CN117617496A - 一种含水果活性成分以及益生菌的组合物及其在制备具有抗氧化作用的产品中的应用 - Google Patents

一种含水果活性成分以及益生菌的组合物及其在制备具有抗氧化作用的产品中的应用 Download PDF

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罗强
黄云
涂玮
牛文芳
刘杰
王志尧
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本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种含水果活性成分以及益生菌的组合物及其在制备具有抗氧化作用的产品中的应用。所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其包含蓝莓活性成分以及益生菌。所述的益生菌选自瑞士乳杆菌或嗜酸乳杆菌。研究表明,所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物具有较好的抗氧化作用;因此,将其作为有效成分用于制备具有抗氧化作用的食品、膳食补充剂、功能性食品、护肤品或药物,具有重要的应用价值。

Description

一种含水果活性成分以及益生菌的组合物及其在制备具有抗 氧化作用的产品中的应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种含水果活性成分以及益生菌的组合物及其在制备具有抗氧化作用的产品中的应用。
背景技术
大量研究表明,水果中富含抗氧化、抗衰老等活性成分,且水果中含有的活性成分,如黄酮、黄酮苷及多酚等具有优秀的抗氧化及抗衰老活性。如,蓝莓中含有丰富的活性成分并具有抗氧化、清除自由基、防衰老、抑菌消炎、调节血脂、缓解视疲劳、改善睡眠的功效。
此外还有研究报道,益生菌能够改善胃肠道微生态平衡,能够产生抗菌物质(如有机酸、细菌素、酶类等),抑制或杀死病原菌。同时,益生菌能够刺激并参与宿主肠道或皮肤免疫反应。
虽然,现有技术有关于水果提取物用于抗氧的报道。但一般情况下单独的水果提取物其抗氧化有效成分含量不高,抗氧化作用有待进一步提高。现有技术也并无将水果提取物与益生菌进行组合并用于抗氧化的研究及报道。
发明内容
为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题,本发明首先提供了种含水果活性成分以及益生菌的组合物。
本发明的技术方案如下:
本发明首先提供了一种含水果活性成分以及益生菌的组合物,其包含蓝莓活性成分以及益生菌。
本发明提供了一种全新的含水果活性成分以及益生菌的组合物;研究表明,所述的组合物相比于单独的蓝莓活性成分,具有更好的抗氧化作用。
优选地,蓝莓活性成分与益生菌的重量比为10:5~8。
优选地,蓝莓活性成分与益生菌的重量比为10:7。
优选地,所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着将蓝莓破碎得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分。
优选地,所述的有机溶剂为体积分数为70%~95%的乙醇水溶液。
优选地,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:8~15mL。
最优选地,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL。
优选地,所述的益生菌选自瑞士乳杆菌或嗜酸乳杆菌;
所述的瑞士乳杆菌具体为Lactobacillus helveticus HEPRO-176。
所述的嗜酸乳杆菌为Lactobacillus acidophilus HEPRO-188。
发明人在研究中惊奇的发现,在本发明所述含水果活性成分以及益生菌的组合物中,益生菌的选择十分关键;并不是在蓝莓活性成分中随意的加入益生菌形成的组合物与单独的蓝莓活性成分相比,其抗氧化作用均能够显著的提高;研究表明,在蓝莓活性成分中加入瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus HEPRO-188)形成的组合物与单独的蓝莓活性成分相比,其抗氧化作用得到了显著的提高;而在水果活性成分中加入其它的益生菌形成的组合物,其抗氧化作用并不能得到提高或显著的提高。
进一步优选地,所述的益生菌选自瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticusHEPRO-176)和嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)的组合。
优选地,瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)和嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)的重量比为1~3:1~3。
发明人在进一步研究中惊奇的发现,在水果活性成分中同时加入瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)和嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilusHEPRO-188)形成的组合物,与加入单一的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)形成的组合物相比,其抗氧化作用得到了更进一步的大幅提高。
本发明所述的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)采用的是瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)冻干粉。
优选地,所述的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)冻干粉采用的是活菌数为100亿cfu/g的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)冻干粉。
本发明所述的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)采用的是嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)冻干粉。
优选地,所述的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)冻干粉采用的是活菌数为100亿cfu/g的瑞士嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)冻干粉。
本发明还提供了一种上述含水果活性成分以及益生菌的组合物在制备具有抗氧化作用的产品中的应用。
优选地,所述的产品为食品、膳食补充剂、功能性食品、护肤品或药物。
有益效果:本发明提供了一种全新组成的含水果活性成分以及益生菌的组合物;研究表明,所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物具有较好的抗氧化作用;因此,将其作为有效成分用于制备具有抗氧化作用的食品、膳食补充剂、功能性食品、护肤品或药物,具有重要的应用价值。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明技术方案进行清楚、完整地描述。显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明中所述的Lactobacillus helveticus HEPRO-176,保藏于广东省微生物菌种保藏中心(地址是广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所),保藏编号为GDMCC 63303,保藏时间为2023年3月29日。
本发明中所述的Lactobacillus acidophilus HEPRO-188,保藏于广东省微生物菌种保藏中心(地址是广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所),保藏编号为GDMCC 63306,保藏时间为2023年3月29日。
本发明瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)冻干粉和嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)冻干粉采用如下方法制备得到:
(1)瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)种子液制备:将HCLP01菌种接入培养基(培养基成分为:蛋白胨11.0g/L,酵母粉11.0g/L,葡萄糖11.0g/L,吐温80 1.2mL/L,乙酸钠6.0g/L,磷酸氢二钾2.5g/L,硫酸镁0.7g/L,硫酸锰0.5g/L,谷氨酸11.0g/L),摇瓶发酵12h,获得OD600>1.0的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)种子液。
(2)扩大培养:将步骤(1)所得的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)种子液接入10L发酵罐中的液体培养基(10L,培养基成分为:蛋白胨11.0g/L,酵母粉11.0g/L,葡萄糖11.0g/L,吐温801.2mL/L,乙酸钠6.0g/L,磷酸氢二钾2.5g/L,硫酸镁0.7g/L,硫酸锰0.5g/L,谷氨酸11.0g/L);搅拌培养24h,结束发酵得发酵液;
(3)将步骤(2)所得发酵液离心收集菌体,然后添加水以及冻干保护剂脱脂乳粉混合均匀后经冷冻干燥后制得活菌数为100亿cfu/g的瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus HEPRO-176)冻干粉或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)冻干粉。
实施例1含水果活性成分以及益生菌的组合物的制备
取蓝莓活性成分与益生菌按重量比10:7混合均匀,即得所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物;
所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着放入捣碎机进行破碎15min得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分;其中,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL;所述的有机溶剂为体积分数为80%的乙醇水溶液;
所述的益生菌采用的是活菌数为100亿cfu/g的瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus HEPRO-176)冻干粉。
实施例2含水果活性成分以及益生菌的组合物的制备
取蓝莓活性成分与益生菌按重量比10:7混合均匀,即得所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物;
所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着放入捣碎机进行破碎15min得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分;其中,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL;所述的有机溶剂为体积分数为80%的乙醇水溶液;
所述的益生菌采用的是活菌数为100亿cfu/g的瑞士嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus HEPRO-188)冻干粉。
实施例3含水果活性成分以及益生菌的组合物的制备
取蓝莓活性成分与益生菌按重量比10:7混合均匀,即得所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物;
所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着放入捣碎机进行破碎15min得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分;其中,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL;所述的有机溶剂为体积分数为80%的乙醇水溶液;
所述的益生菌由重量比为1:1的活菌数为100亿cfu/g的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)冻干粉与活菌数为100亿cfu/g的瑞士嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)冻干粉组成。
对比例1蓝莓活性成分的制备
所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着放入捣碎机进行破碎15min得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分;其中,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL;所述的有机溶剂为体积分数为80%的乙醇水溶液。
对比例2含水果活性成分以及益生菌的组合物的制备
取蓝莓活性成分与益生菌按重量比10:7混合均匀,即得所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物;
所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着放入捣碎机进行破碎15min得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分;其中,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL;所述的有机溶剂为体积分数为80%的乙醇水溶液;
所述的益生菌采用的是活菌数为100亿cfu/g的市售鼠李糖乳杆菌冻干粉。
对比例3含水果活性成分以及益生菌的组合物的制备
取蓝莓活性成分与益生菌按重量比10:7混合均匀,即得所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物;
所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着放入捣碎机进行破碎15min得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分;其中,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL;所述的有机溶剂为体积分数为80%的乙醇水溶液;
所述的益生菌采用的是活菌数为100亿cfu/g的市售保加利亚乳杆菌冻干粉。
对比例4含水果活性成分以及益生菌的组合物的制备
取蓝莓活性成分与益生菌按重量比10:7混合均匀,即得所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物;
所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着放入捣碎机进行破碎15min得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分;其中,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL;所述的有机溶剂为体积分数为80%的乙醇水溶液;
所述的益生菌由重量比为1:1的活菌数为100亿cfu/g的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)冻干粉与活菌数为100亿cfu/g的市售鼠李糖乳杆菌冻干粉组成。
对比例5含水果活性成分以及益生菌的组合物的制备
取蓝莓活性成分与益生菌按重量比10:7混合均匀,即得所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物;
所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着放入捣碎机进行破碎15min得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分;其中,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL;所述的有机溶剂为体积分数为80%的乙醇水溶液;
