CN117229304A

CN117229304A - 一种去甲斑蝥素衍生物、制备方法及应用

Info

Publication number: CN117229304A
Application number: CN202311124633.9A
Authority: CN
Inventors: 张学农; 刘颜
Original assignee: Suzhou University
Current assignee: Suzhou University
Priority date: 2023-09-01
Filing date: 2023-09-01
Publication date: 2023-12-15

Abstract

本发明公开了一种去甲斑蝥素衍生物、制备方法及应用，属医药制备技术领域。将去甲斑蝥素与氨基苯硼酸溶解于适量干燥的四氢呋喃中，得到粗产物；加入乙酸乙酯，减压旋蒸得到白色固体；再加入乙酸乙酯、丙酮搅拌，过滤后得到白色粉末状去甲斑蝥素衍生物。本发明将去甲斑蝥素内酯开环后的羧基与氨基苯硼酸的氨基连接起来，得到的去甲斑蝥素衍生物，与化疗药物联用，或用作术前用药，可拮抗化疗药物导致的白细胞低下症。本发明合成的去甲斑蝥素衍生物方法简单，产率高，成本低，升高白细胞作用显著，能有效降低去甲斑蝥素的毒副作用，口服生物利用度高，提高疗效。

Description

一种去甲斑蝥素衍生物、制备方法及应用

技术领域

本发明涉及一种杂化化合物及其合成方法，特别涉及一种具有升白作用的去甲斑蝥素衍生物及其合成，属于医药制备技术领域。

背景技术

肿瘤是威胁人类健康最严重的疾病之一，其死亡率也呈逐年上升趋势。治疗肿瘤的常用手段包括手术、放疗、化疗等，其中化疗药物选择性低，不仅对肿瘤细胞有杀伤作用，也会破坏正常组织和细胞，尤其对骨髓干细胞这类增殖旺盛的细胞具有很强的抑制作用，从而引起白细胞减少、血小板减少、抵抗力下降等不良反应，这使得患者延期或中断化疗，延误肿瘤治疗时机。

去甲斑蝥素（Norcantharidin，NCTD）：NCTD为斑蝥素的2，3-位去甲基化衍生物，与斑蝥素相比，抗肿瘤活性增强，泌尿系统刺激性明显减少，是我国首先合成的第一个具有升高白细胞作用的抗肿瘤药物。一定剂量内的 NCTD 可明显抑制癌细胞的生长及诱导其凋亡，对正常细胞无明显抑制作用，可升高外周血白细胞数量。但是由于NCTD临床给药剂量较大，被吸收后广泛分布于机体各组织中，产生肝肾毒性、泌尿系统刺激等不良反应。此外，NCTD的消除半衰期短，生物利用度不高，这些问题导致NCTD的治疗效果受到很大影响，阻碍了其临床使用。因此，对去甲斑蝥素进行结构修饰改造，得到药效增强、毒副作用降低、生物利用度高的衍生物成为解决上述问题的关键。

发明内容

本发明的目的在于提供一种合成工艺简单，生产成本低，产率高，低毒，且具有升白作用的去甲斑蝥素衍生物、合成方法及其应用。

实现本发明目的的技术方案是提供一种去甲斑蝥素衍生物，它的结构式为：

。

本发明技术方案还包括一种去甲斑蝥素衍生物的制备方法，包括如下步骤：

（1）按摩尔比为1：1，将去甲斑蝥素与氨基苯硼酸溶解于适量干燥的四氢呋喃中，室温条件下搅拌16～24小时，得到粗产物；

（2）在步骤（1）得到的粗产物中加入乙酸乙酯，减压旋蒸得到白色固体；

（3）将乙酸乙酯、丙酮按体积比为1～2：1混合，加入到步骤（2）得到的白色固体中，搅拌3～6小时后过滤；

（4）重复步骤（3）4～6次，得到白色粉末状去甲斑蝥素衍生物。

本发明提供的去甲斑蝥素衍生物的应用，其与化疗药物联用，用于治疗化疗药物引起的白细胞低下症，或用作术前用药。

苯硼酸是含有苯环的一类硼酸化合物，能够与多羟基类化合物糖特异性结合，氨基苯硼酸作为取代芳基硼酸，为中等强度的路易斯酸，具有相当高的反应活性，同时，氨基苯硼酸还可以发生C-C键、C-O键等偶联反应。本发明利用氨基苯硼酸上的氨基与去甲斑蝥素发生酰胺缩合反应，将苯硼酸修饰于去甲斑蝥素上；通过控制反应条件，将内酯环开环并且保留一个羧基，得到去甲斑蝥素-苯硼酸开环衍生物；得到的化合物在保留抗肿瘤的活性的同时，毒性明显降低，尤其是对肝脏、肾脏等重要脏器几乎没有损伤，且保留了去甲斑蝥素的升白作用。

本发明技术方案的有益效果在于：

1.将去甲斑蝥素进行开环修饰后，保留了去甲斑蝥素的升白作用，能够拮抗化疗药物导致的骨髓抑制作用。通过小鼠急性毒性实验表明，去甲斑蝥素修饰后，毒性反应大大减少，相对于去甲斑蝥素，肝肾损伤明显减轻。

2.本发明提供的去甲斑蝥素衍生物，生产成本低，合成工艺简单，通过简单的反应即可得到产物，容易实现工业化生产。

附图说明

图1是本发明实施例提供的去甲斑蝥素衍生物的氢谱（氘代DMSO溶解）图；

图2是本发明实施例提供的去甲斑蝥素衍生物的碳谱（氘代DMSO溶解）图；

图3是本发明实施例提供的去甲斑蝥素衍生物的质谱图。

实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步描述

实施例

本实施例提供一种去甲斑蝥素衍生物，其制备方法包括如下步骤：

步骤1，将500mg（3mmol）去甲斑蝥素和407.5mg（3mmol）氨基苯硼酸放入反应瓶中，加入5mL干燥四氢呋喃，溶解后室温搅拌16小时，产生大量白色沉淀，过滤得粗产物。

反应过程如下：

。

步骤2，将粗产物加入乙酸乙酯，减压旋蒸得到白色固体，加入少量乙酸乙酯：丙酮，体积比1：1进行搅拌，3～6个小时后过滤。

重复以上操作2～3次，得到白色粉末状去甲斑蝥素衍生物，记作NCTD-PBA，产率为70%。

对本实施例制备的化合物进行表征及产物的性能测定。

核磁表征

将6mg产物溶解于0.6mL的氘代DMSO中，在400MHz核磁共振仪上测试，¹H-NMR图谱如图1所示：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ2.00 (s, 1H), 9.55 (s, 1H), 7.99 (s, 2H),7.77 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.70 – 7.66 (m, 1H), 7.45 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.24(t, J = 7.7 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 3.08(d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.94 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 1.61 – 1.49 (m, 4H).

将8mg产物溶解于0.8mL的氘代DMSO中，在400MHz核磁共振仪上测试，¹³C-NMR图谱如图2所示：¹³C NMR (101 MHz, DMSO-d6)δ171.12 , 168.00 , 137.22 , 127.61 ,126.37 , 123.95 , 119.93 , 77.65 , 52.40 , 50.38 , 27.77 , 27.43 , 27.26 ,26.87 .

图1和2的结果证明，本实施例得到的产物NCTD-PBA开环化合物已成功制备。

2.化合物应用于治疗化疗药物骨髓抑制作用

多数抗癌药物都有骨髓抑制的副作用，使得其临床应用受到很大限制。去甲斑蝥素通过刺激骨髓细胞的增殖，抑制骨髓细胞的凋亡从而导致白细胞升高，其优势在于抑制肿瘤细胞的同时，不降低周围血中的白细胞数量，对机体没有明显的免疫抑制。为考察本发明制备的产物是否仍然具有升高白细胞的作用，选用化疗药物环磷酰胺对小鼠进行造模后给药评估。试验方案如下：

造模：环磷酰胺致白细胞减少小鼠造模，除空白组外，实验小鼠腹腔注射环磷酰胺80mg/kg(80μg/g)，每日一次，连续三天，第四天尾静脉取血测白细胞数量，制备白细胞减少模型小鼠。

实验分组：除空白组外，分为模型组，NCTD组（6mg/kg），NCTD-PBA开环组（10.896mg/kg）。每组12只小鼠，给药采取灌胃给药方式，一日一次。

给药：空白组和模型组正常饲养，各给药组灌胃给药，连续给药6天。分别于第4、7天给药后4h，经小鼠尾静脉取血进行白细胞计数。

白细胞计数：白细胞稀释液(2%冰醋酸)190μL加血10μL,充分混匀后充入计数池，然后静置2～3min,在低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞的总数，最后计算每升血液中白细胞计数值，结果参见表1。

表1. 小鼠外周白细胞计数

计数结果显示，本发明提供的保留了去甲斑蝥素的升白作用，从白细胞数量升高至正常水平来看，本发明去甲斑蝥素衍生物对环磷酰胺等抗肿瘤化疗药物造成的骨髓抑制作用起到了良好的修复作用，可以给化疗药物的应用提供新产品。

本发明提供的去甲斑蝥素衍生物，是利用氨基苯硼酸的氨基与去甲斑蝥素相连得到的新化合物，其合成方法简单，一步法合成，产率高，能够工业化大规模合成，有效升高白细胞数量，毒副作用减少。

Claims

1.一种去甲斑蝥素衍生物，其特征在于它的结构式为：

。

2.如权利要求1所述的去甲斑蝥素衍生物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

3.如权利要求1所述的去甲斑蝥素衍生物的应用，其特征在于：与化疗药物联用，用于治疗化疗药物引起的白细胞低下症，或用作术前用药。