CN117562930B - 预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂及其制备方法、应用 - Google Patents

预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂及其制备方法、应用 Download PDF

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CN117562930B CN202410050928.4A CN202410050928A CN117562930B CN 117562930 B CN117562930 B CN 117562930B CN 202410050928 A CN202410050928 A CN 202410050928A CN 117562930 B CN117562930 B CN 117562930B
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Abstract

本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一种预防幽门螺旋杆菌感染的复合菌剂及其制备方法、应用。预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂包括保藏编号为CGMCC No.18041的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)JYLB‑291、保藏编号为CGMCC No.21373的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)L.Casei21和保藏编号为CGMCC No.21371的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)JYLA‑191。经验证,该复合菌剂能够明显降低幽门螺旋杆菌感染率,而且能够维持炎症细胞平衡,抑制胃部炎症反应,并降低幽门螺杆菌感染者的传染力。

Description

预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂及其制备方法、应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一种预防幽门螺旋杆菌感染的复合菌剂及其制备方法、应用。
背景技术
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp),常寄生在胃黏膜组织中,感染后主要引起慢性胃炎和消化性溃疡等疾病,与胃癌、胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤等疾病有密切的关系,被世界卫生组织(WHO)列为第一类生物致癌因子。全球范围内,不同国家和地区、不同种族人群的幽门螺杆菌感染率有很大差异,我国幽门螺杆菌平均感染率为50%左右。
幽门螺杆菌传染性较强,一般通过消化道进行传播,人-人之间的口-口或粪-口途径是幽门螺杆菌主要的传播途径,即不卫生的饮食习惯是主要的传染方式,比如食用不洁净的食物或饮用不洁净的水,接触了感染者的唾液、体液、呕吐物或粪便排泄物,不洗手进食,与感染者长期密切接触,与感染者共餐,使用感染者用过的不洁饮食器具,幼儿园和学校内儿童、学生之间的密切接触,直接口对口喂食或密切接触等。此外,医院消毒不彻底的内镜也可能导致幽门螺杆菌交叉感染。
目前有较多治疗幽门螺杆菌感染的方法,比如三联疗法、四联疗法或者使用硝酸铋悬液。但是多数幽门螺杆菌感染者在感染早期并无明显症状,长期感染可能会使感染者患上慢性胃炎、消化性溃疡等。因此,在日常生活中做好预防非常重要。一方面,注意饮食卫生、口腔卫生,改变用餐方式,选择分餐制或使用公筷,切断幽门螺杆菌的传播途径,是预防幽门螺杆菌感染、预防胃病与胃癌的重要措施。另一方面,在暴露于感染风险较高的环境前(如聚餐、旅游、内镜检查等),调节肠胃平衡、提高肠胃免疫力也是预防幽门螺杆菌感染的有力途径。目前市面上有较多产品用于治疗幽门螺杆菌感染,但是这些产品多针对于已感染幽门螺杆菌的胃肠道,产品成分复杂、药性强,并不适用于健康胃肠道对幽门螺杆菌的日常预防。
发明内容
针对现有治疗幽门螺杆菌感染的产品成分复杂、药性强,不适用于对幽门螺杆菌的日常预防的技术问题,本发明提供一种预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂及其制备方法、应用,成分温和且安全有效。
第一方面,本发明提供一种预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂,包括保藏编号为CGMCC No.18041的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)JYLB-291、保藏编号为CGMCCNo.21373的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)L.Casei21和保藏编号为CGMCC No.21371的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)JYLA-191。
