CN117373771A - 一种离子型磁珠及其制备方法 - Google Patents

一种离子型磁珠及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN117373771A
CN117373771A CN202311318650.6A CN202311318650A CN117373771A CN 117373771 A CN117373771 A CN 117373771A CN 202311318650 A CN202311318650 A CN 202311318650A CN 117373771 A CN117373771 A CN 117373771A
Authority
CN
China
Prior art keywords
magnetic
preparation
layer
functional
product
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202311318650.6A
Other languages
English (en)
Inventor
贾传秀
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Tangmen Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Shanghai Tangmen Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Tangmen Biotechnology Co ltd filed Critical Shanghai Tangmen Biotechnology Co ltd
Priority to CN202311318650.6A priority Critical patent/CN117373771A/zh
Publication of CN117373771A publication Critical patent/CN117373771A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • H—ELECTRICITY
    • H01—ELECTRIC ELEMENTS
    • H01F—MAGNETS; INDUCTANCES; TRANSFORMERS; SELECTION OF MATERIALS FOR THEIR MAGNETIC PROPERTIES
    • H01F1/00—Magnets or magnetic bodies characterised by the magnetic materials therefor; Selection of materials for their magnetic properties
    • H01F1/42—Magnets or magnetic bodies characterised by the magnetic materials therefor; Selection of materials for their magnetic properties of organic or organo-metallic materials, e.g. graphene
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
    • C12N15/1006—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
    • C12N15/1013—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers by using magnetic beads
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
    • H—ELECTRICITY
    • H01—ELECTRIC ELEMENTS
    • H01F—MAGNETS; INDUCTANCES; TRANSFORMERS; SELECTION OF MATERIALS FOR THEIR MAGNETIC PROPERTIES
    • H01F41/00—Apparatus or processes specially adapted for manufacturing or assembling magnets, inductances or transformers; Apparatus or processes specially adapted for manufacturing materials characterised by their magnetic properties
