CN117683008A - 一种倍半萜类化合物及其制备方法与应用 - Google Patents
一种倍半萜类化合物及其制备方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117683008A CN117683008A CN202311650270.2A CN202311650270A CN117683008A CN 117683008 A CN117683008 A CN 117683008A CN 202311650270 A CN202311650270 A CN 202311650270A CN 117683008 A CN117683008 A CN 117683008A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- rake
- fungus
- mycelium
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 claims abstract description 37
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 229930004725 sesquiterpene Natural products 0.000 claims abstract description 14
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 12
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 11
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims abstract description 10
- -1 sesquiterpene compound Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 8
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000004262 preparative liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 241000222344 Irpex lacteus Species 0.000 claims abstract description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims abstract description 5
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims abstract description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 5
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 claims description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 3
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 3
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 2
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims 3
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 claims 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 claims 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 claims 1
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 claims 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 11
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 abstract description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract description 5
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 abstract description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 abstract description 5
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 abstract description 4
- 150000004354 sesquiterpene derivatives Chemical class 0.000 abstract description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 abstract description 3
- PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N Monacolin X Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 2
- PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N lovastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N 0.000 abstract description 2
- 229960004844 lovastatin Drugs 0.000 abstract description 2
- QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N lovastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C21 QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 4
