CN112998017B

CN112998017B - 含春雷霉素和噻唑锌组合物用于防治铁皮石斛软腐病的用途

Info

Publication number: CN112998017B
Application number: CN201911332164.3A
Authority: CN
Inventors: 徐沛东; 李俊; 魏方林; 毛晨蕾
Original assignee: Jiangsu Xinnong Chemical Co ltd; Zhejiang Xinnong Chemical Co ltd
Current assignee: Jiangsu Xinnong Chemical Co ltd; Zhejiang Xinnong Chemical Co ltd
Priority date: 2019-12-21
Filing date: 2019-12-21
Publication date: 2022-06-17
Anticipated expiration: 2039-12-21
Also published as: CN112998017A

Abstract

本发明公开了含春雷霉素和噻唑锌的组合物(春雷霉素和噻唑锌的重量比为1:7)用于防治铁皮石斛软腐病，同时促进铁皮石斛植株生长、提高铁皮石斛品质的用途，以及本发明还公开了一种防治铁皮石斛软腐病，同时促进铁皮石斛生长、提高铁皮石斛品质的方法。所述促进铁皮石斛生长是通过增加芽数，提高株高，增加最长芽叶片数，促进叶长和/或提高茎秆粗壮度来获得的。所述促进提高铁皮石斛品质是通过提高铁皮石斛多糖含量来获得的。

Description

含春雷霉素和噻唑锌组合物用于防治铁皮石斛软腐病的用途

技术领域

本发明属于农业技术领域，具体涉及含春雷霉素和噻唑锌的组合物用于防治铁皮石斛软腐病，同时促进铁皮石斛植株生长、提高铁皮石斛品质的用途和一种铁皮石斛软腐病的综合防治方法。

背景技术

铁皮石斛(Dendrobium officinale)属兰科，表皮呈铁绿色，是多年生附生草本植物，国家二级保护植物濒危中药材。目前铁皮石斛的野生资源极少，已濒临灭绝，主要是因其自然繁殖率低和人们的长期采挖。现在市场上的铁皮石斛大部分是人工栽培的，育苗是铁皮石斛栽培的关键环节和首要问题。其难以解决的主要原因在于铁皮石斛喜欢阴湿的环境，营养丰富的栽培基质，而这对病害的发生同样也是极为有利的，在铁皮石斛育苗乃至整个种植期过程中，其病害的发生是影响铁皮石斛成活率、产量和品质的主要因素。

铁皮石斛软腐病是铁皮石斛种植中的一种常见病害，病原菌为欧氏杆菌(Erwiniacarotovora subsp.carotovora)。病原菌多从幼苗根茎处侵染，也可从裂口或伤口处浸染。病菌在病残组织及带菌基质及昆虫体内越冬，借雨水、灌溉水和昆虫传播。该病发病普遍，面积较大，往往一小片区内每株均受害。温度20～30℃，相对湿度95％以上易造成流行。软腐病主要传播介质为雨水，流行高峰期在4—7月，未经消毒的基质往往易引发该病害发生。

目前铁皮石斛软腐病的药剂防治措施有两种：栽培基质消毒和化学药剂防治。栽培基质消毒主要采用甲基托布津(即甲基硫菌灵)、高锰酸钾溶液或多菌灵对基质进行浸泡或喷雾处理，化学药剂防治主要采用可杀得101、波尔多液或农用硫酸链霉素等喷雾处理。

目前铁皮石斛软腐病的防治措施存在一些问题，例如：1)铁皮石斛软腐病为土传病害，多在茎基部危害，现常用铜制剂类杀细菌剂，因内吸性差或无内吸而导致效果较差，且存在作物安全性问题，易产生药害；2)铁皮石斛为珍贵中药材，在选择药剂时要特别注意选择安全环保的药剂，随着农用链霉素因使用安全性问题已被禁用，导致铁皮石斛软腐病可用药剂减少，而生物菌剂起效较慢；3)铁皮石斛常感染多种真菌性病害和软腐病混发病害，现有杀菌剂可混性较差，分开防治费时费力。

因此，寻找一种切实可行的铁皮石斛软腐病的防治方法，是防治铁皮石斛软腐病的重要途径。

发明内容

采用春雷霉素和噻唑锌组合物防治铁皮石斛软腐病，可以实现真菌、细菌兼防，且由于噻唑锌、春雷霉素是两种内吸性强、低残留的绿色农药，可用于灌根、喷淋等施药方式，针对软腐病之类的土传病害效果优异，能够杀灭土壤病原菌降低病原基数，又可以内吸向上传导保护植株。特定重量比的春雷霉素和噻唑锌组合物除了能够有效防治铁皮石斛软腐病之外，还能够促进铁皮石斛生长，同时提高铁皮石斛品质。

因此，本发明提供了含春雷霉素和噻唑锌的组合物用于防治铁皮石斛软腐病，同时促进铁皮石斛生长、提高铁皮石斛品质的用途，其特征在于组合物中春雷霉素和噻唑锌的重量比为1:7。

优选的，上述用途中，所述促进铁皮石斛生长是通过增加芽数，提高株高，增加最长芽叶片数，促进叶长和/或提高茎秆粗壮度来获得的。所述提高铁皮石斛品质是通过提高铁皮石斛多糖含量来获得的

优选的，上述用途中，所使用的含春雷霉素和噻唑锌的组合物可制备为常规的制剂，例如：制备为固体制剂、可分散固体制剂、分散液体制剂、悬浮制剂、多相制剂、种子处理固体制剂、种子处理液体制剂等。

优选的，上述用途中，所述组合物的剂型为水分散粒剂、粉剂、可湿性粉剂、颗粒剂、膏剂、悬浮剂、可分散油悬浮剂、微囊悬浮剂、微囊悬浮-悬乳剂、种子处理可分散粉剂、种子处理悬浮剂或种子处理干粉剂，尤其优选的，所述组合物的剂型为悬浮剂、水分散粒剂、可分散油悬浮剂或可湿性粉剂。

上述用途中，所述农药剂型名称及代码，参见中华人民共和国国家标准《农药剂型名称及代码》(GB/T 19378-2017)，其内容通过引用整体并入本文。

优选的，上述用途中，所述组合物中有效成分春雷霉素和噻唑锌的总重量占组合物总重量的5-60％；进一步优选的，所述组合物中有效成分春雷霉素和噻唑锌的总重量占组合物总重量的10-50％。

优选的，上述用途中，所述组合物为40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂。

另外，本发明还提供了一种防治铁皮石斛软腐病，同时促进铁皮石斛植株生长、提高铁皮石斛品质的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤一、基质喷雾：种苗移栽前，使用40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂800-1000倍稀释倍数对基质进行喷雾处理，用水量为45-60升/亩；

步骤二、种苗浸根：种苗移栽前，使用40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂800-1000倍稀释倍数对种苗进行浸根处理30-90分钟；

步骤三、第一次茎叶喷雾：移栽后10-15d，使用40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂800-1000 倍稀释倍数进行茎叶喷雾，间隔7d，连用4次；

步骤四、第二次茎叶喷雾：7-8月软腐病高发期，使用40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂 600-800倍稀释倍数进行茎叶喷雾，间隔5-7d，连用4次。

以上步骤一到步骤四中所使用的40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂，其中有效成分春雷霉素和噻唑锌的重量比均为1:7。

优选的，上述方法中，其特征在于，步骤一中用水量优选为45升/亩。

优选的，上述方法中，其特征在于，步骤二中种苗移栽前使用40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂800-1000倍稀释倍数对种苗进行浸根处理60-90分钟，优选的，浸根处理为60分钟。

本发明所使用的春雷霉素和噻唑锌组合物的使用方法包括对要处理的植株或其生长场所、种子、材料，以混合施用总有效剂量的春雷霉素和噻唑锌活性组合物，可在病菌、病毒、害虫侵染材料、植物或种子之前或之后施用。

本文所用术语“生长场所”包括生长处理植物、或播种栽培植物种子的田地，或种子埋置于土壤中的场所。术语“种子”包括所有的植物繁殖材料如苗木、果实、种子、砧木、接穗、插条、芽体、块根、块茎、鳞茎、球茎、花粉或植物培养材料。

本发明所述的组合物及其制剂可以以其本身浓缩物形式或以制剂形式使用，根据靶标病害的性质不同采用喷雾、喷淋、浇灌、弥雾、浸根、撒施或涂刷方法，其施用总有效活性杀菌量随天气条件、作物状态或施用方法而变化。

本发明的有益效果是使用含春雷霉素和噻唑锌的组合物，能够提高铁皮石斛软腐病防治效果，同时能够促进植株生长、提高品质，例如显著增加芽数，提高株高，增加最长芽叶片数，促进叶长和提高茎秆粗壮度。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加简洁明了，本发明将用以下具体实施例进行阐明，但本发明绝非仅限于这些实施例。以下实施例仅为本发明较优选的实施例，且仅用于阐述本发明，不能理解为对本发明范围的限制。应当指出的是，凡在本发明的实质和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

除非另作说明，本文中所用的各组分是市售可得的或现有技术中众所周知的或技术人员通过现有技术的公开内容而易于得到的。

制剂实施例

下列用语说明本发明的实施例中，杀菌化合物春雷霉素和噻唑锌以特定混合物比例构成的组合物。以下结合实施例对本发明作进一步说明，实施例中剂型的制备方法均为常规方法，本发明所述的“％”均为质量百分比。

春雷霉素和噻唑锌的组合物制剂的剂型如悬浮剂、水分散粒剂、可分散油悬浮剂、可湿性粉剂的制备例子参见如下实施例1-4。

制剂实施例1：40％噻唑锌·春雷霉素(35.0％+5.0％)悬浮剂

根据以下方法进行制备：

将活性化合物(春雷霉素和噻唑锌)、脂肪醇聚氧乙烯醚、甲基萘磺酸钠甲醛缩合物、高分子聚羧酸盐、环氧氯丙烷、丙三醇、黄原胶、有机硅消泡剂、卡松、去离子水充分混合，再投入到高剪切均质乳化剂中高速剪切粗磨和均质，再泵至砂磨机中砂磨，砂磨至一定粒径，再过滤后即得悬浮剂。

配方如下表所示：

表1、制剂实施例1配方表

成分名称	质量分数(％)
		春雷霉素	5.0
噻唑锌	35.0
		脂肪醇聚氧乙烯醚	3.0
甲基萘磺酸钠甲醛缩合物	2.0
		高分子聚羧酸盐	1.0
环氧氯丙烷	1.0
		丙三醇	3.0
黄原胶	0.1
		有机硅消泡剂	0.1
卡松	0.3
		去离子水	补足100.0

制剂实施例2：40％噻唑锌·春雷霉素(35.0％+5.0％)水分散粒剂

根据以下方法制备水分散粒剂制剂：

将活性化合物(春雷霉素和噻唑锌)、EO/PO嵌段聚醚、高分子聚羧酸盐、硫酸铵、黄原胶、氯化钠、高岭土充分混合，加水再投入到高剪切均质乳化剂中高速剪切粗磨和均质，再泵至砂磨机中砂磨，砂磨至一定粒径，再喷雾造粒成型得水分散粒剂。

配方如下表所示：

表2、制剂实施例2配方表

成分	质量分数(％)
		春雷霉素	5.0
噻唑锌	35.0
		EO/PO嵌段聚醚	2.0
高分子聚羧酸盐	5.0
		硫酸铵	8.0
黄原胶	0.5
		氯化钠	5.0
高岭土	补足100.0

制剂实施例3：40％噻唑锌·春雷霉素(35.0％+5.0％)可分散油悬浮剂

根据以下方法制备可分散油悬浮剂制剂：

将活性化合物(春雷霉素和噻唑锌)、EO/PO嵌段聚醚、丙烯酸均聚物钠盐、 YUS-EC2200、乙二醇、气相白炭黑、有机膨润土、聚醚消泡剂、油酸甲酯充分混合，投入到高剪切均质乳化机中高速剪切20分钟，再泵至砂磨机中，循环砂磨3次过滤后即得可分散油悬浮剂。

配方如下表所示：

表3、制剂实施例3配方表

制剂实施例4：40％噻唑锌·春雷霉素(35.0％+5.0％)可湿性粉剂

根据以下方法制备制剂：

将噻唑锌、春雷霉素、高分子聚羧酸盐、甲基萘磺酸钠甲醛缩合物、二异丁基萘磺酸盐、白炭黑搅拌混合均匀，再输送到气流粉碎机进行粉碎至D₉₀小于10微米，即制得可湿性粉剂。

配方如下表所示：

表4、制剂实施例4配方表

成分	质量分数(％)
		春雷霉素	5.0
噻唑锌	35.0
		高分子聚羧酸盐	3.0
甲基萘磺酸钠甲醛缩合物	1.0
		二异丁基萘磺酸盐	2.0
白炭黑	补足100

生物实施例

一、噻唑锌与春雷霉素复配制剂研发

1春雷霉素和噻唑锌复配最佳配比筛选试验

本试验参考《农药室内生物测定试验准则杀菌剂第16部分：抑制细菌生长量试验浑浊度法》。

1.1试验条件

1.1.1供试靶标

铁皮石斛软腐病菌(Erwinia carotovora)。

1.2试验设计

1.2.1试验药剂

将72.1％春雷霉素TC用无菌水稀释成系列梯度母液，95％噻唑锌TC配制成20％悬浮剂后用无菌水稀释成系列梯度母液备用。

1.2.2试验处理

将春雷霉素(A)、噻唑锌(B)以及两者的不同配比设置成系列浓度。

1.3试验方法

将铁皮石解软腐病病原菌在LA固体培养基上面进行划线，在28℃下培养直到长出单菌落。挑取单菌落至LB液体培养基中，在28℃、200rpm恒温摇床振荡培养到OD₆₀₀值0.5 左右，备用。

将春雷霉素和噻唑锌母液加入LB液体培养基中配制成系列梯度的含毒LB液体培养基 20mL，每瓶培养基内加入500μL菌液，并设置不含药含菌的处理作为空白对照，含药不含菌的处理作为药剂对照。在28℃、200rpm恒温摇床振荡培养到CK的OD₆₀₀值到0.5左右时进行测定。

1.4数据分析

1.4.1药效计算

计算不同浓度处理的防效，并用SPSS 16.0软件求出对应药剂的毒力回归方程和抑制中浓度EC₅₀及其95％置信区间。

校正OD值＝含药培养基OD值-无菌培养基OD值

1.4.2共毒系数计算

进行药剂联合毒力测定时，本试验采用孙云沛法计算混剂的共毒系数(CTC)，评价混剂的联合作用类型。

孙云沛法：根据共毒系数(CTC)来评价药剂混用的增效作用，即CTC≥120该复配剂表现增效，CTC≤80表现为拮抗，80＜CTC＜120为相加作用。共毒系数(CTC)按公式(1)、(2)、(3)计算：

式中：

ATI-----混剂实测的毒力指数；

S-----标准药剂的EC₅₀，单位为毫克每升(mg/L)；

M-----混剂的EC₅₀，单位为毫克每升(mg/L)。

TTI＝TI_A×P_A+TI_B×P_B┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈(2)

式中：

TTI-----混剂的理论毒力指数；

TIA-----A药剂的毒力指数；

PA-----A药剂在混剂中的百分含量，单位为百分率(％)；

TIB-----B药剂的毒力指数；

PB-----B药剂在混剂中的百分含量，单位为百分率(％)。

式中：

CTC-----共毒系数

ATI-----混剂实测毒力指数

TTI-----混剂理论毒力指数

1.5结果分析

按照上述杀菌剂室内活性测定方法，春雷霉素、噻唑锌及两者不同配比混配对铁皮石斛软腐病菌的室内活性测定结果如下：

表5、不同处理对铁皮石斛软腐病菌的室内活性测定结果

表6、标准药剂和不同配比毒力分析结果

根据联合毒力测定结果(表6)来看，春雷霉素与噻唑锌的比例为1:7时表现出协同增效作用，其余比例均为相加作用。因此，优选选用春雷霉素和噻唑锌的质量比为1:7为制剂的有效成分配比。

2复配制剂防治铁皮石斛软腐病田间试验

2.1试验方法

2017年于浙江省金华市铁皮石斛种植基地内开展试验，两年生铁皮石斛，软腐病菌常发。在软腐病菌发病初期进行茎叶喷雾防治，试验共设3个处理和1个清水对照，每个处理重复3次，小区面积5m²，亩用药液量45升，间隔5-7d，连续施药3次。施药前和末次药后14d调查软腐病的发病情况。调查方法：每小区采取随机5点取样法，每点调查20株，记录发病株数及发病程度。

分级方法如下：0级：全株无病；1级：茎部病斑不超过茎围1/3，个别叶片萎焉；3级：茎部病斑不超过茎围1/2，或半数一下叶片轻度凋萎，或下部少数叶片出现病斑；5级：茎部病斑超过茎围1/2，或半数一上叶片轻度凋萎；7级：茎部病斑环绕茎围，或2/3一上叶片凋萎；9级：病株全部叶片凋萎或枯死。

2.2结果分析

表7、复配制剂防治铁皮石斛软腐病田间防治效果

从表7不同处理对铁皮石斛软腐病的防治结果来看，复配制剂、春雷霉素和噻唑锌单剂均对软腐病有一定防效，其中制剂实施例1(40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂)1000倍防治效果最佳，达80％以上，且显著优于对照药剂2％春雷霉素水剂300倍、20％噻唑锌悬浮剂400 倍。

二、基质消毒试验

1试验方法

1.1试验设计

2017年于浙江省金华市婺城区安地镇仙源湖铁皮石斛种植基地内选取软腐病菌常发地块开展试验。每个处理重复3次，小区面积5m²，在铁皮石斛移栽前对种植基质进行喷雾处理后，当日进行移栽。

施药浓度处理：设置7个药剂处理和1个清水对照，7个药剂处理分别为制剂实施例1 (40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂)稀释800倍、1000倍、1200倍、3％中生菌素可湿性粉剂稀释600倍、20％噻森铜悬浮剂稀释500倍、46％氢氧化铜水分散粒剂稀释1500倍、33.5％喹啉铜悬浮剂稀释600倍，亩用药液量45升。

施药药液量处理：设置3个药剂处理和1个清水对照，3个药剂处理为制剂实施例1稀释1000倍施用药液量分别30升/亩、45升/亩、60升/亩。

1.2调查方法

待铁皮石斛移栽后15d调查软腐病发病率。每小区采取随机5点取样法，每点调查20 株，记录发病株数，并计算防效。

2试验结果

2.1不同药剂及浓度处理基质试验

表8、不同药剂及浓度处理基质试验效果

从表8结果来看，各药剂均对基质中的软腐病有杀灭效果，能够很好的预防铁皮石斛软腐病；制剂实施例1稀释800倍处理后基质后对软腐病的防效最高，其次是制剂实施例1稀释1000倍、33.5％喹啉铜悬浮剂稀释600倍。

2.2不同药液量处理基质试验

表9、不同药液量处理基质的试验结果

从表9结果来看，制剂实施例1(40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂)处理种植基质，对铁皮石斛软腐病的防治效果随药液量的增加而提升，药液量60升/亩时效果最佳，但与45升/亩无显著差异。可见为达到更好的基质消毒处理效果，需要考虑药液量，药液量过多造成浪费，药液量过少，导致使用效果可能受到影响。由本试验结果可知，制剂实施例1的基质消毒药液量45升/亩左右为宜。

三、种苗浸根试验

1试验目的

种苗浸根试验分为种苗浸根处理药剂筛选试验和不同浸根时长处理试验2个试验。种苗浸根处理药剂筛选试验的目的是为了筛选种苗浸根处理药剂及确定最佳药剂浓度，不同浸根时长处理试验的目的是为了明确药剂浸根时间对药效发挥的影响及确定最佳浸根时间。

2试验方法

2.1试验设计

2017年于浙江省金华市铁皮石斛种植基地内选取软腐病菌常发地块开展试验，种植基质未做消毒处理。设置制剂实施例1、3％中生菌素可湿性粉剂、20％噻森铜悬浮剂、72％农用链霉素可湿性粉剂、33.5％喹啉铜悬浮剂等药剂处理，每个处理重复3次，每重复选择大小均匀的铁皮石斛苗100棵，在铁皮石斛移栽前浸根处理，浸根后各处理种苗随机栽种待铁皮石斛移栽后15-30d调查软腐病发病率。

试验一、种苗浸根处理药剂筛选试验：设置7个药剂处理和1个清水对照，7个药剂处理分别为制剂实施例1分别稀释800倍、1000倍、1200倍，3％中生菌素可湿性粉剂稀释600倍、20％噻森铜悬浮剂稀释500倍、72％农用链霉素可湿性粉剂稀释1000倍，33.5％喹啉铜悬浮剂稀释600倍。各处理的浸根时间均为30分钟。

试验二、不同浸根时长处理试验：制剂实施例1稀释1000倍，分别浸根30分钟、60分钟、90分钟，及清水对照。

2.2调查方法

待铁皮石斛移栽后15-30d调查软腐病发病率。每小区采取随机5点取样法，每点调查 20株，记录发病株数，并计算防效。

3试验结果

3.1种苗浸根处理药剂筛选试验

从表10试验结果看，制剂实施例1稀释800-1000倍、3％中生菌素可湿性粉剂稀释600 倍、20％噻森铜悬浮剂稀释500倍处理种苗后对软腐病的预防效果最佳，均达到80％以上，各药剂处理防效之间无显著差异；其余处理处理种苗预防软腐病的效果稍差，防效在70％-80％之间。

表10、种苗浸根处理药剂筛选试验效果(移栽后20d)

3.2不同浸根时长处理试验

表11、不同浸根时间处理试验结果(移栽后20d)

从表11可以看出，浸根时间对药效发挥有一定影响，制剂实施例1稀释液浸根处理60 分钟效果最佳，与处理90分钟无显著差异，但显著高于处理30分钟的效果。

四、茎叶喷雾试验

1方法

1.1试验设计

2017年于浙江省金华市铁皮石斛种植基地内选取软腐病菌常发地块开展试验。铁皮石斛为当年移栽的一年生苗(4月21日移栽)，种植基质未做消毒处理，肥力中等。选择制剂实施例1(40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂)、3％中生菌素可湿性粉剂、20％噻森铜悬浮剂、46％氢氧化铜水分散粒剂、33.5％喹啉铜悬浮剂等药剂进行茎叶喷雾处理，另设清水对照，间隔5-7d，连续施药4次。各处理重复3次，小区随机分布，小区面积5m²。末次药后14d 调查软腐病的发病情况。

预防试验处理：试验前全田未发病，设置制剂实施例1稀释800倍、1000倍、1200倍，3％中生菌素可湿性粉剂稀释600倍、20％噻森铜悬浮剂稀释500倍、46％氢氧化铜水分散粒剂稀释1500倍、33.5％喹啉铜悬浮剂稀释600倍和清水对照等8个处理，于4月27日、5 月4日、5月11日、5月18日茎叶喷雾处理。。

治疗试验处理：铁皮石斛软腐病发病初期，设制剂实施例1稀释600倍、800倍、1000倍，3％中生菌素可湿性粉剂稀释400倍，20％噻森铜悬浮剂稀释400倍，46％氢氧化铜水分散粒剂稀释1000倍，33.5％喹啉铜悬浮剂稀释500倍和清水对照等8个处理，于8月13日、 8月19日、8月25日、8月31日茎叶喷雾处理。

1.2调查方法

施药前和末次药后14d调查软腐病的发病情况。调查方法：每小区采取随机5点取样法，每点调查20株，记录发病株数及发病程度。

预防试验：

治疗试验：

2试验结果

2.1预防试验

从表12结果来看，各药剂对铁皮石斛移栽后铁皮石斛软腐病有不同预防效果差异。其中，制剂实施例1稀释800-1000倍、3％中生菌素可湿性粉剂稀释600倍效果最佳，发病率仅5％左右，防效达80％以上，且三者无显著差异；其余处理防效均稍差。

表12、各药剂处理预防试验效果

2.2治疗试验

从表13结果来看，各药剂对铁皮石斛软腐病有不同治疗效果。其中，制剂实施例1稀释600-800倍、46％氢氧化铜水分散粒剂稀释1000倍的使用效果最佳，防效达85％以上；且三者无显著差异，其余处理防效均稍差。

表13、各药剂处理治疗试验效果

五、铁皮石斛软腐病综合防治技术试验

1.方法

1.1试验设计

试验于2018年湖南省新宁县铁皮石斛种植基地中进行，该基地历年软腐病发生较重，营养基质肥力中等，选用两年生铁皮石斛苗于3月25日进行移栽。试验各处理均设3次重复，小区随机排列，小区面积5m²。

具体试验设计，如下：

表14、铁皮石斛软腐病综合防治技术试验设计

1.2调查方法

1.2.1防效调查

9月进行软腐病的病情调查并计算防治效果。每小区采取随机5点取样法，每点调查20 株，记录发病株数及发病程度。

(1)分级方法：0级：全株无病；1级：茎部病斑不超过茎围1/3，个别叶片萎焉；3 级：茎部病斑不超过茎围1/2，或半数一下叶片轻度凋萎，或下部少数叶片出现病斑；5级：茎部病斑超过茎围1/2，或半数一上叶片轻度凋萎；7级：茎部病斑环绕茎围，或2/3一上叶片凋萎；9级：病株全部叶片凋萎或枯死。

(2)防效计算公式：

1.2.2生长势调查

每处理随机选取5点，各定点标记10丛铁皮石斛，10月对试验区标记铁皮石斛测定生长指标。测量挂牌铁皮石斛的新芽萌发数、最长芽株高、最长芽叶长、叶宽、叶片数和茎粗。

1.2.3品质调查(多糖测定)

每处理随机选取5点，各定点标记10丛铁皮石斛，12月进行采收并测定多糖含量。

(1)对照品溶液的制备：取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水溶解并定量制成每1mL中含100μg的溶液。标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分别置于10mL具塞试管中，加水至1.0mL，精密加5％苯酚溶液1mL，摇匀，再精密加硫酸5mL，摇匀，置沸水浴中加热20分钟，取出放入冰浴中冷却5分钟，以相应的试剂为空白，用紫外-可见分光光度法在488nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

(2)供试品溶液的制备：取样品粉末(过3mm筛)约0.3g，精密称定，加水200mL，加热回流提取2h，提取液转移至250mL量瓶中，用适量水分次洗涤容器，洗液转移至同一量瓶中，冷却，加水稀释至刻度，摇匀，过滤，精密吸取续滤液2mL，置25mL离心管中，精密加入无水乙醇10mL，摇匀，冷藏1h，取出，离心(4000r/分钟)20分钟，弃去上清液，沉淀加80％乙醇洗涤2次，每次8mL，离心，弃去上清液，沉淀加热水溶解并转移至25mL量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀，待用。

(3)测定：精密量取供试品溶液1mL，置10mL具塞试管中，按照标准曲线制备项目下的方法，自“精密加5％苯酚溶液1mL”起，依方法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中无水葡萄糖的量，并进行计算。

2结果分析

2.1综合技术对铁皮石斛软腐病的防治效果

表15、综合技术防治铁皮石斛软腐病试验结果

从表15结果来看，综合技术对铁皮石斛软腐病的防治效果最佳，其次是处理CK7，二者无显著差异，但显著优于其他对照处理。

2.2综合防治技术对铁皮石斛生长的影响

表16、综合防治技术促进铁皮石斛生长的数据结果

由表16结果来看，综合技术除对软腐病的防治效果优异外，还能够调节铁皮石斛的生长。经综合技术处理铁皮石斛后，能够显著增加芽数、提高株高、增加最长芽叶片数、叶长、茎粗和多糖含量。CK7与综合技术处理相比，在提高株高、增加茎粗和多糖含量方面不如综合技术处理，有显著差异。

试验期间，未见供试的铁皮石斛出现生长抑制、畸形、白化、花叶、褪绿、腐烂及坏死等可见药害症状。可见，综合防治技术对供试铁皮石斛安全。

根据上述说明书的揭示和教导，本发明所属领域的技术人员还可以对上述实施例进行变更和修改。因此，本发明并不局限于上面揭示和描述的具体实施例，对发明的一些修改和变更也应当落入本发明的权利要求的保护范围内。此外，尽管本说明书中使用了一些特定的术语，但这些术语只是为了方便说明，并不对本发明构成任何限制。

Claims

1.含春雷霉素和噻唑锌的组合物用于防治铁皮石斛软腐病，同时促进铁皮石斛植株生长、提高铁皮石斛品质的用途，所述促进铁皮石斛生长是通过增加芽数，提高株高，增加最长芽叶片数，促进叶长和/或提高茎秆粗壮度来获得的，所述提高铁皮石斛品质是通过提高铁皮石斛多糖含量来获得的，其中，春雷霉素和噻唑锌的重量比为1:7。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物的剂型为悬浮剂、水分散粒剂、可分散油悬浮剂或可湿性粉剂。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述组合物中有效成分春雷霉素和噻唑锌的总重量占组合物总重量的5-60％。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述组合物中有效成分春雷霉素和噻唑锌的总重量占组合物总重量的10-50％。

5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述组合物为40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂。

6.一种防治铁皮石斛软腐病，同时促进铁皮石斛生长、提高铁皮石斛品质的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤三、第一次茎叶喷雾：移栽后10-15d，使用40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂800-1000倍稀释倍数进行茎叶喷雾，间隔7d，连用4次；

步骤四、第二次茎叶喷雾：7-8月软腐病高发期，使用40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂600-800倍稀释倍数进行茎叶喷雾，间隔5-7d，连用4次；

以上步骤一至步骤四中所使用的40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂中有效成分春雷霉素和噻唑锌的重量比均为1:7。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤一中用水量优选为45升/亩。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，步骤二中种苗移栽前使用40％春雷霉素·噻唑锌悬浮剂800-1000倍对种苗进行浸根处理60-90分钟。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，浸根处理为60分钟。