进一步的,包括如下重量份的组分:1~3份罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、1~3份干酪乳杆菌L.Casei21菌粉和1~3份嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉。
进一步的,罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、干酪乳杆菌L.Casei21菌粉、嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉的菌含量均为1.0×1011~1.5×1011cfu/g。
第二方面,本发明提供一种上述复合菌剂的制备方法,包括:
(1)制备MRS液体培养基;
(2)取保存的罗伊氏乳杆菌JYLB-291、干酪乳杆菌L.Casei21、嗜酸乳杆菌JYLA-191分别接种于MRS液体培养基中培养,制备菌悬液,将菌悬液冷冻干燥后,分别得到罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、干酪乳杆菌L.Casei21菌粉、嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉;
(3)将罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、干酪乳杆菌L.Casei21菌粉和嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉按重量份数混合,制得复合菌剂。
进一步的,MRS液体培养基的制备方法如下:将蛋白胨10g、牛肉粉5g、三水醋酸钠5g、七水磷酸氢二钾2g、吐温80 1mL、四水硫酸锰0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁0.2g、蒸馏水1000mL混合,搅拌均匀,调节pH为6.8,在121℃、0.1MPa下灭菌20min,制得MRS液体培养基。
进一步的,步骤(2)中,各菌株以体积比2%接种至MRS液体培养基,培养温度为37℃,培养时间为24h。
进一步的,步骤(2)中,菌悬液的制备方法为:将各菌株培养液在4000r/min下离心收集菌体,使用无菌生理盐水洗涤后,将菌体重悬于15wt%的麦芽糊精水溶液中,得到菌悬液,调整菌悬液中菌浓度为1.5×1010~2.0×1010cfu/mL。
第三方面,本发明还提供一种上述复合菌剂在制备预防幽门螺杆菌感染的产品方面的应用。
进一步的,预防幽门螺杆菌感染的产品为维持炎症细胞平衡的产品。
进一步的,预防幽门螺杆菌感染的产品为降低幽门螺杆菌携带者传染性的产品。
本发明的有益效果在于:
本发明提供的预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂中,干酪乳杆菌L.Casei 21、罗伊氏乳杆菌JYLB-291具有良好的抑菌消炎功能,而嗜酸乳杆菌JYLA-191具有较强的胃肠液存活能力,三种菌株复配,相互弥补,协同增效。经实验验证,该复合菌剂能够明显降低幽门螺旋杆菌感染率,提高健康人群对幽门螺杆菌的免疫力,帮助健康人群预防幽门螺杆菌感染;而且该复合菌剂能够维持炎症细胞平衡,抑制胃部炎症反应,并降低幽门螺杆菌感染者的传染力。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本发明保护的范围。
本发明实施例中使用的各菌株均为自行采集,信息如下:
罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)JYLB-291,于2019年6月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编:100101,保藏编号:CGMCC No.18041;其他相关信息已公开于专利CN113943687A。
干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)L.Casei21,于2020年12月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编:100101,保藏编号:CGMCC No.21373;其他相关信息已公开于专利CN112625983A。
嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)JYLA-191,于2020年12月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编:100101,保藏编号:CGMCC No.21371;其他相关信息已公开于专利CN112592874A。
实施例1 制备复合菌剂
(1)制备MRS液体培养基:将蛋白胨10g、牛肉粉5g、三水醋酸钠5g、七水磷酸氢二钾2g、吐温80 1mL、四水硫酸锰0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁0.2g、蒸馏水1000mL混合,搅拌均匀,调节pH为6.8,在121℃、0.1MPa下灭菌20min,制得MRS液体培养基。
(2)取保存的罗伊氏乳杆菌JYLB-291、干酪乳杆菌L.Casei21、嗜酸乳杆菌JYLA-191,分别按体积比2%接种于MRS液体培养基中,在37℃条件下培养24h后,在4000r/min下离心收集菌体,使用无菌生理盐水洗涤后,将菌体重悬于15wt%的麦芽糊精水溶液中,得到菌悬液,调整菌悬液中菌浓度为1.5×1010cfu/mL;将菌悬液冷冻干燥后,分别得到菌含量为1.0×1011cfu/g的罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、干酪乳杆菌L.Casei21菌粉、嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉。
(3)将1重量份罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、1重量份干酪乳杆菌L.Casei21菌粉和1重量份嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉混合,制得复合菌剂。
实施例2 制备复合菌剂
与实施例1的不同之处在于,
步骤(2)中,调整菌悬液中菌浓度为2×1010cfu/mL,将菌悬液冷冻干燥后,分别得到菌含量为1.5×1011cfu/g的罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、干酪乳杆菌L.Casei21菌粉、嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉;
步骤(3)中,将1重量份罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、3重量份干酪乳杆菌L.Casei21菌粉和3重量份嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉混合,制得复合菌剂。
实施例3 制备复合菌剂
与实施例1的不同之处在于,
步骤(3)中,将3重量份罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、1重量份干酪乳杆菌L.Casei21菌粉和1重量份嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉混合,制得复合菌剂。
实施例4 复合菌剂对幽门螺杆菌感染率的影响
1、实验准备
取80只SPF级、5周龄雄性BALB/c小鼠,先适应性喂养一周,饲料类别为普通饲料(购自北京科澳协力公司),之后随机分成8组,分别为空白对照组、模型组、对比例1组、对比例2组、对比例3组、实施例1组、实施例2组、实施例3组,每组10只。
2、实验处理
①空白对照组:10只小鼠,普通饲料正常喂养2周,不作其他处理;
②模型组:10只小鼠,普通饲料正常喂养2周;
③对比例1组:10只小鼠,普通饲料正常喂养2周,并每天灌胃一次1mL罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌悬液(1×107cfu/mL);
④对比例2组:10只小鼠,普通饲料正常喂养2周,并每天灌胃一次1mL干酪乳杆菌L.Casei21菌悬液(1×107cfu/mL);
⑤对比例3组:10只小鼠,普通饲料正常喂养2周,并每天灌胃一次1mL嗜酸乳杆菌JYLA-191菌悬液(1×107cfu/mL);
⑥实施例1组:10只小鼠,普通饲料正常喂养2周,并每天灌胃一次1mL实施例1制备的复合菌剂溶液(1×107cfu/mL);
⑦实施例2组:10只小鼠,普通饲料正常喂养2周,并每天灌胃一次1mL实施例2制备的复合菌剂溶液(1×107cfu/mL);
⑧实施例3组:10只小鼠,普通饲料正常喂养2周,并每天灌胃一次1mL实施例3制备的复合菌剂溶液(1×107cfu/mL);
②-⑧组别的小鼠,在第一周的最后连续三天,每天一次灌胃0.3mL混合抗生素溶液(包含氨苄青霉素10mg/mL、庆大霉素1.2mg/mL、阿奇霉素10mg/mL),第二周每天一次灌胃0.3mL新鲜幽门螺杆菌ATCC 43504菌液(1×109cfu/mL)。
3、实验结果
两周后,脱颈处死所有小鼠,取1条胃组织加入500μL尿素酶试剂(幽门螺旋杆菌诊断试剂盒,购自青岛海博生物技术有限公司),混匀,室温孵育4h,观察试剂颜色变化。统计并记录所有小鼠的幽门螺旋杆菌感染情况,结果如表1所示。
表1 小鼠幽门螺杆菌感染数量
由表1可以看出,模型组小鼠幽门螺杆菌的感染率为100%,表示造模成功。与模型组和对比例1-3组相比,实施例1组、实施例2组和实施例3组灌胃复合菌剂能够大幅降低感染幽门螺杆菌小鼠的数量,说明复合菌剂对于幽门螺旋杆菌的感染有较强的抑制作用,且抑制效果显著优于单菌剂处理。
实施例5 复合菌剂对预防幽门螺杆菌感染的影响
1、实验准备
将90只SPF级、5周龄雄性BALB/c小鼠先适应性喂养一周,饲料类别为普通饲料(购自北京科澳协力公司),之后随机分成6组,处理如下:
①正常小鼠:25只,普通饲料喂养2周。
②模型小鼠:25只,普通饲料喂养2周;第一周的最后连续三天,每天一次灌胃混合抗生素溶液(包含氨苄青霉素10mg/mL、庆大霉素1.2mg/mL、阿奇霉素10mg/mL),第二周每天灌胃0.3mL新鲜幽门螺杆菌ATCC 43504菌液(1×109cfu/g),每天一次。
造模判定:取5只正常小鼠和5只模型小鼠,脱颈处死后,取1条胃组织加入500μL尿素酶试剂,混匀,室温孵育4h,观察试剂颜色变化。5只正常小鼠试剂为黄色,判定为阴性,5只模型小鼠试剂为玫瑰红色,判定为阳性,说明幽门螺杆菌感染模型小鼠造模成功。
③1号小鼠:10只,普通饲料喂养2周;2周内,每天灌胃一次1mL罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌悬液(1×107cfu/mL)。
④2号小鼠:10只,普通饲料喂养2周;2周内,每天灌胃一次1mL干酪乳杆菌L.Casei21菌悬液(1×107cfu/mL)。
⑤3号小鼠:10只,普通饲料喂养2周;2周内,每天灌胃一次1mL嗜酸乳杆菌JYLA-191菌悬液(1×107cfu/mL)。
⑥4号小鼠:10只,普通饲料喂养2周;2周内,每天灌胃一次1mL实施例1制备的复合菌剂溶液(1×107cfu/mL)。
2、小鼠幽门螺旋杆菌传染实验
将小鼠重新分组进行饲养,具体分组如下:
对照组:正常小鼠10只,同笼饲养2周。
模型组:正常小鼠10只,模型小鼠4只,同笼饲养2周。
对比1组:1号小鼠10只,模型小鼠4只,同笼饲养2周。
对比2组:2号小鼠10只,模型小鼠4只,同笼饲养2周。
对比3组:3号小鼠10只,模型小鼠4只,同笼饲养2周。
实验1组:4号小鼠10只,模型小鼠4只,同笼饲养2周。
3、实验结果
两周后,脱颈处死所有小鼠,取1条胃组织加入500μL尿素酶试剂,混匀,室温孵育4h,观察试剂颜色变化。统计并记录所有小鼠的幽门螺旋杆菌感染情况,结果如表2所示。
表2 小鼠幽门螺杆菌感染情况
由表2数据可知,与模型组相比,实验1组小鼠感染幽门螺旋杆菌的数量明显减少,且显著低于对比1组、对比2组和对比3组,说明本发明提供的复合菌剂可以有效预防幽门螺杆菌感染,且预防效果显著优于单菌剂处理。
4、小鼠脾脏中Th-17和Treg的细胞比例
将感染幽门螺旋杆菌的小鼠及对照组10只正常小鼠的脾脏取出,在200目纱布上轻轻研磨,制成单细胞悬液,用PBS缓冲液再清洗一次,4℃离心10min弃上清液,用PBS重悬细胞后,再用等体积小鼠淋巴细胞分离液将悬液分成四层,取灰色单核细胞层,在用PBS悬浮细胞,4℃离心10min,弃上清液,再用小牛血清悬浮细胞,调整细胞密度为107/L,锥虫蓝染色计数活细胞数在95%以上,取1mL悬液加入佛波酯(50ng/mL PMA)20μL,离子霉素(500ng/mL,Ionomycin)50μL,阻断剂BFA 1μL,37℃培养50mL/L CO2培养箱培养4h,移液至对应的流式管中,PBS洗2次,弃上清,100μL PBS重悬细胞,往对应流式管内加入anti-CD4-FITC,anti-CD25-PE,4℃避光孵育30min,PBS洗2次,弃上清,沉淀用1mL 1×concentrate/dilute重悬,涡旋4℃过夜。每个流式管内加入2mL 1×Perf(Buffer)洗2次,弃上清,100μL1×Perf(Buffer)洗2次,弃上清,100μL 1×Perf重悬加入anti-IL-17-PE,anti-foxP3-APC,4℃避光孵育30min,2mL 1×Perf洗两次,弃上清,300μL PBS重悬细胞,上流式细胞仪,检测TH17和Terg细胞数,如表3所示。
表3 各组小鼠Th-17和Treg细胞比例
注:*表示与对照组相比,P<0.05;#表示与模型组相比,P<0.05。
由表3可以看出,与对照组相比,模型组小鼠Th-17细胞有明显的升高,表明感染幽门螺杆菌已经破坏了炎症细胞的平衡,会造成明显的炎症反应;而实验1组感染幽门螺杆菌的小鼠Th-17和Treg细胞与对照组没有显著差异,说明本发明提供的复合菌剂对感染幽门螺旋杆菌的小鼠具有稳定炎症细胞Th-17和Treg平衡的效果。对比1-3组小鼠的Th-17和Treg细胞比例与模型组相比有显著下降,但与对照组仍有显著差异,说明复合菌剂中各菌剂协同增效,稳定炎症的效果明显优于单菌剂。
实施例6 复合菌剂对幽门螺杆菌传染力的抑制作用
1、实验准备
将 90 只SPF级、5周龄雄性BALB/c小鼠先适应性喂养一周,饲料类别为普通饲料(购自北京科澳协力公司),之后随机分成2组,处理如下:
①正常小鼠:65只,普通饲料喂养2周。
②模型小鼠:25只,普通饲料喂养2周;第一周的最后连续三天,每天一次灌胃混合抗生素溶液(包含氨苄青霉素10mg/mL、庆大霉素1.2mg/mL、阿奇霉素10mg/mL),第二周每天灌胃0.3mL新鲜幽门螺杆菌ATCC 43504菌液(1×109cfu/g),每天一次。
造模判定:取5只正常小鼠和5只模型小鼠,脱颈处死后,取1条胃组织加入500μL尿素酶试剂,混匀,室温孵育4h,观察试剂颜色变化。5只正常小鼠试剂为黄色,判定为阴性,5只模型小鼠试剂为玫瑰红色,判定为阳性,说明幽门螺杆菌感染模型小鼠造模成功。
造模成功后,将16只模型小鼠分成4组,具体分组及处理如下:
a组小鼠:模型小鼠10只,普通饲料喂养2周;2周内,每天灌胃一次1mL罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌悬液(1×107cfu/mL)。
b组小鼠:模型小鼠10只,普通饲料喂养2周;2周内,每天灌胃一次1mL干酪乳杆菌L.Casei21菌悬液(1×107cfu/mL)。
c组小鼠:模型小鼠10只,普通饲料喂养2周;2周内,每天灌胃一次1mL嗜酸乳杆菌JYLA-191菌悬液(1×107cfu/mL)。
d组小鼠:模型小鼠10只,普通饲料喂养2周;2周内,每天灌胃一次1mL实施例1制备的复合菌剂溶液(1×107cfu/mL)。
其余小鼠正常饲养2周。
2、小鼠的幽门螺旋杆菌传染实验
将所有小鼠分为6个组,具体分组如下:
对照组:正常小鼠10只,饲养2周。
模型组:正常小鼠10只,模型小鼠4只,同笼饲养2周。
对比1组:正常小鼠10只,a组小鼠4只,同笼饲养2周。
对比2组:正常小鼠10只,b组小鼠4只,同笼饲养2周。
对比3组:正常小鼠10只,c组小鼠4只,同笼饲养2周。
实验1组:正常小鼠10只,d组小鼠4只,同笼饲养2周。
3、实验结果
两周后,脱颈处死所有小鼠,取1条胃组织加入500μL尿素酶试剂,混匀,室温孵育4h,观察试剂颜色变化。统计并记录所有小鼠的幽门螺旋杆菌感染情况,结果如表4所示。
表4 小鼠幽门螺杆菌感染情况
由表4可以看出,灌胃实施例1制备的复合菌剂后,感染幽门螺杆菌的模型小鼠能够转为阴性,而且传染性大幅降低,不能导致其他正常小鼠感染,说明本发明提供的复合菌剂对于幽门螺旋杆菌感染者的传染力有较强的抑制作用。
尽管通过优选实施例的方式对本发明进行了详细描述,但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下,本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换,而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1. 一种预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂,其特征在于,由如下重量份的组分组成:1~3份罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)JYLB-291菌粉、1~3份干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)L.Casei21菌粉和1~3份嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)JYLA-191菌粉;罗伊氏乳杆菌JYLB-291的保藏编号为CGMCC No.18041,干酪乳杆菌L.Casei21的保藏编号为CGMCC No.21373;嗜酸乳杆菌JYLA-191的保藏编号为CGMCCNo.21371;罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、干酪乳杆菌L.Casei21菌粉、嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉的菌含量均为1.0×1011~1.5×1011cfu/g。
2.一种如权利要求1所述复合菌剂的制备方法,其特征在于,包括:
(1)制备MRS液体培养基;
(2)取保存的罗伊氏乳杆菌JYLB-291、干酪乳杆菌L.Casei21、嗜酸乳杆菌JYLA-191分别接种于MRS液体培养基中培养,制备菌悬液,将菌悬液冷冻干燥后,分别得到罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、干酪乳杆菌L.Casei21菌粉、嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉;
(3)将罗伊氏乳杆菌JYLB-291菌粉、干酪乳杆菌L.Casei21菌粉和嗜酸乳杆菌JYLA-191菌粉按重量份数混合,制得复合菌剂。
3. 如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,MRS液体培养基的制备方法如下:将蛋白胨10g、牛肉粉5g、三水醋酸钠5g、七水磷酸氢二钾2g、吐温80 1mL、四水硫酸锰0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁0.2g、蒸馏水1000mL混合,搅拌均匀,调节pH为6.8,在121℃、0.1MPa下灭菌20min,制得MRS液体培养基。
4.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,各菌株以体积比2%接种至MRS液体培养基,培养温度为37℃,培养时间为24h。
5.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,菌悬液的制备方法为:将各菌株培养液在4000r/min下离心收集菌体,使用无菌生理盐水洗涤后,将菌体重悬于15wt%的麦芽糊精水溶液中,得到菌悬液,调整菌悬液中菌浓度为1.5×1010~2.0×1010cfu/mL。
6.一种如权利要求1所述复合菌剂在制备预防幽门螺杆菌感染的药品方面的应用。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,预防幽门螺杆菌感染的药品为维持炎症细胞平衡的药品。
8.如权利要求6所述的应用,其特征在于,预防幽门螺杆菌感染的药品为降低幽门螺杆菌携带者传染性的药品。
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