CN117581988A - 一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法。本发明旨在提供一种简单易行且高效的从青稞嫩叶中提取分离纯化出高抗氧化活性的多酚类化合物方法。具体包括(1)超声波辅助青稞嫩叶粗多酚提取；(2)醇沉除杂；(3)正丁醇萃取；(4)大孔树脂活化；(5)大孔树脂纯化得到高抗氧化活性的青稞嫩叶多酚。本发明能够得到具有高抗氧化活性的青稞嫩叶多酚，提取和纯化工艺简单，对企业的技术要求低，可适应与大范围的推广；多酚的抗氧化活性高，可用于保健食品的开发。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工领域，更具体地，涉及一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法。
背景技术
青稞(Hordeum vulgare Linn.var.nudum Hook.f.)为禾本科(Poaceae)大麦属(Hordeum)植物大麦(Hordeum vulgare L.)的一个变种。因其籽粒内外稃与颖果分离，籽粒外露，故也被称为裸大麦，西藏地区农民还称其为也称为裸麦、原麦、米麦、米大麦等。青稞起源于青藏高原，居住在高原上的农民将野生大麦培育成青稞，距今已有超过3500年的栽培历史，是藏族人民最主要的碳水化合物来源。由于青稞抗逆性强、适应范围广且产量稳定等特性，其栽种区域不断延伸至全国其他地方。目前我国青稞种植区域主要分布在西藏自治区、青海省、四川省、甘肃省以及云贵高原部分地区。青藏高原高寒、缺氧、强光照等极端环境使青稞获得了极强的抗逆性，具有丰富独特的营养成分，如蛋白质、多酚、矿质元素、维生素、膳食纤维等。藏族人民主要利用青稞制作青稞糌粑，位居藏民族食品四宝(糌粑、酥油、茶叶、牛羊肉)之首。青藏高原虽然自然环境恶劣，但百岁老人却并不鲜见，这可能与长期食用具有丰富营养价值及突出医疗保健功效的青稞是密不可分的。大麦嫩叶一般系指高度为15-30cm的新鲜大麦嫩茎叶，俗称大麦苗，具有很高的药用价值和悠久的药用历史。大麦嫩叶在长到15-30cm时营养物质积累达到最高，含有大量的膳食纤维、蛋白质、矿质元素、叶绿素、多酚等成分。开发利用具有抗氧化等生物活性的植物多酚类物质用以预防和治疗氧化及自由基引发的各种疾病已成为当前的研究热点。但目前仍存在资源不足、有效成分含量低、提取纯化工艺不成熟等问题。青稞作为大麦的一种特殊类型，利用青稞嫩叶提取酚类等活性物质，可丰富酚类物质来源。但目前缺乏对青稞嫩叶多酚的提取和分离纯化的相关研究。
发明内容
针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法。本发明首次以青稞嫩叶为原料提取多酚，经济环保，提高了青稞嫩叶的经济价值；利用超声辅助多酚提取工艺，相比较于传统的提取方法，超声提取所需要的溶剂更少，提取时间更短，提取率更高，并且可以最大限度上减少热敏化合物的降解；通过正丁醇的液液萃取先获得具有更高抗氧化活性的多酚物质，可起到初步纯化的效果，降低大孔树脂的承载量，使得大孔树脂对多酚的纯化效果更好，得到更高抗氧化活性的多酚。最终确定正丁醇萃取联用大孔树脂法获得了具有最高抗氧化活性的青稞嫩叶多酚。体外抗氧化结果显示，该多酚的DPPH自由基清除率为159568μmol TE/g，ABTS自由基清除率为163802μmolTE/g和FRAP自由基清除率为193708μmol TE/g。该方法吸附容量较大、选择性好、吸附速度较快、解吸条件简单且温和、树脂可多次重复使用、费用较低，因此，本发明方法具有广阔的市场前景。
本发明的目的是通过以下方案实现的：
本发明提供一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，包括以下步骤：
S1、青稞嫩叶全粉脱脂，与70～90％甲醇溶液混合，超声波处理，离心，沉淀物与70～90％甲醇混合，超声，离心，合并上清液，旋转蒸发后，冻干，利用乙醇沉淀，离心，上清液旋转蒸发后，冻干，得到粗多酚提取物；
S2、液液萃取，将所述青稞嫩叶酚类物质粗提物溶于水，利用分液漏斗，将粗多酚溶液与有机溶剂混合，重复两次；有机溶剂在上层，水层在下层，收集萃取液；重复萃取两次，萃取液旋蒸后冻干；
S3、大孔树脂的活化，大孔树脂用90～95％的乙醇浸泡12～24h，去离子水清洗到无白色漂浮物，无醇味；用两倍树脂体积的3～5％的盐酸溶液和2～4％的氢氧化钠溶液浸泡树脂4～6h，去离子水洗涤至中性；
S4、将活化后饱和湿树脂湿法装入层析柱中，将多酚用70～90％甲醇溶解配置溶液，上样，去离子水洗脱除杂后，用70～75％乙醇洗脱下目标物，收集洗脱液，旋转蒸发除去乙醇，真空冷冻干燥，从而得到青稞嫩叶多酚提取物。
作为本发明的一种实施方式，步骤S1中，全粉与70～90％甲醇的料液比为1g：20mL～1g：25mL。
作为本发明的一种实施方式，步骤S1中，超声波功率为480～560W，超声时间30～60min，超声温度40～50℃。
作为本发明的一种实施方式，步骤S1中，离心后，残渣沉淀物与70～90％甲醇混合超声提取2～3次。
作为本发明的一种实施方式，步骤S1中，利用三倍体积乙醇沉淀除去多糖类物质。
作为本发明的一种实施方式，步骤S2中，青稞嫩叶酚类物质粗提物与水的质量体积分数为0.03～0.05g/mL。
作为本发明的一种实施方式，步骤S2中，有机试剂为正丁醇，粗多酚溶液与有机试剂的体积比为1：1～1：1.5。
作为本发明的一种实施方式，步骤S2中，选用AB-8大孔树脂。
作为本发明的一种实施方式，步骤S3中，上样溶液浓度为2～3mg/mL，以2～3BV/min流速上样4BV，先用4BV的去离子水去除杂质后，用70％乙醇以2.5～3BV/min的流速洗脱下目标物。
前述方法制得的高抗氧化活性青稞嫩叶多酚，是高DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力和氧自由基清除能力的多酚，可用于保健食品的开发。因此，本发明制得的高抗氧化活性青稞嫩叶多酚及其在制备保健食品中的用途也属于本发明的保护范围。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
(1)本发明方法步骤简单，容易实现，多酚提取率高、纯化后多酚抗氧化活性高、生产成本低；
(2)本发明优化超声辅助多酚提取工艺，相比较于传统的提取方法，超声提取所需要的溶剂更少，提取时间更短，提取率更高，并且可以最大限度上减少热敏化合物的降解，保留高活性的多酚化合物；
(3)本发明提出了一种最高抗氧化活性的多酚纯化法，为正丁醇萃取联用大孔树脂法，该方法先利用正丁醇初步纯化出具有高抗氧化活性的多酚物质，后进行大孔树脂纯化，吸附容量较大、选择性好、吸附速度较快、解吸条件简单且温和、大孔树脂可多次重复使用，纯化后的多酚具有更强的抗氧化活性及更好的保健效果，在保健食品的生产中具有潜在的应用价值。
附图说明
通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显：
图1为总酚含量图；
图2为DPPH自由基清除率图；
图3为ABTS自由基清除率图；
图4为FRAP自由基清除率图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变化和改进。这些都属于本发明的保护范围。
以下实施例和对比例中涉及的总酚含量测定方法和抗氧化活性测定方法如下：
1.总酚含量测定
福林酚法测定总酚含量：向试管中加入2.5mL 1:10稀释的0.2mol/L福林酚溶液，再加入500μL上述酚类物质提取液的稀释液，充分涡旋混匀；于室温下反应4min，随后加入2mL 75g/L的碳酸钠溶液，充分涡旋混匀后在室温下(22±1℃)于暗处孵育2h，测定混合液在760nm处的吸光值。准确配制0、16、20、40、80mg/L的没食子酸溶液用于标准曲线制作。结果计算：样品中总酚含量根据标准曲线线性回归方程和测得的吸光值进行计算，单位为毫克没食子酸等价物每百克样品(mg GAE/100g DW)。
2.抗氧化活性测定方法
2.1DPPH自由基清除率：DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，60μM)用80％甲醇溶解得到母液，用80％甲醇稀释5-10倍，使得在515nm处调节吸光度为0.70左右获得反应液，取100μL多酚提取物与1.9mL DPPH溶液黑暗反应2h，515nm测定吸光度。以trolox浓度范围为制作0-600μM标曲，根据标曲计算样品的DPPH自由基清除率，以微摩尔的Trolox当量表示(μmol TE/g)。
2.2ABTS自由基清除率：ABTS(2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐、7mM)与过硫酸钾(2.45mM)1:1配置母液，黑暗保存16h以上，该母液用80％甲醇稀释30-40倍，调节原液在734nm处吸光度为0.70左右获得ABTS反应溶液，取200μL多酚提取物与1.8mLABTS溶液黑暗反应6min，于734nm测定吸光度。以trolox浓度范围为制作0-600μM标曲，根据标曲计算样品的ABTS自由基清除率，以微摩尔的Trolox当量表示(μmol TE/g)。
2.3FRAP自由基清除率：FRAP试剂：TPTZ试剂(2,4,6-tris(2-pyridyl)-s-triazine)10mM：氯化铁溶液(20mM)：醋酸钠溶液(300mM)＝1：1：10配置反应液，37℃预热，取100μL多酚提取物与3mL FRAP试剂反应4min，于593nm测定吸光度。以trolox浓度范围为制作0-600μM标曲，根据标曲计算样品的FRAP自由基清除率，以微摩尔的Trolox当量表示(μmol TE/g)。
实施例1
本实施例涉及一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，步骤如下：
步骤1、青稞嫩叶粗多酚制备
青稞嫩叶全粉利用石油醚脱脂后，与80％甲醇溶液按照1g：20mL的比例混合，超声功率480W，40℃下超声30min后离心3000ⅹg，离心5min，收集上清液。沉淀残渣用同样超声条件方法提取2次，合并3次上清液，利用旋转蒸发仪，55℃减压旋转蒸发后冻干，冻干物配置成2mg/mL的溶液，在磁力搅拌的作用下，通过恒流泵缓慢加入3倍体积的100％乙醇，静置过夜后，离心去除产生的沉淀，上清液旋转蒸发除去乙醇后二次冻干，得青稞嫩叶酚类物质粗提物。
步骤2、大孔树脂的活化
大孔树脂用95％的乙醇浸泡24h，去离子水清洗到无白色漂浮物，无醇味。用两倍树脂体积的5％的盐酸溶液和2％的氢氧化钠溶液浸泡树脂4h，去离子水洗涤至中性；
步骤3、青稞嫩叶多酚纯化
将预处理后的AB-8型饱和湿树脂湿法装入层析柱中，将青稞嫩叶酚类物质粗提物以2mg/mL的浓度，2BV/min流速上样4BV,经4BV的去离子水去除大部分杂质后,用70％乙醇以2.5BV/min的流速洗脱下目标物。将收集到的6BV洗脱液，用旋转蒸发仪除去乙醇，再进行真空冷冻干燥，从而得到纯化后的青稞嫩叶多酚提取物。
实施效果：由图1可知，实施例1的多酚提取物的总酚含量为24780mg GAE/100gDW，由图2-4可知，DPPH自由基清除率为138047μmol TE/g，ABTS自由基清除率为143170μmolTE/g和FRAP自由基清除率为155100μmol TE/g。
实施例2
本实施例涉及一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，与实施例1不同之处在于，步骤3重复两次，多酚提取物进行了两次大孔树脂的纯化。
实施效果：由图1可知，实施例2的多酚提取物的总酚含量为24220mg GAE/100gDW，并没有提高总酚含量。由图2-4可知，DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和FRAP自由基清除率为110570、124792和128902μmol TE/g，比实施例1低。因此，不需要进行重复多次的大孔树脂纯化，一次即可达到纯化效果，省时省力。
实施例3
本实施例涉及一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，与实施例1不同之处在于，步骤1中未进行超声辅助提取，仅在40℃下提取30min。
实施效果：由图1可知，实施例3的多酚提取物的总酚含量为12630mg GAE/100gDW，显著低于实施例1。由图2-4可知，DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和FRAP自由基清除率为90570、94732和89892μmol TE/g，比实施例1低。因此，超声辅助提取有助于提取分离纯化出高抗氧化活性的青稞嫩叶多酚。
实施例4
本实施例涉及一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，与实施例1不同之处在于，步骤1中多酚粗提物未进行乙醇沉淀除杂。
实施效果：由图1可知，实施例4的多酚提取物的总酚含量为16290mg GAE/100gDW，显著低于实施例1。由图2-4可知，DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和FRAP自由基清除率为99300、92844和92342μmol TE/g，比实施例1低。因此，乙醇除杂的步骤有助于提取分离纯化出高抗氧化活性的青稞嫩叶多酚。
实施例5
本实施例涉及一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，与实施例1不同之处在于，未进行步骤2和步骤3。
实施效果：由图1可知，实施例5的粗提物的总酚含量为5360mg GAE/100g DW，显著低于实施例1。由图2-4可知，DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和FRAP自由基清除率为21390、22504和23638μmol TE/g，比实施例1低。
实施例6
本对比例涉及一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，步骤如下：
步骤1、青稞嫩叶粗多酚制备
青稞嫩叶全粉利用石油醚脱脂后，与80％甲醇溶液按照1g：20mL的比例混合，超声功率480W，40℃下超声30min后离心3000ⅹg，离心5min，收集上清液。沉淀残渣用同样超声条件方法提取2次，合并3次上清液，利用旋转蒸发仪，55℃减压旋转蒸发后冻干，冻干物配置成2mg/mL的溶液，在磁力搅拌的作用下，通过恒流泵缓慢加入3倍体积的100％乙醇，静置过夜后，离心去除产生的沉淀，上清液旋转蒸发除去乙醇后二次冻干，得青稞嫩叶酚类物质粗提物。
步骤2、液液萃取
利用分液漏斗，将50mL的粗多酚(0.03g/mL)与50mL石油醚溶液混合3-5min，重复两次。石油醚在上层，水层在下层，收集石油醚萃取液。重复萃取两次。或倒入50mL氯仿于分液漏斗中，氯仿在下层，水在上层，收集氯仿萃取液。或倒入50mL乙酸乙酯于分液漏斗中，乙酸乙酯在上层，水在下层，收集乙酸乙酯萃取液。同理，正丁醇，在上层，水在下层，收集正丁醇萃取液。分别将石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液，旋蒸后冻干。
实施效果：由图1可知，石油醚萃取产物、氯仿萃取产物、乙酸乙酯萃取产物和正丁醇萃取产物的总酚含量分别为5650、4721、8202和15410mg GAE/100g DW，显著低于实施例1。由图2-4可知，DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和FRAP自由基清除率显著性低于实施例1。表明单独使用液液萃取法并不能有效纯化多酚，获得高抗氧化活性的青稞嫩叶多酚。从该结果也可知，四种有机试剂的中正丁醇萃取物的抗氧化更高，表明具有更高抗氧化的多酚物质与正丙醇的极性类似。
实施例7
本实施例涉及一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，步骤如下：
步骤1、青稞嫩叶粗多酚制备
青稞嫩叶全粉利用石油醚脱脂后，与80％甲醇溶液按照1g：20mL的比例混合，超声功率480W，40℃下超声30min后离心3000ⅹg，离心5min，收集上清液。沉淀残渣用同样超声条件方法提取2次，合并3次上清液，利用旋转蒸发仪，55℃减压旋转蒸发后冻干，冻干物配置成2mg/mL的溶液，在磁力搅拌的作用下，通过恒流泵缓慢加入3倍体积的100％乙醇，静置过夜后，离心去除产生的沉淀，上清液旋转蒸发除去乙醇后二次冻干，得青稞嫩叶酚类物质粗提物。
步骤2、液液萃取
利用分液漏斗，将50mL的粗多酚(0.03g/mL)与50mL正丁醇溶液混合3-5min，重复两次。正丁醇在上层，水层在下层，收集正丁醇萃取液。重复萃取两次，将100mL正丁醇旋蒸后冻干。
步骤3、大孔树脂的活化
大孔树脂用95％的乙醇浸泡24h，去离子水清洗到无白色漂浮物，无醇味。用两倍树脂体积的5％的盐酸溶液和2％的氢氧化钠溶液浸泡树脂4h，去离子水洗涤至中性；
步骤4、青稞嫩叶多酚纯化
将预处理后的AB-8型饱和湿树脂湿法装入层析柱中，将步骤2得到的多酚以2mg/mL的浓度，2BV/min流速上样4BV,经4BV的去离子水去除大部分杂质后,用70％乙醇以2.5BV/min的流速洗脱下目标物。将收集到的6BV洗脱液，用旋转蒸发仪除去乙醇，再进行真空冷冻干燥，从而得到纯化后的青稞嫩叶多酚提取物。
实施效果：由图1可知，实施例7的多酚提取物的总酚含量为34789mg GAE/100gDW，由图2-4可知，DPPH自由基清除率为159568μmol TE/g，ABTS自由基清除率为163802μmolTE/g和FRAP自由基清除率为193708μmol TE/g。高于实施例1.因为先通过正丁醇的液液萃取可获得具有更高抗氧化活性的多酚物质，可起到初步纯化的效果，降低大孔树脂的承载量，使得大孔树脂对多酚的纯化效果更好，得到更高抗氧化活性的多酚。实施例7的青稞嫩叶多酚物质进行了UPLC-MS的鉴定，鉴定的物质包括木蝴蝶苷B(Baicalin-7-diglucoside)、白杨素6-C-葡萄糖8-C-阿拉伯糖苷(Chrysin6-C-glucoside 8-C-arabinoside)、槲皮素-3-O-新橙皮苷(Quercetin-3-O-neohesperidoside)、槲皮素-3-O-洋槐糖苷(Quercetin-3-O-robinobioside)、槲皮素-3-O-芸香糖(Quercetin-3-O-rutinose)、槲皮素-7-芸香糖苷(Quercetin-7-rutinoside)、芦丁(Rutin)、芹菜素-7-芸香糖苷(Apigenin-7-rutinoside)、大豆苷元-4',7-二葡萄糖苷(Daidzein7,4'-di-O-glucoside)和异鼠李素-3-芸香糖苷(Isorhamnetin-3-rutinoside)，这些物质首次从青稞嫩叶中分离得到，这些物质的共同作用使得实施例7的抗氧化活性最高。
对比例1
本对比例涉及一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，步骤如下：
步骤1、青稞嫩叶粗多酚制备
青稞嫩叶全粉利用石油醚脱脂后，与80％甲醇溶液按照1g：20mL的比例混合，超声功率480W，40℃下超声30min后离心3000ⅹg，离心5min，收集上清液。沉淀残渣用同样超声条件方法提取2次，合并3次上清液，利用旋转蒸发仪，55℃减压旋转蒸发后冻干，冻干物配置成2mg/mL的溶液，在磁力搅拌的作用下，通过恒流泵缓慢加入3倍体积的100％乙醇，静置过夜后，离心去除产生的沉淀，上清液旋转蒸发除去乙醇后二次冻干，得青稞嫩叶酚类物质粗提物。
步骤2：超滤膜分离
超滤膜的预处理：超滤管中滤膜用10％的丙三醇浸泡一夜，用清水洗涤，再用去离子水离心20min。将8mL(0.1g/10mL)的粗多酚溶液与10mL的水混合分别倒入3KDa与1KDa的超滤管中，将超滤管放入低温离心机中离心1h(分两次离心)，离心转速为5000ⅹg，离心温度为10℃，分别收集大于3KDa、1～3KDa和小于1KDa的滤液冻干。
实施效果：对比例1中的大于3KDa，1～3KDa和小于1KDa的纯化物的总酚含量为8362、7504和1482mg GAE/100g DW，显著低于实施例1。DPPH自由基清除率分别为46597、38904和8237μmol TE/g，ABTS自由基清除率分别为15394、83203和23492μmol TE/g，FRAP自由基清除率为46302、23404和9732μmol TE/g，显著性低于实施例1。表明超滤膜分离的方法并不能有效纯化多酚，获得高抗氧化活性的青稞嫩叶多酚。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改，这并不影响本发明的实质内容。在不冲突的情况下，本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。
Claims (10)
1.一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
S1、青稞嫩叶全粉脱脂，与70～90％甲醇溶液混合，超声波处理，离心，沉淀物与70～90％甲醇混合，超声，离心，合并上清液，旋转蒸发后，冻干，利用乙醇沉淀，离心，上清液旋转蒸发后，冻干，得到青稞嫩叶酚类物质粗提物；
S2、液液萃取，将所述青稞嫩叶酚类物质粗提物溶于水，利用分液漏斗，将粗多酚溶液与有机溶剂混合，重复两次；有机溶剂在上层，水层在下层，收集萃取液；重复萃取两次，萃取液旋蒸后冻干；
S3、大孔树脂的活化，大孔树脂用90～95％的乙醇浸泡12～24h，去离子水清洗到无白色漂浮物，无醇味；用两倍树脂体积的3～5％的盐酸溶液和2～4％的氢氧化钠溶液浸泡树脂4～6h，去离子水洗涤至中性；
S4、将活化后饱和湿树脂湿法装入层析柱中，将多酚用70～90％甲醇溶解配置溶液，上样，去离子水洗脱除杂后，用70～75％乙醇洗脱下目标物，收集洗脱液，旋转蒸发除去乙醇，真空冷冻干燥，从而得到青稞嫩叶多酚提取物。
2.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤S1中，全粉与70～90％甲醇的料液比为1g：20mL～1g：25mL。
3.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤S1中，超声波功率为480～560W，超声时间30～60min，超声温度40～50℃。
4.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤S1中，离心后，残渣沉淀物与70～90％甲醇混合超声提取2～3次。
5.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤S1中，利用三倍体积乙醇沉淀除去多糖类物质。
6.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤S2中，青稞嫩叶酚类物质粗提物与水的质量体积分数为0.03～0.05g/mL，有机试剂为正丁醇，粗多酚溶液与有机试剂的体积比为1：1～1：1.5。
7.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤S3中，选用AB-8大孔树脂。
8.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤S4中，上样溶液浓度为2～3mg/mL，以2～3BV/min流速上样4BV，先用4BV的去离子水去除杂质后，用70～75％乙醇以2.5～3BV/min的流速洗脱下目标物。
9.一种根据权利要求1-8中任一项所述方法制得的高抗氧化活性青稞嫩叶多酚。
10.一种根据权利要求1-8中任一项所述方法制得的高抗氧化活性青稞嫩叶多酚在制备保健食品中的用途。
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| CN202311526571.4A CN117581988A (zh) | 2023-11-15 | 2023-11-15 | 一种高抗氧化活性青稞嫩叶多酚的提取分离纯化方法 |
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