CN117705995A - 一种氟比洛芬有关物质的分析方法 - Google Patents
一种氟比洛芬有关物质的分析方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117705995A CN117705995A CN202311817986.7A CN202311817986A CN117705995A CN 117705995 A CN117705995 A CN 117705995A CN 202311817986 A CN202311817986 A CN 202311817986A CN 117705995 A CN117705995 A CN 117705995A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mobile phase
- impurity
- flurbiprofen
- volume percentage
- analysis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N flurbiprofen Chemical compound FC1=CC(C(C(O)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 52
- 229960002390 flurbiprofen Drugs 0.000 title claims abstract description 52
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 49
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 91
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Substances CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 50
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 47
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 44
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 36
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 22
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 20
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 20
- XUKUURHRXDUEBC-SXOMAYOGSA-N (3s,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-3-phenyl-4-(phenylcarbamoyl)-5-propan-2-ylpyrrol-1-yl]-3,5-dihydroxyheptanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-SXOMAYOGSA-N 0.000 claims description 10
- AAEQXEDPVFIFDK-UHFFFAOYSA-N 3-(4-fluorobenzoyl)-2-(2-methylpropanoyl)-n,3-diphenyloxirane-2-carboxamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1NC(=O)C1(C(=O)C(C)C)OC1(C=1C=CC=CC=1)C(=O)C1=CC=C(F)C=C1 AAEQXEDPVFIFDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 10
- OUCSEDFVYPBLLF-KAYWLYCHSA-N 5-(4-fluorophenyl)-1-[2-[(2r,4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-n,4-diphenyl-2-propan-2-ylpyrrole-3-carboxamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@H]2OC(=O)C[C@H](O)C2)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 OUCSEDFVYPBLLF-KAYWLYCHSA-N 0.000 claims description 8
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 7
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 3
- ALIVXCSEERJYHU-UHFFFAOYSA-N Flurbiprofen axetil Chemical compound FC1=CC(C(C)C(=O)OC(OC(C)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 ALIVXCSEERJYHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims 1
- 229950005941 flurbiprofen axetil Drugs 0.000 claims 1
- JEUXZUSUYIHGNL-UHFFFAOYSA-N n,n-diethylethanamine;hydrate Chemical compound O.CCN(CC)CC JEUXZUSUYIHGNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 abstract description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 22
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 18
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 8
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 8
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 5
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 3
- -1 2- (2-fluoro- (1, 1' -biphenyl) -4-yl) -2, 3-dimethyl succinic acid Chemical compound 0.000 description 2
- HTRNHWBOBYFTQF-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-2-fluoro-1-phenylbenzene Chemical group FC1=CC(Br)=CC=C1C1=CC=CC=C1 HTRNHWBOBYFTQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 2
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 2
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N diphenyl Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- ZLKQQDFLPVWFDT-UHFFFAOYSA-N 1-(3-fluoro-4-phenylphenyl)ethanone Chemical compound FC1=CC(C(=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZLKQQDFLPVWFDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLECYOQFQXJYBC-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-2-phenylbenzene Chemical group FC1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 KLECYOQFQXJYBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZESXUMKHKBMLE-UHFFFAOYSA-N 2-(3-fluoro-4-phenylphenyl)-2-hydroxypropanoic acid Chemical compound FC1=CC(C(O)(C(O)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 WZESXUMKHKBMLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JALUUBQFLPUJMY-UHFFFAOYSA-N 2-(4-phenylphenyl)propanoic acid Chemical compound C1=CC(C(C(O)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 JALUUBQFLPUJMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FTZQXOJYPFINKJ-UHFFFAOYSA-N 2-fluoroaniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1F FTZQXOJYPFINKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGQXAMBOYWULFX-LZWSPWQCSA-N 2-morpholin-4-ylethyl (e)-6-(4,6-dihydroxy-7-methyl-3-oxo-1h-2-benzofuran-5-yl)-4-methylhex-4-enoate Chemical compound OC=1C=2C(=O)OCC=2C(C)=C(O)C=1C\C=C(/C)CCC(=O)OCCN1CCOCC1 QGQXAMBOYWULFX-LZWSPWQCSA-N 0.000 description 1
- PFKITESTTSWHMP-UHFFFAOYSA-N 3-fluoro-4-phenylbenzoic acid Chemical compound FC1=CC(C(=O)O)=CC=C1C1=CC=CC=C1 PFKITESTTSWHMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAYRUOZNLRMSTL-UHFFFAOYSA-N 3-fluoro-4-phenylphenol Chemical group FC1=CC(O)=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZAYRUOZNLRMSTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GZRMNMGWNKSANY-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-2-fluoroaniline Chemical compound NC1=CC=C(Br)C=C1F GZRMNMGWNKSANY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 229930091051 Arenine Natural products 0.000 description 1
- 101000777134 Homo sapiens Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 43 Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031311 Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 43 Human genes 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- RMZZTJOADJVCIO-UHFFFAOYSA-N acetic acid;acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N.CC(O)=O RMZZTJOADJVCIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical group O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 239000007806 chemical reaction intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- BCYGKMDWQBWUSC-UHFFFAOYSA-N n-(4-bromo-2-fluorophenyl)acetamide Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(Br)C=C1F BCYGKMDWQBWUSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及一种氟比洛芬有关物质的分析方法，属于药物检测分析技术领域。为了解决现有的分析不全面的问题，提供一种氟比洛芬有关物质的分析方法，该方法采用高效液相色谱分析法对氟比洛芬样品进行检测分析，高效液相色谱分析法包括以下色谱条件：在检测分析过程中采用梯度洗脱，所述梯度洗脱采用的流动相为流动相A和流动相B，且色谱柱的柱温控制在45℃～46℃；流动相A为三乙胺缓冲液‑乙腈混合液，所述三乙胺缓冲液采用三乙胺水溶液，且用磷酸调节pH值为2.3～2.5；所述流动相B为乙腈。本发明能够更有效的保证流动相的稳定性，能实现对所有九个杂质的监控和分析，有利于实现更好的杂质控制，具有高精准性。
Description
技术领域
本发明涉及一种氟比洛芬有关物质的分析方法，属于药物检测分析技术领域。
背景技术
氟比洛芬是一种非甾体类抗炎药，主要用于治疗类风湿关节炎、骨关节炎及强直性脊椎炎。其化学名(±)-2-(2-氟-4-联苯基)-丙酸，化学式为C15H13FO2，结构式如下：
在氟比洛芬的合成过程中，杂质来源于起始物料和反应中间产物，对于药物中杂质的分析和控制是至关重要的过程。目前，在氟比洛芬原料药的检测分析中目前所涉及到要控制的杂质有九个，这九个杂质(有关物质)分别为2-(4-联苯基)丙酸(杂质A)、2-(2-氟-(1，1’-联苯)-4-基)-2，3-二甲基琥珀酸(杂质B)、2-(2-氟联苯-4-基)-2-羟基丙酸(杂质C)、1-(2-氟-{1，1’-联苯}-4-基)乙烷-1-酮(杂质D)、2-氟-{1，1’联苯}-4-羧酸(杂质E)、3’，3”-二氟-{1，1’；4’，1”；4”，1”’}季苯基(杂质F)、4-羟基-2-氟联苯(杂质G)2-氟联苯(杂质H)、4-溴-2-氟联苯(杂质I)。对于上述杂质的分析过程，已公开的氟比洛芬有关物质的分析包括进口注册标准(标准号：JX20130017)、《欧洲药典》和《中国药典》中的检测方法，但是，目前的检测方法无法做到一次检测全部杂质的可靠性，如采用《中国药典》的方法进行试验，检测采用的色谱柱：Waters Symmetry C18 3.9*150mm，流动相：乙腈-水-冰醋酸(35：60：5)，检测波长为254nm等条件控制。但是该分析方法的问题在于分析结果中对于其中的杂质(F、H和I)均未出峰、杂质E和杂质G峰重合，色谱柱过载严重，不利于配合工艺跟踪以及快速准确的检测，该色谱分析方法中流动相中采用的冰乙酸成分较多，气味重，对金属的腐蚀性强，会造成色谱柱的寿命缩短，流动相受环境温度影响较大，同时色谱柱被腐蚀也不利用保证检测的准确性。同时，也说明采用中国药典方法并不适用于一次检测分析中全部的九个杂质，且对于药物中为保证产品疗效，对其质量的控制也显得尤其重要。另外，对于氟比洛芬的检测分析中在USP43、EP11和JP18中对于氟比洛芬的液相色谱法中采用的流动相均为冰醋酸-乙腈-水的溶剂体系，且采用等梯度洗脱，所有药典的检测方法基本一致，均存在采用冰乙酸的问题。在现有的文献中如中国专利申请(公开号：CN114544785A)公开的一种氟比洛芬及其杂质的检测方法，采用高效液相色谱法的条件包括采用5-氟苯基键合硅胶色谱柱，采用冰乙酸水缓冲液与有机溶剂的混合溶液作用流动相A，相同的有机溶剂作为流动相B进行梯度洗脱，梯度洗脱设备条件为
0min时，流动相A的体积比为50％～100％，流动相B的体积比为0～50％；
15min时，流动相A的体积比为50％～100％，流动相B的体积比为0～50％；
35min时，流动相A的体积比为30％～70％，流动相B的体积比为30％～70％；
50min时，流动相A的体积比为50％～100％，流动相B的体积比为0～50％。该方法能检测的杂质可以选自2-氟苯胺(杂质A)、4-溴-2-氟乙酰苯胺(杂质B)、4-溴-2-氟苯胺(杂质C)和4-溴-2-氟联苯(杂质D)中的一种或多种。该检测方法虽采用梯度洗脱，但是采用的流动相中仍存在冰乙酸所带来的问题，而且该方法也仅是用于检测杂质A、杂质B、杂质C和杂质D，也不能通过一次检测分析中氟比洛芬中上述九个杂质。故开发出在氟比洛芬分析过程中能一次性完全可靠的分析和判断九个杂质具有重要意义。
发明内容
本发明针对以上现有技术中存在的问题，提供一种氟比洛芬有关物质的分析方法，解决的问题是如何实现全面检测和具有检测分离性好且出峰不重峰的特性。
本发明的目的是通过以下技术方案得以实现的，一种氟比洛芬有关物质的分析方法，该方法采用高效液相色谱分析法对氟比洛芬样品进行检测分析，其特征在于，所述高效液相色谱分析法包括以下色谱条件：
在检测分析过程中采用梯度洗脱，所述梯度洗脱采用的流动相为流动相A和流动相B，且色谱柱的柱温控制在45℃～46℃；
所述流动相A为三乙胺缓冲液-乙腈混合液，所述三乙胺缓冲液采用三乙胺水溶液，且用磷酸调节pH值为2.3～2.5；所述流动相B为乙腈。
本发明在采用液相色谱柱分析过程中的条件进行创新改进，由于在氟比洛芬的检测分析过程中，氟比洛芬和所有的杂质都是由联苯基构成，因此，本发明通过对采用的色谱柱进行调整，采用苯基色谱柱进行检测，并使检测的柱温控制在45℃～46℃，使其在检测的过程中更适合样品和杂质的特性，有利于分离检测，且本发明采用的柱温条件也完全不同于常规的药典中采用的Waters Symmetry C18 3.9*150mm色谱柱对于柱温的控制一般在30℃。同时，通过对流动相进行改进，采用双流动相，并使其中的流动相A以三乙胺缓冲液-乙腈体系，并通过磷酸调pH值在2.5左右，并以流动相B为乙腈的体系，在进行梯度洗脱的过程中，能够更有效的保证流动相的稳定性，避免受环境因素的影响，且由于无需采用冰乙酸体系，有效地解决对仪器的腐蚀，更重要的是采用上述流动相体系并采用梯度洗脱的方式能够使检测分析过程中更精准的分析出九个杂质的情况，实现对所有九个杂质的监控和分析，有利于实现更好的杂质控制，提高产品的品质控制和安全的必要性。
在上述氟比洛芬有关物质的分析方法中，作为优选，所述梯度洗脱程序为：
0～15min时，所述流动相中流动相A的体积百分数为100％，流动相B为零；
15min～30min时，所述流动相中流动相A的体积百分数从100％逐渐减小为20％，所述流动相B体积百分数从0逐渐增加为80％；
30min～32min时，所述流动相中流动相A的体积百分数为20％，流动相B体积百分数为80％；
32min～36min时，所述流动相中流动相A的体积百分数从20％逐渐增加为100％，所述流动相B体积百分数从80％逐渐减小为0；
36min～40min时，所述流动相中流动相A的体积百分数为100％，流动相B的体积百分数为0。
采用上述梯度洗脱的方式，通过对时间和梯度洗脱过程中对流动相中流动相A和流动相B的体积百分比进行精准的控制，使在梯度洗脱的过程中呈均匀渐变的过程中到相应的体积比例配比，能够使上述九个杂质的分析的过程中均能出峰且相互分离，分离度好，不会出现重峰现象，定量限均小于0.05％，均符合检测要求。
在上述氟比洛芬有关物质的分析方法中，作为优选，所述三乙胺水溶液中三乙胺的体积百分数为0.5％～0.8％。能更好的实现分析过程中杂质的全面分离且相互不重峰的优点，也能使流动相具有更好的稳定性。作为进一步的优选，所述流动相A中缓冲液：乙腈的体积比为50～55：50～50。
在上述氟比洛芬有关物质的分析方法中，作为优选，所述色谱柱采用的型号为Welch XB-Phenyl 4.6*300mm。采用苯基色谱柱，且色谱柱的长度为300mm，苯基色谱柱较长，且采用的苯基色谱柱能更有利于对样品中氟比洛芬和杂质的分析，适用性更佳，且整体的分离度更好，也能使九种杂质均能出峰且相互分离不重峰的优点。
在上述氟比洛芬有关物质的分析方法中，作为优选，所述氟比洛芬样品的浓度为0.4mg/ml～0.5mg/ml,采用的稀释剂为乙腈，且进样量为5μl～10μl。进样量少能避免色谱柱过载，提高使用寿命。
在上述氟比洛芬有关物质的分析方法中，作为优选，所述有关物质包括杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H和杂质I。
在上述氟比洛芬有关物质的分析方法中，作为优选，所述检测分析的检测波长为254nm。在该检测波长下样品氟比洛芬与各杂质均有较大的吸收峰，更好的保证检测的灵敏性。
综上所述，与现有技术相比，本发明具有以下优点：
1.通过采用苯基色谱柱和上述流动相，使控制柱基在在45℃～46℃下进行梯度洗脱的过程中，能够更有效的保证流动相的稳定性，由于无需采用冰乙酸体系，有效的解决对仪器的腐蚀；采用上述流动相体系并采用梯度洗脱的方式能够使检测分析过程中更精准的分析出九个杂质的情况，实现对所有九个杂质的监控和分析，有利于实现更好的杂质控制，具有高精准性。
2.通过对梯度洗脱过程中时间和流动相中流动相A和流动相B的体积百分比进行精准的控制，能够使上述九种杂质的分析的过程中均能出峰且相互分离，分离度好，不会出现重峰现象。
附图说明
图1是本发明实施例2中对应M1溶液的液相色谱分析图。
图2是本发明实施例2中对应M2溶液的液相色谱分析图。
图3是本发明实施例2中对应M3溶液的液相色谱分析图。
图4是本发明实施例2中对应的LOQ溶液的液相色谱分析图。
具体实施方式
下面通过具体实施例和附图，对本发明的技术方案作进一步具体的说明，但是本发明并不限于这些实施例。
实施例1
相关的氟比洛芬及九个杂质的溶液配制，其中采用的稀释剂为乙腈水溶液(乙腈：水为45：55)：
杂质A储备液：称取杂质A标准品5.37mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质B储备液：称取杂质B标准品5.08mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质C储备液：称取杂质C标准品5.01mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质D储备液：称取杂质D标准品5.15mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质E储备液：称取杂质E标准品5.32mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质F储备液：称取杂质F标准品5.28mg于50ml容量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质G储备液：称取杂质G标准品5.19mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质H储备液：称取杂质H标准品5.05mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质I储备液：称取杂质I标准品5.12mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
氟比洛芬储备液：称取氟比洛芬标准品5.17mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
M1溶液:移取各杂质储备液各1.0ml于10ml容量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀。
M2溶液：精密称取氟比洛芬样品(购买的样品来自江西善渊药业有限公司)20.12mg于10ml容量瓶中，移取2.0mlM1加入其中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
供试品溶液：精密称取氟比洛芬样品(购买的样品来自江西善渊药业有限公司)20.14mg于10ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
采用《中国药典》中氟比洛芬的液相色谱检测方法进行测试。
色谱条件为：
色谱柱：Waters Symmetry C18 3.9*150mm 5μm；
流动相：乙腈-水-冰醋酸(体积比为35：60：5)；
流速：1.0ml/min；
检测波长：254nm；柱温：30℃；
进样量：20μl；运行时间：40min。
采用上述色谱条件对相应的杂质出峰定位及分析，结果如下表1，是氟比洛芬及各杂质在上述色谱条件下的出峰位置情况：
表1：
| 序号 | 名称 | 出峰时间(min) |
| 1 | 杂质A | 19.309 |
| 2 | 杂质B | 17.731 |
| 3 | 杂质C | 9.799 |
| 4 | 杂质D | 26.578 |
| 5 | 杂质E | 20.204 |
| 6 | 杂质F | / |
| 7 | 杂质G | 20.295 |
| 8 | 杂质H | / |
| 9 | 杂质I | / |
| 10 | 氟比洛芬 | 22.421 |
采用上述色谱条件对M1溶液进行进样分析，结果如表2所示：
表2：
采用上述色谱条件对供试品溶液进行进样分析，结果如表3所示：
表3：
采用上述色谱条件对M2溶液进行进样分析，结果如表4所示：
表4：
从上述表1-表4的结果分析可知，在该色谱条件下，杂质(H.F.I)未能出峰，而如表3中的结果所示，杂质E和G两峰重合。因此现有的中国药典关于氟比洛芬的液相色谱分析采用的条件并不适用。
实施例2
相关的氟比洛芬及九个杂质的溶液配制，其中采用的稀释剂为乙腈：
杂质A储备液：称取杂质A标准品5.37mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质B储备液：称取杂质B标准品5.08mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质C储备液：称取杂质C标准品5.01mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质D储备液：称取杂质D标准品5.15mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质E储备液：称取杂质E标准品5.32mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质F储备液：称取杂质F标准品5.28mg于50ml容量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质G储备液：称取杂质G标准品5.19mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质H储备液：称取杂质H标准品5.05mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
杂质I储备液：称取杂质I标准品5.12mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
氟比洛芬储备液：称取氟比洛芬标准品5.17mg于50ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
M1溶液:移取各杂质储备液各1.0ml于10ml容量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀。
M2溶液：精密称取氟比洛芬样品(购买的样品来自江西善渊药业有限公司)20.12mg于10ml容量瓶中，移取2.0mlM1加入其中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
供试品溶液：精密称取氟比洛芬样品(购买的样品来自江西善渊药业有限公司)20.14mg于10ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。
M3溶液：取各杂质储备液各1.0ml于20ml容量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀；再取此溶液1.0ml于10ml容量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀。
LOQ溶液：取5.0ml的M3溶液于10ml容量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀。
本实施例液相色谱检测分析的色谱条件：
色谱柱：Welch XB-Phenyl 4.6*300mm 5μm；
流动相A：缓冲液(移取5.0ml三乙胺于1000ml水中，用磷酸调节pH至2.3-2.5)-乙腈(缓冲液与乙腈的体积比为55：45)；
流动相B：乙腈；
流速：1.0ml/min；
检测波长：254nm；
柱温：45℃或46℃，本实施例中的柱温为45℃；
进样量：10μl或5μl,本实施例中进样量为10μl；
运行时间：40min；
稀释剂：乙腈。
梯度洗脱程序为：
0～15min时，所述流动相中流动相A的体积百分数为100％，流动相B为零；
15min～30min时，所述流动相中流动相A的体积百分数从100％逐渐减小为20％，所述流动相B体积百分数从0逐渐增加为80％；
30min～32min时，所述流动相中流动相A的体积百分数为20％，流动相B体积百分数为80％；
32min～36min时，所述流动相中流动相A的体积百分数从20％逐渐增加为100％，所述流动相B体积百分数从80％逐渐减小为0；
36min～40min时，所述流动相中流动相A的体积百分数为100％，流动相B的体积百分数为0。
相当于梯度洗脱的设备条件设置为：
| 时间(min) | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0 | 100 | 0 |
| 15 | 100 | 0 |
| 30 | 20 | 80 |
| 32 | 20 | 80 |
| 36 | 100 | 0 |
| 40 | 100 | 0 |
采用上述的液相色谱检测分析条件对M1进行进样检测分析，结果如图1所示。
采用上述的液相色谱检测分析条件对M2进行进样检测分析，结果如图2所示。
采用上述的液相色谱检测分析条件对M3进行进样检测分析，结果如下表4及图3所示：
表4：
采用上述的液相色谱检测分析条件对LOQ溶液进行进样检测分析，结果如下表5及图4所示：
表5：
从上述结果可知，各杂质均能出峰且相互分离，定量限均小于0.05％，相对校正因子在大于0.2小于5.0之间。
本发明中所描述的具体实施例仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。
尽管对本发明已作出了详细的说明并引证了一些具体实施例，但是对本领域熟练技术人员来说，只要不离开本发明的精神和范围可作各种变化或修正是显然的。
Claims (8)
1.一种氟比洛芬有关物质的分析方法，该方法采用高效液相色谱分析法对氟比洛芬样品进行检测分析，其特征在于，所述高效液相色谱分析法包括以下色谱条件：
在检测分析过程中采用梯度洗脱，所述梯度洗脱采用的流动相为流动相A和流动相B，且色谱柱采用苯基类色谱柱，柱温控制在45℃～46℃；
所述流动相A为缓冲液-乙腈混合液，所述缓冲液采用三乙胺水溶液，且用磷酸调节pH值为2.3～2.5；所述流动相B采用乙腈。
2.根据权利要求1所述氟比洛芬有关物质的分析方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：
0～15min时，所述流动相中流动相A的体积百分数为100％，流动相B为零；
15min～30min时，所述流动相中流动相A的体积百分数从100％逐渐减小为20％，所述流动相B体积百分数从0逐渐增加为80％；
30min～32min时，所述流动相中流动相A的体积百分数为20％，流动相B体积百分数为80％；
32min～36min时，所述流动相中流动相A的体积百分数从20％逐渐增加为100％，所述流动相B体积百分数从80％逐渐减小为0；
36min～40min时，所述流动相中流动相A的体积百分数为100％，流动相B的体积百分数为0。
3.根据权利要求1所述氟比洛芬有关物质的分析方法，其特征在于，所述三乙胺水溶液中三乙胺的体积百分数为0.5％～0.8％。
4.根据权利要求3所述氟比洛芬有关物质的分析方法，其特征在于，所述流动相A中缓冲液：乙腈的体积比为50～55：50～50。
5.根据权利要求1所述氟比洛芬有关物质的分析方法，其特征在于，所述色谱柱采用的型号为Welch XB-Phenyl 4.6*300mm。
6.根据权利要求1-5任意一项所述氟比洛芬有关物质的分析方法，其特征在于，所述氟比洛芬样品的浓度为0.4mg/ml～0.5mg/ml,采用的稀释剂为乙腈，且进样量为5μl～10μl。
7.根据权利要求1-5任意一项所述氟比洛芬有关物质的分析方法，其特征在于，所述有关物质包括杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H和杂质I。
8.根据权利要求1-5任意一项所述氟比洛芬有关物质的分析方法，其特征在于，所述检测分析的检测波长为254nm。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311817986.7A CN117705995A (zh) | 2023-12-27 | 2023-12-27 | 一种氟比洛芬有关物质的分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311817986.7A CN117705995A (zh) | 2023-12-27 | 2023-12-27 | 一种氟比洛芬有关物质的分析方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117705995A true CN117705995A (zh) | 2024-03-15 |
Family
ID=90149695
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311817986.7A Pending CN117705995A (zh) | 2023-12-27 | 2023-12-27 | 一种氟比洛芬有关物质的分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117705995A (zh) |
-
2023
- 2023-12-27 CN CN202311817986.7A patent/CN117705995A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hsieh et al. | High-performance liquid chromatography-atmospheric pressure photoionization/tandem mass spectrometric analysis for small molecules in plasma | |
| He et al. | Simultaneous determination of food-related biogenic amines and precursor amino acids using in situ derivatization ultrasound-assisted dispersive liquid–liquid microextraction by ultra-high-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry | |
| Locatelli et al. | Microextraction by packed sorbent and high performance liquid chromatography determination of seven non-steroidal anti-inflammatory drugs in human plasma and urine | |
| Xu et al. | A new quantification method using electrochemical mass spectrometry | |
| Takezawa et al. | An automatic analyzer for catecholamines and their 3-O-methyl metabolites using a micro coulometric flow cell as a postcolumn reactor for fluorogenic reaction | |
| Soga | Advances in capillary electrophoresis mass spectrometry for metabolomics | |
| Alcantara et al. | A fast DLLME-LC-MS/MS method for risperidone and its metabolite 9-hydroxyrisperidone determination in plasma samples for therapeutic drug monitoring of patients | |
| Gu et al. | Rapid LC–MS/MS profiling of protein amino acids and metabolically related compounds for large-scale assessment of metabolic phenotypes | |
| CN117705995A (zh) | 一种氟比洛芬有关物质的分析方法 | |
| Wang et al. | Determination of spectinomycin hydrochloride and its related substances by HPLC–ELSD and HPLC–MSn | |
| CN114544785A (zh) | 一种氟比洛芬及其杂质的检测方法 | |
| CN105784854A (zh) | 一种检测牛磺熊去氧胆酸中有关物质的方法 | |
| CN114324642B (zh) | 一种氢溴酸右美沙芬有关物质的测定方法 | |
| CN114295746A (zh) | 一种匹伐他汀钙的分析检测方法 | |
| CN115047089A (zh) | 2-乙烯基吡啶中对叔丁基邻苯二酚的检测方法 | |
| CN113820417A (zh) | 一种分离测定吡罗昔康及其杂质的方法 | |
| Arnipalli et al. | New enantioselective liquid chromatography method development and validation of dipeptidyl peptidase IV inhibitors using a macrocyclic glycopeptide (vancomycin) chiral stationary phase under polar ionic mode condition | |
| Khalil et al. | Highly sensitive LC method with automated co-sense system and fluorescence detection for determination of sertraline in human plasma | |
| CN116297908B (zh) | 吲哚布芬异构体杂质的分析方法 | |
| Emara | Determination of methotrexate in pharmaceutical formulations by flow injection analysis exploiting the reaction with potassium permanganate | |
| CN111044636A (zh) | 米卡芬净含量的分析方法 | |
| Prasanna et al. | Validation of a sensitive ion chromatography method for determination of monoethylsulfate in Indinavir sulfate drug substance | |
| CN108226340A (zh) | 一种分离测定双氟米松及其6β双氟米松和16β双氟米松的方法 | |
| Russo et al. | High-throughput and reliable assessments of the ionization constant of monoprotic organic acids through an arginine based mixed mode HPLC | |
| CN111122742B (zh) | 一种待测样品中二巯基聚乙二醇残留量的检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |