CN117223657A - 一种培育耐低盐长速快方斑东风螺的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种培育耐低盐长速快方斑东风螺的方法。所述方法包括以下步骤：将用于驯化的东风螺幼虫在低盐度育苗池中逐级驯化；随后小规模繁育，半咸水养成，以生长速度快、耐低盐为选育指标，获得子一代；子一代强化促熟培育，群体混交产卵后收集卵囊孵化，重复步骤S2，以生长速度快、耐低盐为选育指标，获得子二代；子二代回交用于驯化的东风螺，优选家系，以生长速度快作为子三代的选育指标，10％淘汰机制，获得子三代；子三代与步骤S2中获得的子一代再次回交，获得子四代；连续自繁即得到长速快耐低盐方斑东风螺。所述培育方法培育的东风螺新品种具有生长速度快、耐低盐、个体大的优点，在低盐度培育中仍然具有极高的存活率。
Description
技术领域
本发明属于螺培育的技术领域，更具体地，涉及一种培育耐低盐长速快方斑东风螺的方法。
背景技术
目前东风螺的培养是在培养池或者海水水体中进行培养。
然而，因东风螺为海水性品种，在半咸水及淡水水域不能养殖，在河口地区其增养殖成活率受到水体盐度和渗透压的影响严重，水体盐度过低时，东风螺大规模死亡、疾病频发，而东风螺养殖对水质要求很高，可待合适开发的海域有限，大大限制了东风螺产业的可持续发展，东风螺养殖转向半咸水水域是必然趋势。
现有技术《低盐度对泥东风螺稚螺生长与存活的影响，福建省水产研究所，郑雅友》公开了盐度渐变、盐度突变对泥东风螺稚螺壳高、体重生长、存活的影响。具体而言，公开了采用盐度渐变法对东风螺进行养殖20d，当盐度从自然海水的32逐渐降低到28、24和21时，其稚螺的存活率在69％～76％之间，而当盐度逐渐降低到18和15时，存活率分别只有37％和33％。盐度18和15时存活率明显偏低，表明盐度低于18以下对泥东风螺稚螺生长与存活会造成严重的影响。
此外，现有技术还进一步公开了采用盐度突变法对东风螺进行养殖25d，当盐度从32突降至21时，稚螺摄食明显受到影响，摄食减少，有少量分泌物出现，当天未见爬壁，存活率降到53％；当盐度突降到18时，稚螺摄食与生长受到严重的影响，当天不见摄食，不爬壁，有分泌物，但尚能存活，存活率为43％。
因此，在低盐度时，现有东风螺存在死亡率高的问题，现有东风螺难以适应低盐度养殖，严重制约了半咸水和淡水化养殖发展。如何提供一种长速快耐低盐的方斑东风螺新品系的培育方法，对稳定东风螺增养殖产业至关重要。
发明内容
针对上述现有的技术问题，本发明的首要目的在于提供一种培育耐低盐长速快方斑东风螺的方法，所述培育方法培育的东风螺新品种具有生长速度快、耐低盐、个体大的优点，对于低盐度的耐受能力大幅提升，在低盐度养殖中仍然具有极高的存活率。
为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的：
一种培育耐低盐长速快方斑东风螺的方法，包括以下步骤：
S1.将用于驯化的东风螺幼虫放置于盐度为20～24ppt的低盐度育苗池中，逐级进行选择淘汰；
S2.将步骤S1中存活的东风螺幼虫进行育苗培育，期间维持盐度为16～18ppt，将变态落底后的稚螺送至盐度为16～22ppt的河口水域标粗、养殖，优胜劣汰，养至亲螺再回捕，以生长速度快、耐低盐为选育指标，获得子一代亲螺；
S3.子一代亲螺放入亲螺池进行强化促熟培育，群体混交产卵后收集卵囊孵化，重复步骤S2，以生长速度快、耐低盐为选育指标，获得子二代亲螺；将获得的子二代亲螺回交步骤S1中用于驯化的东风螺亲螺，建立至少300个家系，正反家系各至少150个，雌雄比1：1～3，以生长速度快、耐低盐作为选育指标，按10％淘汰机制，获得子三代亲螺；在上述整个步骤S3中，始终保持在盐度为16～20ppt的条件下进行；以生长速度快、耐低盐为选育指标是指已养成的亲螺里，选育适应了低盐度培育且东风螺壳长长度、体重为前10％的东风螺；
S4.在盐度在16～20ppt时，将步骤S3中所获得的子三代亲螺，与步骤S2中获得的子一代亲螺再次回交，重复步骤S2、步骤S3，获得子四代亲螺；在所获得的子四代亲螺的基础上连续自繁2代以上即得到长速快耐低盐的东风螺。
本发明首先建立了东风螺的基础群体，随后在低盐度育苗池中进行逐级驯化，淘汰。随后将存活的东风螺幼虫进行小规模繁育，在送至河口水域进行半咸水养成至亲螺，以生长速度快、耐低盐为选育指标，获得子一代。子一代通过优亲选配获得子二代，随后子二代回交方斑东风螺的基础群体，进行优选家系，以生长速度快作为子三代的选育指标，10％淘汰机制，获得子三代。子三代再跟子一代再次回交，获得子四代；所获得的子四代种苗连续自繁2代以上即得到长速快耐低盐方斑东风螺。本发明利用杂交及回交方法培育的方斑东风螺新品系具有优异的低盐耐受能力，在盐度为16～18时，其成活率可达75.4％，在极低盐度时，仍具有极其优异的成活率。远远优于现有的东风螺品种。
本发明所述方法丰富了东风螺遗传多样性，提高了东风螺在低渗透压极端环境的耐受能力。东风螺的适养水区从仅为海区拓展到半咸水的河口水域，促进了东风螺产业的健康发展，提高了东风螺产量和养殖经济效益，市场前景广阔。
优选地，所述步骤S1中，所述逐级淘汰为将低盐度育苗池的盐度每两天降低1个ppt，直至盐度为16ppt。
优选地，所述步骤S2中，所述育苗培育过程中投喂微型单细胞活藻，一天投喂一至两次，保持水体始终是微藻水色。
进一步优选地，所述微型单细胞活藻包括但不限于绿藻、硅藻、金藻等。
优选地，所述步骤S2的育苗培育期间，通过加入渗透调节剂维持盐度；按质量份数计，所述渗透调节辅助剂包括8～14份虾青素、2～4份氧化三甲胺、6～12份竹叶提取物和2～5份二甲基-β-丙酸噻亭。所述渗透调节剂可以有效减少渗透压变化带来的应激，有助于东风螺更好地适应盐度的变化。
优选地，所述步骤S3中，所述强化促熟培育期间，投喂饵料牡蛎、鱿鱼和海水鱼；牡蛎、鱿鱼和海水鱼的质量比为5～6：3～4：2～3，强化期间每天投喂一次，总投喂量占螺体重5～12％。
优选地，所述步骤S3中，所述强化促熟培育期间，保持空气湿度为80～100％，水温为25～28℃，白天保持光照强度为10～100lux，溶解氧含量≥5ppm，酸碱度为8.2～8.6。
优选地，所述步骤S3中，交配产卵期间，每天投喂两次，早晚隔12小时各一次，每次投喂量占螺体重3～8％，投喂量具体以半小时内摄食完为准。
优选地，所述步骤S2中，回捕的亲螺为养殖12～18月龄、35～45头/斤的东风螺亲螺。
优选地，在步骤S1之前，在步骤S1之前，还包括设置预实验找寻出东风螺幼虫最低盐度致死临界值的步骤；所述预实验为设置梯度盐度浓度的实验组进行东风螺养殖幼虫，以3～5％方斑东风螺幼虫存活率为东风螺幼虫最低盐度致死临界值的判断标准。通过上述预实验得到了最低盐度致死临界值为16ppt。
优选地，所述用于驯化的东风螺为东风螺海泰1号。
具体地，本发明采用的方斑东风螺“海泰1号”(品种登记号：GS-01-008-2018)是厦门大学和海南省海洋与渔业科学院以海南省文昌市的方斑东风螺养殖群体为基础群体，以生长快为目标性状，采用群体选育技术，经连续4代选育而成。连续两年的生产性对比试验表明，方斑东风螺“海泰1号”生长速度提高明显，优良性状稳定。在相同的养殖条件下，该品种与未经选育的对照群体相比，6月龄的壳长平均提高18.7％，体重平均提高32.1％。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：本发明利用杂交及回交方法对方斑东风螺新品种“海泰1号”进行遗传改良，获得的方斑东风螺新品系具有生长速度快、耐低盐、个体大的几大优点。与方斑东风螺新品种“海泰1号”相比，新品系低盐耐受能力大幅提升，丰富了东风螺遗传多样性，提高了低渗透压极端环境的耐受能力。适养水区从仅为海区拓展到半咸水的河口水域，促进了东风螺产业的健康发展，市场前景广阔。
附图说明
图1为本发明长速快耐低盐方斑东风螺的培育方法的流程图。
图2为实施例2中低盐驯化，进行逐级进行选择淘汰时的实验图。
图3为实施例2中在河口水域生产养殖新品系收获的亲螺。
图4为实施例2中群体混交产卵时的实验图。
具体实施方式
以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
实施例1方斑东风螺最低盐度致死临界值的预实验
方斑东风螺最低盐度致死临界值的预实验：设置盐度分别为6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28共十二个实验组，另设1个对照组，3个生物组重复，找寻出方斑东风螺幼虫最低盐度致死临界值。结果如下表1所示。
表1
从上表1可知，方斑东风螺幼虫最低盐度致死临界值在16ppt左右。
实施例2一种培育耐低盐长速快方斑东风螺的方法
(1)渗透调节辅助剂配置：渗透调节辅助剂按照质量份数计算，分别取12份虾青素(来源：威海东巽生物科技有限公司)、3份氧化三甲胺(TMAO)(来源：西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司)、9份竹叶提取物(来源：采购自BEST百特店)、4份二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)(来源：浙江一诺生物科技有限公司)混合均匀，即制成渗透调节辅助剂。
(2)如图1所示，将东风螺新品种“海泰1号”幼虫放置于提前配置好的低盐度育苗池，逐级选择淘汰(如图2所示，图2为低盐驯化，进行逐级选择淘汰时的实验图)，从盐度22ppt开始，每两天降低1个ppt，直至盐度16ppt；收集幸活下来的个体，按照常规方法育苗，投喂绿藻、硅藻、金藻等微型单细胞活藻，一天投喂一至两次，保持水体始终是微藻水色,期间维持盐度为16～18ppt；期间每3～4天补充一次渗透调节辅助剂，渗透调节辅助剂在育苗期间使用量为0.1～0.3g/m3，收获落底苗3.2斤，50～55万只/斤。
(3)将步骤(2)中变态落底后的稚螺送至河口水域(盐度常年保持在16～22ppt)标粗、养殖，优胜劣汰，养至亲螺再回捕(如图3所示，图3为在河口水域生产养殖新品系收获的亲螺)，以生长速度快、耐低盐为选育指标(已养成的亲螺里，选育适应了低盐度培育且东风螺壳长长度、体重为前10％的东风螺)，获得子一代亲螺，经过1个月标粗，收获标粗苗104斤，3200～6500只/斤，经过16个月养成，收获商品螺3014斤，35～45只/斤。
(4)将步骤(3)中收获的商品螺放入亲螺池进行强化促熟培育，保持空气湿度为80～100％，水温为25～28℃，白天保持光照强度为10～100lux，溶解氧≥5ppm，酸碱度为8.2～8.6；投喂饵料牡蛎、鱿鱼、海水鱼，质量比分别为5～6：3～4：2～3，强化期间每天投喂一次，总投喂量占螺体重5～12％。交配产卵期间，每天投喂两次，早晚(隔12小时)各一次，每次投喂量占螺体重3～8％，投喂量具体以半小时内摄食完为准；群体混交产卵后收集卵囊孵化(如图4所示，图4为群体混交产卵时的实验图)，重复步骤(2)、步骤(3)，以生长速度快、耐低盐为选育指标，获得子二代亲螺；
(5)将步骤(4)中获得的子二代亲螺回交“海泰1号”，建立326个家系，正反家系各至少163个，雌雄比1：1～3，以生长速度快、耐低盐作为选育指标，10％淘汰机制，获得子三代亲螺。在整个步骤(4)和(5)中，始终保持盐度在16～20ppt的条件下进行。
(6)在盐度在16～20ppt时，将步骤(5)中所获得的子三代亲螺与步骤(3)获得的子一代亲螺再次回交，重复步骤(2)常规方法育苗至步骤(5)，获得子四代亲螺；
(7)在步骤(6)中所获得的子四代亲螺基础上连续自繁2代即可得到长速快耐低盐的方斑东风螺新品系。
实施例3耐低盐长速快的方斑东风螺养殖
采用实施例2中培育的耐低盐长速快方斑东风螺新品系于2021年4月于广东省廉江市河口水域进行新品系养成，河口水域的盐度为16～18，东风螺投苗密度为2～3万只/15～20平方米，稚螺规格为壳长0.5～1.5cm。养殖水深在20～50cm。饵料每天傍晚投喂杂鱼肉、贝肉、螃蟹或虾肉等，投喂前鱼应去除内脏，贝类和螃蟹要掰开，日投饲量为东风螺总重的5％～10％，当天实际投饲量应视残饵量而定，以投喂后30min内饵料无剩为宜，投饲时应注意清除残饵、附着生物。投饵后30min换水，换水时以不露出砂层为准，然后进行流水养殖，养殖日流水量控制在占池子水体体积4倍以上。
经过255天养殖，收获商品螺728斤，50～60只/斤，其中，东风螺成活率为75.4％。
实施例4耐低盐长速快的方斑东风螺养殖
本实施例和实施例3区别在于：河口水域的盐度为20～22。
经过204天养殖，收获商品螺765斤，50～60只/斤，其中，东风螺成活率为86.6％。
对比例1
本对比例和实施例3区别在于：采用东风螺的品种为“海泰1号”。
经过251天养殖，收获商品螺168斤，50～60只/斤，其中，东风螺成活率为13.5％。
对比例2
本对比例和实施例3区别在于：养殖区为廉江市海域，盐度28～31，东风螺的品种为“海泰1号”。
经过221天养殖，收获商品螺892斤，50～60只/斤，其中，东风螺成活率为83.6％。
由上述实施例和对比例可知，本发明利用杂交及回交的方法培育的方斑东风螺新品系具有优异的低盐耐受能力，在盐度为16～18时，其成活率可达75.4％，在极低盐度时，仍具有极其优异的成活率。远远优于现有的东风螺品种。且其生长速度与原有的品种“海泰1号”相当。本发明所述方法培育的东风螺新品系有效结合了长速和低盐抗逆性，丰富了东风螺遗传多样性，提高了低渗透压极端环境的耐受能力。东风螺的适养水区从仅为海区拓展到半咸水的河口水域，促进了东风螺产业的健康发展，提高了东风螺产量和养殖经济效益，市场前景广阔。
前述的实例仅是说明性的，用于解释本发明所述方法的一些特征。所附的权利要求旨在要求可以设想的尽可能广的范围，且本文所呈现的实施例为申请人真实试验结果加以论证。因此，申请人的用意是所附的权利要求不被说明本发明的特征的示例的选择限制。在权利要求中所用的一些数值范围也包括了在其之内的子范围，这些范围中的变化也应在可能的情况下解释为被所附的权利要求覆盖。
Claims (10)
1.一种培育耐低盐长速快方斑东风螺的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.将用于驯化的东风螺幼虫放置于盐度为20～24ppt的低盐度育苗池中，逐级进行选择淘汰；
S2.将步骤S1中存活的东风螺幼虫进行育苗培育，期间维持盐度为16～18ppt，将变态落底后的稚螺送至盐度为16～22ppt的河口水域标粗、养殖，优胜劣汰，养至亲螺再回捕，以生长速度快、耐低盐为选育指标，获得子一代亲螺；
S3.子一代亲螺放入亲螺池进行强化促熟培育，群体混交产卵后收集卵囊孵化，重复步骤S2，以生长速度快、耐低盐为选育指标，获得子二代亲螺；将获得的子二代亲螺回交步骤S1中用于驯化的东风螺亲螺，建立至少300个家系，正反家系各至少150个，雌雄比1：1～3，以生长速度快、耐低盐作为选育指标，按10％淘汰机制，获得子三代亲螺；在上述整个步骤S3中，始终保持在盐度为16～20ppt的条件下进行；以生长速度快、耐低盐为选育指标是指已养成的亲螺里，选育适应了低盐度培育且东风螺壳长长度、体重为前10％的东风螺；
S4.在盐度在16～20ppt时，将步骤S3中所获得的子三代亲螺，与步骤S2中获得的子一代亲螺再次回交，重复步骤S2、步骤S3，获得子四代亲螺；在所获得的子四代亲螺的基础上连续自繁2代以上即得到长速快耐低盐的东风螺。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述逐级淘汰为将低盐度育苗池的盐度每两天降低1个ppt，直至盐度为16ppt。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述育苗培育过程中投喂微型单细胞活藻，一天投喂一至两次，保持水体始终是微藻水色。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤S2的育苗培育期间，通过加入渗透调节剂维持盐度；按质量份数计，所述渗透调节辅助剂包括8～14份虾青素、2～4份氧化三甲胺、6～12份竹叶提取物和2～5份二甲基-β-丙酸噻亭。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述强化促熟培育期间，投喂饵料牡蛎、鱿鱼和海水鱼；牡蛎、鱿鱼和海水鱼的质量比为5～6：3～4：2～3，强化期间每天投喂一次，总投喂量占螺体重5～12％。
6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述强化促熟培育期间，保持空气湿度为80～100％，水温为25～28℃，白天保持光照强度为10～100lux，溶解氧含量≥5ppm，酸碱度为8.2～8.6。
7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述步骤S3中，交配产卵期间，每天投喂两次，早晚隔12小时各一次，每次投喂量占螺体重3～8％，投喂量具体以半小时内摄食完为准。
8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤S2中，回捕的亲螺为养殖12～18月龄、35～45头/斤的东风螺亲螺。
9.根据权利要求1所述方法，其特征在于，在步骤S1之前，还包括设置预实验找寻出东风螺幼虫最低盐度致死临界值的步骤；所述预实验为设置梯度盐度浓度的实验组进行东风螺养殖幼虫，以3～5％方斑东风螺幼虫存活率为东风螺幼虫最低盐度致死临界值的判断标准。
10.根据权利要求1～9任一项所述方法，其特征在于，所述用于驯化的东风螺为东风螺海泰1号。
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