CN117545501A - 改善抗体制剂的稳定性的方法 - Google Patents

改善抗体制剂的稳定性的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN117545501A
CN117545501A CN202280044125.7A CN202280044125A CN117545501A CN 117545501 A CN117545501 A CN 117545501A CN 202280044125 A CN202280044125 A CN 202280044125A CN 117545501 A CN117545501 A CN 117545501A
Authority
CN
China
Prior art keywords
antibody
formulation
composition
acid
histidine buffer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280044125.7A
Other languages
English (en)
Inventor
M·贾亚拉曼
S·瓦苏迪欧帕哈勒
S·高希
S·R·P·尔勒
A·萨哈
S·拉巴拉
M·英戈尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Dr Reddys Laboratories Ltd
Original Assignee
Dr Reddys Laboratories Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dr Reddys Laboratories Ltd filed Critical Dr Reddys Laboratories Ltd
Publication of CN117545501A publication Critical patent/CN117545501A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2839—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明公开了一种α4β7抗体的稳定制剂，其中所述制剂包含α4β7抗、氨基酸、单羧酸或二羧酸、以及表面活性剂。所公开的抗体制剂是液体高浓度制剂，其也适于不同的给药方式(皮下/静脉)。所公开的制剂在各种加速压力条件下表现出稳定性。

Description

改善抗体制剂的稳定性的方法
技术领域
本发明涉及一种抗体分子的稳定水性高浓度制剂，其中制剂中存在的抗体用具有物理化学稳定性的赋形剂溶解。所公开的制剂稳定约50mg/ml至约200mg/ml的抗体，其适用于静脉或皮下的给药途径。
发明背景
在过去的二十年里，重组DNA技术导致了许多蛋白质的商业化，尤其是抗体治疗法。这些治疗用抗体的有效性主要取决于其稳定性、给药途径、剂型和浓度。这反过来需要适当制备治疗用抗体，以保持治疗用抗体的稳定性和活性。
每种给药途径和剂型的制剂都可以是独特的，因此，制剂具有特定的要求。固体剂型(例如冻干粉末)通常比液体(水性)制剂更稳定。然而，相较于液体制剂，冻干制剂的重构需要大量的小瓶过量灌装、小心处理并且生产成本较高。虽然液体制剂在这些方面具有优势，并且通常优选用于注射蛋白质治疗法(在方便最终用户和便于制造商制备方面)，但是鉴于蛋白质在压力(温度、pH变化、搅拌等)下变性、聚集、氧化的易发性，这种剂型可能不是总是可行的。所有的这些压力因素都可导致治疗用蛋白质/抗体的生物活性的丧失。
特别是，高浓度的液体蛋白质/抗体制剂具有较低的溶解度，并且容易降解和/或聚集。这可能导致胶体不稳定和蛋白质的功能丧失。尽管如此，高浓度制剂可能适用于皮下注射或静脉注射的给药途径，因为这降低了给药的频率和注射体积。另一方面，特定的治疗计划和剂量可能需要低浓度制剂，并且优选静脉注射的给药途径，以实现更高的递送可预测性和治疗用药物的完全生物利用度。
此外，具有较高的表面疏水性的单克隆抗体通常具有较低的溶解度。这种较低的溶解度是由于较高的分子间的相互作用，且在高浓度抗体时更为明显，并且可能导致胶体不稳定或乳光(opalescence)的形成。溶液的乳光/浑浊外观损害了蛋白质制剂的美观性，并且还表明溶液中存在聚集体，或者体系有发生液-液相分离的趋势，这表明产品不稳定，可能是潜在的安全问题。
选择用于稳定(高浓度)制剂的赋形剂需要考虑上述所有因素。此外，当制剂以治疗为目的时，还需要考虑减少任何赋形剂在注射部位造成的疼痛。例如，已知在治疗用制剂中使用柠檬酸会引起注射部位中的疼痛或者注射部位疼痛，并且疼痛会随着这种赋形剂的浓度的增加而增加(Shi,G.H.,Pisupati,K.,Parker,J.G.et al.Subcutaneous InjectionSite Pain of Formulation Matrices.Pharm Res 38,779–793(2021).https://doi.org/10.1007/s11095-021-03047-3)。
因此，设计一种在高浓度的治疗用蛋白质/抗体的条件下稳定并且同时又能够改善用户体验的制剂，是一项重大的研发挑战。因此，为了改善药物分子的生物利用度和功能疗效，改善现有的治疗用药物蛋白质的制剂是持续需求。本发明旨在解决上述挑战和需求。
发明简述
本发明公开了一种α4β7抗体的高浓度制剂，其中包含约100mg/ml至约200mg/ml的抗体。特别是本发明公开了一种在组氨酸缓冲液组合物中的无柠檬酸高浓度α4β7抗体制剂。本制剂的缓冲液组合物包含不同于柠檬酸的羧酸，并且该羧酸组分是单羧酸或二羧酸，或其衍生物。
所述制剂中的抗体是稳定的，且，即使在40℃下储存4周；在25℃下储存6个月；以及在2-8℃下储存6个月或更长时间，制剂中的抗体仍然保持至少97％的单体含量。此外，制剂组合物不需要抗氧化剂来维持其稳定性，并且尤其是公开的α4β7抗体制剂不含柠檬酸盐。
具体而言，本发明公开了一种方法，该方法是在抗体生产的预配制和/或配制阶段，通过向抗体组合物中添加乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸或其衍生物，减少α4β7抗体组合物中α4β7抗体的电荷变体、脱酰胺作用、和/或聚集。
本发明还公开了一种控制α4β7抗体组合物的乳光的方法，该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤，向抗体组合物中添加乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸盐或其衍生物，以保持抗体在组合物中的可溶形式，从而保持乳光。此外，上述步骤获得的制剂的乳光与参考乳光标准(ROS)Ⅲ或Ⅳ一致。
本发明还公开了一种方法，该方法是通过将抗体制备于缓冲液组合物中，赋予α4β7抗体胶体稳定性，所述缓冲液组合物包含组氨酸缓冲液、以及乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸或其衍生物。
本发明的α4β7抗体制剂在至少一种下述条件下储存时具备稳定性，例如在2-8℃下储存6个月；在25℃下储存6个月；在40℃下储存1个月。在上述条件下储存时，α4β7抗体制剂的聚集体含量低于2.5％。
此外，本发明公开了一种控制α4β7抗体组合物中，特别是维得利珠单抗(vedolizumab)抗体组合物中亚可见颗粒(sub-visible particle)的方法，，其中该方法包括在组氨酸缓冲液组合物中制备抗体组合物，组氨酸缓冲液组合物pH为6.3至6.8，并且包含单羧酸或二羧酸、精氨酸、表面活性剂，以及任选地包含糖或氨基酸。具体来说，本公开的方法控制亚可见颗粒，其尺寸范围是≥10μm，以及≥25μm，远低于可接受的监管限制。此外，在组氨酸缓冲液、单羧酸/二羧酸、精氨酸以及表面活性剂的组合物中制备的维得利珠单抗抗体在室温下储存六个月后，其中包含更少的聚集体含量，少于2％。
发明详述
定义
术语“约”指的是与所述参考值相似的数值范围，并且包括所述参考值的20％或更小的范围的数值范围。
术语“抗体”指的是包含通过二硫键相互连接的两条重链(H)和两条轻链(L)的糖蛋白，或其抗原结合部分。本文使用的“抗体”包含完整的抗体或者任何抗原结合片段(即，“抗原结合部分”)或其融合蛋白。
术语“抗α4β7抗体”指的是与α4β7受体结合的抗体。维得利珠单抗是一种抗α4β7抗体，并且该抗体的序列在US7147851中公开。
术语“稳定的”制剂指的是制剂中的抗体在储存后保持其物理稳定性和/或化学稳定性和/或生物活性的制剂。
稳定性研究提供抗体在一段时间的各种环境因素的影响下的质量的证明。ICH的“Q1A：新的药物物质和产品的稳定性测试”指出，加速稳定性研究的数据可用于评估在抗体的运输中可能发生的短期高于或者低于标注储存条件的影响。
不同分析方法可用于测量药物制剂中抗体的物理和化学降解。如果根据目测颜色和/或透明度，或者通过紫外光散射或者通过尺寸排阻层析(size exclusionchromatography)测量，基本上没有抗体聚集、沉淀和/或变形的迹象，则抗体在药物制剂中“保持其物理稳定性”。当抗体没有或者极少形成产品变体时，抗体被称为在药物制剂中“保持其化学稳定性”，所述产品变体可包括对感兴趣的抗体进行化学修饰(例如脱氨、氧化等)产生的抗体。例如离子交换层析(ion exchange chromatography)和疏水离子层析(hydrophobic ion chromatography)等分析方法可用于研究化学产品变体。
本文使用的术语“单体”描述由两条轻链和两条重链组成的抗体。抗体组合物的单体含量通常用尺寸排阻层析(SEC)进行分析。根据SEC的分离原理，大分子或具有高分子量(HMW)的分子首先洗脱，随后是较小或者较低分子量的分子。在抗体组合物的典型SEC图谱中，聚集体(可能包括二聚体、多聚体等)首先洗脱，随后是单体，最后洗脱的可能是剪切抗体变体或者降解物。在某些情况下，聚集体峰或者降解物峰可能不会以基线分离峰的形式洗脱，而是以肩峰或者异常宽峰的形式洗脱。为了保持抗体的适当的活性，尤其是治疗用抗体，减少聚集体的形成或产品的片段化是可取的，并且因此控制单体含量至目标值。在稳定性研究中，根据在不同时间点的测量，抑制聚集体形成和降解物含量的能力可表明候选制剂对感兴趣的抗体的适用性。来自TOSCH的TSK-GEL G3000SWXL(7.8mm x 30cm)层析柱可用于水HPLC以进行SEC。
本文使用的术语“主峰”指的是在阳离子交换层析(cation exchangechromatography)过程中大量洗脱的峰(主峰)。在阳离子交换层析过程中，早于主峰洗脱的峰具有相较于主峰呈酸性的电荷，被称为酸性变异峰。在阳离子交换层析过程中，晚于主峰洗脱的峰具有相较于主峰呈碱性的电荷，被称为碱性变异峰。主峰含量可以用离子交换层析(IEO)确定。IEC由两种模式。即阳离子交换层析和阴离子交换层析。带负电荷的分子与阴离子交换树脂结合，带正电荷的分子与阳离子交换树脂结合。在抗体组合物的典型的阳离子交换层析图谱中，酸性变体首先洗脱，随后是主峰洗脱，最后是碱性变体洗脱，酸性变体是抗体修饰的结果，例如天冬酰胺残基的脱酰胺作用。碱性变体是C端赖氨酸残基的不完全去除的结果。一般来说，在抗体的重链和轻链的C端都存在一个赖氨酸残基。在重链和轻链上都含有赖氨酸的抗体分子被称为K2变体，在重链和轻链中任何一条上含有赖氨酸的抗体分子被称为K1变体，以及，没有赖氨酸残基的抗体分子是K0分子。羧肽酶B(Carboxypeptidase B)(CP-B酶)作用于K2和K1变体中存在的C端赖氨酸残基，并且因此将其转化为K0分子。根据具体情况，可以对用羧肽酶B(CP-B)消化的样本进行IEC分析。在典型的稳定性分析中，在研究过程中，稳定的制剂导致电荷变体(酸性变体和碱性变体)形成的减少是可以预期的，并且因此将主峰含量的任何减少最小化。
药学上可接受的赋形剂指的是添加剂或者载体，它们可能有助于制剂中抗体的稳定性。赋形剂可包含稳定剂和张力调节剂。稳定剂和张力调节剂的例子包括但不限于盐、表面活性剂、和衍生物及其组合。
本文使用的术语糖包括糖和糖醇/多元醇。糖可以指单糖、双糖和多糖。糖的例子包括但不限于蔗糖、海藻糖、葡萄糖、右旋糖、棉子糖等。糖醇的例子包括但不限于甘露醇、山梨醇等。
表面活性剂指的是药学上可接受的赋形剂，用于保护蛋白质制剂以防各种压力条件，例如搅拌、剪切、暴露于高温等。适合的表面活性剂包括但不限于聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯(polyoxyethylensorbitan fatty acid esters)(例如Tween 20TM或Tween 80TM)、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(例如泊洛沙姆(Poloxamer)、普兰尼克(Pluronic))、十二烷基硫酸钠(SDS)等或其组合。
盐的例子包括但不限于氯化钠、氯化钾、氯化镁、硫氰酸钠、硫氰酸铵、硫酸铵、氯化铵、氯化钙、氯化锌和/或醋酸钠。
术语“乳光”或“乳光外观”指的是在溶液(例如蛋白质制剂)中检测到的浊度与溶液中一种或多种成分浓度(例如蛋白质和/或盐浓度)的函数关系。可以参照使用已知浊度的悬浮液生成的标准曲线计算浊度。确定药物组合物的浊度的参考标准可以基于美国药典或欧洲药典标准。此处，在本发明中测量乳光，首先通过混合等体积的硫酸肼溶液和六亚甲基四胺溶液来制备福尔马肼溶液，然后稀释以制备各种参考乳光标准。如光标准包括ROS-Ⅰ、ROS-Ⅱ、ROS-Ⅲ和ROS-Ⅳ。
比浊法(Nephelometry)是一种浊度测量方法，用于检测是否存在可溶性聚集体或显示乳光。输出结果以浊度单位(NTU)表示。
“预配制步骤”指的是在将蛋白质配制成治疗用产品之前执行的任何或多个步骤。这些步骤的例子包括层析、过滤(超滤、无菌过滤、纳滤、渗滤、切向流过滤、深度过滤)，或为浓缩蛋白质或将缓冲液换成不同/合适的缓冲液而执行的任何其他步骤。这里提到的过滤步骤可以在切向流过滤模式下进行。
“配制步骤”指的是在过滤/下游层析步骤之后，将在预配制步骤中获得的药物物质配制成药物产品的步骤。
术语“单羧酸”指的是具有一个羧基(COOH)官能团的有机分子。例子包括但不限于乙酸、乳酸。
术语“二羧酸”指的是具有两个羧基(COOH)官能团的有机分子。例子包括但不限于琥珀酸、谷氨酸。
术语“三羧酸”指的是具有三个羧基(COOH)官能团的有机分子。例子是柠檬酸。
本发明中，用微流成像(Micro Flow Imaging)技术测量不溶性微粒。微流成像(MFI)是显微镜、射流技术(fluidics)和成像技术的整合，用于量化不溶性微粒并对其进行表征。在波长为470nm的LED的持续照射下，样本流通过以5X的固定放大倍率的照相机视野为中心、深度为100微米的流动池时，以连续帧捕捉明场像(由于样本中颗粒的反射而在明亮背景下形成的暗图像)。检测受到颗粒对比度和可用像素的限制。MFI的测量结果是颗粒浓度(计数/mL)和形状/形态。
本发明的某些具体方面和实施方案将通过参考以下实施例进行更全面的描述。但是，这些实施例不应被理解为以任何方式限制本发明的范围。
实施方案详述
本发明公开了一种α4β7抗体的药物制剂，其包含在组氨酸缓冲液组合物中的α4β7抗体，所述组氨酸缓冲液组合物包含单羧酸或二羧酸或其衍生物。
在上述实施方案中，单羧酸是乙酸或乳酸，二羧酸是琥珀酸或谷氨酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种α4β7抗体的药物制剂，其中包含α4β7抗体、组氨酸缓冲液、单羧酸或二羧酸或其衍生物。
本发明公开的制剂不需要存在抗氧化剂。具体而言，本发明公开的制剂不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种α4β7抗体的药物制剂，其中包含α4β7抗体、组氨酸缓冲液、选自乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸或其衍生物的任意一种赋形剂，其中该制剂不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种不含柠檬酸的高浓度的维得利珠单抗制剂，其中包含维得利珠单抗抗体、组氨酸缓冲液、选自乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸或其衍生物的任意一种赋形剂。
在本发明的上述实施方案中，α4β7/维得利珠单抗抗体的浓度是约160mg/ml-180mg/ml。
在一个实施方案中，本发明公开了一种高浓度的α4β7抗体制剂，其中包含约160mg/ml-180mg/ml的α4β7抗体、缓冲液、精氨酸、乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸或其衍生物、以及表面活性剂。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种高浓度的α4β7抗体制剂，其中包含约160mg/ml-180mg/ml的α4β7抗体、50mM组氨酸缓冲液、5-50mM乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸、100-125mM精氨酸、以及0.6mg/ml聚山梨醇酯-80。
在上述实施方案中，α4β7抗体制剂在40℃下保持稳定两周。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制高浓度的α4β7抗体组合物中的乳光的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加单羧酸或其衍生物，其中所述方法保持抗体为可溶形式，并且从而控制乳光。
在上述实施方案中，单羧酸是乙酸或乳酸。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制高浓度的α4β7抗体组合物中的乳光的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加乙酸或其衍生物，其中所述方法保持抗体为可溶形式，并且从而控制乳光。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制高浓度的α4β7抗体组合物中的乳光的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加乳酸或其衍生物，其中所述方法保持抗体为可溶形式，并且从而控制乳光。
在上述实施方案中，所述制剂还包含糖、氨基酸和/或盐。
在上述实施方案中，所述抗体的浓度是约160mg/ml或更多。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制高浓度的α4β7抗体组合物中的乳光的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加二羧酸或其衍生物，其中所述方法保持抗体为可溶形式，并且从而控制乳光。
在上述实施方案中，二羧酸是琥珀酸或谷氨酸。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制高浓度的α4β7抗体组合物中的乳光的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加琥珀酸和/或其衍生物，其中所述方法保持抗体为可溶形式，并且从而控制乳光。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制高浓度的α4β7抗体组合物中的乳光的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加谷氨酸或其衍生物，其中所述方法保持抗体为可溶形式，并且从而控制乳光。
在上述实施方案中，所述抗体的浓度是约160mg/ml或更多。
在一个实施方案中，本发明公开了一种制备α4β7抗体组合物的方法，用于控制/减少所述组合物中亚可见颗粒的数量，该方法包括：
a)获得纯化的α4β7抗体组合物
b)向抗体组合物中添加组氨酸缓冲液，该组氨酸缓冲液包含单羧酸或二羧酸
c)将步骤b)中获得的抗体组合物浓缩至约160mg/ml，随后，
d)向浓缩的抗体组合物中添加精氨酸，以获得最终抗体组合物，
其中，相较于在浓缩抗体组合物之前(即，步骤b))添加了精氨酸的组合物，最终抗体组合物的亚可见颗粒的数量被控制/减少。
在上述实施方案中，步骤b)中使用的组氨酸缓冲液不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种制备α4β7抗体组合物的方法，用于控制/减少所述组合物中亚可见颗粒的数量，该方法包括：
a)获得纯化的α4β7抗体组合物
b)向抗体组合物中添加组氨酸缓冲液，该组氨酸缓冲液包含乙酸或琥珀酸或乳酸
c)将步骤b)中获得的抗体组合物浓缩至约160mg/ml，随后，
d)向浓缩的抗体组合物中添加精氨酸，以获得最终抗体组合物，
其中，相较于在浓缩抗体组合物之前(即，步骤b))添加了精氨酸的组合物，最终抗体组合物的亚可见颗粒的数量被控制/减少。
在上述实施方案中，步骤b)中使用的组氨酸缓冲液不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体组合物中的亚可见颗粒的形成的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含单羧酸或二羧酸或其衍生物、氨基酸和表面活性剂。单羧酸是乙酸或乳酸，二羧酸是琥珀酸或谷氨酸。
在上述实施方案中，所述制剂任选地包含糖和/或盐。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体组合物中尺寸≥10μm的亚可见颗粒的形成的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含乙酸或乳酸或琥珀酸、精氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案中，当在5℃下储存六个月时，在每毫升抗体组合物中，亚可见颗粒被控制在1000个颗粒以下。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体组合物中尺寸≥10μm的亚可见颗粒的形成的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含乙酸或乳酸、海藻糖、精氨酸和表面活性剂。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体组合物中尺寸≥10μm的亚可见颗粒的形成的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含乙酸或乳酸、甘氨酸、精氨酸和表面活性剂，其中在每毫升抗体组合物中，微粒被控制在500个颗粒以下。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体组合物中尺寸≥25μm的亚可见颗粒的形成的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含乙酸或乳酸或琥珀酸、精氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案中，当在5℃下储存六个月时，在每毫升抗体组合物中，亚可见颗粒被控制在80个颗粒以下。
在上述实施方案中，所述制剂可任选地包含糖或甘氨酸或甲硫氨酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种减少α4β7抗体组合物中尺寸≥25μm的亚可见颗粒的形成的方法，该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含单羧酸或其衍生物、精氨酸和表面活性剂，其中，相较于在包含三羧酸、精氨酸和表面活性剂的组氨酸缓冲液组合物中制备的抗体组合物，颗粒的形成被减少。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制在α4β7抗体组合物中α4β7抗体的电荷变体的形成的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加单羧酸或其衍生物。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制在α4β7抗体组合物中α4β7抗体的碱性变体的形成的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加单羧酸或其衍生物。
在一个实施方案中，本发明公开了一种在储存过程中控制在α4β7抗体组合物中α4β7抗体的碱性变体的形成的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含单羧酸或二羧酸、精氨酸和表面活性剂。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制在α4β7抗体组合物中α4β7抗体的碱性变体的形成的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加乙酸。
在本发明的上述实施方案的任一项中，即使在40℃下储存两周之后，α4β7抗体制剂是稳定的，其碱性变体含量的变化小于1％。
在一个实施方案中，本发明公开了一种在储存过程中控制在α4β7抗体组合物中α4β7抗体的酸性变体的形成的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含单羧酸或二羧酸、精氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案中，所述制剂还包含糖、和/或甘氨酸、和/或甲硫氨酸、和/或氯化钠。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体组合物中聚集体的形成的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加单羧酸或二羧酸和/或其衍生物。
在上述实施方案中，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，与单羧酸或二羧酸一起，可选择地添加下述赋形剂的一种或更多种，例如糖、甘氨酸、甲硫氨酸或氯化钠。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体组合物中聚集体的形成的方法，其中该方法包括在组合物中制备抗体，所述组合物包含组氨酸缓冲液、单羧酸或二羧酸、精氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案中，当在室温下储存六个月时，抗体组合物的聚集体含量低于2.5％。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体组合物中聚集体的形成的方法，其中该方法包括，在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸或其衍生物。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体的药物组合物中α4β7抗体的聚集体的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含乙酸、精氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案中，当在以下条件下储存时：在2-8℃下储存6个月、在25℃下储存6个月、或在40℃下储存1个月时，抗体组合物是稳定的，且聚集体含量低于2％。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体的药物组合物中α4β7抗体的聚集体的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含乳酸、精氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案中，当在以下条件下储存时：在2-8℃下储存6个月、在25℃下储存6个月、或在40℃下储存1个月时，抗体组合物是稳定的，且聚集体含量低于2％。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体的药物组合物中α4β7抗体的聚集体的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含琥珀酸、精氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案中，当在以下条件下储存时：在2-8℃下储存6个月、在25℃下储存6个月、或在40℃下储存1个月时，抗体组合物是稳定的，且聚集体含量低于2.5％。
在上述实施方案的任一项中，所述抗体组合物还包含甲硫氨酸。
在本发明的上述实施方案的所有项中，抗体组合物或制剂中的抗体浓度为约100mg/ml至约200mg/ml。优选地，制剂中的抗体浓度为100mg/ml、或120mg/ml、或150mg/ml、或160mg/ml、或170mg/ml、或175mg/ml、或180mg/ml、或190mg/ml、或195mg/ml、或200mg/ml。
在本发明的上述实施方案的任一项中，即使在2-8℃下储存6个月；在25℃下储存6个月或在40℃下储存1个月之后，所述α4β7抗体组合物是稳定的，且保持抗体中至少97％的单体含量。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制α4β7抗体的药物组合物中α4β7抗体的片段化的方法，其中该方法包括在组氨酸缓冲液中制备抗体组合物，所述组氨酸缓冲液包含乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸、精氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案中，当在以下条件下储存时：在2-8℃下储存6个月、在25℃下储存6个月、或在40℃下储存1个月时，抗体组合物是稳定的，且片段化含量/低分子量含量低于1％。
在一个实施方案中，本发明公开了一种高浓度的α4β7抗体制剂，其中包含160mg/ml-180mg/ml的α4β7抗体、缓冲液、精氨酸、乙酸或乳酸和表面活性剂，其中该制剂不含柠檬酸。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种高浓度的α4β7抗体制剂，其中包含约160mg/ml-180mg/ml的α4β7抗体、50mM组氨酸缓冲液、5-50mM乙酸或乳酸、100-125mM精氨酸、以及0.6mg/ml聚山梨醇酯-80，其中该制剂不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种α4β7抗体的药物制剂，其中包含约160mg/ml的α4β7抗体、40mM组氨酸缓冲液、约5-20mM乙酸或乳酸、约100-120mM精氨酸、10mM甲硫氨酸、以及2mg/ml聚山梨醇酯-80，其中该制剂不含柠檬酸。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种α4β7抗体的药物制剂，其中包含约160mg/ml的α4β7抗体、40mM组氨酸缓冲液、约5-20mM乙酸或乳酸、约100-120mM精氨酸、5mg/ml山梨醇、以及2mg/ml聚山梨醇酯-80，其中该制剂不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种α4β7抗体的药物制剂，其中包含约160mg/ml的α4β7抗体、40mM组氨酸缓冲液、约10-30mM琥珀酸、约100-120mM精氨酸、10mg/ml海藻糖、25mM氯化钠、以及2mg/ml聚山梨醇酯-80，其中该制剂不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种α4β7抗体的药物制剂，其中包含约160mg/ml的α4β7抗体、40mM组氨酸缓冲液、约10-30mM琥珀酸、约100-120mM精氨酸、10mg/ml海藻糖、以及2mg/ml聚山梨醇酯-80，其中该制剂不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种α4β7抗体的药物制剂，其中包含约160mg/ml的α4β7抗体、40mM组氨酸缓冲液、约10-30mM琥珀酸、约100-120mM精氨酸、以及2mg/ml聚山梨醇酯-80，其中该制剂不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种α4β7抗体的药物制剂，其中包含约160mg/ml的α4β7抗体、40mM组氨酸缓冲液、约10-30mM琥珀酸、约100-120mM精氨酸、10mg/ml海藻糖、10mM甲硫氨酸、以及2mg/ml聚山梨醇酯-80，其中该制剂不含柠檬酸。
在一个实施方案中，本发明公开了一种控制高浓度的α4β7抗体制剂的粘度的方法，其中该方法包括在组合物中制备抗体，所述组合物包含组氨酸缓冲液、单羧酸或二羧酸、精氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案中，制剂的粘度低于20cP，尤其是低于14.5cP。
在上述实施方案的任一项中，相较于在包含组氨酸缓冲液、三羧酸、精氨酸和表面活性剂的组合物中制备的抗体，所述制剂的粘度更低。
在另一个实施方案中，本发明公开了一种对α4β7抗体制剂中的α4β7抗体赋予胶体稳定性的方法，该方法是在抗体生产的预配制和/或配制步骤中，向抗体组合物中添加乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸或其衍生物。
本发明公开的α4β7抗体制剂具有生物活性。
在上述实施方案的任一项中，制剂中提及的缓冲剂包括有机缓冲剂、无机缓冲剂和/或其组合物。
在本发明的另一个实施方案中，制剂中提及的无机缓冲剂包括磷酸盐缓冲液。
在本发明的上述实施方案的任一项中，α4β7抗体制剂的pH为6.0-7.0；尤其是制剂的pH为6.3-6.8。
在上述实施方案的任一项中，α4β7抗体制剂的重量渗透摩尔浓度小于500mOsm/kg。
在上述实施方案的任一项中，无机组分可以与单羧酸或二羧酸混合，并在抗体生产的预配制和/或配制步骤的任何步骤中加入。
在上述实施方案的任一项中，α4β7抗体的制剂是稳定的液体(水性)制剂，该制剂可用于肠胃外给药(parenteral administration)。肠胃外给药包括静脉、皮下、腹腔、肌肉内或任何其他通常被认为是肠胃外给药的范围的给药途径，并且是本领域技术人员熟知的。
在本发明的上述实施方案的任一项中，稳定的液体/水性制剂是适合的，并且可以被冻干为冻干粉末。此外，α4β7抗体的冻干制剂可以用适当的稀释剂重构，以实现适用于给药的液体制剂。
在上述实施方案的任一项中，稳定的液体α4β7抗体与冻干工艺相容，并且冻干工艺不会影响抗体的质量特性。
在上述实施方案的任一项中，α4β7抗体包括维得利珠单抗。
本发明的另一方面提供了一种小瓶、预充式注射器或自动注射器装置或任何其他合适的装置，其中包含本文描述的主题制剂中的任一种。在某些实施方案中，水性制剂储存在小瓶或预充式注射器或自动注射器装置中，其中含有维得利珠单抗、缓冲液、氨基酸、琥珀酸/乳酸/乙酸/谷氨酸和表面活性剂。
在上述实施方案的任一项中，即使在40℃下储存2周，α4β7抗体可见地透明，没有任何颗粒。
实施例
本领域技术人员会认识到，本发明的范围和实质内可能有多种实施方式。现在将通过参考以下非限制性实施例更详细地描述本发明。以下实施例进一步说明了本发明，但是当然，不应被理解为以认可方式限制了本发明的范围。
适用于储存在本药物组合物的α4β7抗体维得利珠单抗是通过本领域已知的标准方法生产的。例如，通过在哺乳动物宿主细胞(例如中国仓鼠卵巢细胞)中，免疫球蛋白的轻链和重链基因的重组表达来制备维得利珠单抗。收获表达的维得利珠单抗，并且粗品经过标准下游工艺步骤，包括纯化、过滤和任选地稀释或浓缩步骤。例如，维得利珠单抗的粗品可以用标准层析技术进行纯化，例如，亲和层析、离子交换层析及其组合物。纯化的维得利珠单抗溶液还可以经过一个或更多个过滤步骤，并且对得到的溶液进行进一步的制剂研究。
实施例1：评估各种组分对高浓度维得利珠单抗制剂的乳光的影响。
从下游层析步骤获得纯化的高浓度的维得利珠单抗抗体，约175mg/ml，其中在组氨酸缓冲液中具有约25mg/ml精氨酸。对此，加入在组氨酸缓冲液中的琥珀酸或乳酸或乙酸组分，以及氯化钠，以制备样本制剂。此外，将在含有精氨酸、氯化钠、海藻糖的组氨酸-磷酸盐缓冲液中的浓度为70mg/ml的维得利珠单抗与含有精氨酸、谷氨酸和氯化钠的组氨酸缓冲液通过渗滤进行缓冲液交换，并且将缓冲液交换后的样本浓缩至170mg/ml。作为对照，使用已获批准的维得利珠单抗组分，其中，将在含有26.3mg/ml精氨酸的组氨酸缓冲液中的约100mg/ml的纯化维得利珠单抗与含有组氨酸缓冲液、精氨酸和柠檬酸的组合物进行缓冲液交换。将聚山梨醇酯-80加入所有上述样本中，包括对照组。表1示出了所有维得利珠单抗制剂的最终组合物。在所有这些样本中的维得利珠单抗的浓度范围是160mg/ml-180mg/ml，并且组氨酸缓冲液的浓度时50mM。琥珀酸、乳酸、乙酸、精氨酸-乙酸或精氨酸-谷氨酸的浓度范围是5-20mM。氯化钠的浓度是约25mM，聚山梨醇酯的浓度是约0.6mg/ml。所有这些制剂的pH值范围是pH6.3-pH6.8。
用赋形剂进行制备之后，测量所有样本的乳光，使用尺寸排阻层析测量高分子质量种类，使用离子交换层析测量电荷变体。为了测量乳光，通过稀释具有4000NTU(浊度单位)的福尔马肼悬浮液的初级乳光溶液，制备了各种USP参考乳光标准。
然后在40℃下对所有维得利珠单抗制剂进行两周的加速稳定性研究。之后，用尺寸排阻层析(SEC)分析样本的低分子量(LMW)种类和单体含量[结果示于表2]，并且用离子交换层析检查主峰含量和碱性变体[表3]，以及乳光[表4]。
表1：按照实施例-1制备的各种高浓度的维得利珠单抗制剂的组分
表2：按照实施例-1制备的高浓度的维得利珠单抗制剂的SEC数据
W-表示周数，Δ-表示变化量
表3：按照实施例-1制备的高浓度的维得利珠单抗制剂的IEX数据
W-表示周数，Δ-表示变化量
表4：按照实施例-1制备的高浓度的维得利珠单抗制剂的乳光
还检测了所有上述制剂的pH变化。结果表明，即使在40℃下储存两周，制剂的pH也没有变化。
此外，检测了所有样本的可见颗粒。
实施例2：在制备和/或预制备步骤中各种赋形剂在不同热压力条件下对高浓度维得利珠单抗制剂的稳定性的作用的评估
从下游层析步骤获得纯化的维得利珠单抗抗体组合物浓缩至30mg/ml，其在磷酸盐缓冲液中的浓度是约3-4mg/ml，随后用含有乙酸或琥珀酸以及精氨酸的50mM组氨酸缓冲液进行渗滤。缓冲液交换之后，维得利珠单抗抗体组合物浓缩至160mg/ml。在此浓缩样本中加入以下一种或更多种赋形剂，例如海藻糖或盐。对此，加入聚山梨醇酯-80以制备表5中的Vmab 6-Vmab 13制剂组合物。作为对照，使用已获批准的高浓度维得利珠单抗制剂组分，其中，从下游层析步骤中获得在磷酸盐缓冲液中的约3-4mg/ml的纯化维得利珠单抗，并且浓缩至30mg/ml，随后与含有50mM组氨酸缓冲液、～125mM精氨酸和～25mM柠檬酸的组合物进行缓冲液交换(Vmab-5)。在缓冲液交换之后，维得利珠单抗抗体组合物浓缩至160mg/ml。然后将聚山梨醇酯-80加入对照组中。
或者，从下游层析步骤获得纯化的维得利珠单抗抗体浓缩至30mg/ml，其在磷酸盐缓冲液中的浓度是约3-4mg/ml，随后用含有乙酸或琥珀酸或乳酸，不含精氨酸的40mM组氨酸缓冲液进行渗滤。缓冲液交换之后，维得利珠单抗抗体组合物浓缩至160mg/ml，然后加入精氨酸以及以下一种或更多中赋型剂，例如海藻糖或山梨醇或甲硫氨酸；或甘氨酸。加入聚山梨醇酯-80以制备表5a中的Vmab 15-Vmab 26的最终制剂。作为对照，使用已获批准的高浓度维得利珠单抗制剂组分，其中，从下游层析步骤中获得在磷酸盐缓冲液中的约3-4mg/ml的纯化维得利珠单抗，并且浓缩至30mg/ml，随后与含有50mM组氨酸缓冲液和～25mM柠檬酸的组合物进行缓冲液交换。在缓冲液交换之后，维得利珠单抗抗体组合物浓缩至160mg/ml。对此，将～125mM精氨酸和聚山梨醇酯-80加入对照组中以制备表5(a)中的Vmab-14。
表5和表5(a)示出了按照实施例-2制备的所有维得利珠单抗样本的最终组合物。
用赋型剂进行制备之后，测量表5和表5(a)的所有样本的乳光，使用尺寸排阻层析测量高分子质量种类，使用离子交换层析测量电荷变体，并使用粘度计测量粘度[结果示于表15]。为了测量乳光，通过稀释具有4000NTU(浊度单位)的福尔马肼悬浮液的初级乳光溶液，制备了各种USP参考乳光标准。
在25℃下对表5和表5a的所有样本进行6个月的加速稳定性研究，以及在40℃下对表5和表5a的所有样本进行4周的加速稳定性研究。所述制剂还在2-8℃等实时储存条件下储存6个月。之后，用微流成像技术检测样本的亚可见颗粒；结果示于表6。以及，测量样本的乳光的结果[表7]和测量样本的重量渗透摩尔浓度[表8]分别示于表7和表8。此外，用尺寸排阻层析(SEC)分析制剂的高分子量(HMW)种类；低分子量(LMW)种类和单体含量[结果示于表9-11]，并且用离子交换层析检查酸性变体；主峰含量和碱性变体[表12-14]。
表5：按照实施例-2制备的各种高浓度的维得利珠单抗制剂的组分
表5(a)：按照实施例-2制备的各种高浓度的维得利珠单抗制剂的组分
表6：在5℃下储存6个月，并用MFI测量的按照实施例-2制备的制剂的亚可见颗粒数据
表7：按照实施例-2制备的高浓度的维得利珠单抗制剂的乳光
W-表示周数；T0-表示零点的数据；M-表示月数；
表8：按照实施例-2制备的高浓度的维得利珠单抗制剂的重量渗透摩尔浓度
M-表示月数；T0-表示零点的数据
表9：用SEC测量的实施例-2的高浓度的维得利珠单抗制剂的HMW含量
M-表示月数；T0-表示零点的数据
表10：用SEC测量的实施例-2的高浓度的维得利珠单抗制剂的单体含量
M-表示月数；T0-表示零点的数据
表11：用SEC测量的实施例-2的高浓度的维得利珠单抗制剂的低分子量(LMW)含量
M-表示月数；T0-表示零点的数据
表12：用IEX测量的实施例-2的高浓度的维得利珠单抗制剂的酸性变体
M-表示月数；T0-表示零点的数据
表13：用IEX测量的实施例-2的高浓度的维得利珠单抗制剂的主峰含量
M-表示月数；T0-表示零点的数据
表14：用IEX测量的实施例-2的高浓度的维得利珠单抗制剂的碱性变体
M-表示月数；T0-表示零点的数据
表15：实施例-2的高浓度的维得利珠单抗制剂的粘度
样本名 T0
Vmab-5对照组 14.6
Vmab-6 13.4
Vmab-7 13.8
Vmab-8 13.3
Vmab-9 14.1
Vmab-10 14.8
Vmab-11 15.4
Vmab-12 15.3
Vmab-13 14.3
Vmab-14 15.4
Vmab-15 13.8
Vmab-16 11.8
Vmab-17 12.3
Vmab-18 12.6
Vmab-19 12.6
Vmab-20 12.6
Vmab-21 12.9
Vmab-22 12.7
Vmab-23 12.8
Vmab-24 12.3
Vmab-25 13.4
Vmab-26 13.7
T0-表示零点的数据
此外，热压力条件下测量了实施例-2的制剂中的抗体浓度，结果表明，即使在室温下储存6个月和在40℃下储存1个月，抗体的浓度也没有明显变化。此外，在热压力稳定性研究的过程中，在不同的时间点测量了样本的pH，且制剂的pH范围是6.3-6.8。

Claims (9)

1.一种高浓度的α4β7抗体的药物制剂，所述制剂包含α4β7抗体、组氨酸缓冲液、和单羧酸或二羧酸、或其衍生物，其中所述制剂不含柠檬酸。
2.一种高浓度的维得利珠单抗抗体的药物制剂，所述制剂包含160mg/ml维得利珠单抗抗体、pH为6.3-6.8的40mM组氨酸缓冲液、5-50mM乙酸或乳酸或琥珀酸或谷氨酸、约120mM精氨酸、以及2mg/ml聚山梨醇酯-80，其中所述制剂不含柠檬酸。
3.一种控制α4β7抗体中的亚可见颗粒的形成的方法，其中所述方法包括在组合物中制备抗体，所述组合物包含组氨酸缓冲液、单羧酸或二羧酸、精氨酸和表面活性剂。
4.一种控制高浓度的α4β7抗体组合物中所述抗体的电荷变体或聚集体的形成或所述抗体的片段化的方法，其中所述方法包括在组合物中制备抗体，所述组合物包含组氨酸缓冲液、单羧酸或二羧酸、精氨酸和表面活性剂。
5.一种控制高浓度的α4β7抗体组合物的乳光的方法，其中所述方法包括，在抗体生产的预配制期间和/或在抗体生产的配制步骤，向抗体组合物中添加组氨酸缓冲液，所述组氨酸缓冲液包含单羧酸或二羧酸或其衍生物，其中所述方法保持抗体于可溶形式，从而控制乳光。
6.根据权利要求1、2、3、4或5的所述制剂，所述制剂还包含海藻糖或山梨醇或甲硫氨酸或甘氨酸。
7.根据权利要求1、2、3、4或5的所述制剂中的所述抗体，所述抗体是维得利珠单抗。
8.根据权利要求1、2、3、4或5的所述制剂，所述制剂包括抗体浓度为约160mg/ml-180mg/ml。
9.一种制备α4β7抗体组合物的方法，用于控制/减少所述组合物中亚可见颗粒的数量，该方法包括：
a)获得纯化的α4β7抗体组合物
b)向抗体组合物中添加组氨酸缓冲液，所述组氨酸缓冲液包含单羧酸或二羧酸
c)将步骤b)中获得的抗体组合物浓缩至约160mg/ml，随后，
d)向浓缩的抗体组合物中添加精氨酸，以获得最终抗体组合物，
其中，相较于在浓缩抗体组合物之前，即步骤b)，添加了精氨酸的组合物，最终抗体组合物的亚可见颗粒的数量被控制或减少。
CN202280044125.7A 2021-05-07 2022-05-05 改善抗体制剂的稳定性的方法 Pending CN117545501A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IN202141020878 2021-05-07
IN202141020878 2021-05-07
PCT/IN2022/050430 WO2022234594A1 (en) 2021-05-07 2022-05-05 A method of improving stability of an antibody formulation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN117545501A true CN117545501A (zh) 2024-02-09

Family

ID=83932659

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280044125.7A Pending CN117545501A (zh) 2021-05-07 2022-05-05 改善抗体制剂的稳定性的方法

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20240239900A1 (zh)
EP (1) EP4333878A1 (zh)
JP (1) JP2024516293A (zh)
CN (1) CN117545501A (zh)
AU (1) AU2022271025A1 (zh)
BR (1) BR112023022811A2 (zh)
CO (1) CO2023015509A2 (zh)
WO (1) WO2022234594A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116466092B (zh) * 2023-03-21 2024-07-23 浙江夸克生物科技有限公司 定量测定尿视黄醇结合蛋白的试剂盒

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MXPA04000747A (es) * 2001-07-25 2004-07-08 Protein Desing Labs Inc Formulacion farmaceutica liofilizada estable de anticuerpos igg.
WO2007074880A1 (ja) * 2005-12-28 2007-07-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 抗体含有安定化製剤
UA116189C2 (uk) * 2011-05-02 2018-02-26 Мілленніум Фармасьютікалз, Інк. КОМПОЗИЦІЯ АНТИ-α4β7 АНТИТІЛА

Also Published As

Publication number Publication date
JP2024516293A (ja) 2024-04-12
CO2023015509A2 (es) 2023-11-30
EP4333878A1 (en) 2024-03-13
AU2022271025A1 (en) 2023-12-14
WO2022234594A1 (en) 2022-11-10
US20240239900A1 (en) 2024-07-18
BR112023022811A2 (pt) 2024-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9844594B2 (en) Liquid formulations for an anti-TNF α antibody
US12030948B2 (en) Antibody formulation
CN110831621A (zh) 稳定的液体药物组合物
US20210401982A1 (en) Stable formulations of therapeutic antibody
CN117545501A (zh) 改善抗体制剂的稳定性的方法
JP2024023468A (ja) 安定な融合タンパク質製剤
WO2023031970A1 (en) A pharmaceutical formulation of immune check point inhibitors
WO2023031969A1 (en) A method of improving stability of immune check point inhibitors
US20230340131A1 (en) Stable aqueous high concentration formulation of integrin antibody
JP2022551622A (ja) インテグリン抗体の安定な製剤
CN118076381A (zh) 改进免疫检查点抑制剂的稳定性的方法
US20240101659A1 (en) Stable therapeutic protein formulation and methods of making the same
WO2023037383A1 (en) Formulations of immune check point inhibitors
WO2024023843A1 (en) A pharmaceutical formulation of a therapeuticantibody and preparations thereof
CN112243379A (zh) 稳定的抗体制剂
CN117355321A (zh) 增强性能的赋形剂以及降低生物制剂的粘度和提高生物制剂的稳定性的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination