CN117820416A - 一种Hsp90 PROTAC化合物及其制备方法与在制备抗宫颈癌药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种Hsp90PROTAC化合物及其制备方法与在制备抗宫颈癌药物中的应用，属于医药技术领域。本发明的Hsp90PROTAC化合物的结构如通式(I)所示，Hsp90抑制剂SNX‑5422分别与带有不同连接子的来那度胺羧酸衍生物和VHL羧酸衍生物为原料在缩合剂HATU和碱DIPEA的催化下，通过一步酰胺反应制备得到Hsp90PROTAC化合物。本发明的Hsp90PROTAC化合物有很好抗宫颈癌活性，其中部分化合物的抑制活性达到了纳摩尔水平，其可用于制备抗宫颈癌药物。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种靶向降解Hsp90的PROTACs化合物及其制备方法与在制备抗宫颈癌药物中的应用。
背景技术
宫颈癌是一种在女性群体当中高发的恶性肿瘤，也是导致女性死亡的主要肿瘤之一，对女性的生命健康构成严重威胁。尽管过去几十年人们一直致力于宫颈癌预防和治疗策略的开发，特别是HPV疫苗的上市在一定程度上降低了发病率，但每年仍有相当一部分女性罹患宫颈癌；治疗手段方面，目前临床上鲜有针对宫颈癌的特异性治疗药物，手术和放化疗仍旧是主要的临床疗法。然而手术治疗大多适用于早期宫颈癌的治疗，对于转移性和复发的宫颈癌患者的治疗效果十分有限，后者的五年生存率不足20％；而阿糖胞苷、顺铂等非选择性的化疗药物往往具有很强的毒副作用，治疗效果也十分有限。因此，为了改善宫颈癌临床治疗效果，同时降低治疗药物的脱靶毒副作用，靶向治疗药物的研发显得尤为重要。
目前，宫颈癌靶向药物研究多数集中在表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子(VEGF)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)以及程序性死亡受体(PD-1)等。尽管目前已有宫颈癌相关的抗体治疗药物上市，但总体来看宫颈癌的靶向药物研究仍旧处于早期阶段，尤其是小分子治疗药物的开发。热休克蛋白90(Hsp90)作为一种分子伴侣蛋白，其主要功能是保证底物蛋白进行正确折叠并防止其非特异性聚集，以维持细胞存活、增殖和分化。该伴侣分子的底物蛋白十分广泛，这使得它与肿瘤的发生发展有着密切关系。研究发现，Hsp90蛋白在宫颈癌组织中的表达异常增高，其在宫颈癌的发生发展过程中可能起着重要作用。此外，部分已报道的Hsp90抑制剂对宫颈癌表现出了一定的抑制活性，这进一步表明其可作为宫颈癌靶向治疗药物开发的潜在靶点。然而，同大多数靶蛋白抑制剂一样，Hsp90抑制剂用于宫颈癌治疗同样将面临耐药突变带来的严峻挑战。
蛋白水解靶向嵌合体(PROTAC)技术是一种基于泛素-蛋白酶体系统发展起来的新兴药物开发策略，该技术通过构建一个由兴趣蛋白配体(POI ligand)、连接子(Linker)和E3泛素连接酶配体(E3 ligand)偶联形成的异源双功能分子，诱导目标蛋白和E3连接酶在空间上相互靠近，使得前者被泛素化标记和降解，从而清除致病蛋白，发挥治疗疾病的作用。该技术相较于传统的小分子抑制剂具有很大的优势，例如其对结合亲和力要求较低，这使得它能够靶向不可成药蛋白、克服靶点耐药突变。此外，它还具有用量小、活性高、选择性高和低毒性等特点。鉴于此，将PROTAC技术用于开发一系列靶向降解Hsp90的PROTAC分子，将是一种具有潜力宫颈癌的靶向治疗策略。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的不足，提供一种Hsp90 PROTAC化合物及其应用，所述的Hsp90 PROTAC化合物具有显著的抗宫颈癌活性，可以作为新的抗宫颈癌药物进行开发，具有广泛的应用前景。本发明的目的还在于提供所述的Hsp90 PROTAC化合物的制备方法。
为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案如下：
第一方面，本发明提供了一种通式(I)所示的Hsp90 PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐，
其中，
Linker选自
E3 ligand选自
本发明通过体外抗宫颈癌活性测试发现，上述Hsp90 PROTAC化合物能够以浓度依赖的方式降解Hsp90，同时对宫颈癌细胞具有显著的抗增殖活性，可用于制备Hsp90降解剂、抗宫颈癌药物。
优选地，所述的Hsp90 PROTAC化合物选自如下表1所示的化合物：
表1
第二方面，本发明提供了上述任意一种Hsp90 PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐在制备Hsp90降解剂或抗宫颈癌药物中的应用。
第三方面，本发明提供了提供一种Hsp90降解剂或抗宫颈癌的药物，包含上述Hsp90PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐中的一种或多种。所述的药物还可包含药学上可接受的载体或赋形剂，其可按照现有的常规医药技术来制备。
第四方面，本发明提供了上述Hsp90 PROTAC化合物的制备方法。所述的Hsp90PROTAC化合物的制备方法包括如下步骤：采用Hsp90抑制剂SNX-5422与E3连接酶配体(来那度胺或VHL)的羧酸衍生物在缩合剂HATU和碱EIPEA的作用下进行酰胺缩合反应得到所述Hsp90 PROTAC化合物：
Hsp90 PROTAC化合物的合成路线
优选的，所述的Hsp90 PROTAC化合物的制备方法中，SNX-5422、VHL羧酸衍生物、HATU和DIPEA投料的摩尔比为1:1.0～1.2:1.0～1.2:2.5～3.5；SNX-5422、来那度胺羧酸衍生物、HATU和DIPEA投料的摩尔比为1:1.0～1.2:1.0～1.2:2.5～3.5。
本发明的优点和有益效果：本发明的Hsp90 PROTAC化合物有很好抗宫颈癌活性，其中部分化合物的抑制活性达到了纳摩尔水平。本发明的Hsp90 PROTAC化合物可作为新的抗宫颈癌药物进行开发，具有广泛的应用前景。
附图说明
图1是免疫印迹分析PROTAC化合物对Hsp90的体外降解活性。A是1μM的Hsp90PROTAC化合物对Hsp90的体外降解活性；B是不同浓度(μM)LF8对Hsp90的体外降解活性，其中，SNX-5422浓度为1μM。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细的描述。所提供的实施例仅是对本发明的说明，而不以任何方式限制本发明揭示的其余内容。
本发明通式(I)所示的Hsp90 PROTAC化合物的制备具体包括以下步骤：
1、通过下式(1)所示反应合成得到6,6-二甲基-3-(三氟甲基)-1,5,6,7-四氢-4H-吲唑-4-酮(2)，并作为下一步反应的原料。
首先，取一100mL圆底烧瓶并加入THF(20mL)，随后，冰浴条件下依次加入咪唑(imidazole)(6799mg，99.87mmol)和三氟乙酸酐(TFAA)(8mL)，搅拌30min。另取一20mL圆底烧瓶加入THF(10mL)，并依次加入市售5,5-二甲基-1,3-环己二酮1(4000mg，28.53mmol)和imidazole(2914mg，42.80mmol)，室温条件下搅拌至所有固体完全溶解，并将其缓慢滴加到上述反应液中，滴加完毕，继续搅拌5h。TLC监测，待原料1完全消失后，利用真空旋转蒸发仪除去反应液中的THF，并将剩余物溶于DCM，利用DCM进行萃取，合并有机相后分别用1M HCl和饱和氯化钠进行洗涤，无水硫酸钠进行干燥，旋干。将其重新溶解于EtOH(12mL)，冰浴条件下，缓慢滴加水合肼(NH2NH2·H2O，6mL)，加料完毕后，继续搅拌1h，TLC监测，原料消失后，往反应体系中缓慢滴加饱和氯化钠，有淡黄色固体析出，抽滤，真空干燥即得淡黄色固体产物2(4307mg，18.55mmol)。
2、通过下式(2)所示反应合成得到2-溴-4-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苄腈(4)，并作为下一步反应的原料。
将反应(1)制得的原料2(2000mg，8.61mmol)溶于DMSO(6mL)，并依次加入市售2-溴-4-氟苯甲腈3(1723mg，8.61mmol)和DIPEA(3352mg，25.84mmol)，将反应体系置于油浴锅中加热至85℃，搅拌3h。TLC监测，原料完全消失后，利用DCM对反应体系进行萃取，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠进行干燥，旋干后即得粗产品，利用柱层析进行纯化，流动相为石油醚/乙酸乙酯(V/V＝3/1)，得淡黄色固体产物4(2947mg，7.15mmol)。
3、通过下式(3)所示反应合成得到4-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)-2-(((1r，4r)-4-羟基环己基)氨基)苄腈(6)，并作为下一步反应的原料。
将反应(2)制得的原料4(1280mg，3.11mmol)、市售反式-4-氨基环己醇5(1073mg，9.32mmol)、Pd(OAc)2(35mg，0.16mmol)、1,1'-双(二苯基膦)二茂铁(DPPF)(172mg，0.31mmol)和Cs2CO3(3035mg，9.32mmol)依次加入50mL封管中，随后通入氩气并加入甲苯(Toluene)(18mL)，将其置于微波反应器中，120℃下反应3h。TLC监测，原料消失后，利用硅藻土进行抽滤，将滤液浓缩后进行柱层析纯化，流动相为石油醚/乙酸乙酯(V/V＝1/1-1/3)，得淡黄色固体产物6(984mg，2.20mmol)。
4、通过下式(4)所示反应合成得到4-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)-2-(((1r，4r)-4-羟基环己基)氨基)苯甲酰胺(7)，并作为下一步反应的原料。
取一50mL单口烧瓶并加入EtOH(10mL)，随后加入反应(3)制得的原料6(900mg，2.02mmol)和DMSO(2mL)，室温下搅拌至固体完全溶解，接着依次缓慢滴加1N NaOH溶液(2mL)和质量分数为30％的H2O2溶液(4mL)，加料完毕，继续搅拌2h。TLC监测，原料完全消失后，缓慢滴加饱和氯化铵溶液淬灭反应，5分钟后缓慢滴加饱和氯化钠溶液至有白色固体析出，抽滤，真空干燥后即得白色固体产物7(852mg，1.83mmol)。
5、通过下式(5)所示反应合成得到(1r，4r)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)甘氨酸环己基酯(SNX-5422)，并作为下一步反应的原料。
将反应(4)制得的原料7(800mg，1.72mmol)、BOC-甘氨酸(453mg，2.58mmol)、DMAP(316mg，2.58mmol)和EDCI(660mg，3.44mmol)加入50mL单口烧瓶，并加入无水DCM(10mL)，室温下搅拌过夜。TLC监测，原料完全消失后，利用DCM对反应体系进行萃取，无水硫酸钠进行干燥，旋干后将其重新溶于DCM(6mL)，冰浴条件下缓慢滴加TFA(2mL)，继续搅拌1.5h。TLC进行监测，原料消失后，利用真空旋转蒸发仪除去DCM和TFA后，溶于DCM并利用氨水调节体系的pH>7，DCM萃取，旋干，利用柱层析进行纯化，流动相为ECM/MeOH(V/V＝15/1)，得到白色固体产物SNX-5422(668mg，1.28mmol)。
6、通过下式(6)所示反应合成得到(4-溴苄基)氨基甲酸叔丁酯(9)，并作为下一步反应的原料。
取一100mL单口烧瓶，并加入混合溶剂EtOAc/H2O(V/V＝1/1)(20mL)，随后依次加入(S)-(-)-1-(4-溴苯)乙胺8(6000mg，29.99mmol)和NaHCO3(2771mg，32.99mmol)，冰浴条件下缓慢加入(Boc)2O(7199mg，32.99mmol)，加料完毕，撤去冰浴，室温下搅拌3h。TLC监测反应，原料8完全消失后，利用EtOAc对反应体系进行萃取，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干即得粗产品，利用粗层析进行纯化，流动相为石油醚/乙酸乙酯(V/V＝15:1)，得白色固体产物9(8732mg，29.09mmol)。
7、通过下式(7)所示反应合成得到(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(11)，并作为下一步反应的原料。
将反应(6)制得的原料9(8500mg，28.31mmol)、市售4-甲基噻唑10(5615mg，56.63mmol)、醋酸钯(321mg，1.42mmol)、醋酸钾(11115mg，113.26mmol)置于50mL圆底烧瓶中，抽真空后通入氩气，循环三次，随后加入溶剂DMAC，150℃下反应过夜。TLC监测反应，原料9完全消失后，加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取。有机相浓缩后，使用流动相为石油醚/乙酸乙酯(V/V＝6:1)经硅胶柱层析分离纯化，得到白色固体产物11(7303mg，22.93mmol)。
8、通过下式(8)所示反应合成得到(2S，4R)-4-羟基-2-(((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(12)，并作为下一步反应的原料。
取一100mL单口烧瓶并加入DCM(20mL)，然后加入反应(7)制得的原料11(7000mg，21.98mmol)，冰浴条件下，缓慢滴加TFA(10026mg，87.93mmol)，加料完毕，继续搅拌1h。TLC监测反应，原料消失后旋蒸除去体系中的DCM和TFA，并重新将剩余物溶于DCM，利用氨水调节pH至碱性，DCM萃取，旋蒸除去大部分DCM后，补加适量无水DCM(30mL)，然后依次加入DIPEA(11408mg，87.93mmol)、HATU(9194mg，24.18mmol)和Boc-Hyp-OH(5592mg，24.18mmol)，加料完毕后，室温下搅拌3h。TLC监测，原料完全消失后，利用DCM进行萃取，旋干后进行柱层析纯化，流动相为石油醚/乙酸乙酯(V/V＝3/1)，得白色固体产物12(8021mg，18.59mmol)。
9、通过下式(9)所示反应合成得到叔丁基((S)-1-((2S，4R)-4-羟基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸酯(Boc-VHL)，并作为下一步反应的原料。
取一50mL单口烧瓶并加入DCM(50mL)，然后加入反应(8)制得的原料12(7800mg，18.07mmol)，冰浴条件下，缓慢滴加TFA(8244mg，72.30mmol)，加料完毕，继续搅拌1h。TLC监测反应，原料消失后旋蒸除去体系中的DCM和TFA，并重新将剩余物溶于适量DCM，利用氨水调节pH至碱性，DCM萃取，干燥，旋蒸除去大部分DCM后，补加适量无水DCM(30mL)，然后依次加入DIPEA(93.80mg，72.30mmol)、HATU(7560mg，19.88mmol)和Boc-Tle-OH(4598mg，19.88mmol)，加料完毕后，室温下搅拌3h。TLC监测，原料完全消失后，利用DCM进行萃取，旋干后进行柱层析纯化，流动相为二氯甲烷/甲醇(V/V＝30:1)，得白色固体产物Boc-VHL(8057mg，14.79mmol)。
10、通过下式(10)、(11)所示反应合成得到含不同长度Linker的VHL羧酸衍生物(15a-c)，并作为下一步反应的原料。
以化合物6-(((S)-1-((2S，4R)-4-羟基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)己酸15a的制备为例，具体步骤如下：取一50mL单口烧瓶并加入DCM，然后加入反应(9)制得的原料Boc-VHL(400mg，0.73mmol)，冰浴条件下，缓慢滴加TFA(335mg，2.94mmol)，加料完毕，继续搅拌1h。TLC监测反应，原料消失后旋蒸除去体系中的DCM和TFA，并重新将剩余物溶于适量DCM，利用氨水调节pH至碱性，DCM萃取，干燥后旋蒸除去DCM，随后将其溶于MeCN(6mL)，依次加入6-溴己酸叔丁酯13a(221mg，0.88mmol)、KI(6mg，0.04mmol)和K2CO3(304mg，2.20mmol)，加料完毕后将反应置于油浴锅，并加热至85℃，搅拌过夜。TLC监测反应，原料消失后利用DCM对反应进行萃取，干燥后旋干有机相。将剩余物重新溶于DCM(3mL)，冰浴条件下，缓慢滴加TFA(1mL)，滴加完毕后，撤去冰浴并继续搅拌1.5h。TLC监测反应，原料消失后旋蒸除去体系中的DCM和TFA，并将剩余物溶于乙酸乙酯，乙酸乙酯萃取、干燥，旋蒸浓缩后即得白色固体产物15a(275mg，0.49mmol)。
化合物15b和15c的制备方法同上。
11、通过下式(12)所示反应合成得到系列(A)Hsp90 PROTAC化合物(LF1-LF3)。
以化合物(1R，4S)-4-((2-氨基甲酰基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(6-(((S)-1-((2S，4R)-4-羟基-2-((((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)己酰基)甘氨酸酯LF1的制备为例，步骤如下：称取化合物SNX-5422(100mg，0.19mmol)、15a(118mg，0.21mmol)、HATU(80mg，0.21mmol)、DIPEA(75mg，0.58mmol)置于25mL圆底烧瓶中，加入无水DCM，室温条件下搅拌过夜，TLC监测原料SNX-5422完全消失后，利用DCM进行萃取，无水硫酸钠进行干燥，浓缩后进行柱层析纯化，流动相为二氯甲烷/甲醇(V/V＝15:1)，得白色固体产物LF1(167mg 0.16mmol)。
Hsp90 PROTAC化合物LF2和LF3的制备方法同上。
12、通过下式(13)所示反应合成得到含不同长度Linker的来那度胺羧酸衍生物(17a-f)，并作为下一步反应的原料。
以化合物4-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)丁酸17a的制备为例，步骤如下：取一25mL单口烧瓶，将来那度胺(800mg，3.09mmol)、市售4-溴丁酸叔丁酯16a(826mg，3.70mmol)和DIPEA(1201mg，9.26mmol)依次溶于NMP(6mL)，然后将反应体系置于油浴锅，加热至110℃，搅拌过夜。TLC监测，来那度胺完全消失后，将反应冷却至室温，并缓慢滴加饱和氯化钠溶液，有淡棕色固体析出，抽滤并烘干固体，然后将其溶于DCM(6mL)，冰浴条件下缓慢滴加TFA(6mL)，滴加完毕，撤去冰浴使反应体系温度升至室温，搅拌2h。TLC进行监测，原料消失后，浓缩反应体系并加入适量乙酸乙酯，剧烈搅拌30min，有米白色固体析出，抽滤即得化合物17a(750mg，2.17mmol)。
化合物17b-f的制备方法同上。
13、通过下式(14)所示反应合成得到系列(B)Hsp90 PROTAC化合物(LF4-LF9)。
以化合物(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)丁酰基)甘氨酸酯LF4的制备为例，步骤如下：称取化合物SNX-5422(100mg，0.19mmol)、17a((73mg，0.21mmol)、HATU(80mg，0.21mmol)、DIPEA(75mg，0.58mmol)置于25mL圆底烧瓶中，加入无水DCM，室温条件下搅拌过夜，TLC监测原料SNX-5422完全消失后，利用DCM进行萃取，无水硫酸钠进行干燥，浓缩后进行柱层析纯化，流动相为二氯甲烷/甲醇(V/V＝15:1)，得白色固体产物LF4(130mg，0.15mmol)。
Hsp90 PROTAC化合物LF5-LF9的制备方法同上。
【实施例1】(1R，4S)-4-((2-氨基甲酰基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(6-(((S)-1-((2S，4R)-4-羟基-2-((((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)己酰基)甘氨酸酯LF1的制备。
称取化合物SNX-5422(100mg，0.19mmol)、15a((118mg，0.21mmol)、HATU(80mg，0.21mmol)、DIPEA(75mg，0.58mmol)置于25mL圆底烧瓶中，加入无水DCM，室温条件下搅拌过夜，TLC监测原料SNX-5422完全消失后，利用DCM进行萃取，无水硫酸钠进行干燥，浓缩后进行柱层析纯化，流动相为二氯甲烷/甲醇(V/V＝15:1)，得白色固体产物LF1(167mg，0.16mmol)，产率为82％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.66(s,1H),8.21(d,J＝7.2Hz,1H),7.93(d,J＝7.7Hz,1H),7.63(d,J＝8.4Hz,1H),7.37(s,4H),6.81-6.72(m,2H),6.58(d,J＝8.3Hz,1H),5.05(t,J＝7.3Hz,1H),4.83(dt,J＝15.2,7.6Hz,2H),4.54(s,1H),3.96(d,J＝5.5Hz,2H),3.75(d,J＝11.1Hz,1H),3.59(d,J＝8.1Hz,1H),3.39(s,1H),3.15(s,1H),2.85(s,2H),2.51(d,J＝9.1Hz,4H),2.44(d,J＝15.4Hz,3H),2.22(t,J＝7.4Hz,2H),2.12–1.95(m,5H),1.64–1.28(m,17H),1.11(s,6H),1.00(s,9H).13C NMR(101MHz,Chloroform-d)δ190.34,174.14,171.48,170.22,169.78,150.73,150.45,150.15,148.30,143.49,141.53,131.74,130.62,129.50,126.44,116.14,113.46,109.16,107.11,73.10,69.86,67.13,58.47,56.49,52.24,49.40,48.87,48.29,41.50,37.13,35.80,35.68,35.27,29.47,29.19,28.22,26.80,26.31,24.97,22.36,16.06.HRMS(ESI)m/z calcd for C54H70F3N9O8SNa(M+Na)+:1084.4918；found,1084.4928.
【实施例2】(1R，4R)-4-((2-氨基甲酰基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(8-(((S)-1-((2S，4R)-4-羟基-2-((((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)辛酰基)甘氨酸酯LF2的制备。
制备方法同上述【实施例1】所述，区别在于将原料15a替换为原料15b，得白色固体产物LF2，产率为83％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.67(s,1H),8.21(d,J＝7.3Hz,1H),7.95(d,J＝7.7Hz,1H),7.61(d,J＝8.4Hz,1H),7.38(s,4H),6.78(s,1H),6.59(d,J＝8.5Hz,2H),5.06(t,J＝7.2Hz,1H),4.85(q,J＝8.7,8.1Hz,2H),4.57(s,1H),3.98(d,J＝4.4Hz,2H),3.73(d,J＝11.1Hz,1H),3.61(dd,J＝11.0,4.3Hz,1H),3.40(s,1H),3.21(s,1H),2.85(s,2H),2.51(s,4H),2.47(s,3H),2.22(t,J＝7.5Hz,2H),2.17–1.93(m,5H),1.68–1.34(m,13H),1.27(d,J＝5.8Hz,8H),1.12(s,6H),1.02(s,9H).13C NMR(101MHz,Chloroform-d)δ190.36,174.10,171.48,170.18,169.74,150.73,150.48,150.14,148.28,143.46,141.53,131.75,130.62,130.29,129.50,126.45,116.14,113.46,109.16,73.05,69.81,67.22,58.50,52.23,49.42,48.88,48.69,37.14,36.00,35.68,35.27,29.44,29.20,28.62,28.22,26.82,26.60,25.30,22.36,16.05.HRMS(ESI)m/z calcd for C56H74F3N9O8SNa(M+Na)+:1112.5231；found,1112.5232.
【实施例3】(1R，4R)-4-((2-氨基甲酰基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(10-(((S)-1-((2S，4r)-4-羟基-2-((((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)癸酰基)甘氨酸酯LF3的制备。
制备方法同上述【实施例1】所述，区别在于将原料15a替换为原料15c，得白色固体产物LF3，产率为88％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.64(s,1H),8.19(d,J＝7.4Hz,1H),7.91(d,J＝7.8Hz,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),7.35(s,4H),6.73(d,J＝2.0Hz,1H),6.56(d,J＝8.4Hz,1H),6.42(d,J＝8.0Hz,1H),5.02(q,J＝6.9Hz,1H),4.82(t,J＝7.2Hz,2H),4.55(t,J＝4.4Hz,1H),3.96(d,J＝5.3Hz,2H),3.62(dt,J＝9.9,6.6Hz,2H),3.37(d,J＝9.0Hz,1H),3.09(s,1H),2.82(s,2H),2.55(d,J＝14.1Hz,1H),2.48(s,3H),2.44(s,2H),2.34–2.29(m,1H),2.19(t,J＝7.5Hz,2H),2.08(d,J＝12.5Hz,2H),2.01–1.94(m,2H),1.60–1.50(m,4H),1.46–1.37(m,9H),1.28–1.17(m,12H),1.09(s,6H),0.97(s,9H).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ190.28,172.88,170.83,169.53,152.00,151.50,149.54,147.88,147.79,144.79,140.69,131.18,130.78,129.72,129.02,128.88,126.37,121.55,115.39,114.06,109.13,106.84,72.12,68.81,66.19,58.39,56.25,51.72,48.73,48.11,47.76,40.90,37.51,36.04,35.20,35.08,34.89,29.27,29.09,28.97,28.83,28.62,27.54,26.82,26.61,26.57,25.25,22.52,22.20,16.01.HRMS(ESI)m/z calcd for C58H78F3N9O8SNa(M+Na)+:1140.5544；found,1140.5540.
【实施例4】(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)丁酰基)甘氨酸酯LF4的制备。
称取化合物SNX-5422(100mg，0.19mmol)、17a((73mg，0.21mmol)、HATU(80mg，0.21mmol)、DIPEA(75mg，0.58mmol)置于25mL圆底烧瓶中，加入无水DCM，室温条件下搅拌过夜，TLC监测原料SNX-5422完全消失后，利用DCM进行萃取，无水硫酸钠进行干燥，浓缩后进行柱层析纯化，流动相为二氯甲烷/甲醇(V/V＝15:1)，得白色固体产物LF4(130mg，0.15mmol)，产率为80％。
1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ9.87(s,1H),8.61(d,J＝7.6Hz,1H),7.87(d,J＝8.4Hz,1H),7.55(t,J＝5.9Hz,2H),7.31(t,J＝7.7Hz,1H),7.02(d,J＝7.4Hz,1H),6.98(d,J＝2.1Hz,1H),6.84(d,J＝8.0Hz,1H),6.77(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),5.27–5.09(m,2H),4.81(dt,J＝9.9,5.3Hz,1H),4.37–4.18(m,2H),3.94(d,J＝5.9Hz,2H),3.54(dd,J＝11.0,6.8Hz,1H),3.30(q,J＝6.4Hz,2H),3.08(s,2H),3.04–2.97(m,1H),2.78–2.71(m,1H),2.51–2.43(m,3H),2.41(t,J＝7.0Hz,2H),2.22–2.11(m,3H),2.04–1.92(m,4H),1.59(dt,J＝12.8,9.4Hz,2H),1.46(ddt,J＝16.0,9.6,4.9Hz,2H),1.13(s,6H).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ190.23,172.92,172.62,171.26,170.79,169.53,168.91,152.00,149.51,143.66,140.66,138.52,132.06,130.73,129.21,126.51,121.53,119.74,115.35,114.04,111.75,110.00,109.13,106.86,54.91,53.47,51.69,51.51,48.68,45.74,42.17,40.89,35.99,35.17,32.54,31.26,29.28,29.10,27.51,24.55,22.84,18.03,16.71,12.34.HRMS(ESI)m/z calcd for C42H48F3N8O8(M+H)+:849.3547；found,849.3544.
【实施例5】(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(5-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)戊酰基)甘氨酸酯LF5的制备。
制备方法同上述【实施例4】所述，区别在于将原料17a替换为原料17b，得白色固体产物LF5，产率为69％。
1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ9.99(s,1H),8.57(d,J＝7.5Hz,1H),7.87(d,J＝8.4Hz,1H),7.67(s,1H),7.58(t,J＝5.9Hz,1H),7.28(t,J＝7.7Hz,1H),7.01(d,J＝7.4Hz,1H),6.97(d,J＝2.1Hz,1H),6.87(s,1H),6.81–6.75(m,2H),5.19(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),5.04(t,J＝5.5Hz,1H),4.78(dt,J＝9.8,5.3Hz,1H),4.34–4.22(m,2H),3.93(d,J＝5.9Hz,2H),3.56–3.47(m,1H),3.23(q,J＝6.2Hz,2H),3.06(s,2H),2.91(d,J＝5.4Hz,1H),2.73(dt,J＝17.2,3.6Hz,1H),2.44(s,3H),2.30(t,J＝6.8Hz,2H),2.13(tt,J＝15.6,2.6Hz,3H),2.01–1.94(m,2H),1.78–1.65(m,4H),1.60–1.50(m,2H),1.43(td,J＝12.4,11.9,6.2Hz,2H),1.11(s,6H).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ190.23,172.92,172.68,171.26,170.79,169.51,168.92,151.99,149.50,143.74,140.66,138.52,138.26,132.05,130.73,129.20,126.47,121.53,119.74,115.35,114.03,111.75,109.92,109.12,106.85,72.15,53.47,51.69,51.51,48.68,45.76,42.44,41.72,40.84,35.99,35.17,34.75,31.26,29.28,29.08,27.99,27.52,27.50,22.85,22.83,18.03,16.71.HRMS(ESI)m/z calcd forC43H50F3N8O8(M+H)+:863.3704；found,863.3712.
【实施例6】(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(6-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)己酰基)甘氨酸酯LF6的制备。
制备方法同上述【实施例4】所述，区别在于将原料17a替换为原料17c，得白色固体产物LF6，产率为68％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.05(s,1H),8.46(d,J＝7.6Hz,1H),8.27(t,J＝6.0Hz,1H),8.04(s,1H),7.81(d,J＝8.4Hz,1H),7.38(s,1H),7.27(t,J＝7.7Hz,1H),6.97–6.87(m,2H),6.78–6.69(m,2H),5.59(t,J＝5.5Hz,1H),5.13(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.73(dt,J＝10.1,5.6Hz,1H),4.31–4.05(m,2H),3.80(d,J＝5.8Hz,2H),3.12(q,J＝6.6Hz,2H),2.99(s,2H),2.97–2.85(m,1H),2.68–2.59(m,1H),2.45(s,2H),2.32(qd,J＝13.1,4.3Hz,1H),2.16(t,J＝7.3Hz,2H),2.09–1.99(m,3H),1.97–1.87(m,2H),1.57(tq,J＝19.9,11.6,9.3Hz,6H),1.44–1.31(m,4H),1.04(s,6H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ190.77,173.45,173.26,171.75,171.27,170.00,169.43,152.46,149.95,144.20,141.11,132.47,131.20,129.70,126.90,115.79,114.44,112.15,110.38,109.58,107.28,72.60,52.12,51.94,49.13,46.19,43.07,41.30,36.44,35.63,35.46,31.71,29.72,29.54,28.71,27.94,26.66,25.50,23.27.HRMS(ESI)m/z calcd for C44H52F3N8O8(M+H)+:877.3860；found,877.3854.
【实施例7】(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(7-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)庚酰基)甘氨酸酯LF7的制备。
制备方法同上述【实施例4】所述，区别在于将原料17a替换为原料17d，得白色固体产物LF7，产率为81％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.03(s,1H),8.45(d,J＝7.7Hz,1H),8.25(t,J＝6.0Hz,1H),8.02(s,1H),7.79(d,J＝8.5Hz,1H),7.38(s,1H),7.26(t,J＝7.7Hz,1H),6.93–6.88(m,2H),6.75–6.70(m,2H),5.58(t,J＝5.5Hz,1H),5.11(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.71(dt,J＝10.2,5.7Hz,1H),4.26–4.07(m,2H),3.78(d,J＝5.9Hz,2H),3.46(d,J＝8.8Hz,1H),3.09(d,J＝6.2Hz,3H),2.98(s,2H),2.94–2.86(m,1H),2.63(d,J＝3.8Hz,1H),2.44(s,2H),2.34–2.23(m,1H),2.12(t,J＝7.3Hz,2H),2.06–1.98(m,3H),1.94–1.85(m,2H),1.54(dt,J＝21.5,6.6Hz,6H),1.34(q,J＝11.8,11.1Hz,6H),1.02(s,6H).13C NMR(151MHz,Methanol-d4)δ192.89,176.91,173.90,172.65,171.06,153.45,151.33,145.31,142.88,133.06,131.95,130.75,128.18,117.12,115.79,114.00,112.05,110.80,108.50,74.34,53.70,53.24,47.47,44.49,42.42,37.95,36.77,36.75,32.54,30.37,30.20,30.06,28.37,28.35,28.05,26.92,24.39.HRMS(ESI)m/z calcd for C45H54F3N8O8(M+H)+:891.4017；found,891.4024.
【实施例8】(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(8-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)辛酰基)甘氨酸酯LF8的制备。
制备方法同上述【实施例4】所述，区别在于将原料17a替换为原料17e，得白色固体产物LF8，产率为80％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.05(s,1H),8.47(d,J＝7.5Hz,1H),8.25(t,J＝6.0Hz,1H),8.05(s,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,1H),7.39(s,1H),7.27(t,J＝7.8Hz,1H),6.93(d,J＝8.7Hz,2H),6.80–6.68(m,2H),5.58(t,J＝5.5Hz,1H),5.13(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.73(tt,J＝10.0,4.1Hz,1H),4.30–4.08(m,2H),3.80(d,J＝5.8Hz,2H),3.11(q,J＝6.7Hz,2H),2.99(s,2H),2.96–2.85(m,1H),2.64(d,J＝17.2Hz,1H),2.46(s,2H),2.31(td,J＝13.2,4.5Hz,1H),2.14(t,J＝7.3Hz,2H),2.08–1.99(m,3H),1.96–1.87(m,2H),1.61–1.48(m,6H),1.38–1.25(m,8H),1.04(s,6H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ190.77,173.45,173.34,171.74,171.28,169.98,169.46,152.43,149.95,144.21,141.13,132.45,131.19,129.70,126.87,119.73,115.80,114.43,112.13,110.36,109.55,107.25,72.58,52.10,51.95,49.14,46.22,43.18,41.31,36.45,35.62,35.47,31.70,29.70,29.52,29.15,29.05,28.96,27.93,27.03,25.64,23.25.HRMS(ESI)m/z calcd for C46H56F3N8O8(M+H)+:905.4173；found,905.4168.
【实施例9】(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(10-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)癸酰基)甘氨酸酯LF9的制备。
制备方法同上述【实施例4】所述，区别在于将原料17a替换为原料17f，得白色固体产物LF9，产率为79％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.03(s,1H),8.46(d,J＝7.6Hz,1H),8.23(t,J＝6.0Hz,1H),8.02(s,1H),7.79(d,J＝8.5Hz,1H),7.38(s,1H),7.26(t,J＝7.7Hz,1H),6.94–6.87(m,2H),6.75–6.68(m,2H),5.56(t,J＝5.6Hz,1H),5.11(dd,J＝13.3,5.1Hz,1H),4.71(dt,J＝10.1,5.6Hz,1H),4.25–4.07(m,2H),3.77(d,J＝5.9Hz,2H),3.45(d,J＝8.8Hz,1H),3.08(q,J＝6.6Hz,2H),2.98(s,2H),2.94–2.85(m,1H),2.61(d,J＝17.4Hz,1H),2.44(s,2H),2.34–2.24(m,1H),2.10(t,J＝7.4Hz,2H),2.02(d,J＝11.1Hz,3H),1.90(d,J＝11.3Hz,2H),1.58–1.44(m,6H),1.35(d,J＝11.4Hz,4H),1.29–1.22(m,8H),1.02(s,6H).13CNMR(151MHz,Methanol-d4)δ192.88,176.95,174.91,173.87,172.46,171.05,153.43,151.34,145.30,142.88,133.05,131.96,130.76,130.68,128.14,117.12,113.98,112.01,110.77,108.47,74.31,53.70,53.23,47.50,44.59,42.45,37.96,36.89,36.74,32.54,32.29,30.97,30.88,30.66,30.59,30.50,30.34,30.30,30.26,30.24,28.37,28.24,27.01,24.38.HRMS(ESI)m/z calcd for C48H60F3N8O8(M+H)+:933.4486；found,933.4495.
以上合成的本发明的目标化合物LF1-LF9的化学结构见表1。
【实施例10】Hsp90 PROTAC化合物体外Hsp90降解活性
免疫印迹分析操作步骤：用不同浓度的Hsp90 PROTAC化合物处理SiHa细胞10h，用RIPA缓冲液和SDS-PAGE蛋白上样缓冲液获得全细胞裂解液。用BCA蛋白分析试剂盒(KR0008)分析样品的蛋白浓度，并根据标准蛋白曲线调节电泳用样品的体积。用7.5％或10％的SDS-PAGE凝胶分离蛋白，并转移到厚度为0.45μm的PVDE膜(Millipore，000027346)上。用5％牛血清白蛋白(BSA，KR9048-466-8)或5％脱脂乳在室温下封闭膜2h，一级抗体在4℃孵育12h以上，二级抗体在摇床上室温孵育1h以上。采用超灵敏增强化学发光(ECL、meilunbio、MAO186-2)试剂检测蛋白质。HSP90抗体(4877S)购自Cell SignalingTechnology(CST)，GAPDH(60004-1-Ig)抗体购自Proteintech。
结果如图1所示，表明大多数Hsp90 PROTAC化合物均能诱导Hsp90降解，例如LF1以及LF6-LF8。其中，化合物LF8在10h内能显著诱导Hsp90降解，在浓度仅为0.05μM，能够显著降低Hsp90的蛋白水平，然而当浓度升高到1μM时，Hsp90的水平开始回升，出现了明显的“hook”效应。
【实施例11】Hsp90 PROTAC化合物体外抗宫颈癌活性
CCK-8用于化合物抗增殖活性测试原理：CCK-8(Cell Counting Kit-8)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。WST-8(化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐)，是一种类似于MTT(化学名：3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐)的化合物，其在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下，被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物(Formazan)。细胞增殖数量越多、速度越快，颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅，对于同样的细胞，颜色的深浅与活细胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
操作步骤：
1)制备细胞悬液：宫颈癌细胞(SiHa、HaLa、C33A或CaSKi)生长密度达到80％-90％时，用0.25％ Trypsin-EDTA消化细胞，加入新鲜的DMEM培养基，混匀细胞悬液，使用细胞计数板计数，将细胞稀释为5×104个/ml的单细胞悬液。
2)铺板：将100μL单细胞悬液接种到微孔板(组织培养级，96孔，平底)中。
3)预培养：在37℃、5％ CO2培养箱中孵育细胞24小时左右。
4)加药：吸出原培养基，向培养板各孔中依次加入200μL含不同浓度(100μM-0.01μM)待测药物的培养基(每个浓度设置3个复孔，同时设置空白组和顺铂对照组)，放入培养箱孵育72h。
6)收板：按照每100μL培养基加10μL CCK-8试剂的比例配制CCK-8工作液，每孔中加入100μL CCK-8工作液，将培养板置于培养箱中孵育1-2h。
7)测板：用酶标仪测定450nm处的吸光度(OD)。
表2.Hsp90 PROTAC化合物(LF1-LF9)的抗宫颈癌细胞增殖活性
上述实验结果表明：合成的大多数Hsp90 PROTAC化合物在上述四种宫颈癌细胞中都具有很好抗宫颈癌活性，且优于阳性对照药物顺铂(IC50＝200-1290nM)，其中部分化合物的抑制活性达到了纳摩尔水平，例如化合物LF2(IC50＝40-170nM)、LF4(IC50＝60-120nM)、LF7(IC50＝90-250nM)、LF8(IC50＝50-80nM)、LF9(IC50＝60-150nM)。
上述实施例仅为本发明较佳的实施方式，本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种Hsp90 PROTAC化合物，其特征在于，结构如通式(I)所示：
其中，
Linker选自
E3 ligand选自
2.根据权利要求1所述的Hsp90 PROTAC化合物，其特征在于，选自下列化合物：
(1R，4S)-4-((2-氨基甲酰基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(6-(((S)-1-((2S，4R)-4-羟基-2-((((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)己酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基甲酰基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(8-(((S)-1-((2S，4R)-4-羟基-2-((((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)辛酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基甲酰基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(10-(((S)-1-((2S，4r)-4-羟基-2-((((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)癸酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)丁酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(5-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)戊酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(6-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)己酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(7-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)庚酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(8-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)辛酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(10-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)癸酰基)甘氨酸酯。
3.根据权利要求1所述的Hsp90 PROTAC化合物，其特征在于，选自下列化合物：
(1R，4R)-4-((2-氨基甲酰基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(8-(((S)-1-((2S，4R)-4-羟基-2-((((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)辛酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)丁酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(7-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)庚酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(8-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)辛酰基)甘氨酸酯；
(1R，4R)-4-((2-氨基-5-(6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)苯基)氨基)环己基(10-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)癸酰基)甘氨酸酯。
4.一种权利要求1-3任一项所述的Hsp90 PROTAC化合物药理或生理上可接受的盐。
5.权利要求1-3任一项所述的Hsp90 PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐在制备Hsp90降解剂或抗宫颈癌的药物中的应用。
6.一种Hsp90降解剂或抗宫颈癌的药物，其特征在于：包含权利要求1-3任一项所述的Hsp90 PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐中的一种或多种。
7.根据权利要求6所述的Hsp90降解剂或抗宫颈癌的药物，其特征在于：还包含药学上可接受的载体或赋形剂。
8.权利要求1-3任一项所述的芳基甲酰胺类化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：含羧酸连接子的VHL或来那度胺衍生物与SNX-5422在缩合剂和碱的作用下进行缩合反应，得到所述的Hsp90 PROTAC化合物；
所述的含羧酸连接子的VHL或来那度胺衍生物为 其中，n＝1、2、3、4、5、7。
9.根据权利要求8所述的芳基甲酰胺类化合物的制备方法，其特征在于：所述的缩合剂为HATU，所述的碱为EIPEA。
10.根据权利要求9所述的芳基甲酰胺类化合物的制备方法，其特征在于：SNX-5422、含羧酸连接子的VHL或来那度胺衍生物、HATU和DIPEA投料的摩尔比为1:1.0～1.2:1.0～1.2:2.5～3.5。
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