CN117425654A - 2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了2,8‑二氮杂螺[4.5]癸烷化合物，其包括(吡啶并[3,4‑d]嘧啶‑4‑基)‑2,8‑二氮杂螺[4.5]癸烷化合物、(2,6‑萘啶‑1‑基)‑2,8‑二氮杂螺[4.5]癸烷化合物和(1,7‑萘啶‑4‑基)‑2,8‑二氮杂螺[4.5]癸烷化合物，所述化合物为LATS1/2的抑制剂；含有这些化合物的组合物；以及用于抑制LATS1/2活性的方法。

Description

2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物
相关申请的交叉引用
本申请主张2021年6月4日提交的国际专利申请第PCT/CN2021/098358号的权益和优先权，该申请的内容全文以引用方式并入本申请。
背景技术
大肿瘤抑制激酶1(LATS1)和大肿瘤抑制激酶2(LATS2)是Hippo通路中的调节性丝氨酸/苏氨酸激酶，其使效应子转录因子Yes相关蛋白(YAP)和带PDZ结合基序(TAZ)的转录共激活因子组成性磷酸化，从而使它们失活。当Hippo通路处于激活状态时，一系列上游因子使Hippo激酶MST1/2磷酸化，进而使LATS1/2磷酸化。LATS1/2使YAP和TAZ磷酸化，导致YAP和TAZ被隔离在细胞质中并降解。当Hippo通路失活且LATS1/2被消除、还原和/或未被磷酸化时，YAP和TAZ未被磷酸化，而是易位至细胞核。在细胞核中，YAP和TAZ与转录因子诸如TEAD转录因子家族络合，以调节一系列与功能，包括抗癌、细胞增生、凋亡及其他细胞特性相关的下游基因。文献报导还表明，损伤后的YAP/TAZ激活促进多种细胞类型的组织再生和修复，包括肺损伤模型。参见例如：LaCanna,R.等人J Clin Invest.2019；129(5):2107-2122；和JCI Insight.2019；4(14):e128674。
因此，LATS1和LATS2通路失活可能代表了对特发性肺纤维化(IPF)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)等人类疾病或病症进行药物干预的一种选择。
发明内容
本文公开的是2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物，包括(吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物、(2,6-萘啶-1-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物和(1,7-萘啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物，它们是LATS1/2的抑制剂；含有这些化合物的组合物；以及抑制细胞或受试者中的LATS1/2、促进损伤后组织再生和治疗可受益于LATS1/2抑制的疾病、疾患或病症的方法。
在一个方面，提供式(I)化合物或其任何变体，诸如式(IA)、(IB)或(IC)，或其N-氧化物，或其盐(例如，其药用盐)，如本文所详述。本文还提供一种药物组合物，其包含本文所详述的式(I)化合物或其任何变体，或其药用盐，以及药用载体或赋形剂。
在另一方面，本文提供一种用于促进损伤后的组织再生或治疗可受益于LATS1/2抑制的疾病或病症(例如ARDS)的方法，该方法包含向有此需要的受试者施用有效量的式(I)化合物或其任何变体，诸如本文所详述的式(IA)、(IB)或(IC)，或其药用盐。在一些实施例中，该受试者为人。
本文还提供一种式(I)化合物或其任何变体，诸如本文所详述的式(IA)、(IB)或(IC)，或其药用盐，其用于促进损伤后组织再生或治疗可受益于LATS1/2抑制的疾病或病症(例如，ARDS)的方法中。
本文还提供一种式(I)化合物或其任何变体，诸如本文所详述的式(IA)、(IB)或(IC)或其药用盐在本文所详述的方法(例如，促进损伤后组织再生或治疗ARDS)中的用途。
本文还提供一种式(I)化合物或其任何变体，诸如本文所详述的式(IA)、(IB)或(IC)或其药用盐用于制造药物的用途，该药物用于本文所详述的方法(例如，促进损伤后组织再生或治疗ARDS)中。
本文还提供一种用于促进损伤后组织再生或治疗可受益于LATS1/2抑制的疾病或病症(例如，ARDS)的试剂盒，该试剂盒包含：药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其任何变体，诸如本文所详述的式(IA)、(IB)或(IC)，或其药用盐；和使用说明。
在另一方面，提供一种制备式(I)化合物或其任何变体，诸如式(IA)、(IB)或(IC)的方法。本文还提供用于式(I)化合物或其任何变体，诸如式(IA)、(IB)或(IC)的合成中的化合物中间体。
具体实施方式
本文公开的是式(I)化合物，或其变体，诸如式(IA)、(IB)、(IC)、(II-A)、(II-B)、(II-C)、(III)至(IX)，例如表1中的化合物编号101至201，及其药物组合物，它们是LATS1/2的抑制剂。因此，这些化合物和组合物用于治疗可受益于LATS1/2抑制的疾病、病患或病症。
现在将在下文更全面地描述本发明所公开的主题。但是，得益于前述说明书所呈递的教示，本发明所公开的主题所属领域的技术人员将想到本文所述的本发明所公开的主题的许多修改及其他实施例。因此，应理解，本发明所公开的主题并不限于所公开的具体实施例，并且修饰及其他实施例旨在包含于所附权利要求书的范畴内。换句话说，本文所述的主题涵盖所有替代、修改和等同形式。如果纳入的文献、专利和类似材料中的一项或多项与本申请不同或矛盾(包括但不限于所定义的术语、术语用法、所述技术等)，则以本申请为准。除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语均具有与本领域普通技术人员所通常理解的含义相同的含义。本文所提及的所有公开、专利申请、专利及其他参考文献均以全文引用的方式并入。
定义
如本文所用的术语“烷基”指的是具有指定的碳原子数(即，C1-10表示一至十个碳原子)的饱和直链(即，非支化)或支化单价烃链或其组合。特定的烷基基团为具有1至20个碳原子(“C1-20烷基”)、具有1至8个碳原子(“C1-8烷基”)、具有1至6个碳原子(“C1-6烷基”)、具有2至6个碳原子(“C2-6烷基”)或具有1至4个碳原子(“C1-4烷基”)的烷基基团。烷基的实例包括但不限于：基团，诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基；以及例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物和异构体。
如本文所用的“烯基”指的是具有至少一个烯烃不饱和位点(即，具有至少一个式C＝C的部分)并具有指定的碳原子数(即，C2-10表示具有二至十个碳原子)的不饱和直链(即，非支化)或支化单价烃链或其组合。烯基基团可以呈“顺式”或“反式”构型，或替代性地呈“E”或“Z”构型。特定的烯基基团为具有2至20个碳原子(“C2-20烯基”)、具有2至8个碳原子(“C2-8烯基”)、具有2至6个碳原子(“C2-6烯基”)或具有2至4个碳原子(“C2-4烯基”)的烯基基团。烯基基团的实例包括但不限于以下基团诸如乙烯基(ethenyl或vinyl)、丙-1-烯基、丙-2-烯基(或烯丙基)、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁-1,3-二烯基、2-甲基丁-1,3-二烯基、其同系物和异构体等。
如本文所用的“炔基”指的是具有至少一个炔属不饱和位点(即，具有至少一个式C≡C的部分)并具有指定的碳原子数(即，C2-10表示具有二至十个碳原子)的不饱和直链(即，非支化)或支化单价烃链或其组合。特定的炔基基团为具有2至20个碳原子(“C2-20炔基”)、具有2至8个碳原子的(“C2-8炔基”)、具有2至6个碳原子(“C2-6炔基”)、具有2至4个碳原子(“C2-4炔基”)的炔基基团。炔基基团的实例包括但不限于基团诸如乙炔基(ethynyl或acetylenyl)、丙-1-炔基、丙-2-炔基(或炔丙基)、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、其同系物和异构体等。
如本文所用的“伸烷基(Alkylene)”指的是与烷基相同的残基，但具有二价。特定的伸烷基基团为具有1至6个碳原子(“C1-6伸烷基”)、具有1至5个碳原子(“C1-5伸烷基”)、具有1至4个碳原子(“C1-4伸烷基”)或1至3个碳原子(“C1-3伸烷基”)的伸烷基基团。伸烷基的实例包括但不限于诸如亚甲基(-CH2-)、亚乙基(-CH2-CH2-)、1,3-亚丙基(-CH2-CH2-CH2-)、1,2-亚丙基(-CH(CH3)-CH2-)、1,4-亚丁基(-CH2-CH2-CH2-CH2-)等。
如本文所用的“亚烷基(Alkylidene)”指的是与烷基相同的残基，但在连接点处具有二价并经由双键连接至母体结构。特定的亚烷基基团为具有1至6个碳原子(“C1-6亚烷基”)、具有1至5个碳原子(“C1-5亚烷基”)、具有1至4个碳原子(“C1-4亚烷基”)或1至3个碳原子(“C1-3亚烷基”)的亚烷基基团。亚烷基的实例包括但不限于基团诸如亚甲基(＝CH2)、亚乙基(＝CH-CH3)、1-亚丙基(＝CH-CH2-CH3)、2-亚丙基(＝C(CH3)2)、1-亚丁基(＝CH2-CH2-CH2-CH3)等。
如本文所用的“环烷基”指的是具有指定的碳原子数(即，C3-10表示三至十个碳原子)的非芳香族、饱和或不饱和环状单价烃结构。环烷基可由一个环组成，例如环己基，或由多个环组成，例如金刚烷基，但不包括芳基基团。包含多于一个环的环烷基可为稠合的、螺环的或桥联的或其组合。特定的环烷基基团为具有3至12个环状碳原子的环烷基基团。优选的环烷基为具有3至8个环状碳原子(“C3-8环烷基”)或具有3至6个碳原子(“C3-6炔基”)的环烃。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基、降莰基等。
如本文所用的“芳基”指的是具有单环(例如，苯基)或多个缩合环(例如，萘基或蒽基)的不饱和芳香族碳环基团，其中缩合环可以为或可以不为芳香环。特定的芳基基团为具有6至14个环状(即，环)碳原子的芳基基团(“C6-14芳基”)。具有多于一个环且其中至少一个环为非芳香环的芳基基团可在芳香环位置或非芳香环位置处连接至母体结构。在一个变体中，具有多于一个环且其中至少一个环为非芳香环的芳基在芳香环位置处连接至母体结构。
如本文所用的“杂芳基”指的是具有1至14个环状(即，环)碳原子和至少一个环杂原子的不饱和芳香环基团，该至少一个环杂原子包括但不限于杂原子诸如氮、磷、氧和硫。杂芳基基团可具有单环(例如，吡啶基、呋喃基)或多个缩合环(例如，吲嗪基(indolizinyl)、苯并噻吩基)，其中缩合环可以为或可以不为芳香环。特定的杂芳基基团为具有1至12个环状(即，环)碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、氧和硫的杂原子的5至14元环；具有1至8个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、磷、氧和硫的环杂原子的5至10元环；具有1至5个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的5、6或7元环。在一个变体中，杂芳基包括具有1至6个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的单环芳香族5、6或7元环。在另一变体中，杂芳基包括具有1至12个环状碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、氧和硫的环杂原子的多环芳香环。具有多于一个环且其中至少一个环为非芳香环的杂芳基基团可在芳香环位置或非芳香环位置处连接至母体结构。在一个变体中，具有多于一个环且其中至少一个环为非芳香环的杂芳基基团在芳香环位置处连接至母体结构。
如本文所用的“杂环”、“杂环状”或“杂环基”指的是具有单环或多个缩合环并具有1至14个环状(即，环)碳原子以及1至6个环状(即，环)杂原子诸如氮、磷、硫或氧等的饱和或不饱和非芳香族环状基团。包含多于一个环的杂环可为稠合的、螺环的或桥联的或其任意组合。在稠环统中，一个或多个稠环可为环烷基。特定的杂环基基团为具有1至13个环状碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、氧和硫的环杂原子的3至14元环；具有1至11个环状碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、氧和硫的环杂原子的3至12元环；具有1至9个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、磷、氧和硫的环杂原子的3至10元环；具有1至7个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、磷、氧和硫的环杂原子的3至8元环；具有1至5个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、磷、氧和硫的环杂原子的3至6元环。在一个变体中，杂环基包括具有1至2个、1至3个、1至4个、1至5个或1至6个环状碳原子和1至2个、1至3个或1至4个独立地选自氮、磷、氧和硫的环杂原子的单环3、4、5、6或7元环。在另一变体中，杂环基包括具有1至12个环状碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、氧和硫的环杂原子的多环非芳香环。
“卤代”或“卤素”指的是氟、氯、溴和/或碘。当残基经多于一个卤素取代时，可使用对应于所连接的卤素部分的数量的前缀来指示，例如二卤代芳基、二卤代烷基、三卤代芳基指的是经两个(“二”)或三个(“三”)卤代取代的芳基和烷基，其中这些卤代可为但不必为相同的卤代；因此，4-氯-3-氟苯基在二卤代芳基的范围内。其中一个或多个氢经卤代取代的烷基被称为“卤烷基”，例如“C1-6卤烷基”。其中每个氢经卤代取代的烷基被称为“全卤烷基”。一个优选的全卤烷基基团为三氟烷基(-CF3)。类似地，“全卤烷氧基”指的是其中卤素取代构成烷氧基的烷基部分的烃中的每个H的烷氧基基团。一个全卤烷氧基基团的实例为三氟甲氧基(-OCF3)。
“羰基”指的是基团C＝O。
“氧代”指的是＝O部分。
“偕型(Geminal)”指的是连接至同一原子的两个部分之间的关系。例如，在残基–CH2-CRxRy–中，Rx与Ry为偕型，并且Rx可以称为Ry的偕型R基团。
除非另有说明，否则“任选地取代”表示基团可以未经取代或经一个或多个(例如，1、2、3、4或5个)针对该基团所列出的取代基取代，其中取代基可以相同或不同。在一个实施例中，任选地取代的基团具有一个取代基。在另一实施例中，任选地取代的基团具有两个取代基。在另一实施例中，任选地取代的基团具有三个取代基。在另一实施例中，任选地取代的基团具有四个取代基。在一些实施例中，任选地取代的基团具有1至2个、1至3个、1至4个或1至5个取代基。
本文中“抑制剂”一词的使用表示抑制分子靶标(例如，LATS1/2)的活性的分子。本文中的“抑制”表示靶标酶的活性与不存在抑制剂时该酶的活性相比有所降低。在一些实施例中，“抑制”表示靶标酶活性降低至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约95％。在其他实施例中，抑制表示靶标酶活性降低约5％至约25％、约25％至约50％、约50％至约75％、或约75％至100％。在一些实施例中，抑制表示靶标酶活性降低约95％至100％，例如活性降低95％、96％、97％、98％、99％或100％。此类降低可以使用本技术领域中普通技术人员可以识别的多种技术(包括体外激酶测定)来测量。
如本文所用，用于指疾病或病症的“治疗(treatment或treating)”是指获得所需的药理学和/或生理学作用。就部分或完全治愈疾病或病症和/或归因于该疾病或病症的不良反应而言，该作用是治疗性的。如本文所用的“治疗”包括但不限于以下一项或多项：减少疾病或病症引起的一种或多种症状；减轻疾病或病症的程度；稳定疾病或病症(例如，预防或推迟疾病或病症的恶化)；推迟或减缓疾病或病症的进展；改善疾病状态；减少治疗疾病或病症所需的一种或多种药物的剂量；增强另一种药物的作用；提高生活质量；干扰导致或引起疾病或病症的生物通路中的一个或多个点；和/或延长存活期。“治疗”还涵盖减少组织损伤的病理后果和促进损伤组织的再生。本发明的方法涵盖治疗的这些方面中的任何一者或多者。
如本文所用，术语“有效量”表示本发明的化合物的量，其结合其功效与毒性参数，在给定的治疗形式中应当是有效的。如本领域所理解的，有效量可以是一剂或多剂，即，可能需要单剂或多剂来实现所需的治疗终点。在施用一种或多种治疗剂的情况下可考虑到“有效量”，并且若单药与一种或多种其他剂联合而可达成或已经达成所期望或有益的结果，则该化合物或其药用盐可视为以有效量给出。由于化合物的联合作用(例如，相加或协同效应)，可以任选地降低任何联合施用的化合物的适当剂量。
“治疗有效量”指的是足以产生所需的治疗结果(例如，降低LATS1/2媒介的疾病或病症(例如，ARDS)的严重程度或持续时间、稳定其严重程度或消除一种或多种症状)的化合物或其盐的量。对于治疗用途，有益或期望的结果包括例如：减少由疾病引起的一种或多种症状(生化、组织学和/或行为)，包括其并发症和疾病发生期间出现的中间病理表型；提高罹患疾病的患者的生活质量；减少治疗疾病所需的其他药物的剂量；增强另一药物的疗效；推迟疾病进展；和/或延长患者的存活期。
如本申请所用，“药用的(pharmaceutically acceptable)”或“药用的(pharmacologically acceptable)”表示不是生物学上或其他方面不期望的材料，例如，该材料可以掺入施用患者的药物组合物中而不会引起任何显著的不期望的生物学效应或以有害的方式与其中所含组合物的任何其他组分相互作用。药用载体或赋形剂已优选地满足毒理学和制造测试的要求标准且/或包括在美国食品药物监督管理局(U.S.Food and DrugAdministration)编制的惰性成分指南(Inactive Ingredient Guide)中。
在一些实施例中，本发明的化合物的盐为药用盐。“药用盐”为保留游离(非盐)化合物的生物活性的至少一部分并可作为药物或药品向受试者施用的那些盐。此类盐例如包括：(1)酸加成盐，与无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸形成；或者与有机酸诸如乙酸、草酸、丙酸、琥珀酸、顺丁烯二酸、酒石酸等有机酸形成；(2)当存在于母体化合物中的酸质子经金属离子诸如碱金属离子、碱土离子或铝离子取代或与有机碱配位时形成的盐。可接受的有机碱包括乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺等。可接受的无机碱包括氢氧化铝、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸钠、氢氧化钠等。药用盐可在制造过程中原位制备，或通过分别使游离酸或碱形式的纯化的本发明化合物分别与合适的有机或无机碱或酸反应，并分离由此在后续纯化过程中所形成的盐。
如本文所用的术语“赋形剂”表示可用于生产药物或药剂(诸如含有本发明的化合物作为活性成分的片剂)的惰性或非活性物质。术语“赋形剂”所涵盖的各种物质包括但不限于用作黏合剂、崩解剂、包衣、压缩/包封助剂、乳膏或洗剂、润滑剂、非消化道用药溶液、咀嚼片原料、甜味剂或调味剂、悬浮剂/胶凝剂或湿法制粒剂的任何物质。黏合剂包括例如卡波姆、普维酮、黄原胶等；包衣包括例如邻苯二甲酸乙酸纤维素、乙基纤维素、结冷胶、麦芽糊精、肠溶衣等；压缩/包封助剂包括例如碳酸钙、右旋糖、果糖dc(dc–“可直接压缩”)、蜂蜜dc、乳糖(无水或一水合物；任选地与阿斯巴甜、纤维素或微晶纤维素组合)、淀粉dc、蔗糖等；崩解剂包括例如交联羧甲基纤维素钠、结冷胶、羟乙酸淀粉钠等；乳膏或洗剂包括麦芽糊精、角叉菜胶等；润滑剂包括例如硬脂酸镁、硬脂酸、硬脂酰反丁烯二酸钠等；咀嚼片原料包括例如右旋糖、果糖dc、乳糖(一水合物，任选地与阿斯巴甜或纤维素组合)等；悬浮剂/胶凝剂包括例如角叉菜胶、淀粉羟乙酸钠、黄原胶等；甜味剂包括例如阿斯巴甜、右旋糖、果糖dc、山梨糖醇、蔗糖dc等；并且湿法制粒剂包括碳酸钙、麦芽糊精、微晶纤维素等。在一些情况下，术语“赋形剂”与“载体”可互换使用。
术语“受试者”或“患者”指的是动物，诸如哺乳动物，包括但不限于灵长类动物(例如，人类)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等。在某些实施例中，受试者为人类或人类患者。
化合物
本文所述的化合物为式(I)化合物或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物。这些化合物与LATS1/2结合并抑制其活性，比其他激酶(诸如AKT1、ROCK1和PKA)具有更高的效力和选择性，因此可用作LATS1/2的选择性抑制剂，用于治疗可受益于LATS1/2抑制的疾病和病症。
在一个方面，提供一种式(I)化合物：
或其N-氧化物，或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中：
R1为5至14元杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R2为氢、卤素、C1-6烷基、–O(C1-6烷基)、–NH(C1-6烷基)或–N(C1-6烷基)2，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R3为氢、C1-6烷基、卤素、氰基、羟基、–O(C1-6烷基)、C2-6烯基或C2-6炔基，其中该C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R4为氢、卤素、氰基、-NR43aR43b、-OR44、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中该C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
G1为N或CR41，G2为N或CR42，前提条件是G1及G2中的一者或两者为N；
R41和R42独立地为氢、卤素、氰基、-NR43aR43b、-OR44、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中该C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
每个R43a和R43b独立地为氢或C1-6烷基；
R44为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3至14元杂环基，其中R44的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代；
R5为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R5的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者与R6a或R6b以及它们所连接的原子一起形成3至14元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
各R6a和R6b独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基、3至12元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R6a和R6b的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者与R5以及它们所连接的原子一起形成3至14元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R8a和R8b独立地为氢、卤素、羟基、–O(C1-6烷基)或C1-6烷基，其中每个C1-6烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
n为0至8；
每个R9独立地为C1-6烷基；或者两个偕型R9基团在存在的情况下，与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R14独立地为氢或C1-6烷基；
每个R15独立地为C1-6烷基；
每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基；或者R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
每个R10独立地为氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-C(O)NRcRd、-ORb、-OC(O)Ra、-OC(O)NRcRd、-SRb、-S(O)Re、-S(O)2Re、-S(O)(＝NH)Re、-S(O)2NRcRd、-NRcRd、-N(Rf)C(O)Ra、-N(Rf)C(O)ORb、-N(Rf)C(O)NRcRd、-N(Rf)S(O)2Re、-N(Rf)S(O)2NRcRd或-P(O)RgRh，其中R10的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Ra独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基，其中Ra的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Rb独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基，其中Rb的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Rc和Rd独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基；其中Rc和Rd的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
或Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Re独立地为C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基，其中Re的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Rf独立地为氢或C1-6烷基；
每个Rg和Rh独立地为C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基、3至12元杂环基或-O-C1-6烷基；其中Rg和Rh的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
或Rg和Rh与它们所连接的磷原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个R11独立地为氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基、3至8元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra1、-C(O)ORb1、-C(O)NRc1Rd1、-ORb1、-OC(O)Ra1、-OC(O)NRc1Rd1、-SRb1、-S(O)Re1、-S(O)2Re1、-S(O)2NRc1Rd1、-NRc1Rd1、-N(Rf1)C(O)Ra1、-N(Rf1)C(O)ORb1、-N(Rf1)C(O)NRc1Rd1、-N(Rf1)S(O)2Re1、-N(Rf1)S(O)2NRc1Rd1或-P(O)Rg1Rh1；其中R11的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Ra1独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Ra1的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Rb1独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基，其中Rb1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Rc1和Rd1独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Rc1和Rd1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
或Rc1和Rd1与它们所连接的氮原子一起形成4至8元杂环基，
其任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Re1独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Re1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Rf1独立地为氢或C1-6烷基；
每个Rg1和Rh1独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基、3至8元杂环基、或-O-C1-6烷基；其中Rg1和Rh1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
或Rg1和Rh1与它们所连接的磷原子一起形成4至8元杂环基，
其任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个R12独立地为氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基、3至6元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra2、-C(O)ORb2、-C(O)NRc2Rd2、-ORb2、-OC(O)Ra2、-OC(O)NRc2Rd2、-S(O)2Re2、-S(O)2NRc2Rd2、-NRc2Rd2、-N(Rf2)C(O)Ra2、-N(Rf2)C(O)ORb2、-N(Rf2)C(O)NRc2Rd2、-N(Rf2)S(O)2Re2、-N(Rf2)S(O)2NRc2Rd2或-P(O)Rg2Rh2；其中R12的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Ra2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基或3至6元杂环基；其中Ra2的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Rb2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或3至6元杂环基；其中Rb2的C1-6烷基、C3-6环烷基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Rc2和Rd2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或3至8元杂环基；其中Rc2和Rd2的C1-6烷基、C3-6环烷基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
或Rc2和Rd2与它们所连接的氮原子一起形成4至6元杂环基，
其任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Re2独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基或3至6元杂环基；其中Re2的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Rf2独立地为氢或C1-6烷基；
每个Rg2和Rh2独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、3至8元杂环基、或-O-C1-6烷基；其中Rg2和Rh2的C1-6烷基、C3-6环烷基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
或Rg2和Rh2与它们所连接的磷原子一起形成4至6元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；以及
每个R13独立地为氧代、卤素、羟基、-O(C1-6烷基)、氰基、C1-6烷基或C1-6卤代烷基。
在一个方面，提供一种式(I)化合物：
或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中：
R1为5至14元杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R2为氢、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R3为氢、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R4为氢、卤素、氰基、–O(C1-6烷基)、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
G1为N或CR41，并且G2为N或CR42，前提条件是G1和G2中的一者或两者为N；
R41和R42独立地为氢、卤素、氰基、–O(C1-6烷基)、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
每个R6a和R6b独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基、3至12元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R6a和R6b的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R8a和R8b独立地为氢、卤素、羟基、–O(C1-6烷基)或C1-6烷基，其中每个C1-6烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
n为0至8；
每个R9独立地为C1-6烷基；或者两个偕型R9基团在存在的情况下，与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R14独立地为氢或C1-6烷基；
每个R15独立地为C1-6烷基；
每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基；或者R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；并且
每个R10如本文中所定义。
在一些实施例中，化合物为表1X中的化合物及其盐以外者。在一些实施例中，本文的化合物诸如式(I)化合物为选自表1X中的化合物编号1x至3x中的一者或多者以外者。在一些实施例中，本公开的化合物和使用本文所详述的化合物的方法涵盖式(I)化合物中的任一者，包括表1X中所列出的那些化合物及其盐。
表1X
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物，或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中(i)G1和G2两者皆为N，(ii)G1为N且G2为CR42，或(iii)G1为CR41且G2为N。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物，或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，前提条件是当G1为CR41(其中R41为氢)、G2为N、R1为2-取代-4-吡啶基且每个R2、R3和R4为氢时，每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一个方面，提供一种式(IA)化合物：
或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n为如针对式(I)所定义，或本文所详述的变体。
在一个方面，提供一种式(IB)化合物：
或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中R1、R2、R3、R4、R42、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n为如针对式(I)所定义，或本文所详述的变体。
在一些实施例中，化合物为式(IB)化合物，或其药用盐，其中R42为氢。
在一个方面，提供一种式(IC)化合物：
或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中R1、R2、R3、R4、R41、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n为如针对式(I)所定义，或本文所详述的变体。
在一些实施例中，化合物为式(I)或(IC)化合物，或其药用盐，前提条件是化合物为选自表1X中的化合物编号1x至3x中的一者或多者以外的化合物和其盐。在一些实施例中，化合物为式(IC)化合物，或其药用盐，其中R41为氢。在一些实施例中，R7a和R7b不与它们所连接的碳一起形成羰基。在一些实施例中，R1为2-取代-4-吡啶基。在一些实施例中，当R1为2-取代-4-吡啶基时，每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物，或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)，或其盐(例如，药用盐)，其中R1为5至14元杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R1为具有1至12个环状(即，环)碳原子和1至6个独立地选自氮、氧和硫的环状(即，环)杂原子的5至14元杂芳基。在这些实施例中的一些实施例中，R1为具有1至8个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的5至10元杂芳基。在这些实施例中的一些实施例中，R1为具有1至5个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的5、6或7元杂芳基。在这些实施例中的一些实施例中，R1为具有1至6个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的单环5、6或7元杂芳基。-在这些实施例中的一些实施例中，R1为具有1至12个环状碳原子和1至6独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的多环杂芳基。
在一些实施例中，R1为具有1、2或3个选自氮、氧和硫的环杂原子的单环5元杂芳基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为具有1或2个环氮原子的单环5元杂芳基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为具有1或2个环氮原子的单环6元杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为具有1至4个选自氮、氧和硫的环杂原子的稠合双环杂芳基，其各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为具有1、2、3或4个环氮原子的5,6-稠合双环杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为具有1或2个环氮原子的5,6-稠合双环杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，R1为吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基或1,2,4-三唑基，其各自任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，R1为吡唑基，其任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代。在一个变体中，R1为吡唑-3-基、吡唑-4-基或吡唑-5-基，其任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为吡唑-4-基，其任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为异噻唑基，其任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代。在一个变体中，R1为异噻唑-3-基、异噻唑-4-基或异噻唑-5-基，其任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为异噻唑-5-基，其任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R10选自卤素(例如，氯)、氰基和任选地被卤素取代的C1-6烷基(例如，甲基或三氟甲基)。在一些实施例中，R1为吡唑-4-基，其任选地被1至3个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氯)、氰基、未经取代的C1-6烷基(例如，甲基)和C1-6卤代烷基(例如，三氟甲基)。在一些特定实施例中，R1为3-甲基吡唑-4-基或5-甲基吡唑-4-基。在一些特定实施例中，R1为4-甲基异噻唑-5-基。
在一些实施例中，R1为吡啶基，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代。在一个变体中，R1为4-吡啶基，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代。在一些特定实施例中，R1为4-吡啶基(也称为吡啶-4-基)。
在一些实施例中，R1为嘧啶基，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代。在一个变体中，R1为嘧啶-4-基，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代。在一些特定实施例中，R1为嘧啶-4-基。
在一些实施例中，R1为具有1至4个环氮原子的5,6稠合杂芳基(例如，吡咯并-吡啶基、吲唑基、咪唑并-吡啶基、吡咯并-嘧啶基或吡唑并-嘧啶基)，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，R1为吡咯并-吡啶基，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代。在一个变体中，R1为吡咯并[2,3-b]吡啶基(例如，吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代。在一些特定实施例中，
在一些实施例中，R1为吡唑基(例如，吡唑-3-基、吡唑-4-基或吡唑-5-基)、吡啶基(例如，4-吡啶基)或吡咯并-吡啶基(例如，吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)，其各自任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为吡唑-4-基、4-吡啶基或吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基，其各自任选地被1至3个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氯)、氰基、未经取代的C1-6烷基(例如，甲基)和C1-6卤代烷基(例如，三氟甲基)。
在一些实施例中，R1选自由以下项组成的组： 其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。在一些实施例中，R1选自由以下项组成的组：/> 其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物，或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)，或其盐(例如，药用盐)，其中R2为氢、卤素、C1-6烷基、–O(C1-6烷基)、–NH(C1-6烷基)或–N(C1-6烷基)2，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R2为氢、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R2为氢、–NH(C1-6烷基)或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R2为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R2为氢。在一些实施例中，R2为氢或C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施例中，R2为C1-6烷基，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R2为C1-6烷基，其任选地被一个或多个卤素(例如，氟)取代。在一些实施例中，R2为C1-6烷基，其任选地被C6-10芳基(例如，苯基)取代，C6-10芳基任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。在一些实施例中，R2为C1-6烷基，其任选地被5至10元杂芳基(例如，吡唑基)，5至10元杂芳基任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。在一些实施例中，R2为C1-6烷基，其任选地被-N(Rf)C(O)Ra取代。在这些实施例中的一些实施例中，Rf为氢且Ra为C1-6烷基。在一些实施例中，R2为-NH(C1-6烷基)，其中C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R2为-NH(C1-6烷基)(例如，NHMe)。
在一些实施例中，R2为氢、C1-6烷基(例如，甲基)、或经卤素、酰基氨基苯基或吡唑基取代的C1-6烷基，其可进一步经卤素取代(例如，2,2,2-三氟乙基、-CH2NHC(O)CH2CH3、苄基和4-氯吡唑-1-基)。在一些实施例中，R2为氢、-NH(C1-6烷基)(例如，NHMe)、C1-6烷基(例如，甲基)、或经卤素、酰基氨基苯基或吡唑基取代的C1-6烷基，其可进一步经卤素取代(例如，2,2,2-三氟乙基、-CH2NHC(O)CH2CH3、苄基和4-氯吡唑-1-基)。
在一些实施例中，R2选自由以下项组成的组：氢、甲基、 其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。在一些实施例中，R2选自由以下项组成的组：NHMe、CF3、其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)，或其盐(例如，药用盐)，其中R3为氢、C1-6烷基、卤素、氰基、羟基、–O(C1-6烷基)、C2-6烯基或C2-6炔基，其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R3为氢、卤素、氰基、羟基、–O(C1-6烷基)、C1-6烷基或C2-6炔基，其中C1-6烷基和C2-6炔基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R3为氢、卤素、C1-6烷基或-O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R3为氢、C1-6烷基或-O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R3为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R3为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基。在一些实施例中，R3为氢或C1-6烷基。在一些实施例中，R3为氢。在一些实施例中，R3为氢、卤素(例如，氯)、氰基、羟基或–O(C1-6烷基)。在一些实施例中，R3为C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施例中，R3为C1-6烷基，其任选地被烷氧基取代(例如、CH2OCH3)。在一些实施例中，R3为C1-6卤代烷基(例如，2,2,2-三氟乙基)。在一些实施例中，R3-O(C1-6烷基)，其中C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R3-O(C1-6烷基)(例如，甲氧基)。在一些实施例中，R3为C2-6炔基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R3为C2-6炔基，其任选地被一个或多个羟基取代(例如，3-羟基丙-1-炔-1-基或3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)。在一些实施例中，R3选自由以下项组成的组：氢、甲基和2,2,2-三氟乙基。在一些实施例中，R3选自由以下项组成的组：氯、氰基、羟基、甲氧基、3-羟基丙-1-炔-1-基、3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基和甲氧基甲基。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)，或其盐(例如，药用盐)，其中R4为氢、卤素、氰基、-NR43aR43b、-OR44、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；每个R43a和R43b独立地为氢或C1-6烷基；R44为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3至14元杂环基，其中R44的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R4为氢、卤素、-NR43aR43b、-OR44、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R4为氢、卤素、C1-6烷基或-O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R4为氢、卤素、氰基、–O(C1-6烷基)、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R4为氢、卤素或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R4为C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R4为–O(C1-6烷基)，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R4为氢、卤素、C1-6烷基或C3-6环烷基。在一些实施例中，R4为氢、卤素或C1-6烷基。在一些实施例中，R4为氢。在一些实施例中，R4为卤素(例如，氟、氯或溴)。在一些实施例中，R4为C1-6烷基(例如，甲基、乙基、1-丙基或2-丙基)。在一些实施例中，R4选自由以下项组成的组：氢、氟、氯、甲基和环丙基。
在一些实施例中，R4为-OR44，其中R44为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3至14元杂环基，其中R44的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R44为氢。在这些实施例中的一些实施例中，R44为C1-6烷基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R44为：经1、2、3或4个独立地选自由卤素(例如，氟)、羟基、烷氧基(例如，甲氧基)所组成的组的取代基任选地取代的C1-6烷基；3至14元杂环基(例如，氧杂环丁烷基)；C2-6烯基(例如，乙烯基)；和C2-6炔基(例如，乙炔基)。在这些实施例中的一些实施例中，R44为C2-6烯基(例如，烯丙基)。在这些实施例中的一些实施例中，R44为C2-6炔基，其任选地被羟基取代(例如，3-羟基-3-甲基丁-3-炔-1-基)。在这些实施例中的一些实施例中，R44为C3-8环烷基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R44为任选地被氰基取代的C3-8环烷基(例如，3-氰基环丁基)。在这些实施例中的一些实施例中，R44为任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代的3至14元杂环基。在这些实施例中的一些实施例中，R44为3至14元杂环基(例如，氧杂环丁烷-3-基)。在这些实施例中的一些实施例中，R44为任选地被酰基取代的3至14元杂环基(例如，1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)。在一些实施例中，R4为-NR43aR43b，其中每个R43a和R43b独立地为氢或C1-6烷基。在一些实施例中，R4为-NR43aR43b，其中每个R43a和R43b独立地为C1-6烷基(例如，二甲基氨基)。在一些实施例中，R4选自由以下项组成的组：氢、氟、氯、溴、甲基、/> 其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
其意图和理解是，针对式(I)、(IA)、(IB)或(IC)所述的R1、R2、R3和R4中的每个或每个变体可组合，正如各自和每一个组合皆已经单独地且具体地描述。例如，在一些实施例中，R1为吡唑基(例如，吡唑-3-基、吡唑-4-基或吡唑-5-基)、吡啶基(例如，4-吡啶基)或吡咯并-吡啶基(例如，吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)，其各自任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代；R2为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代；R3为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；并且R4为氢、卤素或C1-6烷基。在一些实施例中，R1为吡唑-4-基、4-吡啶基或吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基，其各自任选地被1至3个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氯)、氰基、未经取代的C1-6烷基(例如，甲基)和C1-6卤代烷基(例如，三氟甲基)；每个R2和R3独立地为氢或C1-6烷基；并且R4为氢、卤素(例如，氯)或C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施例中，R1为吡唑基(例如，吡唑-3-基、吡唑-4-基或吡唑-5-基)、异噻唑基(例如，4-甲基异噻唑-5-基)、吡啶基(例如，4-吡啶基)或吡咯并-吡啶基(例如，吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)，其各自任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代；R2为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代；R3为氢、卤素(例如，氯)或C1-6烷基(例如，甲基)；並且R4为氢、卤素、C1-6烷基或-O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R1为吡唑-4-基或4-吡啶基，其各自任选地被1至3个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氯)、氰基、未经取代的C1-6烷基(例如，甲基)和C1-6卤烷基(例如，三氟甲基)；R2为氢或C1-6烷基；R3为氢、卤素(例如，氯)或C1-6烷基(例如，甲基)；並且R4为氢、卤素(例如，氯)、C1-6烷基(例如，甲基)或-O(C1-6烷基)(例如，甲氧基)。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)或其盐(例如，药用盐)，其中R5为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R5的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者与R6a或R6b以及它们所连接的原子一起形成3至14元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基或-C(O)R14，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5与R6a或R6b以及它们所连接的原子一起形成3至14元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，R5为氢或-C(O)R14。在一些实施例中，R14为氢或C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施例中，R14为C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施例中，R5为氢或乙酰基。在一些实施例中，R5为氢。
在一些实施例中，R5为C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，其中R10选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟)、氰基、-ORb、-N(Rf)C(O)Ra、-N(Rf)S(O)2Re、-S(O)2NRcRd、-C(O)NRcRd、任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代的C6-10芳基和任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代的3至12元杂环基。在这些实施例中的一些实施例中，Ra为C1-6烷基，Rb为氢或C1-6烷基，Re为C1-6烷基，并且每个Rc、Rd和Rf为氢。在一些实施例中，R5为C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基、羟基、-O(C1-6烷基)、-NHC(O)(C1-6烷基)、-NHS(O)2(C1-6烷基)、-S(O)2NH2、-C(O)NH2、苯基和3至12元杂环基(例如，氧环丁烷-3-基)。
在一些实施例中，R5为C1-6烷基(例如，甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、2-甲基-1-丙基和2-甲基-2-丙基)。在一些实施例中，R5为经取代的C1-6烷基，其选自由以下项组成的组： 其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。在一些实施例中，R5为经取代的C1-6烷基，其选自由以下项组成的组：/>其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的C3-8环烷基。在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的C4-8环烷基。在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的C3-6环烷基。在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的C4-6环烷基。在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的C4-8环烷基，其中R10选自由卤素(例如，氟)、氰基和羟基所组成的组。在一些实施例中，R5为C3-6环烷基。在一些实施例中，R5为经1、2、3、4或5个独立地选自由卤素(例如，氟)、氰基和羟基所组成的组的取代基取代的C3-6环烷基。
在一些实施例中，R5选自由以下项组成的组：
其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的3至14元杂环基、任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的C6-14芳基、或任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的5至14元杂芳基。
在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的3至14元杂环基。在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的3至10元杂环基。在一些实施例中，R5为具有1至9个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的3至10元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为具有1至2个、1至3个、1至4个、1至5个或1至6个环状碳原子和1至2个、1至3个或1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的单环3、4、5、6或7元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为具有1至2个、1至3个、1至4个或1至5个环状碳原子和1个选自氮、氧和硫的环杂原子的单环3、4、5或6元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为具有1个为氧的环杂原子的单环3至6元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，R5为C6-14芳基或5至14元杂芳基，其各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的C6-14芳基。在一些实施例中，R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的苯基。在一些实施例中，R5为具有1至12个环状碳原子和1至6个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的5至14元杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为具有1至8个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的5至10元杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为具有1至3个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的5或6元杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为吡唑基(例如，3-吡唑基、4-吡唑基或5-吡唑基)，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，R5为选自由以下项组成的组的杂环基： 其各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
在一些实施例中，R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基或-C(O)R14，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R5为：C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基、羟基、-O(C1-6烷基)、-NHC(O)(C1-6烷基)、-NHS(O)2(C1-6烷基)、-S(O)2NH2、-C(O)NH2、苯基和3至12元杂环基(例如，氧环丁烷-3-基)；C3-6环烷基，其经1、2、3、4或5个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基和羟基；具有1个为氧的环杂原子的单环3至6元杂环基；苯基；或者吡唑基(例如，3-吡唑基、4-吡唑基或5-吡唑基)。在这些实施例中的一些实施例中，R14为C1-6烷基(例如，甲基)。
在一些实施例中，R5选自由以下项组成的组：氢、乙酰基、甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基、/>
其各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)，或其盐(例如，药用盐)，其中每个R6a和R6b独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基、3至12元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R6a和R6b的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者与R5以及它们所连接的原子一起形成3至14元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基。在一些实施例中，每个R6a和R6b独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基、3至12元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R6a和R6b的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基。
在一些实施例中，每个R6a和R6b独立地为氢或C1-6烷基。在一些实施例中，R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基。在一些实施例中，每个R6a和R6b独立地为氢或C1-6烷基；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基。
在一些实施例中，每个R6a和R6b独立地为氢、-C(O)OR15、-C(O)NR16aR16b或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，每个R6a和R6b独立地为氢或C1-6烷基。在一些实施例中，每个R6a和R6b为氢。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的C1-6烷基。在这些实施例中的一些实施例中，R10选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟)；-ORb，其中每个Rb独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；或者-N(Rf)S(O)2Re，其中Re独立地为C1-6烷基(例如，甲基)且Rf独立地为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、-C(O)OR15、-C(O)NR16aR16b或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b。在一些实施例中，R15为C1-6烷基。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者为-C(O)O(C1-6烷基)。
在一些实施例中，R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为-C(O)NR16aR16b。在一些实施例中，每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基，或R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者为-C(O)NR16aR16b，其中每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者为-C(O)NR16aR16b，其中R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成具有1至3个选自氮、氧和硫的环杂原子的4至7元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成具有1至2个选自氮、氧和硫的环杂原子的5或6元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成吡咯烷-1-基或吗啉-4-基、其各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，每个R6a和R6b独立地为氢、C1-6烷基(例如，甲基)、-C(O)O(C1-6烷基)或-C(O)NR16aR16b，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、C1-6烷基(例如，甲基)、-C(O)O(C1-6烷基)或-C(O)NR16aR16b，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基。在这些实施例中的一些实施例中，每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成吡咯烷-1-基或吗啉-4-基。
在一些实施例中，R6a和R6b中的一者选自由以下项组成的组：氢、甲基、 其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者选自由以下项组成的组：/>其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
在一些实施例中，R6a和R6b中的一者与R5以及它们所连接的原子一起形成3至14元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；并且R6a和R6b中的另一者为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基、3至12元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者与R5以及它们所连接的原子一起形成4至8元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，并且R6a和R6b中的另一者为氢或C1-6烷基。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者与R5以及它们所连接的原子一起形成4至8元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，并且R6a和R6b中的另一者为氢。在一些实施例中，R6a和R6b中的一者与R5以及它们所连接的原子一起形成5或6元杂环基(例如，吗啉)，并且R6a和R6b中的另一者为氢。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物，或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)，或其盐(例如，药用盐)，其中每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基。在一些实施例中，每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基；或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基。在一些实施例中，R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基。
在一些实施例中，每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基。在一些实施例中，每个R7a和R7b为氢。在一些实施例中，R7a和R7b中的一者为氢，并且R7a和R7b中的另一者为C1-6烷基(例如，甲基)。
在一些实施例中，R7a和R7b中的一者为氢，并且R7a和R7b中的另一者为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物，或其变体诸如式(IA),(IB)和(IC)，或其盐(例如，药用盐)，其中每个R8a和R8b独立地为氢、卤素、羟基、–O(C1-6烷基)或C1-6烷基，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、卤素、羟基、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)。在这些实施例中的一些实施例中，R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、卤素(例如，氟)或羟基。在这些实施例中的一些实施例中，R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、氟或羟基。在一些实施例中，每个R8a和R8b为氢。在一些实施例中，每个R8a和R8b为氟。
其意图和理解是，针对式(I)、(IA)、(IB)或(IC)所述的R1、R2、R3和R4中的每个或每个变体可与针对式(I)、(IA)、(IB)或(IC)所述的R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b中的每个或每个变体组合，正如各自和每一个组合皆已经单独地且具体地描述。例如，在一些实施例中，R1为吡唑基(例如，吡唑-3-基、吡唑-4-基或吡唑-5-基)、吡啶基(例如，4-吡啶基)或吡咯并-吡啶基(例如，吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)，其各自任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代；R2为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代；R3为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；R4为氢、卤素或C1-6烷基；R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基或-C(O)R14，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；每个R6a和R6b独立地为氢、-C(O)OR15、-C(O)NR16aR16b或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、卤素、羟基、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)。在这些实施例中的一些实施例中，R1为吡唑基(例如，吡唑-3-基、吡唑-4-基或吡唑-5-基)、异噻唑基(例如，异噻唑-5-基)、吡啶基(例如，4-吡啶基)或吡咯并-吡啶基(例如，吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)，其各自任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代；R2为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代；R3为氢、卤素(例如，氯)或C1-6烷基(例如，甲基)；R4为氢、卤素、-O(C1-6烷基)或C1-6烷基；R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基或-C(O)R14，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；每个R6a和R6b独立地为氢、-C(O)OR15、-C(O)NR16aR16b或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、卤素、羟基、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)。在一些实施例中，R14为C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施例中，R15为C1-6烷基。在一些实施例中，每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成具有1至2个选自氮、氧和硫的环杂原子的5或6元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，R1为吡唑-4-基、异噻唑-5-基、4-吡啶基或吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基，其各自任选地被1至3个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氯)、氰基、未经取代的C1-6烷基(例如，甲基)和C1-6卤烷基(例如，三氟甲基)；每个R2和R3独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；R4为氢、卤素(例如，氯)、-O(C1-6烷基)(例如，甲氧基)或C1-6烷基(例如，甲基)；R5为(i)C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基、羟基、-O(C1-6烷基)、-NHC(O)(C1-6烷基)、-NHS(O)2(C1-6烷基)、-S(O)2NH2、-C(O)NH2、苯基和3至12元杂环基(例如，氧环丁烷-3-基)，(ii)C3-6环烷基，其经1、2、3、4或5个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基和羟基，(iii)具有1个为氧的环杂原子的单环3至6元杂环基，(iv)苯基或(v)吡唑基(例如，3-吡唑基、4-吡唑基或5-吡唑基)；R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、C1-6烷基(例如，甲基)、-C(O)O(C1-6烷基)或-C(O)NR16aR16b，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；R7a和R7b中的一者为氢，并且R7a和R7b中的另一者为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；並且R8a和R8b为氢。在一些实施例中，R1为吡唑-4-基、4-吡啶基或吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基，其各自任选地被1至3个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氯)、氰基、未经取代的C1-6烷基(例如，甲基)和C1-6卤烷基(例如，三氟甲基)；每个R2和R3独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；R4为氢、卤素(例如，氯)或C1-6烷基(例如，甲基)；R5为(i)C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基、羟基、-O(C1-6烷基)、-NHC(O)(C1-6烷基)、-NHS(O)2(C1-6烷基)、-S(O)2NH2、-C(O)NH2、苯基和3至12元杂环基(例如，氧环丁烷-3-基)，(ii)C3-6环烷基，其经1、2、3、4或5个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基和羟基，(iii)具有1个为氧的环杂原子的单环3至6元杂环基，(iv)苯基或(v)吡唑基(例如，3-吡唑基、4-吡唑基或5-吡唑基)；R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、C1-6烷基(例如，甲基)、-C(O)O(C1-6烷基)或-C(O)NR16aR16b，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；R7a和R7b中的一者为氢，并且R7a和R7b中的另一者为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；並且R8a和R8b为氢。在一些实施例中，每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成吡咯烷-1-基或吗啉-4-基。
在一些实施例中，化合物为式(I)化合物，或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)，或其盐(例如，药用盐)，其中n为0至8。螺环的哌啶部分未经取代(n为0)或经1至8个R9基团取代(n＝1、2、3、4、5、6、7或8)。在一些实施例中，当存在每个R9时，其独立地为C1-6烷基；或者两个偕型R9基团在存在的情况下，与它们所连接的碳一起形成羰基。
其意图和理解是，针对式(I)、(IA)、(IB)或(IC)所述的R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b中的每个或每个变体可与针对式(I)、(IA)、(IB)或(IC)所述的R9和n组合，正如各自和每一个组合皆已经单独地且具体地描述。例如，在一些实施例中，R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文所详述，或本文所述的其任意组合，並且n为0(即，不存在R9)。
在一些实施例中，式(I)化合物为式(II)化合物：
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或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、G1、G2、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)所详述，或本文所详述的变体。
在一些实施例中，式(I)或(II)化合物为式(II-A)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)或(II)所详述，或本文所详述的变体。
在一些实施例中，式(I)或(II)化合物为式(II-B)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R42、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)或(II)所详述，或本文所详述的变体。
在一些实施例中，式(I)或(II)化合物为式(II-C)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R41、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)或(II)所详述，或本文所详述的变体。
在一些实施例中，化合物为式(II)、(II-A)、(II-B)或(II-C)化合物或其盐(例如，药用盐)，其中R1为吡唑基(例如，吡唑-3-基、吡唑-4-基或吡唑-5-基)、吡啶基(例如，4-吡啶基)或吡咯并-吡啶基(例如，吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)，其各自任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代；R2为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代；R3为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；R4为氢、卤素或C1-6烷基；R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基或-C(O)R14，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；每个R6a和R6b独立地为氢、-C(O)OR15、-C(O)NR16aR16b或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基、或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、卤素、羟基、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)。在一些实施例中，R14为C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施例中，R15为C1-6烷基。在一些实施例中，每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成具有1至2个选自氮、氧和硫的环杂原子的5或6元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在一些实施例中，化合物为式(II)、(II-A)、(II-B)或(II-C)化合物或其盐(例如，药用盐)，其中R1为吡唑-4-基、异噻唑-5-基、4-吡啶基或吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基，其各自任选地被1至3个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氯)、氰基、未经取代的C1-6烷基(例如，甲基)和C1-6卤烷基(例如，三氟甲基)；R2独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；R3独立地为氢、卤素(例如，氯)或C1-6烷基(例如，甲基)；R4为氢、卤素(例如，氯)、-O(C1-6烷基)(例如，甲氧基)或C1-6烷基(例如，甲基)；R5为(i)C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基、羟基、-O(C1-6烷基)、-NHC(O)(C1-6烷基)、-NHS(O)2(C1-6烷基)、-S(O)2NH2、-C(O)NH2、苯基和3至12元杂环基(例如，氧环丁烷-3-基)，(ii)C3-6环烷基，其经1、2、3、4或5个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基和羟基，(iii)具有1个为氧的环杂原子的单环3至6元杂环基，(iv)苯基，或(v)吡唑基(例如，3-吡唑基、4-吡唑基或5-吡唑基)；R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、C1-6烷基(例如，甲基)、-C(O)O(C1-6烷基)或-C(O)NR16aR16b，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；R7a和R7b中的一者为氢，并且R7a和R7b中的另一者为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；並且R8a和R8b为氢。在一些实施例中，R1为吡唑-4-基、4-吡啶基或吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基，其各自任选地被1至3个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氯)、氰基、未经取代的C1-6烷基(例如，甲基)和C1-6卤烷基(例如，三氟甲基)；每个R2和R3独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；R4为氢、卤素(例如，氯)或C1-6烷基(例如，甲基)；R5为(i)C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基、羟基、-O(C1-6烷基)、-NHC(O)(C1-6烷基)、-NHS(O)2(C1-6烷基)、-S(O)2NH2、-C(O)NH2、苯基和3至12元杂环基(例如，氧环丁烷-3-基)，(ii)C3-6环烷基，其经1、2、3、4或5个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素(例如，氟)、氰基和羟基，(iii)具有1个为氧的环杂原子的单环3至6元杂环基，(iv)苯基或(v)吡唑基(例如，3-吡唑基、4-吡唑基或5-吡唑基)；R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、C1-6烷基(例如，甲基)、-C(O)O(C1-6烷基)或-C(O)NR16aR16b，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；R7a和R7b中的一者为氢，并且R7a和R7b中的另一者为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；並且R8a和R8b为氢。在一些实施例中，每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基(例如，甲基)，或R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成吡咯烷-1-基或吗啉-4-基。
在一些实施例中，式(I)、(IA)、(II)或(II-A)化合物为式(III)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)、(IA)、(II)或(II-A)所述或其适用的变体，p为0、1、2、3或4；並且每个RZ独立地为氢、卤素、氰基或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，p为0(不存在RZ)。在一些实施例中，p为1且RZ为氟(例如，3-氟)或氰基(例如，3-氰基)。在这些实施例中的一些实施例中，每个R2、R3和R4为氢。
在一些实施例中，式(I)、(IA)、(II)或(II-A)化合物为式(IV)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)、(IA)、(II)或(II-A)所述或其适用的变体，q为0、1、2或3；並且每个RY独立地为氢、卤素、氰基、-O(C1-6烷基)或C1-6烷基，其中RY的C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，每个RY独立地为氢、卤素、氰基或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。在一些实施例中，q为1。在一些实施例中，q为1且RY为甲基、氟、氯、氰基或三氟甲基。在一些实施例中，RY在3或5位置处连接至吡唑-4-基。在一个变体中，RY为5-甲基或3-甲基。在这些实施例中的一些实施例中，每个R2、R3和R4为氢。
在一些实施例中，式(I)、(IA)、(II)、(II-A)或(III)化合物为式(V)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)、(IA)、(II)、(II-A)或(III)所述或其适用的变体。在这些实施例中的一些实施例中，每个R2、R3和R4为氢，并且R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如本文针对式(I)、(IA)、(II)、(II-A)或(III)所述或为其适用的变体。
在一些实施例中，式(I)、(IA)、(II)、(II-A)或(IV)化合物为式(VI)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)、(IA)、(II)、(II-A)或(IV)所述或其适用的变体。在这些实施例中的一些实施例中，每个R2、R3和R4为氢，并且R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如本文针对式(I)、(IA)、(II)、(II-A)或(IV)所述或为其适用的变体。
在一些实施例中，式(I)、(IB)、(II)或(II-B)化合物为式(VII)或(VIII)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)、(IB)、(II)或(II-B)所述或其适用的变体。在这些实施例中的一些实施例中，每个R2、R3和R4为氢，并且R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)、(IB)、(II)或(II-B)所述或其适用的变体。
在一些实施例中，式(I)、(IC)、(II)或(II-C)化合物为式(IX)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)、(IC)、(II)或(II-C)所述或其适用的变体。在这些实施例中的一些实施例中，每个R2、R3和R4为氢，并且R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b为如本文针对式(I)、(IC)、(II)或(II-C)所述或其适用的变体。在这些实施例中的一些实施例中，每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
在式(I)化合物或其变体，诸如式(II)或其盐(例如，药用盐)的一些实施例中，每个R10独立地为氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-C(O)NRcRd、-ORb、-OC(O)Ra、-OC(O)NRcRd、-SRb、-S(O)Re、-S(O)2Re、-S(O)(＝NH)Re、-S(O)2NRcRd、-NRcRd、-N(Rf)C(O)Ra、-N(Rf)C(O)ORb、-N(Rf)C(O)NRcRd、-N(Rf)S(O)2Re或-N(Rf)S(O)2NRcRd；其中R10的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。
在一个变体中，R10独立地为氧代、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基、3至12元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-C(O)NRcRd、-ORb、-OC(O)Ra、-OC(O)NRcRd、-S(O)2Re、-S(O)2NRcRd、-NRcRd、-N(Rf)C(O)Ra、-N(Rf)C(O)ORb、-N(Rf)C(O)NRcRd、-N(Rf)S(O)2Re或-N(Rf)S(O)2NRcRd；其中R10的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。
在一个变体中，R10独立地为卤素(例如，氯或氟)、氰基、-ORb、-N(Rf)C(O)Ra、-N(Rf)S(O)2Re、-S(O)2NRcRd、-C(O)NRcRd、任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代的C1-6烷基、任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代的C3-8环烷基、任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代的C6-10芳基、任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代的5至10元杂芳基或任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代的3至12元杂环基。
在一个变体中，R10独立地为卤素(例如，氯或氟)、氰基或羟基。
在一个变体中，R10独立地为卤素(例如，氟或氯)、氰基和C1-6烷基，其任选地被卤素(例如，甲基或三氟甲基)取代。
在一个变体中，R10为羟基、氰基、氟、氯、-CH2F、-CHF2、-CF3、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2、-O(C1-6烷基)、–SO2(C1-6烷基)、-S(O)2NRcRd、-C(O)NRcRd或-N(Rf)C(O)Ra。
在一个变体中，R10为C2-6烯基(例如，乙烯基)或C2-6炔基(例如，乙炔基)，其各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。
在一个变体中，R10独立地为卤素(例如，氟或氯)、氰基、-ORb、-N(Rf)C(O)Ra、-N(Rf)S(O)2Re、-S(O)2NRcRd、-C(O)NRcRd、任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代的C6-10芳基或任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代的3至12元杂环基。在这些实施例中的一些实施例中，Ra为C1-6烷基，Rb为氢或C1-6烷基，Re为C1-6烷基，Rf为氢，每个Rc和Rd独立地为氢或C1-6烷基，或Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成具有1至3个选自氮、氧和硫的环杂原子4至7元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。
在一些实施例中，其中基团(例如，R1)包含任选地被1至5(例如，1、2、3、4或5；1、2、3或4；或者1、2或3；或者1或2)个独立地选自R10的取代基取代的5至14元杂芳基，R10选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟或氯)；氰基；氧代；C1-6烷基；C1-6卤代烷基；和-ORb，其中Rb为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，其中基团(例如，R2、R3、R4、R44、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b或R9)包含任选地被1至5(例如，1、2、3、4或5；1、2、3或4；或者1、2或3；或者1或2)个独立地选自R10的取代基取代的C1-6烷基，每个R10独立地为C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基、卤素、氰基、-C(O)ORb、-C(O)NRcRd、-ORb、-S(O)2NRcRd、-NRcRd、-N(Rf)C(O)Ra或-N(Rf)S(O)2Re，其中R10的C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。在这些实施例中的一些实施例中，R11选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟或氯)、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基和-ORb，其中Rb为氢或C1-6烷基。在这些实施例中的一些实施例中，R11选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟或氯)、氰基和羟基。在一个变体中(例如，关于R2中的经取代的C1-6烷基)，R10选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟或氯)；任选地被卤素或C1-6烷基取代的C6-14芳基(例如，苯基)；任选地被卤素或C1-6烷基、-ORb取代的5至14元杂芳基(例如，吡啶基或吡唑基)，其中Rb为氢或C1-6烷基；和-N(Rf)C(O)Ra，其中Ra为C1-6烷基且Rf为氢。在一个变体中(例如，关于R3中的经取代的C1-6烷基)，R10选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟或氯)和-ORb，其中Rb为氢或C1-6烷基。在一个变体中(例如，关于R4或R44中的经取代的C1-6烷基)，R10选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟或氯)；C2-6烯基；C2-6炔基；-ORb，其中Rb为氢或C1-6烷基；和-C(O)NRcRd，其中Rc和Rd独立地为氢或C1-6烷基。在一个变体中(例如，关于R5中的经取代的C1-6烷基)，R10选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟或氯)；C2-6烯基(例如，乙烯基)、C2-6炔基(例如，乙炔基)；任选地被卤素、氰基或羟基取代的C3-5环烷基；任选地被卤素取代的C6-14芳基(例如，苯基)；任选地被卤素、羟基或乙酰基取代的4或5元杂环基(例如，氧杂环丁烷基或氮杂环丁烷基)；-C(O)NRcRd，其中Rc和Rd独立地为氢或C1-6烷基；-ORb，其中Rb为氢或C1-6烷基；-S(O)2NRcRd，其中Rc和Rd独立地为氢或C1-6烷基；和-N(Rf)C(O)Ra，其中Ra为C1-6烷基且Rf为氢。在一个变体(例如，关于R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b或R9中的经取代的C1-6烷基)，R10选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟或氯)和-ORb，其中Rb为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，其中基团(例如，R5)包含任选地被1至5(例如，1、2、3、4或5；1、2、3或4；或者1、2或3；或者1或2)个独立地选自R10的取代基取代的C3-8环烷基，R10选自由以下项组成的组：卤素(例如，氟或氯)、氰基和-ORb，其中Rb为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Ra独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基；其中Ra的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。在一个变体中，Ra独立地为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Rb独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基；其中Rb的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。在一个变体中，Rb独立地为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Rc和Rd独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基；其中Rc和Rd的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；或者Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。在一个变体中，每个Rc和Rd独立地为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Re独立地为C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基；其中Re的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代。在一个变体中，Re独立地为C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Rf独立地为氢或C1-6烷基。在一个变体中，Rf为氢。
在一些实施例中，每个R11独立地为氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基、3至8元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra1、-C(O)ORb1、-C(O)NRc1Rd1、-ORb1、-OC(O)Ra1、-OC(O)NRc1Rd1、-SRb1、-S(O)Re1、-S(O)2Re1、-S(O)2NRc1Rd1、-NRc1Rd1、-N(Rf1)C(O)Ra1、-N(Rf1)C(O)ORb1、-N(Rf1)C(O)NRc1Rd1、-N(Rf1)S(O)2Re1或-N(Rf1)S(O)2NRc1Rd1；其中R11的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代。
在一个变体中，每个R11独立地为氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、3至8元杂环基、卤素、氰基或-ORb1；其中R11的C1-6烷基、C3-6环烷基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代。
在一个变体中，R11为C1-6烷基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代。在一个变体中，R11为3至8元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代。
在一个变体中，R11为卤素、氰基、-NRc1Rd1、-C(O)NRc1Rd1、-ORb1、-S(O)2Re1、C1-6卤烷基、-(C1-6伸烷基)-OH或-(C1-6伸烷基)-NH2。
在一个变体中，R11为羟基、氰基、卤素、-CHF2、-CF3、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2、-O(C1-6烷基)、–SO2(C1-6烷基)、-S(O)2NRc1Rd1、-C(O)NRc1Rd1或-N(Rf1)C(O)Ra1。
在一个变体中，R11为卤素、氰基、-O(C1-6烷基)、-O(C1-6伸烷基)-NH2或-(C1-6伸烷基)-OH。
在一些实施例中，每个Ra1独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Ra1的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代。
在一些实施例中，每个Rb1独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Rb1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代。在一个变体中，Rb1独立地为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Rc1和Rd1独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Rc1和Rd1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；或者Rc1和Rd1与它们所连接的氮原子一起形成4至8元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代。在一个变体中，每个Rc1和Rd1独立地为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Re1独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Re1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代。在一个变体中，Re1独立地为C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Rf1独立地为氢或C1-6烷基。在一个变体中，Rf1为氢。
在一些实施例中，每个R12独立地为氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基、3至6元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra2、-C(O)ORb2、-C(O)NRc2Rd2、-ORb2、-OC(O)Ra2、-OC(O)NRc2Rd2、-S(O)2Re2、-S(O)2NRc2Rd2、-NRc2Rd2、-N(Rf2)C(O)Ra2、-N(Rf2)C(O)ORb2、-N(Rf2)C(O)NRc2Rd2、-N(Rf2)S(O)2Re2或-N(Rf2)S(O)2NRc2Rd2；其中R12的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代。
在一个变体中，每个R12独立地为氧代、卤素、氰基、-ORb2、或C1-6烷基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代。在一个变体中，每个R12独立地为氧代、卤素、氰基或羟基。
在一个变体中，R12为C1-6烷基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代。
在一个变体中，R12为氧代、羟基、C1-6烷基或-O(C1-6烷基)。
在一些实施例中，每个Ra2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基或3至6元杂环基；其中Ra2的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代。在一个变体中，Ra2独立地为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Rb2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或3至6元杂环基；其中Rb2的C1-6烷基、C3-6环烷基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代。在一个变体中，Rb2为氢。
在一些实施例中，每个Rc2和Rd2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或3至8元杂环基；其中Rc2和Rd2的C1-6烷基、C3-6环烷基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；或者Rc2和Rd2与它们所连接的氮原子一起形成4至6元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代。在一个变体中，每个Rc2和Rd2独立地为氢或C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Re2独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基或3至6元杂环基；其中Re2的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代。在一个变体中，Re2独立地为C1-6烷基。
在一些实施例中，每个Rf2独立地为氢或C1-6烷基。在一个变体中，Rf2为氢。
在一些实施例中，每个R13独立地为氧代、卤素、羟基、-O(C1-6烷基)、氰基、C1-6烷基或C1-6卤烷基。
在一个变体中，每个R13独立地为卤素、羟基、-O(C1-6烷基)、氰基或C1-6烷基。
在一个变体中，R13为氧代、羟基、C1-6烷基或-O(C1-6烷基)。
代表性化合物列于表1中。在一些情况下，对映异构体或非对映异构体通过其各自的特性来鉴定，例如，它们在手性HPLC/SFC上的相对保留时间或其生物活性，并且手性中心的绝对立体构型被任意分配。
表1
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在一些实施例中，提供选自表1中的化合物编号101至292的化合物或其盐(例如，药用盐)。在一些实施例中，化合物选自表1中的化合物编号101至201或其盐(例如，药用盐)。在一些实施例中，化合物选自表1中的化合物编号101至198或其盐(例如，药用盐)。在一些实施例中，化合物选自表1中的化合物编号202至292或其盐(例如，药用盐)。
本文所述的式(I)化合物或其盐可以立体异构形式存在(例如，其含有一个或多个不对称碳原子)。各种立体异构体(对映异构体和非对映异构体)及其混合物涵盖于本文所公开的主题的范围内。应了解，本文所公开的主题包括本文所述的特定组的组合和子集。本文所公开的主题的范围包括立体异构体的混合物和纯化对映异构体或对映/非对映富集的混合物。应了解，本文所公开的主题包括本文所定义的特定组的组合和子集。
还应理解，式(I)化合物或盐可以如式中所示结构之外的互变异构形式存在，并且也涵盖于本文所述的主题的范围内。例如，吡唑基基团可作为如下所示的一种或两种互变异构体存在：
当在结构图中示出特定互变异构体中的一者时，无论所示出中的一者是存在的主要互变异构体还是次要互变异构体，两种互变异构体皆为预期的。
本文所公开的主题也包括本文所述的化合物的同位素标记形式，但事实上，一个或多个原子由原子质量或质量数不同于自然界中通常所发现的原子质量或质量数的原子置换。可摻入本文所述的化合物和其药用盐的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘、氯的同位素，例如2H、3H、11C、13C、14C、15N、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl、123I和125I。
本文所述的主题包括式(I)化合物的前药、代谢物、衍生物和药用盐。式(I)化合物的代谢物包括通过以下工艺所产生的化合物，该工艺包含使式(I)化合物与哺乳动物接触足以得到其代谢物的时间段。
如果式(I)化合物为碱，则可以通过本领域中可用的任何适当方法来制备所需的药用盐，例如，用以下项处理游离碱：用无机酸，诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、磷酸等；或者用有机酸，诸如乙酸、顺丁烯二酸、琥珀酸、苦杏仁酸、延胡索酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸，诸如葡萄醣醛酸或半乳醣醛酸、α-羟基酸，诸如柠檬酸或酒石酸、氨基酸，诸如天冬氨酸或麸氨酸、芳香羟基酸，诸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸，诸如对甲苯磺酸或乙磺酸等。
如果式(I)化合物为酸，则可以通过任何适当方法来制备所需的药用盐，例如，用以下项处理游离酸：用无机碱或有机碱诸如胺(伯胺、仲胺或叔胺)、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等。适当盐的说明性实例包括但不限于源自氨基酸(诸如甘氨酸和精氨酸)、氨、伯胺、仲胺和叔胺以及环状胺(诸如哌啶、吗啉和哌)的有机盐，以及源自钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂的无机盐。
式(I)化合物可以为“前药”的形式，其包括具有可在体内代谢的部分的化合物。通常，前药在体内通过酯酶或通过其他机制代谢为活性药物。前药的实例及其用途是本领域所熟知的(参见例如，Berge等人(1977),“Pharmaceutical Salts”,J.Pharm.Sci.66:1-19)。前药可在化合物的最终分离和纯化期间原位制备，或通过使呈其游离酸形式的纯化的化合物分别与适当酯化剂反应来制备。羟基基团可经由用羧酸处理而转化为酯。前药部分的实例包括经取代和未经取代的支化或非支化低级烷基酯部分(例如，丙酸酯)、低级烯基酯、二低级烷基-氨基低级烷基酯(例如，二甲基氨基乙酯)、酰基氨基低级烷基酯(例如，乙酰氧基甲酯)、酰氧基低级烷基酯(例如，新戊酰氧基甲酯)、芳基酯(苯酯)、芳基-低级烷基酯(例如，苄酯)、经取代的(例如，经甲基、卤素或甲氧基取代基取代的)芳基和芳基-低级烷基酯、酰胺、低级烷基酰胺、二低级烷基酰胺和羟基酰胺。也包括在体内经由其他机制转化为活性形式的前药。在方面，本发明的化合物为本文的式中任一者的前药。
一般合成方法
本公开的化合物可通过以下所显示和描述的说明性合成反应方案中所示的多种方法来制备，其中R基团如针对式(I)所述。用于制备这些化合物的起始材料和试剂通常可从商业供货商(例如Sigma-Aldrich Chemical Co.)处获得，或通过本领域技术人员已知的方法按照以下文献中所述的程序来制备，这些参考文献例如：Fieser和Fieser的Reagentsfor Organic Synthesis，Wiley&Sons：New York，第1-21卷；R.C.LaRock，ComprehensiveOrganic Transformations，第2版，Wiley-VCH，New York1999；Comprehensive OrganicSynthesis，B.Trost和I.Fleming(编)，第1至9卷，Pergamon，Oxford，1991；ComprehensiveHeterocyclic Chemistry，A.R.Katritzky和C.W.Rees(编)，Pergamon，Oxford，1984，第1至9卷；Comprehensive Heterocyclic Chemistry II，A.R.Katritzky和C.W.Rees(编)，Pergamon，Oxford，1996，第1至11卷；和Organic Reactions，Wiley&Sons：New York，1991，第1至40卷；和后续版本。以下合成反应方案仅说明可合成本公开的化合物的一些方法，并且可对这些合成反应方案进行各种修改，并且将由参考本文所包含的本公开的本领域技术人员想到。
处于说明目的，以下反应方案提供合成本发明的化合物以及关键中间体的途径。有关各个反应步骤的更详细描述，参见以下实例部分。本领域技术人员将理解，可使用其他合成途径。尽管一些具体的起始材料和试剂描绘于方案中且如下文所讨论，但是可替换为其他起始材料和试剂以提供各种衍生物或反应条件。此外，根据本公开，可使用本领域技术人员所熟知的常规化学方法进一步修饰通过下文所述方法所制备的许多化合物。
如果需要，合成反应方案的起始材料和中间体可使用常规技术进行分离和纯化，这些技术包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、层析等。这些材料可使用常规手段进行表征，包括物理常数和谱图数据。
除非有相反的说明，否则本文所述的反应优选的是在惰性气氛下在大气压下于-78℃至约150℃、更优选的是于约0℃至约125℃的反应温度范围内进行，并且最优选且适宜的是于室温(或环境温度)或约20℃进行。
以下方案中的一些化合物用一般型取代基来描绘；但是，本领域技术人员将立即理解取代基的性质可以变化，以得到本发明所考虑的各种化合物。此外，反应条件为示例性的并且替代性前提条件是众所周知的。以下实例中的反应顺序并不意味着限制如权利要求书中所述的本发明的范围。
方案1
方案1示出经由式(I-4)的杂芳族化合物与式(I-3)的2-N-保护的2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物的SnAr反应来制备式(I)化合物的一般合成方案，其中R1、R2、R3、R4、G1、G2、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如本文所详述，其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，P可为本领域技术人员已知的任何适当的保护基，其包括但不限于Boc、Fmoc、Cbz等，并且X'为离去基团，其包括但不限于Cl、Br、I、OMs和OTs。在步骤1，将式(I-4)化合物与式(I-3)化合物在任何适当的有机碱或无机碱存在下反应，以形成式(I-2)化合物。在步骤2，将保护基P自式(I-2)化合物去除，以形成式(I-1)化合物。适当的去保护技术是本领域已知的，并且将根据所用保护基而变化。在一个实施例中，保护基P为Boc，并且式(I-2)化合物通过使式(I-2)化合物与强酸或弱酸(诸如TFA、TsOH、HCl等)接触来去保护。在步骤3，使式(I-1)化合物与R5–X'的化合物在适当的无机碱或有机碱存在下接触，其中X'为离去基团，或与式R5–CHO的醛化合物在还原剂存在下接触，以形成式(I)化合物。合适的还原剂包括但不限于NaBH4、NaBH3CN、NaBH(OAc)3等。
(I-4)化合物可通过本文(包括说明性实例)所详述的方法和本领域已知的方法由适当的起始材料和试剂来制备。方法可根据R1、R2、R3、R4、G1和G2的性质而变化。
方案2
方案2示出经由式4的吡啶并[3,4-d]嘧啶化合物与式5的2-N-保护的2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物的SnAr反应来制备式(IA)化合物的一般合成方案，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如本文所详述，其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，P可为本领域技术人员已知的任何适当的保护基，其包括但不限于Boc、Fmoc、Cbz等，并且X'为离去基团，其包括但不限于Cl、Br、I、OMs和OTs。在步骤1，将式1化合物与式2化合物在任何适当的有机碱或无机碱存在下反应，以形成式3化合物。在步骤2，使式3化合物与激活剂接触以形成式4化合物。适当的活化剂包括但不限于POCl3、POBr3、MsCl、TsCl等。在步骤3，将式4化合物与式5化合物在任何适当的有机碱或无机碱存在下反应，以形成式6化合物。在步骤4，将保护基P自式6化合物去除，以形成式7化合物。适当的去保护技术是本领域已知的，并且将根据所用保护基而变化。在一个实施例中，保护基P为Boc，并且式6化合物通过使式6化合物与强酸或弱酸(诸如TFA、TsOH、HCl等)接触来去保护。在步骤5，使式7化合物与式8化合物在适当的无机碱或有机碱存在下接触，或与式9化合物在还原剂存在下接触，以形成式(I)化合物。合适的还原剂包括但不限于NaBH4、NaBH3CN、NaBH(OAc)3等。
替代性地，式3化合物可通过将式1a的亚胺酰胺与式2a的3-氟烟碱酸在碱存在下反应或通过将式1b的醛与式2b的3-氨基烟碱酰胺在氧化剂(例如，氧化铜)存在下反应来制备。
方案3
方案3示出由式12的杂芳基硼酸酯与式11的N-保护的(吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物的交叉偶联来制备式(IA)化合物的一般合成方案，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如本文所详述，式(IA)化合物进而可经由式10的吡啶并[3,4-d]嘧啶化合物与式5的2-N-保护的2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷化合物的SnAr反应来制备，其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，P可为本领域技术人员已知的任何适当的保护基，其包括但不限于Boc、Fmoc、Cbz等，并且X'为离去基团，其包括但不限于Cl、Br、I、OMs和OTs。在步骤1，将式5化合物与式10化合物在任何适当的无机碱或有机碱存在下偶联，以形成式11化合物。在步骤2，将式11化合物与式12化合物在Pd催化剂和任何适当的有机碱或无机碱存在下反应，以形成式6化合物。可以使用的任何适当的Pd催化剂包括但不限于Pd(PPh3)4。在步骤3，将保护基P自式6化合物去除，以形成式7化合物。适当的去保护技术是本领域已知的，并且将根据所用保护基而变化。在一个实施例中，保护基P为Boc，并且式6化合物通过使式6化合物与强酸或弱酸(诸如TFA、TsOH、HCl等)接触来去保护。在步骤4，使式7化合物与式8化合物在适当的无机碱或有机碱存在下接触，或与式9化合物在还原剂存在下接触，以形成式(IA)化合物。合适的还原剂包括但不限于NaBH4、NaBH3CN、NaBH(OAc)3等。在步骤2，可使用适当的R1-Zn或R1-Sn化合物作为式12的硼酸酯的替代物，与适当的Pd催化剂和碱配合使用。
在如方案1至3的反应顺序中例示的制备式(I)或(IA)化合物的方法中，式(I)或(IA)化合物可使用具有与中间体和最终产物中对应的取代基不同的取代基的起始材料来制备。起始材料中的取代基可以为前驱物，其在下一个中间体或最终产物中转化为所期望的取代基。例如，具有为氟的R4基团的起始材料在后续步骤中转化为具有为烷氧基(例如，甲氧基)的R4基团的中间体或最终产物。在其他实例中，具有为乙基(-CH2CH3)的R4基团的最终产物由具有为乙烯基(-CH＝CH2)的R4基团的起始材料来制备，或具有为羟基甲基(-CH2OH)的R4基团的最终产物通过还原具有为甲酰基(-CH＝O)的R4基团的中间体来制备，中间体由具有为乙烯基(-CH＝CH2)的R4基团的起始材料来制备。同样地，具有为炔基(例如、-C≡CC(Me)2OH)的R3基团的最终产物经由使用具有为氯的R3基团的起始材料的Stille偶联来制备。式(I)或(IA)化合物还可由另一种式(I)或(IA)化合物通过修改取代基中的一者或多者来制备。例如，具有为1-羟基苄基或1-吡啶基-1-羟基甲基的R2基团的式(IA)化合物可分别由具有为苄基或吡啶基甲基的R2基团的式(IA)化合物来制备。
因此，在一个方面，提供一种制备式(I)化合物：
或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物((例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物的方法，其中R1、R2、R3、R4、G1、G2、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n为如本文所定义，该方法包含：
a)将式(I-4)化合物：
与式(I-3)化合物：
在碱存在下反应，以产生式(I-2)化合物：
其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs；并且P为保护基；
b)将保护基P从式(I-2)化合物去除，以产生式(I-1)化合物：
以及
c)将式(I-1)化合物转化为式(I)化合物。
在一个实施例中，通过使式(I-1)化合物与式R5–X'的化合物(其中X'为离去基团)在碱存在下接触，将式(I-1)化合物转化为式(I)化合物。在一些实施例中，X'选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、OMs、OTs。
在另一实施例中，通过使式(I-1)化合物与式R5-CHO的醛化合物在还原剂存在下接触，将式(I-1)化合物转化为式(I)化合物。在一个实施例中，还原剂选自由以下项组成的组：NaBH4、NaBH3CN和NaBH(OAc)3。
在一个方面，提供一种制备式(IA)化合物：
或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物的方法，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n为如本文所定义，该方法包含：
a)将式4化合物：
与式5化合物：
在碱存在下反应，以产生式6化合物：
其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs；并且P为保护基；
b)将保护基P从式6化合物去除，以产生式7化合物：
以及
c)将式7化合物转化为式(IA)化合物。
在一个实施例中，通过使式7化合物与式8化合物在碱存在下接触，将式7化合物转化为式(IA)化合物：
其中X'为离去基团。在一些实施例中，X'选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、OMs、OTs。在一些实施例中，式8化合物是环氧化物，其中X'为氧化物，其变成作为所得R5基团的一部分的羟基基团。
在另一实施例中，通过使式7化合物与式9化合物在还原剂存在下接触，将式7化合物转化为式(IA)化合物：
在一个实施例中，还原剂选自由以下项组成的组：NaBH4、NaBH3CN和NaBH(OAc)3。
在另一实施例中，该方法进一步包含产生式4化合物。特定而言，该方法可进一步包含：
d)将式1化合物
与式2化合物：
在碱存在下混合，以形成式3化合物：
以及
e)使式3化合物与激活剂接触以形成式4化合物。
在一些实施例中，该方法进一步包含产生式4化合物，包含以下步骤：
d)将式1a化合物
与式2a化合物：
在碱存在下混合，以形成式3化合物。
在一些实施例中，该方法进一步包含产生式4化合物，包含以下步骤：
d)将式1b化合物
与式2b化合物：
在氧化剂(例如，CuO)存在下混合，以形成式3化合物。
在一个方面，激活剂选自由以下项组成的组：POCl3、POBr3、MsCl和TsCl。
在另一方面，提供一种制备式(IA)化合物：
或其盐(例如，药用盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物的方法，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n为如本文所定义，该方法包含：
a)使式12化合物：
与式11化合物：
在钯催化剂和碱存在下接触，以形成式6化合物：
其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，并且P为保护基；
b)将保护基P从式6化合物去除，以产生式7化合物：
以及
c)将式7化合物转化为式(IA)化合物。
在一个实施例中，通过使式7化合物与式8化合物在碱存在下接触，将式7化合物转化为式(IA)化合物：
其中X'为离去基团。在一些实施例中，X'选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、OMs、OTs。
在另一实施例中，通过使式7化合物与式9化合物在还原剂存在下接触，将式7化合物转化为式(IA)化合物：
在一个实施例中，还原剂选自由以下项组成的组：NaBH4、NaBH3CN和NaBH(OAc)3。
在另一方面，该方法进一步包含产生式11化合物。特定而言，该方法进一步包含：
d)使式5化合物：
与式10化合物：
在碱存在下偶联，以形成式11化合物，其中X和P如本文所述。
本文还提供根据本文所述的方法或工艺中的任一者或多者制备的产物。
药物组合物和制剂
本文所述的化合物可与药用载体或赋形剂一起配制成药物组合物。
式(I)化合物或其变体可根据标准制药实践配制为药物组合物。根据这方面，提供一种药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)与药用赋形剂、稀释剂或载体结合。优选的组合物取决于施用方法，并且通常包含一种或多种常规药用载体、佐剂和/或载体(统称为“赋形剂”)。此类组合物可配制用于全身或局部递送的各种途径，例如通过口服施用、局部施用、经粘膜施用、直肠施用、阴道内施用或通过皮下、鞘内、静脉内、肌肉内、腹膜内、鼻内、眼内或心室内注射来施用。
口服固体剂型包括例如胶囊、片剂、丸剂、膜剂、粉剂和颗粒剂。在此类组合物中，化合物或盐通常与一种或多种赋形剂组合。如果口服施用，化合物或盐可与例如乳糖、蔗糖、淀粉、链烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐和钙盐、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合，然后压片或封装以方便施用。此类胶囊或片剂可包含控释制剂，例如可以在化合物或盐在羟丙基甲基纤维素中的分散体中提供。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可包含pH调节剂，诸如柠檬酸钠；碳酸镁或碳酸钙或碳酸氢盐；酒石酸、延胡索酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸和磷酸及其组合。片剂和丸剂还可用肠溶衣制备。
用于口服施用的液体剂型包括例如药用乳剂(包括水包油和油包水乳剂两者)、溶液(包括水性和非水性溶液两者)、悬液剂(包括水性和非水性悬液剂两者)、糖浆以及包含本领域常用的惰性稀释剂(例如，水)的酏剂。此类组合物还可包含例如润湿剂、乳化剂、悬浮剂、甜味剂和调味剂。
肠胃外施用包括皮下注射、静脉内注射、肌肉内注射、胸骨内注射和输注。可根据已知技术使用适当的分散剂、润湿剂和/或悬浮剂配制可注射制剂(例如，无菌可注射水性或油性悬液剂)。可接受的载体和溶剂包括例如水、1,3-丁二醇、林格氏溶液、等渗氯化钠溶液、温和的不挥发油(例如，合成甘油单酯或甘油二酯)、脂肪酸(例如，油酸)、二甲基乙酰胺、界面活性剂(例如，离子和非离子去污剂)和/或聚乙二醇。
用于肠胃外施用的制剂可例如由具有用于口服施用的制剂中提及的赋形剂中的一者或多者的无菌粉末或颗粒来制备。本发明的化合物或盐可溶解于水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化钠和/或各种pH调节剂中。如有必要，可以用适当的酸、碱或pH调节剂调节pH。
用于直肠施用的栓剂可通过例如将本发明的化合物或盐与合适的无刺激性赋形剂混合来制备，该赋形剂在常温下为固体，但在直肠温度下为液体，因此将在直肠中融化以释放药物。适当的赋形剂包括例如：可可脂；合成甘油单酯、甘油二酯或甘油三酯、脂肪酸和/或聚乙二醇。
本公开的化合物可被配制用于局部施用于皮肤或黏膜，即，经皮肤或透皮。此类施用可包括使用例如透皮贴剂或离子电渗装置。
除上述那些代表性剂型之外，药用赋形剂和载体通常是本领域技术人员已知的，因此包括在本发明中。药物制剂总体论讨于例如：Hoover,J.,Remington的PharmaceuticalSciences(Mack Publishing Co.,1975)和Ansel的Pharmaceutical Dosage Forms andDrug Delivery Systems(Lippincott Williams&Wilkins,2005)；和后续版本。
供应用的药物组合物(或制剂)可以多种方式包装，具体取决于用于施用药物的方法。一般而言，用于分发的制品包括容器，该容器中存放有适当形式的药物制剂。合适的容器是本领域技术人员所熟知的，并且包括瓶(塑料瓶和玻璃瓶)、小袋、安瓿、塑料袋、金属圆筒等材料。容器还可包括干预防护组件，以防止不小心接触到包装的内容物。此外，容器上还贴有描述容器内容物的标签。标签还可包括适当的警告。
包含式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)的药物组合物可按照与良好医学实践一致(即，含量、浓度、时间表、疗程、载体和施用途径)的方式进行配制、给药和施用。在此情况中考虑的因素包括待治疗的特定疾病、待治疗的特定哺乳动物、个别患者的临床状况、疾病原因、递送药剂的部位、施用方法、施用日程和医疗从业人员已知的其他因素。待施用的化合物的“治疗有效量”将受这些考虑因素的支配，并且是预防、改善或治疗凝血因子所介导的病症所需的最小量。在一些实施例中，该量是低于对宿主有毒或使宿主更易于出血的量。
使用方法
本文所述的化合物可用于抑制LATS1/2的活性。
在一个实施例中，本文所述的主题涉及在细胞中抑制LATS1/2的方法，该方法包含使细胞与有效量的式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)或其药用盐或本文所述的药物组合物接触。
在另一实施例中，本文所述的主题涉及一种治疗疾病或病症的方法，该方法包含向有此需要的受试者施用有效量的式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)或其药用盐或本文所述的药物组合物接触。在该实施例的某些方面，疾病或病症由LATS1/2介导。在一些方面，疾病或病症为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。在其他方面，疾病或病症为特发性肺纤维化(IPF)。
在另一方面，提供一种促进损伤后的组织再生的方法或治疗可受益于LATS1/2抑制的疾病或病症的方法，该方法包含向有此需要的受试者施用有效量的式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)或其药用盐。在一个实施例中，疾病或病症为ARDS。在其他方面，疾病或病症为IPF。
本文还提供一种式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)或其药用盐，其用于在细胞中抑制LATS1/2的方法中。
本文还提供一种式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)或其药用盐，其用于促进损伤后组织再生的方法中或用于治疗可受益于LATS1/2抑制的疾病或病症的方法中。在一个实施例中，疾病或病症为ARDS。在其他方面，疾病或病症为IPF。
在另一方面，提供一种式(I)化合物或其变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)或其药用盐在本文所详述的方法(例如，促进损伤后组织再生或治疗ARDS或IPF)中的用途。
本文还提供一种式(I)化合物或其任何变体，诸如式(IA)、(IB)和(IC)或其药用盐用于制造药物的用途，该药物用于本文所详述的方法(例如，促进损伤后组织再生或治疗ARDS或IPF)中。
在本文所述的实施例中的任一者中，受试者可为人类。
进一步提供实施本文所详述的方法的试剂盒，其包含本文所述的一种或多种化合物或包含本文所述的化合物的药物组合物。试剂盒可采用本文所述的化合物中的任一者。在一个变体中，试剂盒采用本文所述的化合物或其药用盐。试剂盒可用于本文所述的用途中的任意一者或多者，并且因此可包含使用说明，例如，用于促进损伤后组织再生和/或用于治疗可受益于LATS1/2抑制的疾病或病症。在一些实施例中，试剂盒包括用于治疗ARDS的说明。在一些实施例中，试剂盒包括用于治疗IPF的说明。
试剂盒通常包括合适的包装。试剂盒可包括一个或多个容器，该容器包含如本文中所述的任何化合物或组合物。可将每种组分(如果有多于一种组分)包装在单独的容器中，或者在允许交叉反应和储存期限的情况下将一些组分组合在一个容器中。试剂盒的一种或多种组分可为无菌的和/或可包含于无菌包装内。
试剂盒可以为单位剂型、散装包装(例如多剂量包装)或亚单位剂量。例如，可提供包含足够剂量的如本文所述的化合物(例如，治疗有效量)和/或用于LATS1/2依赖性疾患(例如，ARDS)的第二医药活性化合物的试剂盒，以提供有效治疗受试者的持续较长时间，诸如1周、2周、3周、4周、6周、8周、3个月、4个月、5个月、7个月、8个月、9个月或更长时间中的任一者。试剂盒还可包括多个单位剂量的化合物和使用说明，并且包装的数量足以在药房(例如，医院药房和配制药房)中储存和使用。
试剂盒可任选地包括一组说明，通常是书面说明，尽管包含说明的电子储存媒体(例如，磁盘或光盘)还为可接受的，其涉及本发明的方法的一种或多种组分的使用。试剂盒随附的说明通常包括有关组分及其对受试者的施用的信息。
以下实例以说明而非限制性方式提供。
另外实施例
实施例1.一种式(I)化合物：
或其药用盐，其中：
R1为5至14元杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R2为氢、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R3为氢、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R4为氢、卤素、氰基、–O(C1-6烷基)、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
G1为N或CR41，G2为N或CR42，前提条件是G1及G2中的一者或两者为N；
R41和R42独立地为氢、卤素、氰基、–O(C1-6烷基)、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
每个R6a和R6b独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基、3至12元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R6a和R6b的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至14元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R8a和R8b独立地为氢、卤素、羟基、–O(C1-6烷基)或C1-6烷基，其中每个C1-6烷基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
n为0至8；
每个R9独立地为C1-6烷基；或者两个偕型R9基团在存在的情况下，与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R14独立地为氢或C1-6烷基；
每个R15独立地为C1-6烷基；
每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基；或者R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
每个R10独立地为氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-C(O)NRcRd、-ORb、-OC(O)Ra、-OC(O)NRcRd、-SRb、-S(O)Re、-S(O)2Re、-S(O)(＝NH)Re、-S(O)2NRcRd、-NRcRd、-N(Rf)C(O)Ra、-N(Rf)C(O)ORb、-N(Rf)C(O)NRcRd、-N(Rf)S(O)2Re、-N(Rf)S(O)2NRcRd或-P(O)RgRh，其中R10的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Ra独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基，其中Ra的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Rb独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基，其中Rb的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Rc和Rd独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基；其中Rc和Rd的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
或Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Re独立地为C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至12元杂环基，其中Re的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Rf独立地为氢或C1-6烷基；
每个Rg和Rh独立地为C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基、3至12元杂环基或-O-C1-6烷基；其中Rg和Rh的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至12元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
或Rg和Rh与它们所连接的磷原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个R11独立地为氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基、3至8元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra1、-C(O)ORb1、-C(O)NRc1Rd1、-ORb1、-OC(O)Ra1、-OC(O)NRc1Rd1、-SRb1、-S(O)Re1、-S(O)2Re1、-S(O)2NRc1Rd1、-NRc1Rd1、-N(Rf1)C(O)Ra1、-N(Rf1)C(O)ORb1、-N(Rf1)C(O)NRc1Rd1、-N(Rf1)S(O)2Re1、-N(Rf1)S(O)2NRc1Rd1或-P(O)Rg1Rh1；其中R11的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Ra1独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Ra1的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Rb1独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基，其中Rb1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Rc1和Rd1独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Rc1和Rd1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
或Rc1和Rd1与它们所连接的氮原子一起形成4至8元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Re1独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基或3至8元杂环基；其中Re1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Rf1独立地为氢或C1-6烷基；
每个Rg1和Rh1独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基、3至8元杂环基、或-O-C1-6烷基；其中Rg1和Rh1的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5至10元杂芳基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
或Rg1和Rh1与它们所连接的磷原子一起形成4至8元杂环基，
其任选地被1、2、3或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个R12独立地为氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基、3至6元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra2、-C(O)ORb2、-C(O)NRc2Rd2、-ORb2、-OC(O)Ra2、-OC(O)NRc2Rd2、-S(O)2Re2、-S(O)2NRc2Rd2、-NRc2Rd2、-N(Rf2)C(O)Ra2、-N(Rf2)C(O)ORb2、-N(Rf2)C(O)NRc2Rd2、-N(Rf2)S(O)2Re2、-N(Rf2)S(O)2NRc2Rd2或-P(O)Rg2Rh2；其中R12的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Ra2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基或3至6元杂环基；其中Ra2的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Rb2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或3至6元杂环基；其中Rb2的C1-6烷基、C3-6环烷基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Rc2和Rd2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或3至8元杂环基；其中Rc2和Rd2的C1-6烷基、C3-6环烷基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
或Rc2和Rd2与它们所连接的氮原子一起形成4至6元杂环基，
其任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Re2独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基或3至6元杂环基；其中Re2的C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5至6元杂芳基和3至6元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Rf2独立地为氢或C1-6烷基；
每个Rg2和Rh2独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、3至8元杂环基、或-O-C1-6烷基；其中Rg2和Rh2的C1-6烷基、C3-6环烷基和3至8元杂环基各自任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；
或Rg2和Rh2与它们所连接的磷原子一起形成4至6元杂环基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R13的取代基取代；以及
每个R13独立地为氧代、卤素、羟基、-O(C1-6烷基)、氰基、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；
前提条件是该化合物为表1X中的化合物及其盐以外者。
实施例2.根据实施例1所述的化合物，其中G1和G2两者均为N，并且化合物为式(IA)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如实施例1中所定义。
实施例3.根据实施例1所述的化合物，其中G1为N且G2为CR42，并且化合物为式(IB)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R42、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如实施例1中所定义。
实施例4.根据实施例1所述的化合物，其中G1为CR41且G2为N，并且化合物为式(IC)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R41、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如实施例1中所定义。
实施例5.根据实施例1至4中任一项所述的化合物，其中R1为具有1或2个环氮原子的6元杂芳基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代。
实施例6.根据实施例5所述的化合物，其中R1为4-吡啶基，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例7.根据实施例1至4中任一项所述的化合物，其中R1为具有1或2个环氮原子的5元杂芳基，其任选地被1、2、3或4个独立地选自R10的取代基取代。
实施例8.根据实施例7所述的化合物，其中R1为吡唑-4-基，其任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代。
实施例9.根据实施例1至4中任一项所述的化合物，其中R1为具有1或2个环氮原子的5,6-稠合杂芳基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例10.根据实施例1至4中任一项所述的化合物，其中R1选自由以下项组成的组：
其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
实施例11.根据实施例1至10中任一项所述的化合物，其中R2为氢或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例12.根据实施例11所述的化合物，其中R2选自由以下项组成的组：氢、甲基、其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
实施例13.根据实施例1至12中任一项所述的化合物，其中R3为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基。
实施例14.根据实施例13所述的化合物，其中R3选自由以下项组成的组：氢、甲基和2,2,2-三氟乙基。
实施例15.根据实施例1至14中任一项所述的化合物，其中R4为氢、卤素、C1-6烷基或C3-6环烷基。
实施例16.根据实施例15所述的化合物，其中R4选自由以下项组成的组：氢、氟、氯、甲基和环丙基。
实施例17.根据实施例1至16中任一项所述的化合物，其中R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基或-C(O)R14，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例18.根据实施例17所述的化合物，其中R5为氢或-C(O)R14。
实施例19.根据实施例18所述的化合物，其中R5为氢或乙酰基。
实施例20.根据实施例17所述的化合物，其中R5为C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例21.根据实施例20所述的化合物，其中R5选自由以下项组成的组：甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、2-甲基-1-丙基和2-甲基-2-丙基、
其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
实施例22.根据实施例17所述的化合物，其中R5为C4-8环烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例23.根据实施例22所述的化合物，其中R5选自由以下项组成的组：
/>其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
实施例24.根据实施例17所述的化合物，其中R5为任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的3至14元杂环基、任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的C6-14芳基、或任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代的5至14元杂芳基。
实施例25.根据实施例24所述的化合物，其中R5选自由以下项组成的组：
其各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代，其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
实施例26.根据实施例1至25中任一项所述的化合物，其中每个R6a和R6b独立地为氢或C1-6烷基；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基。
实施例27.根据实施例1至25中任一项所述的化合物，其中R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、-C(O)OR15、-C(O)NR16aR16b或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例28.根据实施例27所述的化合物，其中R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b；其中每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基。
实施例29.根据实施例27所述的化合物，其中R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为-C(O)NR16aR16b；其中R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成4至12元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例30.如实施例27的化合物，其中R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者选自由以下项组成的组：氢、甲基、 其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
实施例31.根据实施例1至30中任一项所述的化合物，其中每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基；或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基。
实施例32.根据实施例1至31中任一项所述的化合物，其中R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、卤素、羟基、C1-6烷基、或–O(C1-6烷基)。
实施例33.根据实施例32所述的化合物，其中每个R8a和R8b为氢。
实施例34.根据实施例1至33中任一项所述的化合物，其中n为0。
实施例35.根据实施例1至34中任一项所述的化合物，其中化合物为式(II)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、G1、G2、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如实施例1至30中任一项中所定义。
实施例36.根据实施例35所述的化合物，其中G1和G2两者均为N，并且化合物为式(II-A)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如实施例35中所定义。
实施例37.根据实施例35所述的化合物，其中G1为N且G2为CR42，并且化合物为式(II-B)化合物：
/>
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R42、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如实施例35中所定义。
实施例38.根据实施例37所述的化合物，其中R42为氢。
实施例39.根据实施例35所述的化合物，其中G1为CR41且G2为N，并且化合物为式(II-C)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R41、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如实施例35中所定义。
实施例40.如实施例39的化合物，其中R41为氢。
实施例41.根据实施例35至40中任一项所述的化合物，其中：
R1为吡唑基、吡啶基或吡咯并-吡啶基，其各自任选地被1至3个独立地选自R10的取代基取代；
R2为氢或C1-6烷基，其任选地被1至5个独立地选自R10的取代基取代；
R3为氢或C1-6烷基；
R4为氢、卤素或C1-6烷基；
R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基、3至14元杂环基或-C(O)R14，其中R5的C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5至14元杂芳基和3至14元杂环基各自任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；
每个R6a和R6b独立地为氢、-C(O)OR15、-C(O)NR16aR16b或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基；或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；
R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、卤素、羟基、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)；
R14为C1-6烷基；
R15为C1-6烷基；以及
每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基，或R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成具有1至2个选自氮、氧和硫的环杂原子的5或6元杂环基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例42.根据实施例35至40中任一项所述的化合物，其中：
R1为吡唑-4-基、4-吡啶基或吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基，其各自任选地被1至3个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素、氰基、未经取代的C1-6烷基和C1-6卤代烷基；
每个R2和R3独立地为氢或C1-6烷基；
R4为氢、卤素或C1-6烷基；
R5为(i)C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素、氰基、羟基、-O(C1-6烷基)、-NHC(O)(C1-6烷基)、-NHS(O)2(C1-6烷基)、-S(O)2NH2、-C(O)NH2、苯基和3至12元杂环基，
(ii)C3-6环烷基，其经1、2、3、4或5个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素、氰基和羟基，
(iii)具有1个环杂原子的单环3至6元杂环基，该环杂原子为氧，
(iv)苯基，或
(v)吡唑基；
R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、C1-6烷基、-C(O)O(C1-6烷基)或-C(O)NR16aR16b，或R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；
R7a和R7b中的一者为氢，并且R7a和R7b中的另一者为氢或C1-6烷基，或R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；
R8a和R8b为氢；以及
每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基，或R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成吡咯烷-1-基或吗啉-4-基。
实施例43.根据实施例1至34中任一项所述的化合物，其中化合物为式(III)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b在适用时如实施例1至30中任一项中所定义；
p为0、1、2、3或4；以及
每个RZ独立地为氢、卤素、氰基或C1-6烷基，其任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例44.根据实施例43所述的化合物，其中p为0，并且该化合物为式(V)化合物：
或其药用盐。
实施例45.根据实施例1至34中任一项所述的化合物，其中化合物为式(IV)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b在适用时如实施例1至30中任一项中所定义；
q为0、1、2或3；以及
每个RY独立地为氢、卤素、氰基、-O(C1-6烷基)或C1-6烷基，其中RY的C1-6烷基任选地被1、2、3、4或5个独立地选自R10的取代基取代。
实施例46.根据实施例45所述的化合物，其中q为1，并且RY为甲基、氟、氯、氰基或三氟甲基。
实施例47.根据实施例1至34中任一项所述的化合物，其中化合物为式(VII)或(VIII)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b在适用时如实施例1至34中任一项中所定义。
实施例48.根据实施例1至34中任一项所述的化合物，其中化合物为式(IX)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b在适用时如实施例1至34中任一项中所定义。
实施例49.根据实施例1至48中任一项所述的化合物，其中每个R2、R3和R4为氢。
实施例50.根据实施例1所述的化合物，其中该化合物选自由表1中的化合物编号101至201或其药用盐所组成的组。
实施例51.一种药物组合物，其包含根据实施例1至50中任一项所述的化合物、或其药用盐；以及药用赋形剂。
实施例52.一种制备式(I)化合物：
或其药用盐的方法，其中R1、R2、R3、R4、G1、G2、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如实施例1中所定义，该方法包含：
a)将式(I-4)化合物：
其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，与式(I-3)化合物：
其中P为保护基，在碱存在下反应，以产生式(I-2)化合物：
b)将保护基P从式(I-2)化合物去除，以产生式(I-1)化合物：
以及
c)将式(I-1)化合物转化为式(I)化合物。
实施例53.根据实施例52所述的方法，其中式(I-1)化合物通过以下而转化为式(I)化合物：(i)使式(I-1)化合物与式R5–X'化合物在碱存在下接触，其中X'为离去基团，或(ii)使该式(I-1)化合物与式R5–CHO的醛在还原剂存在下接触。
实施例54.根据实施例52所述的方法，其中G1和G2两者均为N，并且该方法进一步包括：
d)将式1化合物
与式2化合物：
在碱存在下混合，以形成式3化合物：
以及
e)使式3化合物与活化剂接触，以形成式(I-4)化合物，其中G1和G2两者均为N。
实施例55.一种制备式(IA)化合物：
或其药用盐的方法，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如实施例1中所定义，该方法包含：
a)使式12化合物：
与式11化合物：
在钯催化剂和碱存在下接触，以形成式6化合物：
其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，并且P为保护基；
b)将保护基P从式6化合物去除，以产生式7化合物：
以及
c)将式7化合物转化为式(IA)化合物。
实施例56.根据实施例55所述的方法，其进一步包括：
d)使式5化合物：
与式10化合物：
其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，在碱存在下偶联，以形成式11化合物。
实施例57.根据实施例55或56所述的方法，其中该式7化合物通过以下而转化为式(IA)化合物：(i)使式7化合物与式8化合物：
其中X'为离去基团，在碱存在下接触；或者
(ii)使该式7化合物与式9化合物在还原剂存在下接触：
实施例58.一种在细胞中抑制LATS1/2的方法，该方法包括使细胞与根据实施例1至50中任一项所述的化合物、或其药用盐；或者根据权利要求51的药物组合物接触。
实施例59.一种治疗疾病或病症的方法，该方法包括向有此需要的受试者施用有效量的根据实施例1至50中任一项所述的化合物、或其药用盐；或者根据实施例51所述的药物组合物。
实施例60.根据实施例54所述的方法，其中疾病或病症为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。
实例
缩写
AcOH–乙酸
Boc–叔丁氧羰基
Cbz–羧基苄基
DBU–1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯
DCM–二氯甲烷
DIEA或DIPEA–N,N-二异丙基乙胺
DMA–二甲基乙酰胺
DMF–二甲基甲酰胺
DMSO–二甲基亚砜
DTT–二硫苏糖醇
EtOAc–乙酸乙酯
EtOH–乙醇
Fmoc–茀基甲基氧基羰基
HATU–1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐
HEPES–4-(2-羟基乙基)-1-哌乙磺酸
LiHMDS–双(三甲基甲硅烷基)酰胺化锂
MeCN--乙腈
MeOH–甲醇
Ms–甲基磺酰基
NaBH(OAc)3–三乙酰氧基硼氢化钠
NBS–N-溴琥珀酰亚胺
NMO–N-甲基吗啉-N-氧化物
Pd(PPh3)4–四(三苯基膦)钯(0)
SEM–(2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基
SFC–超临界流体层析
TBS–叔丁基二甲基甲硅烷基
TBSCl–叔丁基二甲基甲硅烷基氯
TFA–三氟乙酸
THF–四氢呋喃
Ts–甲苯磺酰基
合成实例
实例101
2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物101)
步骤1：2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
于0℃向2-甲基-2-丁醇钾(12.45g,98.59mmol)于THF(80mL)中的溶液中逐滴添加(约4mL/min)3-氨基异烟碱酸乙基甲酯(6.0g,39.43mmol)和4-氰基吡啶(4.93g,47.32mmol)于THF(80mL)中的溶液。使反应温热至室温，并搅拌16小时。添加水(50mL)和乙酸(15mL)。将混合物于室温搅拌20分钟，将所得黄色沉淀物过滤，并将固体用水(30mL×2)洗涤，以得到黄色固体状标题化合物(5g,49％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.08(s,1H),9.15(s,1H),8.81(d,J＝6.0Hz,2H),8.70(d,J＝5.2Hz,1H),8.11(d,J＝6.0Hz,2H),8.00(d,J＝5.2Hz,1H)。LCMS(ESI)m/z：225.2[M+H]+。
步骤2：4-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
将2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(2.5g,11.15mmol)于三氯氧化磷(17mL,182.38mmol)中的溶液加热至110℃持续16小时。冷却至室温后，在真空中浓缩混合物。将粗残余物溶解于DCM(200mL)中，并于0℃用饱和NaHCO3水溶液(100mL)碱化至pH 8。有机层经无水Na2SO4干燥、过滤并在真空中浓缩，以得到棕色固体状标题化合物(2.4g，粗产物)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),8.95(d,J＝5.6Hz,1H),8.88-8.85(m,2H),8.39-8.34(m,2H),8.18(m,J＝5.2Hz,1H)。LCMS(ESI)m/z：242.9[M+H]+。
步骤3：2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
向2打兰小瓶中添加4-氯-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(300mg，1.236mmol，1当量)、氟化钾(215mg，3.71mmol，3当量)，随后添加1-甲基-2-吡咯烷酮(4.10mL,0.3M)、三乙胺(0.862mL，6.18mmol，5当量)和2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(310mg，1.24mmol，1当量)。将于室温搅拌2小时。然后经由添加水(3mL)将反应淬灭，用EtOAc(5mL)稀释。分离各层；将有机相用水(3×3mL)洗涤，随后用盐水(2×3mL)洗涤。有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物在Genevac上进一步浓缩16小时以去除残余DMSO。然后向粗残余物中添加1mL DCM，随后添加0.5mL TFA。将混合物于室温搅拌4小时，然后在真空中浓缩，然后从DCM(5mL)进一步浓缩2倍，以去除尽可能多的残余TFA。然后将粗残余物通过HPLC纯化，以得到4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(348mg，1.00mmol，产率，81％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.26(s,1H),8.79–8.74(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.35–8.29(m,2H),7.90(d,J＝5.7Hz,1H),4.02–3.88(m,4H),2.85(t,J＝7.0Hz,2H),2.67(s,2H),1.72(t,J＝5.7Hz,4H),1.61(t,J＝7.1Hz,2H)。未观察到可交换的胺NH质子。LCMS(ESI)m/z：347.2[M+H]+。
实例102
4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物102)
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(100mg,0.26mmol)于1,2-二氯乙烷(3mL)中的溶液中添加甲醛(106mg，1.31mmol，37％，于水中)和乙酸(0.03mL,0.52mmol)。将混合物于室温搅拌10分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(277mg,1.31mmol)。混合物于室温搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩。将粗残余物溶解于EtOAc(20mL)中，用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过逆相层析(乙腈35％至65％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3于水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(10mg,10％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.79-8.74(m,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.35-8.29(m,2H),7.88(d,J＝6.0Hz,1H),4.03-3.93(m,2H),3.93-3.82(m,2H),2.53-2.48(m,2H),2.39(s,2H),2.23(s,3H),1.78-1.66(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：361.2[M+H]+。
实例103和104
(R)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-1-醇和(S)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-基)丙-1-醇(化合物103和104)
步骤1：2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-1-醇
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(110mg,0.29mmol)于MeOH(4mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.11mL,0.58mmol)。将反应混合物于室温搅拌5分钟，向该混合物中添加乙酸(0.03mL,0.52mmol)和羟丙酮(0.06mL,0.81mmol)。将混合物于室温搅拌20分钟，然后向其中添加氰基硼氢化钠(60mg,0.95mmol)。混合物于室温搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过逆相层析(乙腈10％至40％/0.225％甲酸于水中的溶液)纯化，以得到黃色固体状标题化合物(50mg,43％)。LCMS(ESI)m/z：405.3[M+H]+。
步骤2：(R)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-1-醇和(S)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-1-醇
将2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-1-醇(50mg,0.12mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak AD(250mm×30mm,10um)、超临界CO2/EtOH+0.1％NH4OH＝45/55；60mL/min)分离，以得到标题化合物，两者皆为白色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例103(3.9mg，第二峰)：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.24(s,1H),8.70(d,J＝5.6Hz,2H),8.54(d,J＝5.6Hz,1H),8.45(d,J＝6.0Hz,2H),7.92(d,J＝5.2Hz,1H),4.15-4.06(m,2H),4.02-3.92(m,2H),3.71-3.59(m,2H),3.12-3.02(m,2H),2.99-2.88(m,2H),2.80-2.70(m,1H),1.97-1.93(m,2H),1.92-1.86(m,4H),1.28-1.23(m,3H)。LCMS(ESI)m/z：405.1[M+H]+。实例104(3.9mg，第一峰)：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.23(s,1H),8.70(d,J＝6.4Hz,2H),8.54(d,J＝5.6Hz,1H),8.44(d,J＝6.0Hz,2H),7.91(d,J＝5.6Hz,1H),4.15-4.05(m,2H),4.01-3.90(m,2H),3.71-3.59(m,2H),3.12-3.02(m,2H),2.98-2.88(m,2H),2.80-2.70(m,1H),1.97-1.92(m,2H),1.91-1.87(m,4H),1.28-1.22(m,3H)。LCMS(ESI)m/z：405.1[M+H]+。
实例105
2-(吡啶-4-基)-4-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物105)
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(30mg,0.09mmol)于DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.05mL,0.26mmol)和三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(24mg,0.1mmol)。将反应混合物于室温搅拌1小时。将反应混合物在真空中浓缩，并将所得残余物通过逆相层析(乙腈7％至37％/0.225％甲酸于水中的溶液)纯化，以得到黃色固体状标题化合物(11mg,28％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝6.0Hz,2H),8.58(d,J＝6.0Hz,1H),8.33-8.31(m,2H),7.89(d,J＝6.0Hz,1H),4.03-3.96(m,2H),3.92-3.84(m,2H),3.33-3.28(m,2H),2.80(t,J＝6.8Hz,2H),2.67(s,2H),1.82-1.71(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：429.1[M+H]+。
实例106
4-(2-环戊基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶甲酸盐(化合物106)
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(54mg,0.14mmol)于乙腈(2mL)中的溶液中添加三乙胺(0.06mL,0.43mmol)和溴环戊烷(0.03mL,0.29mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至50℃持续6小时。冷却至室温后，将混合物用EtOAc(30mL)稀释，用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过逆相层析(乙腈1％至30％/0.225％甲酸于水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(8.3mg,12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,1H),8.78(d,J＝6.0Hz,2H),8.60(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,2H),8.23(s,1H),7.89(d,J＝6.0Hz,1H),4.03-3.99(m,2H),3.91-3.85(m,2H),2.73(t,J＝6.8Hz,2H),2.63-2.60(m,3H),1.82-1.72(m,8H),1.67-1.61(m,2H),1.53-1.43(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：415.2[M+H]+。
实例107
2-甲基-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-
基)丙-1-醇(化合物107)甲酸盐
步骤1：2-甲基-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-基)丙酸甲酯
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(150mg,0.39mmol)于MeOH(3.9mL)中的溶液中添加添加N,N-二异丙基乙胺(0.34mL,1.96mmol)和2-溴-2-甲基丙酸甲酯(0.2mL,1.57mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至60℃持续16小时。冷却至室温后，在真空中浓缩混合物。将粗残余物通过逆相层析(乙腈8％至38％/0.225％甲酸于水中的溶液)纯化，以得到棕色固体状标题化合物(104mg,60％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.81-8.73(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.37-8.27(m,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),3.97-3.92(m,4H),3.63(s,3H),2.82(t,J＝6.8Hz,2H),2.71-2.66(m,2H),1.79-1.65(m,6H),1.29(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：447.1[M+H]+。
步骤2：2-甲基-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-基)丙-1-醇甲酸盐
于0℃向2-甲基-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙酸甲酯(80mg,0.18mmol)于THF(3mL)中的溶液中缓慢添加氢化铝锂(20mg,0.54mmol)。将反应混合物于0℃搅拌1小时。将反应用水(0.02mL)和15％NaOH水溶液淬灭，用EtOAc(20mL)稀释，经无水MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过逆相层析(乙腈5％至35％/0.225％甲酸于水中的溶液)纯化，以得到黃色固体状标题化合物(22mg,29％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝5.2Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.33-8.29(m,3H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),4.07-3.83(m,4H),3.36(s,2H),3.01(t,J＝6.4Hz,2H),2.87(s,2H),1.85-1.65(m,6H),1.08(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：419.1[M+H]+。
实例108
3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇(化合物108)甲酸盐
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(100mg,0.26mmol)于1,2-二氯乙烷(1mL)和MeOH(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.14mL,0.78mmol)。将反应混合物于室温搅拌5分钟，并向该混合物中添加乙酸(0.07mL,1.31mmol)、3-羟基环丁酮(67mg,0.78mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(166mg,0.78mmol)。将反应混合物加热至60℃持续16小时。冷却至室温后，将混合物过滤，并在真空中浓缩滤液。将粗残余物通过逆相层析(乙腈1％至31％/0.225％甲酸于水中的溶液)纯化，以得到黃色固体状且呈非对映异构体的混合物的标题化合物(15mg,14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.80-8.73(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.35-8.30(m,2H),8.18(s,1H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.96(s,1H),4.28-4.17(m,1H),4.05-3.96(m,2H),3.94-3.86(m,2H),3.83-3.73(m,1H),2.92-2.84(m,1H),2.55-2.51(m,1H),2.41(s,2H),2.32-2.11(m,2H),1.93-1.65(m,8H)。LCMS(ESI)m/z：417.3[M+H]+。
实例109
2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙烷磺酰胺(化合物109)
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(50mg,0.13mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.11mL,0.65mmol)。将反应混合物于室温搅拌5分钟，并向该混合物中添加乙烯磺酰胺(21mg,0.20mmol)。将反应混合物加热至60℃持续16小时。冷却至室温后，将混合物过滤，并在真空中浓缩滤液。将粗残余物通过逆相层析(乙腈25％至55％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3于水中的溶液)纯化，以得到黃色固体状标题化合物(10mg,17％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.80–8.74(m,2H),8.59(d,J＝6.0Hz,1H),8.35–8.30(m,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),6.79(s,2H),4.05–3.85(m,4H),3.32–3.27(m,2H),3.20–3.12(m,2H),2.85–2.74(m,2H),2.61(t,J＝7.2Hz,2H),1.81–1.67(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：454.1[M+H]+。
实例110
2-甲基-1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-
基)丙-2-醇(化合物110)
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(50mg,0.13mmol)于EtOH(1mL)中的溶液中添加伸异丁氧(94mg,1.31mmol)和K2CO3(90mg,0.65mmol)。将反应容器密封，并在微波下于110℃搅拌30分钟。冷却至室温后，将混合物过滤，并在真空中浓缩滤液。将粗残余物通过逆相层析(乙腈37％至67％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3于水中的溶液)纯化，以得到黃色固体状标题化合物(6.5mg,12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(s,1H),8.76(d,J＝4.8Hz,2H),8.57(d,J＝5.2Hz,1H),8.34-8.27(m,2H),7.90-7.86(m,1H),4.07-4.03(m,1H),4.02-3.95(m,2H),3.91-3.81(m,2H),2.69(t,J＝6.4Hz,2H),2.57-2.55(m,2H),2.36-2.31(m,2H),1.83-1.68(m,4H),1.65(t,J＝6.4Hz,2H),1.10(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：419.2[M+H]+。
实例111
2-(吡啶-4-基)-4-(2-(四氢呋喃-3-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物111)
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将羟丙酮替换为3-氧代四氢呋喃，获得白色固体状且呈对映异构体的混合物的标题化合物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.25(s,1H),8.70(d,J＝5.2Hz,2H),8.55(d,J＝5.6Hz,1H),8.45(d,J＝5.6Hz,2H),7.92(d,J＝6.0Hz,1H),4.14-4.08(m,2H),4.03-3.93(m,4H),3.86-3.83(m,2H),3.79-3.74(m,1H),3.47-3.39(m,1H),3.14-3.03(m,2H),2.29-2.21(m,1H),2.05-1.96(m,4H),1.92-1.88(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：417.1[M+H]+。
实例112和113
(R)-2-(吡啶-4-基)-4-(2-(四氢呋喃-3-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶和(S)-2-(吡啶-4-基)-4-(2-(四氢呋喃-3-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物112和113)
将2-(吡啶-4-基)-4-(2-(四氢呋喃-3-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(80mg,0.19mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak IG(250mm×30mm,10um)、超临界CO2/EtOH+0.1％NH4OH＝40/60；80mL/min)分离，以得到标题化合物，两者皆为白色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例112(5mg，第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝6.0Hz,2H),8.59(d,J＝6.0Hz,1H),8.32(d,J＝6.0Hz,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.04-3.96(m,2H),3.91-3.84(m,2H),3.79-3.70(m,2H),3.69-3.61(m,1H),3.53-3.46(m,1H),2.88-2.74(m,1H),2.63-2.54(m,2H),2.02-1.87(m,2H),1.83-1.60(m,8H)。LCMS(ESI)m/z：417.1[M+H]+。实例113(10mg，第一峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.77(d,J＝5.2Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,2H),7.88(d,J＝5.2Hz,1H),4.04-3.95(m,2H),3.91-3.83(m,2H),3.79-3.70(m,2H),3.68-3.62(m,1H),3.55-3.46(m,1H),2.93-2.76(m,1H),2.65-2.56(m,2H),2.02-1.86(m,2H),1.84-1.64(m,8H)。LCMS(ESI)m/z：417.1[M+H]+。
实例114
2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙醇
(化合物114)甲酸盐
按照实例107中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为2-溴乙醇，获得黃色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27-9.25(m,1H),8.81-8.74(m,2H),8.63-8.56(m,1H),8.36-8.28(m,3H),7.92-7.86(m,1H),4.02-3.93(m,4H),3.91-3.85(m,2H),3.52-3.48(m,2H),3.36-3.17(m,1H),3.06(s,1H),2.65-2.63(m,1H),2.53(s,2H),1.89(t,J＝6.8Hz,1H),1.84-1.68(m,5H)。LCMS(ESI)m/z：391.1[M+H]+。
实例115和116
(S)-1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇和(R)-1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇(化合物115和116)
步骤1：1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(110mg,0.29mmol)于EtOH(4mL)中的溶液中添加2-甲基环氧乙烷(80mg,1.38mmol)和三乙胺(0.16mL,1.18mmol)。混合物于室温搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过逆相层析(乙腈33％至63％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3于水中的溶液)纯化，以得到黃色固体状标题化合物(40mg,34％)。LCMS(ESI)m/z：405.2[M+H]+。
步骤2：(S)-1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇和(R)-1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇
将1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇(38mg,0.09mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak OJ(250mm×30mm,10um)、超临界CO2/EtOH+0.1％NH4OH＝60/40；80mL/min)分离，以得到标题化合物，两者皆为黃色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例115(12mg，第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(s,1H),8.76(d,J＝4.4Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.31(d,J＝4.4Hz,2H),7.87(d,J＝5.2Hz,1H),4.03-3.93(m,2H),3.92-3.80(m,2H),3.79-3.62(m,2H),2.71-2.61(m,2H),2.54-2.47(m,2H),2.42-2.32(m,2H),1.82-1.72(m,4H),1.71-1.64(m,2H),1.06(d,J＝5.6Hz,2H)。LCMS(ESI)m/z：405.1[M+H]+。实例116(12mg，第一峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.24(s,1H),8.76(d,J＝4.4Hz,2H),8.57(d,J＝5.6Hz,1H),8.31(d,J＝4.4Hz,2H),7.86(d,J＝5.6Hz,1H),4.05-3.91(m,2H),3.90-3.82(m,2H),3.76-3.65(m,2H),2.65-2.55(m,2H),2.51-2.43(m,2H),2.36-2.24(m,2H),1.81-1.69(m,4H),1.68-1.62(m,2H),1.05(d,J＝5.6Hz,2H)。LCMS(ESI)m/z：405.1[M+H]+。
实例117
4-(2-异丙基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物117)
按照实例105中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯替换为2-碘丙烷，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.79-8.73(m,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.35-8.28(m,2H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),4.04-3.95(m,2H),3.90-3.82(m,2H),2.59(t,J＝6.8Hz,2H),2.47(s,2H),2.35-2.25(m,1H),1.77-1.65(m,6H),1.02(d,J＝6.4Hz,6H)。LCMS(ESI)m/z：389.2[M+H]+。
实例118
3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁烷甲腈(化合物118)
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将羟丙酮替换为3-氧代环丁烷甲腈，获得黄色固体状且呈非对映异构体的混合物的标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.79-8.74(m,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.33-8.29(m,2H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),3.98-3.85(m,4H),3.11-2.99(m,2H),2.60-5.55(m,2H),2.48-2.38(m,4H),2.24-2.15(m,2H),1.81-1.67(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：448.1[M+Na]+。
实例119
4-(2-环己基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物119)甲酸盐
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将羟丙酮替换为环己酮，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝4.8Hz,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(d,J＝4.4Hz,2H),8.22(s,1H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.04-3.89(m,4H),2.94-2.82(m,2H),2.77-2.65(m,2H),2.39-3.29(m,1H),1.96-1.88(m,2H),1.71-1.81(m,7H),1.58-1.52(m,1H),1.32-1.05(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：429.1[M+H]+。
实例120
3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-1-
醇
(化合物120)
按照实例107中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为3-溴-1-丙醇，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,1H),8.80-8.74(m,2H),8.60(d,J＝5.6Hz,1H),8.35-8.31(m,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.04-3.97(m,2H),3.93-3.85(m,2H),3.46(t,J＝6.0Hz,2H),2.78-2.50(m,6H),1.81-1.71(m,6H),1.67-1.59(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：405.1[M+H]+。
实例121
4-(2-(2-甲氧基乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物121)
按照实例107中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为2-溴乙基甲基醚，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝5.2Hz,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,2H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),4.04-3.95(m,2H),3.91-3.84(m,2H),3.55-3.44(m,2H),3.35(s,3H),3.03-2.53(m,6H),1.95-1.65(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：405.1[M+H]+。
实例122
2-(吡啶-4-基)-4-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶(化合物122)甲酸盐
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将羟丙酮替换为二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝6.0Hz,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,2H),8.18(s,1H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.05-3.97(m,2H),3.92-3.83(m,4H),3.42-3.25(m,2H),2.73-2.66(m,2H),2.58(s,2H),2.34-2.26(m,1H),1.82-1.68(m,8H),1.46-1.35(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：431.1[M+H]+。
实例123
N-(2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙基)乙酰胺(化合物123)
步骤1：(2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙基)胺甲酸叔丁酯
按照实例107中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为(2-溴乙基)胺甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.31(d,J＝5.6Hz,2H),8.19(s,1H),7.86(d,J＝5.6Hz,1H),6.76(t,J＝5.6Hz,1H),3.97-3.80(m,4H),3.12-2.98(m,2H),2.65(t,J＝6.8Hz,2H),2.54(s,2H),2.49-2.42(m,2H),1.78-1.66(m,6H),1.38(s,9H)。LCMS(ESI)m/z：490.1[M+H]+。
步骤2：2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙胺盐酸盐
向(2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙基)胺甲酸叔丁酯(50mg,0.1mmol)在EtOAc(0.6mL)中的溶液中添加4M HCl在EtOAc(0.6mL,2.2mmol)中的溶液。混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物(42mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：390.1[M+H]+。
步骤3：N-(2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙基)乙酰胺
在0℃向2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙胺盐酸盐(15mg,0.04mmol)和三乙胺(17uL,0.12mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液中添加乙酰氯(4uL,0.06mmol)。然后将反应温热至室温并搅拌2小时。将反应用饱和NaHCO3水溶液(5mL)淬灭并用DCM(10mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈13％至43％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(7.6mg,49％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.26(s,1H),8.75-8.67(m,2H),8.55(d,J＝5.6Hz,1H),8.50-8.43(m,2H),7.95(d,J＝5.6Hz,1H),4.13-4.05(m,2H),4.04-3.95(m,2H),3.37-3.35(m,2H),2.75(t,J＝6.8Hz,2H),2.67-2.58(m,4H),1.95(s,3H),1.91-1.79(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：432.1[M+H]+。
实例124
4-(2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物124)
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将羟丙酮替换为氧杂环丁烷-3-甲醛，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(d,J＝5.6Hz,2H),7.88(d,J＝6.0Hz,1H),4.63-4.58(m,2H),3.53-3.28(m,7H),2.54-2.47(m,4H),1.88-1.84(m,2H),2.42(s,2H),1.40-1.31(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：417.1[M+H]+。
实例125
1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙-1-
酮
(化合物125)
按照实例101，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为1-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙-1-酮，获得标题化合物。LCMS(ESI)m/z：389.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.28(d,J＝2.5,1H),8.83–8.73(m,2H),8.64–8.58(m,1H),8.37–8.28(m,2H),7.91(d,J＝5.8,1H),4.12–3.86(m,4H),3.67–3.58(m,1H),3.57–3.51(m,1H),3.42–3.36(m,1H),3.19–3.09(m,1H),1.99–1.93(m,3H),1.94–1.90(m,1H),1.86–1.81(m,1H),1.80–1.72(m,4H)。
实例126
N-(2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙基)甲烷磺酰胺(化合物126)
在0℃向2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙胺盐酸盐(42mg,0.1mmol)、4-二甲基氨基吡啶(2.4mg,0.02mmol)和三乙胺(43uL,0.3mmol)在DCM(1mL)中的溶液中添加甲磺酰氯(10uL,0.11mmol)。然后将反应温热至室温并搅拌4小时。将反应用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭并用DCM(20mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈25％至55％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(7.6mg,16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.83-8.70(m,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.36-8.24(m,2H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),6.93(s,1H),4.02-3.84(m,4H),3.05(t,J＝6.8Hz,2H),2.93(s,3H),2.59(t,J＝6.8Hz,2H),2.54-2.50(m,2H),2.48(s,2H),1.81-1.65(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：468.1[M+H]+。
实例127
4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物127)
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(30mg,0.09mmol)在乙腈(1.5mL)中的溶液中添加三乙胺(0.04mL,0.26mmol)和三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(28mg,0.13mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至50℃持续16小时。冷却至室温后，将混合物在真空中浓缩，并将所得残余物通过反相色谱法(乙腈2％至32％/0.225％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(12mg,32％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,1H),8.82(d,J＝6.0Hz,2H),8.78(d,J＝6.0Hz,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,2H),7.89(d,J＝6.0Hz,1H),6.47-6.09(m,1H),4.05-3.97(m,2H),3.92-3.83(m,2H),3.30-2.65(m,6H),1.90-1.73(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：411.3[M+H]+。
实例128和129
(1R,2R)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇和(1S,2S)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇(化合物128和129)
/>
步骤1：反式-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-基)环戊醇
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(200mg,0.52mmol)在EtOH(5mL)中的溶液中添加1,2-氧化环戊烯(0.46mL,5.22mmol)和K2CO3(361mg,2.61mmol)。将反应混合物加热至80℃持续16小时。冷却至室温后，将反应混合物用DCM(100mL)稀释，用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈25％至55％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(83mg,37％)。LCMS(ESI)m/z：431.2[M+H]+。
步骤2：(1R,2R)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇和(1S,2S)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇
将反式-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇(30mg,0.07mmol)通过使用手性SFC(Phenomenex-Chiralpak-IG(250mm×30mm,10um)、超临界CO2/i-PrOH+0.1％NH4OH＝60/40；80mL/min)分离，以得到标题化合物，两者均为白色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例128(8.1mg，第一峰)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.31(d,J＝5.6Hz,2H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),4.56-4.42(s,1H),4.04-3.95(m,2H),3.93-3.80(m,3H),2.64-2.57(m,2H),2.47-2.44(m,1H),2.35-2.25(m,1H),1.82-1.67(m,6H),1.64(t,J＝6.8Hz,2H),1.59-1.50(m,2H),1.48-1.36(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：431.2[M+H]+。实例129(12.6mg，第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.31(d,J＝5.6Hz,2H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),4.56-4.42(s,1H),4.04-3.95(m,2H),3.93-3.80(m,3H),2.64-2.57(m,2H),2.47-2.44(m,1H),2.35-2.25(m,1H),1.82-1.67(m,6H),1.64(t,J＝6.8Hz,2H),1.59-1.50(m,2H),1.48-1.36(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：431.2[M+H]+。
实例130
2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酰胺(化合物130)甲酸盐
按照实例106中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将甲基溴环戊烷替换为2-溴乙酰胺，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.24(s,1H),8.70(d,J＝5.6Hz,2H),8.54(d,J＝5.6Hz,1H),8.44(d,J＝4.8Hz,2H),8.36(s,1H),7.91(d,J＝5.6Hz,1H),4.12-4.05(m,2H),4.02-3.95(m,2H),3.64(s,2H),3.20(t,J＝7.2Hz,2H),3.06(s,2H),2.02(t,J＝7.2Hz,2H),1.97-1.90(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：404.1[M+H]+。
实例131
4-(2-环丁基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物131)
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将羟丙酮替换为环丁酮，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.79-8.75(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.35-8.31(m,2H),7.89(d,J＝6.0Hz,1H),4.02-3.95(m,2H),3.93-3.86(m,2H),2.89(m,1H),2.49-2.45(m,2H),2.37(s,2H),1.97-1.83(m,4H),1.82-1.60(m,8H)。LCMS(ESI)m/z：401.2[M+H]+。
实例132
3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙酰胺(化合物132)
按照实例109中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将乙烯磺酰胺替换为丙烯酰胺，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.76-8.73(m,2H),8.56(d,J＝5.6Hz,1H),8.32-8.26(m,2H),7.84(s,1H),7.40(s,1H),6.78(s,1H),3.99-3.90(m,2H),3.89-3.80(m,2H),2.60-2.53(m,4H),2.43(s,2H),2.22(t,J＝7.2Hz,2H),1.78-1.62(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：418.1[M+H]+。
实例133
4-(2-苄基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物133)
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将羟丙酮替换为苯甲醛，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.79-8.74(m,2H),8.58(d,J＝6.0Hz,1H),8.33-8.29(m,2H),7.87(d,J＝6.0Hz,1H),7.40-7.25(m,5H),4.03-3.94(m,2H),3.90-3.81(m,2H),3.68(s,2H),3.34-3.26(m,2H),2.67(s,2H),1.86-1.70(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：437.1[M+H]+。
实例134
4-(2-(2-氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物134)甲酸盐
按照实例106中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将甲基溴环戊烷替换为1-溴-2-氟乙烷，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.78-8.75(m,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.35-8.29(m,2H),8.18(s,1H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),4.60-4.45(m,2H),4.03-3.96(m,2H),3.91-3.84(m,2H),2.77-2.66(m,2H),2.64(t,J＝6.8Hz,2H),2.52(s,2H),1.81-1.72(m,4H),1.72-1.68(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：393.1[M+H]+。
实例135
4-(2-(3-氟丙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物135)甲酸盐
按照实例107中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为1-溴-3-氟丙烷，获得浅黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.31(d,J＝6.0Hz,2H),8.20(s,1H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),4.57-4.41(m,2H),4.01-3.94(m,2H),3.91-3.85(m,2H),2.66(t,J＝6.8Hz,2H),2.58-2.53(m,4H),1.91-1.76(m,4H),1.73-1.69(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：407.1[M+H]+。
实例136
3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙腈
(化合物136)
按照实例107中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为3-溴丙腈，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝6.0Hz,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.03-3.95(m,2H),3.92-3.84(m,2H),2.71-2.58(m,6H),2.52-2.51(m,2H),1.80-1.67(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：400.1[M+H]+。
实例137
4-(2-(氧杂环丁烷-3-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶(化合物137)甲酸盐
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将羟丙酮替换为氧环丁-3-酮，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝5.6Hz,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,2H),8.15(s,1H),7.89(d,J＝6.0Hz,1H),4.59-4.54(m,2H),4.49-4.44(m,2H),4.03-3.86(m,4H),3.62-3.54(m,1H),2.58-2.55(m,2H),2.39(s,2H),1.83-1.68(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：403.1[M+H]+。
实例138
4-(2-乙基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物138)
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(50mg,0.13mmol)在乙腈(2mL)中的溶液中添加K2CO3(22mg,0.16mmol)和碘乙烷(0.01mL,0.12mmol)。混合物在室温搅拌16小时。将混合物过滤并将滤液在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈35％至65％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(8.3mg,12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,1H),8.82-8.73(m,2H),8.60(d,J＝6.0Hz,1H),8.36-8.30(m,2H),7.90(d,J＝6.0Hz,1H),4.06-3.96(m,2H),3.95-3.85(m,2H),3.31-3.24(m,2H),3.10-2.70(m,4H),1.89-1.73(m,6H),1.21-1.06(m,3H)。LCMS(ESI)m/z：375.1[M+H]+。
实例139
4-(2-(1H-吡唑-3-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物139)
步骤1：2-(吡啶-4-基)-4-(2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-
基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(200mg,0.52mmol)、3-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(217mg,0.78mmol)(根据WO201934890中的程序制备)和叔丁醇钠(251mg,2.61mmol)在2-甲基-2-丁醇(5mL)中的溶液中添加烯丙基氯化钯(II)二聚体(19mg,0.05mmol)和2-(二-叔丁基膦基)-2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基-1,1'-联苯(51mg,0.1mmol)。将反应混合物在氮气气氛下加热至90℃持续16小时。冷却至室温后，将溶剂在真空中去除，并将残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色油状标题化合物(100mg,35％)。LCMS(ESI)m/z：543.3[M+H]+。
步骤2：4-(2-(1H-吡唑-3-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
向2-(吡啶-4-基)-4-(2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(100mg,0.18mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.53mL,7.13mmol)。混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，将残余物稀释在MeOH(2mL)中，并通过添加氢氧化铵(30％在水中的溶液)，将pH调节至8。将粗制混合物通过反相色谱法(乙腈25％至55％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(6mg,8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.63(s,1H),9.27(s,1H),8.80-8.74(m,2H),8.60(d,J＝5.6Hz,1H),8.36-8.30(m,2H),7.92(d,J＝6.0Hz,1H),7.44(s,1H),5.53(s,1H),4.09-4.01(m,2H),4.01-3.93(m,2H),3.30-3.28(m,2H),3.19(s,2H),1.91(t,J＝6.4Hz,2H),1.84-1.77(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：413.1[M+H]+。
实例140
4-(2-苯基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物140)
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(100mg,0.26mmol)、碘苯(0.04mL,0.35mmol)和Cs2CO3(280mg,0.87mmol)在1,4-二氧杂环己烷(2mL)中的溶液中添加乙酸钯(II)(13mg,0.06mmol)和(±)-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘(36mg,0.06mmol)。将反应混合物在氮气气氛下加热至110℃持续16小时。冷却至室温后，将混合物过滤，并在真空中浓缩滤液。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈20％至50％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(9mg,7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,1H),8.75(d,J＝4.0Hz,2H),8.58(d,J＝5.2Hz,1H),8.34(d,J＝4.0Hz,2H),7.92(d,J＝5.2Hz,1H),7.19-7.12(m,2H),6.62-6.31(m,3H),4.12-3.91(m,4H),3.34-3.30(m,2H),3.24(s,2H),2.12-1.89(m,2H),1.88-1.72(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：423.2[M+H]+。
实例141
4-(2-(1H-吡唑-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物141)三氟乙酸盐
按照实例139中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑替换为4-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝5.2Hz,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(d,J＝5.6Hz,2H),8.23(s,1H),7.90(d,J＝5.6Hz,1H),7.09(s,2H),4.06-3.92(m,4H),3.10(t,J＝6.8Hz,2H),2.99(s,2H),1.90-1.86(m,2H),1.85-1.72(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：413.3[M+H]+。
实例142
2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物142)
步骤1：3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-甲醛
在氮气气氛下在0℃向3-甲基-1H-吡唑-4-甲醛(5g,45.41mmol)在THF(100mL)中的搅拌溶液中添加NaH(2.0g,50mmol,60％)。30分钟后，添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(10.26g,40.54mmol)。使反应温热至室温，并搅拌16小时。将反应倒入饱和NH4Cl水溶液(50mL)中，用EtOAc(150mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：在石油醚中的0至20％EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(10.0g,92％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.96-9.94(m,1H),8.05-7.88(m,1H),5.53-5.36(m,2H),3.65-3.56(m,2H),2.69-2.50(m,3H),0.98-0.90(m,2H),0.05-0.01(m,9H)。
步骤2：2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
向3-氨基吡啶-4-甲酰胺(5g,36.46mmol)在DMA(50mL)中的溶液中添加3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-甲醛(10.5g,43.75mmol)和CuO(5.8g,72.92mmol)。将混合物在氧气气氛下加热至135℃持续40小时。冷却至室温后，将反应倒入水(500mL)中，过滤悬浮液并将滤饼在真空中干燥，以得到黄色固体状标题化合物(9.1g,70％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.51(s,1H),9.02(s,1H),8.69(s,0.5H),8.59(s,1H),8.31(s,0.5H),7.92(s,1H),5.52-5.34(m,2H),3.56-3.54(m,2H),2.79-2.55(m,3H),0.89-0.82(m,2H),-0.03--0.05(m,9H)。LCMS(ESI)m/z：358.3[M+H]+。
步骤3：2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-
d]嘧啶
向2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(200mg,0.56mmol)在DMF(5mL)中的溶液中添加DIEA(0.22mL,1.12mmol)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(200mg,0.67mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时。然后向该反应混合物中添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(135mg,0.56mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时。将混合物用EtOAc(50mL)稀释，用水(30mL×3)和盐水(30mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状8-(2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(200mg,62％)。将该残余物用1mL DCM和1mL TFA处理，并在室温搅拌2小时。然后将反应混合物在真空中浓缩，然后从DCM(5mL)进一步浓缩2倍，以去除残余TFA。然后将粗残余物通过HPLC纯化，以得到标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.78(br s,1H),9.08(d,J＝2.1Hz,1H),8.47–8.41(m,1H),8.14(s,1H),7.80–7.73(m,1H),3.97–3.74(m,4H),3.42–3.35(m,4H),2.85(t,J＝7.1Hz,1H),2.69–2.60(m,5H),1.87–1.79(m,1H),1.76–1.65(m,2H),1.60(t,J＝7.1Hz,1H)。LCMS(ESI)m/z：350.2[M+H]+。
实例143
2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物143)
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(s,1H),8.42(d,J＝5.6Hz,2H),8.13(s,1H),7.72(d,J＝5.6Hz,1H),3.86-3.66(m,4H),2.64(s,3H),2.51-2.46(m,2H),2.36(s,2H),2.22(s,3H),1.74-1.62(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：364.2[M+H]+。
实例144和145
(S)-1-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇和(R)-1-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇(化合物144和145)
步骤1：1-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇
按照实例113中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐，获得黄色固体状标题化合物。LCMS(ESI)m/z：408.1[M+H]+。
步骤2：(S)-1-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇和(R)-1-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇
将1-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇(110mg,0.27mmol)通过使用手性SFC(Phenomenex-Cellulose-2(250mm×30mm,10um)、超临界CO2/EtOH+0.1％NH4OH＝50/50；80mL/min))分离，以得到标题化合物，两者均为白色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例144(18mg，第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.87(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝6.0Hz,1H),8.06(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),4.32(s,1H),3.89-3.80(m,2H),3.79-3.65(m,3H),2.67(s,2H),2.60-2.57(m,2H),2.47(s,3H),2.36-2.27(m,2H),1.79-1.68(m,4H),1.68-1.62(m,2H),1.05(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ESI)m/z：408.2[M+H]+。实例145(15mg，第一峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.07(s,1H),7.76(d,J＝6.0Hz,1H),4.30(d,J＝4.0Hz,1H),3.89–3.81(m,2H),3.80–3.68(m,3H),2.67(s,2H),2.61–2.57(m,2H),2.45(s,3H),2.34–2.30(m,2H),1.76–1.68(m,4H),1.67–1.62(m,2H),1.05(d,J＝6.0Hz,3H)。LCMS(ESI)m/z：408.2[M+H]+。
实例146
2-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙-1-醇(化合物146)
按照实例107中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和2-溴乙醇，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.13(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),4.41(s,1H),3.87-3.73(m,4H),3.47(t,J＝6.4Hz,2H),2.65(s,3H),2.57(t,J＝6.4Hz,2H),2.48-2.43(m,4H),1.76-1.63(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：394.1[M+H]+。
实例147
4-(2-环戊基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶(化合物147)
按照实例106中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.87(s,1H),9.07(s,1H),8.43(d,J＝6.0Hz,1H),8.09(s,1H),7.75(d,J＝6.0Hz,1H),4.07-4.05(m,1H),3.88-3.82(m,2H),3.78-3.71(m,2H),2.67-2.62(m,4H),1.83
-1.55(m,10H),1.54-1.29(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：418.2[M+H]+。
实例148
2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(四氢呋喃-3-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物148)
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和羟丙酮替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和3-氧代四氢呋喃，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.09(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),3.89-3.80(m,2H),3.79-3.74(m,2H),3.74-3.68(m,2H),3.68-3.62(m,1H),3.49(m,1H),2.85-2.75(m,1H),2.69-2.62(m,1H),2.65(s,2H),2.60-2.54(m,2H),2.47-2.40(m,2H),1.97-1.89(m,1H),1.82-1.75(m,1H),1.74-1.64(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：420.1[M+H]+。
实例149
3-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-1-醇(化合物149)
按照实例107中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和3-溴-1-丙醇，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(s,1H),8.43(d,J＝5.6Hz,1H),8.14(s,1H),7.73(d,J＝5.6Hz,1H),3.86-3.80(m,2H),3.77-3.71(m,2H),3.45(t,J＝6.4Hz,2H),2.65(s,3H),2.55-2.51(m,2H),2.44-2.37(m,4H),1.76-1.63(m,6H),1.61-1.54(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：408.2[M+H]+。
实例150
2-甲基-1-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇(化合物150)
按照实例110中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.06(s,1H),8.42(d,J＝5.6Hz,1H),8.07(s,1H),7.74(d,J＝5.6Hz,1H),4.05(s,1H),3.91-3.79(m,2H),3.79-3.69(m,2H),2.71-2.61(m,4H),2.55(s,2H),2.32(s,3H),1.82-1.66(m,4H),1.66-1.59(m,2H),1.08(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：422.1[M+H]+。
实例151
4-(2-乙基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物151)
按照实例138中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.84(s,1H),9.07(s,1H),8.43(d,J＝5.6Hz,1H),8.11(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),3.88-3.72(m,4H),2.65(s,3H),2.55-2.51(m,2H),2.41(s,2H),2.39-2.36(m,2H),1.74-1.64(m,6H),1.02(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ESI)m/z：378.1[M+H]+。
实例152
2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物152)
按照实例103中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和羟丙酮替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和氧杂环丁烷-3-甲醛，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝6.0Hz,1H),8.06(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),4.66-4.62(m,2H),4.28-4.25(m,2H),3.89-3.81(m,2H),3.78-3.72(m,2H),3.20-3.02(m,1H),2.74-2.65(m,4H),2.43-2.27(m,2H),1.73-1.62(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：420.2[M+H]+。
实例153
2-(5-氯-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物153)
步骤1：8-(2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将2,4-二氯吡啶并[3,4-d]嘧啶(800mg，4mmol，1当量)、氟化钾(700mg，10mmol，3当量)和2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(1000mg，4mmol，1当量)添加至40mL小瓶中。依次添加二甲亚砜(10mL,0.3M)和三乙胺(3mL，20mmol，5当量)，并将反应在室温搅拌1小时。经由LCMS监测反应后，此时反应已经完成。将混合物转移至分液漏斗，并用EtOAc(15mL)、饱和NH4Cl水溶液(10mL)和水(10mL)稀释。分离各层，并将水层用另外的EtOAc(3×20mL)萃取。合并的有机提取物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗有机残余物经由24g Isco料筒骤沸，用0至15％MeOH在DCM中的溶液洗脱，以得到8-(2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(1200mg，产率74％)。LCMS(ESI)m/z：426.05[M+Na]+。
步骤2：2-(5-氯-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶
将8-(2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(190mg，0.470mmol，1当量)、四(三苯基膦)钯(0)(54mg，0.047mmol，0.1当量)、碳酸钠(150mg，1.40mmol，3当量)、3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(166mg，0.706mmol，1.5当量)添加至2打兰小瓶中。将小瓶用N2吹扫，然后依次添加1,4-二氧杂环己烷(2.35mL)和水(0.24mL)，并将反应混合物用N2鼓泡5分钟。然后将小瓶密封，并加热至90℃持续16小时。然后将反应冷却至室温，转移至20mL小瓶中，并用水(5mL)和EtOAc(5mL)稀释。分离各层，并将水相用另外的EtOAc(4×5mL)萃取。合并的有机提取物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物溶解在DCM(1mL)和TFA(1mL)中，然后在室温搅拌1小时。然后将反应混合物在真空中浓缩，然后从DCM(5mL)进一步浓缩2倍，以去除残余TFA。然后将粗残余物通过HPLC纯化，以得到2-(5-氯-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(47mg，0.127mmol，产率27％)。LCMS(ESI)m/z：370.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(s,1H),8.54–8.44(m,3H),7.81(d,J＝5.7Hz,1H),4.02–3.82(m,4H),2.89(t,J＝7.1Hz,2H),2.71(s,2H),1.82(t,J＝7.1Hz,1H),1.74–1.67(m,4H),1.63(t,J＝7.1Hz,2H)。
实例154
4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物154)
按照实例153，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑替换为4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑，获得标题化合物(44mg，产率24％)。LCMS(ESI)m/z：404.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.1(br s,1H)9.09(s,1H),8.63(s,1H),8.50(d,J＝5.6Hz,1H),7.82(d,J＝6.0Hz,1H),4.01–3.81(m,4H),2.91(t,J＝7.1Hz,2H),2.71(s,2H),1.66(dt,J＝18.4,6.5Hz,6H)。未观察到可交换的胺NH质子。
实例155
4-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲腈
(化合物155)
按照实例153，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑替换为4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈，获得黄色固体状标题化合物(5mg,15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(s,1H),8.56(s,1H),8.48(d,J＝5.6Hz,1H),7.82(d,J＝5.6Hz,1H),4.00-3.91(m,4H),2.99-2.94(m,2H),2.77(s,2H),1.72-1.61(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：361.1[M+H]+。
实例156
2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶
(化合物156)
按照实例153，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑替换为4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶，获得标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)11.83(s,1H),9.33(d,J＝0.7Hz,1H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.38(d,J＝5.0Hz,1H),8.13(d,J＝5.0Hz,1H),7.94–7.84(m,1H),7.68–7.61(m,1H),7.48(d,J＝3.4Hz,1H),4.11–3.84(m,4H),3.44–3.29(m,3H),2.98(t,J＝7.1Hz,1H),1.85(t,J＝7.1Hz,1H),1.81–1.75(m,4H),1.71(t,J＝7.2Hz,1H)。未观察到可交换的胺NH质子。LCMS(ESI)m/z：386.1[M+H]+。
实例157
6-苄基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物157)
步骤1：6-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
/>
在0℃向2-甲基-2-丁醇钾(22.02g,174.46mmol)在THF(100mL)中的溶液中逐滴添加(约4mL/min)5-氨基-2-氯-吡啶-4-甲酸乙酯(14g,69.78mmol)(根据US2016176871中的程序制备)和4-氰基吡啶(8.72g,83.74mmol)在THF(300mL)中的溶液。使反应温热至室温，并搅拌16小时。添加水(40mL)和乙酸(10mL)。将混合物在室温搅拌20分钟，将所得黄色沉淀物过滤，并用固体水(30mL×2)洗涤，以得到黄色固体状标题化合物(11g,55％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.96(s,1H),8.81-8.77(m,2H),8.11-8.07(m,2H),7.99(s,1H)。LCMS(ESI)m/z：259.1[M+H]+。
步骤2：6-氯-2-(吡啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
在0℃向6-氯-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(10g,38.66mmol)和三乙胺(27mL,193mmol)在DCM(100mL)中的溶液中逐滴添加DCM(100mL)中的2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(27mL,155mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至45℃持续16小时。冷却至室温后，将混合物用DCM(200mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(150mL)和盐水(150mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至5％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(15g,99％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.96(s,1H),8.85-8.80(m,2H),8.14(s,1H),7.72-7.68(m,2H),5.27(s,2H),3.88-3.65(m,2H),1.05-0.88(m,2H),0.02(s,9H)。LCMS(ESI)m/z：389.2[M+H]+。
步骤3：6-苄基-2-(吡啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
在氮气气氛下，向6-氯-2-(吡啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(3g,7.71mmol)和(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]甲磺酸钯(II)(330mg,0.39mmol)在THF(15mL)中的溶液中逐滴添加苄基氯化锌(II)(19.5mL,9.75mmol)(0.5M，在THF中)(根据WO2019123011中的程序制备)。混合物在室温搅拌5小时。将反应用水(50mL)淬灭并用EtOAc(100mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至70％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(1.85g,54％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.14(s,1H),8.96(d,J＝5.6Hz,2H),8.03-7.94(m,3H),7.38-7.29(m,4H),7.27-7.22(m,1H),5.27(s,2H),4.35(s,2H),3.84-3.74(m,2H),1.02-0.94(m,2H),0.03(s,9H)。LCMS(ESI)m/z：445.1[M+H]+。
步骤4：6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
向6-苄基-2-(吡啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(1g,1.8mmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加三氟乙酸(5mL,6.73mmol)。混合物在室温搅拌16小时。将混合物在真空中浓缩，以得到棕色固体状标题化合物(700mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：314.9[M+H]+。
步骤5：6-苄基-4-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
将6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(700mg,2.23mmol)在三氯氧化磷(5mL)中的溶液加热至110℃持续16小时。冷却至室温后，将混合物在真空中浓缩，并将粗残余物溶解在DCM(100mL)中并在0℃用饱和NaHCO3(50mL)水溶液碱化至pH 8。有机层经无水Na2SO4，过滤并在真空中浓缩，以得到黑色固体状标题化合物(6.7g，粗产物)。LCMS(ESI)m/z：333.1[M+H]+。
步骤6：8-(6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向6-苄基-4-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(50mg,0.15mmol)在1-甲基-2-吡咯啶酮(2mL)中的溶液中添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(40mg,0.17mmol)、三乙胺(8.6mL,61.81mmol)和氟化钾(46mg,0.45mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至80℃持续16小时。冷却至室温后，将反应用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL)萃取。将有机层用盐水(20mL×3)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物(74mg，粗产物)。LCMS(ESI)m/z：537.4[M+H]+。
步骤7：6-苄基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶
向8-(6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(74mg,0.14mmol)在DCM(1.5mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.5mL,6.54mmol)。混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，将残余物通过反相色谱法(乙腈10％至40％/0.225％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(17mg,27％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),8.75(d,J＝6.0Hz,2H),8.39(s,1H),8.33-8.26(m,2H),7.67(s,1H),7.35-7.29(m,4H),7.25-7.19(m,1H),4.29(s,2H),3.95-3.81(m,4H),3.23-3.14(m,2H),2.99(s,2H),1.86-1.80(m,2H),1.77-1.68(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：437.3[M+H]+。
实例158
6-甲基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物158)三氟乙酸盐
步骤1：6-甲基-2-(吡啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
向6-氯-2-(吡啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(600mg,1.54mmol)在1,4-二氧杂环己烷(10mL)和水(1mL)中的搅拌溶液中添加甲基硼酸(462mg,7.71mmol)、Cs2CO3(1.5g,4.63mmol)和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(115mg,0.15mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至110℃持续16小时。冷却至室温后，将反应混合物过滤，并将滤液在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(320mg,56％)。LCMS(ESI)m/z：369.2[M+H]+。
步骤2：6-甲基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶三氟乙酸盐
按照实例157中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将6-苄基-2-(吡啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶替换为6-甲基-2-(吡啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.20(s,1H),8.79-8.74(m,2H),8.34-8.30(m,2H),8.21(s,1H),7.71(s,1H),4.00-3.86(m,4H),3.36-3.27(m,2H),3.11(s,2H),2.67(s,3H),1.93-1.88(m,2H),1.85-1.72(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：361.4[M+H]+。
实例159
N-((2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-6-基)甲基)丙酰胺(化合物159)
步骤1：5-氨基-2-溴异烟酸乙酯
向3-氨基异烟酸乙酯(250.0g,1.50mol)在DMF(4000mL)中的溶液中添加NBS(281g,1.58mol)。将混合物加热至50℃并搅拌5小时。反应完成后，将其冷却至室温，添加水(12.5L)，并将反应混合物用EtOAc(5000mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(10L×3)洗涤。经无水Na2SO4干燥，然后在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过硅胶色谱法(石油醚/EtOAc＝10:1)纯化，以得到黄色固体状5-氨基-2-溴异烟酸乙酯(254.4g,69.2％)。LCMS(ESI)m/z：245.0，247.0(Br模式)[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.06(d,J＝0.4Hz,1H),7.61(s,1H),6.81(brs,2H),4.33(q,J＝7.2Hz,2H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤2：6-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
添加THF(930mL)中的2-甲基-2-丁醇钾(158g,1.25mol)。然后在N2下在0℃逐滴添加5-氨基-2-溴异烟酸乙酯(122.5g,499.8mmol,1.0eq)和异烟腈(62.5g,599.8mmol,1.2eq)在THF(2450mL)中的溶液。混合物在室温搅拌2小时。反应完成后，添加水(6.2L)和AcOH(93mL)。将混合物在室温搅拌20分钟。然后通过过滤收集固体，并用水(500mL×3)洗涤。将固体干燥，以得到黄色固体状6-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(两个批次，145.0g，47.9％)。LCMS(ESI)m/z：300.9，302.9(Br模式)[M-H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ13.21(s,1H),8.99(s,1H),8.82(q,J＝3.2Hz,2H),8.16-8.09(m,3H)。
步骤3：8-(6-溴-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向6-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(200mg,0.66mmol)在DMA(5mL)中的溶液中添加4-二甲基氨基吡啶(8mg,0.07mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.34mL,2.0mmol)。最后添加2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(240mg,0.79mmol)，并将反应混合物在室温搅拌30分钟。添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(190mg,0.79mmol)并将反应混合物在室温搅拌3小时。添加NaHCO3饱和溶液(25mL)和乙酸乙酯(40mL)。分离各相，并将有机层用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到棕色油状物。将粗油状物通过硅胶柱色谱法(MeOH/DCM)纯化，以得到棕色胶状标题化合物8-[6-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(197mg，产率57％)。LCMS(ESI)m/z：525-527(Br模式)[M+H]+。
步骤4：8-(2-(吡啶-4-基)-6-乙烯基吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
将8-[6-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(197mg,0.38mmol)和乙烯基三氟硼酸钾(56mg,0.42mmol)溶解在1,4-二氧杂环己烷(3mL)中，并将溶液用氮气流脱气10分钟。添加三乙胺(0.11mL,0.76mmol)，同时将溶液再脱气5分钟。然后，将[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(28mg,0.04mmol)添加至反应混合物中，并将其在氮气下加盖并加热至85℃持续4小时。将反应混合物冷却至室温并经Celite过滤。将滤液用饱和碳酸氢钠溶液(15mL)稀释，并将其用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将粗残余物通过硅胶柱色谱法(MeOH/DCM)纯化，以得到棕色固体状标题化合物8-[2-(4-吡啶基)-6-乙烯基-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(106mg，产率59％)。LCMS(ESI)m/z：473.1[M+H]+。
步骤5：8-(6-甲酰基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下，向8-[2-(4-吡啶基)-6-乙烯基-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(106mg,0.22mmol)和NMO(53mg,0.45mmol)在DCM(4mL)中的溶液中添加4重量％四氧化锇在水中的溶液(71uL,0.01mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时。在烯烃完全转化为二醇后，添加水(2mL)中的过碘酸钠(72mg,0.34mmol)，并将混合物在室温再搅拌16小时。将反应混合物用二氯甲烷稀释，用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠并蒸发。将粗残余物通过硅胶柱色谱法(MeOH/DCM)纯化，以得到黄色固体状标题化合物8-[6-甲酰基-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(106mg，产率>99％)。LCMS(ESI)m/z：475.1[M+H]+。
步骤6：8-(6-(((2,4-二甲氧基苄基)氨基)甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-[6-甲酰基-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(80mg,0.17mmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液中添加2,4-二甲氧基苄胺(30uL,0.2mmol)和一滴乙酸。添加三乙酰氧基硼氢化钠(106mg,0.51mmol)并将反应混合物在室温搅拌1小时。在完全转化为胺后，向反应混合物中添加饱和碳酸氢钠溶液(15mL)，并将其用乙酸乙酯(3×20mL)萃取3次。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将化合物直接用在下一步。
步骤7：8-(6-((N-(2,4-二甲氧基苄基)丙酰氨基)甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将来自步骤4的粗残余物在包含三乙胺(70uL,0.51mmol)的二氯甲烷(4mL)再次稀释，并将丙酰氯(20uL,0.19mmol)添加至混合物中。将反应混合物在室温搅拌30分钟并浓缩至干燥，并直接加载在硅胶色谱柱上，用1％至12％MeOH在DCM中的溶液洗脱，以得到米色固体状标题化合物8-[6-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基-丙酰基-氨基]甲基]-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(62mg，产率54％)。LCMS(ESI)m/z：682.6[M+H]+。
步骤8：N-((2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-6-基)甲基)丙酰胺；甲酸盐
向8-[6-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基-丙酰基-氨基]甲基]-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(39mg,0.06mmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液中添加乙酸中的HBr(0.3mL,1.45mmol)，并将反应混合物在室温搅拌2小时，然后将该反应混合物在减压下浓缩。将残余物直接加载在C18柱顶部的水中，并通过逆相柱色谱法(MeCN/10mM甲酸铵水溶液，缓冲在pH＝3.8)纯化。将纯馏分直接冻干，以得到灰白色固体状标题化合物N-[[4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-6-基]甲基]丙酰胺；甲酸盐(16mg，产率54％)。LCMS(ESI)m/z：432.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),8.74(dd,J＝4.6,1.4Hz,2H),8.55(t,J＝5.7Hz,1H),8.37(s,2H),8.30(dd,J＝4.5,1.4Hz,2H),7.65(s,1H),4.50(d,J＝5.8Hz,2H),3.96–3.80(m,4H),3.19(t,J＝7.3Hz,2H),3.02(s,2H),2.26–2.17(m,2H),1.84(t,J＝7.3Hz,2H),1.81–1.65(m,4H),1.05(t,J＝7.6Hz,3H)。
实例160
6-甲基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物160)甲酸盐
步骤1：6-氯-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
按照实例142，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氨基吡啶-4-甲酰胺替换为5-氨基-2-氯异烟酰胺(根据US2019270742中的程序制备)，获得灰白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.59(s,1H),8.84-8.78(m,1H),8.69-8.28(m,1H),7.91(s,1H),5.54-5.35(m,2H),3.61-3.51(m,2H),2.78-2.52(m,3H),0.91-0.79(m,2H),0.01--0.09(m,9H)。LCMS(ESI)m/z：392.0[M+H]+。
步骤2：4,6-二氯-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-
基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
向6-氯-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(2g,5.10mmol)在三氯氧化磷(14mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.89mL,5.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时，并在真空中浓缩。将粗残余物溶解在DCM(150mL)并在0℃用饱和NaHCO3水溶液(50mL)碱化至pH 8。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至30％EtOAc)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(620mg,30％)。LCMS(ESI)m/z：410.4[M+H]+。
步骤3：8-(6-氯-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
按照实例101中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶替换为4,6-二氯-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶，获得黄色固体状标题化合物。LCMS(ESI)m/z：614.2[M+H]+。
步骤4：8-(6-甲基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
按照实例158中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将6-氯-2-(吡啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶替换为8-(6-氯-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物。LCMS(ESI)m/z：594.2[M+H]+。
步骤5：6-甲基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶甲酸盐
向8-(6-甲基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(60mg,0.1mmol)在EtOAc(1mL)中的溶液添加4M HCl在EtOAc(1mL,4.0mmol)中的溶液。将混合物在室温搅拌5小时并在真空中浓缩。将所得残余物通过反相色谱法(乙腈1％至30％/0.225％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(6mg,16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.00(s,1H),8.40(s,1H),8.13(s,1H),7.58(s,1H),3.83-3.72(m,4H),3.23-3.17(m,2H),3.02(s,2H),2.65(s,3H),2.61(s,3H),1.98-1.62(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：364.1[M+H]+。
实例161
5-氯-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物161)
步骤1：3,5-二氯-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺
将2,6-二氯异烟酸(1309mg,6.82mmol)和HATU(2852mg,7.5mmol)溶解在DMF(10mL)中。向该溶液中添加DIEA(3.56mL,20.5mmol)，并将混合物在室温搅拌10分钟。然后将吡啶-4-甲脒盐酸盐(1289mg,8.18mmol)添加至反应混合物中。3小时后，向反应混合物中添加饱和NaHCO3水溶液(20mL)。然后将其用EtOAc(2×100mL)和10％MeOH/DCM(100mL)萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干燥，以得到黄色固体状标题化合物3,5-二氯-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺(765mg，产率38％)。LCMS(ESI)m/z：295.1，[M+H]+。
步骤2：5-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
在微波小瓶中，将3,5-二氯-N-(吡啶-4-甲酰亚氨基)吡啶-4-甲酰胺(740mg,2.51mmol)悬浮在DMA(6mL)中。然后向该悬浮液中添加K2CO3(347mg,2.51mmol)、DIEA(0.44mL,2.51mmol)和DBU(0.37mL,2.51mmol)。将小瓶密封，并在微波反应器中在150℃照射45分钟。将反应混合物在空气流下浓缩，然后复溶在DMF中并通过C18反相色谱法(MeCN/10mM甲酸铵水溶液，缓冲在pH＝3.8)纯化。将包含产物的馏分合并并冻干，以获得黄色固体状标题化合物5-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇。LCMS(ESI)m/z：259.2，[M+H]+。
步骤3：8-(5-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
按照实例159，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将6-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇替换为5-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇，获得黄色蜡状固体状标题化合物(5mg，产率22％)。LCMS(ESI)m/z：481.1，[M+H]+。
步骤4：5-氯-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
将8-[5-氯-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(5.0mg,0.0100mmol)溶解在EtOAc(2mL)中，用4N HCl在二氧杂环己烷(0.5mL)处理，并在室温搅拌。1小时后，将混合物浓缩至干燥并得到固体残余物。将残余物用MeCN(3mL)研制并再次浓缩至干燥(重复2次)。将所得残余物溶解在水与MeCN的混合物中并冻干，以得到黄色固体状标题化合物5-氯-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(4.5mg，定量产率)。LCMS(ESI)m/z：381.1，[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),9.03(br,1H),8.90–8.83(m,2H),8.67(s,1H),8.49–8.39(m,2H),3.86–3.76(m,4H),3.29–3.21(m,2H),3.17–2.95(m,2H),1.89–1.60(m,6H)。
实例162
5-甲基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物162)
步骤1：3-溴-5-氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺
将吡啶-4-甲脒盐酸盐(1.38g,8.75mmol)和3-溴-5-氟-吡啶-4-甲酸(2.0g,9.1mmol)溶解在包含二异丙基乙胺(4.75mL,27mmol)的DMF(45mL)中。最后，添加HATU(3.63g,9.55mmol)并将反应混合物在室温搅拌16小时。将饱和碳酸氢钠溶液(80mL)添加至反应混合物中，并将其用iPrOH-CHCl3的2:8混合物(3×50mL)萃取3次。将有机相合并，用水、盐水彻底洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将粗残余物通过在MeOH中研制以纯化。将灰白色沉淀物过滤，用MeOH冲洗并干燥，以得到米色固体状标题化合物3-溴-5-氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺(1.93g，产率66％)。LCMS(ESI)m/z：323.0/325.0(Br模式)[M+H]+。
步骤2：5-溴-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮
将3-溴-5-氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺(1.93g,5.96mmol)溶解在DMF(15mL)中并添加碳酸铯(3.9g,11.9mmol)。将反应混合物在100℃搅拌2小时。一旦转化完成，将反应混合物冷却至室温，并逐滴添加至用水按1:1稀释的NH4Cl(饱和)的搅拌溶液(总计150mL)中。形成灰白色沉淀物，将其过滤并用水和乙腈冲洗。将固体干燥，以得到灰白色固体状标题化合物5-溴-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(1.72g，产率95％)。LCMS(ESI)m/z：302.9/304.9(Br模式)[M+H]+。
步骤3：5-甲基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮
向微波小瓶中加入5-溴-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(400mg,1.32mmol)、甲基硼酸(180mg,3.0mmol)、Pd(PPh3)4(154mg,0.13mmol)和K2CO3(548mg,3.96mmol)。将小瓶加盖，并添加DMA(6mL)中并用N2鼓泡5分钟，然后在微波反应器中在150℃照射1小时。在空气流下去除挥发物。将粗残余物悬浮在MeOH(30mL)和EtOAc(30mL)中，并添加5g硅胶，并在真空中浓缩以干燥加载材料。通过柱色谱法(MeOH/EtOAc/庚烷)纯化，以得到黄色固体状标题化合物5-甲基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(26mg，7％，产率)。LCMS(ESI)m/z：239.2[M+H]+。
步骤4：8-(5-甲基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
按照实例159，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将6-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇替换为5-甲基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮，获得黄色固体状标题化合物(16mg，产率26％)。LCMS(ESI)m/z：461.1[M+H]+。
步骤5：5-甲基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶；甲酸盐
按照实例159，步骤6中所述的程序，从16mg 0.04mmol的8-(5-甲基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯开始制备，以得到米色固体状5-甲基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶；甲酸盐(6mg，产率59％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.10(s,1H),8.72(d,J＝5.9Hz,2H),8.54(bs,1H),8.47(dd,J＝4.6,1.6Hz,2H),8.43(s,1H),3.91–3.68(m,4H),3.41(t,J＝7.4Hz,2H),3.21–3.05(m,2H),2.77(s,3H),2.20–1.94(m,2H),1.92–1.74(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：361.1[M+H]+。
实例163
8-甲基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物163)
按照实例142中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氨基吡啶-4-甲酰胺替换为3-氨基-2-甲基异烟酰胺(根据Synthesis,2016,48,1226中的程序制备)，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),8.30(d,J＝5.6Hz,1H),8.17(s,1H),7.58(d,J＝5.6Hz,1H),3.84-3.76(m,4H),3.13(t,J＝7.2Hz,2H),2.94(s,2H),2.85(s,3H),2.68(s,3H),1.80(t,J＝7.6Hz,2H),1.76-1.71(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：364.1[M+H]+。
实例164
8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-3-酮(化合物164)
按照实例101，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为2,8-二氮杂螺[4.5]癸-3-酮，获得标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(d,J＝0.8Hz,1H),8.80–8.75(m,2H),8.60(d,J＝5.7Hz,1H),8.36–8.31(m,2H),7.90(dd,J＝5.8,0.9Hz,1H),7.60(s,1H),4.12–4.01(m,2H),3.94–3.84(m,2H),3.17(s,2H),2.21(s,2H),1.87–1.75(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：361.1[M+H]+。
实例165
8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮
(化合物165)
按照实例101，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-1-酮盐酸盐，获得固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.28(d,J＝0.8Hz,1H),8.80–8.75(m,2H),8.60(d,J＝5.7Hz,1H),8.36–8.31(m,2H),7.93(dd,J＝5.7,0.9Hz,1H),7.67(s,1H),4.52–4.42(m,2H),3.67–3.57(m,2H),3.28–3.21(m,2H),2.14–2.07(m,2H),1.99–1.88(m,2H),1.67–1.57(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：361.01[M+H]+。
实例166
4-(1-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物166)
步骤1：1-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯三氟乙酸盐
向1-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯(200mg,0.51mmol)(根据J.Org.Chem.,2016,81,3509中的程序制备)在DCM(4mL)中的溶液中添加三氟乙酸(2mL,2.69mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(200mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：289.3[M+H]+。
步骤2：1-甲基-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸苄酯
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为1-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯三氟乙酸盐，获得黄色固体状标题化合物。LCMS(ESI)m/z：495.6[M+H]+。
步骤3：4-(1-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶
向1-甲基-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯(60mg,0.12mmol)在AcOH(1mL)中的溶液中添加HBr(1mL，33％，在AcOH中)。混合物在室温搅拌16小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相色谱法(乙腈6％至36％/0.225％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(18mg,41％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,1H),8.77(d,J＝4.8Hz,2H),8.60(d,J＝5.2Hz,1H),8.35-8.32(m,3H),7.92(d,J＝5.2Hz,1H),4.53-4.45(m,2H),3.54-3.42(m,3H),3.23-3.16(m,2H),2.25-2.19(m,1H),1.92-1.72(m,2H),1.70-1.68(m,1H),1.66-1.54(m,2H),1.21-1.13(m,3H)。LCMS(ESI)m/z：361.1[M+H]+。
实例167
4-(3-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物167)
按照实例166中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将1-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯替换为3-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯(根据J.Org.Chem.2016,81,3509中的程序制备)，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,1H),8.79-8.75(m,2H),8.60(d,J＝5.6Hz,1H),8.36(s,1H),8.34-8.32(m,2H),7.90(d,J＝5.6Hz,1H),4.01-3.90(m,4H),3.59-3.54(m,1H),3.10-2.96(m,2H),2.17-2.10(m,1H),1.84-1.76(m,4H),1.44-1.35(m,1H),1.27(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ESI)m/z：361.4[M+H]+。
实例168
4-(2,3-二甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物168)
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为4-(3-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶，获得黄色固体状标题化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝5.2Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.31(d,J＝5.6Hz,2H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),4.06-3.78(m,5H),3.47-3.43(m,1H),3.12-3.08(m,1H),2.29(s,3H),1.99-1.93(m,1H),1.81-1.66(m,4H),1.38-1.32(m,1H),1.11(d,J＝5.6Hz,3H)。LCMS(ESI)m/z：375.1[M+H]+。
实例169和170
(1S,3R)-3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇和(1R,3S)-3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇(化合物169和170)甲酸盐
步骤1：反式-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊醇
将1,3-环戊二醇(2.3mL，24.5mmol，反式:顺式＝2:1)和咪唑(2.5g,37.0mmol)在DCM(30mL)中的溶液搅拌10分钟。然后向该反应混合物中添加TBSCl(3.7g,24.5mmol)并在室温搅拌16小时。将混合物用DCM(50mL)稀释，用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至10％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(2.7g,51％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.49-4.35(m,2H),2.13-1.97(m,2H),1.84-1.77(m,2H),1.61-1.45(m,2H),0.87(s,9H),0.04(s,6H)。
步骤2：反式-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊基甲磺酸酯
向反式-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊醇(1.0g,4.62mmol)和三乙胺(1.6mL,11.6mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加甲磺酰氯(0.43mL,5.55mmol)。将溶液在室温搅拌2小时。将混合物用DCM(50mL)稀释，用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(1.1g，粗产物)，其无需进一步纯化。
步骤3：顺式-4-(2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(500mg,1.31mmol)、反式-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊基甲磺酸酯(800mg,2.7mmol)在DMF(10mL)和乙腈(2mL)中的溶液中添加K2CO3(541mg,3.92mmol)。将混合物加热至90℃并搅拌16小时。冷却至室温后，将混合物用EtOAc(100mL)稀释，用水(50mL×3)和盐水(50mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(220mg,31％)。LCMS(ESI)m/z：545.1[M+H]+。
步骤4：顺式-3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-基)环戊醇
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向顺式-4-(2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(220mg,0.4mmol)在THF(10mL)中的溶液中添加TBAF(2.4mL,2.4mmol,1M)。将溶液在室温搅拌16小时。将混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈5％至35％/0.225％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(80mg,46％)。LCMS(ESI)m/z：431.2[M+H]+。
步骤5：(1S,3R)-3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇和(1R,3S)-3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇甲酸盐
将顺式-3-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊醇(80mg,0.19mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak-AD(250mm×30mm,10um)、超临界CO2/EtOH+0.1％NH3·H2O＝50/50；80mL/min)分离，以得到白色固体状标题化合物。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例169(40mg，第一峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝6.0Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.31(d,J＝6.0Hz,2H),7.87(d,J＝6.0Hz,1H),4.05-3.95(m,3H),3.89-3.83(m,2H),2.68-2.65(m,2H),2.58-2.52(m,3H),2.11-2.00(m,1H),1.81-1.65(m,9H),1.55-1.36(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：431.2[M+H]+。实例170(33mg，第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.31(d,J＝5.6Hz,2H),8.27(s,1H),7.86(d,J＝6.0Hz,1H),4.07-4.03(m,1H),4.00-3.95(m,2H),3.92-3.83(m,2H),2.83-2.72(m,2H),2.75-2.69(m,1H),2.66(s,2H),2.12-2.00(m,1H),1.80-1.65(m,9H),1.56-1.41(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：431.2[M+H]+。
实例171
8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-甲酸甲酯
(化合物171)
步骤1：8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,3-
二甲酸2-(叔丁基)3-甲酯
向20mL小瓶中添加4-氯-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(770mg,3.2mmol)、氟化钾(550mg，9.5mmol，3当量)，并将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,3-二甲酸2-叔丁基3-甲酯盐酸盐(1100mg，3.2mmol，1当量)添加至20mL小瓶中，然后添加二甲亚砜(11mL,0.3M)和三乙胺(2.2mL，16mmol，5当量)。将反应在室温搅拌45分钟。将反应混合物转移至分液漏斗，用水(10mL)、饱和NH4Cl水溶液(10mL)和EtOAc(20mL)稀释，并分离各层。将水层用另外的EtOAc(3×15mL)萃取，并且合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物在Genevac上在减压下进一步浓缩16小时以去除残余DMSO。然后将粗残余物在24g Isco料筒上骤沸，用0至15％MeOH在DCM中的溶液洗脱，以得到8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,3-二甲酸2-(叔丁基)3-甲酯(1.12g，产率70％)。LCMS(ESI)m/z：527.2[M+Na]+。
步骤2：8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-
甲酸甲酯
将8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,3-二甲酸2-(叔丁基)3-甲酯溶解在1mL DCM和1mL TFA中。将混合物在室温搅拌30分钟。然后将反应混合物在真空中浓缩，然后从DCM(5mL)进一步浓缩2倍，以去除残余TFA。然后将粗残余物通过HPLC纯化，以得到8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-甲酸甲酯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.27(d,J＝3.3Hz,1H),8.79–8.74(m,2H),8.59(dd,J＝5.7,2.6Hz,1H),8.35–8.30(m,2H),7.90(d,J＝5.7Hz,1H),4.05–3.86(m,4H),3.85–3.74(m,1H),3.65(s,3H),3.23–2.97(m,1H),2.85–2.78(m,1H),2.25–2.14(m,1H),2.12–2.02(m,1H),2.02–1.89(m,1H),1.84–1.67(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：405.2[M+H]+。
实例172
N-甲基-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-甲酰胺(化合物172)
步骤1：2-(叔丁氧基羰基)-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-甲酸
将8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,3-二甲酸2-(叔丁基)3-甲酯(1100mg,2.2mmol)添加至20mL小瓶中，然后添加四氢呋喃(9700mg,11mL,130mmol,0.2M)、水(11000mg,11mL,610mmol,0.2M)和氢氧化锂(100mg，0.046mL，4.4mmol，2当量)。在室温搅拌1小时后，将混合物用DCM(10mL)稀释，并将反应用1NHCl水溶液小心地淬灭；将水层用pH试纸测试以确保其呈中性/酸性。分离各层，并将水层用1×15mL DCM和8×15mL 80％CHCl3/20％IPA溶液萃取。合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物在真空中从PhMe(10mL)浓缩1次，其引起产物固化，得到标题化合物(700mg，1.43mmol，700mg，产率65％)。LCMS(ESI)m/z：547.3[M+H]+。
步骤2：N-甲基-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-3-甲酰胺
向20mL小瓶中添加2-(叔丁氧基羰基)-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-甲酸(50mg，0.102mmol，1当量)、HATU(48mg，0.12mmol，1.2当量)，然后添加DMF(1.1mL)、N,N-二异丙基乙胺(66mg，5当量)和甲胺(2M在THF中的溶液，0.11mL，2当量)。将反应在室温搅拌2小时，然后在Genevac上浓缩16小时。然后将粗残余物溶解在DCM(5mL)和水(5mL)中。分离各层；将水层用DCM(4×5mL)萃取。合并的有机提取物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。向该粗残余物中添加0.5mL DCM和0.5mL TFA，并将其在室温搅拌1小时。然后将反应混合物在真空中浓缩，然后从DCM(5mL)进一步浓缩2倍，以去除尽可能多的残余TFA。然后将粗残余物通过HPLC纯化，以得到N-甲基-8-[2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-甲酰胺(4.1mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.80–8.73(m,2H),8.59(d,J＝5.7Hz,1H),8.36–8.30(m,2H),7.97–7.91(m,1H),7.90(d,J＝5.7Hz,1H),3.98(t,J＝5.6Hz,2H),3.95–3.89(m,2H),3.65(t,J＝8.1Hz,1H),2.88(d,J＝10.8Hz,1H),2.70(d,J＝10.8Hz,1H),2.62(d,J＝4.8Hz,3H),2.08(dd,J＝12.9,8.7Hz,1H),1.75–1.68(m,4H),1.58(dd,J＝12.9,7.5Hz,1H)。未观察到可交换的NH胺质子。LCMS(ESI)m/z：404.2[M+H]+。
实例173
N,N-二甲基-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-甲酰胺(化合物173)
按照实例172，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将甲胺替换为二甲胺，获得标题化合物(4.11mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.26(s,1H),8.80–8.72(m,2H),8.59(d,J＝5.8Hz,1H),8.35–8.31(m,2H),7.89(d,J＝5.7Hz,1H),4.05–3.84(m,5H),3.00(s,3H),2.97(d,J＝11.0Hz,1H),2.86(s,3H),2.64(d,J＝11.1Hz,1H),2.07(dd,J＝12.8,8.9Hz,1H),1.83–1.63(m,4H),1.59(dd,J＝12.8,6.9Hz,1H)。未观察到可交换的NH胺质子。LCMS(ESI)m/z：418.2[M+H]+。
实例174
(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)(吡咯啶-1-基)甲酮(化合物174)
按照实例172，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将甲胺替换为吡咯啶，获得标题化合物(8.6mg，产率19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.81–8.73(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.36–8.30(m,2H),7.90(d,J＝5.7Hz,1H),4.03–3.82(m,5H),3.54(dt,J＝10.1,6.6Hz,1H),3.41–3.34(m,2H),2.96(d,J＝11.0Hz,1H),2.64(d,J＝11.0Hz,1H),2.06(dd,J＝12.7,8.7Hz,1H),1.92–1.84(m,2H),1.83–1.66(m,7H),1.62(dd,J＝12.7,6.9Hz,1H)。未观察到可交换的NH质子。LCMS(ESI)m/z：444.2[M+H]+。
实例175
N-吗啉代(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-
基)甲酮(化合物175)
按照实例172，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将甲胺替换为吗啉，获得标题化合物(4.3mg，产率7.5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.79–8.73(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.36–8.31(m,2H),7.90(d,J＝5.7Hz,1H),4.04–3.82(m,5H),3.57(q,J＝5.8Hz,5H),3.53–3.44(m,4H),2.96(d,J＝11.0Hz,1H),2.65(d,J＝11.1Hz,1H),2.04(dd,J＝12.9,9.0Hz,1H),1.81–1.73(m,2H),1.73–1.67(m,1H),1.64(dd,J＝12.8,6.8Hz,1H)。未观察到可交换的NH胺质子。LCMS(ESI)m/z：460.2[M+H]+。
实例176和177
(3R,4S)-4-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)四氢呋喃-3-醇和(3S,4R)-4-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)四氢呋喃-3-醇(化合物176和177)
按照实例128中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将1,2-氧化环戊烯替换为3,6-二氧杂双环[3.1.0]己烷，获得呈对映异构体的混合物的反式-4-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)四氢呋喃-3-醇。通过在手性SFC分离以获得标题化合物。产物的绝对立体化学被任意分配。实例176：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.80-8.72(m,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.36-8.28(m,2H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),5.00(d,J＝4.4Hz,1H),4.20-4.10(m,1H),4.05-3.94(m,2H),3.93-3.85(m,2H),3.85-3.81(m,1H),3.80-3.74(m,1H),3.61-3.54(m,1H),3.51-3.45(m,1H),2.65-2.58(m,3H),2.56-2.52(m,1H),2.48-2.43(m,1H),1.80-1.63(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：433.1[M+H]+。实例177：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.83-8.72(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.37-8.28(m,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),5.00(d,J＝4.4Hz,1H),4.19-4.12(m,1H),4.07-3.94(m,2H),3.93-3.85(m,2H),3.85-3.81(m,1H),3.80-3.75(m,1H),3.60-3.54(m,1H),3.51-3.43(m,1H),2.66-2.58(m,3H),2.56-2.52(m,1H),2.48-2.43(m,1H),1.80-1.64(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：433.1[M+H]+。
实例178和179
(1R,2R)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁-1-醇和(1S,2S)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁-1-醇(化合物178和179)
步骤1：2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁酮
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(400mg,1mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.2mL,0.12mmol)。将反应混合物在室温搅拌5分钟，并向该混合物中添加1,2-双((三甲基甲硅烷基)氧基)环丁-1-烯(0.3mL,1.1mmol)。混合物在室温搅拌5小时。将反应混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(300mg,69％)。LCMS(ESI)m/z：415.0[M+H]+。
步骤2：反式-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇和顺式-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇
向2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁酮(300mg,0.72mmol)在MeOH(7mL)中的溶液中添加硼氢化钠(80mg,2.2mmol)。混合物在室温搅拌2小时。将反应倒入饱和NH4Cl水溶液(20mL)，用EtOAc(50mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈28％至58％/0.225％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到外消旋反式异构体(35mg,12％)和顺式异构体(36mg,12％)，两者均为黄色固体。LCMS(ESI)m/z：417.3[M+H]+。
步骤3：(1R,2R)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁-1-醇和(1S,2S)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁-1-醇
将反式-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁-1-醇(35mg,0.08mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak IG(250mm×30mm,10um)、超临界CO2/IPA+0.1％NH4OH＝40/60；80mL/min)分离，以得到白色固体状标题化合物。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例178(10mg，第一峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝5.6Hz,2H),8.59(d,J＝6.0Hz,1H),8.32(d,J＝5.6Hz,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),5.17(s,1H),4.03-3.81(m,5H),2.61-2.53(m,3H),2.47(s,2H),2.43-2.36(m,1H),1.99-1.90(m,1H),1.81-1.66(m,6H),1.50-1.36(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：417.1[M+H]+。实例179(5mg，第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝5.6Hz,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(d,J＝5.6Hz,2H),7.89(d,J＝6.0Hz,1H),5.08(d,J＝7.2Hz,1H),4.03–3.94(m,2H),3.92–3.84(m,2H),3.82–3.72(m,1H),2.61–2.53(m,3H),2.47(s,2H),2.43–2.36(m,1H),1.99–1.90(m,1H),1.76–1.71(m,3H),1.69–1.61(m,3H),1.45–1.34(m,1H),1.26–1.21(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：417.1[M+H]+。
实例180和181
(1S,2R)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁-1-醇和(1R,2S)-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁-1-醇(化合物180和181)
将顺式-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁-1-醇(35mg,0.08mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak IG(250mm×30mm,10um)、超临界CO2/IPA+0.1％NH4OH＝40/60，80mL/min)分离，以得到标题化合物，两者均为白色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例180(13mg，第一峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(d,J＝5.6Hz,2H),7.88(d,J＝6.0Hz,1H),4.79(s,1H),4.08(d,J＝4.4Hz,1H),4.01-3.84(m,4H),2.89-2.86(m,1H),2.78-2.69(m,1H),2.66-2.56(m,2H),2.09-1.97(m,1H),1.87-1.66(m,9H),1.26-1.21(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：417.1[M+H]+。实例181(12mg，第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(d,J＝5.6Hz,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.67(s,1H),4.09-4.02(m,1H),4.01-3.85(m,4H),2.85-2.77(m,1H),2.72-2.63(m,1H),2.60-2.57(m,1H),2.44-2.39(m,1H),2.08-1.94(m,1H),1.83-1.65(m,9H),1.26-1.21(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：417.1[M+H]+。
实例182
2-(3-氟吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物182)
按照实例153，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑替换为(3-氟吡啶-4-基)硼酸，获得标题化合物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.20(s,1H),8.60(d,J＝3.2Hz,1H),8.56(d,J＝6.0Hz,1H),8.52(d,J＝4.8Hz,1H),8.17-8.12(m,1H),7.93(d,J＝5.6Hz,1H),4.14-4.06(m,2H),4.00-3.94(m,2H),3.14(t,J＝7.2Hz,2H),2.94(s,2H),1.88(t,J＝7.2Hz,2H),1.84-1.78(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：365.3[M+H]+。
实例183
4-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)烟碱腈(化合物183)
按照实例153，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑替换为4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)烟碱腈，获得标题化合物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),9.07(s,1H),8.94(d,J＝5.2Hz,1H),8.63–8.57(m,2H),8.50(s,1H),7.98(d,J＝6.0Hz,1H),4.30–4.20(m,2H),4.15–4.05(m,2H),3.45(t,J＝7.2Hz,2H),3.24(s,2H),2.10(t,J＝7.2Hz,2H),1.96–1.86(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：372.3[M+H]+。
实例184和185
(1R,2R)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊-1-醇和(1S,2S)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊-1-醇(化合物184和185)
按照实例128中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶替换为2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶，获得呈对映异构体的混合物的反式-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环戊-1-醇。通过在手性SFC分离以获得标题化合物。产物的绝对立体化学被任意分配。实例184：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.43(d,J＝5.6Hz,1H),8.09(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),4.49(d,J＝4.8Hz,1H),3.98-3.80(m,3H),3.79-3.69(m,2H),2.71-2.63(m,2H),2.63-2.57(m,2H),2.55-2.52(m,1H),2.49-2.42(m,3H),2.34-2.24(m,1H),1.83-1.74(m,2H),1.73-1.66(m,3H),1.65-1.61(m,2H),1.60-1.32(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：434.2[M+H]+。实例185：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85(s,1H),9.07(s,1H),8.43(d,J＝5.6Hz,1H),8.08(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),4.48(d,J＝4.8Hz,1H),3.96-3.79(m,3H),3.78-3.68(m,2H),2.71-2.63(m,2H),2.62-2.57(m,2H),2.55-2.52(m,1H),2.48-2.40(m,3H),2.35-2.24(m,1H),1.83-1.74(m,2H),1.73-1.67(m,3H),1.65-1.62(m,2H),1.61-1.28(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：434.2[M+H]+。
实例186
5-氟-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物186)
按照实例142，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氨基吡啶-4-甲酰胺替换为3-氨基-5-氟异烟酰胺，获得灰白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.92(s,1H),8.43-8.38(m,2H),8.16(s,1H),3.68-3.64(m,4H),3.17-3.12(m,2H),2.96(s,2H),2.65(s,3H),1.83-1.76(m,2H),1.74-1.65(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：368.0[M+H]+。
实例187
8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-4-醇(化合物187)
步骤1：4-羟基-1-氧代-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯
在-78℃向哌啶-1,4-二甲酸1-苄基4-甲酯(5.0g,18.0mmol)在THF(50mL)中的溶液中添加LiHMDS(39.7mL,39.7mmol,1M)。将反应混合物温热至室温并搅拌1小时，然后冷却至-78℃，并在-78℃向该反应混合物中添加THF(25mL)中的(2-氧代乙基)胺甲酸叔丁酯(3.4g,21.6mmol)。然后将反应温热至室温并搅拌16小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(30mL)淬灭，并用EtOAc(80mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至10％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(1.7g,31％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.42-7.28(m,5H),6.03(s,1H),5.14(s,2H),4.27-4.21(m,1H),3.93-3.82(m,2H),3.66-3.59(m,1H),3.53-3.43(m,2H),3.27-3.21(m,1H),2.52(s,1H),1.85-1.68(m,3H),1.54-1.46(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：305.1[M+H]+。
步骤2：4-羟基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯
在0℃向4-羟基-1-氧代-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯(300mg,0.99mmol)在THF(9mL)中的溶液中添加BH3-THF络合物(4.93mL,4.93mmol,1M)。将混合物加热至70℃并搅拌16小时。冷却至室温后，将反应用MeOH(3mL)和水(3mL)淬灭，然后将混合物搅拌30分钟。将混合物在真空中浓缩，将残余物在室温溶解在MeOH(5mL)和HCl(3mL,3mmol,1M)中。将混合物加热至70℃并搅拌16小时。冷却至室温后，将混合物在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(300mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：291.2[M+H]+。
步骤3：4-羟基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-(叔丁基)酯
向4-羟基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯(300mg,1.03mmol)在THF(5mL)和水(2mL)中的溶液中添加Na2CO3(329mg,3.11mmol)和二碳酸二-叔丁酯(451mg,2.07mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物用水(30mL)稀释，用EtOAc(50mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过柱色谱法(在石油醚中的0至60％EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(120mg,30％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40-7.29(m,5H),5.14(s,2H),4.07-3.71(m,3H),3.67-3.57(m,1H),3.45-3.01(m,5H),1.82-1.64(m,2H),1.47(s,9H),1.45-1.35(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：291.2[M-100+H]+。
步骤4：4-羟基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向4-羟基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-(叔丁基)酯(110mg,0.28mmol)在EtOAc(3mL)中的溶液中添加10％钯碳(20mg)。将混合物在氢气球(15psi)下在室温搅拌16小时。将混合物过滤并将滤液在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(70mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：257.2[M+H]+。
步骤5：8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-4-
醇
按照实例101，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为4-羟基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝6.0Hz,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,2H),7.91(d,J＝5.6Hz,1H),4.27-4.17(m,2H),3.94-3.89(m,1H),3.82-3.64(m,2H),3.56-3.48(m,2H),3.31-3.29(m,2H),3.20-3.14(m,1H),2.01-1.92(m,1H),1.78-1.65(m,2H),1.61-1.53(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：363.2[M+H]+。
实例188
2-(5-氟-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物188)
按照实例153，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑替换为5-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑，获得标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(s,1H),8.48(d,J＝5.6Hz,1H),8.40(s,1H),8.34(s,1H),7.79(d,J＝5.6Hz,1H),3.88-3.85(m,4H),3.20-3.13(m,2H),2.98(s,2H),1.84-1.80(m,2H),1.77-1.72(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：353.9[M+H]+。
实例189
6-((4-氯-1H-吡唑-1-基)甲基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物189)甲酸盐
步骤1：8-(6-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向6-氯-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(2g,7.7mmol)和BOP(4.1g,9.3mmol)在MeCN(20mL)中的溶液中添加1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(1.7g,11.6mmol)。将反应混合物在室温搅拌5分钟，向该混合物中添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸酯(2g,8.5mmol)。将混合物在室温搅拌16小时并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(3.5g,7.3mmol,94％)。LCMS(ESI)m/z：481.5[M+H]+
步骤2：8-(2-(吡啶-4-基)-6-乙烯基吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
向乙烯基三氟硼酸钾(1.1g,8.3mmol)、8-(6-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(2g,4.2mmol)、三乙胺(1.7mL,12.5mmol)在1-丙醇(15mL)中的溶液中添加1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(300mg,0.4mmol)。将反应混合物在氮气气氛下加热至100℃持续16小时。冷却至室温后，在真空中浓缩溶剂。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(1.7mg,87％)。LCMS(ESI)m/z：473.6[M+H]+
步骤3：8-(6-甲酰基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
在0℃向8-(2-(吡啶-4-基)-6-乙烯基吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(1.7g,3.6mmol)在THF(6mL)和水(6mL)中的溶液中添加四氧化锇(180mg,0.72mmol)。将反应混合物在0℃搅拌5分钟，向该混合物中添加过碘酸钠(1.5g,7.2mmol)。使反应温热至室温，并搅拌16小时。将反应倒入饱和NaHCO3水溶液(50mL)中，用EtOAc(60mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到棕色固体状标题化合物(800mg,47％)。LCMS(ESI)m/z：475.1[M+H]+
步骤4：8-(6-(羟基甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(6-甲酰基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(800mg,1.7mmol)在MeOH(7mL)中的溶液中添加硼氢化钠(190mg,5mmol)。混合物在室温搅拌2小时。将反应倒入饱和NH4Cl水溶液(5mL)，用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(120mg,14.9％)。LCMS(ESI)m/z：477.1[M+H]+
步骤5：6-(氯甲基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-
d]嘧啶
在0℃向8-(6-(羟基甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(120mg,0.25mmol)在DCM(4mL)中的溶液中添加亚硫酰氯(0.05mL,0.76mmol)。使反应温热至室温并搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(90mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：395.0[M+H]+
步骤6：8-(6-(氯甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向6-(氯甲基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(90.0mg,0.23mmol)在DCM(4mL)中的溶液中添加三乙胺(0.04mL,0.27mmol)和二碳酸二-叔丁酯(55mg,0.25mmol)。将溶液在室温搅拌16小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(110mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：495.1[M+H]+
步骤7：8-(6-((4-氯-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-
基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(6-(氯甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(110mg,0.22mmol)、4-氯吡唑(0.03mL,0.33mmol)、四丁基氢氧化铵(6滴)在甲苯(4mL)中的溶液中添加40％氢氧化钠水溶液(1mL)。将反应混合物在氮气气氛下加热至100℃持续16小时。冷却至室温后，将混合物用EtOAc(50mL)稀释，用水(15mL×2)和盐水(30mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(50mg,40％)。LCMS(ESI)m/z：561.1[M+H]+
步骤8：6-((4-氯-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐
向8-(6-((4-氯-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(50mg,0.09mmol)在EtOAc(2mL)中的溶液中添加4M HCl在EtOAc(5mL,20.0mmol)中的溶液。混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物(40mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：461.1[M+H]+。
步骤9：6-((4-氯-1H-吡唑-1-基)甲基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶甲酸盐
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为6-((4-氯-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.79-8.73(m,2H),8.32-8.28(m,2H),8.25(s,1H),8.19(s,1H),7.65(s,1H),7.42(s,1H),5.60(s,2H),4.12-3.63(m,4H),2.78-2.67(m,2H),2.60(s,2H),2.38(s,3H),1.79-1.69(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：475.1[M+H]+。
实例190
6-((4-氯-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物190)甲酸盐
步骤1：8-(6-甲酰基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
按照实例189，步骤1中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将6-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇替换为6-氯-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇，获得黄色固体状标题化合物。LCMS(ESI)m/z：608.6[M+H]+。
步骤2：6-((4-氯-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶甲酸盐
按照实例189，步骤4至9中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(6-甲酰基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(6-甲酰基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.02(s,1H),8.30(s,1H),8.16(s,1H),8.13(s,1H),7.62(s,1H),7.31(s,1H),5.54(s,2H),3.75-3.62(m,4H),2.88-2.84(m,2H),2.73(s,2H),2.63(s,3H),2.47(s,3H),1.81-1.71(m,2H),1.76-1.64(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：478.5[M+H]+。
实例191
5-环丙基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物191)
按照实例162，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将甲基硼酸替换为环丙基硼酸，获得标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.99(s,1H),8.77(d,J＝6.0Hz,2H),8.39(s,1H),8.32(d,J＝6.0Hz,2H),8.10(s,1H),3.88–3.69(m,4H),3.13–3.03(m,2H),3.00–2.88(m,1H),2.87–2.71(m,1H),2.63–2.53(m,1H),1.89–1.57(m,6H),1.30–1.22(m,2H),1.08–1.00(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：387.3[M+H]+。
实例192
2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物192)
步骤1：2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇和2-(吡啶-4-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
在15分钟内，向在0℃的4-氯-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(600mg,2.47mmol)和三氟乙烷亚磺酸锌(1576mg,7.42mmol)在DMSO(8.2mL)和H2O(0.82mL)中的搅拌溶液中逐滴添加氢过氧化叔丁基氢在H2O中的溶液(2.0mL,14.8mmol)。将反应混合物温热至室温持续15分钟，然后加热至50℃持续3小时并用乙酸异丙酯稀释。将有机层用50％盐水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并在减压下蒸发。将粗产物通过柱色谱法(MeOH/iPrOAc)纯化，以得到油状2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(110.2mg，产率14.6％)。LCMS(ESI)m/z：307[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.17(br s,1H),8.86–8.83(m,2H),8.71(d,J＝5.1Hz,1H),8.19–8.16(m,2H),8.04(d,J＝5.1Hz,1H),4.38(q,J＝11.2Hz,2H)。包含2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇与2-(吡啶-4-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇的1:1混合物的馏分也作为油状物(85.6mg，产率11.3％)分离。LCMS(ESI)m/z：307[M+H]+。
步骤2：8-(2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(105mg,0.34mmol)、2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(128.5mg,0.41mmol)、DMAP(4.3mg,0.034mmol)和DIPEA(0.18mL,1.03mmol)在DMA(1.2mL)在室温搅拌30分钟。向其中添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(99mg,0.41mmol)，并将反应混合物在室温搅拌2天，然后用乙酸异丙酯稀释。将有机层用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并在减压下蒸发。将粗产物通过柱色谱法(MeOH/iPrOAc)纯化，以得到油状8-(2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(165.5mg，产率91.3％)。LCMS(ESI)m/z：529.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.83–8.76(m,2H),8.59(d,J＝5.8Hz,1H),8.40–8.34(m,2H),7.91(d,J＝5.7Hz,1H),4.49(q,J＝11.3Hz,2H),4.09–3.89(m,4H),3.39–3.33(m,2H),3.25–3.19(m,2H),1.92–1.68(m,6H),1.41(s,9H)。
步骤3：2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
/>
将8-(2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(165.5mg,0.31mmol)在TFA(3.1mL)和DCM(3.1mL)中的混合物在室温搅拌3小时。在减压下去除挥发性溶剂。将粗残余物用饱和NaHCO3碱化并用乙酸异丙酯萃取(3次)。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并在减压下蒸发。将粗化合物通过HPLC纯化，以得到白色固体状2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(27.5mg，产率20.5％)。LCMS(ESI)m/z：429.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.82–8.78(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.39–8.35(m,2H),7.91(d,J＝5.7Hz,1H),4.49(q,J＝11.3Hz,2H),4.09–3.87(m,4H),3.07–2.99(m,2H),2.85(s,2H),1.81–1.68(m,6H)；NH隐藏。
实例193
2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物193)
步骤1：8-(2-(吡啶-4-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和8-(2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将2-(吡啶-4-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇与2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(85mg,0.28mmol)的1:1混合物、2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(104mg,0.33mmol)、DMAP(3.5mg,0.03mmol)和DIPEA(0.15mL,0.83mmol)在DMA(1.0mL)中在室温搅拌30分钟。向其中添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(80mg,0.33mmol)，并将反应混合物在室温搅拌2天，并用乙酸异丙酯稀释。将有机层用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并在减压下蒸发。将粗产物通过柱色谱法(MeOH/iPrOAc)纯化，并将化合物混合物通过使用非手性SFC(Chiralcel OX(150.0mm×21.2mm,5μm)，超临界CO2/MeOH+0.1％NH4OH＝30/100等度；70mL/min)以分离，以得到白色固体状8-(2-(吡啶-4-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(第一峰：6.4mg，产率4.4％)。LCMS(ESI)m/z：529.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.26(s,1H),8.81–8.75(m,2H),8.36–8.31(m,2H),8.00(s,1H),4.11–3.89(m,6H),3.40–3.31(m,2H),3.26–3.19(m,2H),1.91–1.68(m,6H),1.41(s,9H)。第二洗脱液提供白色固体状8-(2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(8.6mg，产率5.9％)。LCMS(ESI)m/z：529.2[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO)δ8.83–8.76(m,2H),8.59(d,J＝5.8Hz,1H),8.40–8.34(m,2H),7.91(d,J＝5.7Hz,1H),4.49(q,J＝11.3Hz,2H),4.09–3.89(m,4H),3.39–3.33(m,2H),3.25–3.19(m,2H),1.92–1.68(m,6H),1.41(s,9H)。
步骤2：2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例192，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(2-(吡啶-4-基)-8-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(2-(吡啶-4-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得固体状标题化合物(3.7mg，产率73％)。LCMS(ESI)m/z：429.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.27(s,1H),8.82–8.75(m,2H),8.35–8.32(m,2H),7.99(s,1H),4.12–3.88(m,6H),3.19–3.08(m,2H),2.95(s,2H),1.86–1.73(m,6H)；NH 隐藏。
实例 194
2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物194)甲酸盐
步骤1：8-(2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-6-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(6-甲酰基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(400mg,0.66mmol)在THF(3mL)中的溶液中添加(三氟甲基)三甲基硅烷(561mg,3.95mmol)和四丁基氟化铵(3.95mL,3.95mmol,1M)。将混合物在氮气气氛下在室温搅拌16小时。将反应用水(20mL)淬灭并用EtOAc(50mL)萃取。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(300mg,67％)。LCMS(ESI)m/z：678.8[M+H]+。
步骤2：8-(2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-6-(2,2,2-三氟-1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-6-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(100mg,0.15mmol)在DCM(3mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.08mL,0.44mmol)和甲磺酰氯(0.03mL,0.44mmol)。将混合物在氮气气氛下在室温搅拌3小时。将反应用饱和NaHCO3水溶液(20mL)淬灭并用DCM(30mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(50mg,44％)。LCMS(ESI)m/z：756.3[M+H]+。
步骤3：8-(2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-6-(2,2,2-三氟-1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(50mg,0.07mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中添加10％钯碳(10mg)。将混合物在氢气球(15psi)下在室温搅拌2小时。将混合物过滤并将滤液在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物(30mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：662.4[M+H]+。
步骤4：2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐
向8-(2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(25mg,0.04mmol)在DCM(1mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.03mL,0.38mmol)。混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物(15mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：432.2[M+H]+。
步骤5：2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-
(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶甲酸盐
/>
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(s,1H),8.22(s,1H),8.14(s,1H),7.85(s,1H),4.02-3.92(m,2H),3.86-3.80(m,2H),3.79-3.74(m,2H),2.65(s,3H),2.59(t,J＝6.8Hz,2H),2.47(s,2H),2.29(s,3H),1.78-1.66(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：446.1[M+H]+。
实例195
4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)-6-(2,2,2-三氟乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物195)
按照实例194，步骤1至5中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(6-甲酰基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(6-甲酰基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.84-8.69(m,2H),8.37-8.27(m,2H),7.98(s,1H),4.09-3.94(m,4H),3.92-3.83(m,2H),2.56-2.53(m,2H),2.43(s,2H),2.26(s,3H),1.84-1.65(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：443.1[M+H]+。
实例196
(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)甲醇
(化合物196)
向2打兰小瓶中添加4-氯-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(100mg,0.4120mmol)、氟化钾(71.8mg，1.24mmol，3当量)、3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(166mg，1.25当量，0.515mmol)、三乙胺(0.287mL，2.06mmol，5当量)和二甲亚砜(1.374mL,19mmol,0.3M)。将反应在室温搅拌30分钟。将反应混合物转移至20mL小瓶中，用水(5mL)和EtOAc(5mL)稀释，并分离各层。将水层用另外的EtOAc(3×5mL)萃取，并且合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物溶解在1mL DCM和1mL TFA中。在室温搅拌30分钟。然后将反应混合物在真空中浓缩，然后从DCM(5mL)进一步浓缩2倍，以去除尽可能多的残余TFA。将粗残余物通过HPLC纯化。
实例197和198
(S)-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)甲醇和(R)-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-
基)甲醇(化合物197和198)
通过使用手性SFC(Chiralpak AD(150mm×21.2mm,5um)，用超临界CO2/MeOH+0.1％NH4OH＝55/45等度洗脱；70mL/min)，将外消旋(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)甲醇从来自实例196的经纯化的残余物中分离出来，以得到标题化合物。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例197(第一峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.78–8.76(m,2H),8.59(d,J＝5.7Hz,1H),8.35–8.30(m,2H),7.90(d,J＝5.7Hz,1H),4.53(br s,1H),4.04–3.85(m,5H),3.35(br s,1H),3.25–3.16(m,1H),2.75(s,2H),1.88–1.61(m,6H),1.30(dd,J＝12.7,8.0Hz,1H)。LCMS(ESI)m/z：377.2[M+H]+。实例198(第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.29(s,1H),8.79(d,J＝5.1Hz,2H),8.62(d,J＝5.6Hz,1H),8.37–8.31(m,2H),7.90(d,J＝5.7Hz,1H),5.46(br s,1H),4.10–3.85(m,5H),3.81–3.75(m,1H),3.73–3.68(m,1H),3.60–3.51(m,1H),3.25–3.18(m,1H),3.15–3.06(m,1H),2.14(dd,J＝13.2,7.4Hz,1H),1.88–1.78(m,4H),1.62(dd,J＝13.2,10.0Hz,1H)。LCMS(ESI)m/z：377.2[M+H]+。
实例199
3-(吡啶-4-基)-1-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,6-萘啶(化合物199)
步骤1：N-(叔丁基)-3-甲基异烟酰胺
在0℃向3-甲基-4-吡啶甲酸(2.0g,14.6mmol)在无水DCM(55mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(3.05mL,21.9mmol)。在10分钟内缓慢添加氯甲酸乙酯(1.7mL,17.8mmol)。将所得混合物在0℃搅拌30分钟，然后缓慢添加叔丁胺(1.84mL,17.5mmol)。将所得混合物温热至室温并搅拌过夜。将反应混合物用水(25mL)稀释，并分离二氯甲烷层。将有机层用1M HCl(20mL)萃取。将水层用NaOH溶液中和至pH 9。将水层用乙酸乙酯(2×30mL)萃取，并且合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物N-叔丁基-3-甲基-吡啶-4-甲酰胺(1.7g，8.84mmol，产率60.6％)。LCMS(ESI)m/z：193.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),8.42(d,J＝4.8Hz,1H),8.03(s,1H),7.19(d,J＝4.8Hz,1H),2.27(s,3H),1.35(s,9H)。
步骤2：N-(叔丁基)-3-(2-氧代-2-(吡啶-4-基)乙基)异烟酰胺
在-45℃在15分钟内向N-叔丁基-3-甲基-吡啶-4-甲酰胺(1.70g,8.84mmol)在无水THF(63mL)中的搅拌溶液中添加2.5M正丁基锂在己烷中的溶液(8.5mL,21.2mmol)。将反应在-45℃搅拌45分钟，然后经由套管缓慢添加THF(5.0mL)中的异烟酸甲酯(1.33mL,9.73mmol)。将所得混合物在-45℃搅拌30分钟，然后温热至室温并搅拌2小时。将溶液倒入饱和NH4Cl水溶液(100ml)中。分离有机层，并将水层用EtOAc(3×75mL)萃取。将合并的有机层用饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，经Na2SO4，过滤并浓缩，以得到标题化合物N-(叔丁基)-3-(2-氧代-2-(吡啶-4-基)乙基)异烟酰胺(2.63g，8.85mmol，产率100％)。LCMS(ESI)m/z：298.1[M+H]+。
步骤3：3-(吡啶-4-基)-1H-吡喃酮[4,3-c]吡啶-1-酮
将N-(叔丁基)-3-(2-氧代-2-(吡啶-4-基)乙基)异烟酰胺(2.63g,8.84mmol)在乙酸(30mL,525mmol)中的溶液在100℃加热16小时。将溶液冷却至室温并在减压下浓缩至约10mL。添加水(20mL)，并从溶液中沉淀出固体。将混合物过滤以得到白色沉淀物。将固体用水洗涤，并在减压下干燥，以得到白色固体状标题化合物3-(4-吡啶基)吡喃酮[4,3-c]吡啶-1-酮(1.79g，7.98mmol，产率90％)。LCMS(ESI)m/z：225.2[M+H]+。
步骤4：3-羟基-3-(吡啶-4-基)-3,4-二氢-2,6-萘啶-1(2H)-酮
向3-(4-吡啶基)吡喃酮[4,3-c]吡啶-1-酮(1.79g,7.98mmol)在无水乙醇(22mL)中的溶液中添加氢氧化铵水溶液(17mL,427mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将粗产物在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物3-羟基-3-(4-吡啶基)-2,4-二氢-2,6-萘啶-1-酮(1.07g，4.43mmol，产率55％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.11(s,1H),8.66(d,J＝4.9Hz,1H),8.61(dd,J＝4.7,1.8Hz,3H),7.79(d,J＝5.0Hz,1H),7.60(dd,J＝4.5,1.7Hz,2H),6.72(s,1H),3.37(d,J＝16.2Hz,1H),3.13(d,J＝16.1Hz,1H)。
步骤5：3-(吡啶-4-基)-2,6-萘啶-1(2H)-酮
在0℃向3-羟基-3-(4-吡啶基)-2,4-二氢-2,6-萘啶-1-酮(1.07g,4.44mmol)在无水乙醇(20mL)和水(2mL)中的溶液中添加6N HCl水溶液(11mL,66mmol)。将反应温热至室温并搅拌16小时。混合物经布氏漏斗过滤。将滤液浓缩，以得到浅黄色固体状标题化合物3-(吡啶-4-基)-2,6-萘啶-1(2H)-酮(955mg，4.27mmol，产率96％)。LCMS(ESI)m/z：224.1[M+H]+。
步骤6：1-氯-3-(吡啶-4-基)-2,6-萘啶
将3-(4-吡啶基)-2H-2,6-萘啶-1-酮(1.12g,5.02mmol)在三氯氧化磷(8.84mL,94.9mmol)中的悬浮液添加至开放式厚壁圆底压力容器(75mL)中，并将其在100℃加热。将混合物在100℃搅拌30分钟。然后将该压力容器密封，并将反应混合物在130℃加热15小时。将反应冷却至室温，并在减压下去除过量的三氯氧化磷。将残余物与冰水混合，并将混合物的pH用1M NaOH水溶液调节至约7，然后用饱和Na2CO3水溶液调节至约10。过滤混合物以得到浅棕色固体，将其在减压下干燥，以得到浅棕色固体状标题化合物1-氯-3-(4-吡啶基)-2,6-萘啶(1.01g，4.18mmol，产率83％)。LCMS(ESI)m/z：241.9，243.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),8.94(s,1H),8.90(d,J＝5.8Hz,1H),8.78(dd,J＝4.5,1.7Hz,2H),8.15(dd,J＝4.6,1.6Hz,3H)。
步骤7：8-(3-(吡啶-4-基)-2,6-萘啶-1-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将1-氯-3-(4-吡啶基)-2,6-萘啶(400mg,1.66mmol)、三乙胺(1.15mL,8.28mmol)、氟化钾(294mg,4.97mmol)和2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(517mg,2.15mmol)在NMP(4.00mL)中的溶液在80℃搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温并倒入EtOAc(50mL)和水(25mL)中。分离各层，并将有机层用NaHCO3和盐水(2次)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并用硅胶浓缩。将粗产物通过柱色谱法(MeOH/EtOAc/庚烷)纯化，以得到米色固体状标题化合物8-(3-(吡啶-4-基)-2,6-萘啶-1-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(350mg，产率47％)。LCMS(ESI)m/z：446.1[M+H]+。
步骤8：3-(吡啶-4-基)-1-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,6-萘啶
向8-(3-(吡啶-4-基)-2,6-萘啶-1-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(47mg,0.110mmol)在DCM(0.50mL)中的溶液中添加4N HCl在DCM(0.5mL)中的二氧杂环己烷(1.0mL,4.0mmol)的溶液。完成HCl添加后，形成黄色沉淀物。将反应在室温搅拌15分钟。然后将反应浓缩至干燥。将粗产物复溶在MeCN和水中，冷冻并冻干，以得到橙色固体状标题化合物3-(吡啶-4-基)-1-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,6-萘啶盐酸盐(35mg，0.092mmol，产率87％)。LCMS(ESI)m/z：346.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,1H),9.16(br s,2H),9.00–8.91(m,2H),8.75(d,J＝5.8Hz,1H),8.65–8.53(m,2H),7.94(d,J＝5.8Hz,1H),3.65–3.53(m,4H),3.35–3.24(m,2H),3.12(t,J＝5.5Hz,2H),1.99–1.78(m,6H)。
实例200
2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1,7-萘啶(化合物200)
步骤1：4-羟基-1,7-萘啶-2(1H)-酮
向氮气下的3-氨基吡啶-4-甲酸甲酯(5.0g,32.9mmol)在无水乙酸乙酯(32mL,328mmol)中的搅拌溶液中添加叔丁醇钾(7.74g,69.0mmol)。将所得混合物在75℃搅拌14小时，然后在80℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温并添加100mL水。分离有机层，并将水层用乙酸乙酯洗涤，并用甲基叔丁基醚洗涤两次。将水层用6N HCl酸化至pH为6，其沉淀出固体。滤出所得沉淀物，用水洗涤并在真空下干燥。向湿固体中添加少量水，并将浆液冷冻并冻干，以得到米色固体状标题化合物4-羟基-1H-1,7-萘啶-2-酮(1.17g，7.22mmol，产率22％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.44(s,1H),8.61(s,1H),8.29(d,J＝5.2Hz,1H),7.64(d,J＝5.2Hz,1H),5.88(s,1H)。
步骤2：2,4-二氯-1,7-萘啶
向4-羟基-1H-1,7-萘啶-2-酮(1.17g,7.22mmol)在甲苯(14.4mL)中的搅拌溶液中添加三氯氧化磷(3.4mL,36.5mmol)。所得混合物在80℃下搅拌20小时。将反应冷却至室温并蒸发至干燥。添加1M NaOH(50mL)和二氯甲烷(100mL)的水溶液。分离两层，并将水层用DCM(3×100mL)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发，以得到米色固体状标题化合物2,4-二氯-1,7-萘啶(880mg，4.42mmol，产率61％)。LCMS(ESI)m/z：199.3，201.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(s,1H),8.81(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(s,1H),8.08(d,J＝5.7Hz,1H)。
步骤3：4-氯-2-(吡啶-4-基)-1,7-萘啶
向2,4-二氯-1,7-萘啶(400mg,2.01mmol)、吡啶-4-硼酸频哪醇(pinacol)酯(433mg,2.11mmol)与K2CO3(833mg,6.03mmol)的混合物中添加1,4-二氧杂环己烷(10.7mL)与水(2.7mL)的混合物。将溶液用氮气流脱气5分钟，然后添加Pd(PPh3)4(232.2mg,0.20mmol)。然后将反应在微波装置中加热至150℃，并搅拌25分钟。将反应冷却至室温并用EtOAc(50mL)稀释。添加Na2SO4，并将悬浮液在硅藻土上过滤。将滤饼用EtOAc冲洗，并将滤液浓缩至干燥。将粗产物通过柱色谱法(MeOH/EtOAc/庚烷)纯化，以得到黄色固体状标题化合物4-氯-2-(4-吡啶基)-1,7-萘啶(330mg，1.37mmol，产率68％)。LCMS(ESI)m/z：242.2，244.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(s,1H),8.82(dd,J＝7.9,3.2Hz,4H),8.34–8.27(m,2H),8.11(d,J＝5.7Hz,1H)。
步骤4：8-(2-(吡啶-4-基)-1,7-萘啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将4-氯-2-(4-吡啶基)-1,7-萘啶(180mg,0.740mmol)、三乙胺(0.52mL,3.72mmol)、氟化钾(132mg,2.23mmol)和2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(233mg,0.970mmol)在NMP(3.72mL)中的溶液在80℃搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温并倒入EtOAc(50mL)和水(25mL)中。分离各层，并将有机层用NaHCO3和盐水(2次)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并用硅胶浓缩。将粗产物通过柱色谱法(MeOH/EtOAc/庚烷)纯化，以得到无色油状标题化合物8-(2-(吡啶-4-基)-1,7-萘啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(295mg，产率89％)。LCMS(ESI)m/z：446.0[M+H]+。
步骤5：2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1,7-萘啶
向8-[2-(4-吡啶基)-1,7-萘啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(121mg,0.270mmol)在DCM(0.80mL)中的溶液中添加4N HCl在二氧杂环己烷中的溶液(0.80mL,3.2mmol)。完成HCl添加后，形成黄色沉淀物。将反应在室温搅拌15分钟。然后将反应浓缩至干燥。将产物通过反相色谱法在C18柱(MeCN/10mM甲酸铵pH 3.8缓冲水溶液)上纯化。将包含产物的馏分合并并浓缩以去除一些MeCN，冷冻并冻干，以得到淡橙色粉末状标题化合物2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1,7-萘啶(75mg，0.217 mmol，产率80％)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ9.39(s,1H),8.78(d,J＝5.8 Hz,2H),8.57(d,J＝5.7 Hz,1H),8.39(br s,1H),8.24(d,J＝5.8Hz,2H),7.84(d,J＝5.7 Hz,1H),7.72(s,1H),3.42–3.30(m,4H),3.22–3.09(m,2H),3.03–2.88(m,2H),1.92–1.75(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：346.3[M+H]+。
实例201
2-(嘧啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1,7-萘啶三氟乙酸盐
(化合物201)
按照实例101中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶替换为4-氯-2-(嘧啶-4-基)-1,7-萘啶(根据WO2018198077中的程序制备)，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,1H),9.40(s,1H),9.06(d,J＝5.2 Hz,1H),8.61(d,J＝5.6 Hz,1H),8.57(d,J＝5.2 Hz,1H),8.29(s,1H),8.20(s,1H),7.88(d,J＝5.2 Hz,1H),3.47-3.33(m,4H),3.29-3.23(m,2H),3.08(s,2H),1.93-1.84(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：347.0[M+H]+。
实例202
8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(化合物202)
向4-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(3.0 g,12.36 mmol)在DMF(50mL)中的溶液中添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(2.9 g,12.36mmol)、三乙胺(8.6mL,61.81 mmol)和氟化钾(0.7 g,12.36 mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至80℃持续16小时。冷却至室温后，将反应用水(200mL)稀释并用EtOAc(400mL)萃取。将有机层用盐水(200mL×3)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(1.6g,82％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.81-8.73(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.36-8.29(m,2H),7.90(d,J＝5.6Hz,1H),4.03-3.93(m,4H),3.41-3.35(m,2H),3.22-3.20(m,2H),1.85-1.81(m,2H),1.79-1.69(m,4H),1.41(s,9H)。LCMS(ESI)m/z：447.2[M+H]+。
实例203
8-甲氧基-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物203)甲酸盐
步骤1：8-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
按照实例101，步骤1中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氨基异烟酸甲酯替换为3-氨基-2-甲氧基异烟酸甲酯，获得黄色固体状标题化合物(850mg,61％)。LCMS(ESI)m/z：255.2[M+H]+。
步骤2：8-(8-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将8-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(0.9g,3.54mmol)、BOP(1.88g,4.25mmol)和DBU(0.81g,5.31mol)在乙腈(10mL)中的混合物在室温搅拌10分钟，然后添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(1.02g,4.25mmol)。将反应在室温搅拌16小时。将反应混合物用水(50mL)淬灭，用EtOAc(80mL×2)萃取。将合并的有机层用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，并在真空中浓缩。将粗残余物通过快速色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至3％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(755mg,45％)。LCMS(ESI)m/z：477.3[M+H]+。
步骤3：8-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶三氟乙酸盐
向8-(8-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(610mg,1.28mmol)在DCM(6mL)中的溶液中添加三氟乙酸(2mL,25.96mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，以得到棕色油状标题化合物(480mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：377.4[M+H]+
步骤4：8-甲氧基-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为8-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐，获得黄色固体状标题化合物(140mg,40％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.05(br s,1H),8.77(d,J＝5.6Hz,2H),8.30(d,J＝5.6Hz,2H),8.11(d,J＝5.6Hz,1H),7.39(d,J＝5.6Hz,1H),4.08(s,3H),4.00-3.89(m,2H),3.85-3.75(m,2H),3.70-3.53(m,2H),3.24-3.11(m,1H),3.00-2.91(m,1H),2.88(s,3H),2.17-2.00(m,1H),1.98-1.75(m,5H).LCMS(ESI)m/z：391.4[M+H]+。
实例204
5-乙基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物204)甲酸盐
步骤1：8-(2-(吡啶-4-基)-5-乙烯基吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
将8-[5-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(127mg,0.24mmol)和乙烯基三氟硼酸钾(35.6mg,0.27mmol)溶解在1,4-二氧杂环己烷(3mL)中，并用氮气流脱气10分钟。添加三乙胺(0.07mL,0.48mmol)，同时将溶液再脱气5分钟。然后，将[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(17.7mg,0.02mmol)添加至反应混合物中，并将其在氮气下加盖并加热至85℃持续6小时。将反应混合物冷却至23℃并经Celite过滤。将滤液用饱和碳酸氢钠溶液稀释，并将其用2:8iPrOH/CHCl3萃取3次。将有机层合并，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将粗残余物通过硅胶快速色谱法(SiO2,MeOH/DCM)纯化，以得到橙色固体状8-[2-(4-吡啶基)-5-乙烯基-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(59mg，0.124mmol，产率52％)。UPLCMS(ESI)m/z：473.3[M+H]+。
步骤2：8-(5-乙基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
将8-[2-(4-吡啶基)-5-乙烯基-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(58mg,0.12mmol)溶解在甲醇(3mL)中并用氮气流脱气10分钟，然后添加10重量％钯碳(6mg)。将反应混合物加盖，并经由鼓泡引入氢气持续5分钟。将反应混合物在1atm氢气(气球)下在23℃搅拌1小时。将反应混合物用氮气吹扫，经过滤，并用MeOH冲洗。将滤液在减压下浓缩，以得到米色固体状8-[5-乙基-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(58mg，0.12mmol，产率99％)。UPLCMS(ESI)m/z：475.2[M+H]+。
步骤3：5-乙基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶甲酸盐
按照实例199，步骤8中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将底物替换为8-(5-乙基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得灰白色固体状标题化合物(16mg，0.041mmol，产率34％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(s,1H),8.78(d,J＝5.1Hz,2H),8.56(s,1H),8.38(s,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,2H),3.75–3.61(m,4H),3.18–3.04(m,6H),2.54(s,2H),1.96–1.84(m,1H),1.76–1.57(m,5H),1.19(t,J＝7.4Hz,3H)。UPLCMS(ESI)m/z：375.3[M+H]+。
实例205
1-((8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)甲基)环丁-1-醇(化合物205)甲酸盐
将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶六盐酸盐(200mg,0.35mmol)、1-氧杂螺[2.3]己烷(45mg,0.53mmol)、三乙胺(390μL,2.83mmol)在MeOH(1.8mL)和DCM(1.8mL)中的溶液加热并在50℃搅拌。20小时后，在减压下去除溶剂。将粗产物通过反相色谱法使用C18(MeCN/0％至60％甲酸铵pH 3.7)纯化，以得到暗绿色固体状1-[[8-[2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基]甲基]环丁醇(甲酸盐)(42mg，0.088mmol，产率25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.24(s,1H),8.75(d,J＝5.9Hz,2H),8.57(d,J＝5.7Hz,1H),8.31(d,J＝5.9Hz,2H),8.28(s,1H),7.88(d,J＝5.7Hz,1H),4.03-3.93(m,2H),3.91-3.80(m,2H),2.68(t,J＝6.9Hz,2H),2.50-2.47(m,4H),2.04-1.95(m,2H),1.94-1.83(m,2H),1.80-1.71(m,4H),1.69-1.54(m,3H),1.50-1.32(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：431.3[M+H]+。
实例206
(2-环戊基-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-
基)甲醇(化合物206)
步骤1：3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯
在0℃向2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3,8-二甲酸8-叔丁基3-乙酯(100mg,0.32mmol)(根据WO201887602中的程序制备)在THF(2mL)中的溶液中缓慢添加氢化铝锂(18.2mg,0.48mmol)。然后将反应混合物在0℃搅拌1小时。将混合物通过水(0.1mL)、1M NaOH水溶液(0.1mL)、水(0.1mL)淬灭，用EtOAc(30mL)稀释，然后经无水MgSO4干燥。过滤该混合物，并将滤饼用EtOAc(10mL×2)洗涤。将滤液在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(80mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：271.2[M+H]+。
步骤2：2-环戊基-3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯
向3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(80mg,0.30mmol)在1,2-二氯乙烷(2mL)中的溶液中添加环戊酮(80uL,0.89mmol)和乙酸(20uL,0.30mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(188mg,0.89mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩。将粗残余物溶解于EtOAc(30mL)中，用饱和NaHCO3水溶液(15mL)和盐水(15mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝20:1)纯化，以得到白色固体状标题化合物(40mg,40％)。LCMS(ESI)m/z：339.3[M+H]+。
步骤3：(2-环戊基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)甲醇三氟乙酸盐
向2-环戊基-3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(40mg,0.12mmol)在DCM(1mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.2mL,2.6mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(40mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：239.2[M+H]+
步骤4：(2-环戊基-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-3-基)甲醇
向4-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(25mg,0.10mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加(2-环戊基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)甲醇三氟乙酸盐(36mg,0.10mmol)和N,N-二异丙基乙胺(89uL,0.52mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至80℃持续16小时。冷却至室温后，将所得混合物通过反相色谱法(乙腈27％至57％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(9mg,20％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.83-8.72(m,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.37-8.30(m,2H),7.90(d,J＝5.6Hz,1H),4.42(t,J＝5.6Hz,1H),4.08-3.85(m,4H),3.57-3.50(m,1H),3.27-3.19(m,1H),3.02-2.91(m,2H),2.81-2.72(m,1H),2.40-2.36(m,1H),1.83-1.64(m,8H),1.62-1.33(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：445.2[M+H]+。
实例207
2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶7-氧化物
(化合物207)三氟乙酸盐
步骤1：4-(2-(叔丁氧基羰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-氯吡啶并[3,4-d]
嘧啶7-氧化物
向8-(2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(300mg,0.74mmol)在DCM(8mL)中添加3-氯过氧苯甲酸(192mg,0.89mmol)。将混合物在室温搅拌3小时。将反应混合物用水(30mL)稀释，用DCM(30mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过柱色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(230mg,74％)。LCMS(ESI)m/z：420.3[M+H]+。
步骤2：2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶7-氧化物三氟乙酸盐
按照实例153，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑替换为4-(2-(叔丁氧基羰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶7-氧化物和吡啶-4-基硼酸，获得黄色固体状标题化合物(64mg,30％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.89(s,1H),8.80-8.77(m,2H),8.75(d,J＝2.0Hz,1H),8.31-8.28(m,2H),8.20-8.15(m,1H),7.94(d,J＝7.2Hz,1H),4.00-3.87(m,4H),3.32-3.27(m,2H),3.11(t,J＝5.6Hz,2H),1.93(t,J＝7.6Hz,2H),1.82-1.75(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：363.3[M+H]+。
实例208
4-(2-环戊基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物208)
在氮气气氛下，在0℃向4-(2-环戊基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(220mg,0.52mmol)在THF(5mL)中的溶液中添加NaH(39mg,0.98mmol,60％)。10分钟后，添加碘甲烷(42uL,0.73mmol)。将反应在0℃搅拌2小时。将反应倒入饱和NH4Cl水溶液(5mL)和水(10mL)中，用EtOAc(30mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过反相色谱法(乙腈15％至45％/0.225％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状混合物(位置异构体)(55mg,41％)。将混合物通过使用手性SFC(Chiralpak AD(250mm×30mm,10um)、超临界CO2/EtOH+0.1％NH4OH＝45/55；60mL/min)分离，以得到黄色固体状4-(2-环戊基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(3.9mg，第二峰)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04(s,1H),8.43(d,J＝6.0Hz,1H),8.32(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),3.93-3.84(m,2H),3.83-3.81(m,3H),3.77-3.71(m,2H),2.58-2.54(m,5H),2.44(s,2H),2.42-2.35(m,1H),1.75-1.62(m,10H),1.53-1.44(m,2H),1.43-1.33(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：432.2[M+H]+。
实例209
4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶(化合物209)
步骤1：5-氯-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)-2-(三氟甲基)异烟酰胺
在室温向5-氯-2-(三氟甲基)异烟酸(400mg,1.77mmol)在DMF(11mL)中的溶液中添加HATU(1.01g,2.66mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.93mL,5.32mmol)。搅拌5分钟后，向该反应混合物中添加异烟亚胺酰胺盐酸盐(335mg,2.13mmol)。将所得混合物在室温搅拌5小时。将反应混合物逐滴添加至水(30mL)中并搅拌10分钟。形成白色沉淀物并将其滤出，将滤饼用水(10mL×2)、石油醚(10mL×2)洗涤并在真空中干燥，以得到黄色固体状标题化合物(160mg,27％)。LCMS(ESI)m/z：328.9[M+H]+。
步骤2：2-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
向5-氯-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)-2-(三氟甲基)异烟酰胺(160mg,0.48mmol)在DMF(5mL)中的溶液中添加Cs2CO3(476mg,1.45mmol)。将混合物在100℃搅拌3小时。冷却至室温后，添加水(20mL)，并将所得混合物搅拌10分钟。将混合物用AcOH调节至pH 5，然后搅拌10分钟。形成白色沉淀物并将其滤出，将滤饼用水(10mL×2)、石油醚(10mL×2)洗涤并在真空中干燥，以得到白色固体状标题化合物(190mg,92％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.97(s,1H),8.69-8.64(m,2H),8.30-8.24(m,2H),8.13(s,1H)。LCMS(ESI)m/z：292.9[M+H]+。
步骤3：8-(2-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向2-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(100mg,0.34mmol)在乙腈(4mL)中的溶液中添加DBU(156mg,1.03mmol)、2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(148mg,0.62mmol)和BOP(272mg,0.62mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。将反应用水(30mL)淬灭，用EtOAc(40mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，并在真空中浓缩。将粗残余物通过快速色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至80％EtOAc)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(80mg,45％)。LCMS(ESI)m/z：515.0[M+H]+。
步骤4：4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例203，步骤3至4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(8-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(2-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得白色固体状标题化合物(20mg,24％)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.35(s,1H),8.76–8.70(m,2H),8.52–8.45(m,2H),8.24(s,1H),4.23–4.13(m,2H),4.04(ddd,J＝13.4,7.7,4.0Hz,2H),3.43(t,J＝7.5Hz,2H),3.27(s,2H),2.91(s,3H),2.15(t,J＝7.5Hz,2H),2.03–1.87(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：429.1[M+H]+。
实例210
N,N-二甲基-2-(8-(2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙烷磺酰胺(化合物210)
按照实例109中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和乙烯磺酰胺替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和N,N-二甲基乙烯磺酰胺，获得黄色固体状标题化合物(26mg,17％)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.08(s,1H),8.41(d,J＝5.7Hz,1H),8.20(br s,1H),7.82(d,J＝5.8Hz,1H),3.96(ddd,J＝12.0,6.8,4.0Hz,2H),3.88(ddd,J＝12.0,7.4,3.9Hz,2H),3.28–3.20(m,2H),2.95–2.89(m,2H),2.88(s,6H),2.78–2.68(m,5H),2.63(s,2H),1.90–1.78(m,6H)。未观察到可交换的胺NH质子。LCMS(ESI)m/z：485.2[M+H]+。
实例211
3-((8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)甲基)氧杂环丁烷-3-醇(化合物211)甲酸盐
将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶；六盐酸盐(200mg,0.35mmol)、1,5-二氧杂螺[2.3]己烷(46mg,0.53mmol)、MeOH(6.9mL)和三乙胺(0.39mL,2.83mmol)在30℃搅拌。2天后，在减压下去除溶剂。将粗产物通过逆相柱色谱法在C18上(MeCN/10mM碳酸氢铵pH 10.0缓冲水溶液，然后使用10mM甲酸铵pH 3.8缓冲水溶液)纯化，以得到棕色固体状3-[[8-[2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基]甲基]氧杂环丁烷-3-醇甲酸盐(71mg，0.16mmol，产率46％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+D2O)9.12-9.10(m,1H),8.65(d,J＝5.6Hz,2H),8.51-8.43(m,1H),8.30(s,1H),8.21(t,J＝5.9Hz,2H),7.79-7.75(m,1H),4.46-4.42(m,4H),3.91-3.80(m,2H),3.77-3.72(m,2H),3.09(d,J＝10.9Hz,2H),2.98(t,J＝6.8Hz,2H),2.83(s,2H),1.82-1.64(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：433.3[M+H]+
实例212
(2-甲基-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)甲醇(化合物212)
按照实例206，步骤2至4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将环戊酮替换为甲醛，获得黄色固体状呈非对映异构体的混合物的标题化合物(12mg,15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.77(d,J＝6.0Hz,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(d,J＝6.0Hz,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.46(t,J＝5.2Hz,1H),4.08-3.92(m,2H),3.91-3.82(m,2H),3.48(m,1H),3.00-2.96(m,1H),2.45-2.29(m,2H),2.26(s,3H),2.09-2.05(m,1H),1.83-1.53(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：391.1[M+H]+。
实例213
2-(5-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物213)三氟乙酸盐
按照实例153，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑替换为5-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(根据Bioorg.Med.Chem.Lett.,2016,26,534中的程序制备)，获得白色固体状标题化合物(6mg,8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.70(s,1H),9.16(s,1H),8.93-8.84(m,2H),8.63-8.46(m,2H),7.95-7.62(m,2H),4.09-3.78(m,4H),3.35-3.26(m,2H),3.18-3.04(m,2H),1.93(t,J＝7.2Hz,2H),1.85-1.74(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：386.0[M+H]+。
实例214
N-甲基-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-6-胺(化合物214)
步骤1：6-氯-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
按照实例203，步骤3至4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(8-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(6-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(310mg,75％)。LCMS(ESI)m/z：395.2[M+H]+。
步骤2：甲基(4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-6-基)胺甲酸叔丁酯
向6-氯-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(200mg,0.51mmol)和N-甲基胺甲酸叔丁酯(264mg,2.01mmol)在二氧杂环己烷(3mL)中的溶液中添加2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三异丙基联苯(100mg,0.21mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(100mg,0.11mmol)和叔丁醇钠(100mg,1.04mmol)。将混合物在微波下在130℃搅拌2小时。冷却至室温后，将反应混合物在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝10:1)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(60mg,24％)。LCMS(ESI)m/z：490.2[M+H]+。
步骤3：N-甲基-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-6-胺
向甲基(4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-6-基)胺甲酸叔丁基酯(60mg,0.12mmol)在DCM(1mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.24mL,3.16mmol)。将混合物在室温搅拌3小时，然后在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈27％至57％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(14mg,27％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88(s,1H),8.69(d,J＝4.8Hz,2H),8.24(d,J＝4.8Hz,2H),7.03-6.95(m,1H),6.58(s,1H),3.84-3.77(m,2H),3.75-3.68(m,2H),2.86(d,J＝4.8Hz,3H),2.74-2.64(m,2H),2.60-2.54(m,2H),2.36(s,3H),1.83-1.77(m,2H),1.76-1.70(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：390.2[M+H]+。
实例215
N,N-二甲基-2-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙烷磺酰胺(化合物215)
按照实例109中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将乙烯磺酰胺替换为N,N-二甲基乙烯磺酰胺，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.80-8.74(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.34-8.30(m,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.03-3.86(m,4H),3.22(t,J＝7.2Hz,2H),2.78(s,6H),2.78-2.73(m,2H),2.62(t,J＝6.8Hz,2H),2.51(s,2H),1.82-1.68(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：482.1[M+H]+。
实例216
4-(3-(氟甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物216)
步骤1：3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯
向2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,3,8-三甲酸2-苄基8-叔丁基3-乙酯(5.5g,12.32mmol)(根据WO201887602中的程序制备)在THF(30mL)中的溶液中添加NaBH4(1.4g,36.95mmol)。然后向混合物中缓慢添加LiCl(1.6g,36.95mmol)。将反应在室温搅拌16小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(30mL)淬灭，并用EtOAc(80mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至30％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(3.1g,60％)。LCMS(ESI)m/z：405.1[M+H]+。
步骤2：3-(氟甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯
向全氟丁烷磺酰氟(291mg,0.96mmol)和2-叔丁基-1,1,3,3-四甲基胍(228mg,1.33mmol)在THF(8mL)中的溶液中添加3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯(300mg,0.74mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物用水(30mL)稀释，用EtOAc(20mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至20％EtOAc)，以得到白色固体状标题化合物(0.15g,50％)。LCMS(ESI)m/z：429.1[M+23]+。
步骤3：3-(氟甲基)-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯
按照实例206，步骤3至4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-环戊基-3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯替换为3-(氟甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(110mg,55％)。LCMS(ESI)m/z：513.1[M+H]+。
步骤4：4-(3-(氟甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-
d]嘧啶
在室温向3-(氟甲基)-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯(110mg,0.21mmol)在EtOAc(5mL)中的溶液中添加10％钯碳(50mg)。添加后，将反应混合物在氢气气氛下在室温搅拌1小时。将混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈35％至65％/0.2％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(16mg，17％，对映异构体的混合物)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.81-8.72(m,2H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.34-8.30(m,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.40-4.26(m,1H),4.24-4.15(m,1H),3.97-3.91(m,4H),3.54-3.46(m,1H),2.85-2.78(m,1H),2.70-2.65(m,1H),1.91-1.80(m,1H),1.77
-1.63(m,4H),1.29-1.22(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：379.0[M+H]+。
实例217
4-(3-(甲氧基甲基)-2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶(化合物217)
步骤1：3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯
向3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯(400mg,0.99mmol)和氧化银(II)(250mg,1.98mmol)在MeCN(5mL)中的溶液中添加碘甲烷(0.31mL,4.94mmol)。然后将反应混合物在60℃搅拌24小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(10mL)稀释，用EtOAc(30mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至30％EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(260mg,63％)。LCMS(ESI)m/z：419.5[M+H]+。
步骤2：3-(甲氧基甲基)-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯
按照实例206，步骤3至4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-环戊基-3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯替换为3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(250mg,86％)。LCMS(ESI)m/z：525.4[M+H]+。
步骤3：4-(3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
按照实例216，步骤4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-(氟甲基)-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯替换为3-(甲氧基甲基)-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯，获得黄色油状标题化合物(160mg,92％)。LCMS(ESI)m/z：391.1[M+H]+。
步骤4：4-(3-(甲氧基甲基)-2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为4-(3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶，获得白色固体状标题化合物(10mg，11％，对映异构体的混合物)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.26(s,1H),8.71(d,J＝6.0Hz,2H),8.55(d,J＝6.0Hz,1H),8.46(d,J＝6.0Hz,2H),7.93(d,J＝5.6Hz,1H),4.86-4.83(m,1H),4.63-4.58(m,2H),4.17-4.05(m,2H),3.99-3.88(m,2H),3.59-3.55(m,2H),3.42(s,3H),2.64(s,3H),2.15-2.09(m,1H),1.95-1.79(m,5H)。LCMS(ESI)m/z：405.1[M+H]+。
实例218
1-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)六氢螺[哌啶-4,7'-吡咯并[2,1-c][1,4]
噁嗪](化合物218)
/>
步骤1：2-(2-氯乙酰基)-3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯
向3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(70mg,0.26mmol)在DCM(3mL)中的溶液中添加三乙胺(0.11mL,0.78mmol)和氯乙酰氯(0.02mL,0.28mmol)。将反应在0℃搅拌3小时。将反应用水(15mL)淬灭并用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(80mg,89％)。LCMS(ESI)m/z：347.1[M+H]+。
步骤2：4'-氧代六氢螺[哌啶-4,7'-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪]-1-甲酸叔丁酯
在0℃向氢化钠(14mg,0.35mmol,60％)在THF(3mL)中的溶液中添加2-(2-氯乙酰基)-3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(80mg,0.23mmol)。将反应在0℃搅拌16小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(70mg,98％)。LCMS(ESI)m/z：333.0[M+Na]+。
步骤3：六氢螺[哌啶-4,7'-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪]-1-甲酸叔丁酯
向4'-氧代六氢螺[哌啶-4,7'-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪]-1-甲酸叔丁酯(70mg,0.23mmol)在THF(2mL)中添加硼烷二甲基硫醚络合物(0.11mL,1.13mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。将反应用MeOH(4mL)淬灭，然后添加HCl水溶液(1mL,1N)。将溶液在50℃搅拌3小时。冷却至室温后，将反应在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(60mg,90％)。LCMS(ESI)m/z：196.9[M-100+H]+
步骤4：1-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)六氢螺[哌啶-4,7'-吡咯并
[2,1-c][1,4]噁嗪]
按照实例206，步骤3至4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-环戊基-3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯替换为六氢螺[哌啶-4,7'-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪]-1-甲酸叔丁酯，获得棕色固体状标题化合物(20mg，22％，呈对映异构体的混合物)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.82-8.72(m,2H),8.59(d,J＝5.2Hz,1H),8.35-8.28(m,2H),7.89(d,J＝6.0Hz,1H),4.06-3.99(m,1H),3.96-3.83(m,4H),3.76-3.70(m,1H),3.43-3.41(m,1H),3.16-3.12(m,1H),3.08-3.02(m,1H),2.85-2.81(m,1H),2.22-2.12(m,2H),2.03-1.99(m,1H),1.79-1.70(m,4H),1.31-1.12(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：403.1[M+H]+。
实例219
4-(2-(2-氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶(化合物219)
按照实例107，步骤1中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和1-溴-2-氟乙烷，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.84(s,1H),9.08(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.15(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),4.60-4.44(m,2H),3.86-3.74(m,4H),2.76-2.66(m,2H),2.65(s,3H),2.61(t,J＝6.8Hz,2H),2.55-2.50(m,2H),1.76-1.64(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：396.2[M+H]+。
实例220
4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物220)
按照实例107，步骤1中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.07(s,1H),7.76(d,J＝5.6Hz,1H),6.27-5.92(m,1H),3.86-3.74(m,4H),2.83(m,2H),2.73-2.68(m,2H),2.68-2.65(m,2H),2.57(s,3H),1.76-1.67(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：414.2[M+H]+。
实例221和222
(R)-4-(3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物221)和(S)-4-(3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物222)
将4-(3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(100mg,0.26mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak AD(250mm×30mm,10um)，超临界CO2/EtOH+0.1％NH4OH＝55/45；60mL/min)分离，以得到(R)-4-(3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(30mg，第一峰)和(S)-4-(3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(19mg，第二峰)，两者均为白色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例221(第一峰)：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.24(s,1H),8.76(d,J＝6.0Hz,2H),8.58(d,J＝6.0Hz,1H),8.31(d,J＝6.0Hz,2H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),3.98-3.87(m,4H),3.38-3.34(m,3H),3.28(s,3H),2.93-2.85(m,2H),1.98-1.91(m,1H),1.78-1.74(m,4H),1.40-1.35(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：391.1[M+H]+。实例222(第二峰)：1H NMR(400MHz,CD3OD):δ9.24(s,1H),8.76(d,J＝6.0Hz,2H),8.58(d,J＝6.0Hz,1H),8.31(d,J＝6.0Hz,2H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),3.98-3.87(m,4H),3.38-3.34(m,3H),3.28(s,3H),2.93-2.85(m,2H),1.98-1.91(m,1H),1.78-1.71(m,4H),1.40-1.32(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：391.1[M+H]+。
实例223
4-(4,4-二氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物223)甲酸盐
步骤1：4-氧代-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-叔丁酯
在0℃向4-羟基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-叔丁酯(300mg,0.77mmol)在DCM(6mL)中的溶液中添加Dess-Martin氧化剂(489mg,1.15mmol)。将混合物在氮气气氛下在室温搅拌16小时。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释，用NaHCO3水溶液(50mL×2)和盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：在石油醚中的0至20％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(160mg,54％)。LCMS(ESI)m/z：289.1[M-100+H]+。
步骤2：4,4-二氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-叔丁酯
向4-氧代-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-叔丁酯(140mg,0.36mmol)在1,2-二氯乙烷(2mL)中的溶液中添加Deoxo-Fluor(166uL,0.90mmol)。将反应混合物加热至60℃持续16小时。冷却至室温后，将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(20mL)淬灭，用DCM(50mL)萃取。有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/EtOAc＝5:1)纯化，以得到黄色油状标题化合物(90mg,61％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.41-7.30(m,5H),5.14(s,2H),4.12-3.96(m,2H),3.78-3.63(m,2H),3.51-3.39(m,2H),3.10-2.93(m,2H),1.85-1.72(m,2H),1.56-1.50(m,2H),1.47(s,9H)。LCMS(ESI)m/z：311.2[M-100+H]+。
步骤3：4,4-二氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向4,4-二氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-叔丁酯(110mg,0.28mmol)在EtOAc(2mL)中的溶液中添加10％钯碳(25mg)。将混合物在氢气气氛下(15psi)在室温搅拌16小时。将混合物过滤并将滤液在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(60mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：277.2[M+H]+。
步骤4：4-(4,4-二氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶甲酸盐
按照实例101，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为4,4-二氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(15mg,30％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.29(s,1H),8.81-8.74(m,2H),8.61(d,J＝5.6Hz,1H),8.38-8.31(m,2H),8.14(s,1H),7.94(d,J＝5.6Hz,1H),4.49-4.35(m,2H),3.65-3.54(m,2H),3.52-3.43(m,2H),3.30(s,2H),2.06-1.91(m,2H),1.86-1.76(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：383.2[M+H]+。
实例224
N-((8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)甲基)甲烷磺酰胺(化合物224)甲酸盐
步骤1：3-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯
向3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯(1.2g,2.97mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加三乙胺(1.24mL,8.9mmol)和甲磺酰氯(0.62mL,8.03mmol)。将反应在室温搅拌3小时。将混合物用DCM(40mL)稀释并用水(20mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(1.3g,91％)。
步骤2：3-(叠氮基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯
向3-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯(1.3g,2.69mmol)在DMF(15mL)中的溶液中添加迭氮化钠(320mg,4.92mmol)。将混合物在60℃搅拌16小时。冷却至室温后，将该混合物倒入水中并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到浅黄色固体状标题化合物(1.1g,95％)。LCMS(ESI)m/z：430.2[M+H]+。
步骤3：3-(氨基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯
向3-(叠氮基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯(0.9g,2.1mmol)在THF(10mL)中的溶液中添加三苯基膦(824mg,3.14mmol)和水(0.76mL,41.91mmol)。将混合物在70℃搅拌3小时。冷却至室温后，将反应在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到绿色固体状标题化合物(0.6g,71％)。LCMS(ESI)m/z：404.5[M+H]+。
步骤4：3-(甲基磺酰氨基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-
叔丁酯
向3-(氨基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯(300mg,0.74mmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加三乙胺(0.31mL,2.23mmol)和甲磺酰氯(0.16mL,2.01mmol)。将溶液在室温搅拌6小时。将混合物用DCM(40mL)稀释并用水(20mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(350mg,98％)。LCMS(ESI)m/z：382.0[M-100+H]+。
步骤5：3-(甲基磺酰氨基甲基)-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-
二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯
按照实例206，步骤3至4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-环戊基-3-(羟基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯替换为3-(甲基磺酰氨基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(310mg,71％)。LCMS(ESI)m/z：588.2[M+H]+。
步骤6：N-((8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)甲基)甲烷磺酰胺甲酸盐
按照实例216，步骤4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-(氟甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯替换为3-(甲基磺酰氨基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸2-苄基8-叔丁酯，获得白色固体状标题化合物(10mg,8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.77(d,J＝6.0Hz,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,2H),8.27(s,1H),7.90(d,J＝6.0Hz,1H),7.24(s,1H),4.03-3.91(m,4H),3.50-3.41(m,1H),3.10-3.06(m,2H),2.94(s,3H),2.93-2.88(m,2H),2.03-1.96(m,1H),1.82-1.72(m,4H),1.46-1.38(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：476.1[M+Na]+。
实例225
5-溴-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物225)甲酸盐
步骤1：3-溴-5-氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺
将吡啶-4-甲脒盐酸盐(1.38g,8.75mmol)和3-溴-5-氟-吡啶-4-甲酸(2.0g,9.1mmol)溶解在包含二-异-丙基乙胺(4.75mL,27mmol)的DMF(45mL)中。最后，添加HATU(3.63g,9.55mmol)并将反应混合物在室温搅拌16小时。将饱和碳酸氢钠溶液(80mL)添加至反应混合物中，并将其用iPrOH-CHCl3的2:8混合物(3×50mL)萃取3次。将有机层合并，用水、盐水彻底洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将粗残余物通过在MeOH中研制以纯化。将灰白色沉淀物过滤，用MeOH冲洗并干燥，以得到米色固体状3-溴-5-氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺(1.93g，5.76mmol，产率66％)。LCMS(ESI)m/z：323.0/325.0(Br模式)[M+H]+。
步骤2：5-溴-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
将3-溴-5-氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺(1.93g,5.96mmol)溶解在DMF(15mL)中并添加碳酸铯(3.9g,11.9mmol)。将反应混合物在100℃搅拌2小时。一旦转化完成，将反应混合物冷却至室温，并逐滴添加至用水按1:1稀释的NH4Cl(饱和)的搅拌溶液(总计150mL)中。形成灰白色沉淀物，将其过滤并用水和乙腈冲洗。将固体干燥，以得到灰白色固体状5-溴-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(1.72g，5.66mmol，产率95％)。LCMS(ESI)m/z：302.9/304.9(Br模式)[M+H]+。
步骤3：8-(5-溴-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将5-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(500mg,1.7mmol)、4-二甲基氨基吡啶(20.1mg,0.2mmol)、N,N-二-异-丙基乙胺(0.86mL,5.0mmol)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(600mg,2.0mmol)在DMA(5mL)中的溶液在23℃搅拌30分钟。添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(475mg,2.0mmol)，并将混合物在23℃搅拌3小时。添加饱和NH4Cl(25mL)溶液和EtOAc(40mL)。分离各层，并将有机层用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到棕色油状物。将粗油状物通过硅胶快速色谱法(SiO2，在DCM中的0至15％MeOH)纯化，以得到棕色胶状8-[5-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(505mg，0.986mmol，产率58％)。UPLCMS(ESI)m/z：525/527(Br模式)[M+H]+。
步骤4：5-溴-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶甲酸盐
按照实例199，步骤8中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将底物替换为8-[5-溴-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(13.4mg，0.024mmol，产率83％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.19(s,1H),8.79(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.75(s,1H),8.37(s,1H),8.31(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),3.79–3.73(m,4H),3.22–3.05(m,4H),1.92–1.58(m,6H)。UPLCMS(ESI)m/z：425/427(Br模式)[M+H]+。
实例226
6-苄基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物226)甲酸盐
步骤1：8-(6-(羟基(苯基)甲基)-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
在-78℃向8-(6-甲酰基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(400mg,0.66mmol)在THF(5mL)中的溶液中添加苯基溴化镁(0.33mL,0.99mmol)。然后将混合物在氮气气氛下在0℃搅拌2小时。将混合物用饱和NH4Cl水溶液(10mL)淬灭，并用EtOAc(40mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：在石油醚中的0至70％EtOAc)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(320mg,71％)。LCMS(ESI)m/z：686.4[M+H]+。
步骤2：6-苄基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-
基)吡啶并[3,4-d]嘧啶甲酸盐
按照实例194，步骤2至5中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-6-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(6-(羟基(苯基)甲基)-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.02(s,1H),8.21(s,1H),8.12(s,1H),7.51(s,1H),7.34-7.29(m,4H),7.25-7.19(m,1H),4.24(s,2H),3.75-3.68(m,4H),2.94(t,J＝6.8Hz,2H),2.80(s,2H),2.64(s,3H),2.53(s,3H),1.85-1.77(m,2H),1.76-1.63(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：454.2[M+H]+。
实例227
2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(吡啶-3-基甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物227)
步骤1：8-(6-(羟基(吡啶-3-基)甲基)-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
在-78℃向3-碘吡啶(202mg,0.99mmol)在THF(10mL)中的溶液中添加1.3M异丙基氯化镁氯化锂络合物在THF(0.76mL,0.99mmol)中的溶液。将反应在-78℃搅拌0.5小时，然后添加8-(6-甲酰基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(0.3g,0.49mmol)。将混合物在0℃额外搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl(5mL)水溶液淬灭，并用EtOAc(30mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至10％MeOH)纯化，以得到黄色油状标题化合物(150mg,38％)。LCMS(ESI)m/z：687.4[M+H]+。
步骤2：8-(6-(乙酰氧基(吡啶-3-基)甲基)-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向4-二甲基氨基吡啶(44mg,0.36mmol)和8-(6-(羟基(吡啶-3-基)甲基)-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(250mg,0.36mmol)在吡啶(6mL)中的溶液中添加乙酐(0.15mL,1.06mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(5mL)淬灭，并用EtOAc(30mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至10％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(240mg,91％)。LCMS(ESI)m/z：729.4[M+H]+。
步骤3：2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-
(吡啶-3-基甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例194，步骤3至5中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-6-(2,2,2-三氟-1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(6-(乙酰氧基(吡啶-3-基)甲基)-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.81(s,1H),9.02(s,1H),8.58(d,J＝1.6Hz,1H),8.44-8.42(m,1H),8.11(s,1H),7.73(d,J＝8.0Hz,1H),7.62(s,1H),7.35-7.30(m,2H),4.27(s,2H),3.82-3.65(m,4H),2.85-2.65(m,2H),2.64(s,3H),2.51-2.44(m,2H),2.41(s,3H),1.76-1.69(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：455.2[M+H]+。
实例228和229
(1R,2R)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇和(1S,2S)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇
(化合物228和229)
步骤1：(反式)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇和(顺式)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇
按照实例178，步骤1至2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐，获得标题化合物(反式36mg与顺式35mg)，两者均为白色固体。LCMS(ESI)m/z：420.2[M+H]+。反式异构体：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.07(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),5.07(d,J＝7.2Hz,1H),3.90-3.69(m,5H),2.72-2.63(m,3H),2.60-2.54(m,3H),2.47-2.45(m,1H),2.41-2.37(m,1H),2.01-1.93(m,1H),1.75-1.59(m,7H),1.43-1.33(m,1H),1.22-1.14(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：420.2[M+H]+。顺式异构体：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.07(s,1H),7.76(d,J＝5.6Hz,1H),4.75-4.55(m,1H),4.10-4.00(m,1H),3.90-3.70(m,4H),2.84-2.76(m,1H),2.69-2.63(m,3H),2.60-2.54(m,2H),2.44-2.37(m,2H),2.04-1.96(m,1H),1.86-1.78(m,2H),1.77-1.60(m,7H)。LCMS(ESI)m/z：420.2[M+H]+。
步骤2：(1R,2R)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇和(1S,2S)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇
将(反式)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇(36mg,0.09mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak IG(250mm×30mm,10um)，超临界CO2/EtOH+0.1％NH4OH＝45/55；80mL/min)分离，以得到(1R,2R)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇(14mg，第一峰)和(1S,2S)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇(14mg，第二峰)，两者均为白色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例228(第一峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.07(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),5.07(d,J＝7.2Hz,1H),3.90-3.69(m,5H),2.72-2.63(m,3H),2.60-2.54(m,3H),2.47-2.45(m,1H),2.41-2.37(m,1H),2.01-1.93(m,1H),1.75-1.59(m,7H),1.43-1.33(m,1H),1.22-1.14(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：420.1[M+H]+。实例229(第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.07(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),5.07(d,J＝7.2Hz,1H),3.90-3.70(m,5H),2.72-2.63(m,3H),2.62-2.54(m,3H),2.47-2.45(m,1H),2.42-2.36(m,1H),2.00-1.90(m,1H),1.77-1.60(m,7H),1.42-1.36(m,1H),1.22-1.14(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：420.2[M+H]+。
实例230和231
(1S,2R)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇和(1R,2S)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇
(化合物230和231)
将(顺式)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇(35mg,0.08mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak IG(250mm×30mm,10um)，超临界CO2/EtOH+0.1％NH4OH＝45/55；80mL/min)，以得到(1S,2R)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇(12mg，第一峰)和(1R,2S)-2-(8-(2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)环丁醇(12mg，第二峰)，两者均为白色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。实例230(第一峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.07(s,1H),7.76(d,J＝5.6Hz,1H),4.75-4.55(m,1H),4.10-4.00(m,1H),3.90-3.70(m,4H),2.84-2.76(m,1H),2.69-2.63(m,3H),2.60-2.54(m,2H),2.44-2.37(m,,2H),2.04-1.96(m,1H),1.86-1.78(m,2H),1.77-1.60(m,7H)。LCMS(ESI)m/z：420.2[M+H]+。实例231(第二峰)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),9.07(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.36-8.00(m,1H),7.76(d,J＝5.6Hz,1H),4.75-4.55(m,1H),4.10-4.00(m,1H),3.90-3.72(m,4H),2.88-2.77(m,1H),2.73-2.66(m,3H),2.62-2.55(m,2H),2.45-2.37(m,2H),2.03-1.96(m,1H),1.87-1.78(m,2H),1.77-1.60(m,7H)。LCMS(ESI)m/z：420.2[M+H]+。
实例232
8-氯-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物232)
按照实例142，步骤2至3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氨基吡啶-4-甲酰胺替换为3-氨基-2-氯异烟酰胺(根据本领域中已知的方法制备，例如，如WO2020/239999A1中所述)，获得白色固体状标题化合物(64mg 34％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),8.23(d,J＝5.6Hz,1H),8.16(s,1H),7.77(d,J＝5.6Hz,1H),3.92-3.79(m,4H),3.24(t,J＝7.2Hz,2H),3.05(s,2H),2.70(s,3H),1.88(t,J＝7.2Hz,2H),1.77(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：384.0[M+H]+。
实例233
5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物233)甲酸盐
步骤1：3,5-二氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺
在室温向3,5-二氟异烟酸(175g,1.1mol)在DMF(2.1L)中的溶液中添加HATU(460g,1.21mol)和N,N-二异丙基乙胺(545.4mL,3.3mol)。搅拌5分钟后，向该反应混合物中添加异烟亚胺酰胺盐酸盐(182g,1.16mol)。将所得混合物在室温搅拌5小时。将反应混合物逐滴添加至水(4.2L)中并搅拌30分钟。形成白色沉淀物并将其滤出，将滤饼用水(500mL×2)、石油醚(500mL×2)洗涤并在真空中干燥，以得到白色固体状标题化合物(124g,43％)。LCMS(ESI)m/z：263.1[M+H]+。
步骤2：5-氟-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
向3,5-二氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺(124g,472.9mmol)在DMF(900mL)中的溶液中添加Cs2CO3(185g,567.5mmol)。将混合物在100℃搅拌3小时。冷却至室温后，将反应混合物添加至水(1.8L)中并搅拌30分钟。将混合物用AcOH调节至pH 5，然后搅拌30分钟。形成白色沉淀物并将其滤出，将滤饼用水(400mL×2)、石油醚(400mL×2)洗涤并在真空中干燥，以得到白色固体状标题化合物(91g,80％)。LCMS(ESI)m/z：242.6[M+H]+。
步骤3：5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
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向5-氟-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(91g,375.7mmol)在DMF(600mL)中的溶液中添加甲硫醇钠(60.9g,1.13mol)。将混合物在40℃搅拌3小时。冷却至室温后，将反应混合物添加至水(1.2L)并搅拌30分钟。将混合物用AcOH调节至pH 5，然后搅拌30分钟。形成白色沉淀物并将其滤出，将滤饼用水(350mL×2)、石油醚(350mL×2)洗涤并在真空中干燥，以得到白色固体状标题化合物(90g,94％)。LCMS(ESI)m/z：254.7[M+H]+。
步骤4：8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
将5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(90g,354mmol)、PyBOP(221g,425mmol)和三乙胺(148mL,1.06mol)在DMF(900mL)中的混合物在室温搅拌10分钟，然后添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(85.1g,354mmol)。将反应在室温搅拌16小时。将反应混合物用水(1.8L)淬灭，用EtOAc(2.5L×3)萃取。将合并的有机层用水(2L×3)和盐水(2L)洗涤，经无水Na2SO4干燥，并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至3％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(141g,84％)。LCMS(ESI)m/z：477.2[M+H]+。
步骤5：5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶盐酸盐
按照实例199，步骤8中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将底物替换为8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得灰白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(s,1H),8.76(dd,J＝4.5,1.4Hz,2H),8.40(s,1H),8.34(s,1H),8.30(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),4.08(s,3H),3.78–3.63(m,4H),3.16(t,J＝7.2Hz,2H),2.97(s,2H),1.81(t,J＝7.3Hz,2H),1.77–1.63(m,4H)。UPLCMS(ESI)m/z：377.3[M+H]+。
实例234和235
(S)-4-(4-氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶和(R)-4-(4-氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物234和235)三氟乙酸盐
步骤1：4-氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-叔丁酯
在-78℃向4-羟基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-叔丁酯(400mg,1.02mmol)在DCM(6mL)中的溶液中逐滴添加二乙氨基三氟化硫(0.41mL,3.07mmol)。将混合物在0℃搅拌1小时。将反应用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭，并用DCM(20mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至30％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(160mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：293.1[M+H-100]+。
步骤2：4-氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向基4-氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2,8-二甲酸8-苄基2-叔丁酯(160mg,0.41mmol)在EtOAc(3mL)中的溶液中添加10％钯碳(50mg)。将混合物在氢气气氛下(15psi)在室温搅拌3小时。将混合物过滤并在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(80mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：259.1[M+H]+。
步骤3：4-氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
按照实例202中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为4-氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(30mg,21％)。LCMS(ESI)m/z：465.1[M+H]+。
步骤4：4-氟-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸(S)-叔丁酯和4-氟-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸(R)-叔丁酯
将4-氟-8-[2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(30mg,0.06mmol)通过使用手性SFC(Chiralpak AD(250mm×30mm,10um)，超临界CO2/EtOH+0.1％NH4OH＝55/45；60mL/min)，以得到4-氟-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸(S)-叔丁酯(10mg，第一峰)和4-氟-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸(R)-叔丁酯(11mg，第二峰)，两者均为白色固体。将绝对构型任意分配给每个对映异构体。LCMS(ESI)m/z：465.1[M+H]+。
步骤5：(S)-4-(4-氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐和(R)-4-(4-氟-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐
/>
按照实例157，步骤7中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为4-氟-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸(S)-叔丁酯(来自上述步骤4的第一峰，绝对构型被任意分配)，获得黄色固体状化合物234(11mg,85％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.77(d,J＝5.6Hz,2H),8.56(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(d,J＝5.6Hz,2H),8.29(br s,1H),8.05(d,J＝6.0Hz,1H),4.45-4.42(m,1H),4.27-4.08(m,2H),3.94-3.89(m,2H),3.31-3.15(m,3H),2.82-2.75(m,1H),2.47-2.39(m,1H),2.34-2.14(m,2H),2.08-1.99(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：365.3[M+H]+。
按照实例157，步骤7中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为4-氟-8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸(R)-叔丁酯(来自上述步骤4的第二峰，绝对构型被任意分配)，获得黄色固体状化合物235(9mg,71％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.77(d,J＝5.6Hz,2H),8.56(d,J＝5.6Hz,1H),8.32-8.28(m,3H),8.05(d,J＝6.0Hz,1H),4.45-4.42(m,1H),4.27-4.08(m,2H),3.94-3.89(m,2H),3.34-3.15(m,3H),2.82-2.75(m,1H),2.47-2.39(m,1H),2.34-2.14(m,2H),2.08-1.98(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：365.3[M+H]+。
实例236
2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(吡啶-4-基甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物236)
按照实例227，步骤1至3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-碘吡啶替换为4-碘吡啶，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85(s,1H),9.02(s,1H),8.47(d,J＝5.6Hz,2H),8.04(s,1H),7.64(s,1H),7.32(d,J＝5.6Hz,2H),4.26(s,2H),3.82-3.67(m,4H),2.65(s,3H),2.61-2.52(m,2H),2.37(s,2H),2.23(s,3H),1.74-1.61(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：455.2[M+H]+。
实例237
2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-8-醇(化合物237)
步骤1：8-(8-羟基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(8-氯-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(400mg,0.65mmol)和氢氧化钾(110mg,1.95mmol)在二氧杂环己烷(5mL)中的溶液中添加tBuXPhos Pd G3(52mg,0.07mmol)。将混合物抽空，并用氮气回填三次，然后在氮气气氛下加热至100℃持续16小时。冷却至室温后，将混合物过滤，并将滤液在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝20:1)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(270mg,70％)。LCMS(ESI)m/z：596.3[M+H]+。
步骤2：2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-
d]嘧啶-8-醇
按照实例157，步骤7中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(8-羟基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得白色固体状标题化合物(51mg,31％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.07(s,1H),7.13(d,J＝7.2Hz,1H),6.34(d,J＝7.2Hz,1H),3.71-3.62(m,2H),3.59-3.56(m,2H),3.34(t,J＝6.8Hz,2H),3.20(s,2H),2.64(s,3H),1.82-1.78(m,1H),1.76-1.63(m,4H),1.62-1.57(m,1H)。未观察到3个可交换的质子(吡唑NH、胺NH、OH)。LCMS(ESI)m/z：366.3[M+H]+。
实例238
2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(吡啶-2-基甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物238)
按照实例227，步骤1至3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-碘吡啶替换为2-溴吡啶，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85(s,1H),9.00(s,1H),8.49(d,J＝4.0Hz,1H),8.05(s,1H),7.76-7.71(m,1H),7.59(s,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),7.27-7.21(m,1H),4.39(s,2H),3.81-3.66(m,4H),2.65(s,3H),2.51-2.51(m,2H),2.38(s,2H),2.23(s,3H),1.71-1.62(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：455.2[M+H]+。
实例239
(2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-基)甲醇
(化合物239)甲酸盐
步骤1：8-(5-甲酰基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
在干燥氮气气氛下，向8-[2-(4-吡啶基)-5-乙烯基-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(69mg,0.15mmol)和NMO(34.2mg,0.29mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加四氧化锇(46uL,0.01mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时。在烯烃完全转化为二醇后，添加水(1mL)中的过碘酸钠(46.8mg,0.22mmol)，并将混合物在室温再搅拌16小时。将反应混合物用DCM稀释，用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥并蒸发，以得到粗制棕色固体状8-[5-甲酰基-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(73mg)。UPLCMS(ESI)m/z：475.8[M+H]+。
步骤2：8-(5-(羟基甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
在干燥氮气气氛下，在0℃向8-[5-甲酰基-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(73mg,0.15mmol)在甲醇(2mL)中的溶液中添加硼氢化钠(5.8mg,0.15mmol)。将反应混合物从0℃至室温搅拌6小时。还原完成后，将饱和碳酸氢钠溶液添加至反应混合物中，并将其用乙酸乙酯萃取3次。将有机层合并，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将粗残余物通过硅胶快速色谱法(SiO2,MeOH/DCM)纯化，以得到深橙色胶状8-[5-(羟基甲基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(25mg，0.051mmol，产率34％)。UPLCMS(ESI)m/z：477.8[M+H]+。
步骤3：(2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-
基)甲醇甲酸盐
按照实例199，步骤8中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将底物替换为8-(5-(羟基甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得米色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.20(d,J＝3.7Hz,1H),8.75(d,J＝1.7Hz,1H),8.72(d,J＝5.9Hz,2H),8.54(s,1H),8.48(d,J＝6.1Hz,2H),5.13(s,2H),3.89–3.63(m,4H),3.45–3.38(m,2H),3.22–3.01(m,2H),2.13–1.95(m,2H),1.94–1.73(m,4H)。UPLCMS(ESI)m/z：377.7[M+H]+。
实例240
5-异丙基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物240)甲酸盐
步骤1：3-氟-5-(丙-1-烯-2-基)异烟酸甲酯
将3-溴-5-氟-吡啶-4-甲酸甲酯(100mg,0.43mmol)和异丙烯基三氟硼酸钾(95mg,0.64mmol)溶解在1,4-二氧杂环己烷(4mL)中，并用氮气流脱气10分钟。添加三乙胺(0.18mL,1.3mmol)，同时将溶液再脱气5分钟。然后，将[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(25mg,0.03mmol)添加至反应混合物中，并将其在氮气下加盖并加热至85℃持续6小时。将反应混合物冷却至室温并将其用饱和碳酸氢钠溶液稀释，并将其用EtOAc萃取3次。将有机层合并，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将粗残余物通过硅胶快速色谱法(SiO2，EtOAc/庚烷)纯化，以得到无色油状3-氟-5-异丙烯基-吡啶-4-甲酸甲酯(31mg，0.16mmol，产率37％)。UPLCMS(ESI)m/z：196.5[M+H]+。
步骤2：3-氟-5-异丙基异烟酸甲酯
在干燥氮气气氛下，向3-氟-5-异丙烯基-吡啶-4-甲酸甲酯(31mg,0.16mmol)在甲醇(1mL)中的溶液中添加钯碳(5mg)。将反应混合物用氢气吹扫，并在1atm(气球)氢气下在室温搅拌1小时。完全转化后，将反应混合物用氮气吹扫，并将反应混合物过滤并用甲醇冲洗。将有机层在减压下浓缩，以得到黄色固体状3-氟-5-异丙基-吡啶-4-甲酸甲酯(30mg，0.16mmol，产率97％)。UPLCMS(ESI)m/z：198.5[M+H]+。
步骤3：3-氟-5-异丙基异烟酸锂
向3-氟-5-异丙基-吡啶-4-甲酸甲酯(31mg,0.16mmol)在THF(1mL)中的溶液中添加1M氢氧化锂溶液(310uL,0.31mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时。完全转化后，将反应混合物浓缩至干燥，以得到米色固体状3-氟-5-异丙基异烟酸锂(30mg，0.16mmol，产率102％)。UPLCMS(ESI)m/z：184.4[M+H]+。
步骤4：5-异丙基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶甲酸盐
按照实例225，步骤1至4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将步骤1中的羧酸替换为3-氟-5-异丙基异烟酸锂，获得米色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(s,1H),8.78(d,J＝5.0Hz,2H),8.69(s,1H),8.37(s,1H),8.33(d,J＝5.0Hz,2H),3.89–3.80(m,1H),3.79–3.69(m,2H),3.68–3.54(m,2H),3.14–3.08(m,1H),3.07–3.02(m,1H),3.01(br s,1H),2.77(br s,1H),1.86(t,J＝7.1Hz,1H),1.77–1.56(m,5H),1.30(d,J＝6.7Hz,6H)。UPLCMS(ESI)m/z：389.3[M+H]+。
实例241
2-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物241)
步骤1：2-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
将5-氨基-3-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(200mg,1.43mmol)、3-甲基-1H-吡唑-4-甲醛(157mg,1.43mmol)和氧化铜(11mg,0.14mmol)在DMA(3.1mL)中的溶液在120℃剧烈搅拌。2天后，将反应混合物冷却至室温并用MeOH(50mL)稀释。该溶液经Celite过滤以去除CuO。在减压下浓缩滤液。将该残余物用EtOAc和己烷研制，以得到淡黄色固体状2-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(180mg，0.78mmol，产率55％)。
步骤2：8-(2-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将2-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(60mg,0.25mmol)、N,N-二-异-丙基乙胺(90μL,0.50mmol)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(79mg,0.26mmol)的溶液在60℃搅拌1小时。然后，向该混合物中添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(65mg,0.27mmol)。使反应混合物升温到室温。20小时后，将反应混合物倒入水中，并用EtOAc(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，并经MgSO4干燥，并过滤。在减压下移除溶剂。将残余物通过急速柱色谱法(SiO2，庚烷/EtOAc(包含在EtOAc中的10％MeOH添加剂)0％至100％)纯化，以得到淡黄色固体状8-[2-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(75mg，0.162mmol，产率65％)。LCMS(ESI)m/z：464.4[M+H]+。
步骤3：2-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
按照实例199，步骤8中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将底物替换为8-(2-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得淡黄色固体状标题化合物(37mg，0.10mmol，产率41％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.05(s,1H),8.42(d,J＝5.6Hz,1H),8.37(s,1H),7.72(d,J＝5.7Hz,1H),3.83–3.75(m,4H),3.18(t,J＝7.2Hz,2H),3.00(s,2H),2.51(s,6H),1.84–1.81(m,2H),1.79-1.61(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：364.3，[M+H]+。
实例242
8-(甲氧基甲基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物242)
步骤1：8-(8-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
按照实例203，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇替换为8-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(根据WO201452699中的程序制备)，获得黄色固体状标题化合物(8.1g,90％)。LCMS(ESI)m/z：481.2[M+H]+。
步骤2：8-(8-(甲氧基甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(8-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(300mg,0.62mmol)和三丁基(甲氧基甲基)锡烷(313mg,0.94mmol)在DMF(5mL)中的溶液中添加四(三苯基膦)钯(0)(72mg,0.06mmol)。将反应混合物在氮气气氛下在130℃搅拌16小时。冷却至室温后，将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，用饱和KF水溶液(30mL)和盐水(30mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：在石油醚中的0至75％EtOAc)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(27mg,9％)。LCMS(ESI)m/z：491.3[M+H]+。
步骤3：8-(甲氧基甲基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
按照实例157，步骤7中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(8-(甲氧基甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(15mg,18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(d,J＝6.0Hz,2H),8.54(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,2H),7.81(d,J＝5.6Hz,1H),5.12(s,2H),4.00-3.83(m,4H),3.45(s,3H),2.92-2.84(m,2H),2.70(s,2H),1.75-1.68(m,4H),1.65-1.59(m,2H)。LCMS(ESI)m/z：391.2[M+H]+。
实例243
5-(甲氧基甲基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物243)甲酸盐
步骤1：8-(5-(甲氧基甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
在干燥氮气气氛下，向在0℃的8-[5-(羟基甲基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(48mg,0.10mmol)在THF(1mL)中的溶液中添加氢化钠(4.0mg,0.10mmol)。将反应混合物在0℃搅拌10分钟。然后添加碘甲烷(6.3uL,0.10mmol)，并将反应混合物从0℃至室温搅拌。完全转化后，将饱和碳酸氢钠溶液添加至反应混合物中，并将其用乙酸乙酯萃取3次。将有机层合并，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。粗残余物通过硅胶快速层析(SiO2,MeOH/DCM)纯化，以得到黑色固体状8-[5-(甲氧基甲基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(18mg，0.036mmol，产率36％)。UPLCMS(ESI)m/z：491.9[M+H]+。
步骤2：5-(甲氧基甲基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶甲酸盐
按照实例199，步骤8中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将底物替换为8-(5-(甲氧基甲基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得米色固体状标题化合物(7.9mg，0.017mmol，产率34％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.20(s,1H),8.81–8.76(m,2H),8.65(s,1H),8.35–8.30(m,3H),4.89(s,2H),3.78–3.54(m,4H),3.30(s,3H),3.15–3.00(m,2H),2.98–2.82(m,2H),1.86–1.72(m,2H),1.71–1.59(m,4H)。UPLCMS(ESI)m/z：391.8[M+H]+。UPLCMS(ESI)m/z：391.8[M+H]+。
实例244
5-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)-4-甲基异噻唑(化合物244)甲酸盐
按照实例241，步骤1至3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将步骤1中的醛替换为4-甲基异噻唑-5-甲醛，获得淡黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,CD3OD)9.14(s,1H),8.54–8.50(m,2H),8.36(s,1H),7.86(d,J＝5.7Hz,1H),4.10-3.98(m,2H),3.98-3.84(m,2H),3.45(t,J＝7.4Hz,2H),3.24(s,2H),2.74(s,3H),2.09(t,J＝7.4Hz,2H),1.99-1.79(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：367.2[M+H]+。
实例245
2-甲基-4-(2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-8-基)丁-3-炔-2-醇(化合物245)
步骤1：8-(8-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(8-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(400mg,0.83mmol)在DMF(8mL)中的溶液中添加2-甲基-3-丁炔-2-醇(210mg,2.49mmol)、三乙胺(1.16mL,8.32mmol)、CuI(16mg,0.08mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(58mg,0.08mmol)和三苯基膦(44mg,0.17mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至60℃持续8小时。冷却至室温后，将混合物用EtOAc(100mL)稀释，用水(50mL×3)和盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至3％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(220mg,50％)。LCMS(ESI)m/z：529.3[M+H]+。
步骤2：2-甲基-4-(2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-8-基)丁-3-炔-2-醇
将8-(8-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(220mg,0.42mmol)在六氟异丙醇(4mL)中的5％三氟乙酸中的溶液在室温搅拌0.5小时。将混合物用固体NaHCO3(2g)淬灭，并将混合物搅拌10分钟，用MeOH(10mL)稀释，过滤并将滤液在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(170mg，粗产物)。将粗残余物(70mg)通过反相色谱法(乙腈23％至53％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(2mg,2％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84-8.71(m,2H),8.52(d,J＝5.6Hz,1H),8.42-8.32(m,2H),7.83(d,J＝5.6Hz,1H),5.73(br s,1H),4.02-3.89(m,4H),3.15(t,J＝7.2Hz,2H),2.96(s,2H),1.82(t,J＝7.2Hz,2H),1.80-1.72(m,4H),1.62(s,6H)。未观察到可交换的质子中的一者。LCMS(ESI)m/z：429.2[M+H]+。
实例246
2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物246)
按照实例225，步骤1至4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将步骤1中的酸替换为3-氟-5-(三氟甲基)异烟酸，获得淡黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,1H),8.94(s,1H),8.78(br s,2H),8.30(d,J＝4.9Hz,2H),3.99–3.77(m,3H),3.68–3.50(m,3H),3.35–3.12(m,2H),2.01–1.80(m,1H),1.72–1.42(m,5H)。UPLCMS(ESI)m/z：415.3[M+H]+。
实例247
2-甲基-4-(4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶-8-基)丁-3-炔-2-醇(化合物247)
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为2-甲基-4-(2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-8-基)丁-3-炔-2-醇三氟乙酸盐，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84-8.72(m,2H),8.50(d,J＝5.6Hz,1H),8.42-8.32(m,2H),7.81(d,J＝5.6Hz,1H),5.73(s,1H),4.02-3.92(m,2H),3.91-3.80(m,2H),2.53-2.51(m,2H),2.38(s,2H),2.23(s,3H),1.80-1.66(m,6H),1.62(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：443.2[M+H]+。
实例248
5-异丙氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物248)甲酸盐
按照实例233，步骤3至5中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将甲醇盐替换为异丙醇盐，获得淡黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(s,1H),8.74(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.37(s,1H),8.32(s,1H),8.27(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),4.98–4.88(m,1H),3.81–3.66(m,4H),3.09(t,J＝7.1Hz,2H),2.91(s,2H),1.75(t,J＝7.2Hz,2H),1.70–1.59(m,4H),1.38(d,J＝6.0Hz,6H)。UPLCMS(ESI)m/z：405.3[M+H]+。
实例249
2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-醇(化合物249)甲酸盐
步骤1：2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4,5-二醇
向5-氟-2-(4-吡啶基)-3H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-酮(264mg,1.1mmol)在NMP(4mL)中的溶液中添加a 2M氢氧化钠溶液(2mL,4mmol)。将反应混合物加盖并在110℃搅拌16小时。将反应混合物用空气流浓缩，并将粗残余物直接用在下一步骤。提供棕色固体状5-羟基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(261mg，1.1mmol，产率99％)。UPLCMS(ESI)m/z：241.4[M+H]+。
步骤2：8-(2-(吡啶-4-基)-5-(((2,4,6-三异丙基苯基)磺酰基)氧基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向5-羟基-2-(4-吡啶基)-3H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-酮(262mg,1.1mmol)、4-二甲基氨基吡啶(13mg,0.11mmol)和N,N-二异丙基乙胺(570uL,3.3mmol)在DMA(5.5mL)中的溶液中添加2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(726mg,2.4mmol)，并将反应混合物在室温搅拌60分钟。添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(314mg,1.3mmol)并将混合物在室温搅拌16小时。添加饱和NH4Cl溶液(25mL)和2-甲基四氢呋喃(40mL)。分离各层，并将有机层用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到棕色油状物。将粗油状物通过硅胶快速色谱法(SiO2，(EtOAc/MeOH；3:1)/庚烷)纯化，以得到橙色胶状8-[2-(4-吡啶基)-5-(2,4,6-三异丙基苯基)磺酰氧基-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(94mg，0.132mmol，产率12％)。UPLCMS(ESI)m/z：730.1[M+H]+。
步骤3：8-(5-羟基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
将叔丁醇钾(18mg,0.16mmol)添加至8-[2-(4-吡啶基)-5-(2,4,6-三异丙基苯基)磺酰氧基-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(57mg,0.08mmol)在甲醇(0.52mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌16小时。将所得溶液在减压下浓缩，以得到亮橙色油状8-(5-羟基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(36mg，0.080mmol，产率100％)。UPLCMS(ESI)m/z：463.8[M+H]+。
步骤4：2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-
醇甲酸盐
在21℃将三氟乙酸(0.25mL,3.2mmol)添加至8-[5-羟基-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(36mg,0.08mmol)在DCM(0.4mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液搅拌3小时。将所得溶液在减压下浓缩并共沸3次，以得到黄色油状物。将粗产物通过C18逆相快速色谱法(MeCN在水中的溶液-10mM甲酸铵pH＝3.8)纯化。将纯馏分直接冻干，以得到浅棕色固体状2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-醇甲酸盐(7.8mg，0.020mmol，产率25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.38(s,1H),8.32(s,1H),8.28(dd,J＝4.5,1.6Hz,2H),8.01(s,1H),3.85–3.65(m,4H),3.21–3.14(m,2H),2.98(s,2H),1.82(t,J＝7.3Hz,2H),1.78–1.59(m,4H)。UPLCMS(ESI)m/z：363.3[M+H]+。
实例250
1-(8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)-2-甲基丙-2-醇(化合物250)
步骤1：3,5-二氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺
在室温向3,5-二氟异烟酸(175g,1.1mol)在DMF(2.1L)中的溶液中添加HATU(460g,1.21mol)和N,N-二异丙基乙胺(545.4mL,3.3mol)。搅拌5分钟后，向该反应混合物中添加异烟亚胺酰胺盐酸盐(182g,1.16mol)。将所得混合物在室温搅拌5小时。将反应混合物逐滴添加至水(4.2L)中并搅拌30分钟。形成白色沉淀物并将其滤出，将滤饼用水(500mL×2)、石油醚(500mL×2)洗涤并在真空中干燥，以得到白色固体状标题化合物(124g,43％)。LCMS(ESI)m/z：263.1[M+H]+。
步骤2：5-氟-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
向3,5-二氟-N-(亚氨基(吡啶-4-基)甲基)异烟酰胺(124g,472.9mmol)在DMF(900mL)中的溶液中添加Cs2CO3(185g,567.5mmol)。将混合物在100℃搅拌3小时。冷却至室温后，将反应混合物添加至水(1.8L)并搅拌30分钟。将混合物用AcOH调节至pH 5，然后搅拌30分钟。形成白色沉淀物并将其滤出，将滤饼用水(400mL×2)、石油醚(400mL×2)洗涤并在真空中干燥，以得到白色固体状标题化合物(91g,80％)。LCMS(ESI)m/z：242.6[M+H]+。
步骤3：5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
向5-氟-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(91g,375.7mmol)在DMF(600mL)中的溶液中添加甲硫醇钠(60.9g,1.13mol)。将混合物在40℃搅拌3小时。冷却至室温后，将反应混合物添加至水(1.2L)并搅拌30分钟。将混合物用AcOH调节至pH 5，然后搅拌30分钟。形成白色沉淀物并将其滤出，将滤饼用水(350mL×2)、石油醚(350mL×2)洗涤并在真空中干燥，以得到白色固体状标题化合物(90g,94％)。LCMS(ESI)m/z：254.7[M+H]+。
步骤4：8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(90g,354mmol)、PyBOP(221g,425mmol)和三乙胺(148mL,1.06mol)在DMF(900mL)中的混合物在室温搅拌10分钟，然后添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(85.1g,354mmol)。将反应在室温搅拌16小时。将反应混合物用水(1.8L)淬灭，用EtOAc(2.5L×3)萃取。将合并的有机层用水(2L×3)和盐水(2L)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至3％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(141g,84％)。LCMS(ESI)m/z：477.2[M+H]+。
步骤5：5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐
向8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(80g,167.9mmol)在二氧杂环己烷(300mL)中的溶液中添加4M HCl在二氧杂环己烷(300mL,1.2mol)中的溶液。将混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物(63g，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：376.9[M+H]+。
步骤6：1-(8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)-2-甲基丙-2-醇
向5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(34.6g,83.8mmol)在EtOH(300mL)中的溶液中添加伸异丁氧(20.8mL,251.4mmol)和三乙胺(58.4mL,419mmol)。将混合物在80℃搅拌16小时。冷却至室温后，将混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至10％MeOH)，以得到粗产物(61g)。将粗产物通过反相色谱法(乙腈2％至32％/0.225％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到甲酸盐产物(36g，甲酸盐)。将甲酸盐产物溶解在MeOH(100mL)中，并将混合物用NH3·H2O调节至pH 9，然后通过反相色谱法(乙腈30％至70％/0.05％NH3·H2O+10mMNH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到标题化合物(29g,42％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),8.76-8.72(m,2H),8.31(s,1H),8.29-8.26(m,2H),4.06(s,3H),4.03(s,1H),3.72-3.57(m,4H),2.67(t,J＝6.9Hz,2H),2.53(s,2H),2.31(s,2H),1.70-1.59(m,6H),1.08(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：449.0[M+H]+。
实例251
4-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡啶1-氧化物
(化合物251)
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步骤1：8-(2-(三丁基锡烷基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷
-2-甲酸叔丁酯
向1,1,1,2,2,2-六丁基二锡烷(4.64g,8.0mmol)、8-(2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(0.8g,1.98mmol)在二氧杂环己烷(5mL)中的溶液中添加Pd(t-Bu3P)2(101mg,0.20mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至100℃持续16小时。冷却至室温后，将反应在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至30％EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(400mg,30％)。LCMS(ESI)m/z：660.2[M+H]+。
步骤2：4-(4-(2-(叔丁氧基羰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡啶1-氧化物
向4-溴吡啶1-氧化物(270mg,1.55mmol)和8-(2-(三丁基锡烷基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(450mg,0.68mmol)在二氧杂环己烷(10mL)中的溶液中添加Pd(t-Bu3P)2(35mg,0.07mmol)。将混合物在氮气气氛下加热至70℃持续16小时。冷却至室温后，将反应在真空中浓缩。将粗残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝10:1)纯化，以得到黄色油状标题化合物(140mg,44％)。LCMS(ESI)m/z：463.3[M+H]+。
步骤3：4-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡啶1-氧化物
按照实例157，步骤7中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为4-(4-(2-(叔丁氧基羰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡啶1-氧化物，获得黄色固体状标题化合物(46mg,45％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.58(d,J＝5.6Hz,1H),8.38(s,1H),8.36-8.32(m,4H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),4.02-4.89(m,4H),3.10(t,J＝7.2Hz,2H),3.01(s,2H),1.85(t,J＝7.2Hz,2H),1.80-1.70(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：363.3[M+H]+。
实例252
5-甲氧基-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶甲酸盐(化合物252)
向5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(48.5mg,0.13mmol)和多聚甲醛(0.01mL,0.19mmol)在DCM(6.4mL)中的溶液中添加乙酸(7uL,0.13mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(82mg,0.39mmol)。将反应混合物在室温搅拌48小时。将反应混合物用MeOH溶解并在减压下浓缩。将粗产物通过逆相柱色谱法在C18上(MeCN/甲酸铵pH3.8缓冲剂)纯化，以得到米色固体状5-甲氧基-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(20mg，0.053mmol，产率41％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79(s,1H),8.71(dd,J＝4.6,1.5Hz,2H),8.32(s,1H),8.29(dd,J＝4.6,1.5Hz,2H),8.26(s,1H),4.03(s,3H),3.76–3.67(m,2H),3.67–3.57(m,2H),3.23–3.12(m,2H),3.07–2.95(m,2H),2.68(s,3H),1.94–1.87(m,2H),1.79–1.66(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：391.8[M+H]+。
实例253
1-((8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷
-2-基)甲基)环丁-1-醇(化合物253)甲酸盐
将5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶五盐酸盐(75mg,0.130mmol)、1-氧杂螺[2.3]己烷(16.9mg,0.200mmol)、N,N-二-异-丙基乙胺(0.14mL,0.8100mmol)在甲醇(1.50mL)中的溶液在65℃搅拌。20小时后，在减压下浓缩反应混合物。将残余物通过逆相柱色谱法在C18上(MeCN/甲酸铵pH 3.8缓冲剂)纯化，以得到白色粉末状1-[[8-[5-甲氧基-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基]甲基]环丁醇甲酸盐(6.2mg，0.0135mmol，产率10％)。1H NMR(500MHz,CD3OD)8.86(s,1H),8.72(d,J＝5.0Hz,2H),8.54(s,1H),8.45(dd,J＝5.0,1H),8.28(s,1H),4.16(s,3H),3.97-3.84(m,2H),3.78-3.74(m,2H),3.51(s,2H),3.36(s,2H),3.35-3.34(m,2H),2.31-2.16(m,4H),2.11(t,J＝7.0Hz,2H),1.99-1.83(m,5H),1.77-1.59(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：461.2，[M+H]+。
实例254
5-(氟甲氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物254)
按照实例233，步骤3至5中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将甲醇盐替换为烯丙醇盐，获得淡黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(s,1H),8.77(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.35(s,1H),8.33(s,1H),8.30(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),6.17(ddt,J＝16.0,10.8,5.5Hz,1H),5.50(dd,J＝17.2,1.5Hz,1H),5.38(d,J＝10.5Hz,1H),4.90(d,J＝5.5Hz,2H),3.81-3.65(m,4H),3.07(t,J＝7.1Hz,2H),2.87(s,2H),1.74(t,J＝7.3Hz,2H),1.69–1.59(m,4H)。UPLCMS(ESI)m/z：403.3[M+H]+。
实例255
5-甲氧基-4-(2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物255)
按照实例252中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将多聚甲醛替换为氧杂环丁烷-3-甲醛，获得淡黄色固体状标题化合物(8.6mg，0.019mmol，产率14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)8.80(s,1H),8.74(d,J＝5.1Hz,2H),8.31(s,1H),8.27(d,J＝5.9Hz,2H),4.61(dd,J＝7.7,5.9Hz,2H),4.24(t,J＝6.1Hz,2H),4.05(s,3H),3.76-3.66(m,3H),3.61-3.60(m,3H),3.09(dt,J＝14.0,6.9Hz,1H),2.66(d,J＝7.4Hz,2H),2.36(s,2H),1.75-1.49(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：447.3，[M+H]+。
实例256
4-(2-(丁-3-炔-1-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物256)
向4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(100mg,0.26mmol)在EtOH(2mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.27mL,1.57mmol)和4-溴丁-1-炔(0.2mL,2.09mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。将所得混合物直接通过反相色谱法纯化，不经任何进一步后处理(乙腈30％至60％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)，以得到白色固体状标题化合物(2.3mg,2％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.81-8.73(m,2H),8.59(d,J＝5.6Hz,1H),8.36-8.28(m,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.03-3.85(m,4H),2.79(t,J＝2.8Hz,1H),2.62-2.57(m,2H),2.53-2.51(m,2H),2.48(s,2H),2.36-2.29(m,2H),1.81-1.67(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：399.2[M+H]+。
实例257
2-(5-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物257)甲酸盐
按照实例241，步骤1至3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将醛替换为3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲醛，获得淡黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)12.32(s,1H),9.02(s,1H),8.41(d,J＝5.6Hz,1H),8.20(s,1H),7.73(d,J＝5.3Hz,1H),3.89(s,3H),3.88–3.71(m,4H),3.20(br s,2H),2.89(t,J＝7.1Hz,1H),2.70(br s,1H),1.74–1.58(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：366.3，[M+H]+。
实例258
N,N-二甲基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-胺(化合物258)
按照实例233，步骤3至5中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将甲醇盐替换为N,N-二甲胺，获得淡黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝5.0Hz,2H),8.60(s,1H),8.36(br s,1H),8.28(d,J＝5.0Hz,2H),8.12(s,1H),3.82–3.32(m,4H),3.24(t,J＝7.1Hz,2H),3.04(s,2H),2.86(s,6H),1.92–1.85(m,2H),1.84–1.29(m,4H)。UPLCMS(ESI)m/z：390.81[M+H]+。
实例259
4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-醇(化合物259)三甲酸盐
按照实例252中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将底物替换为2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-醇，获得淡黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.40(s,3H),8.24(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.16(s,1H),7.90(s,1H),3.76–3.70(m,6H),2.34(s,2H),2.20(s,3H),1.71–1.56(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：377.3[M+H]+。
实例260
5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物260)
步骤1：8-(5-氟-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将5-氟-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(300mg,0.1.24mmol)、DIPEA(0.65mL,3.71mmol)、2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(580mg,1.86mmol)和4-二甲基氨基吡啶(30.6mg,0.25mmol)在DMA(6.2mL)中的溶液在室温搅拌30分钟。向混合物中添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(376mg,1.49mmol)，并将反应混合物在室温搅拌24小时。经由LCMS监测反应后，此时反应已经完成。将混合物转移至分液漏斗，并用DCM(50mL)和水(50mL)稀释。分离各层，并将水层用另外的DCM(3×30mL)萃取。合并的有机提取物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至10％MeOH)，以得到白色固体状标题化合物(530mg，产率92％)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.09(s1H),8.71(dd,J＝4.4,1.7Hz,2H),8.50–8.43(m,3H),4.00–3.75(m,4H),3.51–3.42(m,2H),3.35(s,2H),1.92(t,J＝7.2Hz,2H),1.85–1.75(m,4H),1.47(s,9H)。LCMS(ESI)m/z：465.1[M+H]+。
步骤2：8-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下，在0℃向氢化钠(60％，分散在矿物油中，19.4mg，0.484mmol)在THF(0.16mL)中的悬浮液中添加氧杂环丁烷-3-醇(40.8μL,0.484mmol)，并将混合物在0℃搅拌30分钟。添加8-(5-氟-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(75.0mg,0.161mmol)在NMP(0.8mL)中的溶液，并将反应在室温进一步搅拌2小时。将混合物转移至分液漏斗，并用DCM(5mL)和水(5mL)稀释。分离各层，并将水层用DCM(3×3mL)进一步萃取。合并的有机提取物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到棕色固体状标题化合物(80mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：519.1[M+H]+。
步骤3：5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-
基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
将8-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(80mg，粗产物)溶解在2mL DCM和0.3mL TFA中。将混合物在室温搅拌3小时。然后将反应混合物在真空中浓缩，然后从DCM(5mL)进一步浓缩2倍，以去除残余TFA。然后将粗残余物通过HPLC纯化，以得到白色固体状标题化合物(17.3mg，产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(s,1H),8.80–8.74(m,2H),8.35–8.27(m,2H),7.89(s,1H),5.57(p,J＝6.0Hz,1H),5.04(dd,J＝6.8,6.0Hz,2H),4.78–4.70(m,2H),3.90–3.70(m,4H),2.84(t,J＝7.1Hz,2H),2.65(s,2H),1.79(t,J＝7.1Hz,1H),1.69–1.55(m,5H)。LCMS(ESI)m/z：419.1[M+H]+。
实例261
4-(2-(丙-2-炔-1-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶(化合物261)
按照实例256中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-溴丁-1-炔替换为3-溴丙-1-炔，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(s,1H),8.79-8.73(m,2H),8.57(d,J＝5.6Hz,1H),8.35-8.28(m,2H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),4.03-3.82(m,4H),3.37-3.36(m,2H),3.14(t,J＝2.4Hz,1H),2.64(t,J＝6.8Hz,2H),2.52(s,2H),1.83-1.66(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：385.2[M+H]+。
实例262
8-氯-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶(化合物262)
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为8-氯-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶，获得白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.91(s,1H),8.20(d,J＝5.6Hz,1H),8.12–8.03(m,1H),7.79–7.72(m,2H),3.90–3.81(m,2H),3.81–3.72(m,2H),2.76–2.61(m,3H),2.49–2.47(m,1H),2.38(s,2H),2.23(s,3H),1.79–1.64(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：398.2[M+H]+。
实例263
5-(2-甲氧基乙氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-
d]嘧啶(化合物263)
步骤1：2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4,5-二醇
在密封管中，将5-甲氧基-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(2g,7.87mmol)与吡啶盐酸盐(7g,60.57mmol)在微波下加热至170℃持续1小时。冷却至室温后，将混合物溶解在水(20mL)中，并在室温用2M NaOH碱化至pH 7，然后用AcOH酸化至pH 4。将所得棕色沉淀物过滤并用水(10mL×2)洗涤，以得到棕色固体状标题化合物(1.2g,64％)。LCMS(ESI)m/z：241.2[M+H]+。
步骤2：8-(2-(吡啶-4-基)-5-(((2,4,6-三异丙基苯基)磺酰基)氧基)吡啶并[3,4-d]
嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4,5-二醇(1.2g,5mmol)在DMAc(25mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(3.5mL,20mmol)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(4.5g,15mmol)。将反应混合物在室温搅拌3小时，然后向该反应混合物中添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(1.2g,5mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时。将混合物用EtOAc(250mL)稀释，用水(150mL×3)和盐水(150mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至5％MeOH)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(270mg,10％)。LCMS(ESI)m/z：729.1[M+H]+。
步骤3：8-(5-羟基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(2-(吡啶-4-基)-5-(((2,4,6-三异丙基苯基)磺酰基)氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(270mg,0.37mmol)在二氧杂环己烷(2mL)中的溶液中添加2M NaOH在H2O中的溶液(0.74mL,1.48mmol)。将反应混合物在60℃搅拌2小时。冷却至室温后，将混合物用水(5mL)稀释，然后通过HCl(0.1M)中和至pH＝6，用EtOAc(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(150mg,66％)。LCMS(ESI)m/z：463.3[M+H]+。
步骤4：8-(5-(2-甲氧基乙氧基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(5-羟基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(85mg,0.14mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加碳酸钾(40mg,0.29mmol)和2-溴乙基甲基醚(0.03mL,0.29mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。将混合物用水(3mL)稀释并用EtOAc(5mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝10:1)纯化，以得到黄色油状标题化合物(28mg,39％)。LCMS(ESI)m/z：521.3[M+H]+。
步骤5：5-(2-甲氧基乙氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例157，步骤7中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将8-(6-苄基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-(5-(2-甲氧基乙氧基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(12mg,42％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84-8.81(m,1H),8.79-8.74(m,2H),8.35-8.33(m,1H),8.31-8.29(m,2H),4.45-4.39(m,2H),3.80-3.78(m,2H),3.77-3.67(m,4H),3.35(s,3H),3.08(t,J＝7.2Hz,2H),2.87(s,2H),1.75(t,J＝7.6Hz,2H),1.70-1.63(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：421.0[M+H]+。
实例264
5-甲氧基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物264)
步骤1：3-氨基-5-甲氧基异烟酰胺
将3-氨基-5-甲氧基-吡啶-4-甲酸(2g,11.9mmol)(根据Chem.Pharm.Bull.,1982,30,1257中的程序制备)、二碳酸二-叔丁酯(3.2mL,13.9mmol)、吡啶(1.9mL,23.8mmol)和NH4CO3(1.2g,12.5mmol)在二氧杂环己烷(100mL)中的溶液在室温搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至100％EtOAc)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(630mg,32％)。LCMS(ESI)m/z：168.1[M+H]+。
步骤2：5-甲氧基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
按照实例142，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3-氨基异烟酰胺替换为3-氨基-5-甲氧基异烟酰胺，获得黄色固体状标题化合物(2.1g,45％)。LCMS(ESI)m/z：388.2[M+H]+。
步骤3：2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯
向2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(1g,4.16mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加甲醛(0.37mL，4.99mmol，37％在水中的溶液)和乙酸(24uL,0.42mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(2.65g,12.48mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩。将粗残余物溶解于EtOAc(120mL)中，用饱和NaHCO3水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(1g，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：255.1[M+H]+。
步骤4：2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷盐酸盐
向2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(1g,3.93mmol)在EtOAc(6mL)中的溶液中添加4M HCl在EtOAc中的溶液(6mL,22mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物(750mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：155.2[M+H]+。
步骤5：5-甲氧基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例209，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇和2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为5-甲氧基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇和2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷，获得黄色固体状标题化合物(56mg,40％)。LCMS(ESI)m/z：524.3[M+H]+。
步骤6：5-甲氧基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
向5-甲氧基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(56mg,0.11mmol)在DCM(1mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.5mL,6.5mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈40％至70％/0.05％NH3·H2O+10mMNH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(5mg,13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),8.65(s,1H),8.17(s,1H),8.04(s,1H)4.03(s,3H),3.64-3.49(m,4H),2.67(s,3H),2.58-2.51(m,2H),2.36(s,2H),2.22(s,3H),1.72-1.59(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：394.3[M+H]+。
实例265
1-(8-(5-甲氧基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)-2-甲基丙-2-醇化合物265
1-(8-(5-甲氧基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)-2-甲基丙-2-醇
步骤1：2-(2-羟基-2-甲基丙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯
按照实例250，步骤6中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，获得黄色油状标题化合物(350mg，粗产物)。LCMS(ESI)m/z：313.3[M+H]+。
步骤2：1-(8-(5-甲氧基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)-2-甲基丙-2-醇
按照实例264，步骤4至6中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯替换为2-(2-羟基-2-甲基丙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，获得黄色固体状标题化合物(21mg,9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.82(s,1H),8.64(s,1H),8.17(s,1H),8.03(s,1H),4.03(s,3H),3.50-3.62(m,4H),2.66(s,3H),2.56-2.51(m,4H),2.34(s,2H),1.60-1.69(m,6H),1.09(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：452.3[M+H]+。
实例266
8-氯-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物266)
步骤1：2-氯-3-(异烟酰氨基)异烟酰胺
向3-氨基-2-氯-吡啶-4-甲酰胺(7.0g,40.8mmol)和异烟酰氯盐酸盐(8.7g,49.0mmol)在THF(100mL)中的溶液中添加K2CO3(14.5g,81.6mmol)。将反应混合物在氮气气氛下加热至40℃持续4小时。冷却至室温后，在减压下去除溶剂并添加水(50mL)。将所得固体过滤，用水(30mL×2)洗涤并收集，用与甲苯的共沸物干燥，以得到白色固体状标题化合物(9g,80％)，其不需进一步纯化即直接使用。
步骤2：8-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
向2-氯-3-(异烟酰氨基)异烟酰胺(9g,32.5mmol)在MeOH(300mL)中的溶液中添加Cs2CO3(32g,98.0mmol)在水(50mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌16小时。将MeOH在真空中去除，并将残余物用水(100mL)稀释。添加乙酸(20mL)，并将混合物在室温搅拌20分钟，将所得白色沉淀物过滤并用水(30mL×2)洗涤。将固体在真空中干燥，以得到白色固体状标题化合物(6g,71％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.30(s,1H),8.82(d,J＝6.0Hz,2H),8.44(d,J＝5.2Hz,1H),8.11(d,J＝6.0Hz,2H),7.98(d,J＝5.6Hz,1H)。LCMS(ESI)m/z：259.2[M+H]+。
步骤3：8-氯-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
向20mL小瓶中添加8-氯-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(200mg，0.773mmol，200mg，1当量)和PyBOP(622.23mg，1.1598mmol，1.5当量)，安装隔膜盖并用N2吹扫。依次添加DMF(3.9mL,0.2M)和DIPEA(0.34mL，1.93mmol，2.5当量)。将其在室温搅拌10分钟。添加2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷二盐酸盐(222mg，0.928mmol，1.2当量)；将反应在室温搅拌16小时。将反应通过LCMS监测并已不再转化，因此添加额外的DIPEA(0.34mL，1.93mmol，2.5当量)，并将反应在室温搅拌额外的5小时。然后将反应用水淬灭，并用EtOAc萃取(4次)。合并的有机提取物经Na2SO4干燥，经硅胶塞过滤并用EtOAc冲洗，并在真空中浓缩。将粗残余物溶解在MeOH中；穿过10g SCX-2料筒；弃去初始MeOH馏分。然后，转换至新烧瓶，并用5％NH3/MeOH溶液冲洗，并在真空中浓缩，以得到粗残余物。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈5％至50％/0.1％甲酸在水中的溶液)纯化，以得到8-氯-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(24.03mg，0.06085mmol，24.03mg，产率7.870％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.82–8.76(m,2H),8.39–8.32(m,3H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),4.05–3.96(m,2H),3.94–3.84(m,2H),2.69–2.58(m,4H),2.32(s,3H),1.82–1.67(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：395.1[M+H]+。
实例267
5-(氟甲氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
(化合物267)
步骤1：8-(5-(氟甲氧基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向8-(5-羟基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(65mg,0.14mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加溴(氟)甲烷(0.04mL,0.58mmol)和碳酸钾(40mg,0.29mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。将混合物用水(3mL)稀释并用EtOAc(5mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝10:1)纯化，以得到黄色油状标题化合物(10mg,14％)。LCMS(ESI)m/z：517.3[M+Na]+。
步骤2：5-(氟甲氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
按照实例263，步骤4至5中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将1-溴-2-甲氧基乙烷替换为溴氟甲烷，获得黄色固体状标题化合物(3mg,37％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.99(s,1H),8.82-8.73(m,2H),8.45(s,1H),8.34-8.28(m,2H),6.10(d,J＝52.8Hz,2H),3.83-3.63(m,4H),2.88-2.82(m,1H),2.68-2.65(m,1H),2.58-2.51(m,2H),1.84-1.79(m,1H),1.72-1.63(m,4H),1.62-1.55(m,1H)。LCMS(ESI)m/z：395.2[M+H]+。
实例268
2-甲基-1-(8-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)丙-2-醇(化合物268)
在氮气气氛下，向5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(43.0mg,0.103mmol)在MeOH(0.70mL)中的溶液中添加伸异丁氧(27μL,0.308mmol)和DIPEA(90μL,0.514mmol)。在微波装置中，将混合物在80℃搅拌2小时。冷却至室温后，将混合物在真空中浓缩。然后将粗残余物通过HPLC纯化，以得到白色固体状标题化合物(26.0mg，产率52％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(s,1H),8.79–8.74(m,2H),8.33–8.27(m,2H),7.88(s,1H),5.57(p,J＝5.3Hz,1H),5.09–5.00(m,2H),4.73(dd,J＝7.6,4.9Hz,2H),4.01(br s,1H),3.86–3.69(m,4H),2.67(t,J＝7.0Hz,2H),2.54(s,2H),2.32(s,2H),1.70–1.59(m,6H),1.08(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：491.2[M+H]+。
实例269
4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-2-(吡啶-4-
基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物269)
步骤1：5-氟-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
按照实例260，步骤1中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将胺替换为2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷二盐酸盐，获得白色固体状标题化合物(500mg，产率64％)。1HNMR(400MHz,MeOD)δ9.06(s,1H),8.73–8.70(m,2H),8.47–8.41(m,3H),3.93–3.84(m,2H),3.83–3.75(m,2H),2.73(t,J＝6.9Hz,2H),2.60(s,2H),2.41(s,3H),1.89–1.77(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：379.0[M+H]+。
步骤2：4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-2-
(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例260，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将芳基氟化物替换为5-氟-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶，获得白色固体状标题化合物(18.0mg，产率63％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(s,1H),8.79–8.74(m,2H),8.32–8.27(m,2H),7.89(s,1H),5.62–5.52(m,1H),5.07–5.00(m,2H),4.73(dd,J＝7.6,4.9Hz,2H),3.84–3.67(m,4H),2.49–2.38(m,2H),2.37(s,2H),2.22(s,3H),1.74–1.58(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：433.1[M+H]+。
实例270
4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-(氧杂环丁烷-3-基甲氧基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物270)
按照实例260，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将醇替换为氧杂环丁烷-3-基甲醇，获得白色固体状标题化合物(19.0mg，产率64％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(s,1H),8.79–8.73(m,2H),8.37(s,1H),8.32–8.26(m,2H),4.77(dd,J＝7.9,6.0Hz,2H),4.53(d,J＝6.5Hz,2H),4.47(表觀t,J＝6.1Hz,2H),3.78–3.61(m,4H),3.54(ddt,J＝7.9,6.5,6.1Hz,1H),2.47(t,J＝6.9Hz,2H),2.35(s,2H),2.22(s,3H),1.67–1.52(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：447.2[M+H]+。
实例271
2-甲基-1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-
基)丁-3-炔-2-醇(化合物271)
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步骤1：2-甲基-1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)-4-(三甲基甲硅烷基)丁-3-炔-2-醇
向三甲基((2-甲基环氧乙烷-2-基)乙炔基)硅烷(134mg，0.87mmol，根据Angew.Chem.Int.Ed.,2013,52,13033制备)、N,N-二异丙基乙胺(0.31mL,1.73mmol)在EtOH(5mL)中的溶液中添加2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(200mg,0.58mmol)。将混合物加热至80℃持续3小时。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(20mL)淬灭，用EtOAc(50mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：在石油醚中的0至50％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(22mg,8％)。LCMS(ESI)m/z：501.2[M+H]+。
步骤2：2-甲基-1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-基)丁-3-炔-2-醇
向2-甲基-1-(8-(2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)-4-(三甲基甲硅烷基)丁-3-炔-2-醇(22mg,0.04mmol)在THF(2mL)中的溶液中添加TFA(0.18mL,0.18mmol)。将混合物在0℃搅拌1小时。将反应混合物用水(50mL)淬灭，用EtOAc(50mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过制备型TLC(EtOAc/石油醚＝1:1)纯化，以得到白色固体状标题化合物(13mg,67％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.80-8.74(m,2H),8.58(d,J＝6.0Hz,1H),8.35-8.30(m,2H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),5.18(s,1H),4.00-3.86(m,4H),3.21(s,1H),2.82-2.72(m,2H),2.66-2.61(m,2H),2.60-2.53(m,2H),1.83-1.72(m,4H),1.70-1.63(m,2H),1.36(s,3H)。LCMS(ESI)m/z：429.1[M+H]+。
实例272
8-氯-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐(化合物272)
步骤1：8-(8-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
向20mL小瓶中添加8-氯-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(200mg，0.773mmol，1当量)、PYBOP(622mg，1.16mmol，1.5当量)，安装隔膜盖并用N2吹扫。依次添加DMF(3.87mL,0.2M)和DIPEA(0.34mL，1.93mmol，2.5当量)。将其在室温搅拌10分钟。添加2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(293mg，1.16mmol，1.5当量)；将反应在室温搅拌16小时。在此期间，反应由混浊变得透明，且通过LCMS监测，已反应完成。将反应用水淬灭；用EtOAc萃取(4次)。合并的有机提取物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈40％至80％/0.1％NH4OH在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状8-(8-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(192mg，0.399mmol，产率52％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.82–8.77(m,2H),8.39–8.32(m,3H),7.90(d,J＝5.7Hz,1H),3.98(d,J＝6.1Hz,2H),3.39–3.33(m,2H),3.22(d,J＝3.8Hz,2H),1.87–1.82(m,2H),1.84–1.67(m,6H),1.41(s,9H)。LCMS(ESI)m/z：481.2[M+H]+。
步骤2：8-氯-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐
向1打兰小瓶中添加8-(8-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(192mg，0.399mmol，1当量)，然后添加DCM(1mL)和TFA(1mL)。在室温搅拌1小时。在真空中浓缩；从DCM再次浓缩。无需进一步纯化，并将残余物冻干，以得到8-氯-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.87–8.84(m,2H),8.46–8.42(m,2H),8.40(d,J＝5.6Hz,1H),7.91(d,J＝5.7Hz,1H),4.08–3.94(m,4H),3.36–3.26(m,2H),3.12(t,J＝5.8Hz,2H),1.94(t,J＝7.5Hz,2H),1.87–1.73(m,4H)。未观察到可交换的NH质子。LCMS(ESI)m/z：381.1[M+H]+。
实例273
5-甲氧基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物273)
步骤1：5-甲氧基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐
按照实例142，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇替换为5-甲氧基-2-(3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇，获得黄色油状标题化合物(35mg，粗产物)。LCMS(ESI)m/z：380.2[M+H]+。
步骤2：5-甲氧基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2,8-
二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
向NaBH(OAc)3(59mg,0.28mmol)、5-甲氧基-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(35mg,0.09mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中添加氧杂环丁烷-3-甲醛(16mg,0.18mmol)。将反应在室温搅拌16小时。将混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈25％至55％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(2mg,5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.83(s,1H),8.64(s,1H),8.16(s,1H),8.07(s,1H),4.67-4.59(m,2H),4.30-4.22(m,2H),4.02(s,3H),3.81-3.50(m,4H),3.23-3.01(m,1H),2.70-2.66(m,4H),2.63(s,2H),2.37(s,3H),1.68-1.57(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：450.1[M+H]+。
实例274
5-(二氟甲氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物274)
5-(二氟甲氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
步骤1：8-(5-(二氟甲氧基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
将8-(5-羟基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(200mg,0.43mmol)、Cs2CO3(400mg,1.23mmol)和2-氯-2,2-二氟乙酸钠(200mg,1.31mmol)在DMF(5mL)和水(0.5mL)中的溶液在80℃搅拌6小时。冷却至室温后，将反应混合物用EtOAc(40mL)稀释，用水(30mL×2)洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：在石油醚中的0至50％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(40mg,18％)。LCMS(ESI)m/z：513.1[M+H]+。
步骤2：5-(二氟甲氧基)-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶
将8-(5-(二氟甲氧基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(40mg,0.08mmol)在DCM(2mL)和三氟乙酸(1mL)中的溶液在室温搅拌16小时。将混合物在真空中浓缩。将粗残余物通过反相色谱法(乙腈30％至60％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(7mg,21％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.14(s,1H),8.79-8.77(m,2H),8.45(s,1H),8.34-8.31(m,2H),7.36(t,J＝72.8Hz,1H),3.84-3.61(m,4H),3.20(s,1H),3.00-2.93(m,1H),2.77(s,1H),2.62-2.56(m,1H),1.84-1.78(m,1H),1.70-1.65(m,5H)。LCMS(ESI)m/z：413.0[M+H]+。
实例275
8-氯-5-甲氧基-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶(化合物275)
步骤1：2-氯-3-氟-5-甲氧基异烟酸
/>
在-78℃向2-氯-3-氟-5-甲氧基-吡啶(0.9g,5.57mmol)(根据WO202047447中的程序制备)在THF(20mL)中添加正丁基锂(3.34mL,8.36mmol)。在同一温度搅拌0.5小时，在–78℃添加THF(20mL)中的固体二氧化碳(2.45g,55.71mmol)。将反应混合物在氮气环境下在室温搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(50mL)淬灭，并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在石油醚中的0至30％EtOAc)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(450mg,29％)。LCMS(ESI)m/z：205.7[M+H]+。
步骤2：8-氯-5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
按照实例250，步骤1至2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3,5-二氟异烟酸替换为2-氯-3-氟-5-甲氧基异烟酸，获得白色固体状标题化合物(55mg,70％)。LCMS(ESI)m/z：288.6[M+H]+。
步骤3：8-氯-5-甲氧基-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例209，步骤3中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-(吡啶-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇和2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-氯-5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇和2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷，获得黄色固体状标题化合物(12mg,15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80-8.76(m,2H),8.33-8.29(m,2H),8.10(s,1H),4.06(s,3H),3.80-3.60(m,4H),2.51-2.47(m,2H),2.36(s,2H),2.22(s,3H),1.65(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：425.2[M+H]+。
实例276
5-甲氧基-4-(3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物276)
步骤1：8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯
按照实例250，步骤4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯盐酸盐，获得黄色固体状标题化合物。LCMS(ESI)m/z：555.0[M+H]+。
步骤2：5-甲氧基-4-(3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-
基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
将8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-(甲氧基甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸苄酯(70mg,0.13mmol)在三氟乙酸(3mL,39mmol)中的溶液加热至60℃持续16小时。冷却至室温后，将混合物在真空中浓缩。将残余物用NH3·H2O调节至pH 9，并将混合物通过反相色谱法(乙腈25％至55％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到白色固体状标题化合物(2mg,4％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(s,1H),8.77-8.74(m,2H),8.33(s,1H),8.31-8.27(m,2H),4.07(s,3H),3.78-3.60(m,4H),3.29-3.26(m,2H),3.25(s,3H),3.23-3.19(m,1H),2.71(s,2H),1.84-1.76(m,1H),1.76-1.51(m,5H)。LCMS(ESI)m/z：421.0[M+H]+。
实例277
3-((4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-
基)氧基)环丁烷-1-甲腈(化合物277)
按照实例260，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将醇替换为3-羟基环丁烷-1-甲腈，获得呈非对映异构体的混合物的标题化合物(15.7mg，52％，产率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6，主要异构体)δ8.83(d,J＝1.4Hz,1H),8.78–8.73(m,2H),8.31–8.27(m,2H),8.08(s,1H),4.98(p,J＝6.9Hz,1H),3.80–3.65(m,4H),3.15(p,J＝8.7Hz,1H),3.10–3.02(m,1H),2.99–2.90(m,1H),2.73–2.64(m,1H),2.60–2.53(m,2H),2.52–2.48(m,1H),2.38(s,2H),2.22(s,3H),1.73–1.58(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：456.1[M+H]+。
实例278
1-(3-((4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
-5-基)氧基)氮杂环丁烷-1-基)乙-1-酮(化合物278)
按照实例260，步骤2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将醇替换为1-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)乙-1-酮，获得白色固体状标题化合物(16.2mg，产率52％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.86(s,1H),8.77–8.74(m,2H),8.31–8.27(m,2H),8.02(s,1H),5.31(tt,J＝6.8,3.7Hz,1H),4.67(dd,J＝9.8,6.5Hz,1H),4.39(dd,J＝10.9,6.3Hz,1H),4.27(dd,J＝9.9,3.8Hz,1H),3.99(dd,J＝10.7,3.5Hz,1H),3.82–3.65(m,4H),2.47(t,J＝6.9Hz,2H),2.36(s,2H),2.22(s,3H),1.82(s,3H),1.70–1.57(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：474.2[M+H]+。
实例279
8-(5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-1-
酮(化合物279)
按照实例250，步骤4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-1-酮(根据WO201418764中的程序制备)，获得白色固体状标题化合物(12mg,8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,2H),8.35(s,1H),8.31(d,J＝5.6Hz,2H),7.66(s,1H),4.27-4.14(m,2H),4.07(s,3H),3.42-3.34(m,2H),3.22(t,J＝6.8Hz,2H),2.07(t,J＝6.8Hz,2H),1.88-1.77(m,2H),1.58-1.49(m,2H),LCMS(ESI)m/z：391.1[M+H]+。
实例280
4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物280)
步骤1：2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯
向2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(500mg,2.08mmol)在乙腈(6mL)中的溶液中添加1,1-二氟-2-碘-乙烷(480mg,2.5mmol)和碳酸钾(575mg,4.2mmol)。将混合物加热至70℃持续16小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(40mL)淬灭，用EtOAc(50mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(530mg,84％)，其无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.02(tt,J＝56.0,4.0Hz,1H),3.47-3.26(m,4H),2.87-2.77(m,2H),2.71(t,J＝6.8Hz,2H),2.51(s,2H),1.65(t,J＝6.8Hz,2H),1.55-1.49(m,4H),1.46(s,9H)。LCMS(ESI)m/z：305.3[M+H]+。
步骤2：2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷盐酸盐
向2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(260mg,0.85mmol)在二烷(20mL)中的溶液中添加4M HCl在二/>烷中的溶液(2mL,8mmol)。将混合物在室温搅拌1小时。将混合物在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物(200mg，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：205.2[M+H]+。
步骤3：4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例250，步骤4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷盐酸盐，获得白色固体状标题化合物(11mg,30％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82-8.78(m,1H),8.77-8.72(m,2H),8.33-8.30(m,1H),8.29-8.25(m,2H),6.09(tt,J＝56.0,4.0Hz,1H),4.06(s,3H),3.76-3.57(m,4H),2.88-2.75(m,2H),2.72-2.62(m,2H),2.54(s,2H),1.77-1.69(m,2H),1.68-1.62(m,4H)。LCMS(ESI)m/z：441.2[M+H]+。
实例281
4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-甲氧基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物281)
步骤1：4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-甲氧基-2-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例250，步骤4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇和2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为5-甲氧基-2-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇和2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷盐酸盐，获得黄色固体状标题化合物。LCMS(ESI)m/z：574.3[M+H]+。
步骤2：4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-甲氧基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
向4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-甲氧基-2-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(190mg,0.33mmol)在DCM(4mL)中的溶液中添加三氟乙酸(2mL,26mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩并将粗残余物通过反相色谱法(乙腈37％至67％/0.05％NH3·H2O+10mM NH4HCO3在水中的溶液)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(9mg,6％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85(s,1H),8.64(s,1H),8.16(s,1H),8.05(s,1H),6.08(tt,J＝56.0,4.0Hz,1H),4.02(s,3H),3.59-3.47(m,4H),2.85-2.79(m,2H),2.68-2.63(m,4H),2.52(s,3H),1.68-1.59(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：444.3[M+H]+。
实例282
4-[2-[(3-氟氧杂环丁烷-3-基)甲基]-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]-5-甲氧基-2-
(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物282)
在N2气氛下，向5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(50mg,0.133mmol)在无水1,4-二烷(0.66mL,0.2M)中的溶液中依次添加4-甲基苯磺酸(3-氟氧杂环丁烷-3-基)甲酯(41.49g，0.159mmol，1.2当量)和N,N-二异丙基乙胺(0.116mL，0.664mmol，5当量)。将所得混合物在100℃搅拌3天，然后冷却至室温。将挥发物在减压下去除，并将粗残余物通过HPLC(Triart C18(50×30mm,5μm)，0.1％NH4OH在H2O中的溶液/MeCN 20％至60％梯度，60mL/min)纯化，然后通过SFC(ChiralART SJ(150×21.2mm,5μm)，0.1％NH4OH在MeOH中，35％，等度，70mL/min)纯化。获得白色固体状标题产物(3.31mg，0.0071mmol，产率＝5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(s,1H),8.79–8.73(m,2H),8.33(s,1H),8.32–8.27(m,2H),4.66–4.50(m,4H),4.07(s,3H),3.80–3.56(m,4H),2.94(d,J＝25.4Hz,2H),2.66(t,J＝6.9Hz,2H),2.53(s,2H),1.78–1.57(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：465.2[M+H]+。/>
实例283
1,1,1-三氟-3-[8-[5-甲氧基-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2,8-二氮杂螺
[4.5]癸烷-2-基]-2-甲基-丙-2-醇(化合物283)
在N2气氛下，向包含5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(50mg,0.133mmol)在无水MeOH(0.66mL,0.2M)中的溶液的2打兰小瓶中添加2-(1,1-二氟乙基)-2-甲基-环氧乙烷(81.1mg，0.664mmol，5当量)，然后添加N,N-二异丙基乙胺(0.116mL，0.664mmol，5当量)。将小瓶密封并将反应混合物在100℃搅拌30分钟，然后冷却至室温。将挥发物在减压下去除，并将粗残余物通过HPLC(XSelect CSH PrepC18(50×30mm,5μm)，0.1％NH4OH在H2O中的溶液/DMSO 30％至70％梯度，60mL/min)纯化，以得到浅棕色固体状标题产物(4.1mg，0.0082mmol，纯度90％，产率＝6％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(s,1H),8.79–8.73(m,2H),8.33(s,1H),8.32–8.28(m,2H),5.69(s,1H),4.07(s,3H),3.78–3.54(m,4H),2.82–2.62(m,4H),2.52(s,2H),1.77–1.59(m,6H),1.30(s,3H)。LCMS(ESI)m/z：503.2[M+H]+。
实例284
4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-8-甲腈(化合物284)
将8-氯-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(100mg,0.25mmol)、六氰铁(II)酸钾三水合物(46.6mg,0.126mmol)、(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]甲磺酸钯(II)(21.8mg,0.025mmol)、乙酸钾(24.9mg,0.25mmol)在1,4-二烷(0.25mL)和水(0.25mL)中的溶液在氮气气氛下在90℃加热24小时。冷却反应后，添加DCM(3mL)和水(3mL)，并滤出不可溶物质。分离各层，并将水层用DCM(3×3mL)进一步萃取。合并的有机提取物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过硅胶色谱法(溶剂梯度：在DCM中的0至10％MeOH)纯化，然后通过HPLC纯化，以得到白色固体状标题化合物(13.2mg，产率14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85–8.79(m,2H),8.69(d,J＝5.5Hz,1H),8.39–8.31(m,2H),8.23(d,J＝5.5Hz,1H),4.07(ddd,J＝13.6,6.9,4.0Hz,2H),3.97(ddd,J＝13.6,7.6,3.9Hz,2H),2.55–2.48(m,2H),2.40(s,2H),2.24(s,3H),1.84–1.66(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：386.2[M+H]+。
实例285
8-氯-5-甲氧基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物285)
步骤1：5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯
将5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(2g,14.3mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(2.6mL,28.5mmol)和TsOH(490mg,2.9mmol)在THF(60mL)中的混合物加热至75℃持续16小时。冷却至室温后，将残余物溶解在DCM(200mL)中，用饱和NaHCO3水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色油状标题化合物(2.7g，粗产物)，其无需进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：225.2[M+H]+。
步骤2：5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-甲脒
在氮气气氛下，在0℃向NH4Cl(4.78g,89.4mmol)在甲苯(60mL)中的溶液中逐滴添加三甲基铝(45mL,90mmol)(2M，在甲苯中)。将混合物温热至室温并搅拌3小时。将5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(2g,8.9mmol)在甲苯(10mL)中的溶液添加至反应混合物中。将所得混合物加热至80℃持续16小时。冷却至室温后，将反应用MeOH(50mL)缓慢淬灭。将所得白色沉淀物通过在硅藻土垫上过滤以去除。滤液在真空中浓缩。向该粗残余物中添加MeOH(10mL)和甲基叔丁基醚(30mL)，然后过滤。将滤液在真空中浓缩，以得到黄色固体状标题化合物(1.5g,81％)。LCMS(ESI)m/z：209.2[M+H]+。
步骤3：8-氯-5-甲氧基-2-(5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇
按照实例250，步骤1至2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将3,5-二氟异烟酸和异烟亚胺酰胺盐酸盐替换为2-氯-3-氟-5-甲氧基异烟酸和5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-甲脒，获得白色固体状标题化合物(85mg,60％)。LCMS(ESI)m/z：376.0[M+H]+。
步骤4：8-氯-5-甲氧基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-
基)吡啶并[3,4-d]嘧啶
按照实例250，步骤4至5中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇替换为8-氯-5-甲氧基-2-(5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇，获得白色固体状标题化合物(3mg,4％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δδ8.22(s,1H),7.88(s,1H),4.08(s,3H),3.83-3.61(m,4H),3.19(t,J＝7.6Hz,2H),2.97(s,2H),2.77(s,3H),1.89(t,J＝7.2Hz,2H),1.82-1.74(m,4H)。未观察到吡唑NH和胺NH质子。LCMS(ESI)m/z：414.0[M+H]+。
实例286
8-氯-5-甲氧基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-
基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物286)
/>
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为8-氯-5-甲氧基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶，获得白色固体状标题化合物(12mg,23％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(s,1H),8.04(s,1H),7.94(s,1H),4.02(s,3H),3.68-3.50(m,4H),2.67(s,3H),2.49-2.45(m,2H),2.35(s,2H),2.22(s,3H),1.66-1.58(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：428.0[M+H]+。
实例287
1-(8-(8-氯-5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]
癸烷-2-基)-2-甲基丙-2-醇(化合物287)
按照实例250，步骤4至6中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇替换为8-氯-5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇，获得黄色固体状标题化合物(33mg,31％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80-8.75(m,2H),8.33-8.27(m,2H),8.10(s,1H),4.06(s,3H),4.05-4.02(m,1H),3.77-3.60(m,4H),2.66(t,J＝6.8Hz,2H),2.52(s,2H),2.32(s,2H),1.69-1.58(m,6H),1.08(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：483.3[M+H]+。
实例288
8-氯-4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并
[3,4-d]嘧啶(化合物288)
按照实例250，步骤4中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇和2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯替换为8-氯-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(根据WO201452699中的程序制备)和2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷盐酸盐，获得黄色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.81-8.77(m,2H),8.39-8.28(m,3H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),6.11(tt,J＝56.0,2.0,1H),4.05-3.82(m,4H),2.90-2.77(m,2H),2.74-2.66(m,2H),2.57(s,2H),1.81-1.67(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：445.3[M+H]+。
实例289
2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-5-(三氟甲氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物289)
标题化合物按照类似在实例274中所述的程序合成。
实例290
8-氯-4-(2-(2,2-二氟乙基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-
基)吡啶并[3,4-d]嘧啶(化合物290)
标题化合物按照类似在实例107，步骤1中所述的程序合成并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐和2-溴-2-甲基丙酸甲酯替换为8-氯-2-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶和三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯。
实例291
1-(8-(8-氯-5-甲氧基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)-2-甲基丙-2-醇(化合物291)
按照实例250，步骤6中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将5-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为8-氯-5-甲氧基-2-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐，获得白色固体状标题化合物(2mg,2％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(s,1H),8.05(s,1H),7.94(s,1H),4.04(s,1H),4.02(s,3H),3.67-3.49(m,4H),2.72-2.63(m,4H),2.53(s,3H),2.32(s,2H),1.68-1.56(m,6H),1.08(s,6H)。LCMS(ESI)m/z：486.4[M+H]+。
实例292
3-(4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-8-基)丙-2-炔-1-醇(化合物292)
步骤1：3-(2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-8-基)丙-2-炔-1-醇
按照实例245，步骤1至2中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将2-甲基-3-丁炔-2-醇替换为丙-2-炔-1-醇，获得棕色油状标题化合物(100mg，粗产物)。LCMS(ESI)m/z：401.2[M+H]+。
步骤2：3-(4-(2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(吡啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-8-基)丙-2-炔-1-醇
按照实例102中所述的程序并根据需要进行非关键变化以将4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(4-吡啶基)吡啶并[3,4-d]嘧啶盐酸盐替换为3-(2-(吡啶-4-基)-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-8-基)丙-2-炔-1-醇，获得黄色固体状标题化合物(6mg,6％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.73-8.69(m,2H),8.57-8.51(m,2H),8.47(d,J＝6.0Hz,1H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),4.63(s,2H),4.16-4.02(m,2H),4.01-3.90(m,2H),2.71(t,J＝6.8Hz,2H),2.59(s,2H),2.40(s,3H),1.92-1.78(m,6H)。LCMS(ESI)m/z：415.2[M+H]+。
生物实例
根据以下方案测试示例性式(I)化合物以评定化合物抑制。
实例B1：标准LATS2 HTRF测定
包含氨基酸G553-V1088(登录号NP_055387)的人类LATS2催化结构域在内部纯化。将LATS2催化结构域与Mob1b(登录号NP_775739)共同纯化。LATS2生化HTRF测定使用HTRFKinEASE-STK S1套件(Cisbio，目录号62ST1PEC)按照制造商的方案进行。化合物通过Echo液体处理器(Labcyte)分配到白色384孔板(PerkinElmer，目录号6008289)中。将3uL 2XLATS2酶溶液添加至化合物中，然后在室温孵育10分钟。然后，添加2X ATP和STK S1肽溶液，以在室温开始1小时的酶反应。最终反应条件为：0.2nM LATS2，50μM ATP，0.5μM STK S1肽在50mM HEPES pH7.2中，10mM MgCl2，0.1％BGG，0.005％Brij-35，1mM DTT。通过添加6uL包含链霉亲和素XL665和STK抗体-穴合物(Cryptate)的检测混合物淬灭反应，在室温孵育1小时。在Envision酶标仪(PerkinElmer)上读取HTRF(665nm/620nm)信号。IC50值通过用非线性四参数逻辑斯谛方程式拟合抑制百分比来确定。Ki值使用Cheng-Prusoff方程式针对竞争性抑制剂进行计算，IC50＝Ki(1+S/Km)+1/2[E]，对于LATS2，ATP Km＝105μM。结果列在表B1中。
实例B2：LATS2高ATP HTRF测定
使用与标准LATS2 HTRF测定相同的方案进行LATS2高ATP HTRF测定。最终反应条件为：0.05nM LATS2，5000μM ATP，0.5μM STK S1肽在50mM HEPES pH7.2中，10mM MgCl2，0.1％BGG，0.005％Brij-35，1mM DTT，并在室温酶反应2小时。结果列在表B1中。
实例B3：LATS1高ATP HTRF测定
包含氨基酸E590-V1130(登录号NP_004681)的人类LATS1催化结构域在内部纯化。将LATS1催化结构域与Mob1b(登录号NP_775739)共同纯化。LATS1生化测定使用HTRFKinEASE-STK S1套件(Cisbio，目录号62ST1PEC)按照制造商的方案进行。化合物通过Echo液体处理器(Labcyte)分配到白色384孔板(PerkinElmer，目录号6008289)中。将3μL 2XLATS1酶溶液添加至化合物中，然后在室温孵育10分钟。然后，添加3μL 2X ATP和STK S1肽溶液，以在室温开始1小时的酶反应。最终反应条件为：0.025nM LATS1，5000μM ATP，0.5μMSTK S1肽在50mM HEPES pH 7.2中，10mM MgCl2，0.1％BGG，0.005％Brij-35，1mM DTT。将反应淬灭并读取HTRF信号。分析数据并使用Cheng-Prusoff方程式计算竞争性抑制剂的Ki值，针对所用的酶的量进行校正，IC50＝Ki(1+S/Km)+1/2[E]，其中对于LATS1，ATP Km＝27μM。结果列在表B1中。
实例B4：ROCK1 HTRF测定
包含蛋白激酶1(ROCK1)的人类Rho相关缠绕线圈购自Carna Biosciences(目录号01-109)，其中包含催化结构域(氨基酸1至477，来自登录号NP_005397.1)。ROCK1生化测定使用HTRF KinEASE-STK S2套件(Cisbio，目录号62ST2PEC)按照制造商的方案进行。化合物通过Echo液体处理器(Labcyte)分配到白色384孔板(PerkinElmer，目录号6008289)中。将3uL 2X Rock1酶溶液添加至化合物中，然后在室温孵育10分钟。然后，添加3uL 2X ATP和STK S2肽溶液，以在室温开始1小时的酶反应。最终反应条件为：1.5nM ROCK1、3μM ATP、0.5μM STK S2肽在50mM HEPES pH7.2、10mM MgCl2、0.1％BGG、0.005％Brij-35、1mM DTT。通过添加6uL包含链霉亲和素XL665和STK抗体-穴合物(Cryptate)的检测混合物淬灭反应，在室温孵育1小时。在Envision酶标仪(PerkinElmer)上读取HTRF(665nm/620nm)信号。IC50值通过用非线性四参数逻辑斯谛方程式拟合抑制百分比来确定。Ki值使用针对竞争性抑制剂的Cheng-Prusoff方程式计算得出，经所用酶的量校正，IC50＝Ki(1+S/Km)+1/2[E]，其中ROCK1的ATP Km＝2.8uM。表1的化合物显示ROCK1的Ki值范围为约3nM至>10μM，且ROCK1 Ki与LATS2Ki的比率为约2至25,000倍以上。
实例B5：PKA HTRF测定
全长人类蛋白激酶A(PKA)(登录号NP_002721.1)购自Carna Biosciences(目录号01-127)。PKA生化测定使用HTRF KinEASE-STK S3套件(Cisbio，目录号62ST3PEC)按照制造商的方案进行。化合物通过Echo液体处理器(Labcyte)分配到白色384孔板(PerkinElmer，目录号6008289)中。将3μL 2X PKA酶溶液添加至化合物中，然后在室温孵育10分钟。然后，添加3μL 2X ATP和STK S3肽溶液，以在室温开始1小时的酶反应。最终反应条件为：0.0025nM PKA，2.5μM ATP，0.5μM STK S3肽在50mM HEPES pH 7.2中，10mM MgCl2，0.1％BGG，0.005％Brij-35，1mM DTT。将反应淬灭并读取HTRF信号，分析数据，并使用Cheng-Prusoff方程式计算竞争性抑制剂的Ki值，针对所用的酶的量进行校正，IC50＝Ki(1+S/Km)+1/2[E]，其中对于PKA，ATP Km＝1.9μM。表1的化合物显示PKA的Ki值范围为3nM至>1200nM，且对于其中一些化合物，PKA Ki与LATS2 Ki的比率为约1.3至1,000倍以上；并且PKA的Ki值范围为0.6nM至>1200nM，且对于其他化合物，PKA Ki与LATS2 Ki的比率为约1.3至5,000倍以上。
实例B6：AKT1 HTRF测定
全长人类AKT丝氨酸-苏氨蛋白激酶1(AKT1)(登录号NP_001014431)在内部纯化。AKT1生化测定使用HTRF KinEASE-STK S3套件(Cisbio，目录号62ST3PEC)按照制造商的方案进行。化合物通过Echo液体处理器(Labcyte)分配到白色384孔板(PerkinElmer，目录号6008289)中。将3μL 2X ATK1酶溶液添加至化合物中，然后在室温孵育10分钟。然后，添加3μL 2X ATP和STK S3肽溶液，以在室温开始1小时的酶反应。最终反应条件为：3nM AKT1，50μMATP，0.5μM STK S3肽在50mM HEPES pH 7.2中，10mM MgCl2，0.1％BGG，0.005％Brij-35，1mM DTT。将反应淬灭并读取HTRF信号，分析数据，并使用Cheng-Prusoff方程式计算竞争性抑制剂的Ki值，针对所用的酶的量进行校正，IC50＝Ki(1+S/Km)+1/2[E]，其中对于AKT1，ATPKm＝78μM。表1的化合物显示AKT1的Ki值范围为80nM至>10μM，且对于其中一些化合物，AKT1Ki与LATS2 Ki的比率为约100至100,000倍以上；并且AKT1的Ki值范围为26nM至>10μM，且对于其他化合物，AKT1 Ki与LATS2 Ki的比率为约100至500,000倍以上。
实例B7：TAZ核转位测定
通过向384孔板(Greiner 781091)中添加30μL/孔的RPMI1640、10％FBS、2mM谷氨酰胺培养基，以5000个细胞/孔接种SW1990细胞(ATCC,CRL2172)。将细胞在37℃孵育过夜。第二天，使用Echo液体处理器(Labcyte)将测试化合物直接添加至细胞中，在37℃孵育4小时。将细胞用4％多聚甲醛固定并在室温孵育20分钟。用100μL PBS洗涤三次后，添加0.5％Triton X-100以使细胞透化，在室温孵育5分钟，然后将细胞用PBS洗涤三次。向细胞中添加3％BSA，在室温孵育1小时，然后用PBS洗涤三次。将50μL在3％BSA中的1:750稀释的兔抗TAZ(细胞信号传导D3I6D)添加至细胞中，在4℃孵育过夜。第二天，将细胞用PBS洗涤三次后，将50μL在3％BSA中的1:1250稀释的驴抗兔Alexa Fluor 488(Invitrogen A21206)和1:6250稀释的Hoechst 33342(Molecular Probes H-21492)添加至细胞中，在室温孵育1小时。将细胞用PBS洗涤三次，然后用CellInsight CX7高容量成像仪成像。计算核平均荧光强度与细胞质环区平均荧光强度的比率。使用DMSO作为0％抑制并以抑制剂对照作为100％抑制，将抑制百分比归一化。EC50值通过用非线性四参数逻辑斯谛方程式拟合抑制百分比来计算。结果列在表B1中。
实例B8：pYAP(Ser127)HTRF细胞测定
通过向384孔板(Corning 3570)中添加30μL/孔的RPMI1640、10％FBS、2mM谷氨酰胺培养基，以8000个细胞/孔接种SW1990细胞。将细胞在37℃孵育过夜。第二天，使用Echo液体处理器(Labcyte)将化合物直接添加至细胞中，在37℃孵育4小时。
HTRF测定使用Cisbio phospho-YAP Ser127 HTRF套件(64YAPPEG)进行。从细胞中吸取培养基。将20μL 1X裂解/封闭缓冲剂添加至细胞中，在室温轻轻振荡30分钟。将1μL预混合抗体溶液(各磷酸化-YAP Eu穴合物抗体和磷酸化-YAP d2抗体的1:40稀释液)添加至细胞中。将板密封并在室温孵育过夜。在PHERAstar酶标仪(BMG Labtech)上读取HTRF(665nm/620nm)信号。EC50值通过用非线性四参数逻辑斯谛方程式拟合抑制百分比来计算。结果列在表B1中。
表B1
/>
/>
/>
/>
/>
/>
1不带星号的数据使用LATS2高ATP HTRF测定获得。标记有星号的数据使用标准LATS2 HTRF测定获得。
需要注意的是，术语“一(a或an)”实体指的是该实体中的一者或多者；例如，“多肽”应理解为代表一个或多个多肽。因此，术语“一(a或an)”、“一个或多个”和“至少一个”可在本文中可互换使用。
本文所使用的所有技术和科学术语具有相同的含义。已尽力确保所用数字(例如数量、温度等)的准确性，但应考虑一些实验误差和偏差。
在整个说明书和权利要求中，除非上下文另有要求，否则以非排他性的意义使用词语“包括/包含”。应当理解的是，本文所述的实施例包括“由...构成”和/或“实质上由...构成”的实施例。
如本文中所使用的术语“约”在涉及数值时，旨在涵盖指定的量的各种变化，在一些实施例中，涵盖指定的量±50％；在一些实施例中，涵盖指定的量±20％；在一些实施例中，涵盖指定的量±10％；在一些实施例中，涵盖指定的量±5％；在一些实施例中，涵盖指定的量±1％；在一些实施例中，涵盖指定的量±0.5％；在一些实施例中，涵盖指定的量±0.1％；因为该变化适合于执行所公开的方法或采用所公开的组合物。
在提供数值范围的情况下，应了解，除非上下文另有明确规定，否则在该范围的上限与下限之间的每个中间值至下限单位的十分之一或该所述范围中的中间值涵盖在本发明内。这些小范围(其可以独立地包括在更小的范围内)也涵盖在本发明内，受到所述范围内任何明确排除的限值的限定。在所述范围包括一个或两个限值时，排除那些涵盖的一者或两者的范围也包括在本发明中。
得益在前述说明书和相关附图展示的教导，本发明所属领域的技术人员将想到本文所述的本发明的众多修饰和其他实施例。因此，应理解，本发明并不限于所公开的具体实施例，并且修饰和其他实施例旨在包含在所附权利要求的范围内。尽管本文中采用特定术语，但它们是仅作一般性和描述性意义之用而非用于限制的目的。

Claims (60)

1.一种式(I)化合物：
或其N-氧化物，或其药用盐，其中：
R1为任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的5元至14元杂芳基；
R2为氢、卤素、C1-6烷基、–O(C1-6烷基)、–NH(C1-6烷基)或–N(C1-6烷基)2，其中每个C1-6烷基任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代；
R3为氢、C1-6烷基、卤素、氰基、羟基、–O(C1-6烷基)、C2-6烯基或C2-6炔基，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代；
R4为氢、卤素、氰基、-NR43aR43b、-OR44、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代；
G1为N或CR41，G2为N或CR42，前提条件是G1和G2中的一者或两者为N；
R41和R42独立地为氢、卤素、氰基、-NR43aR43b、-OR44、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代；
每个R43a和R43b独立地为氢或C1-6烷基；
R44为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3元至14元杂环基，其中R44的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基和3元至14元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R10的取代基取代；
R5为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5元至14元杂芳基、3元至14元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R5的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5元至14元杂芳基和3元至14元杂环基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R5与R6a或R6b以及它们所连接的原子一起形成任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的3元至14元杂环基；
每个R6a和R6b独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至14元杂芳基、3元至12元杂环基、-C(O)R14、-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中R6a和R6b的所述C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至14元杂芳基和3元至12元杂环基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代；或者每个R6a和R6b与R5以及它们所连接的原子一起形成任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的3元至14元杂环基；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，其任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代；或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R8a和R8b独立地为氢、卤素、羟基、–O(C1-6烷基)或C1-6烷基，其中每个C1-6烷基任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代；
n为0至8；
每个R9独立地为C1-6烷基；或者两个偕R9基团在存在情况下，与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R14独立地为氢或C1-6烷基；
每个R15独立地为C1-6烷基；
每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基；或者R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的4元至12元杂环基；
每个R10独立地为氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5元至14元杂芳基、3元至14元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-C(O)NRcRd、
-ORb、-OC(O)Ra、-OC(O)NRcRd、-SRb、-S(O)Re、-S(O)2Re、
-S(O)(＝NH)Re、-S(O)2NRcRd、-NRcRd、-N(Rf)C(O)Ra、-N(Rf)C(O)ORb、-N(Rf)C(O)NRcRd、-N(Rf)S(O)2Re、-N(Rf)S(O)2NRcRd或-P(O)RgRh，其中R10的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5元至14元杂芳基和3元至14元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Ra独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基或3元至12元杂环基，其中Ra的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至12元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Rb独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基或3元至12元杂环基，其中Rb的所述C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至12元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Rc和Rd独立地为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基或3元至12元杂环基；其中Rc和Rd的所述C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至12元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R11的取代基取代；
或者Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R11的取代基取代的4元至12元杂环基；
每个Re独立地为C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基或3元至12元杂环基，其中Re的所述C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至12元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R11的取代基取代；
每个Rf独立地为氢或C1-6烷基；
每个Rg和Rh独立地为C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基、3元至12元杂环基或-O-C1-6烷基；其中Rg和Rh的所述C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至12元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R11的取代基取代；
或者Rg和Rh与它们所连接的磷原子一起形成任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R11的取代基取代的4元至12元杂环基；
每个R11独立地为氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基、3元至8元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra1、-C(O)ORb1、-C(O)NRc1Rd1、-ORb1、-OC(O)Ra1、-OC(O)NRc1Rd1、-SRb1、-S(O)Re1、-S(O)2Re1、-S(O)2NRc1Rd1、-NRc1Rd1、-N(Rf1)C(O)Ra1、-N(Rf1)C(O)ORb1、-N(Rf1)C(O)NRc1Rd1、-N(Rf1)S(O)2Re1、-N(Rf1)S(O)2NRc1Rd1或-P(O)Rg1Rh1；其中R11的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至8元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Ra1独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基或3元至8元杂环基；其中Ra1的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至8元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Rb1独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基或3元至8元杂环基；其中Rb1的所述C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至8元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Rc1和Rd1独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基或3元至8元杂环基；其中Rc1和Rd1的所述C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至8元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R12的取代基取代；
或者Rc1和Rd1与它们所连接的氮原子一起形成任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R12的取代基取代的4元至8元杂环基；
每个Re1独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基或3元至8元杂环基；其中Re1的所述C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至8元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R12的取代基取代；
每个Rf1独立地为氢或C1-6烷基；
每个Rg1和Rh1独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基、3元至8元杂环基或-O-C1-6烷基；其中Rg1和Rh1的所述C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、5元至10元杂芳基和3元至8元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R12的取代基取代；
或者Rg1和Rh1与它们所连接的磷原子一起形成任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R12的取代基取代的4元至8元杂环基；
每个R12独立地为氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5元至6元杂芳基、3元至6元杂环基、卤素、氰基、-C(O)Ra2、-C(O)ORb2、-C(O)NRc2Rd2、-ORb2、-OC(O)Ra2、-OC(O)NRc2Rd2、-S(O)2Re2、-S(O)2NRc2Rd2、-NRc2Rd2、-N(Rf2)C(O)Ra2、-N(Rf2)C(O)ORb2、-N(Rf2)C(O)NRc2Rd2、-N(Rf2)S(O)2Re2、-N(Rf2)S(O)2NRc2Rd2或-P(O)Rg2Rh2；其中R12的所述C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5元至6元杂芳基和3元至6元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Ra2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5元至6元杂芳基或3元至6元杂环基；其中Ra2的所述C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5元至6元杂芳基和3元至6元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Rb2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或3元至6元杂环基；其中Rb2的所述C1-6烷基、C3-6环烷基和3元至6元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Rc2和Rd2独立地为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基或3元至8元杂环基；其中Rc2和Rd2的所述C1-6烷基、C3-6环烷基和3元至8元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R13的取代基取代；
或者Rc2和Rd2与它们所连接的氮原子一起形成任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R13的取代基取代的4元至6元杂环基；
每个Re2独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5元至6元杂芳基或3元至6元杂环基；其中Re2的所述C1-6烷基、C3-6环烷基、C6芳基、5元至6元杂芳基和3元至6元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R13的取代基取代；
每个Rf2独立地为氢或C1-6烷基；
每个Rg2和Rh2独立地为C1-6烷基、C3-6环烷基、3元至8元杂环基或-O-C1-6烷基；其中Rg2和Rh2的所述C1-6烷基、C3-6环烷基和3元至8元杂环基各自任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R13的取代基取代；
或者Rg2和Rh2与它们所连接的磷原子一起形成任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R13的取代基取代的4元至6元杂环基；并且
每个R13独立地为氧代、卤素、羟基、-O(C1-6烷基)、氰基、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；
前提条件是所述化合物并非表1X中的化合物及其盐。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中G1和G2两者均为N，并且所述化合物为式(IA)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如权利要求1中所定义。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中G1为N并且G2为CR42，并且所述化合物为式(IB)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R42、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如权利要求1中所定义。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中G1为CR41并且G2为N，并且所述化合物为式(IC)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R41、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如权利要求1中所定义。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中R1为具有1个或2个环氮原子的6元杂芳基，其任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R10的取代基取代。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中R1为任选地被1个至5个独立地选自R10的取代基取代的4-吡啶基。
7.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中R1为具有1个或2个环氮原子的5元杂芳基，其任选地被1个、2个、3个或4个独立地选自R10的取代基取代。
8.根据权利要求7所述的化合物，其中R1为异噻唑-5-基或吡唑-4-基，其任选地被1个至3个独立地选自R10的取代基取代。
9.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中R1为具有1个或2个环氮原子的5,6-稠合杂芳基，其任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
10.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中R1选自由以下项组成的组：
其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物，其中R2为氢、
–NH(C1-6烷基)或C1-6烷基，其任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
12.根据权利要求11所述的化合物，其中R2选自由以下项组成的组：氢、NHMe、甲基、CF3、 其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其中R3为氢、卤素、氰基、羟基、–O(C1-6烷基)、C1-6烷基或C2-6炔基，其中所述C1-6烷基和C2-6炔基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
14.根据权利要求13所述的化合物，其中R3选自由以下项组成的组：氢、氯代、氰基、羟基、甲氧基、3-羟基丙-1-炔-1-基、3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基、甲基、甲氧基甲基和2,2,2-三氟乙基。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物，其中R4为氢、卤素、-NR43aR43b、-OR44、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
16.根据权利要求15所述的化合物，其中R4为氢、卤素、C1-6烷基或-O(C1-6烷基)，其中每个C1-6烷基任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
17.根据权利要求15所述的化合物，其中R4选自由以下项组成的组：氢、氟代、氯代、溴代、甲基、
18.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物，其中R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5元至14元杂芳基、3元至14元杂环基或-C(O)R14，其中R5的所述C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5元至14元杂芳基和3元至14元杂环基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
19.根据权利要求18所述的化合物，其中R5为氢或-C(O)R14。
20.根据权利要求18所述的化合物，其中R5为氢或C1-6烷基，其任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
21.根据权利要求20所述的化合物，其中R5选自由以下项组成的组：甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、2-甲基-1-丙基和2-甲基-2-丙基、
其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
22.根据权利要求18所述的化合物，其中R5为任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的C4-8环烷基。
23.根据权利要求22所述的化合物，其中R5选自由以下项组成的组：
其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
24.根据权利要求17所述的化合物，其中R5为任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的3元至14元杂环基；任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的C6-14芳基；或任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的5元至14元杂芳基。
25.根据权利要求24所述的化合物，其中R5选自由以下项组成的组：
其各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代，其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
26.根据权利要求1至25中任一项所述的化合物，其中每个R6a和R6b独立地为氢或C1-6烷基；或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基。
27.根据权利要求1至25中任一项所述的化合物，其中R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、-C(O)OR15、
-C(O)NR16aR16b或C1-6烷基，其任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
28.根据权利要求27所述的化合物，其中R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b；其中每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基。
29.根据权利要求27所述的化合物，其中R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为-C(O)NR16aR16b；其中R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的4元至12元杂环基。
30.根据权利要求27所述的化合物，其中R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者选自由以下项组成的组：氢、甲基、
其中每个基团中的波浪线指示与母结构的连接点。
31.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物，其中R5与R6a和R6b中的一者以及它们所连接的原子一起形成任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的3元至14元杂环基，并且R6a和R6b中的另一者为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至14元杂芳基、3元至12元杂环基、-C(O)R14、
-C(O)OR15或-C(O)NR16aR16b，其中所述C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-10芳基、5元至14元杂芳基和3元至12元杂环基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
32.根据权利要求31所述的化合物，其中R5与R6a和R6b中的一者以及它们所连接的原子一起形成任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代的4元至8元杂环基，并且R6a和R6b中的另一者为氢。
33.根据权利要求1至32中任一项所述的化合物，其中每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基；或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基。
34.根据权利要求1至33中任一项所述的化合物，其中R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、卤素、羟基、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)。
35.根据权利要求32所述的化合物，其中每个R8a和R8b为氢；R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、氟代或羟基；
或者每个R8a和R8b为氟代。
36.根据权利要求1至35中任一项所述的化合物，其中n为0。
37.根据权利要求1至36中任一项所述的化合物，其中所述化合物为式(II)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、G1、G2、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如权利要求1至32中任一项中所定义。
38.根据权利要求37所述的化合物，其中G1和G2两者均为N，并且所述化合物为式(II-A)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如权利要求37中所定义。
39.根据权利要求37所述的化合物，其中G1为N并且G2为CR42，并且所述化合物为式(II-B)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R42、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如权利要求37中所定义。
40.根据权利要求37所述的化合物，其中G1为CR41并且G2为N，并且所述化合物为式(II-C)化合物：
或其药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R41、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b如权利要求37中所定义。
41.根据权利要求37至40中任一项所述的化合物，其中：
R1为吡唑基、吡啶基、异噻唑基或吡咯并-吡啶基，其各自任选地被1个至3个独立地选自R10的取代基取代；
R2为氢或C1-6烷基，其任选地被1个至5个独立地选自R10的取代基取代；
R3为氢、卤素或C1-6烷基；
R4为氢、卤素、-O(C1-6烷基)或C1-6烷基；
R5为氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5元至14元杂芳基、3元至14元杂环基或-C(O)R14，其中R5的所述C1-6烷基、C3-8环烷基、C6-14芳基、5元至14元杂芳基和3元至14元杂环基各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代；
每个R6a和R6b独立地为氢、-C(O)OR15、-C(O)NR16aR16b或C1-6烷基，其任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代，或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；
每个R7a和R7b独立地为氢或C1-6烷基，或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；
R8a和R8b中的一者为氢，并且R8a和R8b中的另一者为氢、卤素、羟基、C1-6烷基或–O(C1-6烷基)；
R14为C1-6烷基；
R15为C1-6烷基；并且
每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基，或者R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成具有1个至2个选自氮、氧和硫的环杂原子的5元或6元杂环基，其任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
42.根据权利要求37至40中任一项所述的化合物，其中：
R1为吡唑-4-基、4-吡啶基、异噻唑-5-基或吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基，其各自任选地被1个至3个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素、氰基、未被取代的C1-6烷基和C1-6卤代烷基；
每个R2和R3独立地为氢或C1-6烷基；
R4为氢、卤素、-O(C1-6烷基)或C1-6烷基；
R5为(i)C1-6烷基，其任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素、氰基、羟基、-O(C1-6烷基)、-NHC(O)(C1-6烷基)、-NHS(O)2(C1-6烷基)、-S(O)2NH2、-C(O)NH2、苯基和3元至12元杂环基，
(ii)C3-6环烷基，其被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤素、氰基和羟基，
(iii)单环3元至6元杂环基，其具有1个环杂原子，所述环杂原子为氧，
(iv)苯基，或
(v)吡唑基；
R6a和R6b中的一者为氢，并且R6a和R6b中的另一者为氢、C1-6烷基、-C(O)O(C1-6烷基)或-C(O)NR16aR16b，或者R6a和R6b与它们所连接的碳一起形成羰基；
R7a和R7b中的一者为氢，并且R7a和R7b中的另一者为氢或C1-6烷基，或者R7a和R7b与它们所连接的碳一起形成羰基；
R8a和R8b为氢；并且
每个R16a和R16b独立地为氢或C1-6烷基，或者R16a和R16b与它们所连接的氮原子一起形成吡咯烷-1-基或吗啉-4-基。
43.根据权利要求1至36中任一项所述的化合物，其中所述化合物为式(III)化合物：
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或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b在适用的情况下如权利要求1至36中任一项中所定义；
p为0、1、2、3或4；并且
每个RZ独立地为氢、卤素、氰基或C1-6烷基，其任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
44.根据权利要求43所述的化合物，其中p为0，并且所述化合物为式(V)化合物：
或其药用盐。
45.根据权利要求1至36中任一项所述的化合物，其中所述化合物为式(IV)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b在适用的情况下如权利要求1至36中任一项中所定义；
q为0、1、2或3；并且
每个RY独立地为氢、卤素、氰基、-O(C1-6烷基)或C1-6烷基，
其中RY的所述C1-6烷基任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R10的取代基取代。
46.根据权利要求45所述的化合物，其中q为1，并且RY为甲基、氟代、氯代、氰基或三氟甲基。
47.根据权利要求1至36中任一项所述的化合物，其中所述化合物为式(VII)或(VIII)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b在适用的情况下如权利要求1至36中任一项中所定义。
48.根据权利要求1至36中任一项所述的化合物，其中所述化合物为式(IX)化合物：
或其药用盐，其中R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a和R8b在适用的情况下如权利要求1至36中任一项中所定义。
49.根据权利要求1至48中任一项所述的化合物，其中每个R2、R3和R4为氢。
50.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自由以下项组成的组：表1中编号为101至292的化合物，或其药用盐。
51.一种药物组合物，其包含：根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药用盐；以及药用赋形剂。
52.一种用于制备式(I)化合物或其药用盐的方法：
其中R1、R2、R3、R4、G1、G2、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如权利要求1中所定义，所述方法包括
a)使式(I-4)化合物：
其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，与式(I-3)化合物：
其中P为保护基团，在碱的存在下反应，以产生式(I-2)化合物：
b)从所述式(I-2)化合物中去除保护基团P，以产生式(I-1)化合物：
以及
c)使所述式(I-1)化合物转化为所述式(I)化合物。
53.根据权利要求52所述的方法，其中通过以下使所述式(I-1)化合物转化为所述式(I)化合物：(i)在碱的存在下，使所述式(I-1)化合物与式R5–X'化合物接触，其中X'为离去基团；或者(ii)在还原剂的存在下，使所述式(I-1)化合物与式R5–CHO的醛接触。
54.根据权利要求52所述的方法，其中G1和G2两者均为N，并且所述方法进一步包括：
d)在碱的存在下，使式1化合物：
与式2化合物混合，
以形成式3化合物：
以及
e)使所述式3化合物与活化剂接触，以形成式(I-4)化合物，其中G1和G2两者均为N。
55.一种用于制备式(IA)化合物或其药用盐的方法：
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7a、R7b、R8a、R8b、R9和n如权利要求1中所定义，所述方法包括：
a)在钯催化剂和碱的存在下，使式12化合物：
与式11化合物接触，
以形成式6化合物：
其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，并且P为保护基团；
b)从所述式6化合物中去除保护基团P，以产生式7化合物：
以及
c)使所述式7化合物转化为所述式(IA)化合物。
56.根据权利要求55所述的方法，其进一步包括：
d)使式5化合物：
与式10化合物：
其中X选自由以下项组成的组：Cl、Br、I、F、OMs和OTs，
在碱的存在下偶联，以形成式11化合物。
57.根据权利要求55或56所述的方法，其中通过以下使所述式7化合物转化为所述式(IA)化合物：(i)使所述式7化合物与式8化合物：
其中X'为离去基团，在碱的存在下接触；或者
(ii)在还原剂的存在下，使所述式7化合物与式9化合物接触：
58.一种抑制细胞中的LATS1/2的方法，所述方法包括使所述细胞与根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药用盐，或者根据权利要求51所述的药物组合物接触。
59.一种用于治疗疾病或病症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药用盐，或者根据权利要求51所述的药物组合物。
60.根据权利要求54所述的方法，其中所述疾病或病症为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。
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