CN117678601B - 苯甲地那铵在防治植物细菌性病害中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种苯甲地那铵的新用途，其能够防治由病原细菌引起的植物病害并可促进植物生长。
Description
技术领域
本发明涉及苯甲地那铵的用途，具体涉及一种苯甲地那铵在防治细菌引起的植物病害和/或促进植物生长中的应用。
背景技术
农作物细菌性病害是我国农业生产中的常发性病害，其危害程度仅次于真菌，是第二大病原物。由于细菌性病害传播方式多样，细菌性病害防治困难，加之高效种植区多实行的连作制度，细菌性病害危害普遍、防治难度日益加大。
化学防治方法是目前防治细菌性病害应用范围最广的防治方法。常用的化学药剂主要有有机铜类、无机铜类、抗生素类。有机铜类杀菌剂如龙克均（噻菌铜）、喹啉铜、噻森铜等等，无机铜制剂如硫酸铜、王铜、氢氧化铜、氧化亚铜。总的讲，能够有效防治细菌性病害的化学药剂种类仍然偏少，部分细菌性病害只有几种杀菌剂可供选择，甚至部分细菌性病害缺乏有效的杀菌剂。国内用于防治细菌性病害的药剂登记数量还很有限，目前国内登记用于防治细菌性病害的药剂数量仅280个。
但有机铜类、无机铜类等铜制剂的应用受限。除了不能与强酸、强碱性物质混用外，一般情况下也不能与含“金属元素”的农药（如代森锰锌、代森锌、福美锌等）、含“金属元素”的叶面肥（如硫酸锌、硫酸镁、钙肥等）混用，因金属离子会与铜制剂中的铜离子发生反应，引起药效改变或导致药害发生；与其他叶面肥，如磷酸二氢钾、海藻肥、氨基酸类叶面肥等混用时，最好现混现用，否则容易产生絮凝、沉淀、分层等现象。
未来作物细菌性病害的发生面积可能继续增加，所以研究专门用于防治细菌性病害药剂的前景看好。
苯甲地那铵，又名苦精，化学名称：苯甲酸[2-[(2，6-二甲基苯基)氨基]-2-氧代乙基]-N，N-二乙基苄基铵；英文名称：Denatonium Benzoate、Benzenemethanaminium ,N-[2-[( 2 ,6-dimethylphenyl )amino]-2-oxoethyl]-N,N-diethyl- ,benzoate；CAS号：3734-33- 6；分子式：C28H34N2O3；分子量：446.5882；分子结构式为：
白色结晶性粉末，熔点为164-168℃，无嗅，有非常强烈的苦味，极易溶于水、乙醇、乙二醇等，其水溶液呈中性。
苯甲地那铵通常被用作厌恶剂，以避免人们误食其它有毒却无味的物质。例如添加到工业酒精、与普通酒类口感相似的乙二醇或甲醇、防冻剂、油漆、洁厕剂、动物驱散剂、液体肥皂以及香波当中，除此之外还会添加到特殊的指甲抛光剂中，用于避免儿童咬指甲的不良习惯，以及驱逐大型野兽的驱逐剂。
中国专利CN 105746516 A提供了苯甲地那铵在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害的杀菌剂中的用途，主要用于植物病原菌为半知菌亚门真菌、子囊菌亚门真菌和鞭毛菌亚门真菌的病害防控。
发明内容
本发明的目的是提供一种苯甲地那铵的新用途，其能够防治由病原细菌引起的植物病害并可促进植物生长。
本发明采用如下技术方案：
一种苯甲地那铵在防治细菌引起的植物病害中的应用。
一种杀菌剂，在所述杀菌剂中，苯甲地那铵的浓度为3~5mg/mL。
一种上述杀菌剂在促进植物生长中的应用。
一种肥料，在所述肥料中，苯甲地那铵的浓度为3~5mg/mL。
一种苯甲地那铵在防治细菌引起的植物病害和促进植物生长中的应用。
一种农用制剂，所述制剂中，苯甲地那铵的浓度为3~5mg/mL。
本发明的有益效果在于：本发明提出了苯甲地那铵能够防治由病原细菌引起的植物病害并具有促进植物生长中的应用，克服了现有细菌防控药剂有机铜类、无机铜类等铜制剂在应用上的限制，可以替代铜制剂实现对细菌性病害的有效防控，对白菜软腐病的防治效果能达到89.28%，并且苯甲地那铵应用在植物上，对植物生长还具有促生作用。
附图说明
图1 为苯甲地那铵200倍稀释液对黄瓜苗灌根试验效果。
图2 为苯甲地那铵300倍稀释液对黄瓜苗灌根试验效果。
图3 为只用清水灌根的黄瓜苗空白对照。
图4 为大白菜软腐病防控及促生试验空白对照。
图5 为苯甲地那铵对大白菜软腐病防控及促生试验效果。
具体实施方式
实施例1 苯甲地那铵对几种植物病原细菌抑制效果的测定试验
（1）试验材料
苯甲地那铵为从Sigma公司购买的成品，分析纯试剂，含量≥98%。
本试验中所用的植物病原菌为本实验室-18℃甘油保存的菌种，采用的固体培养基为NA培养基，液体培养基为NB培养基。
NA培养基配方：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，用1mol/L氢氧化钠调整pH至7.2~7.5；
NB培养基配方：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，蒸馏水1000mL，用1mol/L氢氧化钠调整pH至7.2~7.5。
（2）试验方法
采用浑浊度法测定细菌生长量。
将实验室-18℃甘油保存的菌种在NA固体培养基上进行活化，将活化好的菌种用无菌水稀释为活菌数1×107个/mL浓度的菌悬液，备用。
将NB培养基分别配制为含1 mg/mL、2 mg/mL、3 mg/mL、4 mg/mL、5 mg/mL苯甲地那铵的含药培养基，250mL三角瓶装入含药培养基100mL，121℃灭菌20min，冷却，备用。
每种浓度的三角瓶中分别接种2mL菌种悬浮液，同时以不添加苯甲地那铵溶液的NB培养基样品作为空白对照，置于培养箱中28℃条件下，180r/min培养48 h，测量其OD600。每个处理3次重复。
抑菌率（%）=（空白吸光度值－处理吸光度值）/空白吸光度值×100。
（3）实验室测定的苯甲地那铵对几种细菌性植物病原生长量的抑制效果
表1 不同浓度苯甲地那铵对黄瓜细菌性角斑病病原菌抑菌率
。
表2 不同浓度苯甲地那铵对萝卜黑腐病病原菌抑菌率
。
表3 不同浓度苯甲地那铵对大白菜软腐病病原菌抑菌率
。
表1~表3说明：苯甲地那铵含量为3.0mg/mL以上时，对黄瓜细菌性角斑病、萝卜黑腐病、大白菜软腐病三种病害的病原细菌均具有较好的抑制作用，苯甲地那铵含量为5.0mg/mL时，抑菌率达92.7%以上。
实施例2 苯甲地那铵对植物生长的促生试验
试验地点设在秦皇岛市昌黎县昌黎镇某果蔬种植专业合作社大棚黄瓜种植基地。试验设3个处理，3次重复，随机区组排列。在黄瓜苗移栽15天后，分别使用浓度为98%苯甲地那铵200倍稀释液（即浓度为4.90mg/mL）、300倍稀释液（即浓度为3.27mg/mL）对黄瓜进行灌根处理，每株黄瓜灌根量为50mL，同时以不添加苯甲地那铵的清水灌根作为空白对照。每个处理3畦，每畦畦宽80cm、畦长10m，每畦种植2行，株距0.4m，行距0.5m。日常管理。30天后对黄瓜的株高、叶片数、坐果数进行调查。
表4 苯甲地那铵对黄瓜促生效果
。
使用苯甲地那铵200倍稀释液、300倍稀释液灌根黄瓜株高、叶片数和坐果数均高于对照，说明苯甲地那铵能促进黄瓜的生长，苯甲地那铵200倍稀释液促生效果最好，应用效果见图1~图3。
实施例3苯甲地那铵用于大白菜软腐病的防控及促生试验
供试病菌：大白菜软腐病菌分离自河北省昌黎县一种植基地的大白菜病根，平板纯化，将纯化的菌种接种到试管斜面培养基上，28℃培养24h后置于冰箱中保存，备用。
试验步骤：
（1）菌悬液制备：将大白菜软腐病菌在NA固体平板上活化。28℃培养箱中进行培养后挑取单菌落转接到NB液体培养基，置于28℃、180r/min摇床上培养36h后制备成菌悬液待用。
（2）药剂配置：用蒸馏水将98%苯甲地那铵溶解，分别配置成200倍稀释液、300倍稀释液2个浓度梯度的药剂。
（3）试验设计：试验设4个处理，每个处理3次重复，每个重复10盆，以不加药剂的等量清水作空白对照，以33.5 %喹啉铜悬浮剂800倍液作杀菌剂对照。苯甲地那铵200倍稀释液、苯甲地那铵300倍稀释液2个浓度梯度的药剂灌根为2个处理。
（4）接种与培养：移栽2天后对白菜植株采用伤根法进行软腐病菌接种。接菌后，将白菜苗放入相对湿度90%，温度26~28℃保湿柜中保湿培养24h，之后转入正常温室培养。
盆栽白菜长至五叶一心时，将步骤（2）所配置的2个浓度梯度的药剂灌根于白菜根部，每株50 mL；同样，盆栽白菜长至五叶一心时，以33.5 %喹啉铜悬浮剂800倍液灌根，每株50 mL。空白对照处理，可在盆栽白菜长至五叶一心时，以等量清水灌根。
（5）结果调查：待不加任何药剂的空白对照充分发病，测量白菜单株重量，计算病情指数与防治效果。
白菜软腐病分级标准：0级：无病；1级：植株下部1～2片叶有少量病斑；2级：植株下部3片或3片以上的叶有病斑，其他感染部位稍重；3级：叶片全部被感染，其他感染部位较重；4级：叶片全部感染，植株整体倾斜，叶片下垂不能恢复正常，但仍存活；5级：全株死亡倒地。
计算方法：
发病率（%）＝总发病株数/总调查株数×100
病情指数（%）＝∑(发病株数×该发病株级值)/(总调查株数×最高级值)×100
防治效果（%）＝(对照区病情指数—处理区病情指数)/对照区病情指数×100
表5 苯甲地那铵对白菜的促生效果及软腐病的防治效果
。
由表5可见，使用苯甲地那铵200倍稀释液灌根白菜平均单株重量和防效最好，单株平均增产17.02%，对白菜软腐病防效高达89.28%；其次为苯甲地那铵300倍稀释液灌根，白菜平均单株重量和防效与33.5%喹啉铜悬浮剂800倍液相当，三个处理均好于对照，说明苯甲地那铵既能防治白菜软腐病，又能促进白菜的生长，又可实现对铜制剂的完全替代，应用效果见图4、图5。
Claims (1)
1.一种苯甲地那铵在防治细菌引起的植物病害中的应用；所述植物病害为黄瓜细菌性角斑病、萝卜黑腐病、大白菜软腐病。
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