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 208000006575 hypertriglyceridemia Diseases 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 108010004103 Chylomicrons Proteins 0.000 description 1
- 208000035762 Disorder of lipid metabolism Diseases 0.000 description 1
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- HAVJATCHLFRDHY-UHFFFAOYSA-N Harringtonine Natural products C1=C2CCN3CCCC43C=C(OC)C(OC(=O)C(O)(CCC(C)(C)O)CC(=O)OC)C4C2=CC2=C1OCO2 HAVJATCHLFRDHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 241000222341 Polyporaceae Species 0.000 description 1
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 1
- 108010069201 VLDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- ABRVLXLNVJHDRQ-UHFFFAOYSA-N [2-pyridin-3-yl-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl]methanamine Chemical compound FC(C1=CC(=CC(=N1)C=1C=NC=CC=1)CN)(F)F ABRVLXLNVJHDRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- XNZFUKOVJVOLPE-UHFFFAOYSA-N furan;pyridine Chemical class C=1C=COC=1.C1=CC=NC=C1 XNZFUKOVJVOLPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HAVJATCHLFRDHY-JZTSUELASA-N harringtonine Chemical compound C1=C2CCN3CCC[C@]43C=C(OC)[C@@H](OC(=O)[C@](O)(CCC(C)(C)O)CC(=O)OC)[C@@H]4C2=CC2=C1OCO2 HAVJATCHLFRDHY-JZTSUELASA-N 0.000 description 1
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000002114 high-resolution electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- HYFHYPWGAURHIV-UHFFFAOYSA-N homoharringtonine Natural products C1=C2CCN3CCCC43C=C(OC)C(OC(=O)C(O)(CCCC(C)(C)O)CC(=O)OC)C4C2=CC2=C1OCO2 HYFHYPWGAURHIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 125000003473 lipid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种倍半萜类化合物及其制备方法与应用。本发明提供的倍半萜类化合物来自于白耙齿菌(Irpex lacteus)的次生代谢产物，经核磁共振氢谱、碳谱和高分辨质谱确定了其化学结构，其化学名称为：((6S,6aS,8S,9aR,Z)‑6,8‑dimethyl‑3‑oxo‑1,3,4,5,6,6a,7,8,9,9a‑decahydroazuleno[4,5‑c]furan‑8‑yl)methyl acetate，化学结构如下所示：
Description
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种倍半萜类化合物及其制备方法与应用。
技术背景
白耙齿菌(Irpex lacteus)，又名白囊耙齿菌、白囊孔菌，属担子菌门，伞菌纲，多孔菌目，皱孔菌科，耙齿菌属。白耙齿菌中含有多样的次级代谢产物，其中包括萜类、生物碱、糖类、呋喃吡啶类衍生物、脂肪酸类等化合物；尤其，白耙齿菌次生代谢产物中含有大量的倍半萜类化合物，且具有较好的降脂活性。
高血脂症是一种常见的脂质代谢性紊乱疾病，是由过量的血浆脂质和脂质蛋白组成如总胆固醇、甘油三酯、乳糜微粒、低密度脂蛋白胆固醇和极低密度脂蛋白胆固醇的过度累积而导致的，脂质循环水平中高密度脂蛋白胆固醇的降低也是造成高血脂症的原因。
基于白耙齿菌的次生代谢产物多样性和良好的生物活性，可以从白耙齿菌的发酵液中得到结构新颖、降脂活性更好的化合物。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种倍半萜类化合物及其制备方法与应用，具体是从白耙齿菌的发酵液中分离得到新的倍半萜类化合物及其在降血脂方面的用途。
为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：
一方面，一种倍半萜类化合物，其为化合物1，化合物1的化学结构式如下所示：
另一方面，一种上述化合物1的制备方法，包括如下步骤：
挑取白耙齿菌(Irpex lacteus)亲代菌株平板，选取菌丝体均匀清楚无明显染菌的部分，放置于PDA琼脂平板。接种后将接有菌丝体的子代平板置于恒温培养箱中，28℃培养7天后观察菌株生长状态。菌丝体清晰，无异色、异味后。
取上述活化的菌丝，接种于真菌二号液体培养基中，室温静置培养25天。
发酵结束后将菌丝体破碎后与发酵液合并，并用2倍体积的乙酸乙酯萃取3-5次，将萃取液减压浓缩后得到白耙齿菌粗提物。
采用不同比例的石油醚-乙酸乙酯洗脱体系对白耙齿菌粗提物进行柱色谱分离；石油醚与乙酸乙酯体积比为4:1的混合溶剂洗脱部位为馏分F4。
采用半制备液相色谱法对馏分F4的成分进行进一步的分离制备。在半制备液相色谱条件为检测波长为220nm，流速为4mL/min，乙腈与水的体积比为1:1的混合液作为流动相的条件下，分离制备得到化合物1。
对化合物1经过核磁共振波谱，高分辨质谱鉴定，确定化合物1为一种倍半萜类化合物，其化学结构式为：
化学名称为：((6S,6aS,8S,9aR,Z)-6,8-dimethyl-3-oxo-1,3,4,5,6,6a,7,8,9,9a-decahydroazuleno[4,5-c]furan-8-yl)methyl acetate
经过数据库比对，确定化合物1为一个新的倍半萜类化合物，系首次从白耙齿菌提取物中分离到的化合物，到目前为止未见有关于化合物1的报道。
为发掘化合物1的药用价值，发明人研究发现化合物1在高血脂、高甘油三酯(TG)治疗、预防的药物和保健品方面的应用。
降脂活性实验证明，与模型组相比，阳性药组和本发明所述化合物1的高、中、低剂量组均可极显著降低TG的含量(P＜0.01)，且化合物1的高剂量组和中剂量组降低TG效果优于阳性药组。具有降低高脂HEPG2细胞模型中的TG含量的作用。因此，本发明的倍半萜类化合物在高血脂、高甘油三酯治疗、预防药物/保健品方面极具开发潜力。
附图说明
图1是本发明化合物1的核磁共振氢谱图(1H-NMR)。
图2是本发明化合物1的核磁共振碳谱图(13C-NMR)。
图3是本发明化合物1的高分辨质谱谱图(HRMS)。
具体实施方式
以下实施例中，是为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。
实施例1
一、一种倍半萜化合物1的制备
提供一种倍半萜化合物1的制备方法，包括以下步骤：
挑取白耙齿菌(Irpex lacteus)亲代菌株平板，选取菌丝体均匀清楚无明显染菌的部分，放置于PDA琼脂平板。接种后将接有菌丝体的子代平板置于恒温培养箱中，28℃培养7天后观察菌株生长状态。菌丝体清晰，无异色、异味后。
取上述活化的菌丝，接种于真菌二号液体培养基中，室温静置培养25天。
发酵结束后将菌丝体破碎后与发酵液合并，并用2倍体积的乙酸乙酯萃取3-5次，将萃取液减压浓缩后得到次级代谢产物粗提物。
采用柱层析方法，通过如下的梯度洗脱程序对白耙齿菌粗提物进行柱色谱分离，即依次采用体积比20:1，10:1，5:1，4:1，3:1，1:1，1:3，0:1的石油醚-乙酸乙酯混合液进行洗脱。石油醚-乙酸乙酯体积比为4:1的混合溶剂洗脱部位为馏分F4。
采用半制备色谱柱对馏分F4进行分离，得到化合物1。半制备液相色谱制备化合物1的制备条件为检测波长为220nm，流速为4mL/min，乙腈与水的体积比为1:1的混合液作为流动相。
二、化合物1的结构确定
提供一种倍半萜化合物1的结构表征方法。
该化合物1为白色片状晶体。
称取化合物1约3mg，用Chloroform-d溶解，过滤至核磁管中，利用核磁共振技术进行氢谱和碳谱检测；核磁共振1H NMR(图1)和13C NMR(图2)数据(400MHz，Chloroform-d)见表1。
表1化合物1的1H NMR和13C NMR数据
利用高分辨质谱技术确定化合物1的分子质量。化合物的高分辨质谱(图3)：HR-ESI-MS(m/z
293.17456[M+H]+)。
化合物1的分子式为：C17H2404，化合物1的化学结构式为：
其化学名称为：((6S,6aS,8S,9aR,Z)-6,8-dimethyl-3-oxo-1,3,4,5,6,6a,7,8,9,9a-decahydroazuleno[4,5-c]furan-8-yl)methyl acetate
实施例2
化合物1的降血脂、降甘油三酯活性测定。
1、实验方法
1.1细胞培养
将生长状态良好的HepG2细胞置于37℃、5％CO2培养箱中进行培养，所用培养基为含10％FBS、1％青霉素-链霉素双抗的DMEM培养基。
1.2高脂细胞模型的建立及体外降脂试验
取生长良好且贴壁生长至细胞瓶80％-90％的HepG2细胞，加入适量胰酶进行消化，加入5mL培养基终止消化，然后用移液枪吹打细胞培养瓶至细胞均匀分散于细胞培养液后，将细胞均匀种入6孔板中，每孔2mL。
将上述6孔板置于细胞培养箱中，培养24h后弃旧培养基，正常组只加完全培养基培养，其余各组在10％DMEM完全培养基中均加入油酸诱导细胞，同时阳性药组加入阳性药洛伐他汀(药物浓度为24.7μmol/L)，给药组高、中、低剂量(药物浓度分别为100、50、25μmol/L)的化合物1与培养基混合均匀，孵育24h后弃旧培养基，加入200μLRIPA裂解液，冰上裂解10min后将细胞裂解产物转移至1.5mL离心管中，超声破碎2-3次，每次5s，离心5min(12000r/min)，取上清液测定TG含量。
TG含量测定：设置空白组、校准组、样品组，每个组三个复孔，每孔加入不同工作液250μL，空白孔加入2.5μL蒸馏水，校准孔加入等量的校准品，样品孔加入等量的不同组样品，混匀，37℃孵育10min，测定510nm处吸光度值计算TG含量。
2、实验结果
表1化合物1对油酸诱导的HepG2细胞TG含量的影响
注：与正常组相比，#p<0.05，##p<0.01；与模型组相比，*p＜0.05，**p＜0.01；
化合物1对油酸诱导HepG2细胞TG含量影响的结果表明：化合物1高、中、低各剂量组的TG含量分别降低了42.62％、34.43％和24.59％，表明化合物1具有较好地降低油酸诱导的HepG2细胞的TG含量作用。
综合上述结果可知，从白耙齿菌提取物中分离到的化合物1为一种倍半萜化合物，是一种新化合物，属于纯天然有效成分，其具有良好的降TG活性，可以作为新型抗高血脂，抗高甘油三酯症的用药和保健品等。
Claims (4)
1.一种倍半萜类化合物，其特征是，其为化合物1，化合物1的化学结构式如下所示：
其化学名称为：((6S,6aS,8S,9aR,Z)-6,8-dimethyl-3-oxo-1,3,4,5,6,6a,7,8,9,9a-decahydroazuleno[4,5-c]furan-8-yl)methyl acetate。
2.权利要求1所述的一种倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于是采用如下步骤制备：
<1>菌株活化：挑取白耙齿菌(Irpex lacteus)亲代菌株平板，选取菌丝体均匀清楚无明显染菌的部分，放置于PDA琼脂平板。接种后将接有菌丝体的子代平板置于恒温培养箱中，于28℃培养7天后观察菌株生长状态。菌丝体清晰，无异色、异味。
<2>菌株发酵：取上述活化的菌丝，接种于真菌二号液体培养基中，室温静置培养25天。真菌二号培养基配方为：麦芽糖20g，味精10g，磷酸二氢钾0.5g，硫酸镁0.3g，葡萄糖10g，酵母膏3g，玉米粉1g，甘露醇20g，蒸馏水1000mL。
<3>白耙齿菌粗提物的制备：白耙齿菌发酵结束后将菌丝体破碎后与发酵液合并，用2倍体积的乙酸乙酯萃取3-5次，将萃取液减压浓缩后得到白耙齿菌的粗提物。
<4>白耙齿菌粗提物的柱色谱分离：采用柱色谱方法，通过如下的梯度洗脱程序对白耙齿菌粗提物进行柱色谱分离，即依次采用体积比20:1，10:1，5:1，4:1，3:1，1:1，1:3，0:1的石油醚-乙酸乙酯混合液进行洗脱。石油醚-乙酸乙酯体积比为4:1的混合溶剂洗脱部位为馏分F4。
<5>半制备液相色谱分离制备化合物：采用半制备液相色谱对馏分F4的化合物进行分离，得到化合物1。化合物1的制备采用乙腈与水的体积比为1:1的混合液作为流动相。
3.权利要求1所述的一种倍半萜类化合物，其特征在于：所述化合物1是采用下列方法制备所得。即对权利要求2所述馏分F4经半制备液相色谱制备所得。半制备液相色谱的制备条件为检测波长为220nm，流速为4mL/min，乙腈与水的体积比为1:1的混合液作为流动相制备所得化合物1。
4.权利要求1所述的一种倍半萜类化合物，其特征在于：所述化合物1在制备降血脂、降甘油三酯治疗、预防药物/保健品方面的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311650270.2A CN117683008A (zh) | 2023-12-05 | 2023-12-05 | 一种倍半萜类化合物及其制备方法与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311650270.2A CN117683008A (zh) | 2023-12-05 | 2023-12-05 | 一种倍半萜类化合物及其制备方法与应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117683008A true CN117683008A (zh) | 2024-03-12 |
Family
ID=90129477
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311650270.2A Pending CN117683008A (zh) | 2023-12-05 | 2023-12-05 | 一种倍半萜类化合物及其制备方法与应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117683008A (zh) |
-
2023
- 2023-12-05 CN CN202311650270.2A patent/CN117683008A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107353274B (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸i及制备抗人食管癌药物的应用 | |
| CN107298672B (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸i在制备抗人结肠癌药物的应用 | |
| CN111704544B (zh) | 一种半日花烷型二萜类化合物及其分离方法和应用 | |
| CN113754533A (zh) | 氧化半日花烷型二萜类化合物及其分离方法和应用 | |
| CN107298670B (zh) | 源于草酸青霉黑麦酮酸h制备抗人口腔表皮样癌药物应用 | |
| CN109749941B (zh) | 蝉拟青霉发酵培养基、蝉拟青霉发酵制备麦角甾醇的方法 | |
| CN117164543A (zh) | 具有神经保护功效的化合物及其制备方法和应用 | |
| CN110407792B (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸类化合物Secalonic acid J及制备方法 | |
| CN109985044B (zh) | 白桦醇及其衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN112358516A (zh) | 一种香叶木素(4-o-甲基)葡萄糖苷类化合物在制备降脂药物中的应用 | |
| CN117683008A (zh) | 一种倍半萜类化合物及其制备方法与应用 | |
| CN108558606B (zh) | 一种二倍半萜类化合物peniroquesines及其制备方法和应用 | |
| CN114478685B (zh) | 一种吲哚二萜类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN109134416B (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸h在制备人子宫颈癌药物的应用 | |
| CN114409627B (zh) | 一种抗炎化合物Dalditone A及其制备方法和应用 | |
| CN111233694B (zh) | 具有降血脂作用的线性聚酮类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN110204589B (zh) | 青葙子有效成分、提取方法及其在制备神经保护药物方面的应用 | |
| CN109985043B (zh) | 白桦醇及其衍生物在具有抗肝纤维化作用药物中的应用 | |
| CN110527631B (zh) | 海洋真菌hk1-22来源的不饱和脂肪酸类化合物、制备方法及其应用 | |
| CN110407797B (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸类化合物Secalonic acid K及制备方法 | |
| CN113004237A (zh) | 一种螺环化合物及其制备方法和应用 | |
| CN108586435B (zh) | Echinulin的制备方法 | |
| CN109134417B (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸i及抗人子宫颈癌药物的应用 | |
| CN115385878B (zh) | 一种天然活性化合物拟诺呋喃及其制备方法、应用 | |
| CN114409625B (zh) | 一种具有神经保护活性的炭角酮及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication |