中抑制GDF15诱导的胞内信号传导。与GFRAL胞外结构域结合的抗体可以抑制GDF15-GFRAL-RET复合物的形成，例如，通过抑制RET与GDF15-GFRAL的缔合来实现。我们选定了在使用人GFRAL的测定中展示出高亲和力和高效力的抗体，结合了对非人GFRAL(例如，小鼠GFRAL)的交叉反应性。

将本发明的示例性抗体命名为QUEL-0101、QUEL-0201和QUEL-0301。此外，将本发明的相关抗体命名为QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104、QUEL-0105、QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304。本发明扩展到抗GFRAL结合分子，其掺入QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301的抗原结合序列，或者QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104、QUEL-0105、QUEL-0302、QUEL-0303或QUEL-0304中任一种的抗原结合序列，如它们的互补决定区(CDR)，例如，重链CDR(HCDR)HCDR1、HCDR2和/或HCDR3和/或轻链CDR(LCDR)LCDR1、LCDR2和/或LCDR3，以及任选地重链和/或轻链可变(VH和/或VL)结构域，及其变体。结合分子可以在多肽支架中包含QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104、QUEL-0105、QUEL-0201、QUEL-0301、QUEL-0302、QUEL-0303或QUEL-0304的HCDR1、HCDR2和/或HCDR3，和/或结合分子可以在多肽支架中包含QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104、QUEL-0105、QUEL-0201、QUEL-0301、QUEL-0302、QUEL-0303或QUEL-0304的LCDR1、LCDR2和/或LCDR3。例如，所述结合分子可以包含QUEL-0201的HCDR3，任选地QUEL-0201 HCDR组，并且任选地所述结合分子可以包含QUEL-0201的HCDR和LCDR。

本发明的实施方案包括包含VH结构域和VL结构域的抗体，所述VH结构域包含一组HCDR，即HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且所述VL结构域包含一组LCDR，即LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中

(i)所述HCDR组是所定义的QUEL-0101 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:3，HCDR2是SEQ ID NO:4并且HCDR3是SEQ ID NO:5，

(ii)所述HCDR组是所定义的QUEL-0201 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:13，HCDR2是SEQ ID NO:14并且HCDR3是SEQ ID NO:15，或者

(iii)所述HCDR组是所定义的QUEL-0301 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:23，HCDR2是SEQ ID NO:24并且HCDR3是SEQ ID NO:25。

本发明的进一步的实施方案包括包含VH结构域和VL结构域的抗体，所述VH结构域包含一组HCDR，即HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且所述VL结构域包含一组LCDR，即LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中

(iv)所述HCDR组是所定义的QUEL-0102 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:99，HCDR2是SEQ ID NO:100并且HCDR3是SEQ ID NO:101，

(v)所述HCDR组是所定义的QUEL-0103 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:107，HCDR2是SEQ ID NO:108并且HCDR3是SEQ ID NO:5，

(vi)所述HCDR组是所定义的QUEL-0104 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:107，HCDR2是SEQ ID NO:108并且HCDR3是SEQ ID NO:113，或者

(vii)所述HCDR组是所定义的QUEL-0105 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:118，HCDR2是SEQ ID NO:108并且HCDR3是SEQ ID NO:119。

本发明的进一步的实施方案包括包含VH结构域和VL结构域的抗体，所述VH结构域包含一组HCDR，即HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且所述VL结构域包含一组LCDR，即LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中

(viii)所述HCDR组是所定义的QUEL-0302 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:23，HCDR2是SEQ ID NO:124并且HCDR3是SEQ ID NO:125，

(ix)所述HCDR组是所定义的QUEL-0303 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:133，HCDR2是SEQ ID NO:134并且HCDR3是SEQ ID NO:135，或者

(x)所述HCDR组是所定义的QUEL-0304 HCDR组，其中HCDR1是SEQ ID NO:133，HCDR2是SEQ ID NO:142并且HCDR3是SEQ ID NO:143。

本发明的抗体可以包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含一组HCDR，即HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且

所述VL结构域包含一组LCDR，即LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中

HCDR1是SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:99、SEQ ID NO:107或SEQ ID NO:118，

HCDR2是SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:100或SEQ ID NO:108，并且

HCDR3是SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:113或SEQ ID NO:119，并且任选地其中

LCDR1是SEQ ID NO:8，

LCDR2是SEQ ID NO:9，并且

LCDR3是SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:104。

本发明的抗体可以包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0101 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:3、HCDR2 SEQ ID NO:4和HCDR3 SEQ ID NO:5，并且

所述VL结构域包含QUEL-0101 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:10。

在另一个实施方案中，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0102 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:99、HCDR2 SEQ IDNO:100和HCDR3 SEQ ID NO:101，并且

所述VL结构域包含QUEL-0102 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

在另一个实施方案中，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0103 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:107、HCDR2 SEQ IDNO:108和HCDR3 SEQ ID NO:5，并且

所述VL结构域包含QUEL-0103 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

在另一个实施方案中，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0104 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:107、HCDR2 SEQ IDNO:108和HCDR3 SEQ ID NO:113，并且

所述VL结构域包含QUEL-0104 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

在另一个实施方案中，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0105 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:118、HCDR2 SEQ IDNO:108和HCDR3 SEQ ID NO:119，并且

所述VL结构域包含QUEL-0105 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。本发明的抗体可以包含QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2或其变体，其中存在一个或多个氨基酸改变；和/或QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7，其中存在一个或多个氨基酸改变。氨基酸改变可以是氨基酸的取代、缺失或插入。此类改变可以任选地可变结构域框架中，在CDR之外。例如，在VH和/或VL结构域框架中可以有一个或两个氨基酸改变。改变可以是保守取代和/或可以表示框架残基的种系化。使氨基酸残基种系化意味着使其恢复为如由产生可变结构域的种系基因区段所编码在该位置处存在的残基。对应的种系基因区段可以通过将可变结构域序列与人v、d和j(对于VH)或人v和j(对于VL)基因区段进行比较并且鉴定最接近的匹配来鉴定。所述QUEL-0101VH结构域的变体包括具有一个或多个改变的VH结构域，所述一个或多个改变存在于QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104或QUEL-0105 VH结构域中，例如，存在于这些VH结构域中的一个或多个的框架中。本发明的抗体任选地包含QUEL-0102 VH结构域SEQ ID NO:98、QUEL-0103 VH结构域SEQ ID NO:106、QUEL-0104 VH结构域SEQ ID NO:112或QUEL-0105 VH结构域SEQ ID NO:117。

所述VH结构域可以由通过重链v基因区段IGHV3-30(例如，IGHV3-30*18)与d基因区段和重链j基因区段(例如，IGHJ6例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码。因此，它可以包含通过IGHV3-30和IGHJ6的重组产生的VH结构域框架(“IGHV3-30 IGHJ6框架”)。任选地，所述VH结构域通过IGHV3-30、IGHD3-10和IGHJ6的重组产生。

所述抗体可以包含VH结构域，所述VH结构域与所述QUEL-0101 VH结构域SEQ IDNO:2具有至少90％氨基酸序列同一性，任选地至少95％、至少98％或至少99％序列同一性。所述VH结构域可以包含SEQ ID NO:2或由其组成。所述VH结构域可以包含在哺乳动物细胞(例如，CHO)中表达的由SEQ ID NO:1编码的VH结构域或由其组成。

所述VL结构域可以由通过轻链v基因区段IGKV1-27(例如，IGKV1-27*01)与轻链j基因区段(例如，κj区段，如IGKJ4(例如，IGKJ4*01))的重组产生的核苷酸序列编码。因此，它可以包含通过IGKV1-27和IGKJ4的重组产生的VL结构域框架(“IGKV1-27IGKJ4框架”)。

所述抗体可以包含VL结构域，所述VL结构域与所述QUEL-0101 VH结构域SEQ IDNO:7具有至少90％氨基酸序列同一性，任选地至少95％、至少98％或至少99％序列同一性。所述VL结构域可以包含SEQ ID NO:7或由其组成。所述VL结构域可以包含在哺乳动物细胞(例如，CHO)中表达的由SEQ ID NO:6编码的VL结构域或由其组成。

本发明的抗GFRAL抗体可以包含QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2和QUEL-0101VL结构域SEQ ID NO:7。

在另一个实施方案中，它包含QUEL-0102 VH结构域SEQ ID NO:98和QUEL-0102 VL结构域SEQ ID NO:103。

在另一个实施方案中，它包含QUEL-0103 VH结构域SEQ ID NO:106和QUEL-0103VH结构域SEQ ID NO:110。

在另一个实施方案中，它包含QUEL-0104 VH结构域SEQ ID NO:112和QUEL-0104VL结构域SEQ ID NO:115。

在另一个实施方案中，它包含QUEL-0105 VH结构域SEQ ID NO:117和QUEL-0105VH结构域SEQ ID NO:121。

本发明的抗体可以包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0201重链互补决定区(HCDR)组，即HCDR1 SEQ ID NO:13、HCDR2 SEQ ID NO:14和HCDR3 SEQ ID NO:15，并且

所述VL结构域包含QUEL-0201轻链互补决定区(LCDR)组，即LCDR1 SEQ ID NO:18、LCDR2 SEQ ID NO:19和LCDR3 SEQ ID NO:20。

本发明的抗体可以包含QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12或其变体，其中存在一个或多个氨基酸改变；和/或QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17，其中存在一个或多个氨基酸改变。氨基酸改变可以是氨基酸的取代、缺失或插入。此类改变可以任选地可变结构域框架中，在CDR之外。例如，在VH和/或VL结构域框架中可以有一个或两个氨基酸改变。改变可以是保守取代和/或可以表示框架残基的种系化。

所述VH结构域可以由通过重链v基因区段IGHV1-3(例如，IGHV1-3*01)与d基因区段和重链j基因区段(例如，IGHJ6，例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码。因此，它可以包含通过IGHV1-3和IGHJ6的重组产生的VH结构域框架(“IGHV1-3 IGHJ6框架”)。任选地，所述VH结构域通过IGHV1-3、IGHD5-18和IGHJ6的重组产生。

所述抗体可以包含VH结构域，所述VH结构域与所述QUEL-0201 VH结构域SEQ IDNO:12具有至少90％氨基酸序列同一性，任选地至少95％、至少98％或至少99％序列同一性。所述VH结构域可以包含SEQ ID NO:12或由其组成。所述VH结构域可以包含在哺乳动物细胞(例如，CHO)中表达的由SEQ ID NO:11编码的VH结构域或由其组成。

所述VL结构域可以由通过轻链v基因区段IGLV1-40(例如，IGLV1-40*01)与轻链j基因区段(例如，λj区段，如IGLJ3(例如，IGLJ3*02))的重组产生的核苷酸序列编码。因此，它可以包含通过IGLV1-40和IGLJ3的重组产生的VL结构域框架(“IGLV1-40 IGLJ3框架”)。

本发明的抗体可以包含QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17或具有一个或多个氨基酸改变的其变体。所述抗体可以包含VL结构域，所述VL结构域与所述QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:17具有至少90％氨基酸序列同一性，任选地至少95％、至少98％或至少99％序列同一性。所述VL结构域可以包含SEQ ID NO:17或由其组成。所述VL结构域可以包含在哺乳动物细胞(例如，CHO)中表达的由SEQ ID NO:16编码的VL结构域或由其组成。

本发明的抗GFRAL抗体可以包含QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12和QUEL-0201VL结构域SEQ ID NO:17。

本发明的抗体可以包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含一组HCDR，即HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且

所述VL结构域包含一组LCDR，即LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中

HCDR1是SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:133，

HCDR2是SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:124、SEQ ID NO:134或SEQ ID NO:142，

HCDR3是SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:125、SEQ ID NO:135或SEQ ID NO:143，并且任选地其中

LCDR1是SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:128或SEQ ID NO:138，

LCDR2是SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:129，并且

LCDR3是SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:139或SEQ ID NO:146。

本发明的抗体可以包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0301重链互补决定区(HCDR)组，即HCDR1 SEQ ID NO:23、HCDR2 SEQ ID NO:24和HCDR3 SEQ ID NO:25，并且

所述VL结构域包含QUEL-0301轻链互补决定区(LCDR)组，即LCDR1 SEQ ID NO:28、LCDR2 SEQ ID NO:29和LCDR3 SEQ ID NO:30。

在另一个实施方案中，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，所述VH结构域包含QUEL-0302 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:23、HCDR2 SEQ ID NO:124和HCDR3 SEQ ID NO:125，并且

所述VL结构域包含QUEL-0302 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:128、LCDR2 SEQ IDNO:129和LCDR3 SEQ ID NO:130。

在另一个实施方案中，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，所述VH结构域包含QUEL-0303 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:133、HCDR2 SEQ ID NO:134和HCDR3 SEQ ID NO:135，并且

所述VL结构域包含QUEL-0303 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:138、LCDR2 SEQ IDNO:29和LCDR3 SEQ ID NO:139。

在另一个实施方案中，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，所述VH结构域包含QUEL-0304 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:133、HCDR2 SEQ ID NO:142和HCDR3 SEQ ID NO:143，并且

所述VL结构域包含QUEL-0304 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:138、LCDR2 SEQ IDNO:29和LCDR3 SEQ ID NO:146。

本发明的抗体可以包含QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22或其变体，其中存在一个或多个氨基酸改变；和/或QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27，其中存在一个或多个氨基酸改变。氨基酸改变可以是氨基酸的取代、缺失或插入。此类改变可以任选地可变结构域框架中，在CDR之外。例如，在VH和/或VL结构域框架中可以有一个或两个氨基酸改变。改变可以是保守取代和/或可以表示框架残基的种系化。所述QUEL-0301 VH结构域的变体包括具有一个或多个改变的VH结构域，所述一个或多个改变存在于QUEL-0302、QUEL-0303或QUEL-0304 VH结构域中，例如，存在于这些VH结构域中的一个或多个的框架中。本发明的抗体任选地包含QUEL-0302 VH结构域SEQ ID NO:123、QUEL-0303VH结构域SEQ ID NO:132或QUEL-0304 VH结构域SEQ ID NO:141。

所述VH结构域可以由通过重链v基因区段IGHV3-7(例如，IGHV3-7*01)与d基因区段和重链j基因区段(例如，IGHJ4，例如，IGHJ4*02)的重组产生的核苷酸序列编码。因此，它可以包含通过IGHV3-7和IGHJ4的重组产生的VH结构域框架(“IGHV3-7 IGHJ4框架”)。任选地，所述VH结构域通过IGHV3-7、IGHD1-7和IGHJ4的重组产生。可替代地，所述VH结构域通过IGHV3-7、IGHD1-20和IGHJ4的重组产生。

所述抗体可以包含VH结构域，所述VH结构域与所述QUEL-0301 VH结构域SEQ IDNO:22具有至少90％氨基酸序列同一性，任选地至少95％、至少98％或至少99％序列同一性。所述VH结构域可以包含SEQ ID NO:22或由其组成。所述VH结构域可以包含在哺乳动物细胞(例如，CHO)中表达的由SEQ ID NO:21编码的VH结构域或由其组成。

所述VL结构域可以由通过轻链v基因区段IGLV1-44(例如，IGLV1-44*01)或IGLV1-47(例如，IGLV1-47*01)与轻链j基因区段(例如，λj区段，如IGLJ3(例如，IGLJ3*02))的重组产生的核苷酸序列编码。在一个实施方案中，所述轻链v基因区段是IGLV1-44。在另一个实施方案中，所述轻链v基因区段是IGLV1-47。因此，它可以包含通过IGLV1-44和IGLJ3的重组产生的VL结构域框架(“IGLV1-44 IGLJ3框架”)。可替代地，它可以包含通过IGLV1-47和IGLJ3的重组产生的VL结构域框架(“IGLV1-47 IGLJ3框架”)。

所述抗体可以包含VL结构域，所述VL结构域与所述QUEL-0301 VL结构域SEQ IDNO:27具有至少90％氨基酸序列同一性，任选地至少95％、至少98％或至少99％序列同一性。所述VL结构域可以包含SEQ ID NO:27或由其组成。所述VL结构域可以包含在哺乳动物细胞(例如，CHO)中表达的由SEQ ID NO:26编码的VL结构域或由其组成。

本发明的抗GFRAL抗体可以包含所述QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22和所述QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27。

在另一个实施方案中，它包含所述QUEL-0302 VH结构域SEQ ID NO:123和所述QUEL-0302 VL结构域SEQ ID NO:127。

在另一个实施方案中，它包含所述QUEL-0303 VH结构域SEQ ID NO:132和所述QUEL-0303 VL结构域SEQ ID NO:137。

在另一个实施方案中，它包含所述QUEL-0304 VH结构域SEQ ID NO:141和所述QUEL-0304 VL结构域SEQ ID NO:145。

根据本发明的抗GFRAL抗体可以是与QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301竞争结合人GFRAL的抗体。例如，它可以与包含QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12和包含SEQ ID NO:17的QUEL-0201 VL结构域的QUEL-0201 IgG竞争。可替代地，它可以与包含QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2和QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7的QUEL-0101 IgG竞争，和/或它可以与包含QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22和QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27的QUEL-0301 IgG竞争。结合分子与参考分子竞争结合GFRAL的能力可以在体外确定，例如，在夹心测定中通过表面等离子体共振(SPR)确定。

根据本发明的抗GFRAL抗体可以是不与GDF15竞争结合GFRAL的抗体。结合分子与GDF15竞争结合GFRAL的能力也可以通过SPR夹心测定来确定。

与GFRAL的高亲和力结合是有利的。考虑到GRFAL蛋白的有限表达，抗GFRAL抗体优选以1纳摩尔(nM)或更强(即，1nM或小于1nM)的亲和力(K_D)结合人GFRAL。可以通过SPR确定亲和力，例如，如实施例2中所述。K_D可以是0.5nM(500皮摩尔，pM)或更小、400pM或更小、300pM或更小、200pM或更小，或者100pM或更小。K_D可以是50pM或更小(例如，10pM或更小)。K_D可以是大约100pM，例如，在50pM至200pM的范围内。K_D可以是5pM或更小、4pM或更小、3pM或更小、2pM或更小或者1pM或更小。K_D可以是大约1pM(例如，0.5pM-2pM)。在一些实施方案中，K_D可以是至少0.1pM。K_D可以是至少0.5pM。K_D可以是至少1pM，例如，在1pM至1nM的范围内。

抗GFRAL抗体除了人GFRAL之外优选还结合非人GFRAL(例如，小鼠GFRAL、大鼠GFRAL和/或食蟹猴GFRAL)。最佳地，抗体将对小鼠和食蟹猴GFRAL具有交叉反应性(在10倍亲和力/效力内)。人GFRAL(图1)与小鼠GFRAL(图2)之间的氨基酸序列同一性是70％，并且人与食蟹猴之间是94％。抗体的交叉反应性的程度可以定量为结合人和非人GFRAL的K_D的倍数差异。优选地，抗体对小鼠GFRAL的亲和力在其对人GFRAL的亲和力的100倍以内、10倍以内、5倍以内或更优选2倍以内。

抗GFRAL抗体可以以10nM或更强、优选5nM或更强的亲和力(K_D)结合小鼠GFRAL。小鼠GFRAL的亲和力任选地是100pM或更小。

本文所述的抗GFRAL抗体是GDF15信号传导的抑制剂。具体地，它们通过与GFRAL胞外结构域结合并且抑制细胞表面GDF15-GFRAL-RET信号传导复合物的形成来抑制通过GFRAL的GDF15信号传导。抗GFRAL拮抗剂抗体的抑制效力可以在体外测定(如ERK磷酸化测定)中确定。这是基于细胞的测定，其确定候选拮抗剂分子抑制通过添加GDF15触发的RET信号传导的能力。在所述测定中可以将效力定量为IC50。优选地，抗体在ERK磷酸化测定中以15nM或更强(即，15nM或小于15nM)的效力(IC50)抑制GFRAL激活。优选地，IC50是10nM或更小，例如，5nM或更小。

还提供了编码如本文所述的抗体的核酸，以及包含所述核酸的细胞。体外宿主细胞可包含核酸，所述核酸任选地整合到其细胞(例如，基因组)DNA中或是瞬时转染的(例如，质粒DNA)。

抗GFRAL拮抗剂抗体适合于医疗用途。靶向GFRAL，从而经由GDF15-GFRAL-RET通路抑制激素GDF15的信号传导的拮抗性抗体代表用于诸如恶病质(例如，癌症恶病质)和妊娠剧吐的病症的潜在治疗剂。本文用拮抗性抗GFRAL抗体所例示的对GDF15:GFRAL相互作用的抑制在体内抑制GDF15对食物摄入和体重的作用。可以向患者施用抗GFRAL抗体或其编码核酸以增加食物摄入(例如，对于患有与癌症有关的恶病质或厌食的患者)。抗GFRAL抗体或其编码核酸可以用作辅助治疗药物，与其他抗癌干预(如手术、放射疗法和/或抗肿瘤药物的施用)组合。我们在本文中证明了拮抗性抗GFRAL抗体可以抑制小鼠中通过GDF15诱导的皮质酮的产生。皮质酮是小鼠中糖皮质激素类中的类固醇激素。皮质酮的人等效物是皮质醇。血浆中的皮质醇水平响应于众多种应激源而增加。皮质醇抑制免疫系统，促进蛋白质的分解代谢，在不同的脂肪组织库中差异性地改变脂解并且促进糖异生。糖皮质激素对生命至关重要。然而，如果它们的循环水平长时间过高，它们可能具有有害影响，包括促进肌肉虚耗。恶病质是以瘦体重以及脂肪量减少为特征的病症。在与恶病质相关的几种病症中，有证据表明下丘脑垂体肾上腺(HPA)轴的慢性激活[37，38，39]。鉴于糖皮质激素的已知作用，在以恶病质为特征的病症中，HPA轴的过度激活很可能在瘦体重损失中起促进作用。我们在本文中呈现的内容表明，在GDF15的受体GFRAL处阻断其信号传导将通过升高GDF15的水平来抑制HPA轴的病理性激活，由此减少糖皮质激素的慢性升高对瘦体重(包括骨骼肌)的任何不良作用。

因此，本发明的另外的方面涉及治疗病症，其中水平升高的GDF15促进下丘脑垂体肾上腺轴(HPA)的过度激活，导致患者中循环的皮质醇的病理性水平升高的不良作用，其中所述治疗包括向所述患者施用GDF15信号传导的抑制剂。GDF15信号传导的抑制剂可以降低皮质醇的循环水平(例如，如在血浆中测量的或通过评估尿液中游离皮质醇的排泄测量的)。

本发明的这些和其他方面和实施方案，包括产生抗体的方法、药物组合物和治疗患者的方法，在下文中更详细地描述。

附图说明

图1示出了包含394个氨基酸的人GFRAL SEQ ID NO:31(NCBI NP_997293.2)的氨基酸序列，其中残基1-18表示信号肽。加框的天冬酰胺残基是在N23、N50、N62、N67、N103和N116处的N-连接糖基化(GlcNAc)位点。GFRAL含有分别由残基131-210和220-316形成的两个GDNF/GAS1结构域，加框。认为与GDF15相互作用所需的区域是残基149

-228，斜体。跨膜结构域跨越残基352-371，加粗。残基33(加下划线)的多态性变体存在于人群中，并且根据千人基因组计划(1000genomes project)，残基R以约62％存在并且残基C以约38％存在。胞质尾中的残基P386也是可变的并且可以是S。

图2示出了小鼠GFRAL SEQ ID NO:32(NCBI NP_995316.2)的氨基酸序列。序列特征注释使用与图1相同的惯例。

图3示出了在ERK磷酸化测定中针对log人GDF15摩尔浓度绘制的ΔF％的图。

图4示出了在使用4nM(0.05μg/ml)GDF15的ERK磷酸化测定中拮抗剂滴定的荧光变化。

图5示出了来自抗体与人GFRAL结合的SPR分析的传感图。(A)QUEL-0101。(B)QUEL-0201。(C)QUEL-0301。

图6示出了来自抗体与小鼠GFRAL结合的SPR分析的传感图。(A)QUEL-0101。(B)QUEL-0201。(C)QUEL-0301。

图7示出了抗GFRAL抗体抑制GDF15诱导的(A)食物摄入和(B)体重的减少的能力。数据针对治疗组，从左至右为：同种型对照；低剂量QUEL-0301；低剂量QUEL-0201；高剂量QUEL-0301；高剂量QUEL-0201。

图8呈现来自与小鼠中阻断GFRAL的抗体QUEL-0201的验证有关的小鼠研究15(MS15)的数据。在施用对照媒介物(左柱)或人重组GDF15(右柱)后24小时内(AA)食物摄入和(BB)体重的变化百分比。数据表示为平均值±SEM，n＝6-8/组。通过方差分析，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。

图9示出了来自小鼠研究3(MS3)的数据：在施用(右柱)或未施用(左柱)0.1mg/kg人重组GDF15的QUEL-0201治疗的小鼠和IgG对照治疗的小鼠中的皮质酮血清水平。数据表示为平均值±SEM，n＝6-8/组。通过方差分析，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。

图10示出了来自MS3的数据：用人重组GDF15治疗的QUEL-0201组和IgG组中的人GDF15血清浓度。数据表示为平均值±SEM，n＝6-8/组。通过非配对Student's t检验，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。

图11A-图11D示出了来自实施例8在以下肌肉中的数据：(A)胫骨前肌；(B)腓肠肌；(C)趾长伸肌；(D)比目鱼肌。在给予0.1mg/kg人重组GDF15施用(右柱，黑色正方形)或假注射(左柱，白色圆形)的QUEL-0201治疗的小鼠或IgG对照治疗的小鼠中Mafbx、Murf1和Foxo1的mRNA表达水平的相对变化倍数(针对β-2微球蛋白归一化)。数据表示为平均值±SEM，n＝4-5/组。通过双因素方差分析与多重比较，*p<0.05、**p<0.01、***p<0.001、****p<0.0001。

具体实施方式

GDF15-GFRAL-RET信号传导在HPA轴激活中的作用

下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的激活响应于众多种应激刺激而发生，导致糖皮质激素的循环水平增加。糖皮质激素(在人类中，主要是皮质醇)对炎症、代谢和血管具有作用，其帮助生物体抵抗威胁生命的挑战[40]。响应于感染，诸如TNFα/β、IL-1和IL-6的促炎性细胞因子激活所述轴[41]。

对化学毒素的细胞反应的研究经常将GDF15鉴定为最高上调的基因之一[42，43]。GDF15在体内普遍产生，且循环浓度在暴露于各种各样的应激源后迅速上升[42，44]。已知顺铂提高皮质酮(皮质醇的啮齿动物等效物)[45，46]和GDF15[35，35，47]两者的循环水平。内质网(ER)应激在机制上不同于基因毒性，并且其增加GDF15表达和分泌的作用已被充分确立[48，49]。由GDF15-GFRAL-RET信号传导引起的作用主要集中于对食物摄入、厌食、恶病质、涌吐和条件性厌恶的调节，如本文背景技术部分中所讨论。该作用范围将与GDF15一致，GDF15在对生物体的化学威胁的存在下在信号传导中发挥作用，这可以通过降低暴露于摄取的毒素的比率或排出摄取的毒素以及促进将来避免摄取毒素来减轻。

如本文所报道的，我们发现使用抗GFRAL抗体的GFRAL拮抗作用既(i)抑制体内GDF15对食物摄入和体重的作用，又在相同剂量下(ii)抑制循环糖皮质激素水平响应于GDF15的增加。因此，我们显示抑制GFRAL抑制神经内分泌反应，包括GDF15对提高糖皮质激素水平的作用。抗GFRAL抵制GDF15诱导的循环糖皮质激素的增加。

GDF15信号传导的抑制剂

GDF15信号传导的抑制剂包含抑制GDF15-GFRAL-RET信号传导复合物的激活的分子。抑制剂可以抑制该复合物的形成(例如，通过抑制GDF15与GFRAL结合，或通过抑制GDF15-GFRAL与RET结合)和/或其功能活性(例如，通过使受体偏向活性更低的构象)。任选地在体外测定(如本文所述的ERK磷酸化测定)中测量GDF15信号传导的抑制。GDF15信号传导的其他抑制剂可以降低GDF15、GFRAL或RET的水平，例如，通过下调其表达或增加其降解来实现。抑制剂可以通过减少GFRAL或RET在细胞表面上的存在来下调所述GFRAL或RET。

抑制剂任选地与GDF15、GFRAL或RET结合或与其编码核酸结合。抑制剂可以任选地是小分子、核酸(例如，抑制性RNA)或结合多肽。结合多肽是具有特异性结合并且抑制其靶抗原(例如，GDF15、GFRAL或RET)的能力的多肽分子。

许多类别的结合多肽是本领域已知的，包括经典的IgG抗体和其他基于免疫球蛋白结构域的结合蛋白。非免疫球蛋白结合分子也是已知的，并且结合环可以被工程化到其他多肽支架如纤连蛋白中。

优选地，本发明的结合多肽包含免疫球蛋白结构域，其中针对抗原的结合位点由免疫球蛋白结构域的环区形成。结合多肽的优选实施方案是抗体。抗GFRAL抗体的例子在本文中详细描述。

其他GDF15信号传导抑制剂(包括例如抗GFRAL抗体和抗GDF15抗体)描述于以下文献中：WO 2017/189724、WO 2017/172260、WO 2017/152105、WO 2017/147742、WO 2017/121865、WO 2017/055613、WO 2016/049470、WO 2015/144855、WO 2014/100689、WO 2014/049087、WO 2013/023557、WO 2013/012648、WO 2011/070177、WO 2005/099746和WO 2005/072112。

治疗用途

本发明的方面包括：

用GDF15信号传导的抑制剂治疗患者的方法，

用于在治疗患者中使用的GDF15信号传导的抑制剂，以及

GDF15信号传导的抑制剂用于制造用于治疗患者的药剂的用途。

如本文所述的GDF15信号传导的抑制剂(例如，抗GFRAL抗体)可以用于治疗与GDF15-GFRAL通路的过度激活相关的任何医学病症。此类病症的例子在本文中描述，并且包括

(i)由于包括癌症、心力衰竭、肾衰竭、慢性、慢性肺部疾病和罕见的遗传性疾病(如线粒体肌病和地中海贫血)在内的众多种病症所致的恶病质(食欲不振和体重减轻，包括脂肪量和瘦体重(包括骨骼肌)减少)

(ii)在以上第(i)段中所列的所有情况下，高GDF15水平导致的神经内分泌功能障碍

(iii)由快速增加GDF15的药剂(如癌症化疗)导致的恶心和呕吐

(iv)妊娠剧吐

GFRAL处的GDF15信号传导的抑制剂可用于治疗其中GDF15水平急性或慢性升高的任何病症。

已知GDF15的急性升高(如响应于诸如细胞毒性化学疗法、急性暴露于电离辐射或在妊娠的孕早期的刺激而发生的)与恶心、呕吐和身体活动减少以及下丘脑垂体肾上腺轴的激活有关。预计在GFRAL处阻断GDF15信号传导会减少所有这些现象。

GDF15的慢性升高发生在多种病症中，所述病症包括癌症、慢性心力衰竭、慢性呼吸系统疾病、慢性肾衰竭和一系列罕见疾病(如地中海贫血和地中海贫血线粒体肌病)。在所有这些病症中，升高的GDF15与长期降低的食欲和食物摄入、脂肪量损失和肌肉量损失相关，所有这些一起被称为恶病质。在至少一些形式的恶病质中，存在HPA轴的慢性过度激活的证据。鉴于皮质醇对肌肉蛋白质分解的已知作用，预防HPA轴的过度激活将对肌肉量的损失具有有益作用至少似乎是合理的。

治疗可以包括预防性治疗，其中在要治疗的病症出现之前施用治疗性组合物，以预防病症或至少改善病症的影响。还可以在病症出现后给予治疗，例如，可以在病症诊断后指定治疗。以上列出的病症可能是其他医学干预的副作用，所述医学干预如用细胞毒性剂(例如，用于治疗癌症的抗肿瘤剂)或放射疗法治疗。

治疗可以针对降低患者中皮质醇的升高。患者可具有升高的皮质醇循环水平，其可通过在一天的不同时间在血液或尿液中取样来检测(例如，通过测量24小时尿液游离皮质醇[50])。

患者可具有升高的GDF15生理水平，可在血液中检测到。在一项研究中报道GDF15的人血清水平在150至1150pg/mL之间[51]。已经描述了从血液样品中测量GDF15的方法，例如，ELISA或夹心免疫测定，如用于体外定量确定人血清和血浆中的GDF 15的GDF-15免疫测定。

要治疗的患者可以是癌症患者。从本领域公开的文献中可以明显看出，许多类型的癌症与GDF15的增加有关，所述GDF15的增加将导致癌症恶病质。癌症可以是实体瘤(任选地转移性的)或血癌。癌症可以是膀胱癌、脑癌、乳腺癌、结直肠癌、头颈癌、肾癌、肺癌(例如，非小细胞肺癌)、淋巴瘤(例如，非霍奇金淋巴瘤)、黑色素瘤、间皮瘤、神经母细胞瘤、食管癌、口腔癌或口咽癌、胃肠癌(例如，胃癌)、胰腺癌、前列腺癌、睾丸癌、甲状腺癌或子宫癌。

可替代地，治疗可以包括治疗以下病症的患者的恶病质：肺和/或心脏病症(例如，充血性心力衰竭、慢性阻塞性肺疾病)、慢性肾病、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、囊性纤维化、多发性硬化、运动神经元病、帕金森病、痴呆、结核病、多系统萎缩症、汞中毒、克罗恩病、类风湿性关节炎或乳糜泻。

治疗可以导致病症的减轻，并且可以观察到患者食物摄入增加和/或体重稳定或增加。例如，可以治疗患者的癌症相关的恶病质，其中治疗增加体重或减少体重减轻。

根据本发明治疗的患者可以是已经暴露或将要暴露于细胞毒性化学剂的患者。根据本发明治疗的患者可以是已经暴露或将要暴露于电离辐射的患者。

细胞毒性剂可以是抗肿瘤药，其例子在下文和本文其他地方呈现。治疗可以包括组合疗法，其中将本发明的组合物施用于还正接受抗肿瘤药(如癌症化疗)治疗的患者。本发明的组合物可以在抗肿瘤药之前或之后，或同时施用。它通常将以单独的配制品施用，但是包含两种药剂的单一药物是可能的，其中可以将其配制在一起。根据本发明的治疗可以增强化疗的效果。治疗可以延长患者的存活期。它也有望显著改善患者的生活质量。

要治疗的患者可以是已接受或将接受用以下癌症化学治疗剂中的一种或多种治疗的患者：

烷基化剂(例如，双官能烷基化剂，如环磷酰胺、氮芥、苯丁酸氮芥、美法仑，或单官能烷基化剂，如达卡巴嗪、亚硝基脲、替莫唑胺)；

蒽环类(例如，道诺霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌、戊柔比星(valrubicin))；

细胞骨架破坏剂(例如，紫杉烷，如紫杉醇、多西他赛、abraxane、泰索帝(taxotere)埃博霉素(例如，埃博霉素A、B、C、D、E或F)

组蛋白脱乙酰酶抑制剂(如伏立诺他、罗米地辛(romidepsin))

拓扑异构酶I的抑制剂(例如，伊立替康、拓扑替康、他氟泊苷(tafluposide))

拓扑异构酶II的抑制剂(例如，依托泊苷、替尼泊苷、他氟泊苷)

激酶抑制剂(例如，硼替佐米、厄洛替尼、吉非替尼、伊马替尼、维拉非尼、维莫德吉(vismodegib))

核苷酸类似物和前体类似物(例如，阿扎胞苷、硫唑嘌呤、卡培他滨、阿糖胞苷、去氧氟尿苷、氟尿嘧啶、吉西他滨、羟基脲、巯基嘌呤、甲氨蝶呤、硫鸟嘌呤(tioguanine))

肽抗生素(例如，博来霉素、放线菌素)

基于铂的药剂(例如，卡铂、顺铂、奥沙利铂)

类视黄醇(例如，阿利维A酸、贝沙罗汀、维甲酸)

长春花生物碱和衍生物(例如，长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨)。

抗体

根据本发明的抗体是免疫球蛋白或包含免疫球蛋白结构域的分子，无论是天然的还是部分或完全合成产生的。抗体可以是IgG、IgM、IgA、IgD或IgE分子或其抗原特异性抗体片段(包括但不限于Fab、F(ab')2、Fv、二硫键连接的Fv、scFv、单结构域抗体、闭合构象多特异性抗体、二硫键连接的scfv、双抗体)，无论是源自天然产生抗体的任何物种，还是通过重组DNA技术产生；无论分离自血清、B细胞、杂交瘤、转染瘤、酵母还是细菌。可以使用常规技术将抗体人源化。术语抗体涵盖包含抗体抗原结合位点的任何多肽或蛋白质。抗原结合位点(互补位)是抗体中与其靶抗原(例如，GFRAL)的表位结合并互补的部分。

术语“表位”是指由抗体结合的抗原区域。表位可被定义为结构性的或功能性的。功能性表位通常是结构性表位的子集，并且具有直接促进相互作用的亲和力的那些残基。表位也可以是构象的，也就是由非线性氨基酸构成。在某些实施方案中，表位可以包括决定簇，即分子的化学活性表面基团(如氨基酸、糖侧链、磷酰基或磺酰基)，并且在某些实施方案中，可具有特定的三维结构特征，和/或特定的电荷特征。

抗原结合位点是包含抗体的一个或多个CDR并且能够结合抗原的多肽或结构域。例如，多肽包含CDR3(例如HCDR3)。例如，多肽包含抗体的可变结构域的CDR1和2(例如，HCDR1和2)或CDR1-3(例如，HCDR1-3)。

抗体抗原结合位点可以由一个或多个抗体可变结构域来提供。在一个例子中，抗体结合位点由单个可变结构域提供，例如由重链可变结构域(VH结构域)或轻链可变结构域(VL结构域)提供。在另一个例子中，结合位点包含VH/VL对或两个或更多个这样的对。因此，抗体抗原结合位点可包含VH和VL。

抗体可以是完整的免疫球蛋白，包括恒定区，或者可以是抗体片段。抗体片段是完整抗体的一部分，例如包含完整抗体的抗原结合区和/或可变区。抗体片段的例子包括：

(i)Fab片段，即由VL、VH、CL和CH1结构域组成的单价片段；(ii)F(ab')2片段，即包括在铰链区通过二硫桥连接的两个Fab片段的二价片段；

(iii)由VH和CH1结构域组成的Fd片段；

(iv)由抗体的单臂的VL和VH结构域组成的Fv片段，

(v)dAb片段，其由VH或VL结构域组成；以及

(vi)分离的互补决定区(CDR)，其保留特异性抗原结合功能。

抗体的其他例子为包含重链二聚体(5’-VH-(任选的铰链)-CH2-CH3-3’)且不含轻链的H2抗体。

单链抗体(例如scFv)是常用的片段。多特异性抗体可由抗体片段形成。本发明的抗体可以适当地采用任何这样的形式。

任选地，结合多肽或其抗体免疫球蛋白结构域可以与另外的多肽序列和/或标记、标签、毒素或其他分子融合或缀合。结合多肽可以与一个或多个不同的抗原结合区融合或缀合，从而提供能够结合除GFRAL外的第二抗原的分子。例如，本发明的抗体可以是多特异性抗体，例如双特异性抗体，其包含(i)针对GFRAL的抗体抗原结合位点和(ii)识别另一抗原的另一抗原结合位点(任选地抗体抗原结合位点，如本文所述)。

抗体通常包含抗体VH和/或VL结构域。抗体的分离的VH和VL结构域也是本发明的一部分。抗体可变结构域是如下的抗体轻链和重链的部分，所述部分包括互补决定区(CDR；即CDR1、CDR2、和CDR3)和框架区(FR)的氨基酸序列。因此，在每个VH和VL结构域内是CDR和FR。VH结构域包含一组HCDR，并且VL结构域包含一组LCDR。VH是指重链的可变结构域。VL是指轻链的可变结构域。每个VH和VL通常由三个CDR和四个FR构成，按照以下顺序从氨基末端到羧基末端排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。根据本发明中使用的方法，根据IMGT命名法定义分配给CDR和FR的氨基酸位置。

抗体可以包含抗体VH结构域，所述抗体VH结构域包含VH CDR1、CDR2和CDR3以及框架。其可替代地或还包含抗体VL结构域，所述抗体VL结构域包含VL CDR1、CDR2和CDR3以及框架。根据本发明的抗体VH和VL结构域和CDR的例子列于表A中。本文公开的所有VH和VL序列、CDR序列、CDR组和HCDR组和LCDR组代表本发明的方面和实施方案。如本文所述，“CDR组”包含CDR1、CDR2和CDR3。因此，HCDR组是指HCDR1、HCDR2和HCDR3，而LCDR组是指LCDR1、LCDR2和LCDR3。除非另有说明，否则“CDR组”包括HCDR和LCDR。

如实施例中更详细描述的，我们分离并且表征了特别关注的抗体，命名为QUEL-0101、QUEL-0201和QUEL-0301。然后，我们分别鉴定了QUEL-0101和QUEL-0301的结构变体，即QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104、QUEL-0105、QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304。在本发明的各个方面，除非上下文另有规定，否则抗GFRAL抗体可以任选地选自QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104、QUEL-0105、QUEL-0201、QUEL-0301、QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304。任选地，它选自QUEL-0101、QUEL-0201和QUEL-0301。

本发明涵盖具有如所附序列表所示的这些抗体的VH和/或VL结构域序列的抗GFRAL抗体，以及包含那些抗体的HCDR和/或LCDR、并且任选地具有全重链和/或全轻链氨基酸序列的抗体。

当抗体VH结构域或VL结构域在框架区中包含一个或多个不同于通过重组产生其的种系基因区段的残基时，非种系残基可保留或可突变为不同的残基，例如其可恢复为种系残基。对应的种系基因区段可被鉴定为与可变结构域的序列最紧密比对的基因区段，并且与QUEL-0101、QUEL-0201和QUEL-0301 VH和VL结构域中的每一个以及与它们对应的相关抗体对应的种系基因区段示于本文表G中。

根据本发明的抗体可以包含一个或多个如本文所述的CDR，例如CDR3，以及任选地CDR1和CDR2，以形成一组CDR。CDR或CDR组可以是以下中的任一个的CDR或CDR组：QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104、QUEL-0105、QUEL-0201、QUEL-0301、QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304。

本发明提供了包含以下的抗体：抗体QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104、QUEL-0105、QUEL-0201、QUEL-0301、QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304中的任一个的HCDR1、HCDR2和/或HCDR3和/或这些抗体中的任一个的LCDR1、LCDR2和/或LCDR3，例如，一组CDR。抗体可包含这些抗体之一的一组VH CDR。任选地，它还可以包含这些抗体之一的一组VL CDR，并且VL CDR可以来自与VH CDR相同或不同的抗体。

本发明还提供了包含公开的一组HCDR的VH结构域和/或包含公开的一组LCDR的VL结构域。

通常，VH结构域与VL结构域配对以提供抗体抗原结合位点，但如下文进一步讨论的，单独的VH或VL结构域可用于结合抗原。QUEL-0201 VH结构域可以与QUEL-0201 VL结构域配对，从而形成包含QUEL-0201 VH和VL结构域二者的抗体抗原结合位点。提供了本文公开的其他VH和VL结构域的类似实施方案。在其他实施方案中，所述QUEL-0201 VH与不同VL结构域(例如，λVL结构域，例如，QUEL-0301 VL结构域)配对。相反地，所述QUEL-0301 VH可以与不同VL结构域(例如，λVL结构域，例如，QUEL-0201 VL结构域)配对。轻链混杂性在本领域中是已确立的。例如：

QUEL-0101 VH结构域可以与QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104和QUEL-0105中的任一个的VL结构域配对。

QUEL-0102 VH结构域可以与QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104和QUEL-0105中的任一个的VL结构域配对。

QUEL-0103 VH结构域可以与QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104和QUEL-0105中的任一个的VL结构域配对。

QUEL-0104 VH结构域可以与QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104和QUEL-0105中的任一个的VL结构域配对。

QUEL-0105 VH结构域可以与QUEL-0101、QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104和QUEL-0105中的任一个的VL结构域配对。

QUEL-0301 VH结构域可以与QUEL-0301、QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304中的任一个的VL结构域配对。

QUEL-0302 VH结构域可以与QUEL-0301、QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304中的任一个的VL结构域配对。

QUEL-0303 VH结构域可以与QUEL-0301、QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304中的任一个的VL结构域配对。

QUEL-0304 VH结构域可以与QUEL-0301、QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304中的任一个的VL结构域配对。

抗体可以在抗体框架内包含一个或多个CDR，例如一组CDR。框架区可以具有人种系基因区段序列。因此，抗体可以是具有VH结构域的人抗体，所述VH结构域在人种系框架中包含一组HCDR。通常，抗体还具有VL结构域，所述VL结构域例如在人种系框架中包含一组LCDR。抗体“基因区段”，例如VH基因区段、D基因区段或JH基因区段是指具有衍生抗体的该部分的核酸序列的寡核苷酸，例如VH基因区段是包含与从FR1到CDR3部分的多肽VH结构域对应的核酸序列的寡核苷酸。人V、D和J基因区段重组产生VH结构域，而人V和J区段重组产生VL结构域。D结构域或区域是指抗体链的多样性结构域或区域。J结构域或区域是指抗体链的连接结构域或区域。体细胞超突变可导致抗体VH或VL结构域具有与相应基因区段不精确匹配或比对的框架区，但序列比对可用于鉴定最接近的基因区段，并因此鉴定衍生特定VH或VL结构域的基因区段的特定组合。当将抗体序列与基因区段比对时，可将抗体氨基酸序列与由基因区段编码的氨基酸序列比对，或可直接将抗体核苷酸序列与基因区段的核苷酸序列比对。

本发明的抗体可以是人抗体或包含人可变区和非人(例如小鼠)恒定区的嵌合抗体。本发明的抗体例如具有人可变区，并且任选地还具有人恒定区。

因此，抗体任选地包括恒定区或其部分，例如人抗体恒定区或其部分。例如，VL结构域可以在其C末端附接至抗体轻链κ或λ恒定结构域。类似地，抗体VH结构域可以在其C末端附接至衍生自任何抗体同种型(例如IgG、IgA、IgE和IgM)和同种型亚类中任一个(例如IgG1或IgG4)的免疫球蛋白重链恒定区的全部或部分(例如CH1结构域或Fc区)。优选例子是IgG4PE，例如，SEQ ID NO:60。人重链恒定区序列的另外例子示出于表C中。

在优选的实施方案中，所述抗GFRAL抗体是QUEL-0201 IgG，所述QUEL-0201 IgG包含

(i)包含QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12和人IgG4重链恒定区(例如，IgG4PESEQ ID NO:60)的重链，和

(ii)包含QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17和人λ恒定区(例如，具有表C中示出的序列)的轻链。

在另一个优选的实施方案中，所述抗GFRAL抗体是QUEL-0301 IgG，所述QUEL-0301IgG包含

(i)包含QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22和人IgG4重链恒定区(例如，IgG4PESEQ ID NO:60)的重链，和

(ii)包含QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:17和人λ恒定区(例如，具有表C中示出的序列)的轻链。

在另一个优选的实施方案中，所述抗GFRAL抗体是QUEL-0101 IgG，所述QUEL-0101IgG包含

(i)包含QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2和人IgG4重链恒定区(例如，IgG4PESEQ ID NO:60)的重链，和

(ii)包含QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7和人κ恒定区(例如，具有表C中示出的序列)的轻链。

可替代地，本发明抗体的恒定区可以是非人恒定区。例如，当在转基因动物(其例子在本文别处描述)中产生抗体时，可以产生包含人可变区和非人(宿主动物)恒定区的嵌合抗体。一些转基因动物产生完全人抗体。其他已经被工程化以产生包含嵌合重链和完全人轻链的抗体。当抗体包含一个或多个非人恒定区时，这些可以被人恒定区替代以提供更适合作为治疗组合物施用于人的抗体，因为它们的免疫原性由此降低。

用木瓜蛋白酶消化抗体产生两个相同的抗原结合片段(也称为“Fab”片段)和“Fc”片段(不具有抗原结合活性但具有结晶能力)。“Fab”当在本文中使用时是指抗体片段，其包括重链和轻链中每一个的一个恒定结构域和一个可变结构域。本文的术语“Fc区”用于定义免疫球蛋白重链的C末端区，包括天然序列Fc区和变体Fc区。“Fc片段”是指通过二硫键保持在一起的两条H链的羧基末端部分。抗体的效应子功能由Fc区中的序列决定，该区域也由在某些类型的细胞上发现的Fc受体(FcR)识别。用胃蛋白酶消化抗体产生F(ab')2片段，其中抗体分子的两个臂保持连接并包含两个抗原结合位点。F(ab')2片段具有交联抗原的能力。

“Fv”当在本文中使用时是指抗体的保留抗原识别和抗原结合位点两者的最小片段。此区域由紧密非共价或共价缔合的一个重链可变结构域和一个轻链可变结构域的二聚体组成。在此构型中，每个可变结构域的三个CDR相互作用以将抗原结合位点限定在VH-VL二聚体的表面上。这六个CDR共同为抗体赋予抗原结合特异性。然而，即使单个可变结构域(或仅包含三个对抗原具有特异性的CDR的半个Fv)也具有识别和结合抗原的能力，但其亲和力低于整个结合位点。

本文公开的抗体可以被修饰为增加或减少血清半衰期。在一个实施方案中，引入以下突变中的一个或多个：T252L、T254S或T256F，以增加抗体的生物半衰期。生物半衰期也可以通过改变重链恒定区CH₁结构域或CL区以包含取自IgG的Fc区的CH₂结构域的两个环的补救受体结合表位来增加，如美国专利号5,869,046和6,121,022中所述，其中描述的修饰通过引用并入本文。在另一个实施方案中，将本发明抗体或抗原结合片段的Fc铰链区突变以降低抗体或片段的生物半衰期。将一个或多个氨基酸突变引入Fc-铰链片段的CH₂-CH₃结构域界面区中，使得相对于天然Fc-铰链结构域SpA结合，抗体或片段具有受损的葡萄球菌蛋白A(SpA)结合。增加血清半衰期的其他方法是本领域技术人员已知的。因此，在一个实施方案中，抗体或片段被PEG化。在另一个实施方案中，抗体或片段融合至白蛋白结合结构域，例如白蛋白结合单结构域抗体(dAb)。在另一个实施方案中，抗体或片段被PAS化(即由PAS构成的多肽序列的遗传融合(XL-Protein GmbH)，其形成具有大流体动力学体积的不带电荷的无规卷曲结构)。在另一个实施方案中，抗体或片段被/rPEG化(即非精确重复肽序列(Amunix，Versartis)与治疗性肽的遗传融合)。在另一个实施方案中，抗体或片段被ELP化(即与ELP重复序列(PhaseBio)的遗传融合)。在Strohl,BioDrugs(2015)29:215-239中更详细地描述了这些各种半衰期延长融合物，所述融合物例如在表2和6中，通过引用并入本文。

抗体恒定区

如上所讨论，抗体可以以各种同种型和具有不同的恒定区提供。抗体的Fc区被Fc受体识别并确定抗体介导细胞效应子功能的能力，包括抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)活性、补体依赖性细胞毒性(CDC)活性和抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)活性。这些细胞效应子功能涉及将携带Fc受体的细胞募集到靶细胞位点，导致杀伤抗体结合的细胞。

在本发明的上下文中，希望避免细胞效应子功能，如ADCC、ADCP和/或CDC。因此，根据本发明的抗体可能缺乏Fc效应子功能，例如它们可含有不介导ADCC、ADCP和/或CDC的Fc区，或者它们可能缺乏Fc区或完全缺乏抗体恒定区。抗体可能具有效应子无效的恒定区。

抗体可具有结合一种或多种类型的Fc受体但不诱导细胞效应子功能(即不介导ADCC、CDC或ADCP活性)的重链恒定区。这样的恒定区可能不能结合负责触发ADCC、CDC或ADCP活性的一种或多种特定Fc受体。

抗体可具有不结合Fcγ受体的重链恒定区，例如恒定区可包含Leu235Glu突变(即，其中野生型亮氨酸残基突变为谷氨酸残基)，其可称为“E”突变，例如IgG4-E。重链恒定区的另一个任选突变是Ser228Pro(“P”突变)，其通过减少Fab臂交换来增加稳定性。重链恒定区可以是包含Leu235Glu突变和Ser228Pro突变二者的IgG4。该“IgG4-PE”重链恒定区是效应子无效的。替代的效应子无效的人恒定区是失能的IgG1。

IgG4PE是本发明优选的抗体同种型。结合多肽可以是包含表C所示IgG4PE恒定区序列的IgG4PE抗体。

抗体恒定区可以被工程化为在体内具有延长的半衰期。例子包括“YTE”突变和其他半衰期延长突变(Dall’Acqua,Kiener&Wu,JBC 281(33):23514-23524 2006和WO 02/060919，通过引用并入本文)。三重突变YTE是IgG CH2结构域中3个氨基酸的取代，这些突变提供根据Kabat的EU索引编号的残基252处的酪氨酸、残基254处的苏氨酸和残基256处的谷氨酸。如参考出版物中所述，与具有人CH2野生型结构域的相应抗体的半衰期相比，YTE修饰增加了抗体的半衰期。为了提供增加的体内效力持续时间，本发明的抗体可以包括抗体恒定区(例如，IgG恒定区，例如，IgG CH2结构域)，其具有与相应的野生型人恒定区(例如，IgG，例如，IgG CH2结构域)相比增加抗体半衰期的一个或多个突变。半衰期可通过标准方法测定，如WO 02/060919中所述。

其他示例恒定区示出于表C中。

与GFRAL结合

人GFRAL和小鼠GFRAL的一级结构分别示出于图1和图2中。

GDF15信号传导的抑制剂(例如，抗GFRAL抗体)可以识别GFRAL的胞外结构域内的表位。它可以结合在如图1示出的残基19-351的序列内。例如，所述表位可以包含GFRAL中含有第一GDNF/GAS1结构域的上游残基的N末端区。

与抗体结合的GFRAL的残基(即，精确的结构表位)可以通过抗体:抗原复合物的结构解析(例如，通过冷冻电子显微镜检查或通过x射线晶体学)确定。结合残基可以包括经由其侧链或多肽主链与抗体形成盐桥、疏水相互作用或氢键的那些。表位可以进一步包括糖基化抗原上的碳水化合物部分。

抗GFRAL抗体可以识别GFRAL中与QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301识别的表位相同或重叠的表位。抗GFRAL抗体可以例如结合包含QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301结合的残基中的一个或多个(任选地所有)的表位。这些表位的识别与拮抗剂活性(即GDF15-GFRAL-RET信号传导的抑制)相关，因此是有靶向价值的表位。

还可以确定抗体或其他抑制剂之间的竞争。例如，抗GFRAL结合剂可以与包含QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301的VH和VL结构域的抗体(例如，IgG或scFv)或包含QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301的全重链和全轻链的IgG竞争。它可以例如与QUEL-0201 IgG竞争。

结合多肽或其他药剂之间的竞争表明它们在GFRAL的相同区域中具有表位，例如两者可以以重叠的结合足迹结合相同的结构域。这可以通过其他技术来证实，例如，通过与GFRAL结合的抗GFRAL分子的结构解析，其可以例如使用如所提及的冷冻电子显微镜检查或x射线晶体学来实现。

任选地通过夹心测定来确定竞争，以评估两种结合物同时结合溶液中的GFRAL胞外结构域的能力。在该测定中，将第一种结合物(例如，抗GFRAL抗体QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301 IgG)与固体支持物偶联，并且在溶液中添加将GFRAL抗原，允许形成抗体-抗原(或其他结合物-抗原)复合物。然后在溶液中添加测试抗体或其他抗GFRAL结合分子。如果检测到测试分子的结合，这表明它不与第一种结合物(例如，参考(QUEL)抗体)竞争。如果未检测到测试分子的结合，这表明它不与第一种结合物(例如，参考抗体)竞争结合GFRAL。可以使用SPR进行测定，其中第一种结合物与生物传感器芯片的表面结合。对于IgG，通常经由Fc区，例如使用包被有抗Fc抗体的芯片偶联。对于SPR夹心测定的另外的细节参见实施例4。

任选地，抗GFRAL结合剂不抑制GDF15与GFRAL的结合。这可以使用上文所述原理在夹心测定中确定，将结合物与固体支持物偶联并且在溶液中添加GFRAL抗原，然后确定GDF15的结合或不存在结合。

结合亲和力

可根据结合相互作用的平衡解离常数K_D定量结合物(例如，抗GFRAL抗体)对GFRAL的亲和力，所述K_D是缔合或结合速率(Ka)与解离或分解速率(kd)的比率Ka/Kd。可以使用表面等离子体共振SPR测量抗原结合的K_D、Ka和Kd。示例SPR程序和条件在实施例2和实施例3中阐述。亲和力(K_D)是抗体与其抗原的相互作用强弱的量度。缔合速率(ka)显示了识别抗原的快慢。解离速率(ka)是结合稳定性的量度。总之，动力学数据提供了影响生物活性、药代动力学和给药方案的有价值的信息。

SPR可以包括将抗GFRAL结合物包被或固定到生物传感器芯片上(直接或间接)，将所述结合物暴露于一定浓度范围的缓冲溶液中的抗原，检测结合，并且计算结合相互作用的平衡解离常数K_D。对于IgG抗体，与芯片的偶联可以方便地经由抗Fc包被的芯片(在其表面上(例如化学固定在芯片表面)具有抗人Fc抗体的芯片)上的Fc捕获来完成。可以使用标准算法将结合数据拟合到1:1模型，所述标准算法可能是所用仪器固有的。已知多种SPR仪器，如BiacoreTM、ProteOn XPR36TM和/>(Sapidyne Instruments,Inc)。简言之，SPR可以在25℃下通过将结合物在1μg/ml浓度下在芯片上捕获60秒来进行(例如，可以捕获大约80与140RU之间)，并且以30μLL/min注射可溶性GFRAL(分析物)120秒(缔合时间)并且监测解离1200秒。可以以稀释系列(例如，100、25、6.25、1.56、0.39、0.098、0.024和0nM浓度)注射分析物。合适的运行缓冲液是含1mM CaCl₂的HBS-P+缓冲液pH 7.4。生成结合多肽的传感图，并且可以将数据拟合到1:1相互作用模型。计算了K_D和任选地其他动力学数据。分离纯化的GFRAL胞外结构域可以方便地用于测定，并且是SPR的合适分析物(参见实施例2)。

结合GFRAL的物种交叉反应性

为了能够在非人动物中治疗性使用或测试抗GFRAL抗体，所述抗体必须可与目的物种中的相应抗原交叉反应。

除人GFRAL以外，本发明的抗体优选结合小鼠GFRAL、大鼠GFRAL和/或食蟹猴GFRAL。

抗GFRAL抗体或其他抗GFRAL结合分子的物种交叉反应性的程度表现为其对一种物种的抗原的亲和力与对另一种物种的抗原的亲和力相比的倍数差异，例如，对人抗原的亲和力与对小鼠抗原的亲和力相比的倍数差异。亲和力可以定量为K_D，是指抗原与抗原结合分子结合的平衡解离常数。K_D可以如本文别处描述通过SPR加以测定。

物种交叉反应性结合分子对结合人和非人抗原的亲和力的倍数差异可以是100倍或更小、50倍或更小、30倍或更小、25倍或更小、20倍或更小、15倍或更小、10倍或更小、5倍或更小或2倍或更小。换言之，结合人抗原的胞外结构域的K_D可以在结合非人抗原的胞外结构域的K_D的100倍、50倍、30倍、25倍、20倍、15倍、10倍、5倍或2倍内。

优选地，人和非人抗原的结合亲和力在10倍或更小的范围内，更优选地在5倍或2倍内。例如，如通过SPR确定的结合小鼠GFRAL的K_D可以比结合人GFRAL的K_D大多达10倍(优选多达5倍或多达2倍)或低多达10倍(优选低多达5倍或多达2倍)。

如果结合两种物种的抗原的K_D满足阈值，例如，如果结合人抗原的K_D和结合非人(例如，小鼠)抗原的K_D都是10mM或更小，优选5mM或更小，更优选1mM或更小，则也可以认为结合分子具有物种交叉反应性。K_D可以是100nM或更小、50nM或更小、25nM或更小、10nM或更小、5nM或更小、2nM或更小或者1nM或更小。

在使用来自多个物种的GFRAL(例如，人和小鼠、大鼠和食蟹猴GFRAL中的一个或多个或所有)的基于细胞的测定中，结合分子可以具有可测量的抑制GDF15信号传导的能力。在本文所述的使用人和非人(例如，小鼠、大鼠和食蟹猴)GFRAL的测定中，例如，在ERK磷酸化测定中，所述结合分子可以展现出对GDF15诱导的GFRAL信号传导活性的剂量依赖性抑制。

虽然结合不同物种的抗原的物种交叉反应性可能是有利的，但结合物对GFRAL的选择性仍然是避免不希望的副作用所需的。因此，在体内，GFRAL优选是由结合多肽的抗原结合位点结合的唯一抗原。尽管如此，结合多肽可以任选地被工程化以包含另外的结合位点，并且包含抗体恒定区的抗体可以例如任选地结合一种或多种Fc受体。

GDF15-GFRAL-RET信号传导复合物的抑制

可以体外测试GDF15信号传导的抑制剂(例如，抗GFRAL抗体)的功能活性。合适的测定是ERK磷酸化测定。在该测定中，将在其细胞表面共表达GFRAL和RET的细胞与GDF15一起孵育，导致GDF15-GFRAL-RET信号传导复合物的形成和随后的下游信号传导，包括ERK的磷酸化。可以在裂解的细胞中定量ERK磷酸化，例如，通过使用HTRF和检测荧光的变化。在不存在抑制剂的情况下，以稀释系列添加GDF15产生S形曲线(图3)。在该测定中添加抑制剂的作用可以通过其对通过HTRF检测的荧光变化的影响来定量。技术人员将包括适当的对照，并且将校准测定以确立合适的试剂浓度。例如，为了确定在不存在GDF15抑制剂的情况下在测定中足以产生最大反应的GDF15浓度，可以将表达GFRAL/RET的细胞暴露于一定范围的GDF15浓度，并且在选择合适的浓度之前确定在每个浓度下的抑制。例如，我们发现4nM的浓度在我们的实验中产生最大反应，因此选择4nM作为用于该测定的GDF15浓度。更多细节在实施例1中提供。

GDF15信号传导的抑制剂可以在例如使用人和/或非人(例如，小鼠、大鼠或食蟹猴)GFRAL的ERK磷酸化测定中展现出GDF15诱导的GFRAL信号传导活性的剂量依赖性抑制。可以用一定浓度范围的抑制剂进行ERK磷酸化测定，以产生剂量-反应曲线，可以从所述曲线计算IC50值。因此，根据本发明的抑制剂可以通过其在这种酶测定中的剂量依赖性抑制来鉴定。

抑制剂的效力可以定量为IC50。

例如，在这种测定中抗GFRAL抗体可以具有15nM或更小的IC50。可以将诸如抗GFRAL抗体的结合多肽的效力与本文所述的一种或多种抗GFRAL抗体进行比较以供参考。例如，包含QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301的VH和VL结构域的抗体可以作用参考抗体。参考抗体可作为IgG提供。GDF15信号传导的抑制剂(例如，根据本发明的抗GFRAL抗体)可以是IC50在QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301 IgG的IC50的50％内或10％内的抑制剂，或者它的IC50可以低于所述参考抗体的IC50。“在……的x％内”是指测试结合多肽的IC50比参考抗体的IC50大不超过x％且小不超过x％。

在ERK磷酸化测定中，抗GFRAL抗体可以具有10nM或更小，任选5nM或更小的IC50。

产生和修饰结合多肽

鉴定和制备结合多肽(包括抗体)的方法是本领域熟知的。

例如，可以使用实验室动物产生抗体，所述实验室动物如小鼠(包括转基因小鼠(例如，HuMab/>或MeMo))、大鼠(例如，/>)、骆驼科动物、鲨鱼、兔、鸡或其他非人动物，所述实验室动物用GFRAL或其编码核酸免疫，然后任选地对恒定区和/或可变区进行人源化以产生人或人源化抗体。在一个例子中，可以使用展示技术，如酵母、噬菌体或核糖体展示，这对于技术人员是清楚的。标准亲和力成熟(例如使用展示技术)可以在从转基因动物、噬菌体展示文库或其他文库分离抗体先导物之后的另一步骤中进行。合适技术的代表性例子描述于US20120093818(Amgen,Inc)中，其通过引用以其整体并入本文，例如段落[0309]至[0346]中所述的方法。

期望产生结合物变体的原因有很多，包括优化多肽序列用于大规模制造、促进纯化、增强稳定性或改善包含在所需药物配制品中的适用性。可以在抗体序列中的一个或多个靶残基处进行蛋白质工程化工作，例如用替代氨基酸取代一个氨基酸(任选地，产生在该位置处含有所有天然存在的氨基酸(可能除了Cys和Met)的变体)，并且监测对功能和表达的影响以确定最佳取代。在一些情况下，不希望用Cys或Met取代残基或将这些残基引入序列中，因为这样做可能在制造中产生困难-例如通过形成新的分子内或分子间半胱氨酸-半胱氨酸键。当选择先导候选物并对其优化用于制造和临床开发时，通常希望尽可能少地改变其抗原结合特性，或至少保留亲本分子的亲和力和效力。然而，也可以产生变体以调节关键抗体特征，如亲和力、交叉反应性或中和效力。

抗体可以包含任何公开的抗体的一组H和/或L CDR，其中在所公开的H和/或L CDR组内具有一个或多个氨基酸突变。突变可以是氨基酸取代、缺失或插入。因此，例如在所公开的H和/或L CDR组内可以有一个或多个氨基酸取代。例如，在所述H和/或L CDR组内可以有多达12、11、10、9、8、7、6、5、4、3或2个突变，例如取代。例如，在HCDR3中可有至多6、5、4、3或2个突变，例如取代，和/或在LCDR3中可有至多6、5、4、3或2个突变，例如取代。抗体可以包含对于本文任何QUEL抗体所示的一组HCDR、一组LCDR或一组6个(H和L)CDR，或者可以包含具有一个或两个保守取代的该组CDR。

可任选地在本文公开的抗体VH或VL结构域的框架区中进行一个或多个氨基酸突变。例如，不同于相应人种系区段序列的一个或多个残基可以恢复为种系。对应于示例抗GFRAL抗体的VH和VL结构域的人种系基因区段序列指示于表G中。

抗体可包含与所附序列表中所示的任何抗体的VH结构域具有至少60％、70％、80％、85％、90％、95％、98％或99％氨基酸序列同一性的VH结构域，和/或包含与任何那些抗体的VL结构域具有至少60％、70％、80％、85％、90％、95％、98％或99％氨基酸序列同一性的VL结构域。可用于计算两个氨基酸序列的％同一性的算法包括例如BLAST、FASTA或Smith-Waterman算法，例如采用默认参数。特定变体可包括一个或多个氨基酸序列改变(氨基酸残基的添加、缺失、取代和/或插入)。

可以在一个或多个框架区和/或一个或多个CDR中进行改变。任选地通过CDR诱变提供变体。所述改变通常不会导致功能丧失，因此包含由此改变的氨基酸序列的抗体可以保留结合人GFRAL和/或小鼠GFRAL的能力。它可以保留与其中不进行改变的抗体相同的定量结合能力，例如在本文所述的测定中所测量的。包含由此改变的氨基酸序列的抗体可具有改进的结合和/或抑制人和/或小鼠GFRAL的能力。

改变可以包括用非天然存在的或非标准的氨基酸替代一个或多个氨基酸残基，将一个或多个氨基酸残基修饰成非天然存在的或非标准的形式，或将一个或多个非天然存在的或非标准的氨基酸插入序列中。本文别处描述了本发明序列中改变的数目和位置的例子。天然存在的氨基酸包括20种“标准”L-氨基酸，通过它们的标准单字母码标识为G、A、V、L、I、M、P、F、W、S、T、N、Q、Y、C、K、R、H、D、E。非标准氨基酸包括可并入多肽主链中或由修饰现有氨基酸残基产生的任何其他残基。非标准氨基酸可以是天然存在的或非天然存在的。

如本文所用的术语“变体”是指与亲本多肽或核酸相差一个或多个氨基酸或核酸缺失、取代或添加，但保留亲本分子的一种或多种特定功能或生物活性的肽或核酸。氨基酸取代包括其中氨基酸被不同的天然存在的氨基酸残基替代的改变。此类取代可以被分类为“保守的”，在这种情况下，包含在多肽中的氨基酸残基被另一种天然存在的在极性、侧链功能或大小方面具有相似特征的氨基酸替代。此类保守取代是本领域熟知的。本发明涵盖的取代也可以是“非保守的”，其中肽中存在的氨基酸残基被具有不同特性的氨基酸，如来自不同组的天然存在的氨基酸取代(例如用丙氨酸取代带电荷或疏水性氨基酸)，或可替代地，其中天然存在的氨基酸被非常规氨基酸取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是保守的。当用于提及多核苷酸或多肽时，术语变体还涵盖指分别与参考多核苷酸或多肽相比(例如，与野生型多核苷酸或多肽相比)可在一级、二级或三级结构上变化的多核苷酸或多肽。

在一些方面，可以使用通过使用本领域熟知的方法分离或产生的“合成变体”、“重组变体”或“化学修饰的”多核苷酸变体或多肽变体。“修饰的变体”可以包括保守的或非保守的氨基酸改变，如下所述。多核苷酸改变可导致由参考序列编码的多肽中的氨基酸取代、添加、缺失、融合和截短。一些方面使用包括插入变体、缺失变体或具有氨基酸取代的取代变体，包括通常不存在于作为变体基础的肽序列中的氨基酸和其他分子的插入和取代，例如但不限于通常不存在于人蛋白质中的鸟氨酸的插入。当描述多肽时，术语“保守取代”是指基本上不改变多肽活性的多肽氨基酸组成的改变。例如，保守取代是指用氨基酸残基取代具有相似化学特性(例如，酸性、碱性、带正电荷或带负电荷、极性或非极性等)的不同氨基酸残基。保守氨基酸取代包括用异亮氨酸或缬氨酸替代亮氨酸、用谷氨酸盐替代天冬氨酸、或用丝氨酸替代苏氨酸。提供功能相似的氨基酸的保守取代表是本领域熟知的。例如，以下六组各自含有彼此保守取代的氨基酸：1)丙氨酸(A)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)；2)天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)；3)天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q)；4)精氨酸(R)、赖氨酸(K)；5)异亮氨酸(I)、亮氨酸(L)，甲硫氨酸(M)、缬氨酸(V)；和6)苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)、色氨酸(W)。(还参见Creighton,Proteins,W.H.Freeman and Company(1984)，通过引用以其整体并入。)在一些实施方案中，如果改变、添加或缺失单个氨基酸或小百分比的氨基酸的单独取代、缺失或添加不降低肽的活性，则这些变化也可认为是“保守取代”。插入或缺失典型地在约1至5个氨基酸的范围内。保守氨基酸的选择可以基于以下来选择：肽中要取代的氨基酸的位置，例如如果氨基酸在肽的外部并且暴露于溶剂，或者在内部并且不暴露于溶剂。

可以基于以下来选择将取代现有氨基酸的氨基酸：现有氨基酸的位置，包括其暴露于溶剂(即，如果与未暴露于溶剂的内部定位的氨基酸相比，氨基酸暴露于溶剂或存在于肽或多肽的外表面上)。此类保守氨基酸取代的选择是本领域熟知的，例如Dordo等人,J.MoI Biol,1999,217,721-739和Taylor等人,J.Theor.Biol.119(1986)；205-218以及S.French和B.Robson,J.Mol.Evol.19(1983)171中披露的。因此，可以选择适合于在蛋白质或肽外部的氨基酸(即暴露于溶剂的氨基酸)的保守氨基酸取代，例如但不限于，可以使用以下取代：Y被F取代，T被S或K取代，P被A取代，E被D或Q取代，N被D或G取代，R被K取代，G被N或A取代，T被S或K取代，D被N或E取代，I被L或V取代，F被Y取代，S被T或A取代，R被K取代，G被N或A取代，K被R取代，A被S、K或P取代。

在替代的实施方案中，还可以选择适合于在蛋白质或肽内部的氨基酸的所涵盖的保守氨基酸取代，例如可以使用适合于在蛋白质或肽内部的氨基酸(即氨基酸不暴露于溶剂)的保守取代，例如但不限于，可以使用以下保守取代：其中Y被F取代，T被A或S取代，I被L或V取代，W被Y取代，M被L取代，N被D取代，G被A取代，T被A或S取代，D被N取代，I被L或V取代，F被Y或L取代，S被A或T取代且A被S、G、T或V取代。在一些实施方案中，非保守氨基酸取代也被涵盖在变体的术语中。

本发明包括产生含有表A中所示的抗体VH和/或VL结构域的VH和/或VL结构域变体的抗体的方法。此类抗体可通过包括以下的方法产生：

(i)通过在亲本抗体VH结构域的氨基酸序列中添加、缺失、取代或插入一个或多个氨基酸，提供作为亲本抗体VH结构域的氨基酸序列变体的抗体VH结构域，

其中亲本抗体VH结构域是QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301的VH结构域或包含那些抗体中任一个的重链互补决定区的VH结构域，

(ii)任选地将由此提供的VH结构域与VL结构域组合，以提供VH/VL组合，以及

(iii)测试由此提供的VH结构域或VH/VL结构域组合以鉴定具有一种或多种所需特征的抗体。

VH结构域可以是QUEL-0201的VH结构域。

所需特征包括与人和/或非人GFRAL结合。可以鉴定相对于亲本抗体而言对人和/或小鼠GFRAL具有可比或更高亲和力的抗体。其他所需的特征包括本文所述的GDF15信号传导抑制的测定(例如，ERK磷酸化测定)。鉴定具有所需特征的抗体可包括鉴定具有本文所述的功能属性的抗体，所述功能属性如其亲和力、交叉反应性、特异性或中和效力，其中任一者可在如本文所述的测定中确定。

当所述方法中包括VL结构域时，所述VL结构域可以是QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301中任一个的VL结构域，或可以是借助在亲本VL结构域的氨基酸序列中添加、缺失、取代或插入一个或多个氨基酸而提供的变体，其中所述亲本VL结构域是QUEL-0101、QUEL-0201或QUEL-0301中任一个的VL结构域或包含那些抗体中任一个的轻链互补决定区的VL结构域。VL结构域可以是与VH结构域同属的相同抗体的VL结构域。它可以是QUEL-0201的VL结构域。

产生变体抗体的方法可任选地包括产生抗体或VH/VL结构域组合的拷贝。方法可进一步包括表达所得抗体。可以任选地在一个或多个表达载体中产生对应于所需抗体VH和/或VL结构域的核苷酸序列。本文详细描述了合适的在宿主细胞中表达(包括重组表达)的方法。

编码核酸和产生方法

可以提供分离的核酸，其编码根据本发明的抗体。核酸可以是DNA和/或RNA。合成来源的基因组DNA、cDNA、mRNA或其他RNA或其任何组合可以编码抗体。

本发明提供包含至少一种上述多核苷酸的质粒、载体、转录或表达盒形式的构建体。示例性核苷酸序列包括在序列表中。除非上下文另有要求，否则对本文所述的核苷酸序列的提及涵盖具有指定序列的DNA分子，并且涵盖具有其中U取代T的指定序列的RNA分子。

本发明还提供了包含一种或多种编码抗体的核酸的重组宿主细胞。产生所编码抗体的方法可包括从核酸表达，例如通过培养含有核酸的重组宿主细胞。因此可以获得抗体，并且可以使用任何合适的技术分离和/或纯化，然后适当地使用。产生方法可包括将产物配制成包含至少一种额外组分如药学上可接受的赋形剂的组合物。

用于在各种不同宿主细胞中克隆和表达多肽的系统是熟知的。合适的宿主细胞包括细菌、哺乳动物细胞、植物细胞、丝状真菌、酵母和杆状病毒系统以及转基因植物和动物。

抗体和抗体片段在原核细胞中的表达是本领域已确立的。常见的细菌宿主是大肠杆菌。在培养的真核细胞中的表达也是本领域技术人员可获得的生产选择。本领域可用于表达异源多肽的哺乳动物细胞系包括中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、HeLa细胞、幼仓鼠肾细胞、NSO小鼠黑色素瘤细胞、YB2/0大鼠骨髓瘤细胞、人胚肾细胞(例如HEK293)、人胚视网膜细胞和许多其他细胞。

载体可含有适当的调节序列，包括启动子序列、终止子序列、多腺苷酸化序列、增强子序列、标记基因和其他适当的序列。可以将编码抗体的核酸引入宿主细胞中。本发明的核酸可以整合到宿主细胞的基因组(例如染色体)中。根据标准技术，可以通过包含促进与基因组重组的序列来促进整合。可以通过各种方法将核酸引入真核细胞，所述方法包括磷酸钙转染、DEAE-葡聚糖、电穿孔、脂质体介导的转染以及使用逆转录病毒或其他病毒(例如痘苗病毒)或对于昆虫细胞而言使用杆状病毒的转导。将核酸引入宿主细胞(特别是真核细胞)可以使用基于病毒或质粒的系统。质粒系统可以以附加体维持，或者可以掺入宿主细胞或人工染色体中。掺入可以通过在单个或多个基因座处随机或靶向整合一个或多个拷贝进行。对于细菌细胞，合适的技术包括氯化钙转化、电穿孔和使用噬菌体的转染。引入后可以表达核酸，例如通过在用于基因表达的条件下培养宿主细胞，然后任选地分离或纯化结合多肽，例如抗体。

配制和施用

提供了包含根据本发明的GDF15信号传导的抑制剂(例如，抗GFRAL抗体)的组合物。还提供了包含编码GDF15信号传导抑制剂的核酸的组合物，所述GDF15信号传导抑制剂是结合多肽(例如，抗体)。可以提供此类组合物用于通过疗法治疗人体或动物体，包括在本文所述的任何示例医学治疗中。除了活性成分(抑制剂或编码核酸)之外，组合物还可以包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。

根据本发明的结合多肽及其编码核酸分子通常以分离的形式提供。VH和/或VL结构域和核酸可以从其天然环境或其产生环境中纯化提供。分离的结合多肽和分离的核酸将不含或基本上不含与它们天然缔合的物质，如与它们在体内一起被发现的其他多肽或核酸，或者当通过体外重组DNA技术制备它们时这种制备的环境(例如，细胞培养物)。任选地，分离的结合多肽或核酸(1)不含通常与其一起被发现的至少一些其他蛋白质，(2)基本上不含来自相同来源(例如，来自相同物种)的其他蛋白质，(3)由来自不同物种的细胞表达，(4)已经从至少约50％的天然缔合的多核苷酸、脂质、碳水化合物或其他物质分离，(5)与不天然缔合的多肽可操作地(通过共价或非共价相互作用)缔合，或(6)天然不存在。

结合多肽或其编码核酸可以与稀释剂或佐剂一起配制，并且仍然出于实用目的而被分离，例如，如果用于包被微量滴定板以用于免疫测定，可以将它们与载体混合，而当用于治疗时，可以将它们与药学上可接受的载体或稀释剂混合。如本文别处所述，其他活性成分也可包括在治疗制剂中。结合多肽可以在体内天然地或通过异源真核细胞(如CHO细胞)系统被糖基化，或者可不发生糖基化(例如如果通过在原核细胞中表达而产生)。本发明涵盖具有修饰的糖基化模式的抗体。

通常，分离的产物构成给定样品的至少约5％、至少约10％、至少约25％或至少约50％。结合多肽可以基本上不含在其天然或产生环境中发现的会干扰其治疗、诊断、预防、研究或其他用途的蛋白质或多肽或其他污染物。

本发明提供了包含本文所述的结合多肽的治疗组合物。还提供了包含编码此类结合多肽的核酸的治疗组合物。编码核酸在本文别处更详细地描述，且包括DNA和RNA，例如mRNA。在本文所述的治疗方法中，使用编码结合多肽的核酸和/或含有这种核酸的细胞可用作包含所述结合多肽本身的组合物的替代物(或附加物)。含有编码结合多肽的核酸的细胞(任选地其中所述核酸被稳定地整合到基因组中)因此代表了用于患者治疗用途的药物。可将编码结合多肽的核酸引入源自预期患者的人细胞中并离体修饰。向患者施用含有编码核酸的细胞提供了能够表达结合多肽的细胞储库，这与施用分离的核酸或分离的结合多肽相比，可以在更长的时间内提供治疗益处。还可以将核酸直接施用于患者进行基因疗法。因此，可以提供编码结合多肽的核酸用于基因疗法中，包括将编码核酸引入患者体内的细胞中，使得所述核酸在患者细胞中表达并且提供治疗效果，本文公开了所述治疗效果的例子。

组合物可以含有合适的载体、赋形剂和其他药剂，它们被掺入配制品中以提供改进的转移、递送、耐受性等。在所有药物化学家都知晓的配方中可以找到许多适当的配制品：Remington's Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Company,伊斯顿,宾夕法尼亚州。这些配制品包括例如散剂、糊剂、软膏、凝胶、蜡、油、脂质、含有脂质(阳离子或阴离子)的囊泡(如LIPOFECTINT^TM)、DNA缀合物、无水吸收糊剂、水包油和油包水乳剂、乳剂卡波蜡(carbowax)(具有不同分子量的聚乙二醇)、半固体凝胶和含有卡波蜡的半固体混合物。另外参见Powell等人“Compendium of excipients for parenteral formulations”PDA(1998)J Pharm Sci Technol 52:238-311。组合物可包含与医用注射缓冲液和/或佐剂组合的抗体或核酸。

可以将结合多肽或其编码核酸配制用于向患者施用的所需途径，例如配制于注射用液体(任选地水溶液)中。所述组合物可以任选地被配制用于静脉内或皮下注射。

各种递送系统是已知的并且可用于施用本发明的药物组合物。引入的方法包括但不限于皮内、肌内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内、硬膜外和口服途径。可以将组合物通过任何便利的途径施用，例如通过输注或团注，通过上皮或粘膜皮肤内层(例如，口腔粘膜、直肠和肠粘膜等)吸收，并且可以与其他生物活性剂一起施用。施用可以是全身的或局部的。优选通过皮下注射施用抗原结合分子。施用可以是患者自我施用，例如自我注射。

所述药物组合物还可以以囊泡递送，特别是脂质体(参见Langer(1990)Science249:1527-1533；Treat等人(1989)in Liposomes in the Therapy of InfectiousDisease and Cancer,Lopez Berestein和Fidler(编),Liss,New York,第353-365页；Lopez-Berestein,同上,第317-327页；一般参见同上)。

在某些情况下，可以在控制释放系统中递送所述药物组合物。在一个实施方案中，可以使用泵(参见Langer,同上；Sefton(1987)CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14:201)。在另一个实施方案中，可以使用聚合物材料；参见Medical Applications of ControlledRelease,Langer and Wise(编),CRC Pres.,Boca Raton,Fla.(1974)。在又另一个实施方案中，可以将控制释放系统放置在组合物的靶标附近，因此仅需要全身剂量的一部分(参见例如，Goodson,Medical Applications of Controlled Release,同上,第2卷,第115-138页,1984)。

可注射制剂可包括用于静脉内、皮下、皮内和肌内注射、滴注等的剂型。这些可注射制剂可通过公知方法制备。例如，可以通过例如将上述抗体或其盐溶解、悬浮或乳化在常规用于注射的无菌水性介质或油性介质中来制备可注射制剂。作为注射用水性介质，有例如生理盐水，一种含有葡萄糖和其他辅助剂等的等渗溶液，其可以与适当的增溶剂如醇(例如，乙醇)、多元醇(例如，丙二醇、聚乙二醇)、非离子表面活性剂[例如，聚山梨醇酯80、HCO-50(氢化蓖麻油的聚氧乙烯(50mol)加合物)]等组合使用。作为油性介质，采用例如芝麻油、大豆油等，其可以与增溶剂如苯甲酸苄酯、苯甲醇等组合使用。这样制备的注射剂可填充在适当的安瓿中。可以将本发明的药物组合物用标准针和注射筒皮下或静脉内递送。设想治疗将不限于临床使用。因此，使用无针装置进行皮下注射也是有利的。对于皮下递送，笔式递送装置容易地用于递送本发明的药物组合物。这种笔式递送装置可以是可重复使用的或一次性的。可重复使用的笔式递送装置通常利用含有药物组合物的可更换药筒。一旦施用了药筒内的所有药物组合物并且药筒是空的，就可以容易地弃去空药筒并用含有药物组合物的新药筒替换。然后可以重复使用所述笔式递送装置。在一次性笔式递送装置中，没有可更换的药筒。相反，所述一次性笔式递送装置预装有保持在装置内的储器中的药物组合物。一旦储器内的药物组合物排空，则弃去整个装置。许多可重复使用的笔式和自动注射递送装置已应用于本发明的药物组合物的皮下递送。例子包括但当然不限于AUTOPEN^TM(OwenMumford,Inc.,伍德斯托克，英国)、DISETRONIC^TM笔(Disetronic Medical Systems,布格多夫，瑞士)、HUMALOG MIX 75/25^TM笔、HUMALOG^TM笔、HUMALIN 70/30^TM笔(Eli Lilly and Co.,Indianapolis,Ind.)、NOVOPEN^TMI、II和III(Novo Nordisk,哥本哈根，丹麦)、NOVOPENJUNIOR^TM(Novo Nordisk,哥本哈根，丹麦)、BD^TM笔(Becton Dickinson,富兰克林湖，新泽西州)、OPTIPENT^TM、OPTIPEN PRO^TM、OPTIPEN STARLET^TM、和OPTICLIKT^TM(Sanofi-Aventis,法兰克福，德国)，仅举几例。用于皮下递送本发明的药物组合物的一次性笔式递送装置的例子包括但当然不限于SOLOSTAR^TM笔(Sanofi-Aventis)、FLEXPEN^TM(Novo Nordisk)和KWIKPEN^TM(Eli Lilly)。

有利地，将上述的用于口服或肠胃外使用的药物组合物制备成适于配合活性成分剂量的单位剂量的剂型。单位剂量的此类剂型包括例如片剂、丸剂、胶囊剂、注射剂(安瓿)、栓剂等。包含的上述抗体的量通常为每单位剂量的剂型约5至约500mg；尤其是在注射剂形式中，对于其他剂型，可以含有约5至约100mg和约10至约250mg的上述抗体。

结合多肽、核酸或包含其的组合物可以包含在医用容器如小药瓶、注射筒、IV容器或注射装置中。在一个例子中，结合多肽、核酸或组合物是体外的，并且可以在无菌容器中。在一个例子中，提供了试剂盒，其包含结合多肽、包装和关于在如本文所述的治疗方法中使用的说明书。

本发明的一个方面是包含本发明的结合多肽或核酸和一种或多种药学上可接受的赋形剂的组合物，所述赋形剂的例子在上文中列出。“药学上可接受的”是指由美国联邦政府或州政府的监管机构批准或可批准的或在美国药典或其他普遍认可的药典中列出的，用于在动物体内，包括在人体内使用。可将药学上可接受的载体、赋形剂或佐剂与结合多肽(例如本文所述的任何抗体或多肽分子)一起施用于患者，并且不破坏其药理学活性，并且当以足以递送治疗量的药剂的剂量施用时是无毒的。

在一些实施方案中，结合多肽将是根据本发明的组合物中的唯一活性成分。因此，组合物可由抗体组成或其可由结合多肽和一种或多种药学上可接受的赋形剂组成。然而，根据本发明的组合物任选地包括一种或多种另外的活性成分。可能需要与根据本发明的结合多肽或核酸一起施用的其他治疗剂包括用于癌症的其他治疗剂，其例子在本文中描述。可以将任何这样的药剂或药剂的组合与根据本发明的结合多肽或核酸组合施用，或在组合物中提供，无论是作为组合制剂还是单独制剂。可以将根据本发明的结合多肽或核酸与另一种或多种治疗剂(如本文所提及的那些)分开地和依序地施用，或者并行地且任选地作为组合制剂施用。

可以将多种组合物分开或同时施用。分开施用是指在不同时间施用两种组合物，例如相隔至少10、20、30或10-60分钟，或相隔1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12小时。还可以以24小时间隔，或甚至更长间隔施用组合物。可替代地，可以同时施用两种或更多种组合物，例如间隔小于10或小于5分钟。在一些方面，可以将同时施用的组合物作为混合物施用，各组分具有或不具有相似或不同的时间释放机制。

结合多肽及其编码核酸可用作治疗剂。本文的患者一般是哺乳动物，通常是人。可以将结合多肽或核酸例如通过本文所述的任何施用途径施用于哺乳动物。在优选的实施方案中，通过皮下注射施用结合多肽。

施用通常以“治疗有效量”进行，这是产生施用所需效果的足以对患者显示益处的量。确切量将取决于治疗目的并且将可以通过本领域技术人员使用已知技术(参见例如，Lloyd(1999),The Art,Science and Technology of Pharmaceutical Compounding)确定。治疗处方，例如对剂量的决定等，在全科医师和其他医生的责任范围内，并且可以取决于所治疗疾病的症状和/或进展的严重程度。结合多肽或核酸的治疗有效量或合适剂量可以通过比较其在动物模型中的体外活性和体内活性来确定。将小鼠和其他测试动物中的有效剂量外推到人的方法是已知的。

在本文所述的治疗方法中，可以施用一个或多个剂量。在一些情况下，单剂量可有效实现长期益处。因此，所述方法可包括施用单剂量的结合多肽、其编码核酸或组合物。可替代地，可以施用多剂量，通常依序施用并间隔数天、数周或数月的时间段。例如，可以每2周、每3周或每4周进行施用。任选地，可以将结合多肽每月一次或以更低频率，例如每两个月或每三个月施用于患者。

如本文所用，术语“治疗”(treat、treatment、treating)或“改善”(amelioration)是指治疗性治疗，其中目的是逆转、减轻、改善、抑制、减缓或停止与疾病或障碍相关的病症的进展或严重程度。术语“治疗”包括减少或减轻病症、疾病或障碍的至少一种不良作用或症状。如果一种或多种症状或临床标记降低，则治疗通常是“有效的”。可替代地，如果疾病的进展减少或停止，则治疗是“有效的”。也就是说，“治疗”不仅包括症状或标记的改善，还包括与在没有治疗的情况下预期相比，停止或至少减缓症状的进展或恶化。有益或期望的临床结果包括但不限于一种或多种症状减轻、疾病的程度减小、疾病状态稳定(即，不恶化)、疾病进展延迟或减缓、疾病状态改善或缓和、缓解(无论是部分还是全部)和/或死亡率降低，无论是可检测的还是不可检测的。术语疾病的“治疗”还包括提供疾病的症状或副作用的解除(包括姑息治疗)。对于有效的治疗，没有考虑完全治愈。在某些方面，所述方法还可以包括治愈。在本发明的上下文中，治疗可以是预防性治疗。

长半衰期是本发明的结合多肽的期望特征。延长的半衰期转化为较不频繁的施用，这需要更少的注射来维持血流中分子的治疗有效浓度。本发明的抗原结合分子在人中的体内半衰期可以是7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19，20或21天或更长。抗原结合分子在非人灵长类动物如食蟹猴中的体内半衰期可以是7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或21天或更长。

可以提供结合多肽用于以一周、两周、三周、四周或一个月的规则间隔施用。

条款

以下编号的条款代表本发明的实施方案并且是说明书的一部分。

1.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0201重链互补决定区(HCDR)组，即HCDR1 SEQ ID NO:13、HCDR2 SEQ ID NO:14和HCDR3 SEQ ID NO:15，并且

所述VL结构域包含QUEL-0201轻链互补决定区(LCDR)组，即LCDR1 SEQ ID NO:18、LCDR2 SEQ ID NO:19和LCDR3 SEQ ID NO:20。

2.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

与QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12具有至少90％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17具有至少90％氨基酸序列同一性的VL结构域。

3.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

由通过基因区段IGHV1-3(例如，IGHV1-3*01)和IGHJ6(例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VH结构域，和

由通过基因区段IGLV1-40(例如，IGLV1-40*01)和IGLJ3(例如，IGLJ3*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VL结构域。

4.根据条款3所述的抗体，其中所述VH结构域由通过基因区段IGHV1-3(例如，IGHV1-3*01)、IGHD5-18(例如，IGHD5-18*01)和IGHJ6(例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码。

5.一种与QUEL-0201 IgG竞争结合人GFRAL的抗体，所述QUEL-0201 IgG包含QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12和QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17。

6.根据条款1至5中任一项所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的1nM或更强的亲和力结合人GFRAL。

7.根据条款6所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的100pM或更强的亲和力结合人GFRAL。

8.根据条款6所述的抗体，所述抗体以在50pM-200pM范围的亲和力结合人GFRAL。

9.根据条款1至8中任一项所述的抗体，所述抗体与小鼠GFRAL交叉反应，对小鼠GFRAL的亲和力在其对人GFRAL的亲和力的10倍以内。

10.根据条款1至9中任一项所述的抗体，所述抗体以15nM或更强的效力抑制GFRAL，其中所述效力在响应于GDF15的ERK磷酸化的体外测定中被确定为IC50。

11.根据条款10所述的抗体，其中所述效力是10nM或更强。

12.根据条款1至11中任一项所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12具有至少95％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17具有至少95％氨基酸序列同一性的VL结构域。

13.根据任一项前述条款所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12具有至少98％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17具有至少98％氨基酸序列同一性的VL结构域。

14.根据条款13所述的抗体，所述抗体包含

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12，和

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17。

15.根据条款14所述的抗体，所述抗体包含

所述QUEL-0201 VH结构域SEQ ID NO:12，其包含QUEL-0201 HCDR组，即HCDR1 SEQID NO:13、HCDR2 SEQ ID NO:14和HCDR3 SEQ ID NO:15，任选地在VH结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变，和

所述QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17，其包含QUEL-0201 LCDR组，即LCDR1 SEQID NO:18、LCDR2 SEQ ID NO:19和LCDR3 SEQ ID NO:20，任选地在VL结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变。

16.根据条款14或条款15所述的抗体，其中所述一个或两个氨基酸改变是保守取代。

17.根据任一项前述条款所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0201 VH结构域SEQID NO:12和所述QUEL-0201 VL结构域SEQ ID NO:17。

18.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含一组重链互补决定区(HCDR)，其中HCDR1是SEQ ID NO:23或SEQID NO:133，HCDR2是SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:124、SEQ ID NO:134或SEQ ID NO:142，并且HCDR3是SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:125、SEQ ID NO:135或SEQ ID NO:143，并且

所述VL结构域包含一组轻链互补决定区(LCDR)，其中LCDR1是SEQ ID NO:28、SEQID NO:128或SEQ ID NO:138，LCDR2是SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:129，并且LCDR3是SEQ IDNO:30、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:139或SEQ ID NO:146。

19.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0301重链互补决定区(HCDR)组，即HCDR1 SEQ ID NO:23、HCDR2 SEQ ID NO:24和HCDR3 SEQ ID NO:25，并且

所述VL结构域包含QUEL-0301轻链互补决定区(LCDR)组，即LCDR1 SEQ ID NO:28、LCDR2 SEQ ID NO:29和LCDR3 SEQ ID NO:30。

20.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0302 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:23、HCDR2 SEQ IDNO:124和HCDR3 SEQ ID NO:125，并且

所述VL结构域包含QUEL-0302 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:128、LCDR2 SEQ IDNO:129和LCDR3 SEQ ID NO:130。

21.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0303 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:133、HCDR2 SEQ IDNO:134和HCDR3 SEQ ID NO:135，并且

所述VL结构域包含QUEL-0303 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:138、LCDR2 SEQ IDNO:29和LCDR3 SEQ ID NO:139。

22.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0304 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:133、HCDR2 SEQ IDNO:142和HCDR3 SEQ ID NO:143，并且

所述VL结构域包含QUEL-0304 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:138、LCDR2 SEQ IDNO:29和LCDR3 SEQ ID NO:146。

23.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

与QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22具有至少90％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27具有至少90％氨基酸序列同一性的VL结构域。

24.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

由通过基因区段IGHV3-7(例如，IGHV3-7*01)和IGHJ4(例如，IGHJ4*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VH结构域，和

由通过基因区段IGLV1-44(例如，IGLV1-44*01)和IGLJ3(例如，IGLJ3*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VL结构域。

25.根据条款24所述的抗体，其中所述VH结构域由通过基因区段IGHV3-7(例如，IGHV3-7*01)、IGHD1-7(例如，IGHD1-7*01)和IGHJ4(例如，IGHJ4*02)的重组产生的核苷酸序列编码。

26.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

由通过基因区段IGHV3-7(例如，IGHV3-7*01)和IGHJ4(例如，IGHJ4*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VH结构域，和

由通过基因区段IGLV1-47(例如，IGLV1-47*01)和IGLJ3(例如，IGLJ3*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VL结构域。

27.根据条款26所述的抗体，其中所述VH结构域由通过基因区段IGHV3-7(例如，IGHV3-7*01)、IGHD1-20(例如，IGHD1-20*01)和IGHJ4(例如，IGHJ4*02)的重组产生的核苷酸序列编码。

28.一种与QUEL-0301 IgG竞争结合人GFRAL的抗体，所述QUEL-0301 IgG包含QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22和QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27。

29.根据条款18至28中任一项所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的1nM或更强的亲和力结合人GFRAL。

30.根据条款29所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的1pM或更强的亲和力结合人GFRAL。

31.根据条款29所述的抗体，所述抗体以在0.5pM-2pM范围的亲和力结合人GFRAL。

32.根据条款18至31中任一项所述的抗体，所述抗体与小鼠GFRAL交叉反应，具有如通过表面等离子体共振确定的10nM或更强的对小鼠GFRAL的亲和力。

33.根据条款18至32中任一项所述的抗体，所述抗体以15nM或更强的效力抑制GFRAL，其中所述效力在响应于GDF15的ERK磷酸化的体外测定中被确定为IC50。

34.根据条款33所述的抗体，其中所述效力是10nM或更强。

35.根据条款18至34中任一项所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22具有至少95％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27具有至少95％氨基酸序列同一性的VL结构域。

36.根据任一项前述条款所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22具有至少98％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27具有至少98％氨基酸序列同一性的VL结构域。

37.根据条款36所述的抗体，所述抗体包含

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22，和

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27。

38.根据条款37所述的抗体，所述抗体包含

所述QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22，其包含QUEL-0301 HCDR组，即HCDR1 SEQID NO:23、HCDR2 SEQ ID NO:24和HCDR3 SEQ ID NO:25，任选地在VH结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变，和

所述QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27，其包含QUEL-0301 LCDR组，即LCDR1 SEQID NO:28、LCDR2 SEQ ID NO:29和LCDR3 SEQ ID NO:30，任选地在VL结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变。

39.根据条款37或条款38所述的抗体，其中所述一个或两个氨基酸改变是保守取代。

40.根据条款18至39中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0301 VH结构域SEQ ID NO:22和所述QUEL-0301 VL结构域SEQ ID NO:27。

41.根据条款18、20和23-28中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0302VH结构域SEQ ID NO:123和所述QUEL-0302 VL结构域SEQ ID NO:127。

42.根据条款18、21和23-28中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0303VH结构域SEQ ID NO:132和所述QUEL-0303 VL结构域SEQ ID NO:137。

43.根据条款18和22-28中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0304 VH结构域SEQ ID NO:141和所述QUEL-0304 VL结构域SEQ ID NO:145。

44.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含一组HCDR，即HCDR1、HCDR2和HCDR3，其中

HCDR1是SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:99、SEQ ID NO:107或SEQ ID NO:118，

HCDR2是SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:100或SEQ ID NO:108，并且

HCDR3是SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:113或SEQ ID NO:119，并且

所述VL结构域包含一组LCDR，即LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中

LCDR1是SEQ ID NO:8，

LCDR2是SEQ ID NO:9，并且

LCDR3是SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:104。

45.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0101重链互补决定区(HCDR)组，即HCDR1 SEQ ID NO:3、HCDR2 SEQ ID NO:4和HCDR3 SEQ ID NO:5，并且

所述VL结构域包含QUEL-0101轻链互补决定区(LCDR)组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:10。

46.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0102 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:99、HCDR2 SEQ IDNO:100和HCDR3 SEQ ID NO:101，并且所述VL结构域包含QUEL-0102 LCDR组，即LCDR1 SEQID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

47.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0103 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:107、HCDR2 SEQ IDNO:108和HCDR3 SEQ ID NO:5，并且

所述VL结构域包含QUEL-0103 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

48.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0104 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:107、HCDR2 SEQ IDNO:108和HCDR3 SEQ ID NO:113，并且

所述VL结构域包含QUEL-0104 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

49.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0105 HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:118、HCDR2 SEQ IDNO:108和HCDR3 SEQ ID NO:119，并且

所述VL结构域包含QUEL-0105 LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

50.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

与QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2具有至少90％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7具有至少90％氨基酸序列同一性的VL结构域。

51.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

由通过基因区段IGHV3-30(例如，IGHV3-30*18)和IGHJ6(例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VH结构域，和

由通过基因区段IGKV1-27(例如，IGKV1-27*01)和IGKJ4(例如，IGKJ4*01)的重组产生的核苷酸序列编码的VL结构域。

52.根据条款51所述的抗体，其中所述VH结构域由通过基因区段IGHV3-30*18(例如，IGHV3-30)、IGHD3-10(例如，IGHD3-10*01)和IGHJ6(例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码。

53.一种与QUEL-0101 IgG竞争结合人GFRAL的抗体，所述QUEL-0101 IgG包含QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2和QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7。

54.根据条款44至53中任一项所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的1nM或更强的亲和力结合人GFRAL。

55.根据条款54所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的200pM或更强的亲和力结合人GFRAL。

56.根据条款54所述的抗体，所述抗体以在100pM-400pM范围的亲和力结合人GFRAL。

57.根据条款44至56中任一项所述的抗体，所述抗体与小鼠GFRAL交叉反应，对小鼠GFRAL的亲和力在其对人GFRAL的亲和力的10倍以内。

58.根据条款44至57中任一项所述的抗体，所述抗体以15nM或更强的效力抑制GFRAL，其中所述效力在响应于GDF15的ERK磷酸化的体外测定中被确定为IC50。

59.根据条款58所述的抗体，其中所述效力是10nM或更强。

60.根据条款59所述的抗体，其中所述效力是5nM或更强。

61.根据条款44至60中任一项所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2具有至少95％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7具有至少95％氨基酸序列同一性的VL结构域。

62.根据条款44至61中任一项所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2具有至少98％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7具有至少98％氨基酸序列同一性的VL结构域。

63.根据条款62所述的抗体，所述抗体包含

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2，和

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7。

64.根据条款63所述的抗体，所述抗体包含

所述QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2，其包含QUEL-0101 HCDR组，即HCDR1 SEQID NO:3、HCDR2 SEQ ID NO:4和HCDR3 SEQ ID NO:5，任选地在VH结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变，和

所述QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7，其包含QUEL-0101 LCDR组，即LCDR1 SEQID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:10，任选地在VL结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变。

65.根据条款63或条款64所述的抗体，其中所述一个或两个氨基酸改变是保守取代。

66.根据条款44至65中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0101 VH结构域SEQ ID NO:2和所述QUEL-0101 VL结构域SEQ ID NO:7。

67.根据条款44、46和50-53中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0102VH结构域SEQ ID NO:98和所述QUEL-0102 VL结构域SEQ ID NO:103。

68.根据条款44、47和50-53中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0103VH结构域SEQ ID NO:106和所述QUEL-0103 VH结构域SEQ ID NO:110。

69.根据条款44、48和50-53中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0104VH结构域SEQ ID NO:112和所述QUEL-0104 VL结构域SEQ ID NO:115。

70.根据条款44和49-53中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0105 VH结构域SEQ ID NO:117和所述QUEL-0105 VH结构域SEQ ID NO:121。

71.根据任一项前述条款所述的抗体，所述抗体包含重链Fc区。

72.根据条款71所述的抗体，所述抗体是人IgG。

73.根据条款72所述的抗体，所述抗体是人IgG4。

74.根据条款73所述的抗体，所述抗体包含重链恒定区SEQ ID NO:60。

75.一种编码如任一项前述条款中定义的抗体的核酸。

76.一种体外宿主细胞，所述体外宿主细胞包含如条款75中所定义的核酸。

77.一种组合物，所述组合物包含与药学上可接受的赋形剂一起配制的根据条款1至74中任一项所述的抗体或根据条款75所述的核酸。

78.根据条款77所述的组合物，所述组合物被配制用于静脉内或皮下注射。

79.一种治疗患者的与GDF15-GFRAL通路相关的医学病症的方法，所述方法包括向所述患者施用根据条款77或条款78所述的组合物。

80.根据条款77或条款78所述的组合物，其用于在治疗患者的与GDF15-GFRAL通路相关的医学病症中使用。

81.根据条款77或条款78所述的组合物用于制造用于治疗患者的与GDF15-GFRAL通路相关的医学病症的药剂的用途。

82.根据条款79所述的方法、根据条款80所述的组合物或根据条款81所述的组合物的用途，其中所述医学病症是妊娠剧吐、厌食、恶病质、条件性味觉厌恶和/或用于癌症的化疗治疗的副作用。

83.根据条款82所述的方法、组合物或用途，其中所述患者还要接受或已接受用抗癌化学治疗剂的治疗。

84.根据条款82或条款83所述的方法、组合物或用途，其中所述医学病症是癌症患者的厌食。

85.根据条款82或条款83所述的方法、组合物或用途，其中所述医学病症是癌症患者的恶病质。

86.根据条款82至85中任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述医学病症是用抗癌化学治疗剂治疗的副作用。

87.根据条款86所述的方法、组合物或用途，其中所述治疗包括预防由用抗癌化学治疗剂治疗引起的条件性味觉厌恶。

88.根据条款82至87中任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述治疗包括在癌症患者中减少体重减轻并且延长存活期。

89.一种降低患者中的糖皮质激素(例如，皮质醇)水平的方法，所述方法包括向所述患者施用GDF15信号传导的抑制剂。

90.一种GDF15信号传导的抑制剂，所述抑制剂用于在降低患者中的糖皮质激素(例如，皮质醇)水平中使用。

91.GDF15信号传导的抑制剂用于制造用于降低患者中的糖皮质激素(例如，皮质醇)水平的药剂的用途。

92.根据条款89所述的方法、根据条款90所述的用于所述用途的抑制剂、或根据条款91所述的抑制剂的用途，其用于使得已被确定为具有升高的血液糖皮质激素水平的患者中的糖皮质激素(例如，皮质醇)的血液水平正常化。

93.根据条款89所述的方法、根据条款90所述的用于所述用途的抑制剂或根据条款91所述的抑制剂的用途，其中所述患者是癌症患者。

94.根据条款89至93中任一项所述的方法、用于所述用途的抑制剂或抑制剂的用途，其中所述患者还要接受或已接受用细胞毒性剂和/或抗肿瘤剂的治疗。

95.根据条款89至94中任一项所述的方法、用于所述用途的抑制剂或抑制剂的用途，其中所述抑制剂抑制GDF15-GFRAL-RET信号传导复合物。

96.根据条款95所述的方法、用于所述用途的抑制剂或抑制剂的用途，其中所述抑制剂是抗GFRAL抗体。

97.根据条款96所述的方法、用于所述用途的抑制剂或抑制剂的用途，其中所述抗GFRAL抗体是如条款1至74中任一项定义的抗体。

实施例

在这些实施例中，我们呈现了对抗GFRAL拮抗性抗体QUEL-0101(及其变体QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104和QUEL-0105)、QUEL-0201和QUEL-0301(及其变体QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304)的表征。我们证明了抗GFRAL拮抗剂抗体结合并且强效地抑制GFRAL的能力。我们证明了这种GFRAL的阻断抑制了GDF15对小鼠的食物摄入、体重和体内肌肉萎缩标记物的作用。我们进一步证明在相同剂量下，抗GFRAL抗体还抑制GDF15通过GFRAL起作用以增加循环糖皮质激素水平的作用。这项工作证明，抑制GDF15:GFRAL相互作用会抑制对GDF15的神经内分泌反应，包括糖皮质激素的升高，并表明了治疗性地使用抗GFRAL拮抗剂抗体来降低患者的糖皮质激素水平(例如，降低升高的血液糖皮质激素水平(例如，皮质醇)至更接近患者的正常生理水平)的可能性。

实施例1.GFRAL信号传导的抑制的体外ERK磷酸化测定

将HEK293细胞工程化以在细胞表面上表达编码人GFRAL SEQ ID NO:31和/或人RET的DNA。将人GDF15(具有6-His标签的重组人GDF15蛋白(R&D Systems，957-GD))添加到含有以下HEK293细胞系的96孔细胞培养物中：

仅表达人GFRAL的HEK293细胞

仅表达人RET的HEK293细胞

共表达人GFRAL和RET的HEK293细胞。

将所述细胞与4nM GDF15一起孵育，然后去除培养基并且裂解细胞样品。将细胞裂解物转移到384孔板中，并且进行HTRF测定以测量ERK基因产物的磷酸化，表示GDF15-GFRAL-RET通路的下游信号。当RET被GDF15-GFRAL四聚体激活时，它触发ERK的磷酸化，这可通过HTRF检测到。我们使用Cisbio高级磷酸-ERK测定试剂盒以夹心测定形式使用2种对磷酸化的ERK具有特异性的不同抗体检测磷酸化的ERK，所述抗体中一种用Eu3+-穴合物(供体)标记并且第二种用d2(受体)标记。当染料非常接近(这发生在两种抗体与磷酸化的ERK结合时)时，用光源激发供体触发朝向受体的荧光共振能量转移(FRET)，所述受体进而以特定波长(665nm)发荧光。荧光变化(ΔF)表示GDF15下游信号传导的影响。ΔF对GDF15浓度的对数的图在共表达GFRAL和RET的细胞中产生标准S形曲线，但在单独表达GFRAL或RET的细胞中没有信号(图3)。

作为阳性对照，包括抗GFRAL拮抗性抗体mAb Q用于比较。

所选定的QUEL-0101、QUEL-0202和QUEL-0301抗体以及mAb Q的结果示出于下表和图4中。

mAb	IC50
		QUEL-0101	2.8nM
QUEL-0201	8.6nM
		QUEL-0301	9.4nM
mAb Q	20nM

实施例2.通过SPR确定的对人GFRAL的亲和力

QUEL-0101、QUEL-0201和QUEL-0301显示如通过SPR确定的对人GFRAL的良好范围的亲和力。

使用His标记的人GFRAL作为分析物，和经由固定化的抗人Fc抗体与CM4生物传感器芯片的表面偶联的测试抗体，通过SPR测量抗体与人GFRAL的结合。运行缓冲液为含1mMCaCl₂的HBS-P+缓冲液pH 7.4(GE BR100671)。将抗体以1μg/ml捕获60秒(捕获约80-140RU，取决于结合物)。将分析物(重组的可溶性GFRAL蛋白，R&D目录号9647-GR-050)以100、25、6.25、1.56、0.39、0.098、0.024和0nM以30μg/min注射120秒缔合时间，并且监测解离1200秒。使用10mM甘氨酸pH 1.5使芯片表面再生。所有实验都在25℃下进行。对每种抗体的传感图进行双减(double subtracted)(参考细胞和0浓度)。将数据拟合到1:1结合相互作用模型。使用多循环动力学模式拟合传感图。QUEL-0101、QUEL-0201和QUEL-0301各自显示了快速的缔合速率和缓慢的解离。图5。

计算与人GFRAL结合的KD和其他动力学常数并且结果在下表中示出。

mAb	ka(1/Ms)	kd(1/s)	KD(M)
				QUEL-0101	5.61E+05	7.87E-05	1.40E-10
QUEL-0201	7.38E+05	6.19E-05	8.39E-11
				QUEL-0301	9.83E+06	9.72E-06	9.88E-13
mAb Q	2.38E+06	1.03E-05	4.30E-12

在这些抗体中，QUEL-0301对人GFRAL具有大约1皮摩尔(pM)的最高亲和力，强于具有4.3pM的测量亲和力的参考抗体mAb Q。这些抗体之间约4倍的差异指示了相当的亲和力(2倍差异在Biacore装置的实验误差内)。所指示的KD值仅仅是估计值，因为抗体QUEL-0301的解离极慢，其kd接近装置的测量极限。QUEL-0201以大约84pM的亲和力结合人GFRAL。QUEL-0101以140pM的亲和力结合人GFRAL。

所述QUEL抗体具有非常好的动力学特征。它们的动力学常数在期望针对受体的强效治疗性抗体具有的范围内。Koff和Kon值在这里可提供很多信息，表明了抗体与GFRAL结合非常快，并且长时间保持附接。

实施例3.通过SPR确定的对小鼠GFRAL的亲和力

使用小鼠GFRAL-Fc融合物(R&D目录号9844-GR-050050)作为分析物，通过与实施例2中相同的方法通过SPR确定对小鼠GFRAL的亲和力。图6。

计算与小鼠GFRAL结合的KD和其他动力学常数并且结果在下表中示出。

mAb	ka(1/Ms)	kd(1/s)	KD(M)
				QUEL-0101	9.37E+04	1.12E-04	1.19E-09
QUEL-0201	1.53E+05	9.90E-06	6.48E-11
				QUEL-0301	1.06E+05	5.24E-04	4.95E-09
mAb Q	2.39E+05	4.19E-06	1.76E-11

在这些抗体中，QUEL-0201对小鼠GFRAL具有大约64.8pM的最高亲和力，QUEL-0101具有大约1.2纳摩尔(nM)的亲和力，并且QUEL-0301具有略低于5nM的相对低的亲和力。

比较这些抗体对人和小鼠GFRAL的测量的亲和力，QUEL-0201具有最大的交叉反应性，对人和小鼠GFRAL的亲和力差异在1.5倍以内(人约84pM；小鼠约65pM)。QUEL-0101也具有良好的交叉反应性，在10倍之内，但绝对亲和力较低(人约0.14nM；小鼠约1.2nM)。QUEL-0301也具有交叉反应性，但与其对人GFRAL的高亲和力相比，显示出对小鼠GFRAL相对弱的结合(对人约1pM；对小鼠约5nM)。

实施例4.对GDF15-GFRAL-RET复合物形成的抗体抑制的分析

对选定的拮抗性mAb进行表位作图测定，以研究抑制GDF15-GFRAL-RET信号传导的可能机制。

(a)夹心测定

在该测定中，测试抗体对同时结合抗原的能力。第一抗体经由其Fc区与固体支持物偶联，并且在溶液中添加GFRAL抗原，从而允许抗体-抗原复合物的形成。然后在溶液中添加第二抗体。如果检测到第二抗体的结合，这表明第一和第二抗体结合不同的表位。如果未检测到第二抗体的结合，这表明第一抗体和第二抗体竞争结合相同的表位。

可以使用相同的原理来评估抗体和天然配体是否竞争结合抗原。因此，使测试抗体与固体支持物偶联，并且在溶液中添加GFRAL抗原，从而允许抗体-GFRAL复合物的形成。然后在溶液中添加GDF15。如果检测到GDF15的结合，这表明所述抗体不抑制GDF15-GFRAL复合物的形成。

在这里，我们使用表面等离子体共振来检测与经由预固定的抗Fc捕获抗体与生物传感器芯片表面偶联的抗体的结合。在使用测试抗体、GFRAL抗原和GDF15或mAbQ作为分析物的夹心测定中获得以下结果：

表中的结果示出为GDF15或mAbQ注射后的共振单位。

QUEL-0101、QUEL-0201、QUEL-0301和参考抗体mAb Q显现都不抑制GDF15与GFRAL的结合，因为在将GDF15添加至抗体-GFRAL复合物后观察到结合信号。QUEL-0101、QUEL-0201和QUEL-0301都不与GDF15竞争结合GFRAL的观察结果表明，这些抗体经由不同的机制(如抑制RET与GDF15-GFRAL的缔合)抑制GFRAL信号传导。因此抑制了GDF15-GFRAL-RET活性信号传导复合物的形成。

与mAb Q相比，QUEL-0101、QUEL-0201和QUEL-0301中的每一个显现结合GFRAL的不同表位，因为在将mAb Q添加到抗体-GFRAL复合物后观察到结合信号。

(b)串联结合测定

串联测定是上文(a)中描述的夹心测定的替代。在串联测定中，表面结合的是抗原而不是抗体。将具有6His标签的人GFRAL捕获在固定于生物传感器芯片表面上的抗His抗体上，并且将第一抗体注射到抗原上，然后注射第二抗体。使用串联方法，将QUEL抗体分成两个表位仓(epitope bin)。与共享一个表位仓的QUEL-0101和QUEL-0301相比，QUEL-0201识别不同的表位。在该测定中所述QUEL抗体都不与mAb Q竞争(证实来自夹心测定的结果)，因此将mAb Q置于第三表位仓中。

实施例5.QUEL-0201和QUEL-0301的体内活性

对于在鼠研究中使用，QUEL-0201和QUEL-0301作为小鼠IgG1同种型而产生，即具有小鼠IgG1重链恒定区，同时保留它们的具有如本文定义的序列的人可变结构域。

使在22℃下饲养的C57BL/6小鼠接受QUEL-0201或QUEL-0301的注射，然后注射GDF15，并且监测它们的食物摄入和体重。治疗组如下：

1.在周四和周六2次注射10mg/kg QUEL-0301

2.在周四和周六2次注射10mg/kg QUEL-0201

3.在周六1次注射20mg/kg QUEL-0301

4.在周六1次注射20mg/kg QUEL-0201

5.在周四和周六2次注射同种型对照抗体

所有组在周日接受重组人GDF15的注射。

用同种型对照抗体治疗的小鼠在研究期间减少了它们的食物摄入。用抗GFRAL抗体QUEL-0201治疗的小鼠也减少了它们的食物摄入，但低于同种型对照组。用抗GFRAL抗体QUEL-0301治疗的小鼠维持它们的食物摄入。图7A。

与对食物摄入的影响一致，对照组中的小鼠显示体重下降，而用QUEL-0301治疗的小鼠显示较少的体重下降，并且用QUEL-0201治疗的小鼠显示体重未减轻。

与QUEL-0301相比，本研究中QUEL-0201的较大功效归因于其对小鼠GFRAL的较大亲和力(实施例3)。

在进一步的小鼠研究(MS15)中，我们证实了，当以每次20mg/kg的剂量在两次注射中施用时，QUEL-0201阻断了GDF15诱导的食物摄入减少和体重减轻(图8A和图8B)。

实施例6.外源性GDF15以GFRAL依赖性方式激活HPA轴

为了确定GDF15通过其后脑受体起作用是否可以增加小鼠中的皮质酮水平，我们使用抗GFRAL抗体QUEL-0201进行了实验，已经验证了其对小鼠中的经典GDF15反应的功效(MS15)(实施例5)。QUEL-0201完全阻止了GDF15诱导的皮质酮浓度，而对照同种型抗体没有影响(图9)。在研究中获得的人循环GDF15的浓度在抗GFRAL组与对照同种型之间没有差异(图10)。

因此，在有效地完全阻断GDF15对食物摄入和体重的作用的相同剂量下，抗GFRAL抗体也完全阻断了皮质酮对GDF15的反应。

实施例7.QUEL-0101的序列变体

我们基于其与QUEL-0101 VH和VL结构域的高序列同源性从免疫小鼠中分离抗体，所述抗体具有显现与QUEL-0101共有相同或平行的来自种系的进化谱系的序列。这些被称为QUEL-0102、QUEL-0103、QUEL-0104和QUEL-0105。这些克隆中的每一个都展示出与人GFRAL的结合。

实施例8.QUEL-0301的序列变体

我们基于其与QUEL-0301 VH和VL结构域的高序列同源性从免疫小鼠中分离抗体，所述抗体具有显现与QUEL-0301共有相同或平行的来自种系的进化谱系的序列。这些分别被称为QUEL-0302、QUEL-0303和QUEL-0304。这些克隆中的每一个都展示出与人GFRAL的结合。在进一步的体外初步筛选测定中确认QUEL-0304识别人GFRAL。

实施例9.GFRAL的抑制减少肌肉萎缩的生物标记物

我们分析了GDF15和抗GFRAL抗体对Mafbx、Murf1和Foxo1的表达的影响。在诱导萎缩的条件下，这些基因在骨骼肌中转录增加，使它们成为肌肉萎缩的优良标记物[52，53]。我们在此示出了，用抗GFRAL抗体QUEL-0201治疗在小鼠骨骼肌中抑制体内GDF15诱导的这些标记物中的每一种的增加，从而为GDF15抑制剂在治疗涉及骨骼肌量损失的病症(如恶病质)中的用途提供了进一步的支持。

材料与方法

使在22℃下饲养的BL6/C57小鼠每天一次腹膜内接受抗GFRAL抗体QUEL-0201(剂量为20mg/kg)或同种型对照，持续4天。在最后一次注射后次日，小鼠经由皮下注射接受人重组GDF15(0.1mg/kg，Qkine)或媒介物对照。6h后处死所有组(n＝4-5只小鼠)并且收集四种肌肉：胫骨前肌、趾长伸肌、腓肠肌、比目鱼肌。如前所述将RNA提取，纯化并且分析[49]。分析了骨骼肌萎缩的三种公认的标记物：Mafbx、Murf1和Foxo1。

结果

在分析的时间点，来自用人重组GDF15和同种型对照抗体治疗的小鼠的组织显示肌肉萎缩标记物的表达显著增加。当在用抗GFRAL抗体预治疗后给予GDF15时，在分析的任何肌肉组织中都没有观察到这种作用。图11。

参考文献

¹ Li,Zhihua,Bingwei Wang,Xuefei Wu,Shi-Yuan Cheng,Luminita Paraoan,and Jiawei Zhou.2005.‘Identification,Expression and FunctionalCharacterization of the GRAL Gene’.Journal of Neurochemistry 95(2):361–76.doi10.1111/j.1471-4159.2005.03372.x.

² Emmerson,Paul J,Feng Wang,Yong Du,Qian Liu,Richard T Pickard,Malgorzata D Gonciarz,Tamer Coskun,et al.2017.‘The Metabolic Effects of GDF15Are Mediated by the Orphan Receptor GFRAL’.Nature Medicine 23(10):1215–19.doi10.1038/nm.4393

³ Hsu,Jer-Yuan,Suzanne Crawley,Michael Chen,Dina A.Ayupova,DarrinA.Lindhout,Jared Higbee,Alan Kutach,et al.2017.‘Non-Homeostatic Body WeightRegulation through a Brainstem-Restricted Receptor for GDF15’.Nature 550(7675):255–59.doi 10.1038/nature24042 and see also Hsu,et al.(2017).Erratum.Nature 551,398

⁴ Mullican,Shannon E,Xiefan Lin-Schmidt,Chen-Ni Chin,Jose A Chavez,Jennifer L Furman,Anthony A Armstrong,Stephen C Beck,et al.2017.‘GFRAL Is theReceptor for GDF15 and the Ligand Promotes Weight Loss in Mice and NonhumanPrimates’.Nature Medicine 23(10):1150–57.doi 10.1038/nm.4392

⁵ Yang,Linda,Chih-Chuan Chang,Zhe Sun,Dennis Madsen,Haisun Zhu,BXiaoai Wu,et al.2017.‘GFRAL Is the Receptor for GDF15 and Is Requiredfor the Anti-Obesity Effects of the Ligand’.Nature Medicine 23(10):1158–66.doi 10.1038/nm.4394

⁶ Xiong,Yumei,Kenneth Walker,Xiaoshan Min,Clarence Hale,ThanhvienTran,Renee Komorowski,Jerry Yang,et al.2017.‘Long-Acting MIC-1/GDF15Molecules to Treat Obesity:Evidence from Mice to Monkeys’.ScienceTranslational Medicine 9(412)doi 10.1126/scitranslmed.aan8732

⁷ Hsiao,Edward C.,Leonidas G.Koniaris,Teresa Zimmers-Koniaris,SuzanneM.Sebald,Thanh V.Huynh,and Se-Jin Lee.2000.‘Characterization of Growth-Differentiation Factor 15,a Transforming Growth FactorβSuperfamily MemberInduced Following Liver Injury’.Molecular and Cellular Biology 20(10):3742–3751

⁸ Park,H.,Kim,C.H.,Jeong,J.H.,Park,M.,and Kim,K.S.(2016).GDF15contributes to radiation-induced senescence through the ROS-mediated p16pathway in human endothelial cells.Oncotarget 7,9634-9644

⁹ Zheng,H.,Wu,Y.,Guo,T.,Liu,F.,Xu,Y.,and Cai,S.(2020).Hypoxia InducesGrowth Differentiation Factor 15to Promote the Metastasis of ColorectalCancer via PERK-eIF2alpha Signaling.Biomed Res Int 2020,5958272

¹⁰ Abulizi,Palida,Neruja Loganathan,Duo Zhao,Tina Mele,Yixin Zhang,Terry Zwiep,Kexiang Liu,and Xiufen Zheng.2017.‘Growth Differentiation Factor-15 Deficiency Augments Inflammatory Response and Exacerbates Septic Heart andRenal Injury Induced by Lipopolysaccharide’.Scientific Reports 7(1):1037.doi10.1038/s41598-017-00902-5

¹¹ Johnen,Heiko,Shu Lin,Tamara Kuffner,David A Brown,Vicky Wang-WeiTsai,Asne R Bauskin,Liyun Wu,et al.2007.‘Tumor-Induced Anorexia and WeightLoss Are Mediated by the TGF-βSuperfamily Cytokine MIC-1’.Nature Medicine 13(11):1333–40.doi 10.1038/nm1677

¹² Brown,David A.,John Moore,Heiko Johnen,Tom J.Smeets,Asne R.Bauskin,Tamara Kuffner,Helen Weedon,et al.2007.‘Serum Macrophage Inhibitory Cytokine1in Rheumatoid Arthritis:A Potential Marker of Erosive Joint Destruction’.Arthritis&Rheumatism 56(3):753–64.doi 10.1002/art.22410

¹³ Breit,Samuel N.,Juan J.Carrero,Vicky Wang-Wei Tsai,NasreenYagoutifam,Wei Luo,Tamara Kuffner,Asne R.Bauskin,et al.2012.‘MacrophageInhibitory Cytokine-1(MIC-1/GDF15)and Mortality in End-Stage Renal Disease’.Nephrology Dialysis Transplantation 27(1):70–75.doi 10.1093/ndt/gfr575

¹⁴ Ruparelia,Neil,Joshua T.Chai,Edward A.Fisher,and RobinP.Choudhury.2017.‘Inflammatory Processes in Cardiovascular Disease:A Route toTargeted Therapies’.Nature Reviews Cardiology 14(3):133–44.doi 10.1038/nrcardio.2016.185

¹⁵ Hesselink,Matthijs K.C.,Vera Schrauwen-Hinderling,and PatrickSchrauwen.2016.‘Skeletal Muscle Mitochondria as a Target to Prevent or TreatType 2 Diabetes Mellitus’.Nature Reviews Endocrinology 12(11):633–45.doi10.1038/nrendo.2016.104

¹⁶ Okazaki,Ryuji,Yuseok Moon,Toshiyuki Norimura,and Thomas Eling.2006.‘Ionizing Radiation Enhances the Expression of the Nonsteroidal Anti-Inflammatory Drug-Activated Gene(NAG1)by Increasing the Expression of TP53 inHuman Colon Cancer Cells’.Radiation Research 165(2):125–30.doi 10.1667/RR3492.1

¹⁷ Moritake,Takashi,Hidetoshi Fujita,Mitsuru Yanagisawa,MiyakoNakawatari,Kaori Imadome,Etsuko Nakamura,Mayumi Iwakawa,and TakashiImai.2012.‘Strain-Dependent Damage in Mouse Lung After Carbon IonIrradiation’.International Journal of Radiation Oncology*Biology*Physics 84(1):e95–102.doi 10.1016/j.ijrobp.2012.02.013

¹⁸ Tsai,Vicky Wang-Wei,Laurence Macia,Heiko Johnen,Tamara Kuffner,Rakesh Manadhar,Sebastian BeckKa Ki Michelle Lee-Ng,et al.2013.‘TGF-bSuperfamily Cytokine MIC-1/GDF15 Is a Physiological Appetite and Body WeightRegulator’.Edited by Christopher Morrison.PLoS ONE 8(2):e55174.doi 10.1371/journal.pone.0055174

¹⁹ Fearon,Kenneth,Florian Strasser,Stefan D Anker,Ingvar Bosaeus,Eduardo Bruera,Robin L Fainsinger,Aminah Jatoi,et al.2011.‘Definition andClassification of Cancer Cachexia:An International Consensus’.The LancetOncology 12(5):489–95.doi 10.1016/S1470-2045(10)70218-7

²⁰ Anker,Markus S.,Richard Holcomb,Maurizio Muscaritoli,Stephan vonHaehling,Wilhelm Haverkamp,Aminah Jatoi,John E.Morley,et al.2019.‘OrphanDisease Status of Cancer Cachexia in the USA and in the European Union:ASystematic Review’.Journal of Cachexia,Sarcopenia and Muscle 10(1):22–34.doi10.1002/jcsm.12402

²¹ Zhou,Ting,Bangyan Wang,Huiquan Liu,Kaixiang Yang,Sudip Thapa,HaowenZhang,Lu Li,and Shiying Yu.2018.‘Development and Validation of a ClinicallyApplicable Score to Classify Cachexia Stages in Advanced Cancer Patients’.Journal of Cachexia,Sarcopenia and Muscle 9(2):306–14 doi 10.1002/jcsm.12275

²² Bourgeois,Brianna,Bo Fan,Neil Johannsen,Maria Cristina Gonzalez,Bennett K.Ng,Markus J.Sommer,John A.Shepherd,and Steven B.Heymsfield.2019.‘Improved Strength Prediction Combining Clinically Available Measures ofSkeletal Muscle Mass and Quality’.Journal of Cachexia,Sarcopenia and Muscle10(1):84–94.doi 10.1002/jcsm.12353

²³ Senesse,Pierre,Eric Assenat,Stéphane Schneider,Cyrus Chargari,Nicolas Magné,David Azria,and Xavier Hébuterne.2008.‘Nutritional Supportduring Oncologic Treatment of Patients with Gastrointestinal Cancer:Who CouldBenefit？’Cancer Treatment Reviews 34(6):568–75.doi 10.1016/j.ctrv.2008.03.003

²⁴ Lerner,Lorena,Teresa G Hayes,Nianjun Tao,Brian Krieger,Bin Feng,Zhenhua Wu,Richard Nicoletti,M Isabel Chiu,Jeno Gyuris,and Jose MGarcia.2015.‘Plasma Growth Differentiation Factor 15 Is Associated withWeight Loss and Mortality in Cancer Patients’.Journal of Cachexia,Sarcopeniaand Muscle 6(4):317–24.doi 10.1002/jcsm.12033

²⁵ Rocha,Ilanna Marques Gomes da,Aline Marcadenti,Galtieri OtávioCunha de Medeiros,Ricardo Andrade Bezerra,Juliana Florinda deRego,Maria Cristina Gonzalez,and Ana Paula Trussardi Fayh.2019.‘Is CachexiaAssociated with Chemotherapy Toxicities in Gastrointestinal Cancer Patients？AProspective Study’.Journal of Cachexia,Sarcopenia and Muscle 10(2):445–54.doi10.1002/jcsm.12391

²⁶ Nicolini,Andrea,Paola Ferrari,Maria Chiara Masoni,Milena Fini,Stefania Pagani,Ottavio Giampietro,and Angelo Carpi.2013.‘Malnutrition,Anorexia and Cachexia in Cancer Patients:A Mini-Review on Pathogenesis andTreatment’.Biomedicine&Pharmacotherapy 67(8):807–17.doi 10.1016/j.biopha.2013.08.005

²⁷ Baracos,Vickie E.,Lisa Martin,Murray Korc,Denis C.Guttridge,andKenneth C.H.Fearon.2018.‘Cancer-Associated Cachexia’.Nature Reviews DiseasePrimers 4(1):1–18 doi 10.1038/nrdp.2017.105

²⁸ Pausch,Thomas,Werner Hartwig,Ulf Hinz,Thomas Swolana,BogotaD.Bundy,Thilo Hackert,Lars Grenacher,Markus W.Büchler,and Jens Werner.2012.‘Cachexia but Not Obesity Worsens the Postoperative Outcome afterPancreatoduodenectomy in Pancreatic Cancer’.Surgery,Topics in PancreaticSurgery:A Festschrift Honoring Andrew L.Warshaw,152(3,Supplement):S81–88.doi10.1016/j.surg.2012.05.028

²⁹ Bo,Yacong,Mingjie Yao,Ling Zhang,Wolde Bekalo,Weiquan Lu,andQuanjun Lu.2015.‘Preoperative Nutritional Risk Index to Predict PostoperativeSurvival Time in Primary Liver Cancer Patients’.Asia Pacific Journal ofClinical Nutrition 24(4):591–97.doi 10.6133/apjcn.2015.24.4.26

³⁰ Lerner,Lorena,Julie Tao,Qing Liu,Richard Nicoletti,Bin Feng,BrianKrieger,Elizabeth Mazsa,et al.2016.‘MAP3K11/GDF15 Axis Is a Critical Driverof Cancer Cachexia’.Journal of Cachexia,Sarcopenia and Muscle 7(4):467–822016 doi 10.1002/jcsm.12077

³¹ Tsai,Vicky W.W.,Yasmin Husaini,Rakesh Manandhar,K.K.Michelle Lee-Ng,Hong Ping Zhang,Kate Harriott,Lele Jiang,et al.2012.‘Anorexia/Cachexia ofChronic Diseases:A Role for the TGF-βFamily Cytokine MIC-1/GDF15’.Journal ofCachexia,Sarcopenia and Muscle 3(4):239–43.doi 10.1007/s13539-012-0082-6

³² Suriben,Rowena,Michael Chen,Jared Higbee,Julie Oeffinger,RichardVentura,Betty Li,Kalyani Mondal,et al.2020.‘Antibody-Mediated Inhibition ofGDF15–GFRAL Activity Reverses Cancer Cachexia in Mice’.Nature Medicine 26(8):1264–70.doi 10.1038/s41591-020-0945-x

³³ Macia,Laurence,Vicky Wang-Wei Tsai,Amy D.Nguyen,Heiko Johnen,TamaraKuffner,Yan-Chuan Shi,Shu Lin,et al.2012.‘Macrophage Inhibitory Cytokine 1(MIC-1/GDF15)Decreases Food Intake,Body Weight and Improves Glucose Tolerancein Mice on Normal&Obesogenic Diets’.Edited by Marcia B.Aguila.PLoS ONE 7(4):e34868 2012 doi 10.1371/journal.pone.0034868

³⁴ Borner,Tito,Myrtha Arnold,Johan Ruud,Samuel N.Breit,WolfgangLanghans,Thomas A.Lutz,Anders Blomqvist,and Thomas Riediger.2017.‘Anorexia-cachexia Syndrome in Hepatoma Tumour-bearing Rats Requires the Area Postremabut Not Vagal Afferents and Is Paralleled by Increased MIC-1/GDF15’.Journalof Cachexia,Sarcopenia and Muscle 8(3):417–27.doi 10.1002/jcsm.12169

³⁵ Tito Borner,Evan D.Shaulson,Misgana Y.Ghidewon,and Bart C.DeJonghe.2020.‘GDF15 Induces Anorexia through Nausea and Emesis’.Cell Metab,February.doi 10.1016/j.cmet.2019.12.004

³⁶ Fejzo,Marlena S.,Olga V.Sazonova,J.Fah Sathirapongsasuti,IngileifB.Hallgrímsdóttir,Vladimir Vacic,Kimber W.MacGibbon,Frederic P.Schoenberg,etal.2018.‘Placenta and Appetite Genes GDF15and IGFBP7 Are Associated withHyperemesis Gravidarum’.Nature Communications 9(1).doi 10.1038/s41467-018-03258-0

³⁷ Rasmuson T,et al Increased serum cortisol levels are associatedwith high tumour grade in patients with renal cell carcinoma.ActaOncol2001；40:83-87

³⁸ Drott C et al.Increased urinary excretion of cortisol andcatecholamines in malnourished cancer patients.Ann Surg 1988；208:645/50.27

³⁹ Schaur R J,et al.Tumor host relations.II.Influence of tumor extentand tumor site on plasma cortisol of patients with malignant diseases.JCancer Res Clin Oncol1979；93:287/92

⁴⁰ Herman,J.P.,McKlveen,J.M.,Ghosal,S.,Kopp,B.,Wulsin,A.,Makinson,R.,Scheimann,J.,and Myers,B.(2016).Regulation of the Hypothalamic-Pituitary-Adrenocortical Stress Response.Compr Physiol 6,603-621

⁴¹ Turnbull,A.V.,and Rivier,C.L.(1999).Regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis by cytokines:actions and mechanisms of action.PhysiolRev 79,1-71

⁴² Lockhart,S.M.,Saudek,V.,and O'Rahilly,S.(2020).GDF15:A HormoneConveying Somatic Distress to the Brain.Endocr Rev 41

⁴³ Shimada,K.,and Mitchison,T.J.(2019).Unsupervised identification ofdisease states from high-dimensional physiological and histopathologicalprofiles.Mol Syst Biol 15,e8636

⁴⁴ Breit,S.N.,Brown,D.A.,and Tsai,V.W.(2020).The GDF15-GFRAL Pathwayin Health and Metabolic Disease:Friend or Foe？Annu Rev Physiol

⁴⁵ Akiyama,Y.,Yoshimura,M.,Ueno,H.,Sanada,K.,Tanaka,K.,Sonoda,S.,Nishimura,H.,Nishimura,K.,Motojima,Y.,Saito,R.,et al.(2020).Peripherallyadministered cisplatin activates a parvocellular neuronal subtype expressingarginine vasopressin and enhanced green fluorescent protein in theparaventricular nucleus of a transgenic rat.J Physiol Sci 70,35

⁴⁶ Kenward,H.,Pelligand,L.,and Elliott,J.(2014).Assessment of low-dosecisplatin as a model of nausea and emesis in beagle dogs,potential forrepeated administration.Exp Brain Res 232,2685-2697

⁴⁷ Breen,D.M.,Kim,H.,Bennett,D.,Calle,R.A.,Collins,S.,Esquejo,R.M.,He,T.,Joaquim,S.,Joyce,A.,Lambert,M.,et al.(2020).GDF-15 NeutralizationAlleviates Platinum-Based Chemotherapy-Induced Emesis,Anorexia,and WeightLoss in Mice and Nonhuman Primates.Cell Metab 32,938-950 e936

⁴⁸ Kim,K.H.,Kim,S.H.,Han,D.H.,Jo,Y.S.,Lee,Y.H.,and Lee,M.S.(2018).Growth differentiation factor 15 ameliorates nonalcoholic steatohepatitisand related metabolic disorders in mice.Sci Rep 8,6789

⁴⁹ Patel,S.,Alvarez-Guaita,A.,Melvin,A.,Rimmington,D.,Dattilo,A.,Miedzybrodzka,E.L.,Cimino,I.,Maurin,A.C.,Roberts,G.P.,Meek,C.L.,et al.(2019).GDF15 Provides an Endocrine Signal of Nutritional Stress in Mice andHumans.Cell Metab 29,707-718 e708

⁵⁰ Lin CL,Wu TJ,Machacek DA,et al.1997 Urine free cortisol andcortisone determined by high performance liquid chromatography in thediagnosis of Cushing syndrome.J Clin Endocrinol Metab.82:151–155

⁵¹ Tsai et al PLOS ONE 10,e0133362..doi:10.1371/journal.pone.0133362

⁵² Bodine SC,Baehr LM.Am J Physiol Endocrinol Metab.2014 Sep 15；307(6):E469-84

⁵³ Obayu et al.,FASEB J.2022 Feb；36(2):e22152.doi:10.1096/fj.202101385RR

序列信息

表A

下表A示出了本说明书中描述的抗体的可变结构域序列。所有QUEL VH结构域、QUEL VL结构域、QUEL CDR、QUEL重链和QUEL轻链、包含它们的抗体以及它们的编码核酸代表本发明的实施方案。

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

下表G2示出了具有对应于QUEL-0101、QUEL-0201和QUEL-0301的种系v和j框架区的可变结构域。

本发明的抗体任选地包含具有如本文所示的种系残基的框架区。

/>

序列表

<110> 剑桥企业有限公司

凯玛布有限公司

<120> GDF15信号传导的治疗性抑制剂

<130> BET 22P1082

<150> GB2104556.2

<151> 2021-03-31

<150> GB2107331.7

<151> 2021-05-21

<150> GB2108170.8

<151> 2021-06-08

<160> 146

<170> PatentIn 3.5版

<210> 1

<211> 388

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0101 VH结构域核苷酸

<400> 1

caggttcaac tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cgccttcaat aactatggca tgcactgggt ccgccagggt 120

ccaggcaggg ggctggaatg ggtggctatt atatcatatg atggaacaac tcaatactct 180

gtagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgttgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag aactgaggac acggctctat attactgtgc gaaagaggcg 300

ggggatttct atggttcggg gaattatggg taccacaagt atggtttgga cgtctggggc 360

caagggacca cggtcaccgt ctcctcag 388

<210> 2

<211> 129

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0101 VH结构域氨基酸

<400> 2

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ala Phe Asn Asn Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Gly Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ile Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Thr Gln Tyr Ser Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Glu Ala Gly Asp Phe Tyr Gly Ser Gly Asn Tyr Gly Tyr His

100 105 110

Lys Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

115 120 125

Ser

<210> 3

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0101 HCDR1

<400> 3

Gly Phe Ala Phe Asn Asn Tyr Gly

1 5

<210> 4

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0101 HCDR2

<400> 4

Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Thr Gln

1 5

<210> 5

<211> 22

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0101 HCDR3, QUEL-0103 HCDR3

<400> 5

Ala Lys Glu Ala Gly Asp Phe Tyr Gly Ser Gly Asn Tyr Gly Tyr His

1 5 10 15

Lys Tyr Gly Leu Asp Val

20

<210> 6

<211> 322

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0101 VL结构域核苷酸

<400> 6

Gly Ala Cys Ala Thr Cys Cys Ala Gly Ala Thr Gly Ala Cys Cys Cys

1 5 10 15

Ala Gly Thr Cys Thr Cys Cys Ala Thr Cys Cys Thr Cys Cys Cys Thr

20 25 30

Gly Thr Cys Thr Gly Cys Ala Thr Cys Thr Gly Thr Ala Gly Gly Ala

35 40 45

Gly Ala Cys Ala Gly Ala Gly Thr Cys Ala Cys Cys Ala Thr Cys Ala

50 55 60

Cys Thr Thr Gly Cys Cys Gly Gly Gly Cys Gly Ala Gly Thr Cys Ala

65 70 75 80

Gly Gly Ala Cys Ala Thr Thr Ala Gly Cys Ala Ala Thr Thr Ala Thr

85 90 95

Thr Thr Ala Gly Cys Cys Thr Gly Gly Thr Ala Thr Cys Ala Gly Cys

100 105 110

Ala Gly Ala Ala Gly Cys Cys Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Ala Thr

115 120 125

Thr Cys Cys Thr Ala Ala Gly Cys Thr Cys Cys Thr Gly Ala Thr Cys

130 135 140

Thr Ala Thr Gly Cys Thr Gly Cys Ala Thr Cys Cys Ala Cys Thr Thr

145 150 155 160

Thr Gly Cys Ala Ala Thr Cys Ala Gly Gly Gly Gly Thr Cys Cys Cys

165 170 175

Ala Thr Cys Thr Cys Gly Gly Thr Thr Cys Ala Gly Thr Gly Gly Cys

180 185 190

Ala Gly Thr Gly Gly Ala Thr Cys Thr Gly Gly Gly Ala Cys Ala Gly

195 200 205

Ala Thr Thr Thr Cys Ala Cys Thr Cys Thr Cys Ala Cys Cys Ala Thr

210 215 220

Cys Ala Gly Cys Ala Gly Cys Cys Thr Gly Cys Ala Gly Cys Cys Thr

225 230 235 240

Gly Ala Ala Gly Ala Thr Gly Thr Thr Gly Cys Ala Ala Gly Thr Thr

245 250 255

Ala Thr Thr Ala Cys Thr Gly Thr Cys Ala Ala Ala Ala Ala Thr Ala

260 265 270

Thr Ala Gly Cys Ala Gly Thr Gly Cys Cys Cys Cys Gly Cys Thr Cys

275 280 285

Ala Cys Thr Thr Thr Cys Gly Gly Cys Gly Gly Ala Gly Gly Gly Ala

290 295 300

Cys Cys Ala Ala Gly Gly Thr Gly Gly Ala Gly Ala Thr Cys Ala Ala

305 310 315 320

Ala Cys

<210> 7

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0101 VL结构域氨基酸

<400> 7

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ile Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Ser Ser Ala Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 8

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0101 LCDR1, QUEL-0102 LCDR1, QUEL-0103 LCDR1, QUEL-0104

LCDR1, QUEL-0105 LCDR1

<400> 8

Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

1 5

<210> 9

<400> 9

000

<210> 10

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0101 LCDR3

<400> 10

Gln Lys Tyr Ser Ser Ala Pro Leu Thr

1 5

<210> 11

<211> 373

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0201 VH结构域核苷酸

<400> 11

caggtccagc ttgtgcagtc tggggctgag gtgaaggagc ctggggcctc agtgagggtt 60

tcctgtaagg cttctggata caccttcatt agtcacgcta tacattgggt gcgccaggcc 120

cccggacaaa gacttgagtg gatgggatgg atcaacgctg tcaatggaaa cacaaaatat 180

tcacagaagt tccaggacag agtcaccttt accagggaca catccgcgag cacagcctac 240

atggacctga acagcctgag agctgaagac acggctcttt attactgtgc gagagaggga 300

tacacctatg gtgtccacta ctcgtacggt atggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360

accgtctcgt cag 373

<210> 12

<211> 124

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0201 VH结构域氨基酸

<400> 12

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Glu Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Arg Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Ser His

20 25 30

Ala Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Ala Val Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Asp Arg Val Thr Phe Thr Arg Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Asp Leu Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Gly Tyr Thr Tyr Gly Val His Tyr Ser Tyr Gly Met Asp

100 105 110

Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 13

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0201 HCDR1

<400> 13

Gly Tyr Thr Phe Ile Ser His Ala

1 5

<210> 14

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0201 HCDR2

<400> 14

Ile Asn Ala Val Asn Gly Asn Thr

1 5

<210> 15

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0201 HCDR3

<400> 15

Ala Arg Glu Gly Tyr Thr Tyr Gly Val His Tyr Ser Tyr Gly Met Asp

1 5 10 15

Val

<210> 16

<211> 337

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0201 VL结构域核苷酸

<400> 16

cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60

tcctgcactg ggagcagttc caatatcggg gcaggttatg atgtacactg gtaccagcag 120

cttccaggaa cagtcctcaa actcctcatt tatggtaaca acaatcggcc ctcaggggtc 180

cctgaccgat tctctggctc caactctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240

cagcctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acagcagcct gagtggttat 300

tgggtgttcg gcggagggac caagctgacc gtcctag 337

<210> 17

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0201 VL结构域氨基酸

<400> 17

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly

20 25 30

Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Val Leu Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Tyr Gly Asn Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Asn Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu

65 70 75 80

Gln Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser

85 90 95

Leu Ser Gly Tyr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 18

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0201 LCDR1

<400> 18

Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp

1 5

<210> 19

<400> 19

000

<210> 20

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0201 LCDR3

<400> 20

Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Ser Gly Tyr Trp Val

1 5 10

<210> 21

<211> 355

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0301 VH结构域核苷酸

<400> 21

gaggtgcaac tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgcgcag cttctggatt cacctttagt aactcttgga tgaactgggt ccgccagact 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaat atagaccaag atggagatca gaaatactat 180

gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtct attactgtgc gagagaaata 300

actggaacta catttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctcag 355

<210> 22

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0301 VH结构域氨基酸

<400> 22

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Ser

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Thr Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Asn Ile Asp Gln Asp Gly Asp Gln Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Ile Thr Gly Thr Thr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 23

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0301 HCDR1, QUEL-0302 HCDR1

<400> 23

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Ser Trp

1 5

<210> 24

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0301 HCDR2

<400> 24

Ile Asp Gln Asp Gly Asp Gln Lys

1 5

<210> 25

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0301 HCDR3

<400> 25

Ala Arg Glu Ile Thr Gly Thr Thr Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 26

<211> 331

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0301 VL结构域核苷酸

<400> 26

cagtctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatattg taaactggta ccagcaactc 120

ccaggaacgg cccccaaact cctcatctct agtaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttactgtaca acatgggatg acagcctgga tggtccggtg 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtcctg g 331

<210> 27

<211> 110

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0301 VL结构域氨基酸

<400> 27

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Ile Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Ser Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Thr Thr Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asp Gly Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 28

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0301 LCDR1

<400> 28

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Ile

1 5

<210> 29

<400> 29

000

<210> 30

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0301 LCDR3

<400> 30

Thr Thr Trp Asp Asp Ser Leu Asp Gly Pro Val

1 5 10

<210> 31

<211> 394

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(394)

<223> 人GFRAL

<400> 31

Met Ile Val Phe Ile Phe Leu Ala Met Gly Leu Ser Leu Glu Asn Glu

1 5 10 15

Tyr Thr Ser Gln Thr Asn Asn Cys Thr Tyr Leu Arg Glu Gln Cys Leu

20 25 30

Arg Asp Ala Asn Gly Cys Lys His Ala Trp Arg Val Met Glu Asp Ala

35 40 45

Cys Asn Asp Ser Asp Pro Gly Asp Pro Cys Lys Met Arg Asn Ser Ser

50 55 60

Tyr Cys Asn Leu Ser Ile Gln Tyr Leu Val Glu Ser Asn Phe Gln Phe

65 70 75 80

Lys Glu Cys Leu Cys Thr Asp Asp Phe Tyr Cys Thr Val Asn Lys Leu

85 90 95

Leu Gly Lys Lys Cys Ile Asn Lys Ser Asp Asn Val Lys Glu Asp Lys

100 105 110

Phe Lys Trp Asn Leu Thr Thr Arg Ser His His Gly Phe Lys Gly Met

115 120 125

Trp Ser Cys Leu Glu Val Ala Glu Ala Cys Val Gly Asp Val Val Cys

130 135 140

Asn Ala Gln Leu Ala Ser Tyr Leu Lys Ala Cys Ser Ala Asn Gly Asn

145 150 155 160

Pro Cys Asp Leu Lys Gln Cys Gln Ala Ala Ile Arg Phe Phe Tyr Gln

165 170 175

Asn Ile Pro Phe Asn Ile Ala Gln Met Leu Ala Phe Cys Asp Cys Ala

180 185 190

Gln Ser Asp Ile Pro Cys Gln Gln Ser Lys Glu Ala Leu His Ser Lys

195 200 205

Thr Cys Ala Val Asn Met Val Pro Pro Pro Thr Cys Leu Ser Val Ile

210 215 220

Arg Ser Cys Gln Asn Asp Glu Leu Cys Arg Arg His Tyr Arg Thr Phe

225 230 235 240

Gln Ser Lys Cys Trp Gln Arg Val Thr Arg Lys Cys His Glu Asp Glu

245 250 255

Asn Cys Ile Ser Thr Leu Ser Lys Gln Asp Leu Thr Cys Ser Gly Ser

260 265 270

Asp Asp Cys Lys Ala Ala Tyr Ile Asp Ile Leu Gly Thr Val Leu Gln

275 280 285

Val Gln Cys Thr Cys Arg Thr Ile Thr Gln Ser Glu Glu Ser Leu Cys

290 295 300

Lys Ile Phe Gln His Met Leu His Arg Lys Ser Cys Phe Asn Tyr Pro

305 310 315 320

Thr Leu Ser Asn Val Lys Gly Met Ala Leu Tyr Thr Arg Lys His Ala

325 330 335

Asn Lys Ile Thr Leu Thr Gly Phe His Ser Pro Phe Asn Gly Glu Val

340 345 350

Ile Tyr Ala Ala Met Cys Met Thr Val Thr Cys Gly Ile Leu Leu Leu

355 360 365

Val Met Val Lys Leu Arg Thr Ser Arg Ile Ser Ser Lys Ala Arg Asp

370 375 380

Pro Ser Pro Ile Gln Ile Pro Gly Glu Leu

385 390

<210> 32

<211> 393

<212> PRT

<213> 小家鼠 (Mus musculus)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(393)

<223> 小鼠GFRAL

<400> 32

Met Leu Val Phe Ile Phe Leu Ala Val Thr Leu Ser Ser Glu Asn Glu

1 5 10 15

Ser Ser Ser Gln Thr Asn Asp Cys Ala His Leu Ile Gln Lys Cys Leu

20 25 30

Ile Asp Ala Asn Gly Cys Glu Gln Ser Trp Arg Ser Met Glu Asp Thr

35 40 45

Cys Leu Thr Pro Gly Asp Ser Cys Lys Ile Asn Asn Ser Leu His Cys

50 55 60

Asn Leu Ser Ile Gln Ala Leu Val Glu Lys Asn Phe Gln Phe Lys Glu

65 70 75 80

Cys Leu Cys Met Asp Asp Leu His Cys Thr Val Asn Lys Leu Phe Gly

85 90 95

Lys Lys Cys Thr Asn Lys Thr Asp Asn Met Glu Lys Asp Asn Lys Asp

100 105 110

Lys Trp Asn Leu Thr Thr Thr Pro Phe Tyr His Gly Phe Lys Gln Met

115 120 125

Gln Ser Cys Leu Glu Val Thr Glu Ala Cys Val Gly Asp Val Val Cys

130 135 140

Asn Ala Gln Leu Ala Leu Tyr Leu Lys Ala Cys Ser Ala Asn Gly Asn

145 150 155 160

Leu Cys Asp Val Lys His Cys Gln Ala Ala Ile Arg Phe Phe Tyr Gln

165 170 175

Asn Met Pro Phe Asn Thr Ala Gln Met Leu Ala Phe Cys Asp Cys Ala

180 185 190

Gln Ser Asp Ile Pro Cys Gln Gln Ser Lys Glu Thr Leu His Ser Lys

195 200 205

Pro Cys Ala Leu Asn Ile Val Pro Pro Pro Thr Cys Leu Ser Val Ile

210 215 220

His Thr Cys Arg Asn Asp Glu Leu Cys Arg Thr His Tyr Arg Thr Phe

225 230 235 240

Gln Thr Glu Cys Trp Pro His Ile Thr Gly Lys Cys His Glu Asp Glu

245 250 255

Thr Cys Ile Ser Met Leu Gly Lys Gln Asp Leu Thr Cys Ser Gly Ser

260 265 270

Glu Ser Cys Arg Ala Ala Phe Leu Gly Thr Phe Gly Thr Val Leu Gln

275 280 285

Val Pro Cys Ala Cys Arg Gly Val Thr Gln Ala Glu Glu His Val Cys

290 295 300

Met Ile Phe Gln His Met Leu His Ser Lys Ser Cys Phe Asn Tyr Pro

305 310 315 320

Thr Pro Asn Val Lys Asp Ile Ser Ser Tyr Glu Lys Lys Asn Ser Lys

325 330 335

Glu Ile Thr Leu Thr Gly Phe Asn Ser Phe Phe Asn Gly Glu Leu Leu

340 345 350

Tyr Val Val Val Cys Met Ala Val Thr Cys Gly Ile Leu Phe Leu Val

355 360 365

Met Leu Lys Leu Arg Ile Gln Ser Glu Lys Arg Asp Pro Ser Ser Ile

370 375 380

Glu Ile Ala Gly Gly Val Ile Ile Gln

385 390

<210> 33

<211> 990

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(990)

<223> 人重链恒定区 (IGHG1*01) 核苷酸序列

<400> 33

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60

ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240

tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 300

aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 360

ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420

gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480

tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540

agcacgtacc gggtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600

gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660

aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag 720

ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780

gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840

ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900

cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960

cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa 990

<210> 34

<211> 330

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(330)

<223> 人重链恒定区 (IGHG1*01) 蛋白质序列

(P01857)

<400> 34

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1 5 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

100 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

165 170 175

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

180 185 190

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

210 215 220

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu

225 230 235 240

Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

245 250 255

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

290 295 300

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325 330

<210> 35

<211> 990

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(990)

<223> 人重链恒定区 (IGHG1*02或IGHG1*05)

核苷酸序列

<400> 35

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60

ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240

tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 300

aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 360

ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420

gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480

tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540

agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600

gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660

aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag 720

ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780

gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840

ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900

cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960

cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa 990

<210> 36

<211> 330

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(330)

<223> 人重链恒定区 (IGHG1*02) 蛋白质序列

<400> 36

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1 5 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

100 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

165 170 175

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

180 185 190

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

210 215 220

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu

225 230 235 240

Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

245 250 255

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

290 295 300

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325 330

<210> 37

<211> 990

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(990)

<223> 人重链恒定区 (IGHG1*03) 核苷酸序列

(Y14737)

<400> 37

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60

ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240

tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagccc 300

aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 360

ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420

gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480

tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540

agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600

gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660

aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 720

atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780

gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840

ctggactccg acggctcctt cttcctctat agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900

cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960

cagaagagcc tctccctgtc cccgggtaaa 990

<210> 38

<211> 330

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(330)

<223> 人重链恒定区 (IGHG1*03) 蛋白质序列

<400> 38

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1 5 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

100 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

165 170 175

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

180 185 190

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

210 215 220

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

225 230 235 240

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

245 250 255

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

290 295 300

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325 330

<210> 39

<211> 990

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> 人重链恒定区 (IGHG1*04) 核苷酸序列

<400> 39

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60

ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240

tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 300

aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 360

ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420

gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480

tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540

agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600

gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660

aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag 720

ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780

gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840

ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900

cagcagggga acatcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960

cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa 990

<210> 40

<211> 330

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(330)

<223> 人重链恒定区 (IGHG1*04) 蛋白质序列

<400> 40

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1 5 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

100 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

165 170 175

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

180 185 190

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

210 215 220

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu

225 230 235 240

Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

245 250 255

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

290 295 300

Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325 330

<210> 41

<211> 990

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 失能的人IGHG1*01重链恒定区核苷酸

序列。

<400> 41

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60

ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240

tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agtggagccc 300

aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cgcgggggca 360

ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420

gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480

tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540

agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600

gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660

aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag 720

ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780

gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840

ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900

cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960

cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa 990

<210> 42

<211> 330

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 失能的人IGHG1*01重链恒定区氨基酸

序列。

<400> 42

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1 5 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

100 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Ala Gly Ala Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

165 170 175

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

180 185 190

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

210 215 220

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu

225 230 235 240

Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

245 250 255

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

290 295 300

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325 330

<210> 43

<211> 978

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(978)

<223> 人重链恒定区 (IGHG2*01或IGHG2*03或

IGHG2*05) 核苷酸序列

<400> 43

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60

agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgctctgac cagcggcgtg cacaccttcc cagctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcaacttcgg cacccagacc 240

tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagac agttgagcgc 300

aaatgttgtg tcgagtgccc accgtgccca gcaccacctg tggcaggacc gtcagtcttc 360

ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 420

gtggtggtgg acgtgagcca cgaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggacggc 480

gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagcca cgggaggagc agttcaacag cacgttccgt 540

gtggtcagcg tcctcaccgt tgtgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 600

aaggtctcca acaaaggcct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa aaccaaaggg 660

cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggaggagat gaccaagaac 720

caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 780

gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacac ctcccatgct ggactccgac 840

ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac 900

gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc 960

tccctgtctc cgggtaaa 978

<210> 44

<211> 326

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(326)

<223> 人重链恒定区 (IGHG2*01) 蛋白质序列

<400> 44

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

115 120 125

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

130 135 140

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145 150 155 160

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn

165 170 175

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp

180 185 190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro

195 200 205

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu

210 215 220

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn

225 230 235 240

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

245 250 255

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

260 265 270

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

275 280 285

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

290 295 300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

305 310 315 320

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325

<210> 45

<211> 978

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(978)

<223> 人重链恒定区 (IGHG2*02) 核苷酸序列

<400> 45

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgctctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgacctcca gcaacttcgg cacccagacc 240

tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagac agttgagcgc 300

aaatgttgtg tcgagtgccc accgtgccca gcaccacctg tggcaggacc gtcagtcttc 360

ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 420

gtggtggtgg acgtgagcca cgaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggacggc 480

atggaggtgc ataatgccaa gacaaagcca cgggaggagc agttcaacag cacgttccgt 540

gtggtcagcg tcctcaccgt cgtgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 600

aaggtctcca acaaaggcct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa aaccaaaggg 660

cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggaggagat gaccaagaac 720

caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 780

gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacac ctcccatgct ggactccgac 840

ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac 900

gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacaca gaagagcctc 960

tccctgtctc cgggtaaa 978

<210> 46

<211> 326

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(326)

<223> 人重链恒定区 (IGHG2*02) 蛋白质序列

<400> 46

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Thr Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

115 120 125

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

130 135 140

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145 150 155 160

Met Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn

165 170 175

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp

180 185 190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro

195 200 205

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu

210 215 220

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn

225 230 235 240

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

245 250 255

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

260 265 270

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

275 280 285

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

290 295 300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

305 310 315 320

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325

<210> 47

<211> 978

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(978)

<223> 人重链恒定区 (IGHG2*04) 核苷酸序列

<400> 47

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgctctgac cagcggcgtg cacaccttcc cagctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240

tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagac agttgagcgc 300

aaatgttgtg tcgagtgccc accgtgccca gcaccacctg tggcaggacc gtcagtcttc 360

ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 420

gtggtggtgg acgtgagcca cgaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggacggc 480

gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagcca cgggaggagc agttcaacag cacgttccgt 540

gtggtcagcg tcctcaccgt tgtgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 600

aaggtctcca acaaaggcct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa aaccaaaggg 660

cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggaggagat gaccaagaac 720

caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 780

gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacac ctcccatgct ggactccgac 840

ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac 900

gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc 960

tccctgtctc cgggtaaa 978

<210> 48

<211> 326

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(326)

<223> 人重链恒定区 (IGHG2*04) 蛋白质序列

<400> 48

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

115 120 125

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

130 135 140

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145 150 155 160

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn

165 170 175

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp

180 185 190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro

195 200 205

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu

210 215 220

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn

225 230 235 240

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

245 250 255

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

260 265 270

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

275 280 285

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

290 295 300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

305 310 315 320

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325

<210> 49

<211> 978

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(978)

<223> 人重链恒定区 (IGHG2*06) 核苷酸序列

<400> 49

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgctctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcaacttcgg cacccagacc 240

tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagac agttgagcgc 300

aaatgttgtg tcgagtgccc accgtgccca gcaccacctg tggcaggacc gtcagtcttc 360

ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 420

gtggtggtgg acgtgagcca cgaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggacggc 480

gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagcca cgggaggagc agttcaacag cacgttccgt 540

gtggtcagcg tcctcaccgt cgtgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 600

aaggtctcca acaaaggcct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa aaccaaaggg 660

cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggaggagat gaccaagaac 720

caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatctc cgtggagtgg 780

gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacac ctcccatgct ggactccgac 840

ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac 900

gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacaca gaagagcctc 960

tccctgtctc cgggtaaa 978

<210> 50

<211> 326

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(326)

<223> 人重链恒定区 (IGHG2*06) 蛋白质序列

<400> 50

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

115 120 125

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

130 135 140

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145 150 155 160

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn

165 170 175

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp

180 185 190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro

195 200 205

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu

210 215 220

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn

225 230 235 240

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

245 250 255

Ser Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

260 265 270

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

275 280 285

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

290 295 300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

305 310 315 320

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325

<210> 51

<211> 981

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(981)

<223> 人重链恒定区 (IGHG4*01或IGHG4*04)

核苷酸序列

<400> 51

gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60

agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 240

tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 300

aaatatggtc ccccatgccc atcatgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 360

ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 420

tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 480

ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 540

cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 600

tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 660

gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 720

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 780

tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 840

gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 900

aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 960

ctctccctgt ctctgggtaa a 981

<210> 52

<211> 327

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(327)

<223> 人重链恒定区 (IGHG4*01) 蛋白质序列

(P01861)

<400> 52

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

115 120 125

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

130 135 140

Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp

145 150 155 160

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe

165 170 175

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp

180 185 190

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu

195 200 205

Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

210 215 220

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys

225 230 235 240

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

245 250 255

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

260 265 270

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

275 280 285

Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser

290 295 300

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

305 310 315 320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

325

<210> 53

<211> 981

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(981)

<223> 人重链恒定区 (IGHG4*02) 核苷酸序列

<400> 53

gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60

agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 240

tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 300

aaatatggtc ccccgtgccc atcatgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 360

ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 420

tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 480

ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 540

cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcgtgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 600

tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 660

gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 720

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 780

tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 840

gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 900

aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 960

ctctccctgt ctctgggtaa a 981

<210> 54

<211> 327

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(327)

<223> 人重链恒定区 (IGHG4*02) 蛋白质序列

<400> 54

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

115 120 125

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

130 135 140

Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp

145 150 155 160

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe

165 170 175

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp

180 185 190

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu

195 200 205

Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

210 215 220

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys

225 230 235 240

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

245 250 255

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

260 265 270

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

275 280 285

Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser

290 295 300

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

305 310 315 320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

325

<210> 55

<211> 981

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(981)

<223> 人重链恒定区 (IGHG4*03) 核苷酸序列

<400> 55

gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60

agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 240

tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 300

aaatatggtc ccccatgccc atcatgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 360

ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 420

tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 480

ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 540

cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 600

tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 660

gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 720

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 780

tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 840

gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 900

aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 960

ctctccctgt ctctgggtaa a 981

<210> 56

<211> 327

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(327)

<223> 人重链恒定区 (IGHG4*03) 蛋白质序列

<400> 56

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

115 120 125

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

130 135 140

Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp

145 150 155 160

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe

165 170 175

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp

180 185 190

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu

195 200 205

Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

210 215 220

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys

225 230 235 240

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

245 250 255

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

260 265 270

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

275 280 285

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser

290 295 300

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

305 310 315 320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

325

<210> 57

<211> 981

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人重链恒定区 (IGHG4-PE) 核苷酸序列

型式A

<400> 57

gcctccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60

agcacggccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccagt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 240

tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 300

aaatatggtc ccccatgccc accatgccca gcgcctgaat ttgagggggg accatcagtc 360

ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 420

tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 480

ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 540

cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 600

tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtca tcgatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 660

gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 720

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 780

tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 840

gacggatcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 900

aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 960

ctctccctgt ctctgggtaa a 981

<210> 58

<211> 981

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人重链恒定区 (IGHG4-PE) 核苷酸序列

型式B

<400> 58

gcctccacca agggacctag cgtgttccct ctcgccccct gttccaggtc cacaagcgag 60

tccaccgctg ccctcggctg tctggtgaaa gactactttc ccgagcccgt gaccgtctcc 120

tggaatagcg gagccctgac ctccggcgtg cacacatttc ccgccgtgct gcagagcagc 180

ggactgtata gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagct ccagcctcgg caccaaaacc 240

tacacctgca acgtggacca caagccctcc aacaccaagg tggacaagcg ggtggagagc 300

aagtacggcc ccccttgccc tccttgtcct gcccctgagt tcgagggagg accctccgtg 360

ttcctgtttc cccccaaacc caaggacacc ctgatgatct cccggacacc cgaggtgacc 420

tgtgtggtcg tggacgtcag ccaggaggac cccgaggtgc agttcaactg gtatgtggac 480

ggcgtggagg tgcacaatgc caaaaccaag cccagggagg agcagttcaa ttccacctac 540

agggtggtga gcgtgctgac cgtcctgcat caggattggc tgaacggcaa ggagtacaag 600

tgcaaggtgt ccaacaaggg actgcccagc tccatcgaga agaccatcag caaggctaag 660

ggccagccga gggagcccca ggtgtatacc ctgcctccta gccaggaaga gatgaccaag 720

aaccaagtgt ccctgacctg cctggtgaag ggattctacc cctccgacat cgccgtggag 780

tgggagagca atggccagcc cgagaacaac tacaaaacaa cccctcccgt gctcgatagc 840

gacggcagct tctttctcta cagccggctg acagtggaca agagcaggtg gcaggagggc 900

aacgtgttct cctgttccgt gatgcacgag gccctgcaca atcactacac ccagaagagc 960

ctctccctgt ccctgggcaa g 981

<210> 59

<211> 981

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人重链恒定区 (IGHG4-PE) 核苷酸序列

型式C

<400> 59

gccagcacca agggcccttc cgtgttcccc ctggcccctt gcagcaggag cacctccgaa 60

tccacagctg ccctgggctg tctggtgaag gactactttc ccgagcccgt gaccgtgagc 120

tggaacagcg gcgctctgac atccggcgtc cacacctttc ctgccgtcct gcagtcctcc 180

ggcctctact ccctgtcctc cgtggtgacc gtgcctagct cctccctcgg caccaagacc 240

tacacctgta acgtggacca caaaccctcc aacaccaagg tggacaaacg ggtcgagagc 300

aagtacggcc ctccctgccc tccttgtcct gcccccgagt tcgaaggcgg acccagcgtg 360

ttcctgttcc ctcctaagcc caaggacacc ctcatgatca gccggacacc cgaggtgacc 420

tgcgtggtgg tggatgtgag ccaggaggac cctgaggtcc agttcaactg gtatgtggat 480

ggcgtggagg tgcacaacgc caagacaaag ccccgggaag agcagttcaa ctccacctac 540

agggtggtca gcgtgctgac cgtgctgcat caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 600

tgcaaggtca gcaataaggg actgcccagc agcatcgaga agaccatctc caaggctaaa 660

ggccagcccc gggaacctca ggtgtacacc ctgcctccca gccaggagga gatgaccaag 720

aaccaggtga gcctgacctg cctggtgaag ggattctacc cttccgacat cgccgtggag 780

tgggagtcca acggccagcc cgagaacaat tataagacca cccctcccgt cctcgacagc 840

gacggatcct tctttctgta ctccaggctg accgtggata agtccaggtg gcaggaaggc 900

aacgtgttca gctgctccgt gatgcacgag gccctgcaca atcactacac ccagaagtcc 960

ctgagcctgt ccctgggaaa g 981

<210> 60

<211> 327

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人重链恒定区 (IGHG4-PE) 蛋白质序列

<400> 60

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Glu Phe Glu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

115 120 125

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

130 135 140

Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp

145 150 155 160

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe

165 170 175

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp

180 185 190

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu

195 200 205

Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

210 215 220

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys

225 230 235 240

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

245 250 255

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

260 265 270

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

275 280 285

Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser

290 295 300

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

305 310 315 320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

325

<210> 61

<211> 981

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 失活的人重链恒定区 (IGHG4) 核苷酸

序列

<400> 61

gcctccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60

agcacggccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccagt gacggtgtcg 120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180

ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 240

tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 300

aaatatggtc ccccatgccc accatgccca gcgcctccag ttgcgggggg accatcagtc 360

ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 420

tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 480

ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 540

cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 600

tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtca tcgatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 660

gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 720

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 780

tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 840

gacggatcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 900

aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 960

ctctccctgt ctctgggtaa a 981

<210> 62

<211> 327

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 失活的人重链恒定区 (IGHG4) 蛋白质

序列

<400> 62

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

115 120 125

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

130 135 140

Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp

145 150 155 160

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe

165 170 175

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp

180 185 190

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu

195 200 205

Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

210 215 220

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys

225 230 235 240

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

245 250 255

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

260 265 270

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

275 280 285

Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser

290 295 300

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

305 310 315 320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

325

<210> 63

<211> 321

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(321)

<223> 人Ck轻链恒定区 (IGKC*01) 核苷酸

序列

<400> 63

cgtacggtgg ccgctccctc cgtgttcatc ttcccacctt ccgacgagca gctgaagtcc 60

ggcaccgctt ctgtcgtgtg cctgctgaac aacttctacc cccgcgaggc caaggtgcag 120

tggaaggtgg acaacgccct gcagtccggc aactcccagg aatccgtgac cgagcaggac 180

tccaaggaca gcacctactc cctgtcctcc accctgaccc tgtccaaggc cgactacgag 240

aagcacaagg tgtacgcctg cgaagtgacc caccagggcc tgtctagccc cgtgaccaag 300

tctttcaacc ggggcgagtg t 321

<210> 64

<211> 107

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(107)

<223> Ck轻链恒定区 (IGKC*01) 氨基酸序列

<400> 64

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

1 5 10 15

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

20 25 30

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

35 40 45

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

50 55 60

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

65 70 75 80

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

85 90 95

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100 105

<210> 65

<211> 321

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(321)

<223> Ck轻链恒定区 (IGKC*02) 核苷酸序列

<400> 65

cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 60

ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag 120

tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggag 180

agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag 240

aaacacaaag tctacgccgg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag 300

agcttcaaca ggggagagtg t 321

<210> 66

<211> 107

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(107)

<223> Ck轻链恒定区 (IGKC*02) 氨基酸序列

<400> 66

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

1 5 10 15

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

20 25 30

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

35 40 45

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Glu Ser Lys Asp Ser

50 55 60

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

65 70 75 80

Lys His Lys Val Tyr Ala Gly Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

85 90 95

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100 105

<210> 67

<211> 321

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(321)

<223> Ck轻链恒定区 (IGKC*03) 核苷酸序列

<400> 67

cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 60

ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag 120

cggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggag 180

agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag 240

aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag 300

agcttcaaca ggggagagtg t 321

<210> 68

<211> 107

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(107)

<223> Ck轻链恒定区 (IGKC*03) 氨基酸序列

<400> 68

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

1 5 10 15

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

20 25 30

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Arg Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

35 40 45

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Glu Ser Lys Asp Ser

50 55 60

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

65 70 75 80

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

85 90 95

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100 105

<210> 69

<211> 321

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(321)

<223> Ck轻链恒定区 (IGKC*04) 核苷酸序列

<400> 69

cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 60

ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag 120

tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac 180

agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag 240

aaacacaaac tctacgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag 300

agcttcaaca ggggagagtg t 321

<210> 70

<211> 107

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(107)

<223> Ck轻链恒定区 (IGKC*04) 氨基酸序列

<400> 70

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

1 5 10 15

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

20 25 30

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

35 40 45

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

50 55 60

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

65 70 75 80

Lys His Lys Leu Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

85 90 95

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100 105

<210> 71

<211> 321

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(321)

<223> Ck轻链恒定区 (IGKC*05) 核苷酸序列

<400> 71

cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 60

ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag 120

tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac 180

agcaaggaca gcacctacag cctcagcaac accctgacgc tgagcaaagc agactacgag 240

aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag 300

agcttcaaca ggggagagtg c 321

<210> 72

<211> 107

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(107)

<223> Ck轻链恒定区 (IGKC*05) 氨基酸序列

<400> 72

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

1 5 10 15

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

20 25 30

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

35 40 45

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

50 55 60

Thr Tyr Ser Leu Ser Asn Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

65 70 75 80

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

85 90 95

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100 105

<210> 73

<211> 312

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(312)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC1*01) 核苷酸序列

(ENST00000390321.2

<400> 73

cccaaggcca accccacggt cactctgttc ccgccctcct ctgaggagct ccaagccaac 60

aaggccacac tagtgtgtct gatcagtgac ttctacccgg gagctgtgac agtggcttgg 120

aaggcagatg gcagccccgt caaggcggga gtggagacga ccaaaccctc caaacagagc 180

aacaacaagt acgcggccag cagctacctg agcctgacgc ccgagcagtg gaagtcccac 240

agaagctaca gctgccaggt cacgcatgaa gggagcaccg tggagaagac agtggcccct 300

acagaatgtt ca 312

<210> 74

<211> 104

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(104)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC1*01) 氨基酸序列

(A0A075B6K8)

<400> 74

Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu

1 5 10 15

Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr

20 25 30

Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys

35 40 45

Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr

50 55 60

Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His

65 70 75 80

Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys

85 90 95

Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100

<210> 75

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC1*02) 核苷酸序列

型式A

<400> 75

ggtcagccca aggccaaccc cactgtcact ctgttcccgc cctcctctga ggagctccaa 60

gccaacaagg ccacactagt gtgtctgatc agtgacttct acccgggagc tgtgacagtg 120

gcctggaagg cagatggcag ccccgtcaag gcgggagtgg agaccaccaa accctccaaa 180

cagagcaaca acaagtacgc ggccagcagc tacctgagcc tgacgcccga gcagtggaag 240

tcccacagaa gctacagctg ccaggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300

gcccctacag aatgttca 318

<210> 76

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> CL轻链恒定区 (IGLC1*02) 核苷酸序列

型式B

<400> 76

ggtcagccca aggccaaccc cactgtcact ctgttcccgc cctcctctga ggagctccaa 60

gccaacaagg ccacactagt gtgtctgatc agtgacttct acccgggagc tgtgacagtg 120

gcctggaagg cagatggcag ccccgtcaag gcgggagtgg agaccaccaa accctccaaa 180

cagagcaaca acaagtacgc ggccagcagc tacctgagcc tgacgcccga gcagtggaag 240

tcccacagaa gctacagctg ccaggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300

gcccctacag aatgttca 318

<210> 77

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(106)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC1*02) 氨基酸序列

<400> 77

Gly Gln Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro

35 40 45

Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100 105

<210> 78

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC2*01) 核苷酸序列

型式A

<400> 78

ggccagccta aggccgctcc ttctgtgacc ctgttccccc catcctccga ggaactgcag 60

gctaacaagg ccaccctcgt gtgcctgatc agcgacttct accctggcgc cgtgaccgtg 120

gcctggaagg ctgatagctc tcctgtgaag gccggcgtgg aaaccaccac cccttccaag 180

cagtccaaca acaaatacgc cgcctcctcc tacctgtccc tgacccctga gcagtggaag 240

tcccaccggt cctacagctg ccaagtgacc cacgagggct ccaccgtgga aaagaccgtg 300

gctcctaccg agtgctcc 318

<210> 79

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC2*01) 核苷酸序列

型式B

<400> 79

ggccagccta aagctgcccc cagcgtcacc ctgtttcctc cctccagcga ggagctccag 60

gccaacaagg ccaccctcgt gtgcctgatc tccgacttct atcccggcgc tgtgaccgtg 120

gcttggaaag ccgactccag ccctgtcaaa gccggcgtgg agaccaccac accctccaag 180

cagtccaaca acaagtacgc cgcctccagc tatctctccc tgacccctga gcagtggaag 240

tcccaccggt cctactcctg tcaggtgacc cacgagggct ccaccgtgga aaagaccgtc 300

gcccccaccg agtgctcc 318

<210> 80

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC1*02) 氨基酸序列

<400> 80

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro

35 40 45

Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100 105

<210> 81

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC2*02或IGLC2*03) 核苷酸

序列

<400> 81

ggtcagccca aggctgcccc ctcggtcact ctgttcccgc cctcctctga ggagcttcaa 60

gccaacaagg ccacactggt gtgtctcata agtgacttct acccgggagc cgtgacagtg 120

gcctggaagg cagatagcag ccccgtcaag gcgggagtgg agaccaccac accctccaaa 180

caaagcaaca acaagtacgc ggccagcagc tatctgagcc tgacgcctga gcagtggaag 240

tcccacagaa gctacagctg ccaggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300

gcccctacag aatgttca 318

<210> 82

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(106)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC2*02) 氨基酸序列

<400> 82

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro

35 40 45

Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100 105

<210> 83

<211> 312

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(312)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC3*01) 核苷酸序列

<400> 83

cccaaggctg ccccctcggt cactctgttc ccaccctcct ctgaggagct tcaagccaac 60

aaggccacac tggtgtgtct cataagtgac ttctacccgg gagccgtgac agttgcctgg 120

aaggcagata gcagccccgt caaggcgggg gtggagacca ccacaccctc caaacaaagc 180

aacaacaagt acgcggccag cagctacctg agcctgacgc ctgagcagtg gaagtcccac 240

aaaagctaca gctgccaggt cacgcatgaa gggagcaccg tggagaagac agttgcccct 300

acggaatgtt ca 312

<210> 84

<211> 104

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(104)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC3*01) 氨基酸序列

<400> 84

Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu

1 5 10 15

Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr

20 25 30

Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys

35 40 45

Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr

50 55 60

Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His

65 70 75 80

Lys Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys

85 90 95

Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100

<210> 85

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC3*02) 核苷酸序列

<400> 85

ggtcagccca aggctgcccc ctcggtcact ctgttcccac cctcctctga ggagcttcaa 60

gccaacaagg ccacactggt gtgtctcata agtgacttct acccggggcc agtgacagtt 120

gcctggaagg cagatagcag ccccgtcaag gcgggggtgg agaccaccac accctccaaa 180

caaagcaaca acaagtacgc ggccagcagc tacctgagcc tgacgcctga gcagtggaag 240

tcccacaaaa gctacagctg ccaggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300

gcccctacgg aatgttca 318

<210> 86

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(106)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC1*02) 氨基酸序列

<400> 86

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Pro Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro

35 40 45

Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Lys Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100 105

<210> 87

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC3*03) 核苷酸序列

<400> 87

ggtcagccca aggctgcccc ctcggtcact ctgttcccac cctcctctga ggagcttcaa 60

gccaacaagg ccacactggt gtgtctcata agtgacttct acccgggagc cgtgacagtg 120

gcctggaagg cagatagcag ccccgtcaag gcgggagtgg agaccaccac accctccaaa 180

caaagcaaca acaagtacgc ggccagcagc tacctgagcc tgacgcctga gcagtggaag 240

tcccacaaaa gctacagctg ccaggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300

gcccctacag aatgttca 318

<210> 88

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(106)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC3*03) 氨基酸序列

<400> 88

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro

35 40 45

Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Lys Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100 105

<210> 89

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC3*04) 核苷酸序列

<400> 89

ggtcagccca aggctgcccc ctcggtcact ctgttcccgc cctcctctga ggagcttcaa 60

gccaacaagg ccacactggt gtgtctcata agtgacttct acccgggagc cgtgacagtg 120

gcctggaagg cagatagcag ccccgtcaag gcgggagtgg agaccaccac accctccaaa 180

caaagcaaca acaagtacgc ggccagcagc tacctgagcc tgacgcctga gcagtggaag 240

tcccacagaa gctacagctg ccaggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300

gcccctacag aatgttca 318

<210> 90

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(106)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC3*04) 氨基酸序列

<400> 90

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro

35 40 45

Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100 105

<210> 91

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC6*01) 核苷酸序列

<400> 91

ggtcagccca aggctgcccc atcggtcact ctgttcccgc cctcctctga ggagcttcaa 60

gccaacaagg ccacactggt gtgcctgatc agtgacttct acccgggagc tgtgaaagtg 120

gcctggaagg cagatggcag ccccgtcaac acgggagtgg agaccaccac accctccaaa 180

cagagcaaca acaagtacgc ggccagcagc tacctgagcc tgacgcctga gcagtggaag 240

tcccacagaa gctacagctg ccaggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300

gcccctgcag aatgttca 318

<210> 92

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(106)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC6*01) 氨基酸序列

<400> 92

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Lys Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro

35 40 45

Val Asn Thr Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Ala Glu Cys Ser

100 105

<210> 93

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC7*01或IGLC7*02) 核苷酸

序列

<400> 93

ggtcagccca aggctgcccc atcggtcact ctgttcccac cctcctctga ggagcttcaa 60

gccaacaagg ccacactggt gtgtctcgta agtgacttct acccgggagc cgtgacagtg 120

gcctggaagg cagatggcag ccccgtcaag gtgggagtgg agaccaccaa accctccaaa 180

caaagcaaca acaagtatgc ggccagcagc tacctgagcc tgacgcccga gcagtggaag 240

tcccacagaa gctacagctg ccgggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300

gcccctgcag aatgctct 318

<210> 94

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(106)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC7*01) 氨基酸序列

<400> 94

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Val Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro

35 40 45

Val Lys Val Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Arg Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Ala Glu Cys Ser

100 105

<210> 95

<211> 318

<212> DNA

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(318)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC7*03) 核苷酸序列

<400> 95

ggtcagccca aggctgcccc ctcggtcact ctgttcccac cctcctctga ggagcttcaa 60

gccaacaagg ccacactggt gtgtctcgta agtgacttca acccgggagc cgtgacagtg 120

gcctggaagg cagatggcag ccccgtcaag gtgggagtgg agaccaccaa accctccaaa 180

caaagcaaca acaagtatgc ggccagcagc tacctgagcc tgacgcccga gcagtggaag 240

tcccacagaa gctacagctg ccgggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300

gcccctgcag aatgctct 318

<210> 96

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人 (Homo sapiens)

<220>

<221> 尚未归类的特征

<222> (1)..(106)

<223> Cl轻链恒定区 (IGLC7*03) 氨基酸序列

<400> 96

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Val Ser Asp

20 25 30

Phe Asn Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro

35 40 45

Val Lys Val Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Arg Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Ala Glu Cys Ser

100 105

<210> 97

<211> 388

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0102 VH结构域核苷酸

<400> 97

caggttcaac tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccctcaaa aactatggca tgcactgggt ccgccagggt 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcaatt atatcatatg atggaacatt taaatattct 180

gtagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgttgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag aactgaggac acggctctgt attactgtgc gaaagaggcg 300

ggggatttct atggttcggg gagttatggg taccacaagt atggtttgga cgtctggggc 360

caagggacca cggtcaccgt ctcctcag 388

<210> 98

<211> 129

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0102 VH结构域氨基酸

<400> 98

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Lys Asn Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Gly Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ile Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Phe Lys Tyr Ser Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Glu Ala Gly Asp Phe Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Gly Tyr His

100 105 110

Lys Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

115 120 125

Ser

<210> 99

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0102 HCDR1

<400> 99

Gly Phe Thr Leu Lys Asn Tyr Gly

1 5

<210> 100

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0102 HCDR2

<400> 100

Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Phe Lys

1 5

<210> 101

<211> 22

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0102 HCDR3

<400> 101

Ala Lys Glu Ala Gly Asp Phe Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Gly Tyr His

1 5 10 15

Lys Tyr Gly Leu Asp Val

20

<210> 102

<211> 322

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0102 VL结构域核苷酸

<400> 102

gacgtccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcgagtca ggacattagc aattatttag cctggtatca gcagcaacca 120

gggaaagttc ctaaactcct gatctatgct gcatccactt tgcaatcagg ggtcccatct 180

cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagatgttg caagttatta ctgtcaaaaa tataacagtg ccccgctcac tttcggcgga 300

gggaccgagg tggagatcaa gc 322

<210> 103

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0102 VL结构域氨基酸

<400> 103

Asp Val Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Gln Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 104

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0102 LCDR3, QUEL-0103 LCDR3, QUEL-0104 LCDR3, QUEL-0105

LCDR3

<400> 104

Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Leu Thr

1 5

<210> 105

<211> 388

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0103 VH结构域核苷酸

<400> 105

caggttcaac tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcaat aactatggca tgcactgggt ccgccagggt 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggctatt atatcatatg atggaacaac taaatactct 180

gtagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgttgtat 240

ctacaaatga acagcctgag aactgaggac acggctctgt atttctgtgc gaaagaggcg 300

ggggatttct atggttcggg gaattatggg taccacaagt atggtttgga cgtctggggc 360

caagggacca cggtcaccgt ctcctcag 388

<210> 106

<211> 129

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0103 VH结构域氨基酸

<400> 106

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Gly Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ile Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Thr Lys Tyr Ser Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Lys Glu Ala Gly Asp Phe Tyr Gly Ser Gly Asn Tyr Gly Tyr His

100 105 110

Lys Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

115 120 125

Ser

<210> 107

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0103 HCDR1, QUEL-0104 HCDR1

<400> 107

Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr Gly

1 5

<210> 108

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0103 HCDR2, QUEL-0104 HCDR2, QUEL-0105 HCDR2

<400> 108

Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Thr Lys

1 5

<210> 109

<211> 322

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0103 VL结构域核苷酸

<400> 109

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcgagtca ggacattagc aattatttag cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagttc ctaagctcct gatctatgct gcatccactt tgcaatcagg ggtcccatct 180

cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagatgttg caagttatta ctgtcaaaaa tataacagtg ccccgctcac tttcggcgga 300

gggaccgagg tggagatcaa gc 322

<210> 110

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0103 VL结构域氨基酸

<400> 110

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 111

<211> 388

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0104 VH结构域核苷酸

<400> 111

caggttcaac tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcaat aactatggca tgcactgggt ccgccagggt 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggctatt atatcatatg atggaacaac taaatactct 180

gtagactccg tgaagggccg attcactatc tccagagaca attccaagaa cacgttgtat 240

atgcaaatgg acagcctgag aacggaggac acggctctgt attactgtgc gaaggaggcg 300

ggggatttct atggttcggg gaattatggg tacctctact atggtttgga cgtctggggc 360

caagggacca cggtcaccgt ctcctcag 388

<210> 112

<211> 129

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0104 VH结构域氨基酸

<400> 112

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Gly Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ile Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Thr Lys Tyr Ser Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Met Gln Met Asp Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Glu Ala Gly Asp Phe Tyr Gly Ser Gly Asn Tyr Gly Tyr Leu

100 105 110

Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

115 120 125

Ser

<210> 113

<211> 22

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0104 HCDR3

<400> 113

Ala Lys Glu Ala Gly Asp Phe Tyr Gly Ser Gly Asn Tyr Gly Tyr Leu

1 5 10 15

Tyr Tyr Gly Leu Asp Val

20

<210> 114

<211> 322

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0104 VL结构域核苷酸

<400> 114

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcgagtca ggacattagc aattatttag cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagttc ctaacctcct gatctttgct gcatccactt tgcaatcagg ggtcccatct 180

cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaag tataatagtg ccccgctcac tttcggcgga 300

gggaccaagg tggagatcaa cc 322

<210> 115

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0104 VL结构域氨基酸

<400> 115

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Asn Leu Leu Ile

35 40 45

Phe Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Asn

100 105

<210> 116

<211> 388

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0105 VH结构域核苷酸

<400> 116

caggtgcaac tggtggagtc tgggggagac gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggttt caccttcaaa aactatggca tgcactgggt ccgccagggt 120

ctaggcaagg ggctggagtg ggtggctatt atatcatatg atggaacaac taaatactct 180

gtagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgttgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag aactgaggac acggctctgt attactgtgc gaaagaggcg 300

ggggatttct atggttcggg gaattatggg tactactact atggtttgga cgtctggggc 360

caagggacca cggtcaccgt ctcctcag 388

<210> 117

<211> 129

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0105 VH结构域氨基酸

<400> 117

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Asn Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Gly Leu Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ile Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Thr Lys Tyr Ser Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Glu Ala Gly Asp Phe Tyr Gly Ser Gly Asn Tyr Gly Tyr Tyr

100 105 110

Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

115 120 125

Ser

<210> 118

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0105 HCDR1

<400> 118

Gly Phe Thr Phe Lys Asn Tyr Gly

1 5

<210> 119

<211> 22

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0105 HCDR3

<400> 119

Ala Lys Glu Ala Gly Asp Phe Tyr Gly Ser Gly Asn Tyr Gly Tyr Tyr

1 5 10 15

Tyr Tyr Gly Leu Asp Val

20

<210> 120

<211> 322

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0105 VL结构域核苷酸

<400> 120

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcgaatca ggacattagc aattatttag cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaatttc ctaagctcct gatctatgct gcatccactt tgcaatcagg ggtcccatct 180

cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaag tataacagtg ccccgctcac tttcggcgga 300

gggaccaagg tggagatcaa ac 322

<210> 121

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0105 VL结构域氨基酸

<400> 121

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Asn Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Phe Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 122

<211> 355

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0302 VH结构域核苷酸

<400> 122

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt aactcttgga tgaactgggt ccgccaagct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaaccaag atggcagtga gagatactat 180

gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca actccaagaa ctcactgtct 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctatct attactgtgc gagagaaata 300

actggaacct actttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctcag 355

<210> 123

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0302 VH结构域氨基酸

<400> 123

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Ser

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Asn Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Arg Tyr Tyr Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Ser Leu Ser

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Ile Thr Gly Thr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 124

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0302 HCDR2

<400> 124

Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Arg

1 5

<210> 125

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0302 HCDR3

<400> 125

Ala Arg Glu Ile Thr Gly Thr Tyr Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 126

<211> 331

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0302 VL结构域核苷酸

<400> 126

cagtctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga aataattatg tatactggta ccaacagctc 120

ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat aggaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240

tccgaggatg aggctgaata ttactgtgca gcatgggatg acagcctgag tggtccggtg 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta g 331

<210> 127

<211> 110

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0302 VL结构域氨基酸

<400> 127

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Glu Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 128

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0302 LCDR1

<400> 128

Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Tyr

1 5

<210> 129

<400> 129

000

<210> 130

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0302 LCDR3

<400> 130

Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Pro Val

1 5 10

<210> 131

<211> 355

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0303 VH结构域核苷酸

<400> 131

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt aactattgga tgaactgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac atagaccaag atggaagtga gaaatactat 180

gtggactctt tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac tcggctgtgt attactgtgc gagagagcta 300

actggaacta cttttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctcag 355

<210> 132

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0303 VH结构域氨基酸

<400> 132

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Asn Ile Asp Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Leu

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Leu Thr Gly Thr Thr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 133

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0303 HCDR1, QUEL-0304 HCDR1

<400> 133

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Trp

1 5

<210> 134

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0303 HCDR2

<400> 134

Ile Asp Gln Asp Gly Ser Glu Lys

1 5

<210> 135

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0303 HCDR3

<400> 135

Ala Arg Glu Leu Thr Gly Thr Thr Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 136

<211> 331

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0303 VL结构域核苷酸

<400> 136

cagtctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatacta taaactggta ccaactgctc 120

ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat agtaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgaa tggtccggtg 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta g 331

<210> 137

<211> 110

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0303 VL结构域氨基酸

<400> 137

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Thr Ile Asn Trp Tyr Gln Leu Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 138

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0303 LCDR1, QUEL-0304 LCDR1

<400> 138

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr

1 5

<210> 139

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0303 LCDR3

<400> 139

Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Pro Val

1 5 10

<210> 140

<211> 355

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0304 VH结构域核苷酸

<400> 140

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacatttagt aactattgga tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac atgaaccatg atggaagtga taaatactat 180

gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagag tttaatgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtat attactgtgc gagagatcgg 300

actggaacta tctttgacta ctggggccag ggaaccttgg tcaccgtctc ctcag 355

<210> 141

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0304 VH结构域氨基酸

<400> 141

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Asn Met Asn His Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Leu Met Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Arg Thr Gly Thr Ile Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 142

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0304 HCDR2

<400> 142

Met Asn His Asp Gly Ser Asp Lys

1 5

<210> 143

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0304 HCDR3

<400> 143

Ala Arg Asp Arg Thr Gly Thr Ile Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 144

<211> 331

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0304 VL结构域核苷酸

<400> 144

cagtctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatactg taaactggta ccagcaactc 120

ccaggaacgg cccccaaagt cctcatctat agtaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaggatg aggctaatta ttactgtgca acatgggatg acagcctgaa tggtccggtg 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta g 331

<210> 145

<211> 110

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0304 VL结构域氨基酸

<400> 145

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Val Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 146

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> QUEL-0304 LCDR3

<400> 146

Ala Thr Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Pro Val

1 5 10

Claims (97)

1.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0201重链互补决定区(HCDR)组，即HCDR1 SEQ ID NO:13、HCDR2 SEQ ID NO:14和HCDR3 SEQ ID NO:15，并且

所述VL结构域包含QUEL-0201轻链互补决定区(LCDR)组，即LCDR1 SEQ ID NO:18、LCDR2 SEQ ID NO:19和LCDR3 SEQ ID NO:20。

2.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

与QUEL-0201VH结构域SEQ ID NO:12具有至少90％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与QUEL-0201VL结构域SEQ ID NO:17具有至少90％氨基酸序列同一性的VL结构域。

3.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

由通过基因区段IGHV1-3(例如，IGHV1-3*01)和IGHJ6(例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VH结构域，和

由通过基因区段IGLV1-40(例如，IGLV1-40*01)和IGLJ3(例如，IGLJ3*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VL结构域。

4.根据权利要求3所述的抗体，其中所述VH结构域由通过基因区段IGHV1-3(例如，IGHV1-3*01)、IGHD5-18(例如，IGHD5-18*01)和IGHJ6(例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码。

5.一种与QUEL-0201IgG竞争结合人GFRAL的抗体，所述QUEL-0201IgG包含QUEL-0201VH结构域SEQ ID NO:12和QUEL-0201VL结构域SEQ ID NO:17。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的1nM或更强的亲和力结合人GFRAL。

7.根据权利要求6所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的100pM或更强的亲和力结合人GFRAL。

8.根据权利要求6所述的抗体，所述抗体以在50pM-200pM范围的亲和力结合人GFRAL。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的抗体，所述抗体与小鼠GFRAL交叉反应，对小鼠GFRAL的亲和力在其对人GFRAL的亲和力的10倍以内。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的抗体，所述抗体以15nM或更强的效力抑制GFRAL，其中所述效力在响应于GDF15的ERK磷酸化的体外测定中被确定为IC50。

11.根据权利要求10所述的抗体，其中所述效力是10nM或更强。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0201VH结构域SEQ ID NO:12具有至少95％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0201VL结构域SEQ ID NO:17具有至少95％氨基酸序列同一性的VL结构域。

13.根据任一项前述权利要求所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0201VH结构域SEQ ID NO:12具有至少98％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0201VL结构域SEQ ID NO:17具有至少98％氨基酸序列同一性的VL结构域。

14.根据权利要求13所述的抗体，所述抗体包含

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0201VH结构域SEQ ID NO:12，和

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0201VL结构域SEQ ID NO:17。

15.根据权利要求14所述的抗体，所述抗体包含

所述QUEL-0201VH结构域SEQ ID NO:12，其包含QUEL-0201HCDR组，即HCDR1SEQ ID NO:13、HCDR2 SEQ ID NO:14和HCDR3 SEQ ID NO:15，任选地在VH结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变，和

所述QUEL-0201VL结构域SEQ ID NO:17，其包含QUEL-0201LCDR组，即LCDR1SEQ ID NO:18、LCDR2 SEQ ID NO:19和LCDR3 SEQ ID NO:20，任选地在VL结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变。

16.根据权利要求14或权利要求15所述的抗体，其中所述一个或两个氨基酸改变是保守取代。

17.根据任一项前述权利要求所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0201VH结构域SEQID NO:12和所述QUEL-0201VL结构域SEQ ID NO:17。

18.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含一组重链互补决定区(HCDR)，其中HCDR1是SEQ ID NO:23或SEQ IDNO:133，HCDR2是SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:124、SEQ ID NO:134或SEQ ID NO:142，并且HCDR3是SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:125、SEQ ID NO:135或SEQ ID NO:143，并且

所述VL结构域包含一组轻链互补决定区(LCDR)，其中LCDR1是SEQ ID NO:28、SEQ IDNO:128或SEQ ID NO:138，LCDR2是SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:129，并且LCDR3是SEQ IDNO:30、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:139或SEQ ID NO:146。

19.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0301重链互补决定区(HCDR)组，即HCDR1 SEQ ID NO:23、HCDR2 SEQ ID NO:24和HCDR3 SEQ ID NO:25，并且

所述VL结构域包含QUEL-0301轻链互补决定区(LCDR)组，即LCDR1 SEQ ID NO:28、LCDR2 SEQ ID NO:29和LCDR3 SEQ ID NO:30。

20.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0302HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:23、HCDR2 SEQ ID NO:124和HCDR3 SEQ ID NO:125，并且

所述VL结构域包含QUEL-0302LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:128、LCDR2 SEQ ID NO:129和LCDR3 SEQ ID NO:130。

21.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0303HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:133、HCDR2 SEQ ID NO:134和HCDR3 SEQ ID NO:135，并且

所述VL结构域包含QUEL-0303LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:138、LCDR2 SEQ ID NO:29和LCDR3 SEQ ID NO:139。

22.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0304HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:133、HCDR2 SEQ ID NO:142和HCDR3 SEQ ID NO:143，并且

所述VL结构域包含QUEL-0304LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:138、LCDR2 SEQ ID NO:29和LCDR3 SEQ ID NO:146。

23.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

与QUEL-0301VH结构域SEQ ID NO:22具有至少90％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与QUEL-0301VL结构域SEQ ID NO:27具有至少90％氨基酸序列同一性的VL结构域。

24.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

由通过基因区段IGHV3-7(例如，IGHV3-7*01)和IGHJ4(例如，IGHJ4*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VH结构域，和

由通过基因区段IGLV1-44(例如，IGLV1-44*01)和IGLJ3(例如，IGLJ3*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VL结构域。

25.根据权利要求24所述的抗体，其中所述VH结构域由通过基因区段IGHV3-7(例如，IGHV3-7*01)、IGHD1-7(例如，IGHD1-7*01)和IGHJ4(例如，IGHJ4*02)的重组产生的核苷酸序列编码。

26.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

由通过基因区段IGHV3-7(例如，IGHV3-7*01)和IGHJ4(例如，IGHJ4*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VH结构域，和

由通过基因区段IGLV1-47(例如，IGLV1-47*01)和IGLJ3(例如，IGLJ3*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VL结构域。

27.根据权利要求26所述的抗体，其中所述VH结构域由通过基因区段IGHV3-7(例如，IGHV3-7*01)、IGHD1-20(例如，IGHD1-20*01)和IGHJ4(例如，IGHJ4*02)的重组产生的核苷酸序列编码。

28.一种与QUEL-0301IgG竞争结合人GFRAL的抗体，所述QUEL-0301IgG包含QUEL-0301VH结构域SEQ ID NO:22和QUEL-0301VL结构域SEQ ID NO:27。

29.根据权利要求18至28中任一项所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的1nM或更强的亲和力结合人GFRAL。

30.根据权利要求29所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的1pM或更强的亲和力结合人GFRAL。

31.根据权利要求29所述的抗体，所述抗体以在0.5pM-2pM范围的亲和力结合人GFRAL。

32.根据权利要求18至31中任一项所述的抗体，所述抗体与小鼠GFRAL交叉反应，具有如通过表面等离子体共振确定的10nM或更强的对小鼠GFRAL的亲和力。

33.根据权利要求18至32中任一项所述的抗体，所述抗体以15nM或更强的效力抑制GFRAL，其中所述效力在响应于GDF15的ERK磷酸化的体外测定中被确定为IC50。

34.根据权利要求33所述的抗体，其中所述效力是10nM或更强。

35.根据权利要求18至34中任一项所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0301VH结构域SEQ ID NO:22具有至少95％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0301VL结构域SEQ ID NO:27具有至少95％氨基酸序列同一性的VL结构域。

36.根据任一项前述权利要求所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0301VH结构域SEQ ID NO:22具有至少98％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0301VL结构域SEQ ID NO:27具有至少98％氨基酸序列同一性的VL结构域。

37.根据权利要求36所述的抗体，所述抗体包含

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0301VH结构域SEQ ID NO:22，和任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0301VL结构域SEQ ID NO:27。

38.根据权利要求37所述的抗体，所述抗体包含

所述QUEL-0301VH结构域SEQ ID NO:22，其包含QUEL-0301HCDR组，即HCDR1SEQ ID NO:23、HCDR2 SEQ ID NO:24和HCDR3 SEQ ID NO:25，任选地在VH结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变，和

所述QUEL-0301VL结构域SEQ ID NO:27，其包含QUEL-0301LCDR组，即LCDR1SEQ ID NO:28、LCDR2 SEQ ID NO:29和LCDR3 SEQ ID NO:30，任选地在VL结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变。

39.根据权利要求37或权利要求38所述的抗体，其中所述一个或两个氨基酸改变是保守取代。

40.根据权利要求18至39中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0301VH结构域SEQ ID NO:22和所述QUEL-0301VL结构域SEQ ID NO:27。

41.根据权利要求18、20和23-28中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0302VH结构域SEQ ID NO:123和所述QUEL-0302VL结构域SEQ ID NO:127。

42.根据权利要求18、21和23-28中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0303VH结构域SEQ ID NO:132和所述QUEL-0303VL结构域SEQ ID NO:137。

43.根据权利要求18和22-28中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0304VH结构域SEQ ID NO:141和所述QUEL-0304VL结构域SEQ ID NO:145。

44.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含一组HCDR，即HCDR1、HCDR2和HCDR3，其中

HCDR1是SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:99、SEQ ID NO:107或SEQ ID NO:118，HCDR2是SEQID NO:4、SEQ ID NO:100或SEQ ID NO:108，并且

HCDR3是SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:113或SEQ ID NO:119，并且

所述VL结构域包含一组LCDR，即LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中

LCDR1是SEQ ID NO:8，

LCDR2是SEQ ID NO:9，并且

LCDR3是SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:104。

45.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含抗体重链可变(VH)结构域和抗体轻链可变(VL)结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0101重链互补决定区(HCDR)组，即HCDR1 SEQ ID NO:3、HCDR2SEQ ID NO:4和HCDR3 SEQ ID NO:5，并且

所述VL结构域包含QUEL-0101轻链互补决定区(LCDR)组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:10。

46.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0102HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:99、HCDR2 SEQ ID NO:100和HCDR3 SEQ ID NO:101，并且

所述VL结构域包含QUEL-0102LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

47.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0103HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:107、HCDR2 SEQ ID NO:108和HCDR3 SEQ ID NO:5，并且

所述VL结构域包含QUEL-0103LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

48.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0104HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:107、HCDR2 SEQ ID NO:108和HCDR3 SEQ ID NO:113，并且

所述VL结构域包含QUEL-0104LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ IDNO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

49.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含VH结构域和VL结构域，

所述VH结构域包含QUEL-0105HCDR组，即HCDR1 SEQ ID NO:118、HCDR2 SEQ ID NO:108和HCDR3 SEQ ID NO:119，并且

所述VL结构域包含QUEL-0105LCDR组，即LCDR1 SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:104。

50.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

与QUEL-0101VH结构域SEQ ID NO:2具有至少90％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与QUEL-0101VL结构域SEQ ID NO:7具有至少90％氨基酸序列同一性的VL结构域。

51.一种结合人GFRAL的抗体，所述抗体包含

由通过基因区段IGHV3-30(例如，IGHV3-30*18)和IGHJ6(例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码的VH结构域，和

由通过基因区段IGKV1-27(例如，IGKV1-27*01)和IGKJ4(例如，IGKJ4*01)的重组产生的核苷酸序列编码的VL结构域。

52.根据权利要求51所述的抗体，其中所述VH结构域由通过基因区段IGHV3-30*18(例如，IGHV3-30)、IGHD3-10(例如，IGHD3-10*01)和IGHJ6(例如，IGHJ6*02)的重组产生的核苷酸序列编码。

53.一种与QUEL-0101IgG竞争结合人GFRAL的抗体，所述QUEL-0101IgG包含QUEL-0101VH结构域SEQ ID NO:2和QUEL-0101VL结构域SEQ ID NO:7。

54.根据权利要求44至53中任一项所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的1nM或更强的亲和力结合人GFRAL。

55.根据权利要求54所述的抗体，所述抗体以如通过表面等离子体共振确定的200pM或更强的亲和力结合人GFRAL。

56.根据权利要求54所述的抗体，所述抗体以在100pM-400pM范围的亲和力结合人GFRAL。

57.根据权利要求44至56中任一项所述的抗体，所述抗体与小鼠GFRAL交叉反应，对小鼠GFRAL的亲和力在其对人GFRAL的亲和力的10倍以内。

58.根据权利要求44至57中任一项所述的抗体，所述抗体以15nM或更强的效力抑制GFRAL，其中所述效力在响应于GDF15的ERK磷酸化的体外测定中被确定为IC50。

59.根据权利要求58所述的抗体，其中所述效力是10nM或更强。

60.根据权利要求59所述的抗体，其中所述效力是5nM或更强。

61.根据权利要求44至60中任一项所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0101VH结构域SEQ ID NO:2具有至少95％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0101VL结构域SEQ ID NO:7具有至少95％氨基酸序列同一性的VL结构域。

62.根据权利要求44至61中任一项所述的抗体，所述抗体包含

与所述QUEL-0101VH结构域SEQ ID NO:2具有至少98％氨基酸序列同一性的VH结构域，和

与所述QUEL-0101VL结构域SEQ ID NO:7具有至少98％氨基酸序列同一性的VL结构域。

63.根据权利要求62所述的抗体，所述抗体包含

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0101VH结构域SEQ ID NO:2，和

任选地具有一个或两个氨基酸改变的QUEL-0101VL结构域SEQ ID NO:7。

64.根据权利要求63所述的抗体，所述抗体包含

所述QUEL-0101VH结构域SEQ ID NO:2，其包含QUEL-0101HCDR组，即HCDR1SEQ ID NO:3、HCDR2 SEQ ID NO:4和HCDR3 SEQ ID NO:5，任选地在VH结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变，和

所述QUEL-0101VL结构域SEQ ID NO:7，其包含QUEL-0101LCDR组，即LCDR1SEQ ID NO:8、LCDR2 SEQ ID NO:9和LCDR3 SEQ ID NO:10，任选地在VL结构域框架中具有一个或两个氨基酸改变。

65.根据权利要求63或权利要求64所述的抗体，其中所述一个或两个氨基酸改变是保守取代。

66.根据权利要求44至65中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0101VH结构域SEQ ID NO:2和所述QUEL-0101VL结构域SEQ ID NO:7。

67.根据权利要求44、46和50-53中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0102VH结构域SEQ ID NO:98和所述QUEL-0102VL结构域SEQ ID NO:103。

68.根据权利要求44、47和50-53中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0103VH结构域SEQ ID NO:106和所述QUEL-0103VH结构域SEQ ID NO:110。

69.根据权利要求44、48和50-53中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0104VH结构域SEQ ID NO:112和所述QUEL-0104VL结构域SEQ ID NO:115。

70.根据权利要求44和49-53中任一项所述的抗体，所述抗体包含所述QUEL-0105VH结构域SEQ ID NO:117和所述QUEL-0105VH结构域SEQ ID NO:121。

71.根据任一项前述权利要求所述的抗体，所述抗体包含重链Fc区。

72.根据权利要求71所述的抗体，所述抗体是人IgG。

73.根据权利要求72所述的抗体，所述抗体是人IgG4。

74.根据权利要求73所述的抗体，所述抗体包含重链恒定区SEQ ID NO:60。

75.一种编码根据任一项前述权利要求定义的抗体的核酸。

76.一种体外宿主细胞，所述体外宿主细胞包含根据权利要求75定义的核酸。

77.一种组合物，所述组合物包含与药学上可接受的赋形剂一起配制的根据权利要求1至74中任一项所述的抗体或根据权利要求75所述的核酸。

78.根据权利要求77所述的组合物，所述组合物被配制用于静脉内或皮下注射。

79.一种治疗患者的与GDF15-GFRAL通路相关的医学病症的方法，所述方法包括向所述患者施用根据权利要求77或权利要求78所述的组合物。

80.根据权利要求77或权利要求78所述的组合物，其用于在治疗患者的与GDF15-GFRAL通路相关的医学病症中使用。

81.根据权利要求77或权利要求78所述的组合物用于制造用于治疗患者的与GDF15-GFRAL通路相关的医学病症的药剂的用途。

82.根据权利要求79所述的方法、根据权利要求80所述的组合物或根据权利要求81所述的组合物的用途，其中所述医学病症是妊娠剧吐、厌食、恶病质、条件性味觉厌恶和/或用于癌症的化疗治疗的副作用。

83.根据权利要求82所述的方法、组合物或用途，其中所述患者还要接受或已接受用抗癌化学治疗剂的治疗。

84.根据权利要求82或权利要求83所述的方法、组合物或用途，其中所述医学病症是癌症患者的厌食。

85.根据权利要求82或权利要求83所述的方法、组合物或用途，其中所述医学病症是癌症患者的恶病质。

86.根据权利要求82至85中任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述医学病症是用抗癌化学治疗剂治疗的副作用。

87.根据权利要求86所述的方法、组合物或用途，其中所述治疗包括预防由用抗癌化学治疗剂治疗引起的条件性味觉厌恶。

88.根据权利要求82至87中任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述治疗包括在癌症患者中减少体重减轻并且延长存活期。

89.一种降低患者中的糖皮质激素(例如，皮质醇)水平的方法，所述方法包括向所述患者施用GDF15信号传导的抑制剂。

90.一种GDF15信号传导的抑制剂，所述抑制剂用于在降低患者中的糖皮质激素(例如，皮质醇)水平中使用。

91.GDF15信号传导的抑制剂用于制造用于降低患者中的糖皮质激素(例如，皮质醇)水平的药剂的用途。

92.根据权利要求89所述的方法、根据权利要求90所述的用于所述用途的抑制剂、或根据权利要求91所述的抑制剂的用途，其用于使得已被确定为具有升高的血液糖皮质激素水平的患者中的糖皮质激素(例如，皮质醇)的血液水平正常化。

93.根据权利要求89所述的方法、根据权利要求90所述的用于所述用途的抑制剂或根据权利要求91所述的抑制剂的用途，其中所述患者是癌症患者。

94.根据权利要求89至93中任一项所述的方法、用于所述用途的抑制剂或抑制剂的用途，其中所述患者还要接受或已接受用细胞毒性剂和/或抗肿瘤剂的治疗。

95.根据权利要求89至94中任一项所述的方法、用于所述用途的抑制剂或抑制剂的用途，其中所述抑制剂抑制GDF15-GFRAL-RET信号传导复合物。

96.根据权利要求95所述的方法、用于所述用途的抑制剂或抑制剂的用途，其中所述抑制剂是抗GFRAL抗体。

97.根据权利要求96所述的方法、用于所述用途的抑制剂或抑制剂的用途，其中所述抗GFRAL抗体是根据权利要求1至74中任一项定义的抗体。