CN117568211A - 一株具有抗沙门氏菌感染功能的植物乳植杆菌goldgut-lp618及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及益生菌技术领域，具体涉及一株具有抗沙门氏菌感染功能的植物乳植杆菌GOLDGUT‑LP618及其应用。本发明提供的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT‑LP618保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.28399。该菌株具有较高的耐酸和耐胆盐能力，可适应消化道环境；能够抑制沙门氏菌感染，缓解因沙门氏菌感染导致的腹泻、炎症和肠道损伤，促进肠道健康，可用于制备抗沙门氏菌感染、改善因沙门氏菌感染导致的腹泻和炎症的功能食品、膳食补充剂或药物，具有较好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及益生菌技术领域，尤其涉及一株具有抗沙门氏菌感染功能的植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618及其应用。
背景技术
不慎摄入含有毒有害物质或病原体的食物会造成多种食源性疾病，细菌性食物中毒是其中的主要类型。沙门氏菌属于肠杆菌科，是蛋、肉、奶等食品、水源的重要污染菌，也是重要的食源性致病菌。根据沙门氏菌血清型、菌株毒力、感染剂量和个人免疫状况不同，摄入沙门氏菌污染的食物会造成不同严重程度的感染，通常患者会出现发热、急性胃肠炎、腹痛腹泻、恶心呕吐等症状，其中严重腹泻造成的脱水和体液流失是患者死亡的主要原因。尽管大部分沙门氏菌感染可以自愈，但对严重腹泻患者，药物治疗是必要的。补充电解质的支持疗法和抗生素清除病原体疗法是常用的治疗方式，但由于沙门氏菌可能对最常用的抗生素产生抗药性，抗生素疗法受到限制。此外，抗生素治疗引起的肠道菌群失调也会进一步导致急性腹泻。由于目前尚无有效的口服疫苗来预防沙门氏菌感染，定植在肠道的益生菌逐渐被视为可选的替代方案。益生菌能够占领肠道生态位、维持肠道菌群稳定、增强免疫力，在预防和抑制沙门氏菌感染方面发挥重要作用。
尽管已有一些菌株具有预防和缓解人或动物沙门氏菌感染的效果，但这些菌株的功能均基于沙门氏菌感染的预防模型设计，这意味着宿主需要在沙门氏菌感染之前，提前定植益生菌，而偶发的沙门氏菌感染通常是不能提前预知的，因此筛选一种通过在沙门氏菌感染之后服用，发挥缓解腹泻症状、降低炎症反应等抗沙门氏菌感染功效的益生菌是很有必要的。
发明内容
本发明提供一株具有抗沙门氏菌感染功能的植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618及其应用。
本发明从健康人体肠道分离获得一株植物乳植杆菌(Lactiplantibacillusplantarum)，经验证，该菌株具有较好的耐胃酸和耐胆盐能力，在体外能产生短链脂肪酸，有较强的体外抑制沙门氏菌生长的特性，能够抑制沙门氏菌感染，治疗因沙门氏菌感染导致的腹泻和炎症，调节肠道健康，在小鼠感染沙门氏菌后进行该菌株的给药，能够促进体内短链脂肪酸生成、降低炎症反应、缓解腹泻症状，发挥抗沙门氏菌感染的作用，为开发具有抑制沙门氏菌作用并改善腹泻和炎症、促进肠道健康的膳食补充剂和保健品提供了菌种基础。
具体地，本发明提供以下技术方案：
本发明提供植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618，该菌株于2023年09月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为植物乳植杆菌Lactiplantibacillus plantarum，保藏编号为CGMCC No.28399。
植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618分离自健康人体肠道，通过细菌形态学、生理学以及16S rDNA测序对该菌株进行鉴定，结果为植物乳植杆菌(Lactiplantibacillusplantarum)，命名为植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618。
植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618具有以下微生物学特性：
(1)形态学特征
革兰染色呈阳性，在MRS固体培养基中培养24h后，菌落较小，呈乳白色、圆形、隆起、光滑。
(2)生理特性
植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618能够在人工胃酸和人工胆盐环境中生长良好，有较好的耐胃酸和耐胆盐能力，有较强的抑制沙门氏菌生长的作用，在动物实验中能有效治疗因沙门氏菌感染引起的腹泻。
植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618可采用以下方法进行培养：将该菌株接种于培养基中，37℃培养24h。所述培养基可以采用本领域常规的培养基，能够使得植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618生长即可，优选采用MRS肉汤培养基，MRS肉汤培养基的配方如下：酪蛋白酶消化物10.0g/L、牛肉粉10.0g/L、酵母粉4.0g/L、柠檬酸三铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.05g/L、葡萄糖20.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、吐温80 1.0g/L，pH＝5.7±0.2，固体培养基加入1.5％琼脂。
经安全性评估，毒力基因分析结果表明，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618不含毒力因子；抗生素耐药性测试结果表明，该菌株不含可转移的抗生素抗性基因；动物毒性实验实验结果表明，小鼠行为和精神状况良好，该菌株属实际无毒级别。
本发明提供一种微生物制剂，所述微生物制剂包含以上所述的植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618。
优选地，所述微生物制剂中，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618以活菌形式存在。
以上所述的微生物制剂可为固体制剂(例如菌粉)或液体制剂(例如乳液制剂)。
本发明提供以上所述的微生物制剂的制备方法，所述方法包括培养所述植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618的步骤。
优选地，所述培养为在35-37℃条件下培养。
优选地，所述培养为在液体培养基中培养，获得菌液。
上述菌液可直接或者经浓缩和/或加入其他辅料制备为液体制剂，或者经干燥制备为固体制剂，或者将菌液中的菌体进行分离再将菌体制备为固体制剂。
基于植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618的功能，本发明提供该菌株的以下应用：
本发明提供植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618或所述微生物制剂在制备抗沙门氏菌感染的产品中的应用。
本发明提供植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618或所述微生物制剂在非疾病治疗目的的抑制沙门氏菌中的应用。
上述非疾病治疗目的的抑制沙门氏菌包括在体外环境(例如食品等)中抑制沙门氏菌。
本发明提供植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618或所述微生物制剂在制备用于预防、缓解或治疗因沙门氏菌感染导致腹泻、炎症和/或肠道损伤的产品中的应用。
在缓解或治疗因沙门氏菌感染导致腹泻、炎症和/或肠道损伤的应用中，可在感染沙门氏菌后，即针对已感染沙门氏菌的受试者给予所述产品。
本发明中，所述沙门杀菌包括但不限于鼠伤寒沙门氏菌、肠沙门氏菌等。
本发明提供植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618或所述微生物制剂在制备用于增加肠道短链脂肪酸含量和/或改善肠道健康的产品中的应用。
以上所述的应用中，所述产品为食品、药物、饲料或饲料添加剂。
本发明还提供植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618或所述微生物制剂在制备食品、药物、饲料或饲料添加剂中的应用。
本发明中，所述食品包括普通食品、膳食补充剂、保健品。
本发明提供一种产品，所述产品包含所述植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618或所述微生物制剂；所述产品为食品、药物、饲料或饲料添加剂。
除包含所述植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618或所述微生物制剂外，所述食品还可包含食品领域允许的原料。所述食品可为膳食补充剂、保健品或发酵食品。
除包含所述植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618或所述微生物制剂外，所述药物还可包含药学领域允许的辅料(例如填充剂、赋型剂、润滑剂、润湿剂、稀释剂等)。药物的制剂类型可为固体制剂(例如粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂等)或液体制剂(例如口服液等)。
与现有技术相比，本发明提供的技术方案的有益效果至少包括：
本发明提供的植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618具有较高的耐酸能力和耐胆盐能力，因此可适应消化道环境；对于沙门氏菌具有较好的抑菌作用；能够抑制沙门氏菌感染，治疗因沙门氏菌感染导致的腹泻、炎症和肠道损伤，促进肠道健康，可用于制备抗沙门氏菌感染、改善因沙门氏菌感染导致的腹泻和炎症，促进肠道健康的功能食品、膳食补充剂或药物，在抗沙门氏菌感染和改善肠道健康等领域具有较好的应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1中植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618的菌落形态。
图2为本发明实施例1中植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618的革兰氏染色图，放大倍数为1000倍。
图3为本发明实施例2中植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618耐酸培养前后CFU计数结果，数据来自三次重复实验，误差线表示标准差，统计分析方法为t test，ns表示p值大于0.05。
图4为本发明实施例3中植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618模拟肠液孵育培养前后CFU计数结果，数据来自三次重复实验，误差线表示标准差，统计分析方法为t test，ns表示p值大于0.05。
图5为本发明实施例4中植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618上清液抑制沙门氏菌生长能力检测结果，其中，MRS代表阴性对照，LP618代表植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618；数据来自四次重复实验，误差线表示标准差，统计分析方法为ANOVA，****表示p值小于0.0001。
图6为本发明实施例5中植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618上清液中乙酸(A)和丙酸(B)浓度检测结果，其中Control代表对照菌株；数据来自三次重复实验，误差线表示标准差，统计分析方法为t test，****表示p值小于0.0001。
图7为本发明实施例6中小鼠体重变化曲线(A)、体重增重率(B)及小鼠粪便评分(C)，误差线表示标准差，统计分析方法为单因素方差分析，*表示p值小于0.05，**表示p值小于0.01，***表示p值小于0.001，****表示p值小于0.0001。
图8为本发明实施例7中小鼠血液免疫细胞数量检测结果，误差线表示标准差，统计分析方法为单因素方差分析，ns表示p值大于0.05，*表示p值小于0.05，**表示p值小于0.01，****表示p值小于0.0001。
图9为本发明实施例7中小鼠血清细胞因子ELISA检测结果，误差线表示标准差，统计分析方法为单因素方差分析，ns表示p值大于0.05，*表示p值小于0.05，**表示p值小于0.01。
图10为本发明实施例8中小鼠空回肠组织H&E染色图，放大倍数为40倍。
图11为本发明实施例8中小鼠空回肠绒毛长度(A)、隐窝深度(B)和绒隐比(C)定量分析结果，误差线表示标准差，统计分析方法为单因素方差分析，ns表示p值大于0.05，**表示p值小于0.01，***表示p值小于0.001。
图12为本发明实施例9中小鼠结肠内容物中短链脂肪酸含量检测结果，误差线表示标准差，统计分析方法为单因素方差分析，ns表示p值大于0.05，*表示p值小于0.05，**表示p值小于0.01，****表示p值小于0.0001。
图7-12中，NC代表空白对照组，STMC代表模型组，POS代表阳性药物组，LP618代表益生菌治疗组。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明中的附图，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
以下实施例中使用的肠沙门氏菌肠炎亚种具体为肠沙门氏菌肠炎亚种(Salmonella enterica subsp.Enterica)BNCC292614，购自北纳生物。
实施例1植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618的分离及鉴定
1、植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618的分离
1.1样品来源
植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618分离自健康人体肠道。
1.2培养基的配制
样品分离和菌株筛选所用的培养基为MRS固体培养基，MRS液体培养基的配方如下：酪蛋白酶消化物10.0g/L、牛肉粉10.0g/L、酵母粉4.0g/L、柠檬酸三铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.05g/L、葡萄糖20.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、吐温80 1.0g/L，加入1.5％琼脂即为MRS固体培养基，pH＝5.7±0.2。
1.3菌株的分离
将1g样品放入10mL MRS液体培养基中，混匀后于37℃下培养，吸取培养后的富集液，进行十倍梯度稀释，选取10E-5、10E-6、10E-7三个稀释梯度的菌液100μL涂于含有无菌MRS固体培养基的培养皿上，于有氧条件下37℃静置培养24-48h，至有明显单菌落形成后，挑取典型菌落，在MRS固体平板培养基上多次划线纯化，直至整个平板上的菌落形态一致，将培养物进行菌株鉴定。
2、植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618的鉴定
2.1菌落特征
植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618在MRS固体培养基中培养24h后，菌落较小，呈乳白色、圆形、隆起、光滑，见图1。
2.2显微镜下形态
植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618菌落涂片：革兰氏染色呈阳性，菌体呈杆状，单个、成对或呈链状排列，见图2。
2.3 16S rDNA鉴定
鉴定单位：擎科生物科技有限公司。
鉴定序列：如SEQ ID NO.1所示。
鉴定结果：根据菌株的序列比对结果结合生理生化结果，确定该菌株为植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)。
实施例2植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618耐胃酸能力测试
人体胃环境中整体pH条件呈强酸性，因此，菌株的耐酸能力是评估其是否能在胃酸环境下存活、定植的重要指标。使用人工胃液模拟胃部环境，取配制好的人工胃液储液100mL，向其中加入1.9mL1M盐酸，加入1瓶消化酶，即得模拟胃液。取植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618菌液4mL，经PBS洗涤重悬后，加入模拟胃液4mL吹打混匀，37℃，厌氧共孵育2h，将模拟胃液孵育前(0h)和孵育后(2h)的菌液梯度稀释至10E(-5)，取10E(-3)、10E(-4)、10E(-5)三个浓度，将稀释液涂布于MRS琼脂平板上。于37℃厌氧培养48h后进行菌落计数。从图3可以看出，经过模拟胃液孵育培养，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618的活菌数没有下降，表明该菌株具有良好的耐胃酸能力。
实施例3植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618耐胆盐能力测试
采用模拟肠液测试菌株胆盐耐受能力。取配制好的人工肠液储液100mL，加入1瓶消化酶混匀，即得模拟肠液。取植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618菌液4mL，经PBS洗涤重悬后，加入模拟肠液4mL吹打混匀，37℃，厌氧共孵育2h，将孵育前(0h)和孵育后(2h)的菌液梯度稀释至10E(-5)，取10E(-3)、10E(-4)、10E(-5)三个浓度，将稀释液涂布于MRS琼脂平板上。于37℃厌氧培养48h后进行菌落计数。从图4可以看出，经过模拟肠液孵育培养，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618的活菌数没有下降，表明该菌株具有良好的胆盐耐受能力。
实施例4植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618体外抑菌能力测试
将植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618以2％(v/v)的接种量转接至新鲜的MRS培养基中，37℃厌氧培养48h后，4000rpm离心10min，取上清经过0.22μm滤膜过滤除菌备用。
将肠沙门氏菌肠炎亚种(Salmonella enterica subsp.Enterica)以2％的接种量转接新鲜的LB培养基中。培养后的菌液用LB培养基调节OD值至1.6后，取100μL沙门氏菌菌液，加入到100mL灭菌后冷却至50℃的LB固体培养基中，混匀后倒平板。平板中培养基凝固之后，用打孔器在平板上打孔，孔中心距离不小于25mm。加入200μL过滤除菌的植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618上清液，在4℃让样本自然扩散3h后，于37℃过夜培养24-48h，测定抑菌圈直径。以MRS培养基作为阴性对照，氨苄青霉素(25μg/mL)作为阳性对照。
从图5可以看出，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618上清液能够有效抑制沙门氏菌生长。
实施例5植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618产酸能力测定
取植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618以4％(v/v)的接种量转接至新鲜的MRS培养基中，37℃厌氧培养24h后，4000rpm离心10min，取上清，使用HPLC方法测定上清液中短链脂肪酸含量。对照菌株为本次筛选实验获得的一株低产酸植物乳植杆菌。
从图6可以看出，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618具有高产乙酸和丙酸的能力。
实施例6植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618改善小鼠感染沙门氏菌后腹泻症状
为了评估植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618在体内抵御沙门氏菌感染的能力，采用小鼠感染鼠伤寒沙门氏菌腹泻模型。将SPF级6周龄雄性BALB/c小鼠适应性饲养一周后，饲喂含5mg/mL的链霉素水两天，随后正常水和食物饲喂一天。禁食禁水4h后，每只小鼠灌胃100μL 5％碳酸氢钠溶液，随即每只小鼠灌胃2×10E8 CFU鼠伤寒沙门氏菌，连续灌胃鼠伤寒沙门氏菌三天诱导腹泻。将鼠伤寒沙门氏菌灌胃诱导腹泻的小鼠分成三组干预，模型组(STMC组)每日每只小鼠灌胃200μL生理盐水；阳性药物组(POS组)每日每只小鼠灌胃200μL左氧氟沙星溶液，给药剂量为8mg/kg；益生菌治疗组(LP618组)每日每只灌胃200μL植物乳植杆GOLDGUT-LP618菌液，活菌数为每只5×10E8 CFU。连续灌胃干预5天。空白对照组(NC组)小鼠不灌胃鼠伤寒沙门氏菌建模，每天灌胃等量生理盐水作为对照。
图7的A显示了在建模和干预期间四组小鼠的体重变化。模型组小鼠体重明显降低，阳性药物组和益生菌治疗组小鼠体重下降减缓。阳性药物和益生菌干预后，小鼠体重增重率较模型组下降明显减缓(图7的B)。
在干预期间，通过观察小鼠排便的状态，以粪便积分的形式来评估小鼠的腹泻状态。0分表示正常大便；1分表示轻度腹泻；2分表示中度腹泻。从图7的C可以看出，空白对照组的小鼠无腹泻现象发生，模型组的小鼠出现了不同程度的腹泻，经过阳性药物干预后小鼠的腹泻状态得到了明显改善，同样植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预后小鼠腹泻的症状也明显有所好转。
实施例7植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618降低小鼠感染沙门氏菌后的炎症反应
为了评估鼠伤寒沙门氏菌对小鼠肠道造成的炎症反应，取小鼠的血液进行了血常规分析。细菌感染时，白细胞和淋巴细胞的数量会降低，中性粒细胞和中间细胞的数量会升高。从图8可以看出，与NC组相比，STMC组小鼠被鼠伤寒沙门氏菌感染后，白细胞总数下降且淋巴细胞的比率显著性降低，中性粒细胞的数量及中间细胞的比率显著升高，这表明小鼠因鼠伤寒沙门氏菌的感染产生了炎症反应。阳性药物干预后，白细胞总数和淋巴细胞的比率显著上升，中间细胞比率和中性粒细胞显著下降，表明其缓解了沙门氏菌导致的炎症反应。同样，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预后，淋巴细胞比率显著升高，中间细胞比率和中性粒细胞比率显著下降，白细胞总数有所升高但并不显著。这表明在灌胃植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618后，沙门氏菌感染引起的炎症得到了一定程度的控制。
取小鼠血清进行ELISA分析，结果见图9。TGF-β作为免疫抑制性细胞因子，在小鼠感染沙门氏菌后，STMC组TGF-β的含量略有下降，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预后，TGF-β的含量显著性增加(图9的A)。另外，与STMC模型组相比，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预后，炎症因子IL-6和IL-17的含量均显著下降(图9的B、C)。血清铁蛋白(ST)的表达与炎症细胞的浸润密切相关，与STMC组相比，灌胃植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618后，ST的含量显著降低(图9的D)。免疫球蛋白A(IgA)可以影响肠道微环境的免疫应答，与STMC组相比，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预组的IgA含量显著提高(图9的E)。
综上所述，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618可以通过降低血清中促炎因子的水平、提高抑炎因子的水平、降低ST含量和促进IgA的分泌来缓解沙门氏菌感染诱导的肠道炎症。
实施例8植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618对小鼠肠道粘膜的保护作用
为了评估植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618是否改善了鼠伤寒沙门氏菌感染造成的小鼠肠道损伤，取空回肠组织进行组织切片和H&E染色分析，结果见图10。NC组肠壁无空隙，固有层结构完整且正常，而STMC组的空肠肠壁变薄，肠壁有空隙，固有层结构松散；肠绒毛变短且失去正常形态，肠通道变宽，形态不完整，并且有少许炎症细胞浸润。相较于模型组，阳性药物和植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预后，肠道形态明显改变，肠道组织形态出现一定的恢复，肠绒毛长度趋于正常，结构相对完整；肠壁空隙恢复，固有层结构正常，黏膜完整，细胞浸润不明显。
对绒毛长度、隐窝深度及绒隐比等进行定量分析，结果见图11。与NC组相比，STMC组感染沙门氏菌后，显著降低了空肠的绒毛长度，隐窝深度并没有发生显著性的提高，但绒隐比值出现显著性下降，这表明沙门氏菌感染严重损害了肠道结构，影响肠道粘膜的结构完整性。与STMC组相比，阳性药物组和植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预后，肠道绒毛长度和绒隐比显著提高。这表明植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预可以显著促进绒毛发育，改善肠道健康，缓解沙门氏菌感染引发的肠道损伤。
实施例9植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618增加小鼠肠道短链脂肪酸含量
为了验证定植植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618是否增加了小鼠肠道短链脂肪酸含量，取小鼠结肠内容物进行短链脂肪酸检测。结果见图12。与NC组相比，鼠伤寒沙门氏菌感染后，STMC组乙酸的含量显著性降低，丙酸的含量显著性增加，丁酸含量没有显著性差异。与STMC组相比，阳性药物组和植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预显著增加了乙酸含量。与STMC组相比，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618干预没有改变丙酸和丁酸的含量。
综上所述，本发明分离筛选获得了一株植物乳植杆菌，命名为植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618。该菌株具有良好的耐胃酸和耐胆盐能力。植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618在体外和体内都能产生短链脂肪酸；在体外具有抑制沙门氏菌的能力，在体内能够缓解鼠伤寒沙门氏菌引起的腹泻、肠道炎症和肠道损伤。小鼠感染鼠伤寒沙门氏菌后，定植植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618能够改善肠道屏障，促进肠道健康，减少腹泻和炎症反应。由此可见，植物乳植杆菌GOLDGUT-LP618是一株能够改善沙门氏菌感染导致的细菌性腹泻且具有抗炎功能的菌株。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (10)
1.植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618，其特征在于，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.28399。
2.一种微生物制剂，其特征在于，所述微生物制剂包含权利要求1所述的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618。
3.权利要求2所述的微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括培养所述植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618的步骤。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述培养为在35-37℃条件下培养。
5.权利要求1所述的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618或权利要求2所述的微生物制剂在制备抗沙门氏菌感染的产品中的应用。
6.权利要求1所述的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618或权利要求2所述的微生物制剂在非疾病治疗目的的抑制沙门氏菌中的应用。
7.权利要求1所述的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618或权利要求2所述的微生物制剂在制备用于预防、缓解或治疗因沙门氏菌感染导致腹泻、炎症和/或肠道损伤的产品中的应用。
8.权利要求1所述的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618或权利要求2所述的微生物制剂在制备用于增加肠道短链脂肪酸含量和/或改善肠道健康的产品中的应用。
9.权利要求1所述的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618或权利要求2所述的微生物制剂在制备食品、药物、饲料或饲料添加剂中的应用。
10.一种产品，其特征在于，所述产品包含权利要求1所述的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)GOLDGUT-LP618或权利要求2所述的微生物制剂；
所述产品为食品、药物、饲料或饲料添加剂。
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