CN117866840A - 一株粪肠球菌xy2及其在制备抗炎和美白食品药品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于益生菌及其应用技术领域，具体涉及一株粪肠球菌XY2及其在制备抗炎和美白食品药品中的应用。为进一步开发利用粪肠球菌的益生功能，本发明从中国广东省一名健康成年人的粪便样品中分离纯化得到一株粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株，该菌株可产生和分泌3‑羟基丁酸，可产生和分泌透明质酸，可清除羟自由基，具有超氧化物歧化酶活性，有望应用于抗炎和改善肠道菌群；美白和抗皱；抗氧化、抗炎和抗衰老；增强免疫力和护肝等方面，在抗炎和美白等领域具有重要的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于益生菌及其应用技术领域，具体涉及一株粪肠球菌XY2及其在制备抗炎和美白食品药品中的应用。
背景技术
粪肠球菌(Enterococcus faecalis)是革兰氏阳性菌，过氧化氢阴性球菌，是人和动物肠道内主要菌群之一。粪肠球菌(E.faecalis)是一种兼性厌氧型革兰氏阳性乳酸菌，菌体形态为球状或链状，大多数成双或短链状排列，通常不运动，直径为0.5-1.0微米，无荚膜，无芽孢，对环境适应力和抵抗力强，可耐受四环素、卡那霉素、庆大霉素等多种抗生素，生长条件要求不严格。此外，粪肠球菌可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，但不能发酵阿拉伯糖。
粪肠球菌是人类肠道的正常寄居菌，存在于大约90-95％的人体当中。这种细菌通常是生命早期定植于人类胃肠道的首批微生物之一，在肠道免疫系统的发育中发挥着重要作用。《饲料添加剂品种目录(2013)》将粪肠球菌划分为可以添加到饲料中的菌种，其在动物肠道内可形成生物薄膜而附着于动物肠道的粘膜上，并且其上发育、生长和繁殖。而且，粪肠球菌能够将饲料中的纤维变软，提高饲料的转化率。
粪肠球菌是人和动物肠道内的主要菌群之一，能产生天然抗生素，有利于机体健康；还能产生细菌素等抑菌物质，抑制大肠杆菌和沙门氏菌等病原菌的生长，改善肠道微环境；还能抑制肠道内产尿素酶细菌和腐败菌的繁殖，减少肠道尿素酶和内毒素的含量，使血液中氨和内毒素的含量下降。同时，粪肠球菌为消化道内正常存在的一类微生物，在肠黏膜中具有较强的耐受和定植能力，并且是一种兼性厌氧的乳酸菌，适合于生产和应用，也是一种很好的饲用微生物，在水产、畜禽上的应用广泛。此外，粪肠球菌既是人和动物肠道中的正常菌群，也是一种重要的乳酸菌，具有较好的肠道粘附能力，能产生乳酸及一些抗菌物质，抑制肠道腐败菌、致病菌的繁殖及肠道感染，降低腹泻率，促进营养物质的消化吸收，增强免疫力，提高采食量及饲料转化率，促进动物健康，是畜牧生产及食品工业首选使用的益生菌菌种之一。有学者研究发现，在玉米秸秆青贮饲料中添加粪肠球菌和纤维素酶，能使青贮饲料的色泽、气味和质地等发生明显的改善，干物质消失率提高8％，氨态氮与总氮质量比降低33％，丁酸质量分数降低82％，同时使中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量分别降低10％和7％，明显提高了饲料品质。同时，有研究证实，粪肠球菌能够产生多种抗菌物质，这些抗菌物质对沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等致病菌具有良好的抑制作用。也有研究表明，粪肠球菌能够产生伏尔加霉素，可以有效抑制李斯特菌和金黄色葡萄球菌和腐败微生物的生长繁殖。粪肠球菌也能增强巨嗜细胞的活性，促进动物的免疫反应，提高抗体水平。粪肠球菌在动物肠道内可形成生物薄膜而附着于动物肠道粘膜上，并且在此发育、生长和繁殖，可形成乳酸菌屏障，抵御外来病菌病毒及霉菌毒素等的负影响。
现有的大量研究表明，粪肠球菌的不同菌株具有不同的益生功能。比如：(1)粪肠球菌菌株T-110与枯草芽孢杆菌TO-A和丁酸梭菌TO-A结合使用作为益生菌(BIO-THREE)。这三种菌株一起可以减少手术患者的术后感染并缩短急性腹泻患儿的住院时间。(2)一项交叉研究发现，对健康人类受试者单次施用粪肠球菌YM0831菌株，可显著改善血糖对蔗糖耐量试验的反应。
由于粪肠球菌来源具有多样性，导致其基因具有多样性和功能多样性。然而，目前针对粪肠球菌的分离鉴定、益生特性和代谢机制的研究依然较少，这在一定程度上也影响了对粪肠球菌的开发利用。因此，有必要挖掘更多具有益生功能的粪肠球菌，并应根据粪肠球菌的不同来源进一步挖掘其不同功能，使其更好地发挥作用，如根据菌株的功能或者益生代谢产物确定其功效，明确其应用前景。综上所述，粪肠球菌的研究及应用有很广阔的发展空间。
发明内容
为了克服上述现有技术的不足，本发明从中国广东省一名健康成年人的粪便样品中分离纯化得到一株粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株，该菌株可产生和分泌3-羟基丁酸，可产生和分泌透明质酸，可清除羟自由基，具有超氧化物歧化酶活性，在抗炎和美白等领域具有重要的应用前景。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
本发明第一方面提供了一株粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株，所述粪肠球菌XY2菌株于2022年9月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC NO:M20221504；所述粪肠球菌XY2菌株的16S rDNA全序列如SEQ ID No：1所示。
本发明第二方面提供了第一方面所述的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株在产3-羟基丁酸中的应用。
经研究发现，益生菌粪肠球菌XY2菌株可产3-羟基丁酸(3-HB)，提示粪肠球菌XY2菌株可用于生产3-HB，并通过产3-HB这一特性用于为身体各种活动提供能量，抗骨质疏松，预防及治疗慢性综合征，改善脑部认知功能，改善脂代谢等领域。
本发明第三方面提供了第一方面所述的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株在产透明质酸中的应用。
经研究发现，益生菌粪肠球菌XY2菌株可产透明质酸(HA)，提示粪肠球菌XY2菌株有望用于生产HA，并通过产HA的这一特性应用于抗炎和抗血管生成作用，抗衰老、水润、抚平皱纹，促进伤口消炎及愈合等领域。
本发明第四方面提供了第一方面所述的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株在制备羟自由基清除剂中的应用。
经研究发现，益生菌粪肠球菌XY2具有较好的清除羟自由基的能力，由于疾病的发生均与体内自由基产生过多或者清除自由基能力下降有着密切的关系，可见粪肠球菌XY2有望通过清除羟自由基的功能而避免羟自由基给机体带来的危害，可制作成抗氧化剂、抗炎药物等形式进行应用。
本发明第五方面提供了第一方面所述的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株在产超氧化物歧化酶中的应用。
经研究发现，益生菌粪肠球菌XY2菌株能够产超氧化物歧化酶(SOD)，其发酵液具有超氧化物歧化酶(SOD)活性，提示粪肠球菌XY2菌株有望用于制备SOD，并通过具有SOD活性的功能应用于抗氧化、抗炎、增强免疫力、抗衰老、降血脂、增强肝功能、改善视力、降血糖等领域。
本发明第六方面提供了一种制备3-羟基丁酸的方法，具体为：将第一方面所述的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株接种于MRS液体培养基中，培养至稳定期后收取菌悬液，最后分离纯化菌悬液中的3-羟基丁酸即得。
当然，也可以用相同的方法，经过不同的分离纯化步骤后，用于制备透明质酸、超氧化物歧化酶等。
优选地，培养的条件为：37℃恒温厌氧。
优选地，先用MRS液体培养基将粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株培养至稳定期，再以1:20-1000的稀释倍数扩培至新的MRS液体培养基中。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明从中国广东省一名健康成年人的粪便样品中分离纯化得到一株粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株，该菌株具有多种益生功效，包括产生和分泌3-羟基丁酸，产生和分泌透明质酸，清除羟自由基，超氧化物歧化酶活性。因此，粪肠球菌XY2菌株具有抗炎和改善肠道菌群；美白和抗皱；抗氧化、抗炎和抗衰老；增强免疫力和护肝等多种功能。可见，本发明新分离得到的粪肠球菌XY2菌株具有多种益生功效，可用于抗炎和美白等领域，比如，制作成抗炎和美白药品，具有重要的应用价值和经济价值。
附图说明
图1为粪肠球菌XY2菌株的系统进化树(建树菌株来源于NCBI的Genome数据库)；
图2为粪肠球菌XY2菌株可以产生3-羟基丁酸；
图3为粪肠球菌XY2菌株可以产生和分泌透明质酸；
图4为粪肠球菌XY2菌株可以清除羟自由基；
图5为粪肠球菌XY2发酵液具有SOD活性。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到。
下列实施例涉及的实验材料如下：
(1)粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株，由肠道微生物组研究润泽实验室分离自中国广东广州市一名健康成年人(BMI＝18.9)的肠道粪便样品中，于甘油管内置于-80℃低温冷冻保藏。一般情况下，将该菌株接种于MRS固体培养基平板表面，并在37℃恒温厌氧培养箱中倒置培养24h，即可获得菌落，或在37℃恒温厌氧培养箱内于MRS液体培养基中振荡培养24-48h，即可获得发酵液。
(2)试剂盒：3-羟基丁酸(3-HB)检测试剂盒(Cloud-Clone Corp.,Cat:CEB022Ge)，透明质酸(又名玻尿酸，HA)检测试剂盒(Cloud-Clone Corp.,Cat:CEA182Ge)，羟自由基(·OH)测定试剂盒(南京建成,Cat:A018-1-1)，超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(南京建成,Cat:A001-3)。
(3)MRS平板：牛肉膏10g,蛋白胨10g,酵母膏5g,柠檬酸三铵2g,乙酸钠5g,葡萄糖20g,磷酸氢二钾2g,吐温80 1mL,硫酸镁0.58g,硫酸锰0.25g,琼脂15g,ddH2O补齐至1L，调pH至6.2-6.6，121℃高压灭菌20min，配置成MRS平板。
(4)MRS液体培养基：牛肉膏10g,蛋白胨10g,酵母膏5g,柠檬酸三铵2g,乙酸钠5g,葡萄糖20g,磷酸氢二钾2g,吐温80 1mL,硫酸镁0.58g,硫酸锰0.25g,ddH2O补齐至1L，调pH至6.2-6.6，121℃高压灭菌20min，配置成MRS液体培养基。
实施例1粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株的分离鉴定
粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株从中国广东省一名健康成年人的粪便中分离得到具体如下：
用无菌水将粪便样品反复清洗3次，置于研钵中，每100mg粪便加入500uL无菌水，彻底研磨匀浆，用移液器吸取适量研磨液，涂布于MRS平板上，室温培养3天。然后，用记号笔对分离实验平板中待划线纯化的菌落进行编号，并相应地在平板上标明菌株编号。标记后，挑取菌落接种到MRS平板上，用平板划线法纯化菌株。若此法不能将菌株分离则需要从富集平板上挑取菌落，经MRS液体培养基梯度稀释后，涂布于培养基上。最后，参考《伯杰细菌鉴定手册》(第八版)和《真菌分类鉴定手册》，首先分辨属于细菌的菌株，然后观察菌落的生长状况：生长形态、是否有菌丝、颜色是否均匀一致，菌落个体表面及边缘。最终初步分离得到一株纯化菌株，菌株编号为XY2，培养24小时后观察到菌株的菌落呈圆形或椭圆形、湿润、凸起、边缘光滑、表面平整。
接着，通过16S rDNA通用引物(27F：AGAGTTTGATCCTGGCTCAG，1492R：TACGGCTACCTTGTTACGACTT)对分离得到的XY2菌株进行分子鉴定后，由北京百迈客生物科技有限公司对XY2菌株进行全基因组测序。将得到的序列16S rDNA sequence(SEQ ID No：1)在NCBI的Genome数据库进行BLAST比对。结果显示，与已知的粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)16S rDNA序列的同源性>99％，并与同源菌株进行进化分析(图1)，确认菌株XY2是同种不同株的粪肠球菌。
最后，对菌株XY2进行保藏，保藏信息如下：保藏时间：2022年9月27日；保藏单位名称：中国典型培养物保藏中心(CCTCC)；保藏号：CCTCC NO:M 20221504；保藏单位地址：中国.武汉.武汉大学；分类命名：Enterococcus faecalis。
粪肠球菌具有广泛的益生功效，如抗炎、抗衰老和降胆固醇等，但不同来源的菌株其功效不同，说明本发明从人体粪便分离得到的一株新的粪肠球菌XY2可以作为益生菌使用，并可能具有新的功效和功能。
Enterococcus faecalis XY2 16S rDNA sequence(1431bp，SEQ ID No：1)：
GCAGTCGTACGCTTCTTTTTCCACCGGAGCTTGCTCCACCGGAAAAAGAAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCATCAGAAGGGGATAACACTTGGAAACAGGTGCTAATACCGTATAACAATCGAAACCGCATGGTTTTGATTTGAAAGGCGCTTTCGGGTGTCGCTGATGGATGGACCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCCACGATGCATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGAAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGTTAGAGAAGAACAAGGATGAGAGTAACTGTTCATCCCTTGACGGTATCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCCCGGCTCAACCGGGGAGGGTCATTGGAAACTGGGAGACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTTTGACCACTCTAGAGATAGAGCTTCCCCTTCGGGGGCAAAGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATTGTTAGTTGCCATCATTCAGTTGGGCACTCTAGCAAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGGAAGTACAACGAGTTGCGAAGTCGCGAGGCTAAGCTAATCTCTTAAAGCTTCTCTCAGTTCGGATTGCAGGCTGCAACTCGCCTGCATGAAGCCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCACGAGAGTTTGTAACACCCGAAGTCGGTGAGGTAACCTTTTTGGAGCCAGCCGCCTAA。
实施例2粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株的功能及其应用
(1)粪肠球菌XY2菌株可产生3-羟基丁酸(3-HB)
将用MRS液体培养基培养至稳定期的粪肠球菌XY2以1:30的稀释倍数扩培至新的MRS液体培养基中，在培养至稳定期24h时收取菌体，10,000×g、4℃离心10min后收取发酵后菌体，所得菌体取1OD600用500uL buffer PBS(称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸馏水中，用HCl调节溶液至7.2，最后加蒸馏水定容至1L，即得PBS缓冲液)裂解制成菌体裂解液后通过3-HB特定ELISA试剂盒(CEB022Ge)测定菌体裂解液的3-HB浓度。结果显示，与菌体裂解buffer PBS中不存在3-HB相比，菌株XY2的菌体裂解液中3-HB的浓度为145.65μg/mL，说明粪肠球菌XY2可以在稳定期产生3-羟基丁酸(图2)。
3-HB可以为身体各种活动提供能量，是潜在的能量/功能型食物，已被添加到运动员饮料中，因此益生菌粪肠球菌XY2可作为能量型食品的添加剂。同时，鉴于3-HB可以有效的抗骨质疏松，预防及治疗慢性综合征(高血压，酒精性脂肪肝，肠炎，肠癌)，改善脑部认知功能(提高学习记忆的能力，保护神经胶质细胞，改善阿尔兹海默症)，改善脂代谢。益生菌粪肠球菌XY2菌株可通过产生3-羟基丁酸的功效发挥以上多个用途。
此外，3-HB是机体天然产生的一种内源性小分子物质，对维持结肠直肠组织完整性具有重要作用，并且具有维持肠道健康、防止结肠疾病和消炎产能的作用。通过3-HB处理可以促进肠道有益菌增殖，缓解多发性硬化老鼠的症状，在调节菌群、改善健康方面具有巨大的潜力。因此，益生菌粪肠球菌XY2菌株也有助于改善肠道菌群，缓解肠道炎症。
(2)粪肠球菌XY2菌株可产生和分泌透明质酸(HA)
将用MRS液体培养基培养至稳定期的粪肠球菌XY2以1:30的稀释倍数扩培至新的MRS液体培养基中，在培养至稳定期24h时收取菌悬液，10,000×g、4℃离心10min后收取发酵液上清，然后通过透明质酸(又名玻尿酸，HA)特定ELISA试剂盒(CEA182Ge)测定发酵液上清的HA浓度。结果显示，与空白培养基MRS中低浓度HA相比，菌株XY2的发酵上清液中HA的浓度显著性增加，可积累量为87.33ng/mL，说明粪肠球菌XY2可以在稳定期产生并分泌透明质酸(图3)。
透明质酸，又名玻尿酸，是一种可生物降解、生物相容性、无毒、无致敏性的聚合物，具有多种生物学功能。既具有抗炎和抗血管生成作用，又具有较强的抗衰老、水润、抚平皱纹的能力。由于其有助于皮肤抗皱，促进伤口消炎及愈合，可用于抗皱剂，具有开发皮肤化妆品的潜力。此外，由于HA具有很高的润滑、吸水和保水能力，可以影响多种细胞功能，如迁移、粘附和增殖，使得HA也被广泛应用于眼科手术，关节炎治疗，伤口愈合支架，组织工程，以及植入材料等生物医学领域。
因此，益生菌粪肠球菌XY2菌株可通过产生透明质酸的功效发挥以上多个用途。
(3)粪肠球菌XY2菌株可清除羟自由基(·OH)
将用MRS液体培养基培养至稳定期的粪肠球菌XY2菌株以1:30的稀释倍数扩培至新的MRS液体培养基中，在培养至稳定期24h时收取菌悬液，10,000×g、4℃离心10min后收取发酵液上清，然后通过羟自由基(·OH)测定试剂盒(南京建成,Cat:A018-1-1)测定发酵液上清对羟自由基的清除能力。结果显示，与空白对照MRS相比，菌株XY2的发酵上清液对羟自由基清除率为27.02％(**P<0.01)，说明粪肠球菌XY2具有较好的清除羟自由基的能力，表现出良好的抗氧化能力(图4)。
羟基自由基(·OH)是一种重要的活性氧，从分子式上看是由氢氧根(OHˉ)失去一个电子形成的。羟基自由基具有极强的得电子能力，也就是氧化能力，氧化电位为2.8V，是自然界中仅次于氟的氧化剂。
羟基自由基几乎可以破坏所有类型的大分子，包括碳水化合物、核酸(突变)、脂质(脂质过氧化)和氨基酸(例如苯丙氨酸转化为间酪氨酸和邻酪氨酸)等。羟自由基对人体的攻击首先是从细胞膜开始的，导致细胞膜失去弹性和功能，引发心血系统疾病。大量资料证明，炎症、肿瘤、衰老、血液病，以及心、肝、脾、肺和皮肤等各方面疾病的发生机理均与体内自由基产生过多或者清除自由基能力下降有着密切的关系。
由此，益生菌粪肠球菌XY2菌株可以通过清除羟自由基的功能，从而避免该自由基给机体带来的危害。
(4)粪肠球菌XY2菌株具有超氧化物歧化酶(SOD)活性
将用MRS液体培养基培养至稳定期的粪肠球菌XY2菌株以1:30的稀释倍数扩培至新的MRS液体培养基中，在培养至稳定期24h时收取菌悬液，10,000×g、4℃离心10min后收取发酵液上清，然后，通过超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(南京建成,Cat:A001-3)测定发酵液上清的SOD活性。其中，每毫升反应液中SOD抑制率达50％时所对应的SOD量为一个SOD活力单位(U)。结果显示，与空白对照MRS相比，菌株XY2的发酵上清液SOD活性为13.65U/mg，说明粪肠球菌XY2发酵液具有较好的SOD活性，表现出良好的抗氧化能力(图5)。
超氧化物歧化酶(SOD)是一种抗氧化酶，具有抗氧化、抗炎、增强免疫力等功效与作用。主要表现在：(1)抗氧化：SOD能够清除细胞内的自由基，减轻氧化应激对细胞的损伤，保护细胞免受自由基的攻击。(2)抗炎：SOD能够抑制炎症反应，减少炎症细胞的释放，降低炎症的程度和持续时间。(3)增强免疫力：SOD能够促进免疫细胞的产生，提高身体的免疫力，预防疾病的发生和恢复身体的健康。(4)抗衰老：可防止脂质过氧化，有效清除自由基，使细胞保持活性，防止机体过快衰老。(5)降血脂：能清除血管内阻力，软化血管，降低血液粘稠度，使血脂水平逐渐恢复正常。(6)增强肝功能：可以减少血液中的毒素，减轻氧自由基对肝脏造成的损伤。(7)改善视力：有助于清除眼内过多的自由基，从而提高视力，预防白内障。(8)降血糖：可使胰岛细胞恢复活力，加快分裂速度，进而达到降血糖的目的。
由此，益生菌粪肠球菌XY2菌株可以通过具有超氧化物歧化酶(SOD)活性的功能而发挥以上多个功效。
综上可知，本发明新分离的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株具有的多种益生功效：(1)可产生和分泌3-羟基丁酸；(2)可产生和分泌透明质酸；(3)可清除羟自由基；(4)具有超氧化物歧化酶活性。可见，本发明新分离得到的粪肠球菌XY2菌株在抗炎和美白等领域具有重要的应用价值和经济价值。
以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。
Claims (7)
1.粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株在产3-羟基丁酸中的应用，其特征在于,所述粪肠球菌XY2菌株于2022年9月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC NO:M 20221504；所述粪肠球菌XY2菌株的16S rDNA全序列如SEQ ID No：1所示。
2.粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株在产透明质酸中的应用，其特征在于,所述粪肠球菌XY2菌株于2022年9月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCCNO:M 20221504；所述粪肠球菌XY2菌株的16S rDNA全序列如SEQ ID No：1所示。
3.粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株在制备抗氧化剂或羟自由基清除剂中的应用，其特征在于,所述粪肠球菌XY2菌株于2022年9月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC NO:M 20221504；所述粪肠球菌XY2菌株的16S rDNA全序列如SEQ IDNo：1所示。
4.粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株在产超氧化物歧化酶中的应用，其特征在于,所述粪肠球菌XY2菌株于2022年9月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC NO:M 20221504；所述粪肠球菌XY2菌株的16S rDNA全序列如SEQ ID No：1所示。
5.一种制备3-羟基丁酸的方法，其特征在于，将粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株接种于MRS液体培养基中，培养至稳定期后收取菌悬液，最后分离纯化菌悬液中的3-羟基丁酸即得；所述粪肠球菌XY2菌株于2022年9月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC NO:M 20221504；所述粪肠球菌XY2菌株的16S rDNA全序列如SEQIDNo：1所示。
6.根据权利要求5所述的一种制备3-羟基丁酸的方法，其特征在于，培养的条件为：37℃恒温厌氧。
7.根据权利要求5所述的一种制备3-羟基丁酸的方法，其特征在于，先用MRS液体培养基将粪肠球菌(Enterococcus faecalis)XY2菌株培养至稳定期，再以1:20-1000的稀释倍数扩培至新的MRS液体培养基中。
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