CN117320749A

CN117320749A - 用于治疗或预防重症肌无力的药物组合物

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Publication number: CN117320749A
Application number: CN202280030321.9A
Authority: CN
Inventors: 小泽孝俊; 周曼迪; 伊藤创; 吉田俊介; 吉莉安·史密斯; 希恩·蓝侬-克莱姆斯; 培创卡·克鲁摩法; 汉娜·席柏包曼
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG; Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG; Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2021-03-12
Filing date: 2022-03-11
Publication date: 2023-12-29
Also published as: TW202302143A; US20240158518A1; KR20230156368A; AU2022232856A1; CA3211328A1; JPWO2022191306A1; MX2023010491A; IL305793A; WO2022191306A1; AU2022232856A9; EP4306127A1

Abstract

本公开提供了用于治疗或预防重症肌无力的药物组合物，其包含萨特利珠单抗作为活性成分。

Description

用于治疗或预防重症肌无力的药物组合物

技术领域

本发明涉及用于治疗或预防重症肌无力的药物组合物。

背景技术

重症肌无力(MG)是自身免疫性疾病，其中神经肌肉接头处肌肉侧的受体被自身抗体破坏。目前尚无完全治愈该疾病的疗法，并且在日本，其被指定为指定的难治性疾病(NPL1)。全身性重症肌无力(全身性MG，gMG)的现有疗法基于药物治疗(NPL1)。

目前用于长期治疗重症肌无力的治疗药物，例如类固醇和免疫抑制剂，可能引起各种副作用，包括外表退化、骨质疏松、糖耐量受损、腹泻、肌肉痉挛和感染。此外，由于许多现有的治疗药物尚未经过随机对照试验来测试其对MG患者的疗效，因此其证据有限。对于静脉注射免疫球蛋白疗法(IVIg)和血液净化/替代疗法，其效果是暂时的，因此需要常规治疗(包括住院治疗)才能长期控制症状，这可能给患者带来巨大的身体、精神和经济负担。因此，治疗或预防MG的需求尚未得到满足。

最近，只有当症状难以通过IVIg或血液净化疗法控制时，生物制剂依库珠单抗才纳为抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体阳性的全身性重症肌无力患者的保险范围。然而，它尚未被积极开具处方，因为目前它不适用于抗肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)抗体阳性的MG、抗低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白4(Lrp4)抗体阳性的MG或自身抗体阴性的MG，而且，它需要接种疫苗来预防脑膜炎球菌感染，并且非常昂贵。

因此，在日本国内外，均需要对MG具有既定疗效和安全性的新治疗或预防方法。

在MG的研究中，在非临床动物模型和MG患者的血液和肌肉组织中观察到IL-6水平升高，并且已显示施用抗IL-6抗体对MG大鼠有治疗作用(NPL2至NPL8)，这表明IL-6可能参与MG的病理机制。还显示托珠单抗(IL-6信号传导阻断剂)对两名中度和重度AChR抗体阳性MG且对利妥昔单抗反应不足的患者有效(NPL2)。此外，还表明IL-6拮抗剂有利于治疗免疫性疾病(PTL1)。因此，抑制IL-6信号传导可能作为MG患者的治疗选择。

人源化抗体(如托珠单抗)是第一代抗体药物。通过改进第一代抗体药物，正在开发具有改进的疗效、便利性和成本的第二代抗体药物。第二代抗体药物中有萨特利珠单抗(SA237)，其是新型抗IL-6受体抗体，已向其应用改进技术，例如增强抗原结合能力、药代动力学和稳定性以及降低免疫原性风险(PTL2和PTL3)。

萨特利珠单抗是pH依赖性结合人源化抗IL-6受体单克隆抗体。它特异性靶向人IL-6受体(IL-6R)，并且通过抑制IL-6与膜结合IL-6R和可溶性IL-6R的结合来抑制IL-6信号传导。通过修饰托珠单抗的氨基酸序列构建萨特利珠单抗，以延长其血浆半衰期。萨特利珠单抗还具有与其抗原IL-6R的pH依赖性结合特性，并显示出降低的抗体分子等电点和与FcRn更强的结合。此外，其Fc区已经修饰以最大限度地减少抗体依赖性细胞毒性和补体依赖性细胞毒性效应活性。

与本申请的发明相关的现有技术文献信息如下所示。

[引用列表]

[非专利文献]

[NPL1]Practical Guideline for Myasthenia Gravis(MG)2014(editorialsupervisor:Societas Neurologica Japonica),Nankodo Co.,Ltd.

[NPL2]D I Jonsson,et al.,Beneficial effect of tocilizumab inmyasthenia gravis refractory to rituximab.Neuromuscular Disorders 27(2017)565-568

[NPL3]Deng C,Goluszko E,Tuzun E,et al.,Resistance to experimentalautoimmune myasthenia gravis in IL-6-deficient mice is associated withreduced germinal center formation and C3 production.JImmunol.2002；169(2):1077-83.

[NPL4]Hu Y,Wang J,Rao J,et al.,Comparison of peripheral blood B cellsubset ratios and B cell-related cytokine levels between ocular andgeneralized myasthenia gravis.International Immunopharmacology 2020；80:106130.

[NPL5]Zhang CJ,et al.,Augmentation of Circulating Follicular Helper TCells and Their Impact on Autoreactive B Cells in Myasthenia Gravis.JImmunol.2016 Oct 1；197(7):2610-7.

[NPL6]Mocchegiani E,et al.,Different age-related effects ofthymectomy in myasthenia gravis:role of thymoma,zinc,thymulin,IL-2 and IL-6.Mech Ageing Dev.2000 Aug 15；117(1-3):79-91.

[NPL7]Maurer,M.,Bougoin,S.,Feferman,T.et al.,IL-6 and Akt areinvolved in muscular pathogenesis in myasthenia gravis.acta neuropatholcommun 3,1(2015).

[NPL8]Miriam C.Souroujon et al.,Regulatory T cell-basedimmunotherapies in experimental autoimmune myasthenia gravis.Annals of theNew York Academy of Science,2012 1274 120-126.

[专利文献]

[PTL1]WO2005/028514

[PTL2]WO2010/035769

[PTL3]WO2016/136933

发明内容

[技术问题]

萨特利珠单抗的作用机制不同于现有的MG治疗药物。具体地，萨特利珠单抗特异性靶向人IL-6R，并且通过阻断IL-6与膜结合和可溶性IL-6R(sIL-6R)的结合来抑制IL-6信号传导。其有望成为MG的新治疗选择。

鉴于这些情况提出本发明。本发明的目的是应用萨特利珠单抗，作为第二代抗体药物，其是抗IL-6受体抗体，已向其应用改进技术，例如增强抗原结合能力、药代动力学和稳定性以及降低免疫原性风险，并且其还是与现有治疗药物作用机制不同的抗体，即抑制IL-6信号传导，从而治疗或预防MG。

[解决问题的方案]

为了解决上述问题，本发明人侧重于第二代抗体药物萨特利珠单抗抑制IL-6信号传导的作用，并发现其可用于治疗MG，从而完成本发明。

本发明具体包括以下：

[1]

用于治疗或预防重症肌无力患者的药物组合物，其包含以下作为活性成分：

(i)抗体，其含有包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的重链CDR1、包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的重链CDR2、包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列的重链CDR3、包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的轻链CDR1、包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的轻链CDR2和包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的轻链CDR3；

(ii)抗体，其含有包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的重链可变区和包含SEQ IDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区；或

(iii)抗体，其含有包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的重链和包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的轻链，

其中该患者呈抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体阳性、抗肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)抗体阳性或抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4(Lrp4)抗体阳性。

[2]

[1]的药物组合物，其中该抗体是萨特利珠单抗。

[3]

[1]或[2]的药物组合物，其中该重症肌无力患者呈抗MuSK抗体阳性或抗Lrp4抗体阳性。

[4]

[1]至[3]中任一项的药物组合物，其中该重症肌无力患者是被诊断患有表现出属于美国重症肌无力基金会(MGFA)临床分类的II级、III级或IV级的全身性肌无力的重症肌无力的患者。

[5]

[1]至[3]中任一项的药物组合物，其中该重症肌无力患者是总MG日常生活活动(MG-ADL)评分为5或更高的患者，并且其中该评分的一半或更多与非眼部症状有关。

[6]

[1]至[3]中任一项的药物组合物，其中该重症肌无力是全身性重症肌无力。

[7]

[1]至[3]中任一项的药物组合物，其降低MG-ADL评分。

[8]

[1]至[3]中任一项的药物组合物，其降低定量重症肌无力(QMG)评分、15项重症肌无力(MG)生活质量量表(修订版)(MG-QOL 15r)评分、神经病学生活质量疲劳简表(Neuro-QOL疲劳)评分或重症肌无力综合(MGC)评分。

[9]

[1]至[8]中任一项的药物组合物，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重为大于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用。

[10]

[1]至[8]中任一项的药物组合物，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[11]

[1]至[8]中任一项的药物组合物，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[12]

[1]至[11]中任一项的药物组合物，其中该组合物在短间隔给药期之后以标准给药间隔施用，在该短间隔给药期期间，该组合物以与标准剂量相同的剂量以短于该标准给药间隔的给药间隔多次施用。

[13]

一种用于治疗或预防重症肌无力患者的试剂，其含有包含以下的抗体作为有效成分，其中该患者呈抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体阳性、抗肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)抗体阳性或抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4(Lrp4)抗体阳性：

(iii)抗体，其含有包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的重链和包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的轻链。

[14]

[13]的试剂，其中该重症肌无力患者是被诊断患有表现出属于美国重症肌无力基金会(MGFA)临床分类的II级、III级或IV级的全身性肌无力的重症肌无力的患者。

[15]

[13]或[14]的试剂，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重为大于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用。

[16]

[13]或[14]的试剂，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[17]

[13]或[14]的试剂，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[18]

用于治疗或预防重症肌无力的方法，其包括向有需要的患者施用包含以下的抗体，其中该患者呈抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体阳性、抗肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)抗体阳性或抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4(Lrp4)抗体阳性：

[19]

[18]的方法，其中该重症肌无力患者是被诊断患有表现出属于美国重症肌无力基金会(MGFA)临床分类的II级、III级或IV级的全身性肌无力的重症肌无力的患者。

[20]

[18]或[19]的方法，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重为大于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用。

[21]

[18]或[19]的方法，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[22]

[18]或[19]的方法，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[23]

包含以下的抗体在制备用于治疗或预防重症肌无力的试剂中的用途，其中该患者呈抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体阳性、抗肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)抗体阳性或抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4(Lrp4)抗体阳性：

[24]

[23]的用途，其中该重症肌无力患者是被诊断患有表现出属于美国重症肌无力基金会(MGFA)临床分类的II级、III级或IV级的全身性肌无力的重症肌无力的患者。

[25]

[23]或[24]的用途，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重为大于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用。

[26]

[23]或[24]的用途，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[27]

[23]或[24]的用途，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[28]

用于治疗或预防重症肌无力患者的抗体，其中该抗体包含以下，并且其中该患者呈抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体阳性、抗肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)抗体阳性或抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4(Lrp4)抗体阳性：

[29]

[28]的抗体，其中该重症肌无力患者是被诊断患有表现出属于美国重症肌无力基金会(MGFA)临床分类的II级、III级或IV级的全身性肌无力的重症肌无力的患者。

[30]

[28]或[29]的抗体，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重为大于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用。

[31]

[28]或[29]的抗体，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[32]

[28]或[29]的抗体，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，该抗体的剂量为180mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，该抗体的剂量为240mg/次施用。

[33]

药物，其包含固定剂量的180mg萨特利珠单抗作为活性成分。

[34]

药物，其包含固定剂量的240mg萨特利珠单抗作为活性成分。

[35]

制品，其包含在药学上可接受的辅料中固定剂量的180mg萨特利珠单抗。

[36]

制品，其包含在药学上可接受的辅料中固定剂量的240mg萨特利珠单抗。

[37]

制品，其包含：

(i)容器；

(ii)药物组合物，其包含在容器中固定剂量的180mg萨特利珠单抗；和

(iii)任选地，容器上的标签或容器随附的包装说明书。

[38]

一种制品，其包含：

(i)容器；

(ii)药物组合物，其包含在容器中固定剂量的240mg萨特利珠单抗；和

(iii)任选地，容器上的标签或容器随附的包装说明书。

[39]

[35]-[38]中任一项的制品，其中该制品是皮下施用装置。

[40]

[35]-[38]中任一项的制品，其中该制品是预充式注射器。

[41]

[35]-[38]中任一项的制品，其中该制品是自动注射器。

发明效果

本发明可以提供用于治疗或预防重症肌无力的药物组合物，其作用机制不同于现有的治疗药物。

附图说明

图1显示了这项随机、双盲、安慰剂对照、多中心III期研究的研究设计。DB表示双盲，LA表示末次评估，LO表示末次观察，OLE表示开放标签扩展，PK表示药代动力学，以及SOC表示护理标准。a：第0周基线评估将在给药前收集。b：OLE期的第0周与DB期的第24周一致。c：在OLE期的第2周，将向在DB期接受活性药物治疗的患者施用安慰剂剂量，以维持DB期治疗分配设盲。d：研究总时长，从筛选第一名患者至OLE期结束，估计为约4年。

图2显示了体重为100kg或小于100kg(40-100kg)的患者和体重大于100kg(100-160kg)的患者每4周分别施用120mg和180mg后预测的血清中稳态暴露参数(最大浓度(C_max)、谷浓度(C_trough))和受体占有率(RO)值。C_max表示稳态最大浓度，C_tr表示稳态谷浓度，以及RO表示稳态受体占有率。绘图显示了2000例个体的模拟结果。C_max预测值如图2A所示，C_trough预测值如图2B所示，以及RO预测值如图2C所示。点是基于以下假设的模拟数据：ADA(抗药物抗体)阳性患者的百分比与NMOSD(视神经脊髓炎谱系障碍)研究中观察到的百分比相同。增加水平虚线以作为参考。

图3显示了对于体重为100kg或小于100kg(40-100kg)和体重大于100kg(100-160kg)的患者，每4周分别180mg和240mg的给药方案有望在整个体重范围内保持RO的目标水平。C_tr表示稳态谷浓度，以及RO表示稳态受体占有率。

图4显示了MGFA(美国MG基金会)分类系统。

图5显示了MG日常生活活动(MG-ADL)问卷样本。

图6显示了定量重症肌无力(QMG)调查问卷样本。

图7显示了重症肌无力综合(MGC)调查问卷样本。

图8显示了15项重症肌无力(MG)生活质量量表(修订版)(MG-QOL15r)调查问卷样本。

图9显示了神经病学生活质量疲劳(神经QoL疲劳)简表量表的样本。

图10显示了在针对HV(健康成人)和NMOSD(视神经脊髓炎谱系障碍)患者进行的模拟中，对于每个评估病例数，清除率超出人群平均值0.8-1.25范围的患者以及RSE大于0.2的患者的分数。RSE表示残差标准误差。

具体实施方式

下文将对本发明进行详细说明。

本发明涉及用于治疗或预防重症肌无力(MG)的药物组合物。

本发明中的“抗体”是阻断IL-6的信号转导并抑制IL-6的生物活性的抗体。抗体优选为对IL-6、IL-6受体或gp130的结合具有抑制作用的抗体。

本发明中的抗体包括但不特别限于，例如，抗IL-6抗体、抗IL-6受体抗体和抗gp130抗体。本发明中优选的抗体包括识别IL-6受体的抗IL-6受体抗体。

本发明中使用的抗IL-6受体抗体可以使用已知的方法作为多克隆抗体或单克隆抗体获得。特别地，本发明中使用的抗IL-6受体抗体优选是源自哺乳动物的单克隆抗体。源自哺乳动物的单克隆抗体包括由杂交瘤产生的抗体和由通过使用基因工程方法用含有抗体基因的表达载体转化的宿主产生的抗体。通过与IL-6受体结合，该抗体抑制IL-6与IL-6受体的结合，并阻断IL-6的生物活性转导至细胞中。

这种抗体的实例包括MR16-1抗体(Tamura,T.等人Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1993)90,11924-11928)、PM-1抗体(Hirata,Y.等人,J.Immunol.(1989)143,2900-2906)、AUK12-20抗体、AUK64-7抗体和AUK146-15抗体(国际专利申请公开号WO 92-19759)。其中，PM-1抗体是针对人IL-6受体的优选单克隆抗体的实例，以及MR16-1抗体是针对小鼠IL-6受体的优选单克隆抗体的实例。

基本上，产生抗IL-6受体单克隆抗体的杂交瘤可以使用已知技术如下产生：使用IL-6受体作为致敏抗原，通过常规免疫方法进行免疫，通过常规细胞融合方法将所得免疫细胞与已知的亲代细胞融合，然后通过常规筛选方法筛选产生单克隆抗体的细胞。

具体地，抗IL-6受体抗体可以如下制备。用作获得抗体的致敏抗原的人IL-6受体或小鼠IL-6受体可以通过，例如，使用欧洲专利申请公开号EP 325474和日本专利申请Kokai公开号(JP-A)H03-155795中分别公开的IL-6受体基因和/或氨基酸序列获得。

IL-6受体蛋白有两种类型：一种在细胞膜上表达和另一种与细胞膜分离(可溶性IL-6受体)(Yasukawa,K.等人,J.Biochem.(1990)108,673-676)。可溶性IL-6受体基本上由细胞膜结合的IL-6受体的胞外区组成，并且其与膜结合的IL-6受体的不同之处在于它缺少跨膜区或缺少跨膜区和胞内区两者。任何IL-6受体均可以用作IL-6受体蛋白，只要它可以用作用于产生本发明中使用的抗IL-6受体抗体的致敏抗原即可。

将IL-6受体基因序列插入已知的表达载体系统中并转化适当的宿主细胞。然后，使用已知的方法从宿主细胞内部或从培养上清液中纯化目标IL-6受体蛋白。该纯化的IL-6受体蛋白可以用作致敏抗原。可选地，表达IL-6受体或IL-6受体蛋白与另一种蛋白的融合蛋白的细胞可以用作致敏抗原。

对用致敏抗原免疫的哺乳动物没有特别限制，但优选考虑与用于细胞融合的亲代细胞的相容性进行选择。通常，使用啮齿动物，例如小鼠、大鼠和仓鼠。

根据已知方法用致敏抗原免疫动物。通常，免疫通过，例如，向哺乳动物腹腔或皮下注射致敏抗原进行。具体地，优选将致敏抗原用磷酸盐缓冲盐水(PBS)、生理盐水等稀释或悬浮至适当体积，根据需要与适量的常规佐剂(例如弗氏完全佐剂)混合(如有需要)并乳化，然后每4至21天向哺乳动物施用数次。致敏抗原免疫还可以使用适当的载体。

如此对哺乳动物进行免疫，并确认期望的抗体的血清水平增加后，从哺乳动物取出免疫细胞并进行细胞融合。作为进行细胞融合的免疫细胞，特别优选脾细胞。

来自哺乳动物的骨髓瘤细胞用作亲代细胞，与免疫细胞融合。迄今为止，已知的各种细胞系，例如P3X63Ag8.653(Kearney,J.F.等人,J.Immunol(1979)123,1548-1550)、P3X63Ag8U.1(Current Topics in Microbiology and Immunology(1978)81,1-7)、NS-1(Kohler,G.和Milstein,C.,Eur.J.Immunol.(1976)6,511-519)、MPC-11(Margulies,D.H.等人,Cell(1976)8,405-415)、SP2/0(Shulman,M.等人,Nature(1978)276,269-270)、F0(deSt.Groth,S.F.等人,J.Immunol.Methods(1980)35,1-21)、S194(Trowbridge,I.S.,J.Exp.Med.(1978)148,313-323)和R210(Galfre,G.等人,Nature(1979)277,131-133)适合使用。

基本上，前述免疫细胞与骨髓瘤细胞的细胞融合可以根据已知的方法进行，例如Milstein等人的方法(Kohler,G.和Milstein,C.,Methods Enzymol.(1981)73,3-46)。

更具体地，细胞融合例如在存在细胞融合促进剂的情况下在常规营养培养基中进行。例如，使用聚乙二醇(PEG)或仙台病毒(HVJ)作为融合促进剂，如有需要，可以进一步添加辅助剂(例如二甲基亚砜)用于提高融合效率。

所使用的免疫细胞与骨髓瘤细胞的比例优选为，例如，每个骨髓瘤细胞1至10个免疫细胞。用于细胞融合的培养基是，例如，适合骨髓瘤细胞系增殖的RPMI1640或MEM培养基。还可以使用用于此类细胞培养的其他常规培养基。此外，还可以组合使用血清补充剂，例如胎牛血清(FCS)。

对于细胞融合，通过以下形成目标融合细胞(杂交瘤)：将预定量的前述免疫细胞和骨髓瘤细胞在前述培养基中充分混合，添加PEG溶液(例如，平均分子量为约1,000至6,000的PEG溶液)，预热至约37℃，通常浓度为30％至60％(w/v)，然后将它们混合。然后，通过重复顺序添加适当的培养基并通过离心除去上清液的操作，可以除去不适合杂交瘤生长的细胞融合剂等。

通过在通用选择培养基(例如HAT培养基(含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸苷的培养基))中培养来选择杂交瘤。在HAT培养基中持续培养足够的时间，通常从数天至数周，以杀死除了目标杂交瘤之外的细胞(未融合的细胞)。然后，进行标准有限稀释方法来筛选和克隆产生目标抗体的杂交瘤。

除了通过用抗原免疫非人动物获得杂交瘤之外，还可以通过在体外用期望的抗原蛋白或抗原表达细胞致敏人淋巴细胞，并将致敏的B淋巴细胞与人骨髓瘤细胞(例如)融合来获得对期望的抗原或抗原表达细胞具有结合活性的期望的人抗体(参见日本专利申请Kokoku公开号(JP-B)H01-59878)。此外，可以将抗原或表达抗原的细胞施用于具有人抗体基因库的转基因动物，然后可以按照上述方法获得期望的人抗体(参见国际专利申请公开号WO 93/12227、WO 92/03918、WO 94/02602、WO 94/25585、WO 96/34096和WO 96/33735)。

如此制备的产生单克隆抗体的杂交瘤可以在常规培养基中传代并在液氮中长期保存。

为了从杂交瘤中获得单克隆抗体，可以采用以下方法：根据常规方法培养杂交瘤并以培养物上清液形式获得抗体，或通过将杂交瘤施用于相容的哺乳动物来增殖杂交瘤并从腹水中获得抗体；等等。前一种方法适合获得高纯度的抗体，后者适合大规模抗体生产。

例如，产生抗IL-6受体抗体的杂交瘤可以通过JP-A(Kokai)H03-139293中公开的方法进行制备。这种制备可以通过以下进行：将产生PM-1抗体的杂交瘤注射到BALB/c小鼠的腹腔中，获得腹水，然后从腹水中纯化PM-1抗体；或在适当的培养基(例如含有10％胎牛血清和5％BM-Condimed H1(Boehringer Mannheim)的RPMI 1640培养基；杂交瘤SFM培养基(GIBCO-BRL)；或PFHM-II培养基(GIBCO-BRL))中培养杂交瘤，然后从培养物上清液中纯化PM-1抗体。

重组抗体可用作本发明的单克隆抗体，其中使用基因重组技术通过从杂交瘤克隆抗体基因，将基因插入适当的载体，然后将载体引入宿主来产生重组抗体(参见，例如，Borrebaeck,C.A.K.和Larrick,J.W.,THERAPEUTIC MONOCLONAL ANTIBODIES,由MACMILLANPUBLISHERS LTD在英国出版,1990)。

更具体地，从产生目标抗体的细胞(例如杂交瘤)中分离编码抗体可变(V)区的mRNA。可以通过根据已知方法(例如胍超速离心法(Chirgwin,J.M.等人,Biochemistry(1979)18,5294-5299)和AGPC法(Chomczynski,P.等人,Anal.Biochem.(1987)162,156-159))制备总RNA，以及使用mRNA纯化试剂盒(Pharmacia)等制备mRNA来分离mRNA。可选地，可以使用QuickPrep mRNA纯化试剂盒(Pharmacia)直接制备mRNA。

使用逆转录酶从获得的mRNA合成抗体V区的cDNA。可以使用AMV逆转录酶第一链cDNA合成试剂盒等来合成cDNA。此外，为了合成和扩增cDNA，可以使用5’-RACE方法(Frohman,M.A.等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1988)85,8998-9002；Belyavsky,A.等人,Nucleic Acids Res.(1989)17,2919-2932)，使用5’-Ampli FINDER RACE试剂盒(Clontech)，以及可以使用PCR。从获得的PCR产物中纯化目标DNA片段，然后与载体DNA连接。然后，使用上述方法制备重组载体，并将其引入大肠杆菌等中，然后选择其菌落以制备期望的重组载体。目标DNA的碱基序列可以通过已知方法(例如双脱氧法)进行确认。

当获得编码目标抗体的V区的DNA时，将该DNA与编码期望的抗体的恒定区(C区)的DNA连接，并插入表达载体中。可选地，可以将编码抗体V区的DNA插入包含抗体C区的DNA的表达载体中。

为了产生本发明中使用的抗体，将抗体基因插入表达载体中，使得其在表达调节区(例如增强子和启动子)的控制下表达，如下所述。然后，可以通过用该表达载体转化宿主细胞来表达抗体。

在本发明中，可以使用人工修饰的重组抗体，例如嵌合抗体、人源化抗体或人抗体，例如以降低针对人的异种抗原性。这些修饰的抗体可以使用已知的方法进行制备。

可以通过以下获得嵌合抗体：将如上获得的编码抗体V区的DNA与编码人抗体C区的DNA连接，将其插入表达载体，并将该载体引入宿主以产生嵌合抗体(参见，欧洲专利申请公开号EP 125023；国际专利申请公开号WO 92-19759)。该已知方法可用于获得可用于本发明的嵌合抗体。

人源化抗体也称为重构人抗体或制成人类型的抗体。它们通过将非人哺乳动物(例如小鼠)的抗体的互补决定区(CDR)移植到人抗体的CDR中产生。用于这种基因重组的一般方法也是已知的(参见欧洲专利申请公开号EP 125023、国际专利申请公开号WO 92-19759)。

更具体地，设计用于连接小鼠抗体的CDR与人抗体的框架区(FR)的DNA序列通过PCR从产生的在其末端含有重叠部分的几种寡核苷酸合成。将获得的DNA与编码人抗体C区的DNA连接并插入表达载体中，并将表达载体引入宿主以产生人源化抗体(参见欧洲专利申请公开号EP239400，国际专利申请公开号WO 92-19759)。

选择通过CDR连接的人抗体FR，使得CDR形成令人满意的抗原结合位点。抗体可变区的框架区内的氨基酸可以根据需要被置换，使得重构的人抗体的CDR形成适当的抗原结合位点(Sato,K.等人,Cancer Res.(1993)53,851-856)。

人抗体恒定区(C区)用于嵌合抗体和人源化抗体。人抗体C区的实例包括Cγ，并且例如，可以使用Cγ1、Cγ2、Cγ3或Cγ4。此外，为了提高抗体的稳定性或其产生，可以修饰人抗体C区。

嵌合抗体由非人哺乳动物来源的抗体的可变区和人抗体来源的C区构成；人源化抗体由非人哺乳动物来源的抗体的CDR和人抗体来源的框架区和C区构成。它们在人体内的抗原性降低，因此它们可用作本发明中使用的抗体。

用于本发明的人源化抗体的优选具体实例包括人源化PM-1抗体(参见国际专利申请公开号WO 92-19759)。

另外，除了前述的用于获得人抗体的方法以外，还已知通过使用人抗体文库进行淘选来获得人抗体的技术。例如，可以通过使用噬菌体展示方法将人抗体的可变区作为单链抗体(scFv)在噬菌体表面上表达，然后可以选择抗原结合噬菌体。通过分析所选噬菌体的基因，可以确定编码与抗原结合的人抗体可变区的DNA序列。一旦揭示了与抗原结合的scFv的DNA序列，就可以制备包含该序列的合适的表达载体以获得人抗体。这些方法是已知的，并且可以参考WO 92/01047、WO 92/20791、WO93/06213、WO 93/11236、WO 93/19172、WO95/01438和WO 95/15388。

如上所述构建的抗体基因可以根据已知的方法表达。当使用哺乳动物细胞时，可以通过使用DNA，其中常用的有效启动子基因、待表达的抗体基因以及抗体基因3’侧(下游)的聚腺苷酸(poly A)信号可操作地连接在一起，或通过使用包含DNA的载体来表达抗体基因。启动子/增强子的实例包括人巨细胞病毒即时早期启动子/增强子。

此外，可用于表达本发明所用抗体的其他启动子/增强子包括来自逆转录病毒、多瘤病毒、腺病毒、猿猴病毒40(SV40)等的病毒启动子/增强子；以及哺乳动物细胞来源的启动子/增强子，例如人延伸因子1α(HEF1α)。

表达可以很容易地进行，例如，当使用SV40启动子/增强子时，按照Mulligan等人(Mulligan,R.C.等人,Nature(1979)277,108-114)的方法，或当使用HEF1α启动子/增强子时，按照Mizushima等人(Mizushima,S.和Nagata S.,Nucleic Acids Res.(1990)18,5322)的方法。

当使用大肠杆菌时，可以通过将常用的有效启动子基因、抗体分泌的信号序列和待表达的抗体基因可操作地连接来表达抗体基因。启动子的实例包括lacZ启动子和araB启动子。可以根据Ward等人(Ward,E.S.等人,Nature(1989)341,544-546；Ward,E.S.等人,FASEB J.(1992)6,2422-2427)的方法使用lacZ启动子；以及可以按照Better等人(Better,M.等人,Science(1988)240,1041-1043)的方法使用araB启动子。

当抗体在大肠杆菌的周质中产生时，pel B信号序列(Lei,S.P.等人,J.Bacteriol.(1987)169,4379-4383)可以用作抗体分泌的信号序列。分离周质中产生的抗体，然后适当地重新折叠待使用的抗体结构(参见例如WO 96/30394)。

作为复制起点，可以使用源自SV40、多瘤病毒、腺病毒、牛乳头瘤病毒(BPV)等的复制起点。另外，为了增加宿主细胞系统中的基因拷贝数，表达载体可以包含氨基糖苷磷酸转移酶(APH)基因、胸苷激酶(TK)基因、大肠杆菌黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(Ecogpt)基因、二氢叶酸还原酶(dhfr)基因等作为选择标志物。

任何产生系统均可以用于制备用于本发明的抗体。用于抗体制备的产生系统包括体外和体内产生系统。体外产生系统包括使用真核细胞的系统或使用原核细胞的系统。

当使用真核细胞时，产生系统包括使用动物细胞、植物细胞或真菌细胞的那些。此类动物细胞包括(1)哺乳动物细胞，例如CHO、COS、骨髓瘤、幼仓鼠肾(BHK)、HeLa和Vero；(2)两栖动物细胞，例如非洲爪蟾卵母细胞；(3)昆虫细胞，例如sf9、sf21和Tn5。已知的植物细胞包括源自烟草(Nicotiana tabacum)的细胞，其可以在愈伤组织中培养。已知的真菌细胞包括酵母(例如酵母属(例如酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae))和霉菌(例如曲霉属(例如黑曲霉(Aspergillus niger)))。

当使用原核细胞时，产生系统包括使用细菌细胞的系统。已知的细菌细胞包括大肠杆菌(E.coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

通过转化将目标抗体基因引入这些细胞中，然后在体外培养转化的细胞，可以获得抗体。根据已知方法培养细胞。例如，可以使用DMEM、MEM、RPMI 1640或IMDM作为培养基，并且可以组合使用血清补充剂，例如胎牛血清(FCS)。可选地，可以将引入抗体基因的细胞转移到动物的腹腔等中以在体内产生抗体。

同时，体内产生系统包括使用动物的系统或使用植物的系统。当使用动物时，产生系统包括使用哺乳动物或昆虫的系统。

可以使用的哺乳动物包括山羊、猪、绵羊、小鼠和牛(Vicki Glaser,SPECTRUMBiotechnology Applications,1993)。此外，可以使用的昆虫包括蚕。当使用植物时，可以使用烟草等。

将抗体基因引入这些动物或植物中，在动物或植物体内产生抗体，然后回收。例如，可以通过将抗体基因插入编码乳液中独特产生的蛋白(例如山羊β酪蛋白)的基因的中间来制备抗体基因作为融合基因。将包括插入的抗体基因的融合基因的DNA片段注射到山羊胚胎中，并将该胚胎引入雌性山羊体内。从接受胚胎的山羊或其后代所产的转基因山羊产生的乳液中获得期望的抗体。当适当时，可以给予转基因山羊激素以增加含有它们产生的期望的抗体的乳液量(Ebert,K.M.等人,Bio/Technology(1994)12,699-702)。

当使用蚕时，用插入目标抗体基因的杆状病毒感染蚕，并从这些蚕的体液中获得期望的抗体(Maeda,S.等人,Nature(1985)315,592-594)。此外，当使用烟草时，将目标抗体基因插入植物表达载体(例如pMON530)中，并将该载体引入细菌(例如根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens))中。该细菌用于感染烟草(例如普通烟草(Nicotianatabacum))，然后从该烟草的叶子中获得期望的抗体(Julian,K.-C.Ma等人,Eur.J.Immunol.(1994)24,131-138)。

当使用如上所述的体外或体内产生系统产生抗体时，可以将编码抗体重链(H链)和轻链(L链)的DNA插入单独的表达载体中，然后将宿主与载体共转化。可选地，可以将编码H链的DNA和编码L链的DNA插入用于转化宿主的单一表达载体中(参见国际专利申请公开号WO94-11523)。

本发明中使用的抗体可以是抗体片段或其修饰产物，只要它们能够适用于本发明即可。例如，抗体片段包括Fab、F(ab’)2、Fv和单链Fv(scFv)，其中H链和L链的Fv通过适当的接头连接。

具体地，通过用酶(例如木瓜蛋白酶或胃蛋白酶)处理抗体，或通过构建编码这些抗体片段的基因并将其引入表达载体，然后在适当的宿主细胞中表达载体来产生抗体片段(参见，例如，Co,M.S.等人,J.Immunol.(1994)152,2968-2976；Better,M.&Horwitz,A.H.,Methods in Enzymology(1989)178,476-496；Plueckthun,A.&Skerra,A.,Methods inEnzymology(1989)178,497-515；Lamoyi,E.,Methods in Enzymology(1989)121,652-663；Rousseaux,J.等人,Methods in Enzymology(1989)121,663-666；和Bird,R.E.等人,TIBTECH(1991)9,132-137)。

可以通过连接抗体的H链V区和L链V区获得scFv。在该scFv中，H链V区和L链V区通过接头连接，优选地通过肽接头连接(Huston,J.S.et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1988)85,5879-5883)。scFv中的H链和L链的V区可以源自上述任何抗体。用于连接V区的肽接头包括，例如，由12至19个氨基酸残基组成的任何单链肽。

可以通过用PCR扩增模板序列中编码期望的氨基酸序列的DNA部分，使用限定该部分末端的引物对，获得编码scFv的DNA，其中前述抗体的编码H链或H链V的DNA和编码L链或L链V区的DNA用作模板，然后用编码肽接头部分的DNA和限定接头的两个末端的引物对进一步扩增扩增的DNA部分，使得其可以连接至H链和L链中的每一个。

一旦已制备编码scFv的DNA，就可以根据常规方法获得包含DNA的表达载体和用该表达载体转化的宿主。另外，可以使用宿主按照常规方法获得scFv。

与上述类似，抗体片段可以通过获得它们的基因，使其表达，然后使用宿主来产生。本文所用的“抗体”涵盖此类抗体片段。

与各种分子(例如聚乙二醇(PEG))结合的抗体也可以用作修饰的抗体。如本文所用，“抗体”涵盖此类修饰的抗体。可以通过对得到的抗体进行化学修饰获得这些修饰的抗体。本领域已建立此类方法。

如上所述产生和表达的抗体可以从细胞内部或外部或从宿主中分离，然后纯化至同质。用于本发明的抗体可以通过亲和层析进行分离和纯化。用于亲和层析的柱包括蛋白A柱和蛋白G柱。用于蛋白A柱的载体包括HyperD、POROS和Sepharose F.F。可以不受限制地使用用于分离和/或纯化普通蛋白的其他方法。

例如，本发明中使用的抗体可以通过适当选择并组合上述亲和层析以外的层析、过滤、超滤、盐析、透析等进行分离和纯化。色谱的实例包括离子交换色谱、疏水色谱和凝胶过滤。这些色谱可应用于高效液相色谱(HPLC)。可选地，可以使用反相HPLC。

如上所述获得的抗体的浓度可以通过吸光度测定、ELISA等来确定。具体地，当使用吸光度测量时，可以通过用PBS(-)适当稀释抗体溶液，在280nm处测量其吸光度，并使用转换因子1.35OD/1mg/ml计算浓度来确定浓度。可选地，当使用ELISA时，可以如下确定浓度。具体地，将用0.1M碳酸氢盐缓冲液(pH 9.6)稀释至1μg/ml的100μl山羊抗人IgG(TAG)添加到96孔板(Nunc)中，并在4℃下孵育过夜以固定抗体。封闭后，添加100μl适当稀释的本发明中使用的抗体或适当稀释的包含该抗体的样本，或作为标准品的人IgG(CAPPEL)，并将板在室温下孵育一小时。

洗涤后，添加100μl的5,000×稀释的碱性磷酸酶标记的抗人IgG(BIOSOURCE)，并将板在室温下孵育一小时。再次洗涤后，添加底物溶液，孵育板，并使用酶标仪3550型(Bio-Rad)测量405nm处的吸光度，以计算目标抗体的浓度。

IL-6是由T细胞、单核细胞、巨噬细胞和成纤维细胞产生的炎症细胞因子。作为B细胞和T细胞功能的调节剂，IL-6通过其特异性受体IL-6R对免疫系统发挥多效性作用。在多种炎症性自身免疫性疾病(包括类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、NMOSD(IcozS.等人,Int JNeurosci.2010；120(1):71-5,Uzawa A.等人,J Neurol.2009；256(12):2082-4,Uzawa A.等人,Mult Scler.2010；16(12):1443-52)和Castleman病(Ishihara K和Hirano T.Cytokine&Growth Factor Reviews 2002；13(4-5):357-68))中观察到IL-6水平升高。在MG(也涉及自身免疫异常)的研究中，在非临床动物模型和MG患者的血液和肌肉组织中观察到IL-6水平升高。因此，IL-6可能参与MG的病理机制。例如，它可以(i)刺激B细胞成熟为自身抗体产生细胞(促进自身抗体产生)，以及(ii)诱导CD4阳性T细胞分化成Th17促炎性T细胞(诱导慢性炎症)。由于IL-6不仅直接参与自身抗体的产生，而且具有不依赖于自身抗体的功能，无论是否存在自身抗体，它均可能与MG的发病机制有关。

抑制过度免疫应答的调节性T细胞(Treg)和致病性辅助T17(Th17)细胞是两种淋巴细胞亚群，在自身免疫性疾病(例如MG)中具有相反的活性。IL-6是促炎细胞因子，其是体内将免疫应答从诱导Treg转变成致病性Th17细胞的有效因子。一项在实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型和健康对照大鼠中的研究(Aricha R.等人,J Autoimmun.2011；36(2):135-41)报道，Treg和Th17细胞之间的平衡在疾病中受到干扰。EAMG模型中上调的Th17细胞相关基因和下调的Treg相关基因在施用抗IL-6抗体后表现出恢复的趋势。此外，施用用于EAMG的抗IL-6抗体抑制EAMG的进展并降低总体IgG抗体滴度和B细胞。这些数据表明IL-6作为调节MG中自身免疫应答的因子的重要性。

此外，托珠单抗(IL-6信号传导阻断剂)也显示对两名中度和重度AChR抗体阳性MG且对利妥昔单抗反应不足的患者有效(Jonsson DI.等人,Neuromuscular Disorders2017；27(6):565-8)。因此，抑制IL-6信号传导可作为MG患者的治疗选择。

本发明中的“IL-6受体抗体”的优选实例包括作为人源化抗IL-6受体IgG1抗体的托珠单抗，以及通过修饰托珠单抗的可变区和恒定区产生的人源化抗IL-6受体抗体，具体地，含有包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的重链CDR1、包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的重链CDR2、包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列的重链CDR3、包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的轻链CDR1、包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的轻链CDR2和包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的轻链CDR3的抗体。更优选的抗体包括含有包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的重链可变区和包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的轻链可变区的抗体。还更优选的是含有包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的重链(SA237的重链)和包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的轻链(SA237的轻链)的抗体。SA237(萨特利珠单抗)是特别优选的。

可以根据WO2010/035769、WO2010/107108、WO2010/106812等中描述的方法获得此类抗体。具体地，可以基于上述IL-6受体抗体的序列，使用本领域技术人员已知的基因重组技术来产生抗体(参见，例如，Borrebaeck CAK和Larrick JW,THERAPEUTICMONOCLONALANTIBODIES,由MACMILLAN PUBLISHERS LTD在英国出版,1990)。可以通过从杂交瘤或产生抗体的细胞(例如产生抗体的致敏淋巴细胞)中克隆编码该抗体的DNA，将DNA插入适当的载体中，并将载体引入宿主(宿主细胞)中以产生抗体来获得重组抗体。

此类抗体可以使用常规用于抗体纯化的分离和纯化方法来分离和纯化，但不限于此。例如，可以通过适当选择并组合柱层析、过滤、超滤、盐析、溶剂沉淀、溶剂萃取、蒸馏、免疫沉淀、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦、透析、重结晶等来分离和纯化抗体。

本发明中使用的抗体可以是与各种分子(例如聚乙二醇(PEG)、放射性物质、毒素)结合的缀合抗体。可以通过对得到的抗体进行化学修饰获得此类缀合抗体。本领域已建立抗体修饰方法。因此，本发明中的术语“抗体”涵盖此类缀合抗体。

在日本，萨特利珠单抗于2020年6月获批上市，适应症为“预防视神经脊髓炎谱系疾病(包括视神经脊髓炎)复发”。靶向视神经脊髓炎谱系障碍(NMOSD)和/或视神经脊髓炎(NMO)患者人群的国际联合III期临床试验(SA-307JG试验和SA-309JG试验)期间确定的安全性特征大部分是有利的。无死亡病例报告。萨特利珠单抗组中出现重度不良事件的患者比例与安慰剂组大致相同。两组之间在导致停止施用试验药物的不良事件发生频率或导致停药的不良事件发生频率上没有太大差异。SA-309JG试验(单药试验)和SA-307JG试验(与现有疗法(口服类固醇和/或免疫抑制剂)联合试验)之间的安全性特征相似。

重症肌无力(MG)是自身免疫性疾病，其是由于神经肌肉接头处的自身抗体破坏肌肉侧的受体，导致神经肌肉接头处的刺激传递受损而引起的。

目前尚无完全治愈的疗法，在日本被指定为指定难治性疾病。该疾病的特征在于骨骼肌的惰性疲劳无力，以及反复运动时恶化和休息时改善(重症肌无力(MG)实用指南2014(编辑负责人：Societas NeurologicaJaponica)，Nankodo Co.,Ltd.)。很少发生永久性肌肉损伤，并且最大力量通常良好。同时，肌肉力量的下降因个体肌肉和肌肉群而异。根据日本统计(重症肌无力(MG)实用指南2014(编辑负责人：SocietasNeurologicaJaponica)，Nankodo Co.,Ltd.)，71.9％的患者出现眼睑下垂(上睑下垂)和47.3％的患者出现重影(复视)为初始症状。诊断时，81.9％的患者存在上睑下垂和59.1％的患者存在复视。诊断时约20％的眼部MG症状进展为全身性疾病，因此，85％的MG患者出现全身性MG(gMG)症状(重症肌无力(MG)实用指南2014(编辑主负责人：SocietasNeurologicaJaponica)，Nankodo Co.,Ltd.；Kerty E.等人,European Journal ofNeurology2014；21:687-93)。出现眼部症状后，最常受累的肌肉是肢体的骨骼肌。据2006年统计，23.1％的患者在发病初期出现颈部和四肢肌肉无力的症状，以及44.1％的患者在诊断时出现颈部和四肢肌肉无力的症状。发病频率按照以下顺序依次降低：说话困难(构音障碍)、下咽困难(吞咽困难)、咀嚼困难、面部肌肉无力、呼吸困难。在疾病的早期阶段，症状往往是短暂的，可能在数周或更长时间内得到改善。然而，症状是进行性且持续性的，并且通常在个体患者发病后数年内达到高峰(重症肌无力(MG)实用指南2014(编辑负责人：Societas Neurologica Japonica)，Nankodo Co.,Ltd.)。

在本发明中，“眼部MG”是指仅表现出眼部症状(例如上睑下垂、复视)的MG，根据MGFA分类，被分类为MGFA I。

在本发明中，“全身性MG(gMG)”是指表现出除了眼部症状(例如上睑下垂和复视)以外的全身症状的MG。gMG也可能出现眼部症状，例如上睑下垂和复视。眼部MG可能包括gMG，因为在gMG中，存在难以区分眼部MG(MGFA I)和轻度gMG(MGFAIIa)的情况。

重症肌无力(MG)是由针对神经肌肉接头突触后膜中存在的功能重要分子的自身抗体引起的。

与MG相关的自身抗体包括抗乙酰胆碱受体(AChR)的自身抗体、针对肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)的自身抗体、针对LDL受体相关蛋白4(Lrp4)的自身抗体等。

虽然报告之间存在一些差异，但关于自身抗体阳性率，约80％的MG是AChR抗体阳性和约7％是MuSK抗体阳性(Gilhus N.等人,Nat Rev DisPrimers 2019；5(30))。最近，与MuSK形成复合物的针对Lrp4的自身抗体被认为是有希望成为MG新的致病性自身抗体的候选者，并且有报道约3％的总MG是Lrp4抗体阳性(Gilhus N.等人,Nat Rev DisPrimers2019；5(30))。此外，数个百分比的总MG是自身抗体阴性MG病例，即在出现MG症状时未检测到上述抗体。

现有的全身性MG治疗基于重症肌无力(MG)实用指南2014(编辑负责人：SocietasNeurologica Japonica，Nankodo Co.,Ltd)的药物治疗。治疗方法根据自身抗体的表达而变化。对于AChR抗体阳性的全身性MG，建议使用抗胆碱酯酶药物(溴吡斯的明、安贝氯铵等)。此后，无论是否存在自身抗体，均进行治疗。口服类固醇是一线选择，当症状控制不足时，作为二线选择，改用免疫抑制剂(环孢素、水合他克莫司等)，和/或增加口服类固醇的剂量，和/或建议联合口服类固醇和免疫抑制剂，晚期建议类固醇冲击治疗、静脉注射免疫球蛋白(IVIg)和血液净化治疗。依库珠单抗于2017年获批用于治疗AChR抗体阳性的gMG，并靶向难治性gMG进行施用。对于治疗有国际共识指南(Sanders DB.等人,Neurology2016；87:419-25)，虽然免疫抑制剂的使用偏好可能因保险承保的药物不同而有所不同，日本与西方国家的待遇政策没有太大区别。

本发明用于治疗或预防MG患者的药物组合物可用于发挥治疗效果，例如避免MG的发作，或减轻或改善患有MG的患者的临床症状。重症肌无力(MG)是长期进展的疾病。重症肌无力(MG)实用指南2014(编辑负责人：Societas Neurologica Japonica，Nankodo Co.,Ltd)建议治疗患者“考虑到MG是长期疾病，以维持长期良好的生活质量为目标”，并且建议从治疗早期就积极引入相对较强的免疫疗法。通过尽早开始治疗，可以获得症状的缓解、改善等治疗效果，并且还可以获得预防或阻止症状进展等效果。

重症肌无力(MG)是难以完全缓解的自身免疫性疾病。因此，即使没有达到完全缓解，将症状减轻或改善至可以维持最低限度表现(MM)的水平，或维持这样的状态也包括在“MG患者的治疗或预防”中。例如，重症肌无力(MG)实用指南2014(编辑负责人：SocietasNeurologicaJaponica，Nankodo Co.,Ltd.)将MG治疗要达到的目标设定为“考虑到MG很难实现完全缓解，通过确定治疗目标，维持每日5mg或更少的口服泼尼松龙，可以维持最低症状(MM)的水平。”通过实现这一治疗目标，再加上社交活动的改善，可以看到QOL明显改善。然而，即使在日本的专科门诊，目前情况下的成功率仍然是整个MG病例的40％至50％。为了实现这一目标，需要进一步的治疗可选方案和治疗方法。

此外，通过在出现MG症状之前向可能具有易患MG的遗传背景的患者施用本发明的药物组合物，该药物组合物可用于预防MG发作。由于MG是长期进展的疾病，因此通过对已发生MG的患者施用本发明的药物，可以防止MG症状的进展。此外，通过向已发生MG但在严重程度增加之前(例如，危象之前)的患者施用本发明的药物组合物，其可以用于预防MG严重程度的增加。

更具体地，本发明用于治疗或预防MG患者的药物组合物具有预防MG发作、预防或阻止症状进展、预防MG严重程度增加、或在诸如缓解或改善症状的治疗中的效果。

重症肌无力(MG)的诊断标准和用于评价MG的方法正在世界范围内标准化，并在2000年，美国MG基金会(MGFA)提出了MGFA分类用于对MG症状进行分类。MGFA分类也可称为MGFA分类、MGFA临床分类或简称MGFA。MGFA分类是根据迄今为止最严重状态的MG患者的病况进行分类的分类方法。

作为定量评价MG严重程度的严重程度评分，报道了MG临床研究建议的标准，例如MG日常生活活动(MG-ADL)量表和定量重症肌无力(QMG)评分(Jaretzki A.等人,Neurology2000；55(1):16-23)。MG-ADL量表作为严重程度评分相对容易记录。评分主要根据患者的陈述进行记录，并将各项的评分相加得到总评分。总评分也可称为MG-ADL评分。QMG评分是评价严重程度的指标。将各项的评分相加，得到总评分。记录QMG评分约需要20分钟，因此这不是简短的测试。同时，它对疲劳肌肉的检测能力很高，可以捕捉眼外肌和看似具有正常力量的肌肉的疲劳程度。重症肌无力综合(MGC)量表用于评价治疗干预后的症状，综合考虑MG-ADL量表和QMG评分的优缺点而设计。MGC量表与QMG评分等相关性很好，尽管它允许医生进行一定程度的主观判断，因此并不复杂。除了上述各个量表之外，MG-QOL 15r和Neuro-QOL疲劳量表将在实施例中详细讨论。

药物组合物对MG的疗效可以使用上述评价项并通过定量测量在向患者施用药物组合物之前和之后MG的严重程度并确认严重程度的变化是否具有统计学显著性来评价。可选地，可以比较施用药物组合物的组和未施用组(安慰剂)之间的变化或差异。例如，可以将患者在施用药物组合物之前的MG严重程度确定为基线，在施用药物组合物一定时间后，可以再次定量评价患者的MG严重程度。可选地，在待施用药物组合物的一组患者和未接受药物组合物的组中，可以将施用药物组合物之前患者的MG严重程度确定为基线，并在施用药物组合物一定时间段后，可以再次对各组患者的MG严重程度进行定量评价。上述评价标准MG-ADL、QMG、MGC、MG-QOL 15r和/或Neuro-QOL疲劳可以用作定量评价的标准。在上述任一评价标准中，当与药物组合物施用前(基线)相比，施用后的评分或分数发生变化时，或当施用或未施用药物组合物的患者组之间的评分或分数的变化或差异具有统计学显著性时，可以说该药物组合物对重症肌无力(MG)有效。当患者的MG程度为重度时，MG评价评分或分数将偏高，而当程度是轻度时，MG评价评分或分数将偏低。因此，期望评价标准的评分或分数的变化或差异减小。

本发明的药物组合物是用于治疗或预防重症肌无力(MG)患者的药物组合物。因此，本发明的药物组合物可以被称为降低施用本发明的药物组合物的患者的MG-ADL、QMG、MG-QOL 15r、Neuro-QOL疲劳和/或MGC的评分或分数的药物组合物。此外，本发明的药物组合物可以被称为与施用本发明的药物组合物之前从患者获得的使用相同量表或评分方法测量的值(评分或分数)相比，降低施用本发明的药物组合物的患者的MG-ADL、QMG、MG-QOL15r、Neuro-QOL疲劳和/或MGC的药物组合物。此外，本发明的药物组合物可以被称为与未施用本发明药物组合物的患者相比，降低施用本发明药物组合物的患者的MG-ADL、QMG、MG-QOL 15r、Neuro-QOL疲劳和/或MGC的药物组合物。

对用于评价药物组合物对MG的疗效的施用药物组合物的给定时期没有特别限制，并且包括1周、2周、4周、8周、12周、24周、48周、1年、2年、3年、4年和5年，并且该时期可以比示例的时期更短或更长。

当MG-ADL、QMG、MG-QOL 15r、Neuro-QOL疲劳和/或MGC中任一项的评分或分数的变化或差异具有统计学显著性时，可以确认向患者施用的药物组合物对MG的疗效。例如，与从施用药物组合物之前的患者或未施用药物组合物的患者获得的相同测量方法的评分或分数相比，用药物组合物治疗后MG-ADL、QMG、MG-QOL 15r、Neuro-QOL疲劳和/或MGC中的任一项的评分或分数可以统计上显著降低，例如包括降低1、2、3、4、5或6评分或分数，但也可以是其他评分或分数。

在本发明中，“作为活性成分”意指该成分作为主要活性成分被包含在药物组合物中，除非特别说明，否则其含量不受限制，只要包括用于本发明的抗体作为药物成分即可。

在本发明中，“标准给药间隔”是指通常用于药物(本发明的药物组合物)的给药间隔，并且包括例如用于恒定施用的给药间隔，其可以在包装说明书中描述为“以四周间隔进行皮下注射”等。本发明对标准给药间隔没有特别限制，但实例包括1天至24周，优选2周至8周，更优选3至5周，甚至更优选4周。标准给药间隔可以具有一定的范围。

在本发明中，“短于标准给药间隔的给药间隔”是指比药物(本发明的药物组合物)通常使用的给药间隔(标准给药间隔)更短的给药间隔。对短于标准给药间隔的给药间隔没有特别限制，只要其比标准给药间隔短即可，例如，当标准给药间隔为24周时，短于标准给药间隔的给药间隔可以短于24周，例如20周。短于标准给药间隔的给药间隔优选为标准给药间隔的一半的间隔。例如，优选地当标准给药间隔为8周时，短于标准给药间隔的给药间隔为4周，更优选地当标准给药间隔为4周时，短于标准给药间隔的给药间隔为2周。短于标准给药间隔的给药间隔可以具有一定的范围。

在本发明中，“标准剂量”是指通常用于药物(本发明的药物组合物)的作为活性成分的抗体的剂量。实例包括用于标准施用的抗体剂量，其可以在包装说明书中描述为“作为抗体通常以每剂100mg施用”、“通常以每剂100mg抗体皮下注射”等。本发明对标准剂量没有特别限制，并且实例包括每次施用50至800mg抗体，优选地每次施用120至240mg抗体，更优选地每次施用120mg、180mg或240mg抗体。

本发明中的“标准剂量”可以根据患者的体重而变化。例如，对于体重为100kg或小于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是120mg抗体，并且对于体重大于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是180mg抗体；对于体重为100kg或小于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是120mg抗体，并且对于体重大于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是240mg抗体；对于体重为100kg或小于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是180mg抗体，并且对于体重大于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是240mg抗体。进一步地，对于体重小于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是120mg抗体，并且对于体重为100kg或大于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是180mg抗体；对于体重小于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是120mg抗体，并且对于体重为100kg或大于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是240mg抗体；对于体重小于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是180mg抗体，并且对于体重为100kg或大于100kg的患者，每次施用的标准剂量可以是240mg抗体。更具体地，对于体重为100kg或小于100kg的患者(体重为40kg或大于40kg且为100kg或小于100kg的患者)，每次施用的标准剂量可以是120mg抗体，并且对于体重大于100kg(体重大于100kg且为160kg或小于160kg的患者)，每次施用可以是180mg抗体；对于体重为100kg或小于100kg的患者(体重为40kg或大于40kg且为100kg或小于100kg的患者)，每次施用的标准剂量可以是120mg抗体，并且对于体重大于100kg(体重大于100kg且为160kg或小于160kg的患者)，每次施用的标准剂量可以是240mg抗体；以及对于体重为100kg或小于100kg的患者(体重为40kg或大于40kg且为100kg或小于100kg的患者)，每次施用的标准剂量可以是180mg抗体，并且对于体重大于100kg(体重大于100kg且为160kg或小于160kg的患者)，每次施用可以是240mg抗体。此外，对于体重小于100kg的患者(体重为40kg或大于40kg且小于100kg的患者)，每次施用的标准剂量可以是120mg抗体，并且对于体重为100kg或大于100kg的患者(体重为100kg或大于100kg且为160kg或小于160kg的患者)，每次施用的标准剂量可以是180mg抗体；对于体重低于100kg的患者(体重为40kg或大于40kg且小于100kg的患者)，每次施用的标准剂量可以是120mg抗体，并且对于体重为100kg或大于100kg的患者(体重为100kg或大于100kg且为160kg或小于160kg的患者)，每次施用的标准剂量可以是240mg抗体；以及对于体重小于100kg的患者(体重为40kg或大于40kg且小于100kg的患者)，每次施用的标准剂量可以是180mg抗体，并且对于体重为100kg或大于100kg的患者(体重为100kg或大于100kg且为160kg或小于160kg)，每次使用的标准剂量可以是240mg抗体。

本发明中的术语“标准施用”是指上述药物(本发明的药物组合物)常用的施用方式，例如，以上述“标准剂量”和“标准给药间隔”施用。

在本发明中，“短间隔给药期”是指在以标准给药间隔施用之前进行多次施用的时期，其中剂量与标准剂量相同且给药间隔短于标准给药间隔，并且该时期优选为自初始施用起1至12周，更优选2至8周，甚至更优选为自初始施用起4周。与标准剂量相同的剂量包括其中抗体的血液浓度与施用标准剂量的情况相当的情况。短间隔给药期可以具有一定的范围。

在本发明中，“多次施用”是指包括初始施用的两次或更多次施用，优选为包括初始施用的2至5次，更优选为包括初始施用的3次。

在本发明中，标准施用期从短间隔给药期的末次施用开始。更具体地，从短间隔给药期的末次施用起经过一个标准给药间隔后，进行标准给药期间的首次施用。例如，在短间隔给药期间进行3次施用(包括初始剂量)时，第3次施用后，经过一个标准给药间隔，并且从第4次施用起以标准给药间隔进行施用的时期为标准施用期。例如，在短间隔给药期为4周的情况下，在短间隔给药期内施用(包括初始施用)3次，标准给药间隔为4周，并且短于标准给药间隔短的给药间隔为2周，在短间隔给药期的4周内，间隔2周进行初始、第2次、第3次施用，然后从第3次施用起经过4周后，进行第4次施用，这是第1个标准给药间隔，此后以4周的标准给药间隔进行施用。因此，第3次施用后，即短间隔给药期的末次施用，以4周的间隔进行施用的时期，即标准给药间隔将成为标准施用期。

本发明的药物组合物优选为以下药物组合物，其施用通过从初始施用起以1至3周的间隔的短间隔给药周期以与标准剂量相同的剂量施用抗体2至5次进行，然后从短间隔给药期的末次施用开始，以2至8周的间隔进行标准施用，每次施用50至800mg抗体，即为标准剂量。更优选地，该药物组合物的施用包括从初始施用起以2周的间隔(即第0周、第2周和第4周施用)在短间隔给药期内以与标准剂量相同的剂量施用SA237 3次，然后从短间隔给药期的末次施用开始，以4周的间隔进行标准施用(即从第8周、第12周、第16周的短间隔期的初始施用开始计算，继续间隔4周)SA237，每次施用120mg、180mg或240mg，即为标准剂量。

本发明的抗体的优选施用时间计划可以调整，例如，通过监测病况和血液检查值的变化，适当延长施用间隔。

本发明还提供了用于本发明的方法的制品(例如试剂盒、装置等)，其含有本发明的药物组合物或药物。本发明的药物组合物或药物包含本文所述的IL-6抑制剂。制品可以与另外的药学上可接受的载体或介质、或描述如何使用试剂盒、装置等的说明书等一起包装。

在一个实施方案中，该制品包含容器和容器上的标签或所附的包装说明书。合适的容器包括，例如，瓶子、小瓶、注射器(包括预充式注射器和自动注射器)、IV溶液袋等。容器可以由多种材料(例如玻璃或塑料)形成。在一个实施方案中，容器可以容纳单独的组合物或与有效治疗、预防和/或诊断病况的另一种组合物组合的组合物，并且还可以具有无菌进入端口(例如，容器可以是注射器、自动注射器、静脉溶液袋或具有可被皮下注射针刺穿的塞子的小瓶)。组合物中的至少一种活性成分是本公开中描述的IL-6抑制剂，优选抗IL-6受体抗体，并且更优选萨特利珠单抗。

在一个实施方案中，作为如上所述的本发明的制品的装置可以是用于通过任何施用途径(例如静脉内、皮下等)注射的预充式注射器，其包含在药学上可接受的辅料中的固定剂量的如本公开所述的IL-6抑制剂，优选抗IL-6受体抗体，更优选萨特利珠单抗。在另一个实施方案中，该装置可以是用于皮下施用的自动注射器，其包含在药学上可接受的辅料中的固定剂量的如本公开所述的IL-6抑制剂，优选抗IL-6受体抗体，更优选萨特利珠单抗。在某些实施方案中，装置(例如预充式注射器和自动注射器)可以包含120mg、180mg或240mg的萨特利珠单抗。

在一个实施方案中，标签或包装说明书指示药物组合物或药物用于治疗所选病况。此外，制品可以包含(a)其中含有组合物的第一容器，其中该组合物包含如上所述的IL-6抑制剂，优选抗IL-6受体抗体，更优选萨特利珠单抗；和(b)其中含有组合物的第二容器，其中该组合物包含另外的治疗剂。本发明的该实施方案中的制品可以进一步包含包装说明书，其指示组合物可以用于治疗特定病况。可选地，或另外地，制品可以进一步包含第二(或第三)容器，其包含药学上可接受的缓冲剂，例如抑菌注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格溶液和葡萄糖溶液。它可以进一步包括从商业和用户角度来看期望的其他材料，包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头和注射器。

术语“包装说明书”用于指通常包括在治疗产品的商业包装中的说明书，其含有关于此类治疗产品的使用的适应症、用法、剂量、施用、联合疗法、禁忌症和/或警告的信息。

用于治疗或预防目的的本发明的药物组合物可以通过与合适的药学上可接受的载体、溶媒等混合(如有需要)来配制以产生冻干制剂或溶液制剂。合适的药学上可接受的载体和溶媒包括，例如，无菌水、生理盐水、稳定剂、辅料、抗氧化剂(例如抗坏血酸)、缓冲剂(例如磷酸盐、柠檬酸盐、组氨酸和其他有机酸)、防腐剂、表面活性剂(例如PEG和吐温)、螯合剂(例如EDTA)和结合剂。还可以含有其他低分子量多肽、蛋白(例如血清白蛋白、明胶和免疫球蛋白)、氨基酸(例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、谷氨酸、天冬氨酸、蛋氨酸、精氨酸和赖氨酸)、糖和碳水化合物(例如多糖和单糖)以及糖醇(例如甘露醇、山梨醇)。制备注射用水溶液时，可以使用生理盐水以及包含葡萄糖和其他佐剂(例如D-山梨醇、D-甘露糖、D-甘露醇和氯化钠)的等渗溶液；可以组合使用适当的增溶剂，例如醇(例如乙醇)、多元醇(例如丙二醇和PEG)和非离子表面活性剂(例如聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、泊洛沙姆188和HCO-50)。通过将透明质酸酶混合到制剂中，可以皮下施用更大的液体体积(ExpertOpin.Drug Deliv.2007Jul；4(4):427-40)。此外，注射器可以预先填充有本发明的药物组合物。溶液制剂可以根据WO2011/090088中描述的方法进行制备。

如有需要，本发明的药物组合物可以封装在微胶囊中(例如，由羟甲基纤维素、明胶和聚(甲基丙烯酸甲酯)制成的微胶囊)，或掺入胶体药物递送系统(例如，脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米颗粒和纳米胶囊)中(参见，例如，“雷明顿制药科学第16版”，Oslo编辑(1980))。用于制备作为控释药剂的药剂的方法也是已知的，并且此类方法可以应用于本发明的药物组合物(Langer等人,J.Biomed.Mater.Res.15:267-277(1981)；Langer,Chemtech.12:98-105(1982)；美国专利号3,773,919；欧洲专利申请公开号EP 58,481；Sidman等人.,Biopolymers 22:547-556(1983)；和EP 133,988)。

本发明的药物组合物可以通过任何适当的途径施用于患者。例如，它可以通过推注或通过连续输注、肌内、腹腔、脑脊髓内、经皮、皮下、关节内、舌下、滑膜内、口服、吸入、局部或外部向患者施用持续一段时间。优选静脉内施用或皮下施用。

本发明的抗体可以用于包含该抗体的用于治疗或预防MG的试剂，或可用于治疗或预防MG的方法，该方法包括向MG患者施用该抗体。另外，本发明的抗体可用于生产治疗或预防MG的试剂。此外，本发明的抗体可以被称为用于治疗MG患者或用于预防MG的抗体。此外，本发明的抗体优选为萨特利珠单抗，具体为含有包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的重链可变区和包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的轻链可变区的抗体。

本文引用的所有现有技术参考文献均通过引用并入本说明书中。

[实施例]

下文将参考实施例具体描述本发明，但不应解释为对本发明的限制。

实施例1：萨特利珠单抗(SA237)的制备

SA237，其是专利文献WO 2010/035769中描述的IL-6受体抗体(在专利文献WO2010/035769中，包含具有SEQ ID NO:26(本说明书中的SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的重链的抗体和具有SEQ ID NO:29(本说明书中的SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的轻链)，根据该专利文献的描述进行制备。重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，并且轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。使用制备的抗体，通过专利文献WO 2011/090088中描述的方法制备皮下施用制剂。

实施例2：随机、双盲、安慰剂对照、多中心的III期研究

研究设计

1.研究描述

这项随机、双盲、安慰剂对照、多中心的III期研究旨在评价与安慰剂相比，萨特利珠单抗作为护理标准(SOC)的附加疗法治疗全身性重症肌无力(全身性MG或gMG)的疗效、安全性、药代动力学和药效学。该研究包括24周双盲(DB)期和开放标签扩展(OLE)期。

研究设计的总结如图1所示。

1.1双盲期

在双盲治疗期间，患者基于体重以1:1的比例随机接受120mg、180mg或240mg萨特利珠单抗(A组)或安慰剂(B组)，持续24周。将基于基线护理标准治疗(SOC)、自身抗体类型和地区作为分层因素对随机化进行分层。

除了稳定剂量的SOC外，在第0、2、4周以及此后每4周一次，直至DB期结束时，向患者皮下施用设盲药物。在DB期间，对药代动力学(PK)数据进行中期分析。根据中期PK分析的结果和预先指定的标准，确定是否增加研究药物剂量。如果确定增加，则此后，A组施用180mg或240mg萨特利珠单抗。

本研究允许的背景治疗是单独使用抗胆碱酯酶抑制剂(AChEI)或以下治疗方法(有或没有AChEI)：口服皮质类固醇(OCS)、一种免疫抑制剂治疗(IST)以及OCS与一种IST联合使用。允许的IST药物例如为硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、环孢菌素A和他克莫司，但不限于此。

1.2开放标签扩展期

完成DB期的患者即可进入OLE期。第24周评估完成后，所有患者均接受萨特利珠单抗开放标签治疗。

在OLE期间，所有患者均接受120mg、180mg或240mg萨特利珠单抗的开放标签治疗。

基于研究者的判断，背景治疗(OCS、IST和/或AChEI)的剂量减少(逐渐减少)可以在OLE期间的第12周或稍后开始。

1.3非计划访视和挽救治疗

治疗神经科医生可以自行决定是否进行非计划访视。如果在研究期间发生疑似gMG恶化，参与者需要在接受挽救治疗之前或之后立即返回研究中心并接受gMG严重程度评价。

挽救治疗包括静脉注射免疫球蛋白治疗(IVIg)和血浆置换(PE)治疗(联合或不联合高剂量皮质类固醇)。挽救治疗的选择由研究者基于总体临床评估决定。

在DB期间接受挽救治疗的患者可以在DB期间完成后接受OLE萨特利珠单抗施用。

1.4受试患者和研究地区

本研究在包括但不限于北美、欧洲、拉丁美洲和亚洲的国家进行。

这项研究入组约240名患者，包括约20名12至17岁的gMG青少年。主要入选/排除标准如下所示。

[入选标准]

-获得知情同意时年龄为12岁或大于12岁的患者

-被诊断患有属于美国重症肌无力基金会(MGFA)的II、III或IV级严重程度分类的重症肌无力伴全身肌无力的患者。诊断确认需要通过筛选时三种抗体类型(AChR抗体、MuSK抗体和Lrp4抗体)中的一种的阳性血清检测来证明和支持。

-MG-ADL总评分为5或高于5分且不少于与非眼部症状相关的评分的一半的患者。

-可以接受挽救治疗(免疫球蛋白治疗(IVIg)、血浆交换(PE)治疗和大剂量皮质类固醇治疗)的患者。

-入组前已接受稳定剂量的重度重症肌无力治疗(硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、环孢菌素A、他克莫司(tachlorimus)、口服皮质类固醇(OCS)或抗胆碱酯酶抑制剂(AChEI))的患者。

[排除标准]

-排除有胸腺囊肿、胸腺瘤或其他胸腺肿瘤病史(根据世界卫生组织胸腺肿瘤分类(2015)定义)的患者，除非他们被认为已通过适当的治疗治愈，并且筛选前五年或更长时间未观察到复发。

-排除胸腺切除术小于十二个月的患者。

-排除过去三个月内有肌无力危象病史(MGFAV级)的患者。

2.研究时长

研究的总时长，从第一名患者筛选到OLE期结束，估计为约四年。

3研究设计的基本原理

3.1萨特利珠单抗剂量和时间计划的基本原理

本研究使用SC注射按体重分级给药，以研究萨特利珠单抗在gMG中的疗效和安全性，如表1所示。

[表1]

萨特利珠单抗治疗全身性重症肌无力III期研究的给药方案

基线体重^a	剂量和方案
		100kg或小于100kg	此后第0、2、4周和Q4W皮下注射施用120mg
大于100kg	此后第0、2、4周和Q4W皮下注射施用180mg

Q4W：每四周一次。

a：在个体患者的体重变化的情况下，建议将其纳入其他给药组。见表2。

给药方案基于信息来源的组合，包括以下：

萨特利珠单抗用于视神经脊髓炎谱系障碍(NMOSD)初步开发的PK、PD和安全性数据；和

考虑人口统计差异。

NMOSD的III期研究中研究的120mg固定剂量方案与大多数患者稳态(RO_tr,ss)值下的高预测中位谷受体占有率(95％或更高)相关，并且显示是安全的且对所有体重组均有效。RO_tr,ss预测值低于80％的少数患者通常基线体重大于100kg。

基于美国急诊室的大型数据集(58,860名具有MG代码的患者)的真实世界数据表明，该人群中约30％的患者体重可能大于100kg。与NMOSD中类似的暴露预期对gMG也有效，因此使用现有群体PK(pop-PK)模型进行模拟，以估计在预期体重范围内，在gMG患者的整个剂量间隔内，NMOSD患者达到相同的最大RO_tr,ss值所需的剂量。

体重为100kg或小于100kg和体重大于100kg的患者每四周120mg施用和每四周180mg施用后，预测观察到的最大浓度(C_max)、谷浓度(C_trough)和RO值分别如图2所示。建议与体重为100kg或小于100kg的患者施用120mg相比，体重大于100kg的患者施用180mg可以获得类似的RO。此外，体重大于过100kg的患者施用180mg时的暴露量处于NMOSD患者III期研究中已确认安全的120mg施用的暴露量范围内。研究设计包括PK中期分析，以确认是否达到目标暴露量和RO。

萨特利珠单抗的NMOSD计划证明具有良好的安全性，这支持本研究中类似暴露的目标。然而，低于目标范围的暴露量可能需要增加剂量，以在整个预期体重范围内的剂量间隔内优化IL-6阻断。因此，研究设计中包括增加剂量的选项(如有必要，适用于所有体重范围)。详细信息在第3.11节中提供。

虽然健康成人(HV)和NMOSD患者之间的萨特利珠单抗的大多数PK参数估计值显示非常相似，但观察到药物总清除率(CL)的人群差异(HV中的协变量值[95％CI]95.8％[67.5至124.1])。因此，假设gMG人群中的CL与HV中的CL相似，PK模拟已被用于探索潜在有用的治疗方案。图3中的模拟表明，如果是这种情况，对于体重为100kg或小于100kg和体重大于100kg的患者，分别采用180mg和240mg(180/240mg方案)的给药方案预期将在整个体重范围内保持RO目标水平。如果gMG中的CL反映了HV中的CL，则剂量应适应这种较高的给药方案。

PK模拟用作PK中期分析的一部分，以确认初始拟定的剂量是否达到目标暴露量，或剂量应适应180mg或240mg方案。无论哪种情况，所选择的给药方案预期不显著超过NMOSD患者III期研究中确认的安全暴露量。

3.2选择背景治疗的基本原理

入组接受稳定剂量背景治疗的患者。研究中允许的背景SOC疗法如下：

AChEI

OCS

一种IST

OCS与一种IST联合使用

接受稳定剂量的OCS、一种IST以及OCS与一种IST联合使用的患者，允许同时使用AChEI。

基于作为全球gMG最常见的治疗选择并根据MG管理的国际共识指南，选择IST和/或OCS联合治疗方案(Sanders等人,Neurology 2016；87:419-25)。

3.3主要结局指标的基本原理：重症肌无力日常生活活动(MG-ADL)

本研究的主要目的是使用MG-ADL作为主要结局指标，比较添加到SOC中的萨特利珠单抗相比于添加到SOC中的安慰剂的疗效。MG-ADL问卷样本如图5所示。

MG-ADL由Wolfe及其同事开发(Neurology 1999；52:1487-9)，用于评估gMG症状的程度(六项：复视、上睑下垂、咀嚼、吞咽、说话困难和呼吸问题)和进行已显示在gMG患者中存在并具有临床相关性的日常生活活动的功能限制(两项：无法刷牙或梳头以及无法从椅子上起身)。八项中的每一项均按照0至3的等级进行排序，总评分范围为0至24，评分越高表明疾病严重程度越高(图5)。MG-ADL的项目均源自包含临床医生评定的QMG量表的原始13项症状列表。

MG-ADL的心理测量特性已得到表征。通过显示与QMG(r＝0.58；Wolfe等人,Neurology 1999；52:1487-9)、MGC量度(r＝0.85)和MG-QOL 15r量度(r＝0.76)的相关性，证明构建有效性(Muppidi等人,Muscle Nerve 2011；44:727-31)。测试/再测试信度在小样本(n＝26)的患者中得到证实，两次重复评估相隔2至4天，显示出高度的可重复性(r＝0.94)(Muppidi等人,Muscle Nerve 2011；44:727-31)。

由于疾病的波动性质以及已建立的心理测量特性(包括与患者日常生活功能相关的良好内容效度)，由于患者主观反馈的重要性，MG-ADL是合适的主要结局指标。在最近完成的(Howard et al.,Lancet Neurol 2017；16:976-86)和正在进行的gMG随机、安慰剂对照的III期试验(NCT03669588、NCT03971422、NCT03920293、NCT04115293和NCT03304054)中，MG-ADL量表已被用作主要结局指标。

3.4次要结局指标的基本原理

选择QMG、MG-QOL 15r、NeuroQOL疲劳量表和MGC作为次要终点，以比较添加到SOC中的萨特利珠单抗相比于添加到SOC中的安慰剂的疗效。

QMG是基于临床检查的gMG症状严重程度的13项评估(Tindall等人,N Engl J Med1987；316:719-24)。自1983年以来，它一直用于临床试验，当时它首次被开发用于研究AChR-Ab结合与疾病严重程度之间的关系(Besinger等人,Neurology 1983；33:1316-21)。最近，在最近完成的依库珠单抗治疗gMG的研究(Howard等人,Lancet Neurol 2017；16:976-86)和所有正在进行的gMG随机、安慰剂对照的III期试验中，QMG已被用作关键的次要结局指标(NCT03669588、NCT03971422、NCT03920293、NCT04115293和NCT03304054)。QMB问卷样本如图6所示。

QMG评估上睑下垂、复视、眼轮匝肌无力、吞咽、语言障碍、用力肺活量百分比、手臂和腿部耐力(四项)、握力(两项)和颈部屈曲强度的症状严重程度，范围从0至3，产生总评分范围从0至39，并且值越高表示症状越严重(Tindall等人,N Engl J Med 1987；316:719-24)。

使用观察和临床试验数据研究QMG的心理测量特性。QMG在临床稳定的患者中具有可接受的内部一致性(Cronbach’sα＝0.74)和测试/再测试信度(组内相关系数[ICC]＝0.88)(Barnett等人,J Neuromuscular Disease 2015；2:301-11)。QMG的构建有效性研究发现与MGFA评分(r²＝0.54)和MG-QOL 15(r＝0.41)相关(Barnett等人,J ClinNeuromuscular Dis.2012；13:201-5)。

本研究通过比较第24周(DB期结束)时QMG评分相对于基线的变化，评估添加到SOC中的萨特利珠单抗相比于添加到SOC中的安慰剂的疗效。

MGC是本试验中的另外的次要疗效结局指标。顾名思义，MGC是综合指标，由MG-ADL(咀嚼、吞咽、言语和呼吸)、QMG(复视和上睑下垂)和徒手肌肉测试(髋部、颈部、面部和三角肌力量测试)中的项目组成，以将临床医生和患者报告的要素纳入单一指标中(Burns等人,Muscleand Nerve 2008；38:957-63)。这十项的总评分范围为0至50，并且值越高表明症状严重程度越高。MGC问卷样本如图7所示。MGC的心理测量特性在初级保健环境中对分布在11个中心的175名患者进行评估(Burns等人,Neurology 2010；74:1434-40)。发现来自单一中心的小样本患者(n＝38)的测试/再测试信度较高(相关系数为0.98)。MGC与MG-ADL总评分(r＝0.85)、MG-QOL 15总评分(r＝0.68)和徒手肌肉测试(r＝0.8)表现出中等到强的收敛效度。

由于MGC具有良好的心理测量特性并且来自医生和患者报告的项目，因此美国重症肌无力基金会的医学科学咨询委员会建议在潜在的新gMG疗法的随机临床试验中使用MGC(Benatar等人2012)。

作为次要疗效目标之一，本研究通过比较第24周(DB研究期结束)时MGC评分相对于基线的变化，评价添加到SOC中的萨特利珠单抗相比于添加到SOC中的安慰剂的疗效。

MG-QOL 15是与特定疾病相关的健康相关QOL指标，由15项组成：活动能力(9项)、症状(3项)以及满足感和情绪健康(3项)。项目按照Likert量表从0至4进行评分，总评分范围从0至60，并且总评分越高表明HRQoL越低(Burns等人,2008)。MG-QOL 15具有强内部一致性信度(Cronbach’sα＝0.89)和测试/再测试信度(ICC＝0.98)(Burns等人,2011)。在最近一项吗替麦考酚酯治疗gMG的临床试验中，MG-QOL 15与36项简表调查的身体和精神总结部分以及MG特定指标(QMG、MG-ADL)良好相关(Burns等人,Muscle and Nerve 2008；38:957-63)。

在IVIg相比于PE的随机对照研究中，MG-QOL 15也被证明是可靠的。在这项研究中，与变化2分的无应答者相比，治疗应答者平均改善了9分，这表明MG-QOL 15降低7分或更多分与中度至重度MG亚组的改善相关(QMG评分小于11)(Barnett等人，2013)。最小重要差异尚未完全确定。由于其广泛使用，最近已对MG-QOL进行修改，以提高某些项目的表现(Burns等人,2016)。在修订版(MG-QOL 15r)中，基于Rasch分析，15项的评分范围从0-4更改为0-2。得出的指标评分范围为0至30，并且评分越高表示健康相关的生活质量越低。与原始量表相比，修订版比原始版具有更好的心理测量特性，并且非常易于使用(Burns等人,2016。MG-QOL 15r问卷样本如图8所示。

Neuro-QOL疲劳量表是简短形式，其是一系列工具和项目库的一部分，该量表通过国家神经疾病和中风研究所资助的计划开发，用于评价被诊断患有神经疾病的成人和儿童的HRQoL(Cella等人,Neurology 2012；78:1860-7)。它由八项组成，每项均使用5级Likert量表，范围从1(从不)至5(总是)，召回期为7天。该指标表明具有强内部一致性信度(Chronbach’sα系数＝0.97)和构建有效性(参见，例如，Cella等人,Neurology 2012；78:1860-7)。Neuro-QOL疲劳量表的样本如图9所示。

最近，使用257名接受IVIg/PE或泼尼松的患者的观察队列对MG患者的量表进行评估(Tran等人,Muscle Nerve 2018；58:197-203)。结果表明疲劳与MG严重程度之间呈正相关。MGFAII级和III级患者表现出轻度至中度疲劳，而IV级患者表现出重度疲劳。疲劳评分与MG损伤指数、QMG、MGC和MG-ADL呈正相关(Pearson’s r＝0.52-0.69)，表明收敛效度可接受(Tran等人,Muscle Nerve 2018；58:197-203)。与基线相比，所有治疗组在第4周时的疲劳程度均显著下降，总体人群的标准化反应平均值(SRM)为0.49，表明该指标具有良好的反应性(Tran等人,2018,Muscle Nerve 2018；58:197-203)。

Neuro-QOL疲劳量表也被用于最近MG患者中依库珠单抗的REGAIN研究(Andersen等人,Qual Life Res.2019；28:2247-54)。

3.5次要应答者分析

作为次要疗效目标的一部分，对MG-ADL、QMG和MGC总评分进行支持性应答者分析。

它们包括但不限于以下：

在总体人群或未接受挽救治疗的人群中，MG-ADL总评分相对于基线的变化，以及相对于基线下降一定分数或更多的患者比例

在总体人群或未接受挽救治疗的人群中，QMG总评分相对于基线的变化，以及相对于基线下降一定分数或更多的患者比例

在总体人群或未接受挽救治疗的人群中，MGC总评分相对于基线的变化，以及相对于基线下降一定分数或更多的患者比例

在总体人群或未接受挽救治疗的人群中，MG-QOL 15r总评分相对于基线的变化，以及相对于基线下降一定分数或更多的患者比例

在总体人群或未接受挽救治疗的人群中，Neuro-QOL疲劳子量表总评分相对于基线的变化，以及相对于基线下降一定分数或更多的患者比例

3.6开放标签扩展的基本原理

在24周的DB期后，本研究包括从全球研究中最后一名患者算起约2年的OLE期。OLE的目标是为了评价萨特利珠单抗在gMG患者中的长期安全性和疗效，包括类固醇/IST减少。

本研究入组接受稳定背景治疗的患者，包括“1.1双盲期”中所示的OCS和IST。

长期类固醇治疗与对许多器官系统产生大量不良作用相关，这些器官系统包括骨骼(骨质疏松症、缺血性坏死)、肌肉(肌病)、新陈代谢和内分泌器官(体重增加、糖耐量受损、下丘脑-垂体-肾上腺抑制)、皮肤(皮肤萎缩、痤疮、皮纹)、眼睛(青光眼、白内障)、行为和情绪(情绪障碍、失眠)、心血管系统(高血压、体液潴留、血清脂蛋白紊乱)、胃肠系统(胃炎、消化性溃疡病)和免疫系统(感染风险增加)。MG的关键治疗目标之一是减少类固醇的暴露(Sanders等人,Neurology 2016；87:419-25；Jaretzki等人,2000 Neurology 2000；55:16-23)。构成本研究背景治疗的类固醇保留IST的不良事件特征包括使用环孢菌素引起的肾毒性、骨髓抑制、感染、肝毒性和恶性肿瘤(Vodopivec等人,2014Semin Nerol 2014；34:467-78；Collins等人,2019 Dermatol Clin 2019；37:83-94)。

在OLE第12周时或之后，基于临床判断，允许逐渐减少类固醇和IST背景治疗。

在OLE期间，基于统计分析计划(SAP)中预先指定的分析，评价患者在同时服用萨特利珠单抗的同时成功逐渐减少类固醇或IST的能力。

3.7生物标志物评估的基本原理

本研究评估基线测量的生物标志物是否可用于识别接受萨特利珠单抗治疗时可获得临床获益的患者，或识别不同的疾病进展。本研究还评估生物标志物是否有助于表征萨特利珠单抗在gMG中的作用机制，提供萨特利珠单抗在gMG中活性的证据，或增加对gMG疾病生物学的认识和理解。

探索性生物标志物样本用于研究目的，以鉴定通路和/或疾病生物标志物(包括但不限于反映炎症、B细胞和T细胞亚群、活性和产物的生物标志物(例如血清IL-17)和血液中的B细胞亚群))。

收集PD生物标志物样本，用于评估靶标结合(例如IL-6和sIL-6R)对萨特利珠单抗治疗的反应。

3.8PK样本收集时间计划的基本原理

在DB期间和直至OLE期间第24周之前，在每次施用前获取用于评估血清萨特利珠单抗浓度的样本，并在剩余治疗期间每12周获取样本，以探索长期治疗后gMG人群中萨特利珠单抗的药代动力学。该评估包括一系列协变量对暴露的影响(例如性别、种族、年龄和体重)，以及暴露与PD、疗效、免疫原性和安全性终点之间的关系。

3.9 PK中期分析的基本原理

根据I期研究确定对NMOSD患者进行的III期研究的剂量和施用，并且III期研究显示出良好的疗效/安全性。虽然针对gMG的这项III期研究提出了类似的剂量选择方法，但申办方注意到萨特利珠单抗的药代动力学存在人群差异，因此，拟定的gMG的III期研究设计包括进行PK中期分析。进行PK中期分析是为了确保患者在申办方保持设盲的情况下实现目标暴露，从而保持这项关键研究的完整性。

当约60名患者完成至少8周的DB治疗(包括来自萨特利珠单抗组的约30名患者)时，进行PK数据的中期分析。中期分析的目的是为了评估达到的萨特利珠单抗暴露量(和预测的RO)是否在预测范围内。在此中期分析中使用现有的RO模型来预测RO被认为是适当的，因为两种适应症中靶标相同，并且预期gMG的靶标表达相似。

图10所示的PK模拟支持为此PK中期分析拟定的病例数量。假设gMG患者的CL与健康成人或NMOSD患者中观察到的CL相似，则认为对约30名患者进行PK中期分析可以检测到CL增加。

在整个研究过程中，为了进行PK中期分析，入组一系列体重的患者，其比例近似代表总体gMG人群。

剂量和施用决策的程序在研究开始前的统计分析计划中定义。将从gMG患者获得的PK数据纳入现有的群体药代动力学模型中以更新模型，并将获得的预测暴露量和RO与预设标准进行比较以确定最佳剂量。如果未达到靶标暴露，则对于体重为100kg或小于100kg和大于100kg的患者，剂量分别增加至180mg和240mg的预定剂量方案。在gMG中的CL值反映了HV中的CL值(高于NMOSD人群中的CL值)的情况下，剂量和施用的基本原理在第3.1节中描述。

3.10免疫原性样本收集的基本原理

在入组III期研究的大部分NMOSD患者中检测到抗萨特利珠单抗抗体(ADA)，并且获得的数据表明，发生ADA的概率与低暴露量和较高体重呈正相关。然而，在这些III期研究中，所有体重组均证明了类似的临床重要疗效。

与PK样本平行收集ADA血清样本，以评估gMG人群中ADA的发生率和滴度-时间特征，以及对萨特利珠单抗暴露量的影响。将ADA数据纳入第8周的PK数据盲审中，用于解读萨特利珠单抗浓度数据，并且也纳入在基于完整研究数据集的后续分析中。

[工业实用性]

序列表

<110> 中外制药株式会社

豪夫迈·罗氏有限公司

<120> 用于治疗或预防重症肌无力的药物组合物

<130> C1-A2036P

<150> JP 2021-040206

<151> 2021-03-12

<160> 10

<170> PatentIn 3.5版

<210> 1

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的多肽序列

<400> 1

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly His Ser Ile Ser His Asp

20 25 30

His Ala Trp Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Phe Ile Ser Tyr Ser Gly Ile Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Leu Ala Arg Thr Thr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Glu Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 2

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的多肽序列

<400> 2

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Ser Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Thr Asp Ile Ser Ser His

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Glu Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Gly Ser His Leu Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly Asn Arg Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Glu

100 105

<210> 3

<211> 443

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的多肽序列

<400> 3

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly His Ser Ile Ser His Asp

20 25 30

His Ala Trp Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Phe Ile Ser Tyr Ser Gly Ile Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Leu Ala Arg Thr Thr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Glu Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Ser Cys Val Glu

210 215 220

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Ala

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

435 440

<210> 4

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的多肽序列

<400> 4

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Ser Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Thr Asp Ile Ser Ser His

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Glu Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Gly Ser His Leu Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly Asn Arg Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Glu Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 5

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的序列

<400> 5

His Asp His Ala Trp Ser

1 5

<210> 6

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的序列

<400> 6

Phe Ile Ser Tyr Ser Gly Ile Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Gln Gly

1 5 10 15

<210> 7

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的序列

<400> 7

Ser Leu Ala Arg Thr Thr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 8

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的序列

<400> 8

Gln Ala Ser Thr Asp Ile Ser Ser His Leu Asn

1 5 10

<210> 9

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的序列

<400> 9

Tyr Gly Ser His Leu Leu Ser

1 5

<210> 10

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工合成的序列

<400> 10

Gly Gln Gly Asn Arg Leu Pro Tyr Thr

1 5

Claims

1.用于治疗或预防重症肌无力患者的药物组合物，其包含以下作为活性成分：

(ii)抗体，其含有包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的重链可变区和包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的轻链可变区；或

其中所述患者呈抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体阳性、抗肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)抗体阳性或抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4(Lrp4)抗体阳性。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述抗体是萨特利珠单抗。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述重症肌无力患者呈抗MuSK抗体阳性或抗Lrp4抗体阳性。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其中所述重症肌无力患者是被诊断患有表现出属于美国重症肌无力基金会(MGFA)临床分类的II级、III级或IV级的全身性肌无力的重症肌无力的患者。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其中所述重症肌无力患者是总MG日常生活活动(MG-ADL)评分为5或更高的患者，并且其中所述评分的一半或更多与非眼部症状有关。

6.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其中所述重症肌无力是全身性重症肌无力。

7.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其降低MG-ADL评分。

8.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其降低定量重症肌无力(QMG)评分、15项重症肌无力(MG)生活质量量表(修订版)(MG-QOL 15r)评分、神经病学生活质量疲劳简表(Neuro-QOL疲劳)评分或重症肌无力综合(MGC)评分。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的药物组合物，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，所述抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重为大于100kg的患者，所述抗体的剂量为180mg/次施用。

10.根据权利要求1至8中任一项所述的药物组合物，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，所述抗体的剂量为120mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，所述抗体的剂量为240mg/次施用。

11.根据权利要求1至8中任一项所述的药物组合物，其中对于体重为100kg或小于100kg的患者，所述抗体的剂量为180mg/次施用，并且对于体重大于100kg的患者，所述抗体的剂量为240mg/次施用。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物在短间隔给药期之后以标准给药间隔施用，在所述短间隔给药期期间，所述组合物以与标准剂量相同的剂量以短于所述标准给药间隔的给药间隔多次施用。