CN117647614A - 一种特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定方法。该方法采用离子色谱检测，试样经超声预处理、盐酸水解后，进阳离子分析柱，通过抑制器后进入电导检测器进行检测，外标法定量。本发明通过对产品进行酸水解，彻底释放胆碱分子，利用离子色谱法测定胆碱含量的高效检测方法。本检测方法应用于特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定，理论清晰，实验操作简便，保证准确定量分析胆碱的含量，简单易于操作。
Description
技术领域
本发明属于特殊膳食中胆碱的检测技术领域，具体涉及一种特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定方法。
背景技术
胆碱，英文名称：choline，分子式C5H15NO2，胆碱是一种强有机碱，是卵磷脂的重要组成成分，是动物生长过程中不可或缺的一种水溶性维生素，胆碱也存在于神经鞘磷脂之中，是机体可变甲基的一个来源而作用于合成甲基的产物，同时又是乙酰胆碱的前体，人体也可以合成胆碱，所以不容易造成胆碱缺乏病。胆碱耐热，在干燥环境下长时间储存，胆碱的含量几乎没有变化。
最初的胆碱测定方法主要有雷氏盐比色法、雷氏盐重量法、高氯酸非水滴定法等传统方法，操作繁琐，选择性差，干扰因素多，无法鉴别掺进来无机氯化物和胺类等物质，近年来可见报道的检测方法有高效液相色谱-电化学检测法、化学发光法、蒸发光散射检测法及高效液相-质谱法等测定胆碱含量的方法，这些方法对仪器要求比较高，不易广发推广应用。现行国标采用酶反应分光光度法，该方法所需要的酶种类多，不易购买，且实验操作较难控制。
发明内容
为解决上述现有技术中存在的问题，本发明提供一种特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定方法。
所述的特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定方法为：采用离子色谱检测，试样经超声预处理、盐酸水解后，进阳离子分析柱，通过抑制器后进入电导检测器进行检测，外标法定量。
所述的特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定方法的具体步骤为：
1)试样预处理：取特殊医学用途全营养配方乳剂食品超声5-10min混匀；
2)试样酸解：称取步骤1)的试样10g于100mL比色管中，加15mL浓度为1.5mol/L的盐酸溶液，振摇混匀后，于70-75℃水浴恒温振荡器中水解2h；
3)试样定容、过滤：步骤2)的试样冷却后，用水定容至刻度，过滤，得滤液，稀释后检测；
4)检测：采用ICS6000离子色谱仪，色谱柱：Dionex lonpacTMCS 12A(4mm×250mm)；保护柱：Dionex lonpacTMCG 12A；淋洗液：20mmol/L甲烷磺酸淋洗液；检测器：电导检测器；抑制器：CERS 300*4mm；流速：1.0mL/min；进样量：100μL；柱温：30℃。
本发明通过对产品进行酸水解，彻底释放胆碱分子，利用离子色谱法测定胆碱含量的高效检测方法。本检测方法应用于特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定，理论清晰，实验操作简便，保证准确定量分析胆碱的含量，简单易于操作。
附图说明
图1胆碱标准曲线图。
图2特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的离子色谱图。
具体实施方式
实施例1
1.试剂与材料
1.1试剂
盐酸：优级纯及以上级别；甲烷磺酸：分析纯。
1.2标准溶液配制
(1)胆碱标准储备液
将酒石酸氢盐胆碱于102℃电热鼓风干燥箱中干燥4h，称取2.6659g(精确至0.0001g)，置于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，配成25mg/mL的胆碱标准储备溶液，4℃贮存，有效期3个月。
(2)胆碱标准中间液
移取1mL胆碱标准储备液，置于250mL容量瓶中，用甲烷磺酸淋洗液定容至刻度，配成0.1mg/mL胆碱标准中间液。临用现配。
(3)胆碱标准系列工作液
分别精密吸取胆碱标准中间液0mL、0.5mL、1mL、2.5mL、5mL、10mL于100mL容量瓶中，用甲烷磺酸淋洗液定容至刻度，混匀。该标准系列工作液胆碱浓度分别为0μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL。临用前配制。
2.仪器设备
分析天平：感量为0.1mg；离子色谱仪：配电导检测器；水浴恒温振荡器；超声波清洗机；电热恒温干燥箱。
3.测定方法
3.1试样溶液
称取混合均匀的液体试样约10g(精确至0.0001g)于100mL具塞比色管中，加入15mL 1.5mol/L盐酸溶液，涡旋混匀，将比色管放入75℃恒温水浴振荡器中酸解2h，取出冷却至室温，再超声15min，加水定容至刻度，混匀。用滤纸过滤，移取1mL滤液于50mL比色管中，加水定容至刻度，将稀释后的溶液经过0.22μm水相滤膜，弃去前面3mL滤液，收集后面滤液待上机分析。
3.2试样加标溶液
称取混合均匀的液体试样约10g(精确至0.0001g)于100mL具塞比色管中，准确加入胆碱标准储备液适量，涡旋混匀。其他步骤与试样溶液同法处理。
4.计算公式
4.1试样中胆碱的含量
试样中胆碱的含量按式(1)计算：
式中：
Y——试样中胆碱含量，单位为毫克每一百克(mg/100g)；
C——测试液中胆碱含量，单位为微克每毫升(μg/mL)；
V——试样最终定容体积，单位为毫升(mL)；
f——稀释倍数；
m——试样的称样量，单位为克(g)；
100——单位换算系数；
1000——单位换算系数；
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，计算结果保留三位有效数字。
4.2回收率计算
样品中胆碱加标回收率按式(2)计算：
式中：
R——样品加标回收率，％；
Y1——加标后样品中胆碱含量测定值，单位为毫克每一百克(mg/100g)；
——加标前样品中胆碱的算数平均含量，单位为毫克每一百克(mg/100g)；
m——称样量，单位为克(g)；
c——标准储备液浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；
V1——加标体积，单位为微升(μL)；
100——单位换算系数；
1000——单位换算系数。
5.本实验例的结果
5.1线性与范围
分别吸取胆碱标准中间液0mL、0.5mL、1mL、2.5mL、5mL、10mL于100mL容量瓶中，用甲烷磺酸淋洗液定容至刻度，混匀。该标准系列工作液胆碱浓度分别为0.00μg/mL、0.500μg/mL、1.00μg/mL、2.50μg/mL、5.00μg/mL、10.0μg/mL。临用前配制。编号为STD 1～STD 6。
表1线性与范围结果
5.2准确度
采取3水平6平行加标回收实验，该样品为特殊医学用途全营养配方食品(乳剂)：
水平1：加入胆碱标准使用储备液100μL，相对于50％样品中胆碱含量；
水平2：加入胆碱标准使用储备液200μL，相对于100％样品中胆碱含量；
水平3：加入胆碱标准使用储备液300μL，相对于150％样品中胆碱含量。
表2准确度实验结果
准确度评价：水平1：平均回收率为104.1％，RSD为0.87％；水平2：平均回收率为100.8％，RSD为0.38％；水平3：平均回收率为102.9％，RSD为1.8％。
5.3精密度
按照相同操作步骤，人员1和人员2在不同时间分别进行相同样品中胆碱含量检测，每人平行处理6份，该样品为特殊医学用途全营养配方食品(乳剂)，并向其中加入100％与样品中胆碱含量相当的标准溶液。
表3精密度实验结果
精密度评价：由不同人员在不同时间内同法测定加入相同样品(n＝12)，胆碱含量的RSD为2.0％，该方法精密度良好。
从表格数据可知，采用本发明的特殊医学用途全营养配方食品(乳剂)中胆碱的测定方法检测结果准确性及重复性好，简单易操作，能够快速准确定量分析胆碱含量。
Claims (2)
1.一种特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定方法，其特征在于，该方法采用离子色谱检测，试样经超声预处理、盐酸水解后，进阳离子分析柱，通过抑制器后进入电导检测器进行检测，外标法定量。
2.根据权利要求1所述的特殊医学用途全营养配方乳剂食品中胆碱的测定方法，其特征在于，该方法的具体步骤为：
1)试样预处理：取特殊医学用途全营养配方乳剂食品超声5-10min混匀；
2)试样酸解：称取步骤1)的试样10g于100mL比色管中，加15mL浓度为1.5mol/L的盐酸溶液，振摇混匀后，于70-75℃水浴恒温振荡器中水解2h；
3)试样定容、过滤：步骤2)的试样冷却后，用水定容至刻度，过滤，得滤液，稀释后检测；
4)检测：采用ICS6000离子色谱仪，色谱柱：Dionex lonpacTMCS 12A(4mm×250mm)；保护柱：Dionex lonpacTMCG 12A；淋洗液：20mmol/L甲烷磺酸淋洗液；检测器：电导检测器；抑制器：CERS 300*4mm；流速：1.0mL/min；进样量：100μL；柱温：30℃。
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