所述的益生菌由重量比为1:1的活菌数为100亿cfu/g的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)冻干粉与活菌数为100亿cfu/g的市售保加利亚乳杆菌冻干粉组成。
实验例1本发明含水果活性成分以及益生菌的组合物的抗氧化实验
健康balb/c小鼠,饲养温度为20-22℃,自然光照,自由进食饮水,普通饲料喂养7d。将小鼠随机分组,每组10只。除空白对照组外,其余各组腹部注射700mg/(kg·d)D-半乳糖构建氧化损伤模型。其中,实验组以10mg/(kg·d)的剂量灌胃待测样品,空白对照组以及模型组注射等体积的生理盐水,灌胃等体积的蒸馏水,每2d称体质量1次,持续28d。实验结束后取血,参考ELISA试剂盒使用说明测定血清中SOD活性。
以空白对照组的SOD活性计为100%,实验组和模型组相对空白对照组的SOD活性百分比见表1。
表1.本发明含水果活性成分以及益生菌的组合物的抗氧化活性结果
待测样品 SOD活性
模型组 - 73.2±4.59%
实验组1 实施例1制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物 96.7±5.89%
实验组2 实施例2制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物 95.1±5.64%
实验组3 实施例3制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物 121.7±6.53%
实验组4 对比例1制备得到的蓝莓活性成分 81.6±5.35%
实验组5 对比例2制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物 79.8±5.01%
实验组6 对比例3制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物 84.9±5.44%
实验组7 对比例4制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物 87.1±5.57%
实验组8 对比例5制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物 91.8±5.71%
从表1实验数据中可以看出,实施例1和2制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其SOD活性百分比显著高于对比例1制备得到的蓝莓活性成分;这说明:在采用本发明所述方法制备得到的蓝莓活性成分中加入瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticusHEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)形成的组合物,相比于单独的蓝莓活性成分,其抗氧化作用得到了显著的提高。
从表1实验数据中可以看出,对比例2和3制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其SOD活性百分比与对比例1制备得到的蓝莓活性成分相比,并未得到提高或显著的提高;这说明:并不是在蓝莓活性成分中随意的加入益生菌形成的组合物与单独的蓝莓活性成分相比,其抗氧化作用均能够显著的提高;上述实验结果表明,在蓝莓活性成分中加入其它的益生菌形成的组合物,其抗氧化作用并不能得到提高或显著的提高;在蓝莓活性成分中只有加入瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)形成的组合物,其抗氧化作用才能得到显著的提高。
从表1实验数据中可以看出,实施例3制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其SOD活性百分比与实施例1和2制备得到的蓝莓活性成分相比,得到了进一步的大幅提高;这说明:在水果活性成分中同时加入瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticusHEPRO-176)和嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)形成的组合物,与加入单一的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)形成的组合物相比,其抗氧化作用得到了更进一步的大幅提高。
从表1实验数据中可以看出,对比例4和5制备得到的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其SOD活性百分比与实施例1和2制备得到的蓝莓活性成分相比,并未得到进一步的大幅提高。这说明:在水果活性成分中只有加入瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticusHEPRO-176)和嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)形成的组合物,与加入单一的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)形成的组合物相比,其抗氧化作用才能得到更进一步的大幅提高;而在水果活性成分中加入瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticusHEPRO-176)和其它益生菌形成的组合物,与加入单一的瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus HEPRO-176)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus HEPRO-188)形成的组合物相比,其抗氧化作用并不能得到更进一步的大幅提高。

Claims (10)

1.一种含水果活性成分以及益生菌的组合物,其特征在于,包含蓝莓活性成分以及益生菌。
2.根据权利要求1所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其特征在于,蓝莓活性成分与益生菌的重量比为10:5~8。
3.根据权利要求1所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其特征在于,蓝莓活性成分与益生菌的重量比为10:7。
4.根据权利要求1所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其特征在于,所述的蓝莓活性成分通过如下方法制备得到:取新鲜蓝莓,加入有机溶剂混合,接着将蓝莓破碎得破碎混合物;将混合物离心后,取上清液浓缩干燥后得蓝莓活性成分。
5.根据权利要求4所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其特征在于,所述的有机溶剂为体积分数为70%~95%的乙醇水溶液。
6.根据权利要求4所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其特征在于,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:8~15mL。
7.根据权利要求6所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其特征在于,新鲜蓝莓与有机溶剂的用量比为1g:12mL。
8.根据权利要求1所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物,其特征在于,所述的益生菌选自瑞士乳杆菌或嗜酸乳杆菌。
9.权利要求1~8任一项所述的含水果活性成分以及益生菌的组合物在制备具有抗氧化作用的产品中的应用。
10.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的产品为食品、膳食补充剂、功能性食品、护肤品或药物。
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