CN117899223A - 以nup35基因和或以nup35蛋白作为作用靶点的物质的应用及组合物 - Google Patents

Abstract

本申请涉及生物医药领域，尤其涉及以NUP35基因和/或以NUP35蛋白作为作用靶点的物质的应用及组合物，以NUP35基因作为作用靶点的物质是能够提高NUP35基因活性和/或表达量的促进剂或NUP35重组蛋白或NUP35蛋白片段活性多肽；以NUP35蛋白作为作用靶点的物质是能够提高NUP35蛋白表达与功能的促进剂或NUP35重组蛋白或NUP35蛋白片段活性多肽。本发明提供的应用，可用于制备组合物或制剂，所述组合物或制剂用于治疗心力衰竭等心血管疾病。

Description

以NUP35基因和或以NUP35蛋白作为作用靶点的物质的应用及 组合物

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体地，本发明涉及以NUP35基因和/或以NUP35蛋白作为作用靶点的物质的应用及组合物。

背景技术

核孔蛋白(NUPs)是核孔复合体(NPC)的组成部分，参与细胞核/细胞质运输。核通道蛋白对于细胞活性和基因转录调控至关重要。核通道蛋白35(NUP35)通过转录后控制Na(+)-H(+)交换蛋白-1(NHE1)表达选择性调节培养心肌细胞pHi稳态。尽管最近冷冻电子显微镜(cryo-EM)技术在产生NPC分子结构取得了突破重建，然而，到目前为止NUP35在心力衰竭中的作用还没有相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种以NUP35基因和/或NUP35蛋白作为组织细胞选择性特异作用药物靶点的药物在治疗血管紧张素II和内皮损伤、心肌梗死、缺血-再灌注、高脂肪高果糖和衰老诱导心力衰竭疾病中的方法和应用。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

在一实施方案中，以NUP35基因作为药物作用靶点的物质在制备治疗心力衰竭疾病药物中的应用，所述以NUP35基因作为药物作用靶点的物质是能够提高NUP35基因的活性和/或表达量的促进剂或NUP35重组蛋白或NUP35蛋白片段活性多肽。

优选的，NUP35基因的核酸序列为SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4。

优选的，能够提高NUP35基因的活性和/或表达量的促进剂包括：小分子化合物、多肽、表达NUP35的载体。

在另一实施方案中，以NUP35蛋白作为药物作用靶点的物质在制备治疗心力衰竭疾病药物中的应用，所述以NUP35蛋白作为药物靶点的药物是能够提高NUP35蛋白的表达与功能的促进剂或NUP35重组蛋白或NUP35蛋白片段活性多肽或NUP35蛋白片段活性多肽。

优选的，NUP35蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3。

优选的，能够提高NUP35蛋白的表达与功能的促进剂包括：构建NUP35基因过表达体系的载体、小分子化合物、多肽。

优选的，NUP35重组蛋白是指基于氨基酸序列SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3合成的重组蛋白。

优选的，NUP35重组蛋白包括：经修饰的NUP35蛋白、与天然NUP35蛋白同源且具有天然NUP35蛋白活性的蛋白分子、NUP35蛋白的二聚体或多聚体、含有NUP35蛋白氨基酸序列的活性多肽。

更优选的，经修饰的NUP35蛋白是PEG化的NUP35蛋白。体内或体外蛋白的化学衍生形式包括乙酸化、羧基化和糖基化。

更优选的，与天然NUP35蛋白同源且具有天然NUP35蛋白活性的蛋白分子是指其氨基酸序列与SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3具有50％或以上，优选60％以上、70％以上、80％以上，85％以上，较佳地至少90％，更佳地至少95％，最佳地至少98％的同源性。

更优选的，上述载体包括：腺病毒、腺相关病毒、慢病毒、质粒、脂质体和纳米颗粒。

优选的，以NUP35基因和/或NUP35蛋白作为药物作用靶点的物质可以选自以下的一种或多种用途：

(1)抑制血管紧张素II和内皮损伤后心力衰竭；

(2)抑制心肌细胞肥大；

(3)抑制心脏细胞纤维化；

在另一实施方案中，本发明提供一种组合物，该组合物包括药学上可接受的载体和以NUP35基因和/或以NUP35蛋白作为作用靶点的物质；其中NUP35重组蛋白是基于氨基酸序列SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3合成的蛋白衍生物。

优选的，上述组合物还包括其他治疗心力衰竭疾病的组分。

本发明涉及的相关定义：

(1)NUP35蛋白及其编码核酸

本发明涉及一种NUP35蛋白及其截断体，所述NUP35蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.1或SEQ ID NO.3所示。本发明的NUP35蛋白或其促进剂可用于：(1)抑制血管紧张素II和内皮损伤后心力衰竭；(2)抑制心肌细胞肥大；(3)抑制心脏细胞纤维化。

本发明还包括与本发明的SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示序列具有50％或以上，优选60％以上、70％以上、80％以上，更优选90％以上，更优选95％以上，最优选98％以上同源性的具有相同或相似功能的多肽或蛋白。

其中，SEQ ID NO.1为人源NUP35蛋白，SEQ ID NO.3为鼠源NUP35蛋白。

本文所用到的术语“治疗”当指保护哺乳动物免受疾病时，是指预防、抑制、压制或消除疾病。预防疾病包括在疾病发病之前给予哺乳动物本发明组合物。抑制疾病包括在诱导疾病之后但在临床表现之前给予哺乳动物本发明的组合物。压制疾病包括在有疾病临床表现后给予哺乳动物本发明的组合物，以使疾病减轻或维持。消除疾病包括在有疾病临床表现后给予哺乳动物本发明的组合物以使哺乳动物不再患病。

本发明的蛋白可以是重组蛋白、天然蛋白、合成蛋白。本发明的蛋白可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的蛋白可以是糖基化的，或是非糖基化的。本发明的蛋白还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。

本发明还包括具有NUP35蛋白活性的NUP35蛋白片段活性多肽和类似物。本文所用的术语“片段”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然NUP35蛋白相同的生物学功能或活性的蛋白。

本发明的突变蛋白片段、衍生物或类似物可以是：(1)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基被取代的突变蛋白，优选保守性氨基酸残基，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的；或(2)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的突变蛋白；或(3)成熟突变蛋白与另一个化合物，比如延长突变蛋白半衰期的化合物(例如聚乙二醇)，融合所形成的突变蛋白；或(4)附加的氨基酸序列融合到此突变蛋白序列而形成的突变蛋白，例如前导序列、分泌序列、用来纯化此突变蛋白的序列或蛋白原序列、与抗原IgG片段的形成的融合蛋白。根据本文的说明，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。本发明中，保守性替换的氨基酸最好根据表I进行氨基酸替换而产生。

表1、保守性替换的氨基酸

本发明还包括与本发明的天然NUP35蛋白具有50％或以上，优选60％以上、70％以上、80％以上，更优选90％以上，更优选95％以上，最优选98％以上同源性的具有相同或相似功能的多肽或蛋白。在蛋白质截断体可以经过若干个(通常为1-60个，较佳地1-30个，更佳地1-20个，最佳地1-10个)取代、缺失或添加至少一个氨基酸所得的衍生序列，以及在C末端和/或N末端添加一个或数个(通常为20个以内，较佳地为10个以内，更佳地为5个以内)氨基酸。例如，在所述蛋白中，用性能相近或相似的氨基酸进行取代时，通常不会改变蛋白质的功能，在C末端和/或N末端添加一个或数个氨基酸通常也不会改变蛋白质的功能。本发明包括天然NUP35蛋白类似物与天然NUP35蛋白的差别可以是氨基酸序列上的差异，也可以是不影响序列的修饰形式上的差异，或者兼而有之。这些蛋白的类似物包括天然或诱导的遗传变异体。诱导蛋白质截断体可以通过各种技术得到，如通过辐射或暴露于诱变剂而产生随机诱变，还可通过定点诱变法或其他已知分了生物学的技术。类似物还包括具有不同于天然L-氨基酸的残基(如D-氨基酸)的类似物，以及具有非天然存在的或合成的氨基酸(如β、γ-氨基酸)的类似物。应理解，本发明的蛋白并不限于上述例举的代表性蛋白。

修饰形式(通常不改变一级结构)包括：体内或体外蛋白的化学衍生形式如乙酸化或羧基化。修饰还包括糖基化，如那些在蛋白质合成和加工中进行糖基化修饰。这种修饰可以通过将蛋白暴露于进行糖基化的酶(如哺乳动物的糖基化酶或去糖基化酶)而完成。修饰形式还包括具有磷酸化氨基酸残基(如磷酸酪氨酸、磷酸丝氨酸、磷酸苏氨酸)的序列。此外，还可以对本发明蛋白质截断体进行修饰。修饰形式(通常不改变一级结构)包括：体内或体外的突变蛋白的化学衍生形式如乙酰化或羧基化。修饰还包括糖基化，如那些在突变蛋白的合成和加工中或进一步加工步骤中进行糖基化修饰而产生的突变蛋白。这种修饰可以通过将突变蛋白暴露于进行糖基化的酶(如哺乳动物的糖基化酶或去糖基化酶)而完成。修饰形式还包括具有磷酸化氨基酸残基(如磷酸酪氨酸、磷酸丝氨酸、磷酸苏氨酸)的序列。还包括被修饰从而提高了其抗蛋白水解性能或优化了溶解性能的突变蛋白。

本发明还提供了编码NUP35蛋白的多核苷酸序列。本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括：DNA、基因组DNA或人工合成的DNA，DNA可以是单链的或是双链的。编码成熟多肽的多核苷酸包括：只编码成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。本发明还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。

在本发明优选例中，NUP35蛋白的多肽序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示，编码NUP35蛋白的多核苷酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4所示。

其中，SEQ ID NO.2为人源NUP35基因的核苷酸序列；SEQ ID NO.4为鼠源NUP35基因的核苷酸序列。

根据本文所述的核苷酸序列，本技术领域人员可方便地用各种已知方法制得本发明的编码核酸。这些方法例如但不限于：PCR、DNA人工合成等，具体的方法可参见J.萨姆布鲁克，《分子克隆实验指南》。作为本发明的一种实施方式，可通过分段合成核苷酸序列再进行重叠延伸PCR的方法来构建本发明的编码核酸序列。

本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50％，较佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中，“严格条件”是指：(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC，0.1％ SDS，60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％ Ficoll，42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在90％以上，更好是95％以上时才发生杂交。

本发明的蛋白和多核苷酸优选以分离的形式提供，更佳地，被纯化至均质。

本发明多核苷酸全长序列通常可以通过PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。

一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。

此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。

目前，已经可以完全通过化学合成来得到编码本发明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中已知的各种现有的DNA分子(如载体)和细胞中。此外，还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。

应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法被优选用于获得本发明的多核苷酸。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时，可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法)，用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择，并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。

(2)NUP35促进剂

在本发明中，NUP35促进剂包括能够在体内或体外提高NUP35基因或其蛋白的活性和/或含量的物质。

其中，可通过下述方法增加NUP35的表达量：组织自身分泌大量NUP35蛋白或人工过表达NUP35蛋白、或者人工输送NUP35蛋白(比如用病毒载体，如腺相关病毒载体)或者NUP35截断体活性蛋白多肽、或者NUP35促进剂。

在本发明中，所述NUP35促进剂没有特别限制，只要能够促进NUP35的表达或者增强NUP35蛋白活性都在本发明的保护范围内。

在一优选实施方式中，所述NUP35促进剂包括小分子化合物。

(3)复方药物组合物和药盒

本发明提供了含有活性成分及药学上可接受的载体的复方药物组合物。活性成分包含：NUP35基因促进剂、NUP35截断体活性蛋白多肽、或者NUP35促进剂；载体包括但并不限于：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、粉剂、及其组合。药物制剂应与给药方式相匹配。本发明的药物组合物可以被制成针剂形式，例如用生理盐水或含有葡萄糖和其他辅剂的水溶液通过常规方法进行制备。诸如片剂和胶囊之类的药物组合物，可通过常规方法进行制备。药物组合物如针剂、溶液、片剂和胶囊宜在无菌条件下制造。本发明的药物组合也可以被制成粉剂用于雾化吸入。本发明的药物组合物的剂型为注射剂、口服制剂(片剂、胶囊、口服液)、支架涂覆剂、透皮剂、缓释剂。活性成分的给药量是治疗有效量。本发明的药物制剂还可制成缓释制剂。本发明的药物组合物优选为注射制剂。此外，本发明药物组合物还可与其他治疗剂一起使用。并且，本发明的药物组合物还可以包括额外的组分，所述额外的组分选自下组：(1)抑制血管紧张素II和内皮损伤后心力衰竭；(2)抑制心肌细胞肥大；(3)抑制心脏细胞纤维化疾病的组分或蛋白截断体多肽。

本发明所述的活性成分的有效量可随给药的模式和待治疗的疾病的严重程度等而变化。优选的有效量的选择可以由本领域普通技术人员根据各种因素来确定(例如通过临床试验)。所述的因素包括但不限于：所述的活性成分的药代动力学参数例如生物利用率、代谢、半衰期等；患者所要治疗的疾病的严重程度、患者的体重、患者的免疫状况、给药的途径等。通常，当本发明的活性成分每天以约0.00001mg-50mg/kg动物体重，较佳地，0.0001mg-10mg/kg动物体重的剂量给予，能得到令人满意的效果。例如，由治疗状况的迫切要求，可每天给予若干次分开的剂量，或将剂量按比例地减少。

本发明所述的药学上可接受的载体包括但不限于：水、盐水、脂质体、脂质、蛋白、蛋白-抗体缀合物、肽类物质、纤维素、纳米凝胶、或其组合。载体的选择应与给药方式相匹配，这些都是本领域的普通技术人员所熟知的。

(4)治疗方法

本发明提供了用本发明的活性成分或相应的药物来治疗血管紧张素II和内皮损伤后心力衰竭；心肌细胞肥大；心脏细胞纤维化疾病的药物组合物。

当本发明的活性成分被用于上述用途时，可与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合，如溶剂、稀释剂等，而且可以用如下形式口服给药：片剂、丸剂、胶囊、可分散的粉末、颗粒或悬浮液(含有约0.05-5％悬浮剂)、糖浆(含有约10-50％糖)、和酏剂(含有约20-50％乙醇)，或者以无菌可注射溶液或悬浮液形式(在等渗介质中含有约0.05-5％悬浮剂)进行非肠胃给药。例如，这些药物制剂可含有与载体混合的约0.01-99％，更佳地约为0.1％-90％(重量)的活性成分。

本发明的两种活性成分或药物组合物可以通过常规途径进行给药，其中包括但并不限于：肌内、腹膜内、静脉内、皮下、皮内、口服、瘤内或局部给药。优选的给药途径包括口服给药、肌内给药或静脉内给药。

从易于给药的立场看，优选的药物组合物是液态组合物，尤其是注射剂。

本申请至少包括以下有益技术效果：

本发明证实NUP35基因及其蛋白、活性截断体蛋白多肽、或其促进剂能够抑制血管紧张素II和内皮损伤后心力衰竭；抑制心肌细胞肥大；抑制心脏细胞纤维化疾病。

附图说明

图1是实施例1中心肌细胞敲减NUP35加重血管紧张素II诱导的心力衰竭的结果图；

图2是实施例2中心肌细胞敲除NUP35加重血管紧张素II诱导心脏纤维化的结果图；

图3是实施例3中RNA测序和RNA免疫沉淀测序的结果图；

图4是实施例4中过表达NUP35减缓血管紧张素II诱导心力衰竭的结果图；

图5是实施例5中心肌细胞特异过表达NUP35减缓血管紧张素II诱导的心脏纤维化(蛋白质免疫印迹试验)的结果图；

图6是实施例6中Western blot数据显示心肌细胞特异过表达NUP35减缓血管紧张素II诱导的心脏纤维化相关基因Col I和Col III的表达的结果图。

具体实施方式

以下结合附图和实施例对本申请的效果作进一步详细说明。

实施例1：心肌细胞敲减NUP35加重血管紧张素II诱导的心力衰竭

NUP35^flox/flox条件敲除鼠给与Cre重组酶腺相关病毒在心肌细胞敲除NUP35蛋白，尾静脉给与空载腺相关病毒作为对照。给与腺相关病毒1周后，小鼠背部埋血管紧张素II泵(1000ng/kg/min)2周。小动物超声评估心脏功能，结果如图1所示(图示是6-7次独立实验的结果；数据显示平均值±标准误。AAV-Empty代表同窝野生型对照小鼠；AAV-Cre代表心肌细胞特异性敲除NUP35小鼠)。

由图1可知，结果显示PBS处理组小鼠，心肌细胞敲除NUP35不影响射血分数(Ejection Fraction％)和舒张早期二尖瓣血流峰值速度E与舒张早期二尖瓣瓣环峰值速度e'比值(E/e’)。而血管紧张素II(Ang II)处理2周不影响EF值，增加E/e’值。心肌细胞敲除NUP35更进一步地增加E/e’值，提示心肌细胞敲除NUP35加重Ang II诱导的心力衰竭。

实施例2：心肌细胞敲除NUP35加重血管紧张素II诱导心脏纤维化

将PBS和Ang II处理组对照和NUP35敲除鼠心脏切片进行马松染色，结果如图2所示(图示是6-7次独立实验的结果；数据显示平均值±标准误；标尺代表100μm；AAV-Empty代表同窝野生型对照小鼠；AAV-Cre代表心肌细胞特异性敲除NUP35小鼠)。

由图2可知，结果显示心肌细胞敲除NUP35加重血管紧张素II诱导心脏纤维化。

实施例3：RNA测序和RNA免疫沉淀测序

将对照和NUP35敲除鼠心脏组织进行RNA测序，结果如图3(左)所示。结果显示心肌细胞敲除NUP35上调纤维化和心肌肥大基因。

对NUP35抗体行RNA免疫沉淀测序(RIP-Seq)，将RNA免疫沉淀测序结果和RNA测序结果取交集，结果如图3(右)所示。结果显示NUP35敲除上调Wif1表达。

实施例4：过表达NUP35减缓血管紧张素II诱导心力衰竭

C57BL/6小鼠尾静脉注射心肌细胞特异NUP35过表达腺相关病毒和对照病毒，从而在心肌细胞特异过表达NUP35。给与腺相关病毒1周后，小鼠背部埋血管紧张素II泵(1000ng/kg/min)2周。小动物超声评估心脏功能，结果如图4所示(图示是6次独立实验的结果；数据显示平均值±标准误；Ctrl代表注射对照空载体病毒C57BL/6小鼠；NUP35代表注射心肌细胞特异性过表达NUP35病毒C57BL/6小鼠)。

由图4可知，结果显示心肌细胞过表达NUP35减缓血管紧张素II诱导心力衰竭。

实施例5：心肌细胞特异过表达NUP35减缓血管紧张素II诱导的心脏纤维化(蛋白质免疫印迹试验)

对照鼠和心肌细胞特异过表达NUP35小鼠心脏组织进行Western blot，结果如图5所示(图示是6次独立实验的结果；数据显示平均值±标准误；Ctrl代表注射对照空载体病毒C57BL/6小鼠；NUP35代表注射心肌细胞特异性过表达NUP35病毒C57BL/6小鼠)。

由图5可知，结果显示心肌细胞特异过表达NUP35减缓血管紧张素II诱导的心脏纤维化相关基因表达。

实施例6：Western blot数据显示心肌细胞特异过表达NUP35减缓血管紧张素II诱导的心脏纤维化相关基因Col I和Col III的表达

对照鼠和心肌细胞特异过表达NUP35小鼠心脏切片行免疫荧光染色，结果如图6所示(图示是6次独立实验的结果；数据显示平均值±标准误；标尺代表100μm；Ctrl代表注射对照空载体病毒C57BL/6小鼠；NUP35代表注射心肌细胞特异性过表达NUP35病毒C57BL/6小鼠)。

由图6可知，结果显示心肌细胞特异过表达NUP35减缓血管紧张素II诱导的SMA+肌成纤维细胞数目。

以上均为本申请的较佳实施例，并非依此限制本申请的保护范围，故：凡依本申请的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本申请的保护范围之内。

Claims (10)

1.以NUP35基因和/或以NUP35蛋白作为作用靶点的物质在制备治疗心力衰竭疾病药物中的应用；

所述以NUP35基因作为作用靶点的物质是能够提高NUP35基因活性和/或表达量的促进剂或NUP35重组蛋白或NUP35蛋白片段活性多肽；

所述以NUP35蛋白作为作用靶点的物质是能够提高NUP35蛋白表达与功能的促进剂或NUP35重组蛋白或NUP35蛋白片段活性多肽。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述能够提高NUP35基因活性和/或表达量的促进剂包括：小分子化合物、多肽、表达NUP35的载体。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述能够提高NUP35蛋白表达与功能的促进剂包括：构建NUP35基因过表达体系的载体、小分子化合物、多肽；

所述NUP35重组蛋白是指基于氨基酸序列SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3合成的重组蛋白。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述NUP35重组蛋白包括：经修饰的NUP35蛋白、与天然NUP35蛋白同源且具有天然NUP35蛋白活性的蛋白分子、NUP35蛋白的二聚体或多聚体、含有NUP35蛋白氨基酸序列的活性多肽。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述经修饰的NUP35蛋白是PEG化的NUP35蛋白。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述与天然NUP35蛋白同源且具有天然NUP35蛋白活性的蛋白分子是指其氨基酸序列与SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3具有至少85％的同源性。

7.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述载体包括：腺病毒、腺相关病毒、慢病毒、质粒、脂质体和纳米颗粒。

8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物具有以下的一种或多种用途：

(1)抑制血管紧张素II和内皮损伤后心力衰竭；

(2)抑制心肌细胞肥大；

(3)抑制心脏细胞纤维化。

9.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括药学上可接受的载体和权利要求1所述的以NUP35基因和/或以NUP35蛋白作为作用靶点的物质。

10.权利要求9所述的组合物在制备心力衰竭疾病的药物中的应用；

所述心力衰竭疾病包括血管紧张素II和内皮损伤、心肌梗死、缺血-再灌注、高脂肪高果糖和衰老诱导心力衰竭。