CN117865957A

CN117865957A - 2-苯基-4-苯基-6-n-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物及其合成、应用

Info

Publication number: CN117865957A
Application number: CN202410068336.5A
Authority: CN
Inventors: 严映坤; 包爱玲; 蒋文静; 吴振宇; 谢先松; 王德员; 邓字权; 敬晓月; 陈春容; 李唯一; 唐孝荣
Original assignee: Xihua University
Current assignee: Xihua University
Priority date: 2024-01-16
Filing date: 2024-01-16
Publication date: 2024-04-12

Abstract

本发明涉及农药技术领域，具体为2‑苯基‑4‑苯基‑6‑N‑异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物及其合成、应用，通过采用生物活性基团拼接原理，将卤素，杂环化合物等生物活性基团引入嘧啶并吡啶类先导化合物结构中，从而构建一些结构新颖、活性优异以及具有新的作用机制的药物分子。本发明达到的有益效果是：通过电负性强的元素提高整个衍生物与氨基酸之间的结合力，此外当本发明中衍生物中的苯环与嘧啶环连接时会旋转并以最优的姿势和方式与蛋白质进行紧密结合时，通过芳香环与活性口袋周围氨基酸作用，形成π‑π作用力、疏水相互作用力，进而保证整个衍生物的活性，对植物病原真菌和植物病原细菌有较好的抑制效果；此外，本方案本方案化合物合成简单。

Description

2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物及其合成、应用

技术领域

本发明涉及农药技术领域，具体为2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物的合成及用途。

背景技术

植物病害一直是制约农作物安全生产的主要因素之一，病害发生时不仅会造成农作物大量减产，而且还严重影响农作物的品质，杀菌剂的使用大大减少了由植物病害引起的经济损失，为粮食安全供应提供了重要保障。杀菌剂的使用给人们带来巨大经济效益和社会效益的同时，也带来一些负面影响。由于杀菌剂的不合理使用，使得病原物对现代杀菌剂的抗性日趋严重，也对非靶标生物造成了一定影响，给环境带来了巨大压力。随着人们对健康饮食的重视，以及环保意识的增强，创制“高效、低毒、安全”的绿色杀菌剂已成为农药研究领域的重点研究方向。

杂环化合物的研究一直是一大热点，又数含氮杂环最为热门，吡啶及嘧啶类化合物作为含氮杂环中重要的一员，在医药、农药等药物中均具有广泛的应用。其在农药中通常作为杀菌剂使用，例如琥珀酸脱氢酶类抑制剂中就有多种含氮类化合物，该类杀菌剂一般具有低毒高效和环境安全等优点，在农业中有着重要作用，其研发已成为新农药创制中的重点。

在当今农药和医药的研究与开发过程中，吡啶及嘧啶类化合物占据着重要的地位，广泛存在于自然界的植物中。嘧啶并吡啶因含有氮原子平面型多环稠杂环的特殊结构，表现出良好的生物活性和药理活性。如抗菌活性、抗微生物活性、抗疟活性、抗高血压、抗肿瘤等多种生物活性。此外，一些含有嘧啶并吡啶类的化合物在体外还具有良好的抗氧化活性。由于嘧啶及吡啶类化合物用途广泛，拥有良好的应用前景，但是将嘧啶并吡啶及其衍生物作为活性化合物用于农药杀菌剂的研究报道很少。因此，在农药的研究和开发过程中，含嘧啶并吡啶的化合物将受到科研工作者的密切关注，嘧啶并吡啶类化合物成为新农药创制研究的热点和前沿。

到目前为止，还未见有2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物作为杀菌剂使用的报道。

为了充分地保护发明思路，同时又为了避免存在单一性问题，故同时申请了多个专利进行保护，本方案只是其中之一。

发明内容

本发明的目的在于：针对老旧杀菌剂长期使用导致日益出现的耐药性问题，本发明开发具有新颖结构的新型杀菌剂-2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物。

由于含氮或含氧杂环化合物在医药、农药等具有各种生物活性的物质中占据了绝对的数量。因此本发明制备新农药创制过程中，也是通过设计和合成各种杂环化合物，来寻找结构新颖具有生物活性的化合物。本发明，通过结合生物电子等排或活性基团拼接方法进行活性结构片段修饰和拼接，设计合成了出相应化合物，然后对目标化合物进行结构表征和活性筛选，获得具有优异生物活性和潜在应用价值的化合物；本发明，采用原料便宜易得，反应条件温和，时间短，后处理简便以及产物收率高的特点。

为了实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：

(第一方面)本发明提供一种2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物，其结构式为式I所示：

其中，R¹为氢、卤素、三氟甲基、氨基、氰基、甲基或者甲氧基中的一种或多种；R²为氢、卤素、甲基或者甲氧基中的一种或多种；R³为氢、卤素、甲基或者甲氧基中的一种或多种；

或者其中，R¹为氟、三氟甲基中的一种胡多种；R²为氢、甲基、氯、溴中的一种或多种；R³为氢、甲基、氯、溴中的一种或多种。

在一些实施方案中，本发明衍生物的结构式为：

需要说明的是，现有的农用杀菌剂中，常采用一些吡啶、嘧啶等杂环类衍生物作为杀菌剂，其杀菌能力有限。本发明则采用嘧啶并吡啶类物质作为先导化合物，将卤素原子、杂环化合物作为生物活性基团引入分子结构中；选用具有强电负性的卤素元素作为生物活性基团时，例如氟具有很强的电负性，当用来杀菌时氟能更好地与氨基酸结合形成氢键作用力；同样地，由于氮原子上具有孤对电子的因素，在特定的结合模式下也会优先形成分子间氢键作用力，加强与氨基酸的结合能力；本发明的化合物由于具有苯环、杂环类结构以及可以旋转的单键，化合物能以能量最低的构象和和方式与蛋白质进行紧密结合，通过芳香环与活性口袋周围氨基酸作用，形成一些π-π作用力，疏水相互作用力等，从而保证整个衍生物的活性较好。

(第二方面)本发明提供一种2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物的合成，其制备步骤为：

S11、将哌啶-4-酮盐酸盐加入容器中，然后向容器中加入乙醇，使得哌啶-4-酮盐酸盐全部溶解；

S12、在常温条件下将容器内的物质进行搅拌，并加入固定氢氧化钠；

S13、采用恒压滴液漏斗，将3,4-二氟苯甲醛、3-甲基-4-氟苯甲醛中的一种，与乙醇混合，形成混合物，将该混合液加入上述的容器中；在常温下反应8h-10h，并在反应过程采用薄层硅胶板来监测反应是否完成，直至反应结束；

S21、上述反应结束后，再向容器中加入氢氧化钠固体，充分进行搅拌；

S22、取氟苯甲脒盐酸盐、4-氟苯甲脒盐酸盐、4-三氟甲基-苯甲脒盐酸盐中的一种，与乙醇溶液混合后形成混合液，再用滴管将该混合液滴加至容器中；

S23、将容器置于磁力搅拌器上进行搅拌，用盐酸溶液将容器中的pH调至7，伴有大量固体析出；持续搅拌，直到固态物质充分析出，然后停止搅拌；

S24、静置后，待固体完全沉淀后用布氏漏斗进行抽滤，并用蒸馏水多次洗涤，得到粗产物；然后采用无水乙醇重结晶，得到目标化合物。

需要说明的是：该合成路线原料便宜易得，成本低廉；反应不需要太高的温度和压力，室温下即可进行，安全性较高；反应时间较短，后处理简便，不需要通过柱层析、HPLC等复杂的分离技术进行分离；目标化合物通过重结晶即可得到并且收率较高。

(第三方面)本发明还提供一种2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物的应用，其用于制备农用杀菌剂，用于杀灭或抑制相应菌。

在制备农用杀菌剂中的用途。

本发明2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物，具有较好的杀菌活性，可以用于制备农用杀菌剂。

在一些实施方案中，能够防治的菌为真菌，例如防治马铃薯干腐病菌、烟草根腐病菌、辣椒灰霉病病菌、马铃薯黑胫病、水稻稻瘟病病菌。

在一些实施方案中，能够防治的菌为细菌，例如甘薯瘟病菌，水稻白叶枯病菌，猕猴桃溃疡病菌或白菜软腐病菌。

需要说明的是，本发明所使用的术语“防治”，表示既能够杀灭相应的细菌或真菌，也能够抑制相应细菌或真菌的生长。所防治的细菌或真菌并不仅现有提及的细菌或真菌，只要是采用本方案的原理来防治细菌或真菌，均在本方案保护范围内。

本发明将应用以下定义除非其他方面表面。根据本发明的目的，化学元素根据元素周期表来定义。

像本发明所描述的，本发明的化合物可以任选地被一个或多个取代基所取代，如上面的通式化合物，或者像实施例里面的特殊的例子，子类，和本发明所包含的一类化合物。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

(1)在老旧杀菌剂由于长期使用导致耐药性问题，本发明合成了结构新颖、活性优异的新化合物作为杀菌剂，新化合物相比于老旧杀菌剂能对植物病原真菌和植物病原细菌有较好的抑制能力，并且新化合物合成过程简单；

(2)本发明通过引入的新的基团，增强与氨基酸的结合能力；此外，本发明中新化合物由于具有苯环、杂环类结构以及能够旋转的单键，该新化合物能以能量最低的构象和和方式与蛋白质进行紧密结合，通过芳香环与活性口袋周围氨基酸作用，形成一些π-π作用力，疏水相互作用力等，从而保证整个衍生物的活性较好。

附图说明

图1为实施例1化合物的核磁氢谱图；

图2为实施例1化合物的核磁碳谱图；

图3为实施例1化合物的高分辨质谱图；

图4为实施例2化合物的核磁氢谱图；

图5为实施例2化合物的核磁碳谱图；

图6为实施例2化合物的高分辨质谱图；

图7为实施例3化合物的核磁氢谱图；

图8为实施例3化合物的核磁碳谱图；

图9为实施例3化合物的高分辨质谱图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步的描述，但本发明的保护范围不局限于以下所述。

本发明提供一种本发明2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物，结构通式为式I所示：

在本发明的一些实施方式中，R¹为氢，卤素，三氟甲基，氨基，氰基，甲基或者甲氧基；R²为氢，卤素，甲基或者甲氧基；R³为氢，卤素，甲基或者甲氧基；

或者在本发明的一些具体实施方式中，R¹为氟、三氟甲基；R²为氢，甲基，氯，溴；R³为氢，甲基，氯，溴。

另一方方面，本发明还提供了2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物的的合成。

在本发明的一些实施方式中，采用如下路线合成2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物：

下面结合实施例对本发明的合成路线具体实施方式做进一步的描述，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。

合成的实施例：

实施例1

化合物的制备：

将10mmol的N-异丙基-哌啶-4-酮加入100mL的圆底烧瓶中，然后向烧瓶中加入15mL的乙醇将哌啶-4-酮全部溶解，在25℃条件下搅拌，随后向烧瓶中加入10mmol的固体氢氧化钠。使用恒压滴液漏斗再将11mmol 3,4二氟苯甲醛与15mL乙醇混合液缓慢加入上述反应液中，在25℃下反应。反应时间8-10h，反应过程中用薄层硅胶板(TLC)进行监测反应是否完成，直到反应结束。待反应完成后，中间体没有进行任何处理。

上述反应结束后，向反应烧瓶中加入24mmol的氢氧化钠固体，让其充分搅拌，称取12mmol对氟苯甲脒盐酸盐，与30mL乙醇溶液混合后，用滴管将对氟苯甲脒盐酸盐和乙醇的混合溶液逐滴加入到反应瓶中，继续室温反应10-12h，用薄层硅胶板(TLC)进行监测，直到反应结束。将反应液倒入装有适量冰水混合物的烧杯中，将烧杯放到磁力搅拌器上进行搅拌，同时用10％的盐酸溶液将烧杯中混合液的pH调至7，伴有大量固体析出。持续搅拌，直到固态物质充分析出来，然后停止搅拌。静置20-30min，待固体完全沉淀后，用布氏漏斗进行抽滤，并用蒸馏水多次洗涤，得到粗产物，随后使用无水乙醇重结晶得到目标化合物。其理化性能如下：

粉色晶体，收率：85％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm):8.51(dd,J＝12.0,7.6Hz,2H),7.95(s,1H),7.33(d,J＝4.8Hz,1H),7.15(t,J＝7.6Hz,2H),6.55-6.53(m,2H),6.45(d,J＝4.4Hz,1H),4.11(s,2H),3.97(s,2H),3.09-3.00(m,1H),1.23(d,J＝8.8Hz,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ(ppm):166.20,161.66(d,J＝246.0Hz),159.30,154.88,154.70,151.21,133.99(d,J＝3.0Hz),130.16(d,J＝11.0Hz),125.02,123.80,120.63,116.34,116.08,115.23(d,J＝28.0Hz),115.18,114.03,113.93,53.98,48.96,48.17,18.92；HRMS(ESI)m/z:Calcd for C₂₅H₂₀Br₂FN₃O₂[M+H]⁺:571.9985,Found:571.9982。

实施例2

化合物的制备：

将10mmol的N-异丙基-哌啶-4-酮加入100mL的圆底烧瓶中，然后向烧瓶中加入15mL的乙醇将哌啶-4-酮盐酸盐全部溶解，在25℃条件下搅拌，随后向烧瓶中加入10mmol的固体氢氧化钠。使用恒压滴液漏斗再将11mmol 3-甲基-4-氟苯甲醛与15mL乙醇混合液缓慢加入上述反应液中，在25℃下反应。反应时间8-10h，反应过程中用薄层硅胶板(TLC)进行监测反应是否完成，直到反应结束。待反应完成后，中间体没有进行任何处理。

上述反应结束后，向反应烧瓶中加入24mmol的氢氧化钠固体，让其充分搅拌，称取12mmol 4-氟苯甲脒盐酸盐，与30mL乙醇溶液混合后，用滴管将对氟苯甲脒盐酸盐和乙醇的混合溶液逐滴加入到反应瓶中，继续室温反应10-12h，用薄层硅胶板(TLC)进行监测，直到反应结束。将反应液倒入装有适量冰水混合物的烧杯中，将烧杯放到磁力搅拌器上进行搅拌，同时用10％的盐酸溶液将烧杯中混合液的pH调至7，伴有大量固体析出。持续搅拌，直到固态物质充分析出来，然后停止搅拌。静置20-30min，待固体完全沉淀后，用布氏漏斗进行抽滤，并用蒸馏水多次洗涤，得到粗产物，随后使用无水乙醇重结晶得到目标化合物。其理化性能如下：

黄色粉末，收率：88％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm):8.57(dd,J＝8.8,5.6Hz,2H),8.03(s,1H),7.26(d,J＝3.2Hz,1H),7.17(t,J＝8.8Hz,2H),6.53(d,J＝3.2Hz,1H),6.24(dd,J＝3.6,0.8Hz,1H),6.15(d,J＝2.8Hz,1H),4.19(s,2H),4.07(s,2H),3.08-3.01(m,1H),2.47(s,3H),2.42(s,3H),1.24(d,J＝6.4Hz,6H)；¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ(ppm):164.41(d,J＝248.0Hz),160.37,159.40,155.33,154.04,152.29,151.46,151.44,134.51(d,J＝3.0Hz),130.17(d,J＝9.0Hz),119.71,116.38,115.69,115.49,115.12(d,J＝22.0Hz),115.09,108.56,53.58,49.12,48.57,19.15,14.07,13.98；HRMS(ESI)m/z:Calcdfor C₂₇H₂₆FN₃O₂[M+H]⁺:444.2087,Found:444.2090。

实施例3

化合物的制备：

将10mmol的N-异丙基-哌啶-4-酮加入100mL的圆底烧瓶中，然后向烧瓶中加入15mL的乙醇将哌啶-4-酮全部溶解，在25℃条件下搅拌，随后向烧瓶中加入10mmol的固体氢氧化钠。使用恒压滴液漏斗再将11mmol 3,4-二氟-苯甲醛与15mL乙醇混合液缓慢加入上述反应液中，在25℃下反应。反应时间8-10h，反应过程中用薄层硅胶板(TLC)进行监测反应是否完成，直到反应结束。待反应完成后，中间体没有进行任何处理。

上述反应结束后，向反应烧瓶中加入24mmol的氢氧化钠固体，让其充分搅拌，称取12mmol 4-三氟甲基-苯甲脒盐酸盐，与30mL乙醇溶液混合后，用滴管将对氟苯甲脒盐酸盐和乙醇的混合溶液逐滴加入到反应瓶中，继续室温反应10-12h，用薄层硅胶板(TLC)进行监测，直到反应结束。将反应液倒入装有适量冰水混合物的烧杯中，将烧杯放到磁力搅拌器上进行搅拌，同时用10％的盐酸溶液将烧杯中混合液的pH调至7，伴有大量固体析出。持续搅拌，直到固态物质充分析出来，然后停止搅拌。静置20-30min，待固体完全沉淀后，用布氏漏斗进行抽滤，并用蒸馏水多次洗涤，得到粗产物，随后使用无水乙醇重结晶得到目标化合物。其理化性能如下：

淡黄色固体，收率：90％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm):8.64(d,J＝7.6Hz,2H),8.34(s,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,2H),7.26(d,J＝3.2Hz,1H),7.13(d,J＝3.2Hz,1H),7.02(dd,J＝10.0,3.6Hz,2H),4.02(s,2H),3.89(s,2H),3.12-3.06(m,1H),1.24(d,J＝1.24Hz,6H)；¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δδ(ppm):159.97,159.02,155.47,141.44,140.64,137.90,135.96,133.52,132.33,132.01,130.86,130.44,129.24,128.40,127.67,127.02,125.38(q,J＝3.0Hz),122.84,54.00,48.76,48.59,18.69；HRMS(ESI)m/z:Calcd forC₂₆H₂₀Cl₂F₃N₃S₂[M+H]⁺:566.0506,Found:566.0502。

实施例4

化合物的制备：

将10mmol的N-异丙基-哌啶-4-酮加入100mL的圆底烧瓶中，然后向烧瓶中加入15mL的乙醇将哌啶-4-酮全部溶解，在25℃条件下搅拌，随后向烧瓶中加入10mmol的固体氢氧化钠。使用恒压滴液漏斗再将11mmol 3-甲基-4-氟-苯甲醛与15mL乙醇混合液缓慢加入上述反应液中，在25℃下反应。反应时间8-10h，反应过程中用薄层硅胶板(TLC)进行监测反应是否完成，直到反应结束。待反应完成后，中间体没有进行任何处理。

淡黄色晶体，收率：89％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm):8.69(d,J＝8.4Hz,2H),8.41(s,1H),7.76(d,J＝8.4Hz,2H),7.33(d,J＝3.6Hz,1H),7.16(d,J＝3.6Hz,1H),6.89(d,J＝2.8Hz,1H),6.84(d,J＝3.2Hz,1H),4.05(s,2H),3.95(s,2H),3.10-3.04(m,1H),2.60(d,J＝3.2Hz,6H),1.24(d,J＝6.4Hz,6H)；¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ(ppm):159.70,159.35,156.26,145.26,143.78,141.41,140.33,137.68,131.89,131.65,131.57,129.93,128.38,127.96,126.73,126.11,125.69,125.22(q,J＝3.0Hz),122.98,53.87,49.33,48.96,18.86,15.61,15.56；HRMS(ESI)m/z:Calcd for C₂₈H₂₆F₃N₃S₂[M+H]⁺:526.1598,Found:526.1592。

另一方面，本发明还提供了2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物的应用，将2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物用于制备农用杀菌剂时，具有较好的杀菌活性。

本一些具体实施例中，农用杀菌剂防治的菌为植物病原真菌，例如防治马铃薯干腐病菌、烟草根腐病菌、辣椒灰霉病病菌、马铃薯黑胫病、水稻稻瘟病病菌。

在一些具体实施例中，农用杀菌剂防治的菌为植物病原细菌，例如甘薯瘟病菌，水稻白叶枯病菌，猕猴桃溃疡病菌或白菜软腐病菌。

抑菌或灭菌活性测试试验例：

选用实施例1-4化合物进行抑菌活性试验；

本发明化合物抑菌活性的测定1

(1)供试植物病原真菌

马铃薯干腐病菌、烟草根腐病菌、辣椒灰霉病病菌、马铃薯黑胫病、水稻稻瘟病病菌。

(2)测定方法

主要实验步骤：(1)待测化合物的称量与配制；(2)马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基的制备；(3)植物病原真菌的接种和培养；(4)用生长速率法测定各化合物在浓度为20mg/L时的相对抑菌率，每种药物设三次平行。

在超净台中，用移液枪分别取0.5mL药液和0.5mL硫酸链霉素溶液加入到已灭菌的PDA试管培养基中，将其震荡混合均匀后在酒精灯火焰下转移至无菌培养皿中，每一个化合物分别倒取3个经过灭菌处理的培养皿，制成薄厚均匀的含药平板，以不含化合物药液的培养皿作为空白对照。待培养基冷却凝固，并在紫外灭菌灯下灭菌12h。

将直径为5mm的灭菌打孔器在紫外灯火焰下灭菌，然后选取生长良好，长势均匀，无污染的丝核菌菌落为菌饼。在无菌条件下，将菌饼接种于含药培养基和空白对照培养基的中心。在28℃恒温培养箱中培养3-5天，恒温培养箱底部放有盛水杯，培养箱中需要水分。待空白对照菌落直径长到50-60mm左右，采用十字交叉法两次测量含药菌落直径取其平均值。并通过Abbott公式计算每个化合物的抑菌率，相同化合物取三组菌落大小的平均值。菌丝生长抑制率(％)＝(空白对照菌落增长直径-药剂处理菌落增长直径)/空白对照菌落增长直径×100％，通过上述相对抑菌率的公式进行计算，最终可以初步得到每个目标化合物在不同浓度下对不同植物病原真菌的抑制效果，然后筛选出高抑菌率的目标化合物。

(3)实验结果

本发明化合物的抑菌活性见表1。

表1本发明化合物对植物病原细菌的抑制活性

抑菌率^a(％)：为三次重复实验的平均值。

从上表2可知本发明化合物对这些植物病原真菌均有较好的抑制效果。

本发明化合物抑菌活性的测定2

(1)供试植物病原细菌

甘薯瘟病菌，水稻白叶枯病菌，猕猴桃溃疡病菌或白菜软腐病菌。

(2)测定方法

(a)菌种的活化：将供试的细菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基斜面，37℃过夜培养。

(b)菌悬液的制备：在装有100mL牛肉膏蛋白胨液体培养基的锥形瓶中，接种一环已活化的供试菌株，于37℃培养18h，得到初始的菌悬液后，再用无菌生理盐水采用梯度稀释法配成适当浓度(10⁶～10⁷CFU/mL)的菌悬液备用。

(c)最低抑菌浓度(MIC)的测定：将供试化合物溶于二甲亚砜中，再用含有0.1％吐温-80的无菌生理盐水，采用二倍稀释法将其稀释成不同浓度的溶液，混合均匀。取稀释后的样品溶液1mL，加入到已灭菌的19mL培养基中，混合均匀，制成平板。待培养基凝固后，用涂布法加入上述浓度为10⁶CFU/mL的菌悬液200μL，于37℃培养16～18h，观察细菌生长情况，以完全无菌生长的浓度作为供试样品溶液的MIC值，同时，以不含供试化合物的相应溶液为空白对照。

(3)实验结果

本发明化合物的抑菌活性见表2。

表2本发明化合物对植物病原细菌的抑制活性

从上表2可知本发明化合物对这些植物病原细菌均有较好的抑制效果。

上述实施例仅表达了较为优选的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims

1.2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物，其特征在于，结构通式为式I所示：

2.根据权利要求1所述的2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物，其特征在于：该化合物的结构式为：

3.权利要求1或2所述2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物的合成，其特征在于：制备步骤为：

S22、取氟苯甲脒盐酸盐、4-氟苯甲脒盐酸盐、4-三氟甲基-苯甲脒盐酸盐中的一种，与乙醇溶液混合后形成混合液，再用滴管将该混合液滴加至上述的容器中；

4.权利要求1、2或3所述2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物的应用，其特征在于：能用于制备农用杀菌剂，用于防治真菌。

5.根据权利要求4所述的2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物在制备农用杀菌剂中的用途，其特征在于：所述农用杀菌剂防治的真菌为马铃薯干腐病菌、烟草根腐病菌、辣椒灰霉病病菌、马铃薯黑胫病、水稻稻瘟病病菌的一种或多种。

6.权利要求1、2或3所述的2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物的应用，其特征在于：能用于制备农用杀菌剂，用于防治细菌。

7.根据权利要求6所述的2-苯基-4-苯基-6-N-异丙基取代的嘧啶并吡啶衍生物的应用，其特征在于：所述农用杀菌剂防治的细菌为甘薯瘟病菌，水稻白叶枯病菌，猕猴桃溃疡病菌或白菜软腐病菌。