CN117898993A - 一种仿生微针及其制备和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种仿生微针，并提供了其制备方法和应用。本发明所述的仿生微针是基于蛋白质和高分子多糖复合膜的微针，具体为所述仿生微针的外壳由蛋白质和高分子多糖形成的复合膜制备而成，中间的中空空腔可用来装载功能活性物质。本发明所述的蛋白质和高分子多糖形成复合膜所构成的微针外壳，可显著提高聚合物微针的机械强度；微针的中空空腔可全部用于装载功能活性物质，可显著提高微针的装载能力，从而有效提高微针的转化潜力。

Description

一种仿生微针及其制备和应用

技术领域

本发明涉及用于药物或疫苗递送及美容的微针技术领域，具体涉及一种基于蛋白质和高分子多糖的复合膜结构的仿生微针的制备及其应用。

背景技术

聚合物微针由高分子聚合物制备而成，是长度在100–1000μm的微型针状结构。由于其可有效穿刺皮肤角质层屏障，而同时不触及皮肤内的神经与血管，因此聚合物微针递送功能物质几乎无痛微创伤，患者顺应性好。同时，聚合物微针递送功能活性物质后，聚合物材料可在皮肤内溶解或降解，因此没有医疗或美容废弃物的残留，安全性好。另一方面，通过调节聚合物的化学性质可有效调节功能活性物质的释放行为。

但是聚合物微针相比由金属或者无机材料制备而成的微针，其机械强度相对较低，可能导致皮肤穿刺效率不理想。同时，微针较小的针体体积严重限制了微针的装载能力，而功能活性物质的装载会进一步降低聚合物微针的机械强度。以上两个问题均严重地降低了聚合物微针的实际应用范围和转化潜力。另一方面，聚合物微针装载功能活性物质时，一般先将活性成分与聚合物材料一起溶解或混合均匀后再进行载药，因此装载过程较为复杂，且溶解和混合步骤有可能损害活性成分的功能或者结构，从而影响其功效。

一般情况下，为了提高聚合物微针的机械强度，可以在聚合物材料里掺入金属纳米粒子或者无机物成分，利用这些材料本身较高的机械强度来提高微针整体的机械性能。然而，这种方法具有两方面缺点。第一，这些金属和无机材料的掺入会降低聚合物微针的生物相容性，增大聚合物微针的安全性风险。另一方面，金属和无机材料的加入会进一步损害聚合物微针的装载能力。以上两方面的缺点会降低聚合物微针的临床转化潜力。

为了提高聚合物微针的装载能力，可通过制备核壳型聚合物微针来实现。首先，可使用聚合物材料(如PLGA、PVA等)制备微针的外壳，将功能活性物质直接装载于微针的中空空腔内。此种策略可有效增强微针的装载能力，但核壳型聚合物微针的机械强度相比聚合物实心微针会显著降低，不利于微针的皮肤穿刺。另外，也可以通过直接增加微针的尺寸和数量来提高聚合物微针的装载能力，但这种策略会导致微针制备难度显著提高，且微针尺寸增大可能会加剧给药时的疼痛感。

因此，研发一种制备简便、能够同时提升微针机械强度和载药量的新型聚合物微针及其制备方法，具有重要的商业价值和科研意义。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种基于蛋白质和高分子多糖的仿生微针及其制备方法和应用。一方面，本发明通过对微针制备材料进行改进，制备了仿生型微针外壳，有效提高了微针的机械强度。另一方面，微针的中空空腔可用于直接装载功能活性物质的粉末、浓溶液或混悬液，可显著提高微针的装载量。同时，此种药物装载方法不受限于功能活性物质的理化性质，不需要功能活性物质与微针制备材料预先混合，提高了功能活性物质装载的方便性和稳定性。

昆虫的角质层、甲壳类动物的外壳以及软体动物的珍珠层都具有超强的机械强度和硬度，研究发现这些生物组织里面都存在甲壳素类多糖和蛋白质形成的复合膜结构，因此，为了提高微针的机械强度，本发明使用蛋白质和高分子多糖形成复合膜以模拟这些生物组织来制备高机械强度微针。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种仿生微针，所述微针的外壳包含蛋白质和高分子多糖，内部为中空空腔结构，可用于装载功能活性物质。优选的，所述微针的外壳包含蛋白质和高分子多糖形成的复合膜，内部为中空空腔结构，可用于装载功能活性物质。优选的，所述的功能活性物质包括具有美容功效的组份、具有治疗或者预防功效的药物或疫苗的一种或多种。

优选的，所述蛋白质为胶原蛋白、丝素蛋白、明胶、层纤粘蛋白、白蛋白中的一种或多种。

优选的，所述多糖为壳聚糖、N-三甲基壳聚糖、羧甲基壳聚糖、N-琥珀酰壳聚糖、季铵盐壳聚糖、壳寡糖的一种或多种。

所述仿生微针中外壳厚度可以通过调节复合膜结构的层数来进行控制。

优选的，所述复合膜可以是多层膜，进一步优选的，所述仿生微针的外壳为双层膜。

进一步优选的，所述蛋白质为丝素蛋白，所述高分子多糖为壳聚糖。

本发明提供一种仿生微针的制备方法，包括以下步骤：

(1)将蛋白质溶液加入微针模具中，干燥后得到蛋白质膜；

(2)在微针模具中加入甲醇对蛋白质膜进行处理，将残留甲醇去除后进行干燥；

(3)加入高分子多糖溶液到微针模具中，进行干燥，即得到双层膜微针结构；

(4)可重复上述前三步骤直到达到所需要的复合膜层数；

(5)将功能活性物质粉末、溶液或者混悬液加入上述复合膜微针的中空空腔；

(6)最终补加聚合物溶液作为微针衬底，干燥后剥离微针即得到装载活性物质的仿生微针。

优选的，上述微针制备方法中，步骤(1)和(3)中的溶液为水溶液，所述蛋白质水溶液中蛋白质的浓度为0.5％-20％(m/v)，所述高分子多糖水溶液中高分子多糖的浓度为0.5％-20％(m/v)。进一步优选的，所述蛋白质水溶液中蛋白质的浓度为1％-10％，所述高分子多糖水溶液中高分子多糖的浓度为0.5％-5％。进一步优选的，所述蛋白质水溶液中蛋白质的浓度为8％，所述高分子多糖水溶液中高分子多糖的浓度4％。进一步优选的，所述蛋白质为丝素蛋白，所述高分子多糖为壳聚糖。

所述用于制备微针衬底的聚合物为聚酯、PHA、PHBV、PHP、PHH、PHA-PEG、聚4-羟基酸、聚α-羟基酸、聚β-羟基酸、聚4-羟基丁酸酯、聚4-羟基戊酸酯、聚4-羟基己酸酯、聚酯酰胺、聚已内酯、聚丙交酯、聚乙醇酸交酯、PLGA、聚二噁烷酮、聚原酸酯、聚醚酯、聚酐、乙醇酸-三亚甲基碳酸酯共聚物、聚磷酸酯、聚磷酸酯氨基甲酸酯、聚氨基酸、聚氰基丙烯酸酯、聚三亚甲基碳酸酯、聚亚氨基碳酸酯、聚酪氨酸碳酸酯、聚碳酸酯、聚酪氨酸芳基酯、聚亚烷基草酸酯、聚磷酸肌酸、壳聚糖、右旋糖苷、纤维素、肝素、透明质酸、海藻酸、菊糖、淀粉和糖原中的至少一种。

本发明的有益效果为：

(1)本发明的仿生微针的复合膜外壳可显著提高微针的机械强度，因此可以有效保证微针的皮肤穿刺效率。传统聚合物微针需将聚合物材料做成实心结构才能保证较好的皮肤穿刺效率，本发明的仿生微针的复合膜外壳即具有比传统实心聚合物微针更强的机械强度，能够有效保证微针的皮肤穿刺效率。

(2)本发明的仿生微针的中空空腔可用于直接装载功能活性物质，因此这种复合膜微针可有效提高微针的装载量。相比于传统聚合物微针，本发明的复合膜微针可将微针的药物装载量提高至少三倍以上。

(3)本发明的仿生微针的载药过程为将活性物质粉末、浓溶液或混悬液直接灌入到微针中空空腔内，不需要干燥或者干燥时间短，因此这种装载方式对活性物质功能或者结构影响小，装载过程简便。

附图说明

图1为本发明实施例1制备的未装载活性物质的仿生微针。

图2为本发明实施例1制备的仿生微针的横切面扫描电镜图。

图3为本发明实施例1制备的仿生微针的皮肤穿刺图。

图4为本发明实施例2制备的载雷帕霉素仿生微针。

图5为本发明实施例2和对比例4制备的载雷帕霉素微针载药量结果。

图6为本发明实施例2制备的载雷帕霉素仿生微针皮肤穿刺图。

图7为本发明实施例3制备的载OVA仿生微针。

图8为本发明实施例4制备的载甲氨蝶呤二钠盐仿生微针。

图9为本发明实施例5制备的载树突状细胞的仿生微针。

图10为本发明实施例6制备的仿生微针。

具体实施方式

以下通过特定的具体实施例说明本发明的实施方式，本领域的研究或技术人员可根据本说明里的内容轻易的了解本发明的其他优点与功效。本发明也可以通过其他的具体实施方式加以实施或应用，也可以根据不同的应用，进行各种修饰和改变。

在进一步描述本发明的具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案。本发明实施例使用的术语是为了描述特定的实施方案，不是为了限制本发明的保护范围。

本发明对所采用的原料来源不做限定，如果没有特殊说明，本发明所采用的原料均为本技术领域的普通市售产品。

本发明公布的仿生微针，外壳由蛋白质和高分子多糖形成的高机械强度复合膜结构制备而成，中空空腔可用来装载功能活性物质。因此，此种仿生微针可以有效的同时提升微针的机械强度和装载能力。本发明通过改善聚合物微针的制备材料和活性物质装载方式进行了创造性的劳动，得到了本发明的方案。

实施例1

将丝素蛋白溶于水，制成8％(m/v)的丝素蛋白溶液，使用加压气体将10μl上述丝素蛋白溶液压入微针模具中。

将上述微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，在室温下干燥2h后，加入20μl甲醇到微针模具中，使用加压气体将甲醇压入模具后放置30min。

使用水将模具中的甲醇清洗干净。

将壳聚糖溶于2％(v/v)的醋酸水溶液中，配制成4％(m/v)壳聚糖溶液，使用加压气体将10μl所述壳聚糖溶液压入微针模具中，放入含有无水硅胶的干燥釜中室温干燥2h。

向上述微针模具中加入10μl 500mg/ml透明质酸溶液，干燥得到底座，即可最终剥离得到双层膜仿生微针。

所制备的未装载功能活性物质的仿生微针见图1，可看到明显的微针中空结构；所制备的仿生微针的机械强度数据见表1，破裂压强为116.67±3.36MPa，杨氏模量为1.10±0.05GPa；单个微针针尖横切面扫描电镜图见图2，可看到明显的微针中空结构和丝素蛋白-壳聚糖双层膜结构；微针皮肤穿刺效果见图3，可见所制备微针可有效穿刺皮肤，皮肤穿刺效率高于95％。

表1：未载药双层膜微针机械强度

实施例2

将丝素蛋白溶于水，制成8％(m/v)的丝素蛋白溶液，使用加压气体将10μl上述丝素蛋白溶液压入微针模具中。

将上述微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，在室温下干燥2h后，加入20μl甲醇到微针模具中，使用加压气体将甲醇压入模具后放置30min。

使用水将模具中的甲醇清洗干净。

将壳聚糖溶于2％(v/v)的醋酸水溶液中，配制成4％(m/v)壳聚糖溶液，使用加压气体将10μl所述壳聚糖溶液压入微针模具中，放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中室温干燥2h。

向模具上方加入雷帕霉素粉末，离心使药物进入微针中空空腔。

上述加入药物粉末的过程，可以重复进行多次，直到药物填满微针模具为止。

向上述微针模具中加入10μl 500mg/ml透明质酸溶液，干燥得到底座，即可最终剥离得到载药的仿生微针。

所制备微针见图4，可明显观察到雷帕霉素被装载进入复合膜微针的中空空腔；所制备微针的载药量为167.0±11.2μg(见图5)；微针皮肤穿刺效果见图6，可见所制备微针可有效穿刺皮肤，皮肤穿刺效率高于95％。

实施例3

将丝素蛋白溶于水，制成8％(m/v)的丝素蛋白溶液，使用加压气体将10μl上述丝素蛋白溶液压入微针模具中。

将上述微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，在室温下干燥2h后，加入20μl甲醇到微针模具中，使用加压气体将甲醇压入模具后放置30min。

使用水将模具中的甲醇清洗干净。

将壳聚糖溶于水中，制成4％(m/v)壳聚糖水溶液，使用加压气体将10μl所述壳聚糖溶液压入微针模具中，放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中室温干燥2h。

向模具空腔中加入10μl 30mg/ml鸡卵清白蛋白(OVA)水溶液，离心使溶液进入微针中空空腔，室温干燥2h。

上述加入蛋白溶液的过程，可以重复进行多次，直到蛋白填满微针模具为止。

向上述微针模具中加入10μl 500mg/ml透明质酸溶液，干燥得到底座，即可最终剥离得到载蛋白的仿生微针。

所制备微针见图7。

实施例4

将丝素蛋白溶于水，制成8％(m/v)的丝素蛋白溶液，使用加压气体将10μl所述丝素蛋白溶液压入微针模具中。

将上述盛有丝素蛋白溶液的微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，在室温下干燥2h后，加入20μl甲醇，使用加压气体将甲醇压入上述微针模具后放置30min。

使用水将微针模具中的甲醇清洗干净。

将壳聚糖溶于2％(v/v)醋酸水溶液中，制成4％(m/v)的壳聚糖水溶液，使用加压气体将10μl所述壳聚糖溶液压入微针模具中，放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中室温干燥2h。

向模具上方加入10μl 50mg/ml甲氨蝶呤二钠盐水溶液，离心使溶液进入微针中空空腔。

上述加入药物溶液的过程，可以重复进行多次，直到药物填满微针模具为止。

向上述微针模具中加入10μl 500mg/ml透明质酸溶液，干燥得到底座，即可最终剥离得到载有甲氨蝶呤二钠盐的仿生微针。

所制备微针见图8，可明显观察到甲氨蝶呤二钠盐被装载进入微针针体当中；微针载药量为129.7±9.6μg。

实施例5

将丝素蛋白溶于水，制成8％(m/v)的丝素蛋白溶液，使用加压气体将10μl所述丝素蛋白溶液压入微针模具中。

将上述盛有丝素蛋白溶液的微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，在室温下干燥2h后，加入20μl甲醇，使用加压气体将甲醇压入上述微针模具后放置30min。

使用水将微针模具中的甲醇清洗干净。

将壳聚糖溶于2％(v/v)醋酸水溶液中，制成4％(m/v)的壳聚糖水溶液，使用加压气体将10μl所述壳聚糖溶液压入微针模具中，放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中室温干燥2h。

向模具上方加入100μl绿色荧光标记的小鼠骨髓来源树突状细胞(1×10⁸细胞/ml)，静置1h使细胞沉降入微针的针尖。

将微针底座上的多余液体吸走。

向上述微针模具上方加入10μl 500mg/ml透明质酸溶液，干燥得到底座，即可最终剥离得到载树突状细胞的仿生微针。

所制备微针见图9，可明显观察到293T细胞被包载进入微针针体当中。

实施例6

将丝素蛋白溶于水，制成8％(m/v)的丝素蛋白溶液，使用加压气体将10μl所述丝素蛋白溶液压入微针模具中。

将上述盛有丝素蛋白溶液的微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，在室温下干燥2h后，加入20μl甲醇，使用加压气体将甲醇压入上述微针模具后放置30min。

使用水将微针模具中的甲醇清洗干净。

将壳聚糖溶于2％(v/v)醋酸水溶液中，制成4％(m/v)的壳聚糖水溶液，使用加压气体将10μl所述壳聚糖溶液压入微针模具中，放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中室温干燥2h。

按照上述方法继续制备各一层丝素蛋白膜和壳聚糖膜，最终制备得到四层膜结构。

向上述微针模具中加入10μl 500mg/ml透明质酸溶液，干燥得到底座，即可最终剥离得到丝素蛋白-壳聚糖四层膜微针。

所制备微针见图10，可以看见明显的微针中空结构。所制备的四层膜微针的机械强度数据见表2，破裂压强为163.37±3.47MPa，杨氏模量为1.48±0.05GPa。相比实施例1所制备的双层膜微针，四层膜微针的机械强度进一步得到提高。

表2：丝素蛋白-壳聚糖四层膜微针机械强度

实施例7-实施例14

实施例7-实施例14提供的仿生微针贴片，其制备方法同实施例1，不同在于蛋白质和高分子多糖的种类，实施例7-实施例14分别制备了如表3所示的几种微针贴片。

表3：实施例7-实施例14所制备仿生微针的蛋白质和高分子多糖的种类、浓度和用量

测定了实施例7-实施例14所制备仿生微针的机械强度，测试结果如表4所示；

表4：实施例7-实施例14所制备仿生微针的机械强度

实验结果表明，使用丝素蛋白、胶原蛋白、明胶和壳聚糖、N-三甲基壳聚糖、羧甲基壳聚糖均可得到机械强度高的仿生微针。

实施例15-实施例19

实施例15-实施例19提供的仿生微针贴片，其制备方法同实施例1，不同在于丝素蛋白和壳聚糖溶液的浓度，实施例15-实施例19分别制备了如表5所示的几种微针贴片。

表5：实施例15-实施例19所制备仿生微针丝素蛋白和壳聚糖的浓度

测定了实施例15-实施例19所制备仿生微针的机械强度，测试结果如表6所示。

表6：实施例15-实施例19所制备仿生微针的机械强度

实验结果显示，使用丝素蛋白和壳聚糖制备仿生微针时，随着丝素蛋白和壳聚糖溶液浓度的增加，所制备仿生微针的机械强度也会显著增加。

微针机械强度与载药量对比：

对比例1

将透明质酸溶于水，制备成500mg/ml的透明质酸溶液。

使用加压气体将20μl上述透明质酸溶液压入微针模具中。

将微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，室温下干燥2h。

加入20μl透明质酸溶液作为底座，室温下干燥2h。

将微针从模具中剥离，即可得到空白透明质酸微针。

所制备透明质酸实心微针的破裂压强为57.30±5.54MPa，杨氏模量为0.50±0.05GPa，见表7。通过对比实施例1、实施例6-实施例19与本对比例的结果可以发现，本发明仿生微针的机械强度显著高于传统透明质酸实心微针。

表7：所制备透明质酸微针的机械强度

对比例2

将壳聚糖溶于2％(v/v)的醋酸水溶液中，配制成4％(m/v)壳聚糖溶液。

使用加压气体将10μl所述壳聚糖溶液压入微针模具中。

将微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，室温干燥2h。

向上述微针模具中加入10μl 500mg/ml透明质酸溶液，室温干燥2h得到底座。

将微针从模具中剥离，即可得到壳聚糖薄膜微针。

所制备壳聚糖薄膜微针的破裂压强为32.64±2.40MPa，杨氏模量为0.26±0.03GPa，见表8。

表8：所制备壳聚糖薄膜微针的机械强度

通过对比实施例1与本对比例的结果可以发现，加入丝素蛋白后，丝素蛋白-壳聚糖仿生微针的机械强度显著高于壳聚糖薄膜微针。可见，在壳聚糖膜微针上添加丝素蛋白膜制备成复合膜结构的微针，可以显著提高微针的机械强度。

对比例3

将丝素蛋白溶于水，配制成8％(m/v)丝素蛋白溶液。

使用加压气体将10μl所述丝素蛋白溶液压入微针模具中。

将微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，室温干燥2h。

向上述微针模具中加入10μl 500mg/ml透明质酸溶液，室温下干燥2h得到底座。

将微针从模具中剥离，即可得到丝素蛋白薄膜微针。

所制备丝素蛋白薄膜微针的破裂压强为43.15±3.71MPa，杨氏模量为0.34±0.04GPa，见表9；通过对比实施例1与本对比例的结果可以发现，加入壳聚糖后，丝素蛋白-壳聚糖仿生微针的机械强度显著高于丝素蛋白薄膜微针。可见，在丝素蛋白膜微针上添加壳聚糖膜制备成复合膜结构的微针，可以显著提高微针的机械强度。综上可知，蛋白质和高分子多糖二者具有协同作用，二者结合可显著提高微针的机械强度。

表9：所制备丝素蛋白薄膜微针的机械强度

微针载药量对比：

对比例4

将透明质酸溶于水，制备成500mg/ml的透明质酸溶液。

将雷帕霉素加入上述溶液中充分搅拌，制备成含50mg/ml雷帕霉素的透明质酸混悬液。

使用加压气体将20μl上述载药透明质酸混悬液压入微针模具中。

将微针模具放入含有无水硅胶的玻璃干燥器中，室温下干燥2h。

加入20μl透明质酸溶液作为底座，室温下干燥2h。

将微针从模具中剥离，即可得到载雷帕霉素的透明质酸微针。

所制备微针载药量为48.8±7.4μg。通过对比实施例2与本对比例，可见与传统聚合物实心微针相同大小的仿生微针载药量提高了3.4倍，显著提高了载药量，差异对比见图5。

综上可知，本发明制备的仿生微针可同时显著提高聚合物微针的机械强度和装载能力。一方面，微针的复合膜外壳具有比传统实心聚合物微针更强的机械强度，能够有效保证微针的皮肤穿刺效率。另一方面，微针的中空空腔可用于直接装载功能活性物质，可显著提高微针的装载量；相比于传统聚合物微针，本发明的仿生微针可将微针的药物装载量提高至少三倍以上。同时，本发明的仿生微针的载药过程为将活性物质粉末、浓溶液或混悬液直接灌入到微针中空空腔内，不需要干燥或者干燥时间短，因此这种装载方式对活性物质功能或者结构影响小，装载过程简便，活性物质性质更多样，适用范围更广泛。

以上所述仅是本发明的优选实施例而已，并非对本发明做任何形式上的限制，虽然本发明以优选实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明。任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案的范围内，当可利用上述揭示的技术内容做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (9)

1.一种仿生微针，其特征在于，所述微针的外壳包含蛋白质和高分子多糖，内部为中空空腔结构，可用于装载功能活性物质。

2.根据权利要求1所述的仿生微针，其特征在于，所述蛋白质为胶原蛋白、丝素蛋白、明胶、层纤粘蛋白、白蛋白中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的仿生微针，其特征在于，所述高分子多糖为壳聚糖、N-三甲基壳聚糖、羧甲基壳聚糖、N-琥珀酰壳聚糖、季铵盐壳聚糖、壳寡糖的一种或多种。

4.根据权利要求1-3任一项所述的仿生微针，其特征在于，所述蛋白质和高分子多糖形成复合膜，优选的所述复合膜可以是多层膜，更优选为双层膜。

5.根据权利要求4所述的仿生微针，其特征在于，其外壳厚度可以通过调节复合膜结构的层数来进行控制。

6.一种权利要求1-5任一项所述仿生微针的制备方法，其特征在于，所述复合膜微针的制备方法包括以下步骤：

(1)将蛋白质溶液加入微针模具中，干燥后得到蛋白质膜；

(2)在微针模具中加入甲醇对蛋白质膜进行处理，将残留甲醇去除后进行干燥；

(3)加入高分子多糖溶液到微针模具中，进行干燥，即得到蛋白质和高分子多糖形成的复合膜微针结构；

(4)可重复上述前三步骤直到达到所需要的复合膜层数；

(5)将功能活性物质加入上述复合膜微针的中空空腔内并干燥；

(6)最终补加聚合物溶液作为微针衬底，干燥后剥离微针即得。

7.针对权利要求6所述的仿生微针的制备方法，其特征在于，所述蛋白质溶液中蛋白质的浓度为0.5％-20％(m/v)，所述高分子多糖溶液中高分子多糖的浓度为0.5％-20％(m/v)。

8.针对权利要求6所述的仿生微针的制备方法，其特征在于，所述用于制备微针衬底的聚合物为聚酯、PHA、PHBV、PHP、PHH、PHA-PEG、聚4-羟基酸、聚α-羟基酸、聚β-羟基酸、聚4-羟基丁酸酯、聚4-羟基戊酸酯、聚4-羟基己酸酯、聚酯酰胺、聚已内酯、聚丙交酯、聚乙醇酸交酯、PLGA、聚二噁烷酮、聚原酸酯、聚醚酯、聚酐、乙醇酸-三亚甲基碳酸酯共聚物、聚磷酸酯、聚磷酸酯氨基甲酸酯、聚氨基酸、聚氰基丙烯酸酯、聚三亚甲基碳酸酯、聚亚氨基碳酸酯、聚酪氨酸碳酸酯、聚碳酸酯、聚酪氨酸芳基酯、聚亚烷基草酸酯、聚磷酸肌酸、壳聚糖、右旋糖苷、纤维素、肝素、透明质酸、海藻酸、菊糖、淀粉和糖原中的至少一种。

9.针对权利要求1-5任一所述的仿生微针或权利要求6-8任一方法制备的仿生微针，其特征在于所制备微针可以装载小分子类、大分子类、细胞类和病毒类的药物、佐剂和/或美容组份。