CN117322631B - 调节肠道的益生菌组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种调节肠道的益生菌组合物及制备方法。本发明调节肠道的益生菌组合物的制备方法为：对植物源益生菌(植物乳杆菌、长双歧杆菌)进行接种培养、扩大培养并调节浓度得到3.0×109CFU/mL的菌悬液，与植物蛋白‑多糖的美德拉反应产物及L‑茶氨酸通过喷雾干燥得到。与现有技术中直接添加大豆分离蛋白、乳清蛋白、多糖相比，本发明将植物蛋白‑多糖通过美德拉反应后应用于益生菌组合物中能够有效提高益生菌组合物的储存稳定性及胃液耐受性。

Description

调节肠道的益生菌组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉微生物组合物技术领域，尤其涉及一种调节肠道的益生菌组合物及其制备方法。
背景技术
益生菌是有益于肠道健康的微生物，具有诸多好处。例如：有助于调节肠道菌群平衡，抑制致病菌的生长，维护肠道菌群的稳定性。在肠道中产生酶和其他有益物质，可以帮助消化和吸收营养物质，增强养分的利用率。增强肠道黏膜屏障的完整性和功能。有助于增加黏膜层的厚度，减少有害物质的渗透，防止细菌和毒素进入血液循环，从而维护肠道屏障的健康。增强肠道免疫功能，促进免疫细胞的活性，增强抗炎作用，有助于预防肠道炎症和自身免疫疾病。缓解肠道不适症状，如腹胀、腹泻、便秘等。改善肠道功能，减轻不适症状，提高整体的肠道健康感。
相比普通的益生菌，植物源益生菌通常来自天然植物或植物发酵产物，具有较高的安全性。它们往往不含有害物质和副作用，并且对大多数人群都适用。植物源益生菌具有较好抗炎和抗氧化活性，能够减轻炎症反应、降低氧化应激，对肠道的炎症性疾病和氧化损伤也有较好的保护作用。
CN116515808A公开了一种益生菌微胶囊及其应用，该发明利用含有乳清蛋白、阿拉伯胶、金耳多糖的壁材保护剂与益生菌组合制备得到益生菌微胶囊，制备得到的益生菌微胶囊能够很好的保护益生菌在外界不利条件下的细胞活性，同时制备的菌剂表现出更好的性质及更优良的贮存性能，能显著提高益生菌菌剂的贮存稳定性能和益生菌的肠道粘液的定植能力。但其储存稳定性仍然不够理想。
发明内容
有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是改善益生菌组合物的储存稳定性及胃液耐受性。
为实现上述目的，本发明提供了一种调节肠道的益生菌组合物的制备方法，具体为：将植物乳杆菌悬浮液、长双歧杆菌悬浮液、L-茶氨酸、植物蛋白-多糖复合物混合均匀后喷雾干燥，即得。
优选的，所述植物乳杆菌悬浮液的制备方法为：接种植物乳杆菌AR113到MRS液体培养基中，在30-40℃下静置培养8-16h，得到培养液；然后将培养液加入到MRS液体培养基中，在30-40℃下培养18-36h，离心、洗涤，用无菌水调节菌悬液至3.0×109CFU/mL，即得。
相比普通的益生菌，植物源益生菌通常来自天然植物或植物发酵产物，具有较高的安全性。它们往往不含有害物质和副作用，并且对大多数人群都适用。植物源益生菌具有较好抗炎和抗氧化活性，能够减轻炎症反应、降低氧化应激，对肠道的炎症性疾病和氧化损伤也有较好的保护作用。本发明选的用植物乳杆菌AR113与长双歧杆菌BL21的来源均为植物。其作为肠道调节的益生菌具有较好的肠道调节效果。
植物乳杆菌，植物乳杆菌在存在于许多食品中，食用历史悠久，安全性高；同时也存在于人体中，是人体胃肠道内的益生菌群，代谢产生多种天然抑菌物质，对人体健康具有很大的促进作用。大部分乳杆菌能定殖于肠道中，并在利用食物过程中产生许多代谢产物，部分短链脂肪酸和乳酸是植物乳杆菌主要代谢产物。
优选的，所述长双歧杆菌悬浮液的制备方法为：接种长双歧杆菌BL21接种于双歧杆菌液体培养基中，在30-40℃下静置培养8-16h，得到培养液；然后将培养液加入到双歧杆菌液体培养基中，在30-40℃下培养18-36h，离心、洗涤，用无菌水调节菌悬液至3.0×109CFU/mL，，即得。
长双歧杆菌，能够将糖发酵成乳酸，这有助于降低肠道的pH值还可以改善腹部疼痛/不适，腹胀，排便困难。
L-茶氨酸，一种非蛋白质氨基酸，从茶叶中提取得到。L-茶氨酸能够促进植物乳杆菌、长双歧杆菌等有益菌的繁殖，抑制梭状芽孢杆菌等有害细菌，在肠道中创造一个有利于有效营养吸收、新陈代谢和改善肠道免疫功能的环境，对肠道微生物群具有有益的作用。
优选的，所述植物蛋白-多糖复合物的制备方法为：将3-8g植物蛋白、0.5-3g多糖、89-96.5g水混合均匀，在70-90℃下搅拌混合4-10h，冷却至室温，即得。
优选的，所述植物蛋白为大豆分离蛋白、乳清蛋白、无腺体棉籽蛋白中任意一种。所述多糖为木糖、黄芪多糖、菊糖中的任意一种。
进一步优选的，所述植物蛋白-多糖复合物为无腺体棉籽蛋白-菊糖复合物，制备方法为：将3-8g无腺体棉籽蛋白、0.5-3g菊糖、89-96.5g水混合均匀，在70-90℃下搅拌混合4-10h，冷却至室温，即得。
优选的，所述调节肠道的益生菌组合物的制备方法，包括如下步骤：
接种1.0mL植物乳杆菌AR113到30-60mL MRS液体培养基中，在30-40℃下静置培养8-16h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到80-120mL MRS培养基中，在30-40℃下培养18-36h，用无菌生理盐水离心洗涤3-5次，用无菌水调节菌悬液至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于30-60mL双歧杆菌液体培养基中，在30-40℃下静置培养8-16h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到80-120mL双歧杆菌液体培养基中，在30-40℃下培养18-36h，用无菌生理盐水离心洗涤3-5次，用无菌水调节菌悬液至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将1-5mL植物乳杆菌悬浮液、1-5mL长双歧杆菌悬浮液、1-5g L-茶氨酸、30-60mL植物蛋白-多糖复合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
优选的，所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为110-130℃，出口空气温度为60-90℃，进料速度240-350mL/h，空气流动速度240-350L/h。
本发明的有益效果：
1、与现有技术相比，本发明采用植物源益生菌，具有较高的安全性，不含有害物质和副作用，并且对大多数人群都适用。
2、相比现有技术，本发明通过将植物蛋白与多糖进行美德拉反应，应用于益生菌组合物中，能够有效提高益生菌组合物的储存稳定性及胃液耐受性。
具体实施方式
使用具体化学物质的参数，来源。
MRS培养基：蛋白胨10g，无水乙酸钠3g，磷酸氢二钾2g，七水合硫酸镁0.575g，一水合硫酸锰0.25g，葡萄糖20g，柠檬酸三钠2.42g，酵母浸粉4g，牛肉浸膏8g，吐温80 1g，用蒸馏水1L，调pH至6.0。
双歧杆菌培养基：蛋白胨10g，无水乙酸钠3g，磷酸氢二钾2g，七水合硫酸镁0.575g，一水合硫酸锰0.25g，葡萄糖20g，柠檬酸三钠2.42g，酵母浸粉4g，牛肉浸膏8g，吐温80 1g，L-半胱氨酸0.5g，蒸馏水1L。
实施例中的大豆分离蛋白为常规市场。
木糖，CAS号：133-56-2。
实施例中的黄芪多糖采用常规的水提醇沉法，具体为：将10黄芪粉末加入到800mL水中，在90℃下回流2.5h，离心后去上清液，加入无水乙醇析出沉淀，离心取沉淀，洗涤后得到黄芪多糖。
实施例中菊糖采用常规的水提醇沉法，具体为：将10g菊芋干粉加入到1000mL水中，在90℃下回流提取90min，离心后去上清液，加入无水乙醇析出沉淀，离心取沉淀，洗涤后得到菊糖。
实施例中的乳清蛋白为常规市场。
无腺体棉籽蛋白采用常规的方法制备而成：将大豆粉碎、过筛，然后用石油醚脱脂；脱脂后的大豆粉按1:10的比例加入蒸馏水，调节pH至8.0，并通过磁力搅拌进行混合以促进溶解；在50℃水浴中加热60min，然后5000rpm离心30min，弃沉淀，将pH调节至4.8，在4℃下放置过夜，并5000rpm离心50min。将沉淀溶解后调节pH值为7.0；再透析和冷冻干燥后获得。
实施例1
调节肠道的益生菌组合物的制备方法：
接种1mL植物乳杆菌AR113到50mL MRS液体培养基中，在37℃下静置培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mLMRS培养基中，在37℃下培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于50mL双歧杆菌液体培养基中培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL双歧杆菌液体培养基中培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液、1.5g L-茶氨酸、50mL大豆分离蛋白-木糖复合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为120℃，出口空气温度为70℃，进料速度320mL/h，空气流动速度320L/h。
所述大豆分离蛋白-木糖复合物的制备方法为将4g大豆分离蛋白、1g木糖、95g水混合均匀，在80℃下搅拌混合5h，冷却至室温，即得。
实施例2
调节肠道的益生菌组合物的制备方法：
接种1mL植物乳杆菌AR113到50mL MRS液体培养基中，在37℃下静置培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL MRS培养基中，在37℃下培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于50mL双歧杆菌液体培养基中培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL双歧杆菌液体培养基中培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液、1.5g L-茶氨酸、50mL大豆分离蛋白-黄芪多糖复合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为120℃，出口空气温度为70℃，进料速度320mL/h，空气流动速度320L/h。
所述大豆分离蛋白-黄芪多糖复合物的制备方法为将4g大豆分离蛋白、1g黄芪多糖、95g水混合均匀，在80℃下搅拌混合5h，冷却至室温，即得。
实施例3
调节肠道的益生菌组合物的制备方法：
接种1mL植物乳杆菌AR113到50mL MRS液体培养基中，在37℃下静置培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL MRS培养基中，在37℃下培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于50mL双歧杆菌液体培养基中培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL双歧杆菌液体培养基中培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液、1.5g L-茶氨酸、50mL大豆分离蛋白-菊糖复合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为120℃，出口空气温度为70℃，进料速度320mL/h，空气流动速度320L/h。
所述大豆分离蛋白-菊糖复合物的制备方法为将4g大豆分离蛋白、1g菊糖、95g水混合均匀，在80℃下搅拌混合5h，冷却至室温，即得。
实施例4
调节肠道的益生菌组合物的制备方法：
接种1mL植物乳杆菌AR113到50mL MRS液体培养基中，在37℃下静置培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL MRS培养基中，在37℃下培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于50mL双歧杆菌液体培养基中培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL双歧杆菌液体培养基中培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液、1.5g L-茶氨酸、50mL乳清蛋白-菊糖复合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为120℃，出口空气温度为70℃，进料速度320mL/h，空气流动速度320L/h。
所述乳清蛋白-菊糖复合物的制备方法为将4g乳清蛋白、1g菊糖、95g水混合均匀，在80℃下搅拌混合5h，冷却至室温，即得。
实施例5
调节肠道的益生菌组合物的制备方法：
接种1mL植物乳杆菌AR113到50mL MRS液体培养基中，在37℃下静置培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL MRS培养基中，在37℃下培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于50mL双歧杆菌液体培养基中培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL双歧杆菌液体培养基中培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液、1.5g L-茶氨酸、50mL无腺体棉籽蛋白-菊糖复合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为120℃，出口空气温度为70℃，进料速度320mL/h，空气流动速度320L/h。
所述无腺体棉籽蛋白-菊糖复合物的制备方法为将4g无腺体棉籽蛋白、1g菊糖、95g水混合均匀，在80℃下搅拌混合5h，冷却至室温，即得。
对照例1
调节肠道的益生菌组合物的制备方法：
接种1mL植物乳杆菌AR113到50mL MRS液体培养基中，在37℃下静置培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL MRS培养基中，在37℃下培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于50mL双歧杆菌液体培养基中培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL双歧杆菌液体培养基中培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液、1.5g L-茶氨酸、50mL大豆分离蛋白-木糖混合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为120℃，出口空气温度为70℃，进料速度320mL/h，空气流动速度320L/h。
所述大豆分离蛋白-木糖混合物的制备方法为将4g大豆分离蛋白、1g木糖、95g水混合均匀，即得。
对照例2
调节肠道的益生菌组合物的制备方法：
接种1mL植物乳杆菌AR113到50mL MRS液体培养基中，在37℃下静置培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL MRS培养基中，在37℃下培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于50mL双歧杆菌液体培养基中培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL双歧杆菌液体培养基中培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液、1.5g L-茶氨酸、50mL大豆分离蛋白-黄芪多糖混合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为120℃，出口空气温度为70℃，进料速度320mL/h，空气流动速度320L/h。
所述大豆分离蛋白-黄芪多糖混合物的制备方法为将4g大豆分离蛋白、1g黄芪多糖、95g水混合均匀，即得。
对照例3
调节肠道的益生菌组合物的制备方法：
接种1mL植物乳杆菌AR113到50mL MRS液体培养基中，在37℃下静置培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL MRS培养基中，在37℃下培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于50mL双歧杆菌液体培养基中培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL双歧杆菌液体培养基中培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液、1.5g L-茶氨酸、50mL大豆分离蛋白-菊糖混合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为120℃，出口空气温度为70℃，进料速度320mL/h，空气流动速度320L/h。
所述大豆分离蛋白-菊糖混合物的制备方法为将4g大豆分离蛋白、1g菊糖、95g水混合均匀，即得。
对照例4
调节肠道的益生菌组合物的制备方法：
接种1mL植物乳杆菌AR113到50mL MRS液体培养基中，在37℃下静置培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL MRS培养基中，在37℃下培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于50mL双歧杆菌液体培养基中培养12h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到100mL双歧杆菌液体培养基中培养24h，用无菌生理盐水离心洗涤3次，用无菌水将菌悬液调至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液、50mL无腺体棉籽蛋白-菊糖复合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为120℃，出口空气温度为70℃，进料速度320mL/h，空气流动速度320L/h。
所述无腺体棉籽蛋白-菊糖复合物的制备方法为将4g无腺体棉籽蛋白、1g菊糖、95g水混合均匀，在80℃下搅拌混合5h，冷却至室温，即得。
测试例1
储存稳定性测试
分别取实施例及对比例的调节肠道的益生菌组合物10g保存在自封袋中密封，置于25℃避光条件下放置30天，取出样品，检测活菌数量的变化。对照组是指将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液混合均匀后喷雾干燥得到益生菌组合物。
表1储存稳定性
0天 第30天 存活率
实施例1 2.78×108CFU/g 1.93×108CFU/g 69.42％
实施例2 2.47×108CFU/g 1.67×108CFU/g 67.61％
实施例3 2.83×108CFU/g 2.32×108CFU/g 82.08％
实施例4 2.61×108CFU/g 2.12×108CFU/g 81.23％
实施例5 2.73×108CFU/g 2.42×108CFU/g 88.64％
对比例1 2.94×108CFU/g 1.24×108CFU/g 42.18％
对比例2 2.89×108CFU/g 1.34×108CFU/g 46.37％
对比例3 2.52×108CFU/g 1.14×108CFU/g 45.24％
对比例4 2.56×108CFU/g 2.11×108CFU/g 82.42％
对照组 6.15×107CFU/g 1.41×107CFU/g 22.93％
根据实施例1-3与对比例1-3的对比，可以发现相比直接添加大豆分离蛋白及糖类，将大豆分离蛋白与木糖、黄芪多糖、菊糖通过特定的温度处理后得到的复合物应用于益生菌的制备中能够有效提高其储存稳定性。起可能的原因在于：在合适的温度下，大豆分离蛋白与糖类物质能够进行美拉德反应得到具备良好生物相容性、乳化性和成膜性的复合物。其在益生菌组合物喷雾干燥的过程中能够有效成膜在菌体表面形成致密的保护壳层，从而提高益生菌组合物的存活率(储存稳定性)。再者，益生菌组合物在存储过程中，其微囊化后表面的膜被氧化也是导致益生菌失活的重要原因。而大豆分离蛋白与糖类物质通过美拉德反应后的复合物可能具备更好的抗氧化能力，能够有效减少微囊化益生菌表面膜层的氧化，从而提高了其存储稳定性。
发明人还发现，与不添加L-茶氨酸相比，添加L-茶氨酸的益生菌组合物的储存稳定性更好。起可能的原因在于：L-茶氨酸能够与益生菌的细胞膜的膜脂质层相互作用，形成新的结构，提高其在不利条件下的生存能力。
测试例2
模拟胃液耐受测试
分别称取0.1g实施例及对比例的调节肠道的益生菌组合物加入到10mL人工模拟胃液中，转移至37℃恒温摇床中，在200rpm的转速下震荡培养1h；取1mL样品，计活菌数。
对照组是指将3mL植物乳杆菌悬浮液、3mL长双歧杆菌悬浮液混合均匀后喷雾干燥得到益生菌组合物；取0.1g采用上述方法进行模拟胃液实验。
人工模拟胃液：取0.1mol/L盐酸16.4mL，先加适量无菌水溶解，再加胃蛋白酶10g，最后定容至1L，调节pH值为1.2，过0.22μm滤膜除菌，即得。
表2
根据实施例3-5的对比可以发现，采用菊糖与无腺体棉籽蛋白过特定的温度处理后得到的复合物应用于益生菌组合物的胃液耐受明显优于采用菊糖和大豆分离蛋白及乳清蛋白的益生菌组合物。起可能的原因在于：无腺体棉籽蛋白的结构特点与大豆分离蛋白和乳清蛋白不同，与菊糖之间的交互作用能够更加有利于对益生菌的保护。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。

Claims (6)

1.一种调节肠道的益生菌组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将植物乳杆菌悬浮液、长双歧杆菌悬浮液、L-茶氨酸、植物蛋白-多糖复合物混合均匀后喷雾干燥，即得；
所述植物蛋白-多糖复合物为无腺体棉籽蛋白-菊糖复合物，所述无腺体棉籽蛋白-菊糖复合物的制备方法为将4g无腺体棉籽蛋白、1g菊糖、95g水混合均匀，在80℃下搅拌混合5h，冷却至室温，即得。
2.如权利要求1所述的调节肠道的益生菌组合物的制备方法，其特征在于，所述植物乳杆菌悬浮液的制备方法为：接种植物乳杆菌AR113到MRS液体培养基中，在30-40℃下静置培养8-16h，得到培养液；然后将培养液加入到MRS液体培养基中，在30-40℃下培养18-36h，离心、洗涤，用无菌水调节菌悬液至3.0×109CFU/mL，即得。
3.如权利要求1所述的调节肠道的益生菌组合物的制备方法，其特征在于，所述长双歧杆菌悬浮液的制备方法为：接种长双歧杆菌BL21接种于双歧杆菌液体培养基中，在30-40℃下静置培养8-16h，得到培养液；然后将培养液加入到双歧杆菌液体培养基中，在30-40℃下培养18-36h，离心、洗涤，用无菌水调节菌悬液至3.0×109CFU/mL，即得。
4.如权利要求1-3任一项所述的调节肠道的益生菌组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
接种1.0mL植物乳杆菌AR113到30-60mL MRS液体培养基中，在30-40℃下静置培养8-16h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到80-120mL MRS培养基中，在30-40℃下培养18-36h，用无菌生理盐水离心洗涤3-5次，用无菌水调节菌悬液至3.0×109CFU/mL，得到植物乳杆菌悬浮液；
接种1mL长双歧杆菌BL21接种于30-60mL双歧杆菌液体培养基中，在30-40℃下静置培养8-16h，得到培养液；然后将2mL培养液加入到80-120mL双歧杆菌液体培养基中，在30-40℃下培养18-36h，用无菌生理盐水离心洗涤3-5次，用无菌水调节菌悬液至3.0×109CFU/mL，得到长双歧杆菌悬浮液；
将1-5mL植物乳杆菌悬浮液、1-5mL长双歧杆菌悬浮液、1-5g L-茶氨酸、30-60mL植物蛋白-多糖复合物混合均匀后喷雾干燥得到所述调节肠道的益生菌组合物。
5.如权利要求4所述的调节肠道的益生菌组合物的制备方法，其特征在于，所述喷雾干燥参数为：入口空气温度为110-130℃，出口空气温度为60-90℃，进料速度240-350mL/h，空气流动速度240-350L/h。
6.一种调节肠道的益生菌组合物，其特征在于：由权利要求1-5任一项所述的方法制备而成。
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