CN117431189A - 一株副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株qh-20029及其应用 - Google Patents
一株副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株qh-20029及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及微生物技术领域,具体公开了一株副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH‑20029及其应用,副干酪乳杆菌副干酪亚种(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏名称为QH‑20029,保藏编号为CGMCC No.24916。本发明所述副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH‑20029能在酸性条件下及高乙醇条件下生长代谢并产酸,具有高产乳酸、琥珀酸的能力,并能降低生物胺,特别是组胺。将其运用于食醋酿造中,可显著提高食醋酿造原料出醋率,提升食醋中不挥发酸含量特别是乳酸与琥珀酸含量,并能显著降低食醋生物胺含量,提高食醋产品品质。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一株副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029及其应用。
背景技术
醋是一种使用含淀粉、糖的原料经微生物发酵而成的酸性调味品,其中包含多种有机酸、氨基酸、肽、多酚、和黄酮类物质,赋予了食醋促消化、降血压、降血脂、软化血管、减肥、抗氧化等功能。食醋中的非挥发性有机酸使食醋风味柔和,酸味绵长,并增进食醋风味。高品质食醋的不挥发酸含量占总酸的50%以上。食醋酿造过程涉及多种微生物的参与,包括黑曲霉、根霉、酵母、乳酸菌、醋酸菌、芽孢杆菌等。在目前固态酿造过程中,所用大米、麸皮等原料含有丰富的蛋白质,被微生物发酵分解后,形成大量的游离氨基酸,游离氨基酸在氨基酸脱羧酶作用下会形成生物胺。
生物胺是一类具有生物活性的小分子含氮有机物,微量生物胺在有机体细胞活动中发挥重要作用,但当人体摄入过量生物胺时,会引发头痛、恶心、血压变化、呼吸紊乱等不适反应,严重时可危及生命。目前,发酵食品一般从三个方面控制生物胺,1)、从源头控制:控制总游离氨基酸的含量或者使用无氨基酸脱羧酶的菌株进行发酵生产,但控制总游离氨基酸含量会影响食品品质及风味;2)、过程控制:通过调整优化发酵工艺,抑制产生物胺菌株的生长达到控制生物胺的目的,或者添加降解生物胺的菌株,但工艺调整往往会影响发酵食品的产率及风味等;3、后期控制:向发酵产品找那个添加生物胺降解酶,但可能会影响食物风味且面临酶解效果差的问题。
目前,食醋中生物胺的降解控制的难点在于,食醋的酸性环境需要生物胺降解酶或菌株具有耐酸性;食醋发酵过程具有较高酒精度,还要求生物胺降解菌株具有耐乙醇的特性;食醋中生物胺种类多。
因此,需要寻找对一种或多种生物胺降解效果好、耐酸、耐乙醇的菌株,应用到食醋发酵生产中,以降低生物胺含量,同时还需保证食醋风味品质。
发明内容
本发明的目的在于提供一株副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029,不仅能高产乳酸及琥珀酸,且能耐受食醋发酵过程较强的酸性环境及高乙醇环境,应用到食醋发酵过程能显著降低食醋中生物胺含量。
将该副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029用于食醋酿造,能够显著提升食醋的不挥发酸含量、提升食醋产率。
本发明通过下述技术方案实现:
一株副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029,副干酪乳杆菌副干酪亚种(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心中国普通微生物菌种保藏中心,其保藏名称为QH-20029,保藏编号为CGMCC No. 24916。
副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029的16S rDNA序列如SEQ ID No.1所示。
本发明的发明初衷在于:
第一,选育获取一株降解生物胺,高产乳酸及琥珀酸且能耐受较强的酸性环境(pH3.0)和耐受高乙醇(10 %vol)的菌株。
第二,将所选育的菌株应用于食醋酿造,获取食醋具有较高的不挥发酸含量,并具有较低的生物胺,使食醋美味健康。为食醋酿造行业提供新的有益微生物发酵菌株,为食醋发酵行业整体所面临的解决发酵产品安全性的问题,及提升食醋品质及原料利用率的问题提供了一个新的改善思路,促进行业的整体进步。
副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029的保藏日期:2022年5月19日,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,邮编:100101,分类命名为:Lactobacillus paracasei subsp. paracasei。
本发明的副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029是从醋醅中分离获得,经检测具有高产乳酸、降解生物胺、耐酸耐乙醇的能力,应用到食醋发酵过程,可提升食醋不挥发酸含量及原料出醋率。
即本发明的副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029不仅能高产乳酸及琥珀酸,且能耐受食醋发酵过程较强的酸性环境(pH3.0-4.0)及高乙醇环境,应用到食醋发酵过程能显著降低食醋中生物胺含量。
副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029在食醋酿造中的应用。
副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029在固态发酵食醋酿造中的应用。
具体地,先将副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029制备成发酵液,然后将发酵液作为种子液,接种于醋醅进行固态发酵。副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029在醋醅环境中继续生长繁殖代谢,促进环境中的糖类转化为有机酸,同时通过生长代谢,将醋醅环境中的生物胺进行降解,或者通过生长抑制其他产生物胺菌株的生长代谢,使食醋不挥发酸提升,生物胺含量降低。
种子液加入醋醅的时间为发酵前期、中期或中后期。
优选地,发酵液的接种量为醋醅量的2~10%,此处的接种量是以重量计。
进一步地,发酵液的制备过程如下:
将副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029依次进行斜面培养、种子培养和发酵培养。
具体地:
发酵液按如下方法制备:
S1、斜面培养:将副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029接种至斜面培养基,在35℃厌氧培养48 h,获得斜面菌体;所述斜面培养基终浓度为:葡萄糖1-20g/L,酱油原油(氨氮含量1.0 g/100 mL)10-100 g/L,琼脂为20.0 g/L,溶剂为去离子水,pH值自然;
S2、种子培养:分为一级种子培养和二级种子培养:
一级种子培养:从斜面菌体挑取一接种环菌体接种至种子培养基,在35 ℃静置培养24 h,获得一级种子液;所述种子培养基终浓度组成为:葡萄糖1-20 g/L,酱油原油(氨氮含量1.0 g/100 mL)10-100 g/L,溶剂为去离子水,pH值自然;
二级种子培养:将一级种子液以体积浓度1~10%的接种量接种至二级种子培养基中,在35 ℃静置培养24-48 h,获得二级种子液;所述二级种子培养基终浓度组成为:葡萄糖1-20 g/L,酱油原油(氨氮含量1.0 g/100 mL)10-100 g/L,溶剂为去离子水,pH值自然;
S3、发酵培养:选用液态发酵罐,加水搅拌,同时加入1-2%的葡萄糖和1-10%酱油原油(氨氮为1.0 g/100 mL),121℃灭菌20 min后,冷却至33-37 ℃,按照2~10%的接种量接入上述二级种子液,33~40 ℃静置发酵培养20-48 h。
进一步地,所述食醋包括窖醋。在制备窖醋时,发酵液按2~10%的接种量接入醋醅中,通过翻醅混合均匀后,按照麸醋工艺进行发酵生产,制得富含不挥发酸且生物胺降低的食醋。
本发明与现有技术相比,具有如下的优点和有益效果:
1、本发明提供了一株能高产乳酸且能降解生物胺的菌株--副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029,该菌株可在酸性条件下(pH3.0-4.0)及高乙醇(10 %vol)条件下生长代谢,应用于固态食醋发酵领域,可提食醋不挥发酸及降低食醋生物胺。
2、本发明提供的副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029作为微生物发酵菌剂,应用于食醋酿造领域,可提高食醋中不挥发酸含量,特别是乳酸及琥珀酸的含量,在窖醋酿造中,添加副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029组相比对照组(未添加组)不挥发酸占比含量提高了13.82%,不挥发酸占比特别是乳酸与琥珀酸占比的增加,琥珀酸含量提升69.14倍,乳酸含量提升6.87%。使食醋口感更加柔和绵长,酸甜绵柔。
3、本发明所述副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029及其发酵液应用于食醋酿造可提高原料淀粉利用率,出醋率相比对照均有提高,在窖醋酿造中,添加副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029相比对照组淀粉利用率提高了10.62%。
4、本发明所述副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029及其发酵液应用于食醋酿造中可提降低生物胺含量,在窖醋酿造中,添加副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029组相比对照组总生物胺含量降低了总生物胺含量降低69.47%,组胺含量降低70.84%。
5、本发明所述中副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029及其发酵液应用于食醋酿造中,使淋出醋色泽黑亮、体态澄清,香味及滋味均优于对照组。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本发明实施例的进一步理解,构成本申请的一部分,并不构成对本发明实施例的限定。在附图中:
图1为本发明实施例2中菌株QH-20029的菌落图;
图2为本发明实施例2中菌株QH-20029的显微镜观察下菌株形态图。
实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白,下面结合实施例和附图,对本发明作进一步的详细说明,本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明,并不作为对本发明的限定。
实施例1:
菌株的选育,包括以下步骤:
1、生物胺降解菌初筛
本发明从申请人自身的自然发酵状态的醋醅发酵池中,分别选取发酵第2、4、6、8、10、12、14、6、18、20、22、24天的醋醅,取样方式为发酵池四周从醋醅表面到底部垂直取样,然后将不同发酵周期醋醅样品均匀混合得到菌株筛选样本。筛选的具体方法:称取100 g醋醅样品置于1000 mL 0.85% 的生理盐水中,摇晃后静置,取上清液至富集培养基中,于30℃,静置振荡培养2-3天。取10 mL富集液加入100 mL新鲜富集培养基中,如此重复3次后进行分离纯化,所述富集培养基为:葡萄糖20 g/L,组胺1 g/L,Na2HPO40.5 g/L,K2HPO40.5 g/L,溶剂为蒸馏水。
选用筛选培养基对菌株进行初筛,将富集完成的菌液进行梯度稀释后,涂布于固体筛选培养基平板上,35 ℃厌氧培养48 h后,挑选生长较大的菌落进行进一步的复筛。所用筛选培养基为:葡萄糖20 g/L,组胺1 g/L,Na2HPO40.5 g/L,K2HPO40.5 g/L,琼脂20 g/L,溶剂为蒸馏水。
2、产酸生物胺降解菌复筛
挑取初筛时候具有明显透明水解圈的单菌落点种到复筛培养基平板上,35 ℃厌氧培养48 h后,观察单菌落周围水解透明圈生成情况,选取水解透明圈直径与单菌落直径比较大的菌落,进一步在复筛培养基平板上上进行分离纯化,得到纯种生物胺降解菌单菌落。酸性蛋白酶复筛培养基为:葡萄糖20 g/L,组胺1 g/L,Na2HPO40.5 g/L,K2HPO40.5 g/L,CaCO315 g/L,琼脂20 g/L,溶剂为蒸馏水。
3、产酸生物胺降解菌产酸能力测定
由步骤2得到的单菌落接种到液体培养基中,并将液体培养基35 ℃静置培养48 h后,通过电位滴定仪测定发酵培养基中总酸含量,挑选总酸含量较高的10株菌对应发酵培养液,通过高效液相色谱法测定其有机酸含量,所得结果如表1所示。所述液体培养基为:葡萄糖20 g/L,酱油原油(氨氮含量1.0 g/100 mL)80 g/L,溶剂为去离子水,pH值自然。
有机酸测定方法按《GB 5009.157-2016 食品安全国家标准食品中有机酸的测定》进行测定。
如表1所示,菌株R1、R3、R5、R6、R8乳酸、琥珀酸含量均高于其他菌株,可作为待选菌株。
表1菌株产酸能力测定
4、产酸生物胺降解菌生物胺降解能力测定
将步骤3中筛选出菌株R1、R3、R5、R6、R8进行发酵培养,在发酵液体培养基中加入一定量的生物胺(色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、精胺各200mg/L),35 ℃静置培养48h后,35 ℃,150 rpm培养48 h,取培养液离心后,测定上清液中生物胺含量。所得结果如表2所示。可见,所筛选菌株对钻降解率最佳,酪胺次之。其中,R6对组胺降解率高达90.72%,对总生物胺降解率达到40.93%,将R6重新编号为QH-20029作为目标菌株进行进一步的应用研究。
生物胺测定方法按《GB 5009.208-2016 食品安全国家标准食品中生物胺的测定》进行测定。
表2 菌株生物胺降解能力测定
实施例2:
菌株QH-20029鉴定
1、形态学鉴定:
将实施例1筛选得到的菌株QH-20029接种在固体培养基上,37 ℃厌氧培养箱内划线培养24小时后形成乳白色,圆形或类圆形,直径大于1.0 mm,表面隆起,边缘光滑整齐的菌落;在100倍油镜下观察,菌株形态为短杆状,排列整齐,两端混圆,无芽孢,表面光滑整齐。如图1、图2所示。
固体培养基组成为:葡萄糖1-20 g/L,酱油原油(氨氮含量1.0 g/100 mL)10-100g/L,琼脂为20.0 g/L,溶剂为去离子水,pH值自然;
2、生理生化鉴定:
利用Biolog (GENⅢ)自动微生物鉴定系统对菌株QH-20029进行了94种表型测试,包括71种碳源利用情况检测以及23种化学敏感性检测:将菌株QH-20029接种于BUG平板培养基(BIOLOG UNIVERSAL GROWTH AGAR),33℃恒温培养2天,用无菌棉签将平板上的菌体洗下,与接种液(IF-A)混合,制成菌悬液,用浊度计调整至91% T/IF-A。用8孔电动加液器将菌悬液分别加在BiologGENⅢ微孔鉴定板的各孔中,每孔100 μL。将微孔鉴定板放在33℃培养箱中,分别在培养12 h、24 h、36 h、48 h后将其置于Biolog读数仪上读取结果。Biolog系统给出48 h鉴定结果如表3和表4所示。
表3. 菌株QH-20029对BiologGENⅢ板上71种碳源的利用能力
表4. 菌株QH-20029对BiologGENⅢ板上23种化学物质的化学敏感性
3、分子生物学鉴定:
以菌株QH-20029的总DNA为模板,利用引物P1: 5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG -3'和 P2: 5'-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA -3'扩增菌株的16S rDNA基因,委托上海生工对该菌16S rDNA扩增及测序,得到该菌株的16S rDNA序列(SEQ ID NO.1所示)后,在NCBI网站上用BLAST检索GenBank中相关菌株的16S rDNA基因序列,并进行同源性比对。菌株QH-20029与Lactobacillus paracasei subsp. paracasei8700:2菌株同源性最高(homology,99.94%),根据微生物遗传学鉴定原则,基于16S rDNA同源性高于95%,鉴定菌基本属于对照菌。因此,菌株QH-20029为副干酪乳杆菌副干酪亚种(Lactobacillus paracasei subsp. paracasei)菌株,拟命名为副干酪乳杆菌副干酪亚种(Lactobacillus paracasei subsp. paracasei) 菌株QH-20029,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号CGMCC No:24915,保藏日期2022年5月19日,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,邮编:100101。
实施例3:
发酵液及种子液的制备:
1、斜面培养:
将副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029接种至斜面培养基,在35℃厌氧培养48h,获得斜面菌体;葡萄糖20 g/L,酱油原油(氨氮含量1.0 g/100 mL)50 g/L,琼脂为20.0g/L,溶剂为去离子水,pH值自然;
2、种子培养
分为一级种子培养和二级种子培养。
一级种子培养:从斜面菌体挑取一接种环菌体接种至种子培养基,在35 ℃静置培养24 h,获得一级种子液;所述一级种子培养基终浓度组成为:葡萄糖20 g/L,酱油原油(氨氮含量1.0 g/100 mL)50 g/L,溶剂为去离子水,pH值自然;对照组为相同操作单不接种QH-20029的培养基。
二级种子培养:将一级种子液以体积浓度5%的接种量接种至二级种子培养基中,在35 ℃静置培养24-48 h,获得二级种子液;优选二级种子培养基终浓度为:葡萄糖20 g/L,酱油原油(氨氮含量1.0 g/100 mL)30 g/L,溶剂为去离子水,pH值自然。对照组为相同组分且为接种QH-20029的培养基。
3、发酵培养
选用液态发酵罐,选用液态发酵罐,加水搅拌,同时加入2%的葡萄糖和2.5%酱油原油(氨氮为1.0 g/100 mL),121℃灭菌20 min后,冷却至35℃,按照10%的接种量接入上述二级种子液, 35℃静置发酵培养48 h。发酵完成后,所得发酵液即为菌液,所得菌液也作为接入醋醅发酵的种子液。对照组为相同处理但未接种QH-20029的培养基。
实施例4:
不同pH对副干酪乳杆菌副干酪亚种QH-20029生长和产酸的影响:
配制液体培养基(2%的葡萄糖,5%酱油原油(氨氮为1.0 g/100 mL),用乳酸调节不同pH,于35 ℃静置培养一定时间,三角瓶底有菌覆盖,则菌株能在此pH条件下生长。相同条件培养60 h后,混匀菌液,测定菌液OD600值及上清液可滴定酸含量,以表征菌株在酸性条件下的生长及产酸情况,结果如表5所示。菌株具有较低的pH耐受性,适宜于醋醅环境生长代谢。
表5产酸菌株在不同pH条件下的生长及产酸情况
实施例5:
不同酒精度对副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029生长和产酸的影响
配制液体培养基(2%的葡萄糖,5%酱油原油(氨氮为1.0 g/100 mL),pH自然,灭菌后加入无水乙醇,使培养基中乙醇含量终浓度为2-10 %vol,于35 ℃静置培养一定时间,三角瓶底有菌覆盖,则菌株能在此酒精度条件下生长。相同条件培养72 h后,混匀菌液,测定菌液OD600值及上清液可滴定酸含量,以表征菌株在不同含量乙醇条件下的生长及产酸情况,结果如表6所示。菌株可耐受高乙醇环境,适宜于醋醅环境生长代谢。
表6产酸菌株在不同pH条件下的生长及产酸情况
实施例6:
副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029在窖醋酿造中的应用:
1、酒醪液制备
称取大米250 kg,高粱50 kg,磨浆制粉,边搅拌边加水900 kg,加入α-淀粉酶1kg,加热到90-95 ℃,匀速搅拌约30 min左右得到醪液,将醪液降温至45-55 ℃,缓慢搅拌条件下加乳酸调醪液pH 4.7后加入2 kg糖化酶并保温约20 min左右,冷却至33-37 ℃,接入活性干酵母5 kg,静置常温培养12-16 h,即得酵母活化醪液。
2、菌株扩大培养
按实施例3中发酵液及种子液制备方式制得发酵菌液。
3、醋醅接种发酵
对照组1:发酵池内部从下而上铺谷壳540 kg,加入麸皮4600 kg,大曲 200 kg,麸曲 250 kg,接入步骤1中制备的酒醪液8300 kg(其中酒醪液温度约为33 ℃),同时接入对照糖醪液,用量为醪液总量的5%,待酒醪液浸入新醅后,在新醅表面接种100 kg发酵至第9-11天的鲜醋醅,均匀铺散于新醅表面,进行人工翻醅。发酵周期前3天每天翻醅,之后隔天翻醅。翻醅完成后进行自然发酵。
实验组1-1:发酵池内部从下而上铺谷壳540 kg,加入麸皮4600 kg,大曲 200 kg,麸曲 250 kg,将实施例3中制备的发酵液接入1中制备的酒醪液中,混合均匀,成为含副干酪乳杆菌副干酪亚种的酒醪液,将其接入发酵池(其中混合酒醪液温度约为33 ℃),接种量为醪液总量的5%。待酒醪液浸入新醅后,在新醅表面接种100 kg发酵至第9-11天的鲜醋醅,均匀铺散于新醅表面,进行人工翻醅。发酵周期前3天每天翻醅,之后隔天翻醅。翻醅完成后进行自然发酵。
实验组1-2:发酵池内部从下而上铺谷壳540 kg,加入麸皮4600 kg,大曲 200 kg,麸曲 250 kg,接入1中制备的酒醪液8300 kg(其中酒醪液温度约为33 ℃),待酒醪液浸入新醅后,在新醅表面接种100 kg发酵至第9-11天的鲜醋醅,均匀铺散于新醅表面,进行人工翻醅。发酵周期前3天每天翻醅,之后隔天翻醅。在发酵第9天接入实施例3中制备的发酵液140 kg,翻醅拌和均匀后,按常规自然方式继续进行自然发酵。
实验组1-3:发酵池内部从下而上铺谷壳540 kg,加入麸皮4600 kg,大曲 200 kg,麸曲 250 kg,接入1中制备的酒醪液8300 kg(其中酒醪液温度约为33 ℃),待酒醪液浸入新醅后,在新醅表面接种100 kg发酵至第9-11天的鲜醋醅,均匀铺散于新醅表面,进行人工翻醅。发酵周期前3天每天翻醅,之后隔天翻醅。在发酵第12天接入实施例3中制备的发酵液140 kg,翻醅拌和均匀后,按常规自然方式继续进行自然发酵。
实验组1-4:发酵池内部从下而上铺谷壳540 kg,加入麸皮4600 kg,大曲 200 kg,麸曲 250 kg,接入1中制备的酒醪液8300 kg(其中酒醪液温度约为33 ℃),待酒醪液浸入新醅后,在新醅表面接种100 kg发酵至第9-11天的鲜醋醅,均匀铺散于新醅表面,进行人工翻醅。发酵周期前3天每天翻醅,之后隔天翻醅。在发酵第15天接入实施例3中制备的发酵液140 kg,翻醅拌和均匀后,按常规自然方式继续进行自然发酵。
4、淋醋
淋醋采用套淋方式得醋。将发酵池醋醅及卤汁全部铲入淋醋池,用上一轮的一醋进行浇淋,浸泡2 h后取醋,所得为头醋,放入存储罐。再用上一轮二醋进行浇淋,浸泡2 h后得一醋,放入中转罐,用于下一轮浇淋头醋。接着用自来水浸泡醋醅2 h,所得为二醋,放入中转罐,用于下一轮浇淋一醋。
5、沉降灭菌灌装
所得头醋经管道的高温瞬时灭菌后,于储存罐进行沉降,沉降后抽取上层醋液经板框压滤后进入精制灌装流程,最终得到成品醋。
6、总酸、不挥发酸、出醋率、有机酸、生物胺含量监测
通过电位滴定仪测定所得食醋总酸、不挥发酸含量,并统计食醋出醋率,结果如表7所示。有机酸、生物胺含量分别如表8、表9所示。
表7发酵所得原醋理化指标及出醋率
如表7所示,在发酵周期第12天进行菌株的强化,可以显著提升食醋不挥发酸含量和出醋率,食醋不挥发酸含量提升13.82%,出醋率提升10.62%。
表8所示,所得食醋中,在第12天进行菌株强化,可以显著提升食醋中琥珀酸、乳酸含量,提升食醋品质。琥珀酸含量提升69.14倍,乳酸含量提升6.87%。
表8 发酵所得食醋有机酸含量
表9所示,所得食醋中,在第12天进行菌株强化,可显著降低食醋中生物胺含量,特别是组胺的含量,总生物胺含量降低69.47%,组胺含量降低70.84%。
表9发酵所得食醋生物胺含量
7、成品醋感官指标分析
实验组1的成品醋色泽更黑亮,体态更澄清,酸味更柔和饱满醇厚,回味更悠长,说明在窖醋的发酵阶段添加副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029可以显著提高产品品质。
以上所述的具体实施方式,对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明,所应理解的是,以上所述仅为本发明的具体实施方式而已,并不用于限定本发明的保护范围,凡在本发明的精神和原则之内,所做的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一株副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029,其特征在于,副干酪乳杆菌副干酪亚种(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏名称为QH-20029,保藏编号为CGMCC No. 24916。
2.如权利要求1所述的副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029在食醋酿造中的应用。
3.如权利要求1所述的副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029在固态发酵食醋酿造中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,先将副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029制备成发酵液,然后将发酵液作为种子液,接种于醋醅进行固态发酵。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,种子液接种于醋醅的时间为发酵前期、中期或中后期。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,发酵液的接种量为醋醅量的2~10%。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,发酵液的制备过程如下:
将副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株QH-20029依次进行斜面培养、种子培养和发酵培养。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,种子培养分为一级种子培养和二级种子培养。
9.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于,所述食醋包括窖醋。
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