CN117310032A - 一种中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，所述检测方法包括如下步骤：S1、配制不同浓度的补肾壮阳类非法添加药物的混合标准溶液；S2、将中药材进行干燥、粉碎后，加入甲醇涡旋、离心，得到提取液；S3、采用Sin‑QuEChERS净化管进行净化，收集甲醇净化液；Sin‑QuEChERS净化管腔内预先封装有130‑170mg PSA、180‑220mg C18、MWCNTs和无水MgSO4；S4、对混合标准溶液进行液相色谱串联质谱检测绘制标准曲线；S5、对待测样品进行测定，获得待测样品中补肾壮阳类非法添加药物的浓度。本发明的检测方法能够有效降低质谱分析过程基质效应的影响，提升检测的准确度和精密度，具有较强的适用性。
Description
技术领域
本发明涉及非法添加药物检测技术领域，尤其涉及一种中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法。
背景技术
本发明背景技术中公开的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
目前，标称以中药或药食同源食物为原料生产加工的中成药和保健食品，在人群中具有可观的市场和销量。但近年来一些不法商家为提升产品的保健效果，向这类产品中非法添加化学药品等违禁物质，严重影响着消费者的身体健康，同时扰乱市场秩序。其中，声称“抗疲劳”或暗示补肾壮阳类的中成药及保健品中非法添加那非类物质是打击食品药品安全违法犯罪的重点，研究团队和监管部门也建立了相关的快速检测或实验室检测方法，大大提升了技术甄别能力。而以淫羊藿、锁阳和肉苁蓉等为代表的中药材则仍是监管洼地，且这些中药材在市场中逐渐由原料药材成为终端消费品，因而具有较高的非法添加风险。因此，对于淫羊藿、锁阳和肉苁蓉等为代表的中药材中那非类违禁物质的检测至关重要。
实验室常用的质谱分析技术对样品基质的净化要求较高，然而，中药材基质复杂，极易在质谱分析过程中产生基质效应以及仪器污染，从而导致检测准确度差、定性错误率高、仪器效能下降等问题。已公开的相关论文及专利方法的适用产品多数为中成药、保健食品、化学药品等提取、加工后的产品，并不适用于中药材的分析，目前针对中药材中那非类违禁物质的检测方法仍是空白。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，能有效降低质谱分析过程中基质效应的影响并消除干扰，提升检测的准确度和精密度，具有较强的适用性。
为了实现上述目的，本发明提供了一种中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，包括如下步骤：
S1、混合标准溶液配制：配制不同浓度的补肾壮阳类非法添加药物的混合标准溶液；所述补肾壮阳类非法添加药物包括他达拉非、氨基他达拉非、那红地那非、那莫西地那非、羟基豪莫西地那非、硫代艾地那非、西地那非、豪莫西地那非、伐地那非、伪伐地那非和红地那非；
S2、样品提取：将中药材进行干燥、粉碎后，加入甲醇涡旋、离心，得到提取液；
S3、提取液净化：采用Sin-QuEChERS净化管进行净化，收集甲醇净化液；所述Sin-QuEChERS净化管腔内预先封装有130-170mg PSA分散净化剂、180-220mg C18分散净化剂、MWCNTs净化粉和无水MgSO4；
S4、标准曲线绘制：对步骤S1中的不同浓度的补肾壮阳类非法添加药物的混合标准溶液进行液相色谱串联质谱检测，根据混合标准溶液的浓度以及检测到的信号强度绘制标准曲线；
S5、数据采集：取步骤S3中的甲醇净化液作为待测样品替代步骤S4中的混合标准溶液，采用相同方法进行检测；
S6、数据分析：根据待测样品的检测结果，对照标准曲线，获得待测样品中补肾壮阳类非法添加药物的浓度，从而实现对中药材中补肾壮阳类非法添加药物的定量检测。
本发明中，所述中药材包括淫羊藿、锁阳和肉苁蓉中的一种或多种。
优选的，步骤S1中，采用甲醇分别配制浓度为2、5、10、20、50和100ng/mL的补肾壮阳类非法添加药物的混合标准溶液。
优选的，步骤S2中，干燥、粉碎的具体步骤为：将50～200g块状中药材切片，在70-90℃条件下干燥1-3小时，取出后冷却至室温，然后使用破壁粉碎机进行粉碎处理。
优选的，步骤S2中，加入甲醇涡旋、离心的具体步骤为：称量干燥、粉碎后的中药材样品1.5-2.5g至离心管中，加入10-20mL甲醇，涡旋0.5-2min使其混匀，并在7000-9000r/min转速条件下离心4-6min。
优选的，步骤S3中，所述MWCNTs净化粉的添加量为45-55mg，所述无水MgSO4的添加量为750-850mg；所述收集甲醇净化液的具体步骤为：以0.8-1.2mm/s的速度缓慢下压Sin-QuEChERS净化管，使收集腔中收集到2-4mL的甲醇净化液。
优选的，步骤S4中，液相色谱采用C18色谱柱或等效色谱柱，流动相A为5mmol/L乙酸铵和0.5％甲酸的水溶液；流动相B为5mmol/L乙酸铵和0.5％甲酸的甲醇溶液。
进一步的，所述液相色谱的检测条件如下：流速：0.3mL/min，进样体积：5μL，柱温：25℃；所述液相色谱的梯度洗脱程序如下：
优选的，所述步骤S4中，质谱的检测条件为：
离子源：电喷雾电离ESI(+)；气帘气(CUR)：30psi；碰撞气(CAD)：8psi；离子化电压(IS)：4500V；离子源温度(TEM)：500℃；喷雾气(GS1)：50psi；辅助加热气(GS2)：50psi；扫描模式：多反应监测模式(MRM)。
利用本发明上述检测方法，补肾壮阳类非法添加药物的线性检测范围为2～100ng/mL，检出限为0.2-4μg/kg，定量限为0.5-10μg/kg。
从上述技术方案可以看出，本发明取得了以下有益效果：
(1)本发明的11种目标分析物均为当前中成药和保健品重点监测的非法添加项目，目标分析物的选择充分考虑到了药典及其补充方法等检测标准的需要，覆盖面广，且更具有药品非法添加风险的代表性；
(2)本发明的提取和净化工艺在保证理想目标化合物回收率的前提下，使中药材的基质效应对检测结果的影响控制在合理程度内，有效降低质谱分析过程中基质效应的影响并消除干扰，提升检测的准确度和精密度，降低假阳性和假阴性的几率；11种目标物在多种样本、多种浓度中的加标回收率在66.3％～98.4％范围内，RSD在0.6％～4.2％范围内；
(3)利用液相色谱串联质谱进行定量检测，可以实现多种物质的同时检测，分析效率高。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。显而易见地，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例的检测方法流程图；
图2是本发明实施例不同溶剂对那非类药物提取能力对比(c＝50ng/mL,n＝3)图；
图3是本发明实施例使用PSA和C18净化粉对那非类药物溶剂加标回收率的影响图(c＝50ng/mL,n＝3)；
图4是11种药物混合标准溶液的液相色谱-串联质谱分析总离子流图
图5是未采用本发明净化工艺的阴性淫羊藿基质液质联用叠加选择离子流图；
图6是未采用本发明净化工艺的阴性锁阳基质液质联用叠加选择离子流图；
图7是未采用本发明净化工艺的阴性肉苁蓉基质液质联用叠加选择离子流图；
图8是采用本发明净化工艺的阴性淫羊藿基质液质联用叠加选择离子流图；
图9是采用本发明净化工艺的阴性锁阳基质液质联用叠加选择离子流图；
图10是采用本发明净化工艺的阴性肉苁蓉基质液质联用叠加选择离子流图。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
下面结合具体实施例对本发明技术方案做进一步阐述。
实施例
1.实验部分：
1.1实验试剂：
甲醇、甲酸、乙酸铵、无水硫酸镁、封端十八烷基硅胶(C18)分散净化剂、N-丙基乙二胺(PSA)分散净化剂、多壁碳纳米管(MWCNTs)分散净化剂、补肾壮阳类药物混合标准溶液(他达拉非、氨基他达拉非、那红地那非、那莫西地那非、羟基豪莫西地那非、硫代艾地那非、西地那非、豪莫西地那非、伐地那非、伪伐地那非、红地那非，上述药物的浓度均为100μg/mL)。
1.2仪器和设备：
Sin-QuEChERS通过式净化管、液相色谱-三重四级杆串联质谱仪(配有ESI离子源)，电子天平(精度为0.01g)、电热恒温干燥箱(温度精度为1℃)、破壁粉碎机、旋涡振荡器、高速冷冻离心机、氮气发生器。
1.3标准系列溶液的配制：
准确移取前述补肾壮阳类药物混合标准溶液(每种药物浓度均为100μg/mL)1mL至100mL容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，配制成各补肾壮阳类药物的浓度为1μg/mL的混合标准中间液。该溶液置于4℃冰箱中保存，有效期1个月。取混合标准中间液适量，采用甲醇分别配制浓度为2、5、10、20、50、100ng/mL的标准系列工作溶液，用于仪器分析。
1.4试样溶液的制备：
1.4.1样品提取：取50～200g中药材，将块状中药材切片，置于电热恒温干燥箱中在80℃条件下干燥2小时，取出后置于干燥器中冷却至室温，随后使用破壁粉碎机进行粉碎处理。称量干燥粉碎后的样品2g(精确至0.01g)至15mL聚丙烯离心管中，加入10mL甲醇，涡旋1min使其混匀，并在8000r/min转速条件下离心5min。
1.4.2提取液的净化：采用Sin-QuEChERS净化管插入离心后的提取管，净化管腔内预先封装有150mg PSA、200mg C18、50mg MWCNTs净化粉和800mg无水MgSO4，以约1mm/s的速度缓慢下压，使收集腔中收集到约3mL的甲醇净化液。取1mL净化液，过0.22μm滤膜转移至进样瓶中，待仪器分析。
1.5仪器分析
1.5.1液相色谱条件：C18色谱柱(2.1×100mm,1.8μm)，流动相：A相为5mmol/L乙酸铵-0.5％甲酸-水，B相为5mmol/L乙酸铵-0.5％甲酸-甲醇；流速：0.3mL/min，进样体积：5μL，柱温：25℃。液相色谱梯度洗脱程序如表1所示。
表1液相色谱梯度洗脱程序
| 时间(min) | 流速(mL/min) | A相比例(％) | B相比例(％) |
| 0 | 0.3 | 90 | 10 |
| 1 | 0.3 | 70 | 30 |
| 10 | 0.3 | 55 | 45 |
| 15 | 0.3 | 5 | 95 |
| 17 | 0.3 | 5 | 95 |
| 17.1 | 0.3 | 90 | 10 |
| 19 | 0.3 | 90 | 10 |
1.5.2质谱条件
离子源：电喷雾电离ESI(+)；气帘气(CUR)：30psi；碰撞气(CAD)：8psi；离子化电压(IS)：4500V；离子源温度(TEM)：500℃；喷雾气(GS1)：50psi；辅助加热气(GS2)：50psi；扫描模式：多反应监测模式(MRM)。目标物质的的多反应监测质谱分析参数见表2。
表2目标物的多反应监测分析参数
注：表2中*为定量离子，丰度比为定性离子与定量离子丰度比值
1.6标准曲线绘制
在前述仪器分析条件下，先后将6个不同浓度的混合标准系列溶液(2、5、10、20、50、100ng/mL)分别注入高效液相色谱-三重四级杆串联质谱仪中，测定相应的峰面积或响应值，以混合标准溶液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，采用系统工作站软件拟合目标化合物的标准曲线。
1.7试样溶液的测定
将1.4.2小节得到的试样溶液和空白样品溶液分别注入高效液相色谱-三重四级杆串联质谱仪中，测得目标化合物相应的峰面积或响应值，由软件工作站计算出试样溶液中目标物的浓度，进一步根据标准曲线计算出中药材样品中各种目标化合物的质量浓度。
本发明实施例的检测方法流程图如图1所示。
2、结果与讨论
2.1样品前处理条件优化
2.1.1样品提取条件的优化
在植物源性基质的农药残留提取中，常用的方法为加入乙腈提取，随后加入氯化钠、无水硫酸镁、无水醋酸钠等物质实现两相分层以及液液萃取；对于干燥后的样本，如茶叶等，普遍采用水分浸泡后再提取的方式。本发明考察了加水浸泡后采用乙腈提取，以及乙腈直接提取、甲醇直接提取对回收率的影响。由图2可以看出，对于淫羊藿、锁阳和肉苁蓉三种药材基质而言，加水浸泡后再用乙腈提取的方式对绝大多数化合物的提取效率均偏低，他达拉非和氨基他达拉非的回收率在30.3％～46.2％范围内，而其余9种物质回收率则低至15％以下。采用甲醇提取和乙腈提取具有接近的提取能力，但乙腈作为溶剂进行仪器分析时，几种物质的峰型表现出显著的拖尾。综合考虑，确定了甲醇直接提取的处理方案。
2.1.2净化操作工艺的确立：
本发明采用商业化的Sin-QuEChERS快速通过式净化技术，其通常用于果蔬农药残留、污染物等物质前处理分析中，相比SPE反相净化和传统QuEChERS分散净化的方式，该净化方式具有更高的分析处理效率，能够将净化处理的时间缩短50％以上。
2.1.3净化材料的选择和优化
采用液相色谱-串联质谱仪器进行分析时，通常需要对植物源性药材提取液进行适当净化，以降低基质效应的影响并延长设备使用寿命。本发明讨论了PSA、C18和GCB(石墨化炭黑)三种净化剂的净化效果并确定了最优方案。
首先采用混合标准溶液研究了三种净化剂对目标化合物的直接影响，如图3所示。从图中可以看出，PSA和C18对多数目标物的影响较小，除伐地那非和那红地那非外，其余各目标物的回收率在82.7％～107.8％范围内；对于绝大多数目标物来说，添加50mg和150mg的PSA或C18的回收率差异并不显著。而GCB净化剂对目标物则有严重的吸附，仅有他达拉非和氨基他达拉非略有回收且与净化剂使用量成反比，其余9种目标物则全部被吸附，表明GCB虽有良好的色素吸附能力但并不适用于那非类物质的净化处理及分析，可能由于那非类化合物多具有苯环及多杂环的平面结构而极易被GCB吸附。
随后，研究了模拟实际检测的基质加标提取液中，净化剂对目标化合物的检测结果影响规律。分别采用淫羊藿、锁阳及肉苁蓉按前述优选的提取方法提取后，进行了50μg/kg水平的标准物质加入，并对净化粉的使用进行了单因素测试，包括1个未添加组、4个不同剂量PSA添加组、4个不同剂量C18添加组，检测数据列举于表1中。
表1基质提取液加入不同含量的PSA和C18净化后的加标回收率
注*：最优配比为150mg PSA和200mg C18复配使用。
从表1和图3的对比中可以发现，药材基质对检测结果的干扰显著，呈现出加标回收率检测值显著降低。由未净化组可看出，三种药材基质中目标物的回收率分别在28.6％～77.3％、38.4％～91.9％、30.3％～88.0％范围内，淫羊藿基质组的检测值显著低于锁阳和肉苁蓉基质组。这表明中药材基质中存在大量的影响目标物仪器分析的干扰物质，且叶类(淫羊藿)和茎类(锁阳和肉苁蓉)等不同中药材也具有显著差异。药物在不同基质中的受干扰程度具有规律特征。在三组未净化基质提取液中，羟基豪莫西地那非、硫代艾地那非和红地那非的回收率均偏低，而他达拉非、那莫西地那非和伪伐地那非的回收率均偏高。
PSA的加入能够影响部分药物的回收率。部分药物回收率会随着PSA的加入量增加而提升，如伐地那非、红地那非、豪莫西地那非；部分药物回收率对PSA敏感，但随添加量增加的变化不明显，如他达拉非、那莫西地那非；部分药物回收率在PSA大量添加时略有提升，如西地那非。研究普遍认为，PSA能够有效吸附净化植物性基质中的有机酸等物质，进而降低基质干扰，提升目标药物的仪器分析响应。但是本发明发现，部分药物的回收率受PSA添加影响不明显甚至略有下降，如那红地那非、硫代艾地那非。
C18的加入能够影响部分药物的回收率。部分药物回收率会随着C18的加入量增加而提升，如那红地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非；部分药物回收率对C18敏感，但随添加量增加的变化不明显，如羟基豪莫西地那非、西地那非。研究普遍认为，C18能够有效吸附净化植物性基质中的脂溶性和弱极性共提取干扰物进而降低基质干扰，提升目标药物的仪器分析响应。但是本发明发现，部分药物的回收率受C18添加影响不明显甚至略有下降，如他达拉非、氨基他达拉非、豪莫西地那非。
可以看出，两种净化剂对于各种目标分析物的影响并不相同，因此，获得在多种药材基质中、所有目标检测物均具有理想回收率的效果是具有挑战性的。发明人研究发现，130-170mg PSA和180-220mg C18分散净化剂复配使用时，对三种药材基质的所有目标检测物均具有较为理想的回收率，加标回收率均高于60％，满足分析检测要求。统筹考虑回收率提升、仪器保护、基质特性等因素确定了150mg PSA和200mg C18复配作为最优配比，如表1中所示。在该配比测试组中，淫羊藿、锁阳、肉苁蓉三种基质药物加标回收率分别在66.3％～90.3％、74.0％～98.4％、72.6％～97.5％范围内，虽然个别药物回收率略低于各自的最优测试组，但整体加标回收率优于单独使用PSA或C18的组别，且所有目标分析物均能够满足分析检测要求。
2.2线性范围及检出限、定量限的确定
本发明确定了各物质的检出限和定量限。检出限的确定原则为信号和噪声比值为3倍时的响应，定量限的确定原则为信号和噪声比值为10倍时的响应。根据物质的检出限、定量限水平以及实际分析需要，提出了线性范围在2～100ng/mL的统一线性范围，经验证各物质在该线性范围内具有良好的线性关系，各物质线性曲线强制通过原点时的相关系数均不低于0.998。表3为各目标物的相关参数。从表3中可以看出，本发明补肾壮阳类非法添加药物的线性检测范围为2～100ng/mL，检出限为0.2～4μg/kg，定量限为0.5～10μg/kg。
表3各目标物的线性方程、范围、相关系数、检出限及定量限
2.3精密度、准确度、基质效应的评估
本发明对建立的检测方法进行了必要的方法验证。分别选择阴性的淫羊藿、锁阳、肉苁蓉样本，选择三个浓度水平，每个浓度水平做六平行加标检测。以平行测定的平均加标回收率考察准确度，以平行测定的相对标准偏差RSD考察精密度。由表4可以看出，目标物在多种样本、多种浓度中的加标回收率在66.3％～98.4％范围内，RSD在0.6％～4.2％范围内，表明本发明方法具有良好的精密度和准确度。
本发明对不同中药材基质在检测过程中产生的检测结果系统性偏差，即基质效应值(ME)进行了评估，评估计算方法为基质加标回收样本与空白基质加标回收样本检测结果比值。评估过程选取的基质为淫羊藿、锁阳和肉苁蓉。淫羊藿基质的目标物的ME值在0.72～0.96范围内，锁阳基质的目标物的ME值在0.77～0.95范围内，肉苁蓉基质的目标物的ME值在0.82～0.97范围内，均表现出不同程度的基质抑制效应。一般认为，基质效应值在0.7～0.9范围内为基质弱抑制效应，0.9～1.1范围内为可忽略的基质效应。由表1数据可知未采用本发明净化工艺的中药材提取液会在液相色谱-质谱联用分析中造成显著的基质效应，而从表4中可以看出，在采用本发明的提取和净化工艺后基质效应均为弱抑制或可忽略的基质效应，说明基质对检测结果的影响会控制在合理程度内。
表4基质效应值(n＝2)、多浓度平均加标回收率及相对标准偏差(n＝6)
2.4仪器谱图验证
本发明经一系列前处理和仪器分析的工艺、参数优化，确定了最优的检测方法。为验证方法的仪器适用性，本发明提供了该方法的液相色谱-串联质谱仪分析的离子流图。
图4是他达拉非、氨基他达拉非、那红地那非、那莫西地那非、羟基豪莫西地那非、硫代艾地那非、西地那非、豪莫西地那非、伐地那非、伪伐地那非、红地那非的总离子流图。可以看出，11种目标药物在建立的仪器条件下具有良好的分离效果，均具有尖锐、对称的峰形，满足分析检测要求。
图5-图7分别是经甲醇提取后未采用本发明净化方法的阴性淫羊藿、锁阳、肉苁蓉基质总离子流图，图8-图9分别是经甲醇提取后采用本发明净化方法的阴性淫羊藿、锁阳、肉苁蓉基质总离子流图。可以看出，净化后的样品测试溶液谱图中基线水平更低，干扰杂峰显著减少，表明本发明的净化工艺能够显著改善样品测试溶液的仪器分析效果。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、混合标准溶液配制：配制不同浓度的补肾壮阳类非法添加药物的混合标准溶液；所述补肾壮阳类非法添加药物至少包括他达拉非、氨基他达拉非、那红地那非、那莫西地那非、羟基豪莫西地那非、硫代艾地那非、西地那非、豪莫西地那非、伐地那非、伪伐地那非和红地那非；
S2、样品提取：将中药材进行干燥、粉碎后，加入甲醇涡旋、离心，得到提取液；
S3、提取液净化：采用Sin-QuEChERS净化管进行净化，收集甲醇净化液；所述Sin-QuEChERS净化管腔内预先封装有130-170mg PSA分散净化剂、180-220mg C18分散净化剂、MWCNTs净化粉和无水MgSO4；
S4、标准曲线绘制：对步骤S1中的不同浓度的补肾壮阳类非法添加药物的混合标准溶液进行液相色谱串联质谱检测，根据混合标准溶液的浓度以及检测到的信号强度绘制标准曲线；
S5、数据采集：取步骤S3中的甲醇净化液作为待测样品替代步骤S4中的混合标准溶液，采用相同方法进行检测；
S6、数据分析：根据待测样品的检测结果，对照标准曲线，获得待测样品中补肾壮阳类非法添加药物的浓度，实现对中药材中补肾壮阳类非法添加药物的定量检测。
2.如权利要求1所述的中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，所述中药材包括淫羊藿、锁阳和肉苁蓉中的一种或多种。
3.如权利要求1所述的中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，步骤S1中，采用甲醇分别配制浓度为2、5、10、20、50和100ng/mL的补肾壮阳类非法添加药物的混合标准溶液。
4.如权利要求1所述的中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，步骤S2中，干燥、粉碎的具体步骤为：将50～200g块状中药材切片，在70-90℃条件下干燥1-3小时，取出后冷却至室温，然后使用破壁粉碎机进行粉碎处理。
5.如权利要求1所述的中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，步骤S2中，加入甲醇涡旋、离心的具体步骤为：称量干燥、粉碎后的中药材样品1.5-2.5g至离心管中，加入10-20mL甲醇，涡旋0.5-2min使其混匀，并在7000-9000r/min转速条件下离心4-6min。
6.如权利要求1所述的中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，步骤S3中，所述MWCNTs净化粉的添加量为45-55mg，所述无水MgSO4的添加量为750-850mg；所述收集甲醇净化液的具体步骤为：以0.8-1.2mm/s的速度缓慢下压Sin-QuEChERS净化管，使收集腔中收集到2-4mL的甲醇净化液。
7.如权利要求1所述的中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，步骤S4中，液相色谱采用C18色谱柱或等效色谱柱，流动相A为5mmol/L乙酸铵和0.5％甲酸的水溶液；流动相B为5mmol/L乙酸铵和0.5％甲酸的甲醇溶液。
8.如权利要求7所述的中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，所述液相色谱的梯度洗脱程序如下：
所述液相色谱的检测条件如下：流速：0.3mL/min，进样体积：5μL；柱温：25℃。
9.如权利要求1所述的中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，所述步骤S4中，所述质谱的检测条件为：
离子源：电喷雾电离ESI(+)；气帘气：30psi；碰撞气：8psi；离子化电压：4500V；离子源温度：500℃；喷雾气：50psi；辅助加热气：50psi；扫描模式：多反应监测模式。
10.如权利要求1所述的中药材中补肾壮阳类非法添加药物含量的检测方法，其特征在于，补肾壮阳类非法添加药物的线性检测范围为2～100ng/mL，检出限为0.2-4μg/kg，定量限为0.5-10μg/kg。
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Cited By (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN117665174A (zh) * | 2024-02-01 | 2024-03-08 | 巴中市产品质量检验检测中心 | 一种检测pde5和ssri的方法及其应用 |
| CN117665174B (zh) * | 2024-02-01 | 2024-04-23 | 巴中市产品质量检验检测中心 | 一种检测pde5和ssri的方法及其应用 |
| CN118340804A (zh) * | 2024-03-15 | 2024-07-16 | 兰州大学 | 一种提高锁阳营养成分含量的加工方法 |
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