    • H01F41/02—Apparatus or processes specially adapted for manufacturing or assembling magnets, inductances or transformers; Apparatus or processes specially adapted for manufacturing materials characterised by their magnetic properties for manufacturing cores, coils, or magnets

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Power Engineering (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hard Magnetic Materials (AREA)

Abstract

本发明涉及生物材料实验技术领域，且公开了一种离子型磁珠及其制备方法，包括磁性内核、亲水聚合物壳层、金属螯合吸附层；其中：所述磁性内核为表面修饰有稳定剂的纳米团簇，所述纳米团簇为γ‑Fe2O3、m‑γ‑Fe2O3、Fe3O4之一种或几种的混合物；所述亲水聚合物壳层为带有大量的可反应官能团的功能层，所述官能团选自羧基、羟基和环氧基。该离子型磁珠及其制备方法，通过基于多价金属离子磷酸盐化学反应，可以在温和简便的条件下仅通过调节吸附和脱附液的pH值便可实现DNA的高效提取，避免了苛刻的吸附和洗脱条件对DNA结构的破坏和残留盐溶液对PCR扩增的抑制；通过磁珠表面的高亲水性，可以有效避免由于疏水作用产生的非特异吸附。

Description

一种离子型磁珠及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物材料实验技术领域，具体为一种离子型磁珠及其制备方法。
背景技术
DNA功能的阐明代表了科学上的一次前所未有的革命，对研究生物的方法产生了深远影响。现如今，提取纯化DNA是不同知识领域的重要步骤，例如探究疾病的起源进行诊断扩大人类学研究的范围，开发新的生物技术过程和新药的研发，借助DNA法医研究解决法律问题等。其中，提取的DNA片段的质量和数量是在生物和法医学、药剂学、流行病学、分子诊断学和基因测序等不同领域采用的分子生物学协议成功的关键因素。
目前已经开发了很多不同的策略用于DNA的提取。传统的核酸提取方法主要分为两类：液相提取法和固相提取法。在液相法提取DNA的过程中要使用大量毒性的有机溶剂，例如苯酚、氯仿和异丙醇等，提取过程中需要对样本反复纯化，制备过程繁琐复杂。与液相法提取DNA相比，基于填充基质的固相提取法(多采用硅胶基质作为固相萃取吸附剂)在纯化分离DNA的过程中避免了使用有害溶剂。然而，固相法提取过程中通常需要反复多次地对溶液过滤和离心，以实现吸附剂从溶液中地分离，流程复杂且耗时，目前许多商业试剂盒在对复杂且低丰度样本进行DNA提取地过程中，繁琐的离心可能会导致目标DNA的降解甚至丢失。磁性固相提取法的研究解决了以上诸多问题。它允许通过施加外部磁场实现吸附剂与溶液的相分离，简化了离心沉淀过滤等步骤，易于操作可实现自动化处理，且可以有效避免因离心产生的剪切力而引起的DNA降解，因此本发明提供了一种离子型磁珠及其制备方法。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种离子型磁珠及其制备方法，解决了上述背景技术中提出的问题。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明提供如下技术方案：一种离子型磁珠及其制备方法，包括磁性内核、亲水聚合物壳层、金属螯合吸附层；其中：所述磁性内核为表面修饰有稳定剂的纳米团簇，所述纳米团簇为γ-Fe2O3、m-γ-Fe2O3、Fe3O4之一种或几种的混合物；所述亲水聚合物壳层为带有大量的可反应官能团的功能层，所述官能团选自羧基、羟基和环氧基；所述金属螯合吸附层为络合有大量多价金属离子的功能层，所述金属离子选自Fe3+、Ce3+、Ti4+、zr4+或Hf4+的吸附材料；所述的稳定剂选自聚谷氨酸、柠檬酸钠或聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-马来酸)钠盐；所述磁珠为壳核结构，总粒径为250～800nm；其中，磁性内核的粒径为150～650nm；亲水聚合物壳层的厚度为50～70nm。
优选的，所述官能团选自壳层功能单体为含环氧基团的丙烯酸-2，3-环氧丙酯、丙烯酸(3，4-环氧环己基)甲酯或甲基丙烯酸环氧丙酯。
优选的，具体步骤为：
步骤1，采用溶剂热法制备表面稳定剂修饰的磁性纳米团簇，得到磁性内核，为微球形态；
步骤2，在磁性内核外表面修饰一层硅烷偶联剂；
步骤3，利用回流沉淀聚合，所得微球上包覆一层交联的聚合物，作为壳层；
步骤4，利用含磷酸基团的功能分子与壳层相互作用，修饰上具有强络合能力的磷酸基团；
步骤5，利用磷酸基团与多价金属之间的金属磷酸盐化学反应，使多价金属离子固定在微球表面。
优选的，步骤2中所述硅烷偶联剂为带有双键的γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷；步骤3中所述交联剂为N，N’-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)；步骤4中所述含磷酸基团的功能分子为正磷酸、焦磷酸、多聚磷酸或植酸分子中的一种或多种。
优选的，量取一定量的乙二醇至烧瓶中，并依次加入氯化铁、乙酸钠、PSSMA，通过超声、机械搅拌和加热的方式将其充分分散成均一溶液，之后加入氢氧化钠，50～90℃下继续加热搅拌使完全溶解；将上述溶液升温至180～220℃后恒温反应10～18h，反应结束后通过磁铁吸附分离产物，并用乙醇和水进行多次洗涤，最后将产物分散至去离子水中，由此制得稳定剂修饰的的磁性内核微粒，记为MSPs；其中，氯化铁、乙酸钠、PSSMA、氢氧化钠的摩尔比为3～4∶32～33∶5，乙二醇用量为250～300mL。
优选的，步骤2具体过程如下：将MSPs分散在含乙醇、去离子水、氨水和MPS的混合溶液中，40～80℃机械搅拌12～24h；磁分离收集反应后的产物，用乙醇和水洗涤多次，所得产物记为MM，将其冷冻干燥备用；其中，乙醇、水、氨水、MPS的体积用量比为80∶20∶3∶1～2。
优选的，步骤3具体过程如下：将一定量MBA、GMA和AIBN溶解在乙腈中，将MM分散在装有上述混合物的烧瓶中；将烧瓶连接到冷凝管上，于85～110℃油浴中反应30～90min；待反应结束后，磁分离收集产物，并用水和乙醇多次洗涤，得到MM@PGMA磁性复合微球；其中，MBA、GMA的摩尔比为1：1，AIBN用量为单体总量的2～3wt％，乙腈和MM的用量比为40～50mL：50mg。
优选的，步骤4具体过程如下：将MM@PGMA磁性复合微球均匀分散在丙酮中；室温下边搅拌边滴加含磷酸基团的功能分子，滴加完毕后继续反应12～24h；磁分离收集产物，并用乙醇和水多次洗涤，得MM@PGMA-PA磁性复合微球；其中，MM@PGMA和含磷酸基团的功能分子的用量比为150mg：100～200mg，滴加速度为100～200mg/h；步骤5具体过程如下：将MM@PGMA-PA浸没在金属盐溶液中，室温下反应12～24h，磁分离收集产物，并用去离子水洗涤数次得到MM@PGMA-PA-Ti4+磁珠；其中，金属盐为FeCI3、Fe2(SO4)3、CeCl3、Ce(SO4)2·4H2O、Ti(SO4)2、ZrSiO4、HfO8S2或HfCI4的水溶液中的一种或多种，其盐溶液浓度不低于50mM。
优选的，所述DNA提取纯化为线性短链鲑鱼精DNA以及小鼠成纤维细胞(L929)的基因组DNA的提取纯化。
(三)有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种离子型磁珠及其制备方法，具备以下有益效果：
该离子型磁珠及其制备方法，通过基于多价金属离子磷酸盐化学反应，可以在温和简便的条件下仅通过调节吸附和脱附液的pH值便可实现DNA的高效提取，避免了苛刻的吸附和洗脱条件对DNA结构的破坏和残留盐溶液对PCR扩增的抑制；通过磁珠表面的高亲水性，可以有效避免由于疏水作用产生的非特异吸附；通过含多磷酸基团分子的引入，使微球具有高的磷酸官能团密度，可以保证较高量金属离子的固定，从而有利于DNA的高效负载；通过磁核表面回流沉淀修饰上聚合物作为连接层，使得磁核本身的非特异性吸附降低，同时也起到保护磁核的作用，提高了磁核的抗性和耐酸碱性。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供一种技术方案：包括磁性内核、亲水聚合物壳层、金属螯合吸附层；其中：所述磁性内核为表面修饰有稳定剂的纳米团簇，所述纳米团簇为γ-Fe2O3、m-γ-Fe2O3、Fe3O4之一种或几种的混合物；所述亲水聚合物壳层为带有大量的可反应官能团的功能层，所述官能团选自羧基、羟基和环氧基；所述金属螯合吸附层为络合有大量多价金属离子的功能层，所述金属离子选自Fe3+、Ce3+、Ti4+、zr4+或Hf4+的吸附材料；所述的稳定剂选自聚谷氨酸、柠檬酸钠或聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-马来酸)钠盐；所述磁珠为壳核结构，总粒径为250～800nm；其中，磁性内核的粒径为150～650nm；亲水聚合物壳层的厚度为50～70nm，所述官能团选自壳层功能单体为含环氧基团的丙烯酸-2，3-环氧丙酯、丙烯酸(3，4-环氧环己基)甲酯或甲基丙烯酸环氧丙酯，具体步骤为：步骤1，采用溶剂热法制备表面稳定剂修饰的磁性纳米团簇，得到磁性内核，为微球形态；步骤2，在磁性内核外表面修饰一层硅烷偶联剂；步骤3，利用回流沉淀聚合，所得微球上包覆一层交联的聚合物，作为壳层；步骤4，利用含磷酸基团的功能分子与壳层相互作用，修饰上具有强络合能力的磷酸基团；步骤5，利用磷酸基团与多价金属之间的金属磷酸盐化学反应，使多价金属离子固定在微球表面，步骤2中所述硅烷偶联剂为带有双键的γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷；步骤3中所述交联剂为N，N’-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)；步骤4中所述含磷酸基团的功能分子为正磷酸、焦磷酸、多聚磷酸或植酸分子中的一种或多种，量取一定量的乙二醇至烧瓶中，并依次加入氯化铁、乙酸钠、PSSMA，通过超声、机械搅拌和加热的方式将其充分分散成均一溶液，之后加入氢氧化钠，50～90℃下继续加热搅拌使完全溶解；将上述溶液升温至180～220℃后恒温反应10～18h，反应结束后通过磁铁吸附分离产物，并用乙醇和水进行多次洗涤，最后将产物分散至去离子水中，由此制得稳定剂修饰的的磁性内核微粒，记为MSPs；其中，氯化铁、乙酸钠、PSSMA、氢氧化钠的摩尔比为3～4∶32～33∶5，乙二醇用量为250～300mL，步骤2具体过程如下：将MSPs分散在含乙醇、去离子水、氨水和MPS的混合溶液中，40～80℃机械搅拌12～24h；磁分离收集反应后的产物，用乙醇和水洗涤多次，所得产物记为MM，将其冷冻干燥备用；其中，乙醇、水、氨水、MPS的体积用量比为80∶20∶3∶1～2，步骤3具体过程如下：将一定量MBA、GMA和AIBN溶解在乙腈中，将MM分散在装有上述混合物的烧瓶中；将烧瓶连接到冷凝管上，于85～110℃油浴中反应30～90min；待反应结束后，磁分离收集产物，并用水和乙醇多次洗涤，得到MM@PGMA磁性复合微球；其中，MBA、GMA的摩尔比为1∶1，AIBN用量为单体总量的2～3wt％，乙腈和MM的用量比为40～50mL：50mg，步骤4具体过程如下：将MM@PGMA磁性复合微球均匀分散在丙酮中；室温下边搅拌边滴加含磷酸基团的功能分子，滴加完毕后继续反应12～24h；磁分离收集产物，并用乙醇和水多次洗涤，得MM@PGMA-PA磁性复合微球；其中，MM@PGMA和含磷酸基团的功能分子的用量比为150mg：100～200mg，滴加速度为100～200mg/h；步骤5具体过程如下：将MM@PGMA-PA浸没在金属盐溶液中，室温下反应12～24h，磁分离收集产物，并用去离子水洗涤数次得到MM@PGMA-PA-Ti4+磁珠；其中，金属盐为FeCI3、Fe2(SO4)3、CeCl3、Ce(SO4)2·4H2O、Ti(SO4)2、ZrSiO4、HfO8S2或HfCI4的水溶液中的一种或多种，其盐溶液浓度不低于50mM，所述DNA提取纯化为线性短链鲑鱼精DNA以及小鼠成纤维细胞(L929)的基因组DNA的提取纯化。
工作步骤；步骤1，采用溶剂热法制备表面稳定剂修饰的磁性纳米团簇，得到磁性内核，为微球形态；
步骤2，在磁性内核外表面修饰一层硅烷偶联剂；
步骤3，利用回流沉淀聚合，所得微球上包覆一层交联的聚合物，作为壳层；
步骤4，利用含磷酸基团的功能分子与壳层相互作用，修饰上具有强络合能力的磷酸基团；
步骤5，利用磷酸基团与多价金属之间的金属磷酸盐化学反应，使多价金属离子固定在微球表面。
综上所述，该离子型磁珠及其制备方法，通过基于多价金属离子磷酸盐化学反应，可以在温和简便的条件下仅通过调节吸附和脱附液的pH值便可实现DNA的高效提取，避免了苛刻的吸附和洗脱条件对DNA结构的破坏和残留盐溶液对PCR扩增的抑制；通过磁珠表面的高亲水性，可以有效避免由于疏水作用产生的非特异吸附；通过含多磷酸基团分子的引入，使微球具有高的磷酸官能团密度，可以保证较高量金属离子的固定，从而有利于DNA的高效负载；通过磁核表面回流沉淀修饰上聚合物作为连接层，使得磁核本身的非特异性吸附降低，同时也起到保护磁核的作用，提高了磁核的抗性和耐酸碱性。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (9)

1.一种离子型磁珠及其制备方法，其特征在于：包括磁性内核、亲水聚合物壳层、金属螯合吸附层；其中：所述磁性内核为表面修饰有稳定剂的纳米团簇，所述纳米团簇为γ-Fe2O3、m-γ-Fe2O3、Fe3O4之一种或几种的混合物；所述亲水聚合物壳层为带有大量的可反应官能团的功能层，所述官能团选自羧基、羟基和环氧基；所述金属螯合吸附层为络合有大量多价金属离子的功能层，所述金属离子选自Fe3+、Ce3+、Ti4+、Zr4+或Hf4+的吸附材料；所述的稳定剂选自聚谷氨酸、柠檬酸钠或聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-马来酸)钠盐；所述磁珠为壳核结构，总粒径为250～800nm；其中，磁性内核的粒径为150～650nm；亲水聚合物壳层的厚度为50～70nm。
2.根据权利要求1所述的一种离子型磁珠及其制备方法，其特征在于：所述官能团选自壳层功能单体为含环氧基团的丙烯酸-2,3-环氧丙酯、丙烯酸(3,4-环氧环己基)甲酯或甲基丙烯酸环氧丙酯。
3.根据权利要求1所述的一种离子型磁珠及其制备方法，其特征在于：具体步骤为：
步骤1，采用溶剂热法制备表面稳定剂修饰的磁性纳米团簇，得到磁性内核，为微球形态；
步骤2，在磁性内核外表面修饰一层硅烷偶联剂；
步骤3，利用回流沉淀聚合，所得微球上包覆一层交联的聚合物，作为壳层；
步骤4，利用含磷酸基团的功能分子与壳层相互作用，修饰上具有强络合能力的磷酸基团；
步骤5，利用磷酸基团与多价金属之间的金属磷酸盐化学反应，使多价金属离子固定在微球表面。
4.根据权利要求1所述的一种离子型磁珠及其制备方法，其特征在于：步骤2中所述硅烷偶联剂为带有双键的γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷；步骤3中所述交联剂为N，N′-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)；步骤4中所述含磷酸基团的功能分子为正磷酸、焦磷酸、多聚磷酸或植酸分子中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的一种离子型磁珠及其制备方法，其特征在于：量取一定量的乙二醇至烧瓶中，并依次加入氯化铁、乙酸钠、PSSMA，通过超声、机械搅拌和加热的方式将其充分分散成均一溶液，之后加入氢氧化钠，50～90℃下继续加热搅拌使完全溶解；将上述溶液升温至180～220℃后恒温反应10～18h，反应结束后通过磁铁吸附分离产物，并用乙醇和水进行多次洗涤，最后将产物分散至去离子水中，由此制得稳定剂修饰的的磁性内核微粒，记为MSPs；其中，氯化铁、乙酸钠、PSSMA、氢氧化钠的摩尔比为3～4:32～33:5，乙二醇用量为250～300mL。
6.根据权利要求1所述的一种离子型磁珠及其制备方法，其特征在于：步骤2具体过程如下：将MSPs分散在含乙醇、去离子水、氨水和MPS的混合溶液中，40～80℃机械搅拌12～24h；磁分离收集反应后的产物，用乙醇和水洗涤多次，所得产物记为MM，将其冷冻干燥备用；其中，乙醇、水、氨水、MPS的体积用量比为80:20:3:1～2。
7.根据权利要求1所述的一种离子型磁珠及其制备方法，其特征在于：步骤3具体过程如下：将一定量MBA、GMA和AIBN溶解在乙腈中，将MM分散在装有上述混合物的烧瓶中；将烧瓶连接到冷凝管上，于85～110℃油浴中反应30～90min；待反应结束后，磁分离收集产物，并用水和乙醇多次洗涤，得到MM@PGMA磁性复合微球；其中，MBA、GMA的摩尔比为1:1，AIBN用量为单体总量的2～3wt％，乙腈和MM的用量比为40～50mL:50mg。
8.根据权利要求1所述的一种离子型磁珠及其制备方法，其特征在于：步骤4具体过程如下：将MM@PGMA磁性复合微球均匀分散在丙酮中；室温下边搅拌边滴加含磷酸基团的功能分子，滴加完毕后继续反应12～24h；磁分离收集产物，并用乙醇和水多次洗涤，得MM@PGMA-PA磁性复合微球；其中，MM@PGMA和含磷酸基团的功能分子的用量比为150mg:100～200mg，滴加速度为100～200mg/h；步骤5具体过程如下：将MM@PGMA-PA浸没在金属盐溶液中，室温下反应12～24h，磁分离收集产物，并用去离子水洗涤数次得到MM@PGMA-PA-Ti4+磁珠；其中，金属盐为FeCI3、Fe2(SO4)3、CeCl3、Ce(SO4)2·4H2O、Ti(SO4)2、ZrSiO4、HfO8S2或HfCI4的水溶液中的一种或多种，其盐溶液浓度不低于50mM。
9.根据权利要求1所述的一种离子型磁珠及其制备方法，其特征在于：所述DNA提取纯化为线性短链鲑鱼精DNA以及小鼠成纤维细胞(L929)的基因组DNA的提取纯化。
CN202311318650.6A 2023-10-11 2023-10-11 一种离子型磁珠及其制备方法 Pending CN117373771A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202311318650.6A CN117373771A (zh) 2023-10-11 2023-10-11 一种离子型磁珠及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202311318650.6A CN117373771A (zh) 2023-10-11 2023-10-11 一种离子型磁珠及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN117373771A true CN117373771A (zh) 2024-01-09

Family

ID=89399728

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202311318650.6A Pending CN117373771A (zh) 2023-10-11 2023-10-11 一种离子型磁珠及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN117373771A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101646610B1 (ko) 생체 물질 정제용 고활성 실리카 자성나노입자 및 이의 제조 방법
JP4980349B2 (ja) 閉鎖された超薄シリカ層を有する磁性粒子、その製造方法および使用
JP2002543979A (ja) ｐＨ依存型イオン交換マトリックス及び核酸の単離におけるその使用法
EP0757106A2 (en) Nucleic acid-bondable magnetic carrier and method for isolating nucleic acid using the same
CN104258833B (zh) 基于核酸适配体/纳米金/多孔聚合物涂层新型固相微萃取纤维的制备方法
EP1260595A2 (en) Nucleic acid-bondable magnetic carrier and method for isolating nucleic acid using the same
CN109055359A (zh) 一种核酸提取试剂盒及核酸提取方法
CN101229504A (zh) 氧化铁-氧化铝复合纳米除氟材料的制备及应用
CN105642239A (zh) 核酸提取用磁性微珠的制备方法
JP2018198599A (ja) 核酸の精製のための１工程法
JP5183905B2 (ja) 担体、担体の製造方法、およびその利用
CN114177893B (zh) 磁性微球、制备方法及应用
CN117373771A (zh) 一种离子型磁珠及其制备方法
CN112563016B (zh) 核酸提取用磁性微球的制备方法、所制备的产品及用途
WO2008058996A2 (de) Verfahren zur herstellung von magnetischen kieselsäurepartikeln
JP4196459B2 (ja) 磁性担体、その製造方法及びこれを用いた核酸抽出方法
US9441265B2 (en) Compositions and methods for sample preparation
CN114906876B (zh) 一种基于聚乙烯醇修饰的四氧化三铁磁珠的制备方法
CN116550303A (zh) 一种用于核酸提取的自旋性聚丙烯酸磁性介孔载体的制备方法
CN116272903A (zh) 用于提取纯化dna的离子型磁珠及其制备方法和应用
CN1966151A (zh) 负载二氧化锆的小球型硅胶超强酸催化剂
CN105597657B (zh) 一种功能化复合金属氧化物材料及其制备方法和应用
CN111229178A (zh) 一种聚-（甲基丙烯酸-乙二醇二丙烯酸酯）@Fe3O4水处理剂及其制备方法
CN109337309B (zh) 储水多孔二氧化硅磁性颗粒及其制备工艺与应用
CN117089020B (zh) 一种基于纳米TiO2的Co(II)离子印迹吸附材料的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination