CN117120613A - 用于调节pnpla3表达的组合物和方法 - Google Patents

用于调节pnpla3表达的组合物和方法 Download PDF

Info

Publication number
CN117120613A
CN117120613A CN202280028149.3A CN202280028149A CN117120613A CN 117120613 A CN117120613 A CN 117120613A CN 202280028149 A CN202280028149 A CN 202280028149A CN 117120613 A CN117120613 A CN 117120613A
Authority
CN
China
Prior art keywords
seq
strand
nos
dsirna
antisense
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280028149.3A
Other languages
English (en)
Inventor
U·萨克塞纳
H·T·杜德克
M·艾布拉姆斯
A·图拉诺夫
B·D·布朗
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Dicerna Pharmaceuticals Inc
Original Assignee
Dicerna Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dicerna Pharmaceuticals Inc filed Critical Dicerna Pharmaceuticals Inc
Publication of CN117120613A publication Critical patent/CN117120613A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7125—Nucleic acids or oligonucleotides having modified internucleoside linkage, i.e. other than 3'-5' phosphodiesters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/315—Phosphorothioates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/321—2'-O-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/322—2'-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
    • C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/351—Conjugate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/351—Conjugate
    • C12N2310/3515—Lipophilic moiety, e.g. cholesterol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/50—Physical structure
    • C12N2310/53—Physical structure partially self-complementary or closed
    • C12N2310/531—Stem-loop; Hairpin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
    • C12P19/28—N-glycosides
    • C12P19/30—Nucleotides
    • C12P19/34—Polynucleotides, e.g. nucleic acids, oligoribonucleotides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Liquid Crystal Substances (AREA)

Abstract

公开了用于抑制或降低含patatin样磷脂酶结构域蛋白3(PNPLA3)基因表达的寡核苷酸以及包括所述寡核苷酸的组合物。还公开了制备和使用所述寡核苷酸的方法，特别地公开了与治疗与PNPLA3表达相关的疾病、病症和/或疾患有关的用途。

Description

用于调节PNPLA3表达的组合物和方法
序列表
本申请含有序列表，所述序列表已以ASCII格式以电子方式提交并且以全文引用的方式并入本文中。所述ASCII拷贝创建于2022年4月11日，名称为400930-028WO_190156_SL.txt并且大小为374,357字节。
相关申请的交叉引用
本申请根据35U.S.C.§119(e)要求于2021年4月14日提交的美国临时申请号63/174,932的优先权，所述临时申请以全文引用的方式并入本文中。
技术领域
本公开总体上涉及生物学和医学，并且更特别地它涉及使用寡核苷酸组合物来抑制或降低含patatin样磷脂酶结构域蛋白3(PNPLA3)基因表达，以及其用途，特别是来说与治疗与PNPLA3相关的疾病、病症和/或疾患有关的用途。
背景技术
PNPLA3为由PNPLA3编码的蛋白质并且为具有三酰基甘油酯酶和酰基甘油转酰酶活性的蛋白质。人PNPLA3在肝脏中高度表达并且在脂肪组织、脑、肾脏及皮肤中适度表达。
本文中特别关注在人PNPLA3中的位置148的异亮氨酸(Ile/I)到甲硫氨酸(Met/M)的突变(I148M或PNPLA3148M；即，PNPLA3rs738409)。参见Pingitore和Romeo(2019)BIOCHIM.BIOPHYS.ACTA MOL.CELL BIOL.LIPIDS1864:900-906。与野生型PNPLA3相比，PNPLA3148M缺乏脂酶活性，但似乎具有增加的转酰酶活性。参见Kumari等(2012)CELLMETAB.15:691-702。
PNPLA3148M与由甘油三酯(TG)累积、肝损伤以及纤维化引起的广谱肝病，包括酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝细胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)以及非酒精性脂肪性肝炎(NASH)强烈相关。由蛋白酶体引起的PNPLA3148M降解似乎延迟，这使得在脂质微滴表面的蛋白质累积并且不允许其他蛋白质代谢肝细胞中的TG。因而，降低PNPLA3148M表达可允许其他脂酶正常起作用并且逆转PNPLA3 I148M在多种病变中的有害作用。
已知若干基于RNA的治疗剂用于试图抑制或降低PNPLA3表达。举例来说，国际专利申请公布号WO 2016/130806和WO 2019/118638描述了用于抑制或降低PNPLA3表达的双链(ds)RNAi构建体，以及使用所述双链(ds)RNAi构建体来治疗或预防诸如NAFLD等肝病的方法。另外，国际专利申请公布号WO 2020/061200描述了用于抑制或降低PNPLA3表达的反义寡核苷酸。
尽管存在一些定向至PNPLA3的治疗剂，但仍需要其他用于抑制或降低PNPLA3表达以便治疗肝病的治疗剂。
发明内容
为解决此需要，本公开描述了用于治疗与PNPLA3表达有关的疾病、病症和/或疾患的组合物和方法。本公开部分基于发现和开发用于选择性抑制和/或降低例如肝脏中的PNPLA3表达的ds寡核苷酸(例如RNAi寡核苷酸)。因此，已鉴定PNPLA3内的靶序列，并且已产生结合至这些靶序列并且抑制PNPLA3 mRNA表达的RNAi寡核苷酸。如本文所示，RNAi寡核苷酸抑制肝脏中的人和食蟹猴PNPLA3表达。在不受理论约束的情况下，本文的RNAi寡核苷酸可用于治疗与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患(例如肝病，诸如AH、ALD、肝硬化、HCC、胆管细胞癌(CCA)、原发性硬化性胆管炎(PSC)、NAFLD以及NASH)。总体来说，本文的RNAi寡核苷酸可用于治疗与异常PNPLA3表达(例如突变体PNPLA3等位基因表达)相关的疾病、病症或疾患。特别地，本文的RNAi寡核苷酸可用于治疗与突变体PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患。
因此，本公开描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括具有如表1(例如SEQ ID NO:9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253、255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477、479、481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553、555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、771、773以及775)或表3(例如SEQ ID NO:777、779、781、783、785、787、789、791、793、795、797、799、801、803、805、807、809、811、813、815、817、819、821、823、825、827、829、831、833、835、837、839、841、843、845、847、849、851、853、855、857、859、861、863、865、867、869、871、873、875、877、879、881、883、885、887、889、891、893、895、897、899、901、903、905、907、909、911、913、915、917、919、921、923、925、927、929、931、933、935、937、939、941、943、945、947、949、951、953、955、957、959、961、963、965、967、969、971、973、975、977、979、981、983、985、987、989、991、993、995、997、999、1001、1003、1005、1007、1009、1011、1013、1015、1017、1019、1021、1023、1025、1027、1029、1031、1033、1035、1037、1039、1041、1043、1045、1047、1049、1051、1053、1055、1057、1059、1061、1063、1065、1067、1069、1071、1073、1075、1077、1079、1081、1083、1085、1087、1089、1091、1093、1095、1097、1099、1101、1103、1105、1107、1109、1111、1113、1115、1117、1119、1121、1123、1125、1127、1129、1131、1133、1135、1137、1139、1141、1143、1145、1147、1149、1151、1153、1155、1157、1159、1161以及1163)中所列的序列，尤其SEQ ID NO:787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中的任一者的有义链。
或者，本公开描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括具有如表1(例如SEQ ID NO:10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、342、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384、386、388、390、392、394、396、398、400、402、404、406、408、410、412、414、416、418、420、422、424、426、428、430、432、434、436、438、440、442、444、446、448、450、452、454、456、458、460、462、464、466、468、470、472、474、476、478、480、482、484、486、488、490、492、494、496、498、500、502、504、506、508、510、512、514、516、518、520、522、524、526、528、530、532、534、536、538、540、542、544、546、548、550、552、554、556、558、560、562、564、566、568、570、572、574、576、578、580、582、584、586、588、590、592、594、596、598、600、602、604、606、608、610、612、614、616、618、620、622、624、626、628、630、632、634、636、638、640、642、644、646、648、650、652、654、656、658、660、662、664、666、668、670、672、674、676、678、680、682、684、686、688、690、692、694、696、698、700、702、704、706、708、710、712、714、716、718、720、722、724、726、728、730、732、734、736、738、740、742、744、746、748、750、752、754、756、758、760、762、764、766、768、770、772、774以及776)或表3(例如SEQ ID NO:778、780、782、784、786、788、790、792、794、796、798、800、802、804、806、808、810、812、814、816、818、820、822、824、826、828、830、832、834、836、838、840、842、844、846、848、850、852、854、856、858、860、862、864、866、868、870、872、874、876、878、880、882、884、886、888、890、892、894、896、898、900、902、904、906、908、910、912、914、916、918、920、922、924、926、928、930、932、934、936、938、940、942、944、946、948、950、952、954、956、958、960、962、964、966、968、970、972、974、976、978、980、982、984、986、988、990、992、994、996、998、1000、1002、1004、1006、1008、1010、1012、1014、1016、1018、1020、1022、1024、1026、1028、1030、1032、1034、1036、1038、1040、1042、1044、1046、1048、1050、1052、1054、1056、1058、1060、1062、1064、1066、1068、1070、1072、1074、1076、1078、1080、1082、1084、1086、1088、1090、1092、1094、1096、1098、1100、1102、1104、1106、1108、1110、1112、1114、1116、1118、1120、1122、1124、1126、1128、1130、1132、1134、1136、1138、1140、1142、1144、1146、1148、1150、1152、1154、1156、1158、1160、1162以及1164)中所列的序列，尤其SEQ ID NO:788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中的任一者的反义链。
在某些实施方案中，本公开描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D(例如SEQ ID NO:1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300)中所列的序列的有义链。
在某些实施方案中，本公开描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D(例如SEQ ID NO:1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301)中所列的序列的反义链。
在一些实施方案中，描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括反义链和有义链，其中反义链具有如表1或表3中所列的序列，并且其中有义链具有如表1或表3中所列的序列。
在一些实施方案中，描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括反义链和有义链，其中反义链具有如表A、表B、表C或表D中所列的序列，并且其中有义链具有如表A、表B、表C或表D中所列的序列。
在一些实施方案中，描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括反义链和有义链，其中反义和有义链形成双链体区域，并且其中反义链具有与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域。
在以上实施方案中的任一者中，反义链的长度为约15个核苷酸至约30个核苷酸。在一些实施方案中，反义链为约20个核苷酸至约25个核苷酸。在一些实施方案中，反义链的长度为22个核苷酸。
在以上实施方案中的任一者中，有义链的长度为约15个核苷酸至约50个核苷酸。在一些情况下，有义链的长度为约20个核苷酸至约40个核苷酸。在一些实施方案中，有义链的长度为36个核苷酸。
在以上实施方案中的任一者中，双链体区域的长度为约19个核苷酸至长度为约21个核苷酸。在某些实施方案中，双链体区域的长度为20个核苷酸。
在以上实施方案中的任一者中，具互补性的区域的长度为至少15个连续核苷酸。在一些实施方案中，具互补性的区域的长度为约19个连续核苷酸至长度为约21个连续核苷酸。在其他实施方案中，具互补性的区域的长度为19个连续核苷酸或长度为21个连续核苷酸。
在以上实施方案中的任一者中，RNAi寡核苷酸在有义链上在3'端包括阐述为S1-L-S2的茎-环，其中S1与S2互补，并且其中L形成在S1与S2之间长度为约3至约5个核苷酸的环。
在以上实施方案中的任一者中，反义链、有义链或两者具有悬垂序列。在一些实施方案中，反义链包括长度为1个或更多个核苷酸的3'-悬垂物。在其他实施方案中，3'-悬垂序列的长度为2个核苷酸，诸如GG。
还描述了包括反义链和有义链的寡核苷酸，其中反义链可为长度为约21个核苷酸至约27个核苷酸并且具有与PNPLA3具互补性的区域，其中有义链在其3'端包括阐述为S1-L-S2的茎-环，其中S1与S2互补，其中L形成在S1与S2之间长度为约3个核苷酸至约5个核苷酸的环，并且其中反义链和有义链形成长度为至少约19个核苷酸的双链体结构但不共价键联。
在一些实施方案中，环L为三环或四环。在一些情况下，L为长度为4个核苷酸的四环。在其他实施方案中，L包括序列5'-GAAA-3'。
在一些实施方案中，S1和S2的长度为1-10个核苷酸并且具有相同长度。在其他实施方案中，S1和S2的长度为1个核苷酸、2个核苷酸、3个核苷酸、4个核苷酸、5个核苷酸、6个核苷酸、7个核苷酸、8个核苷酸、9个核苷酸或10个核苷酸。在其他实施方案中，S1和S2的长度为6个核苷酸。在某些实施方案中，茎-环包含序列5'-GCAGCCGAAAGGCUGC-3'(SEQ ID NO:1177)。
在一些实施方案中，反义链的长度为27个核苷酸并且有义链的长度为25个核苷酸。在其他实施方案中，反义链的长度为22个核苷酸并且有义链的长度为36个核苷酸。
在以上实施方案中，双链体区域包括反义链上的3'-悬垂序列。在一些实施方案中，反义链上的3'-悬垂序列的长度为2个核苷酸。
在以上实施方案中的任一者中，寡核苷酸中的至少一个核苷酸为经过修饰的核苷酸。在一些情况下，经过修饰的核苷酸包括2'-修饰，诸如2'-氨基乙基、2'-氟、2'-O-甲基、2'-O-甲氧基乙基以及2'-脱氧-2'-氟-β-阿拉伯糖基核酸。在某些情况下，寡核苷酸中的所有核苷酸均包括2'-修饰，诸如2'-氟或2'-O-甲基。
在以上实施方案中的任一者中，寡核苷酸中的至少一个核苷酸包括经过修饰的核苷酸间键联。在一些实施方案中，经过修饰的核苷酸间键联为硫代磷酸酯键联。
在以上实施方案中的任一者中，反义链的5'-核苷酸的糖的4'-碳包括磷酸酯类似物，诸如氧甲基膦酸酯、乙烯基膦酸酯或丙二酰基膦酸酯。或者或任选地，磷酸酯类似物为包括5'-甲氧基膦酸酯-4'-氧基的4'-磷酸酯类似物。
在以上实施方案中的任一者中，寡核苷酸的至少一个核苷酸可缀合至一个或多个靶向配体，诸如氨基糖、碳水化合物、胆固醇、脂质或多肽。在一些实施方案中，靶向配体为N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)部分。在其他实施方案中，GalNAc部分为单价GalNAc部分、二价GalNAc部分、三价GalNAc部分或四价GalNAc部分。
在一些实施方案中，靶向配体缀合至茎环的L的一个或多个核苷酸。在某些情况下，茎-环的L的至多4个核苷酸各自缀合至单价GalNAc部分。
在以上实施方案中的任一者中，寡核苷酸为RNAi寡核苷酸。在一些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有如表1或表3中所列的核苷酸序列，尤其SEQ ID NO:787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中的任一者的有义链。在某些实施方案中，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的核苷酸序列，尤其SEQ ID NO:1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中的任一者的有义链。在一些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有如表1或表3中所列的核苷酸序列，尤其SEQ ID NO:788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中的任一者的反义链。在一些实施方案中，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的核苷酸序列，尤其SEQ ID NO:1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中的任一者的反义链。在某些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO:787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中的任一者或SEQ ID NO:1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中的任一者的核苷酸序列的有义链，以及具有SEQ ID NO:788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中的任一者，SEQ ID NO:1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中的任一者的核苷酸序列的反义链。在某些实施方案中，RNAi寡核苷酸的有义链和反义链分别选自：
(a)SEQ ID NO:787和788，
(b)SEQ ID NO:843和844，
(c)SEQ ID NO:867和868，
(d)SEQ ID NO:871和872，
(e)SEQ ID NO:937和938，
(f)SEQ ID NO:1003和1004，
(g)SEQ ID NO:1007和1008，
(h)SEQ ID NO:1017和1018，
(i)SEQ ID NO:1161和1162，以及
(j)SEQ ID NO:1163和1164。
在一些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的核苷酸序列，尤其SEQ ID NO:1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中的任一者的有义链。在一些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的核苷酸序列，尤其SEQ ID NO:1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1202、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301中的任一者的反义链。在某些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO:1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中的任一者的核苷酸序列的有义链，以及具有SEQ ID NO:1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301中的任一者的核苷酸序列的反义链。
在某些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO:1188、1190、1200、1216、1218、1220、1224、1230、1232、1234、1244、1246、1250、1254、1262、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中的任一者的核苷酸序列的有义链，以及具有SEQ ID NO:1189、1191、1201、1215、1217、1219、1225、1231、1233、1235、1245、1247、1251、1255、1263、1289、1291、1295、1297、1299或1301中的任一者的核苷酸序列的反义链。
在特定情况下，RNAi寡核苷酸的有义链和反义链分别选自：
(a)SEQ ID NO:1220和1221，
(b)SEQ ID NO:1224和1225，
(c)SEQ ID NO:1230和1231，
(d)SEQ ID NO:1232和1233，
(e)SEQ ID NO:1188和1189，
(f)SEQ ID NO:1190和1191，
(g)SEQ ID NO:1244和1245，
(h)SEQ ID NO:1250和1251-，
(i)SEQ ID NO:1254和1255，以及
(j)SEQ ID NO:1246和1247。
还描述了用于抑制或降低PNPLA3表达的寡核苷酸，所述寡核苷酸包括有义链和反义链，其中有义链和反义链形成双链体区域，其中有义链和反义链的所有核苷酸包括碱基、糖和/或核苷酸间键联的修饰，其中反义链包括与SEQ ID NO:1167至1176中的一者的PNPLA3mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中具互补性的区域的长度为至少约15个连续核苷酸。
在其他方面中，描述了药物组合物，所述药物组合物包括本文的至少一种寡核苷酸以及药学上可接受的载体、递送剂或赋形剂。在一些情况下，药物组合物包括另一治疗剂，诸如抗糖尿病剂或抗肥胖剂。
在其他方面中，描述了用于降低细胞、细胞群体、组织、器官或个体中的PNPLA3表达的方法，所述方法包括至少一个向细胞、细胞群体、组织、器官或个体施用本文的寡核苷酸或本文的药物组合物或使细胞、细胞群体、组织、器官或个体与本文的寡核苷酸或本文的药物组合物接触的步骤。在一些情况下，降低PNPLA3表达包括降低细胞、细胞群体、组织、器官或个体中PNPLA3 mRNA的量或水平、PNPLA3蛋白的量或水平或两者。在一些情况下，细胞、细胞群体、组织、器官或个体具有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患。在某些情况下，所述与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患为心脏代谢疾病、AH、ALD、肝硬化、HCC、CCA以及其他胆管病(诸如PSC)、NAFLD以及NASH。
在其他方面中，描述了用于治疗患有或疑似患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的个体的方法。所述方法包括至少一个向有需要的个体施用有效量的本文的寡核苷酸或本文的药物组合物的步骤。在一些情况下，与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患为心脏代谢疾病、AH、ALD、CCA、肝硬化、HCC、NAFLD、PSC以及NASH。在一些情况下，寡核苷酸或药物组合物经由SQ施用每天、每周、每月、每季、每年，尤其每月或每季施用。
在一些情况下，个体患有肝硬化、糖尿病、肝纤维化、肝脏炎症、高脂血症、AH、ALD、CCA、肝硬化、HCC、NAFLD、PSC、NASH、肥胖症和/或脂肪变性。
在以上实施方案中的任一者中，所述方法包括其他步骤，诸如测量或获得基因型信息、PNPLA3表达、PNPLA3蛋白水平、个体的重量和/或血糖和/或TG以及将此类所获得的值与一个或多个基线值或先前所获得的值进行比较以评估接触或施用的有效性。在一些实施方案中，其他步骤包括证实个体具有PNPLA3 I148M变体。在一些实施方案中，其他步骤包括证实个体不具有PNPLA3 E434K变体。在一些实施方案中，其他步骤包括证实个体不具有蛋白质截短HSD17B13变体(rs72613567)。
在以上实施方案中的任一者中，所述方法可包括将RNAi寡核苷酸或药物组合物与第二组合物或第二治疗剂同时、单独或依序施用。在一些实施方案中，第二组合物或第二治疗剂为PNPLA3抗体或其片段、抗糖尿病剂或抗肥胖剂。在一些实施方案中，以与RNAi寡核苷酸相同的频率施用(即，每隔一天一次、每周两次或甚至每周一次)第二组合物或第二治疗剂。在其他实施方案中，以与RNAi寡核苷酸不同的频率施用第二组合物或第二治疗剂。同样地，在其他实施方案中，经由与RNAi寡核苷酸相同的途径(例如SQ)施用第二组合物或第二治疗剂。在其他实施方案中，经由与RNAi寡核苷酸)不同的途径施用第二组合物或第二治疗剂。
在其他方面中，描述了本文的RNAi寡核苷酸用于治疗与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的用途，所述RNAi寡核苷酸任选与第二组合物或第二治疗剂同时、单独或依序(即，组合)施用。
在其他方面中，描述了本文的RNAi寡核苷酸在制造用于治疗与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的药剂中的用途，其中药剂任选还包括第二组合物或第二治疗剂。
在其他方面中，描述了药盒，所述药盒包括本文的至少一种寡核苷酸、任选的药学上可接受的载体以及包装插页，所述包装插页具有关于向患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的个体施用所述至少一种寡核苷酸的说明书。
本文的寡核苷酸和组合物的优点为受到抑制的PNPLA3表达，尤其PNPLA3148M的表达，对整个谱系的NAFLD(包括纤维化)发挥有益作用。
附图说明
当考虑以下具体实施方式时，除上文阐述的那些优点、效应、特征以及目标外的优点、效应、特征以及目标将变得更容易显而易见。此类具体实施方式提到以下图式，其中：
图1公开了展示通用GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸的结构和化学修饰模式的示意图。图1按出现顺序分别公开了SEQ ID NO1302-1303。
图2公开了展示替代通用GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸的结构和化学修饰模式的示意图。
具体实施方式
综述
ALD和NAFLD为严重的公众健康负担。ALD和NAFLD为慢性肝脏病症，所述慢性肝脏病症从肝脏TG累积(脂肪变性)开始并且进展为肝脏炎症和纤维化、肝硬化，并且甚至进展为肝癌。PNPLA3148M为已显示与ALD和NAFLD以及肝硬化、HCC以及肝脏相关死亡有关的遗传因子。
RNA干扰(RNAi)为将外源性RNA引入细胞中的过程，所述过程引起编码所靶向的蛋白质的mRNA的特异性降解以及所得靶基因表达降低。
在人中，PNPLA3的长度为481个氨基氨基酸，预测分子量为52.865kD。在NCBI参考序列号NM_025225(人)、NM_054088或XM_006520346(小鼠)、NM_001282324(大鼠)、XM_015457081(灵长类动物)、XM_005567051(灵长类动物)以及XM_001109144(灵长类动物)中可找到PNPLA3的示例性核酸序列。然而，本领域技术人员理解，PNPLA3 mRNA序列的其他实例可使用公共可获得的数据库(诸如GenBank和UniProt)轻易地获得。
定义
如本文所用，“约”意指在一个或多个值(诸如所陈述的浓度、长度、分子量、pH值、序列相似性、时间范围、温度、体积等)的统计学意义范围内。此类值或范围可在给定值或范围的一个数量级内，典型地在20％内，更典型地在10％内，并且甚至更典型地在5％内。由“约”涵盖的容许偏差将取决于研究中的系统，并且可为本领域技术人员容易理解的。
如本文所用，“施用(administer/administering/administration)”和类似术语是指以药理学可用的方式向个体提供物质(例如本文的寡核苷酸或本文的组合物)(例如以治疗个体的疾病、病症或疾患)。
如本文所用，“反义链”意指本文的与靶序列的区域互补的寡核苷酸。同样地，并且如本文所用，“有义链”意指本文的与反义链的区域互补的寡核苷酸。
如本文所用，“脱唾液酸糖蛋白受体”或“ASGPR”意指由主要48kDa亚单位(ASGPR-1)和次要40kDa亚单位(ASGPR-2)形成的二分C型凝集素。ASGPR主要在肝细胞的窦状表面上表达并且在循环糖蛋白的结合、内化以及后续清除中起主要作用，所述循环糖蛋白含有末端半乳糖或GalNAc残基(脱唾液酸糖蛋白)。
如本文所用，“减轻(attenuate/attenuating/attenuation)”和类似术语是指减少或有效停止。作为非限制性实例，本文中的治疗中的一者或多者可减少或有效停止个体中AH、ALD、CCA、PSC、肝硬化、HCC、NAFLD以及NASH以及相关疾病、病症以及疾患的发作或进展。此减轻可由例如以下来例示：AH、ALD、肝硬化、HCC、CCA、PSC、NAFLD以及NASH以及相关疾病、病症及疾患的一个或多个方面(例如症状、组织特征以及细胞、炎性或免疫活性等)的降低；没有可检测的AH、ALD、肝硬化、HCC、CCA、PSC、NAFLD以及NASH以及相关疾病、病症以及疾患的一个或多个方面的进展(恶化)；或当个体中可能以其他方式预测到AH、ALD、肝硬化、HCC、NAFLD以及NASH以及相关疾病、病症以及疾患时没有可检测的所述疾病的方面。
如本文所用，“减轻(attenuate/attenuating/attenuation)”和类似术语意指减少或有效停止。作为非限制性实例，本文中的治疗中的一者或多者可减少或有效停止受试者中血脂异常/高甘油三酯血症/高脂血症的发作或进展。此减轻可由例如以下来例示：当个体中可以其他方式预测到AH、ALD、肝硬化、HCC、CCA、PSC、NAFLD以及NASH以及相关疾病、病症以及疾患时所述疾病的一个或多个方面(例如症状、组织特征以及细胞、炎性或免疫活性等)的降低。
如本文所用，“互补”意指两个核苷酸的间(例如两个相对核酸上或单个核酸链的相对区域上)的结构关系，所述结构关系容许两个核苷酸彼此形成碱基对。举例来说，与相对核酸的嘧啶核苷酸互补的一个核酸的嘌呤核苷酸可通过彼此形成氢键而碱基配对在一起。互补核苷酸可以沃森-克里克方式(Watson-Crick manner)或以允许形成稳定双链体的任何其他方式碱基配对。同样地，如本文所描述，两个核酸可具有彼此互补的多个核苷酸的区域以形成具互补性的区域。
如本文所用，“接触(contact/contacting)”和类似术语意指通过促进或实现摄入或吸收至例如细胞中将RNAi直接或间接引入或递送至细胞中。
如本文所用，“脱氧核糖核苷酸”意指当与核糖核苷酸相比较时在戊糖的2'位置具有氢代替羟基的核苷酸。经过修饰的脱氧核糖核苷酸具有除2'位置外的原子的一个或多个修饰取代，包括核碱基、糖或磷酸酯基中或核碱基、糖或磷酸酯基的修饰或取代。
如本文所用，“双链寡核苷酸”或“ds寡核苷酸”意指基本上呈双链体形式的寡核苷酸。ds寡核苷酸的双链体区域的互补碱基配对可在共价分开的核酸链的核苷酸的反向平行序列之间形成。同样地，ds寡核苷酸的双链体区域的互补碱基配对可在共价键联的核酸链的核苷酸的反向平行序列之间形成。此外，ds寡核苷酸的双链体区域的互补碱基配对可由单个核酸链形成，所述单个核酸链折叠(例如经由发夹)以提供碱基配对在一起的核苷酸的互补反向平行序列。ds寡核苷酸可包括彼此完全双链体化的两个共价分开的核酸链。然而，ds寡核苷酸可包括部分双链体化(例如在一个或两个末端具有悬垂物)的两个共价分开的核酸链。ds寡核苷酸可包括部分互补的核苷酸的反向平行序列，并且因此，可具有一个或多个错配，所述一个或多个错配可包括内部错配或末端错配。
如本文所用，关于核酸(例如寡核苷酸)的“双链体”意指通过核苷酸的两个反向平行序列的互补碱基配对形成的结构。
如本文所用，“赋形剂”意指可包括在本文的组合物中的非治疗剂，例如用于提供或促进所需同一性或稳定化作用。
如本文所用，“肝细胞”意指肝脏的实质组织的细胞。这些细胞占肝脏质量的约70％-85％，并且制造血清白蛋白、纤连蛋白(FBN)以及凝血酶原组的凝血因子(除因子3和4外)。肝细胞谱系细胞的标记物包括但不限于甲状腺素转运蛋白(Ttr)、谷氨酰胺合成酶(Glul)、肝细胞核因子1a(Hnf1a)以及肝细胞核因子4a(Hnf4a)。成熟肝细胞的标记物可包括但不限于细胞色素P450(Cyp3a11)、富马酰乙酰乙酸水解酶(Fah)、6-磷酸葡萄糖(G6p)、白蛋白(Alb)以及OC2-2F8。参见例如Huch等(2013)NATURE 494:247-50。
如本文所用，“肝毒剂”意指本身对肝脏具毒性或可经过加工以形成对肝脏具毒性的代谢产物的化合物、病毒或其他物质。肝毒剂可包括但不限于四氯化碳(CCl4)、乙酰胺酚(对乙酰氨基酚)、氯乙烯、砷、氯仿、非类固醇消炎药(诸如阿司匹林(aspirin)和丁二苯吡唑二酮(phenylbutazone))。
如本文所用，“不稳定接头”意指可裂解(例如通过酸性pH)的接头。同样地，“相当稳定的接头”意指不能裂解的接头。
如本文所用，“肝脏炎症”或“肝炎”意指尤其因如可能由暴露于肝毒剂引起的损伤或感染所引起的其中肝脏变得肿胀、功能失调和/或疼痛的身体疾患。症状可包括黄疸、疲劳、虚弱、恶心、呕吐、食欲降低以及重量减轻。肝脏炎症如果不治疗可能进展为纤维化、肝硬化、肝衰竭或肝癌。
如本文所用，“肝脏纤维化”、“肝纤维化”或“肝脏的纤维化”是指细胞外基质蛋白在肝脏中的过量累积，所述细胞外基质蛋白可包括胶原蛋白(I、III及IV)、FBN、粗纤维调节素(undulin)、弹性蛋白、层粘连蛋白、玻尿酸(hyaluronan)以及由炎症和肝脏细胞死亡产生的蛋白聚糖。肝脏纤维化如果不治疗可能进展为肝硬化、肝衰竭或肝癌。
如本文所用，“环”意指核酸(例如寡核苷酸)的未配对区域，所述未配对区域侧接核酸的彼此足够互补的两个反向平行区域，使得在适当杂交条件下(例如在磷酸盐缓冲液中、在细胞中)，侧接未配对区域的两个反向平行区域杂交以形成双链体(称为“茎”)。
如本文所用，“经过修饰的核苷酸间键联”意指当与具有磷酸二酯键的参考核苷酸间键联相比较时具有一个或多个化学修饰的核苷酸间键联。经过修饰的核苷酸可为非天然存在的键联。典型地，经过修饰的核苷酸间键联赋予其中存在所述经过修饰的核苷酸间键联的核酸一种或多种所需特性。举例来说，经过修饰的核苷酸可改善热稳定性、对降解的抗性、核酸酶抗性、溶解度、生物利用度、生物活性、降低的免疫原性等。
如本文所用，“经过修饰的核苷酸”是指当与选自以下的对应参考核苷酸相比较时具有一个或多个化学修饰的核苷酸：腺嘌呤核糖核苷酸、鸟嘌呤核糖核苷酸、胞嘧啶核糖核苷酸、尿嘧啶核糖核苷酸、腺嘌呤脱氧核糖核苷酸、鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸、胞嘧啶脱氧核糖核苷酸以及胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸。经过修饰的核苷酸可为非天然存在的核苷酸。经过修饰的核苷酸可在其糖、核碱基和/或磷酸酯基中具有例如一个或多个化学修饰。另外或或者，经过修饰的核苷酸可具有缀合至对应参考核苷酸的一个或多个化学部分。典型地，经过修饰的核苷酸赋予其中存在所述经过修饰的核苷酸的核酸一种或多种所需特性。举例来说，经过修饰的核苷酸可改善热稳定性、对降解的抗性、核酸酶抗性、溶解度、生物利用度、生物活性、降低的免疫原性等。
如本文所用，“缺口四环结构”意指以分开的有义(过客)和反义(引导)链为特征的RNAi寡核苷酸结构，其中有义链具有与反义链具互补性的区域，并且其中所述股链中的至少一者(通常为有义链)具有被配置成用于稳定在至少一个股链内形成的相邻茎区域的四环。
如本文所用，“核苷酸”意指具有核苷(核碱基，诸如腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤、胸腺嘧啶或尿嘧啶；以及戊糖，诸如核糖或2'-脱氧核糖；以及可充当核酸聚合物的单体单元的磷酸酯基(诸如脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA))的有机分子。
如本文所用，“寡核苷酸”意指短核酸分子(例如长度为不到约100个核苷酸)。寡核苷酸可为单链的(ss)或ds。寡核苷酸可能具有或可能不具有双链体区域。作为一组非限制性实例，寡核苷酸可为但不限于小干扰RNA(siRNA)、微RNA(miRNA)、短发夹RNA(shRNA)、dicer底物小干扰RNA(dsiRNA)、反义寡核苷酸(ASO)、短siRNA或ss siRNA。典型地，ds寡核苷酸为RNAi寡核苷酸。
如本文所用，“悬垂物”意指由一个股链或区域延伸超过与所述股链或区域形成双链体的互补链的末端所产生的末端非碱基配对核苷酸。悬垂物可包括在ds寡核苷酸的5'端或3'端从双链体区域延伸的一个或多个未配对核苷酸。悬垂物可为ds寡核苷酸的反义链或有义链上的3'或5'悬垂物。
如本文所用，“磷酸酯类似物”意指模拟磷酸酯基的静电和/或空间特性的化学部分。在一些实施方案中，磷酸酯类似物定位于寡核苷酸的5'端核苷酸处替代5'-磷酸酯，5'-磷酸酯常常容易发生酶移除。5'磷酸酯类似物可包括磷酸酶抗性键联。磷酸酯类似物的实例包括但不限于5'膦酸酯，诸如5'亚甲基膦酸酯(5'-MP)和5'-(E)-乙烯基膦酸酯(5'-VP)。寡核苷酸可在5'端核苷酸处在糖的4'-碳位置具有磷酸酯类似物(称为“4'-磷酸酯类似物”)。4'-磷酸酯类似物的实例为氧甲基膦酸酯，其中氧甲基的氧原子结合至糖部分(例如在其4'-碳处)或其类似物。参见例如国际专利申请公布号WO 2018/045317。已研发针对寡核苷酸的5'端的其他修饰(参见例如国际专利申请号WO 2011/133871；美国专利号8,927,513；以及Prakash等(2015)NUCLEIC ACIDS RES.43:2993-3011)。
如本文所用，“PNPLA3相关疾病”、“PNPLA3相关病症”或“PNPLA3相关疾患”意指其中PNPLA3表达增加和/或存在例如PNPLA3 I148M变体的疾患。示例性PNPLA3相关的疾患、疾病或病症包括但不限于肝脏中的脂肪累积、肝脏的肝硬化、脂肪肝(脂肪变性)、肝细胞坏死、HCC、肝脏纤维化、肝脏的炎症、NASH、NAFLD或肥胖症。
如本文所用，“降低的表达”并且就基因(例如PNPLA3)来说意指当与适当参考(例如参考细胞、细胞群体、样品或受试者)相比时，RNA转录物(例如PNPLA3 mRNA)或由基因编码的蛋白质的量或水平降低和/或细胞、细胞群体、样品或受试者中基因的活性的量或水平降低。举例来说，当与未经ds寡核苷酸处理的细胞相比时，使细胞与本文的寡核苷酸(例如具有含有与包括PNPLA3 mRNA的核苷酸序列互补的核苷酸序列的反义链的寡核苷酸)接触的动作可使得mRNA、蛋白质和/或活性的量或水平降低(例如经由通过RNAi路径降解PNPLA3mRNA)。类似地并且如本文所用，“降低表达”意指使得基因(例如PNPLA3)的表达降低的动作。特别地并且如本文所用，“PNPLA3表达的降低”意指当与适当参考(例如参考细胞、细胞群体、组织或受试者)相比时，细胞、细胞群体、样品或受试者中PNPLA3 mRNA、PMPLA3蛋白和/或PNPLA3活性的量或水平降低。
如本文所用，“互补区域”意指核酸(例如ds寡核苷酸)的核苷酸序列，所述核苷酸序列与核苷酸的反向平行序列足够互补从而容许核苷酸的两个序列之间在适当杂交条件下(例如在磷酸盐缓冲液中、在细胞中等)杂交。本文的寡核苷酸包括具有与mRNA靶序列互补的区域的靶向序列。
如本文所用，“核糖核苷酸”意指具有核糖作为其戊糖的核苷酸，所述核苷酸在其2'位置含有羟基。经过修饰的核糖核苷酸为具有除2'位置外的原子的一个或多个修饰或取代，包括核碱基、糖或磷酸酯基中或核碱基、糖或磷酸酯基的修饰或取代的核糖核苷酸。
如本文所用，“RNAi寡核苷酸”是指(a)具有有义链(过客)和反义链(引导)的ds寡核苷酸，其中反义链或反义链的一部分在靶mRNA的裂解中由Argonaute 2(Ago2)核酸内切酶使用；或(b)具有单个反义链的ss寡核苷酸，其中所述反义链(或所述反义链的一部分)在靶mRNA的裂解中由Ago2核酸内切酶使用。
如本文所用，“股链”是指通过核苷酸间键联(例如磷酸二酯键联或硫代磷酸酯键联)键联在一起的核苷酸的单个连续序列。股链可具有两个自由端(例如5'端和3'端)。
如本文所用，“受试者”意指任何哺乳动物，包括猫、狗、小鼠、大鼠以及灵长类动物，尤其是人。此外，“个体”或“患者”可与“受试者”互换使用。
如本文所用，“合成”是指核酸或其他分子为人工合成的(例如使用机器，诸如固态核酸合成仪)或以其他方式不衍生自通常产生所述核酸或其他分子的天然来源(例如细胞或有机体)。
如本文所用，“靶向配体”意指选择性结合至相关组织或细胞的同源分子(例如受体)并且可缀合至另一物质以使另一物质靶向至相关组织或细胞的分子(例如氨基糖、碳水化合物、胆固醇、脂质或多肽)。举例来说，靶向配体可出于使寡核苷酸靶向至特定相关组织或细胞的目的缀合至本文的寡核苷酸。靶向配体可选择性结合至细胞表面受体。因此，在缀合至寡核苷酸时，靶向配体通过选择性结合至在细胞的表面表达的受体以及包含寡核苷酸、靶向配体以及受体的复合物由细胞内体内化促进寡核苷酸递送至特定细胞中。此外，靶向配体可经由接头缀合至寡核苷酸，所述接头在细胞内化之后或期间裂解，使得寡核苷酸从细胞中的靶向配体释放。
如本文所用，“四环”意指增加通过核苷酸的侧接序列的杂交形成的相邻双链体的稳定性的环。稳定性增加可检测为相邻茎双链体的解链温度(Tm)增加，所述解链温度高于由一组随机选择的核苷酸序列组成的类似长度的环平均所预期的相邻茎双链体的Tm。举例来说，四环可赋予包含长度为至少2个碱基对(bp)的双链体的发夹在10mM NaHPO4中至少约50℃、至少约55℃、至少约56℃、至少约58℃、至少约60℃、至少约65℃或至少约75℃的Tm。四环还可通过叠加相互作用稳定相邻茎双链体中的bp。另外，四环中的核苷酸间相互作用包括但不限于非沃森-克里克碱基配对、叠加相互作用、氢键合以及接触相互作用(Cheong等(1990)NATURE 346:680-682；Heus和Pardi(1991)SCIENCE 253:191-194)。在此，四环可包括或可具有约3至6个核苷酸，并且典型地为约4至5个核苷酸。因此，四环可具有3、4、5或6个可能经过修饰或可能未经修饰(例如其可能缀合或可能未缀合至靶向部分)的核苷酸，尤其是4个核苷酸。任何核苷酸均可用于四环中，并且可如Cornish-Bowden(1985)NUCLEICACIDS RES.13:3021-30中所描述来使用此类核苷酸的标准IUPAC-IUB符号。举例来说，可使用字母“N”意指任何碱基可位于所述位置，可使用字母“R”表明A(腺嘌呤)或G(鸟嘌呤)可位于所述位置，并且可使用“B”表明C(胞嘧啶)、G(鸟嘌呤)或T(胸腺嘧啶)可位于所述位置。四环的实例包括四环的UNCG家族(例如UUCG)、四环的GNRA家族(例如GAAA)以及CUUG四环(Woese等(1990)PROC.NATL.ACAD.SCI.USA 87:8467-71；Antao等(1991)NUCLEIC ACIDSRES.19:5901-05)。DNA四环的实例包括四环的d(GNNA)家族(例如d(GTTA))、四环的d(GNRA)家族、四环的d(GNAB)家族、四环的d(CNNG)家族以及四环的d(TNCG)家族(例如d(TTCG))。参见例如Nakano等(2002)BIOCHEM.41:4281-92；以及Shinji等(2000)NIPPON KAGAKKAIKOENYOKOSHU 78:731。在此，四环可在缺口四环结构内。
如本文所用，“治疗(treat/treating)”意指向有需要的个体提供护理的动作，例如通过出于相对于现有情况(例如疾病、病症)改善个体的健康和/或幸福的目的或为防止疾患发生或降低其可能性向个体施用治疗剂(例如本文的寡核苷酸)。治疗还可涉及减轻个体所经历的疾患(例如疾病、病症)的至少一种迹象、症状或促进因素的频率或严重程度。
如本文所用，“iRNA”、“iRNA剂”、“RNAi”、“RNAi剂”以及“RNA干扰剂”意指含有RNA并且经由RNA诱导的沉默复合体(RISC)路径介导RNA转录物的靶向裂解的剂。iRNA经由RNA干扰引导mRNA的序列特异性降解。iRNA调节、抑制或降低细胞中的PNPLA3表达。
组合物
根据一些方面，本公开提供了降低、调节或抑制肝脏中PNPLA3的表达的寡核苷酸(例如双链RNAi寡核苷酸)。在一些实施方案中，本文所提供的寡核苷酸用于治疗与PNPLA3表达相关的疾病。在一些方面中，本公开提供了通过降低、调节或抑制肝脏中(例如构成肝脏的细胞中)的PNPLA3表达来治疗与PNPLA3表达相关的疾病的方法。
PNPLA3表达的寡核苷酸抑制剂
I.PNPLA3靶序列：使本文的寡核苷酸(例如RNAi寡核苷酸)靶向包含PNPLA3 mRNA的靶序列(即，PNPLA3靶序列)。在一些实施方案中，寡核苷酸或其部分、片段或股链(例如dsRNAi寡核苷酸的反义链或引导链)结合或退火至PNPLA3靶序列，从而抑制PNPLA3表达。在一些实施方案中，使寡核苷酸靶向PNPLA3靶序列以抑制体内PNPLA3表达。在一些实施方案中，PNPLA3表达受靶向PNPLA3靶序列的寡核苷酸抑制的量或程度与寡核苷酸的性能有关。在一些实施方案中，PNPLA3表达受靶向PNPLA3靶序列的寡核苷酸抑制的量或程度与用寡核苷酸治疗的患有或疑似患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的个体中的治疗益处的量或程度有关。
通过检验和分析PNPLA3 mRNA，包括多个不同物种(例如人、食蟹猴以及恒河猴；参见例如实施例1)的mRNA的核苷酸序列并且作为体外和体内测试的结果(参见例如实施例2-3)，本文中显示PNPLA3 mRNA的某些核苷酸序列比其他核苷酸序列更适合于基于寡核苷酸的对PNPLA3表达的抑制并且因此适合作为本文的寡核苷酸的靶序列。在一些实施方案中，本文所描述的寡核苷酸(例如ds RNAi寡核苷酸)的有义链(例如表1或表3或表A、表B、表C或表D中)包含PNPLA3靶序列。在一些实施方案中，本文所描述的寡核苷酸的有义链(例如表1或表3或表A、表B、表C或表D中)的部分或区域包含PNPLA3靶序列。在一些实施方案中，PNPLA3靶序列包含SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的序列，或由其组成。
II.PNPLA3 mRNA靶向序列：在一些实施方案中，本文的寡核苷酸具有用于靶向细胞中的PNPLA3 mRNA并且抑制PNPLA3表达的与PNPLA3 mRNA具互补性的区域(例如在PNPLA3mRNA的靶序列内)。在一些实施方案中，本文的寡核苷酸包含PNPLA3靶向序列(例如ds寡核苷酸的反义链或引导链)，所述PNPLA3靶向序列具有通过互补(沃森-克里克)碱基配对结合或退火至PNPLA3 mRNA靶序列的具互补性的区域。靶向序列或具互补性的区域具有合适的长度和碱基含量，以使寡核苷酸(或其股链)能够结合或退火至PNPLA3 mRNA以便抑制其表达。在一些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域的长度为至少约12、至少约13、至少约14、至少约15、至少约16、至少约17、至少约18、至少约19、至少约20、至少约21、至少约22、至少约23、至少约24、至少约25、至少约26、至少约27、至少约28、至少约29或至少约30个核苷酸。或者，靶向序列或具互补性的区域的长度为约12至约30(例如12至30、12至22、15至25、17至21、18至27、19至27或15至30)个核苷酸。或者，靶向序列或具互补性的区域的长度为约12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个核苷酸。在某些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域的长度为18个核苷酸。在某些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域的长度为19个核苷酸。在某些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域的长度为20个核苷酸。在某些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域的长度为21个核苷酸。在某些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域的长度为22个核苷酸。在某些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域的长度为23个核苷酸。在某些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域的长度为24个核苷酸。
在一些实施方案中，本文的寡核苷酸包含与PNPLA3靶序列完全互补的靶向序列或具互补性的区域(例如双链寡核苷酸的反义链或引导链)。在一些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域与PNPLA3靶序列部分互补。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与SEQ IDNO:1167至1176的序列中的任一者完全互补的靶向序列或具互补性的区域。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与SEQ ID NO:1167至1176的序列中的任一者部分互补的靶向序列或具互补性的区域。
或者，在一些实施方案中，本文的寡核苷酸包含与包含PNPLA3mRNA的核苷酸的连续序列互补的靶向序列或具互补性的区域，其中核苷酸的连续序列的长度为约12至约30个核苷酸(例如长度为12至30、12至28、12至26、12至24、12至20、12至18、12至16、14至22、16至20、18至20或18至19个核苷酸)。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与包含PNPLA3 mRNA的核苷酸的连续序列互补的靶向序列或具互补性的区域，其中核苷酸的连续序列的长度为10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个核苷酸。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与包含PNPLA3 mRNA的核苷酸的连续序列互补的靶向序列或具互补性的区域，其中核苷酸的连续序列的长度为19个核苷酸。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与包含PNPLA3 mRNA的核苷酸的连续序列互补的靶向序列或具互补性的区域，其中核苷酸的连续序列的长度为20个核苷酸。在其他实施方案中，寡核苷酸包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的核苷酸的连续序列互补的靶向序列或具互补性的区域，任选其中核苷酸的连续序列的长度为19个核苷酸。
就本文的寡核苷酸的靶向序列或具互补性的区域来说，所述靶向序列或具互补性的区域与如SEQ ID NO:1167至1176中的任一者中所列的序列的连续核苷酸互补并且跨越反义链的整个长度。在一些实施方案中，寡核苷酸的具互补性的区域与如SEQ ID NO:1167至1176中的任一者中所列的序列的连续核苷酸互补并且跨越反义链的整个长度的一部分。在一些其他实施方案中，寡核苷酸包括具互补性的区域(例如在ds寡核苷酸的反义链上)，所述具互补性的区域与跨越如SEQ ID NO:1167至1176中的任一者中所列的序列的核苷酸1-20的核苷酸的连续延伸段至少部分(例如完全)互补。
或者，本文的寡核苷酸包含与对应PNPLA3靶序列具有一个或多个碱基对(bp)错配的靶向序列或具互补性的区域。在一些实施方案中，靶向序列或具互补性的区域与对应PNPLA3靶序列至少约1、至多约2、至多约3、至多约4、至多约5等个错配，前提条件为靶向序列或具互补性的区域在适当杂交条件下结合或退火至PNPLA3 mRNA的能力和/或寡核苷酸降低或抑制PNPLA3表达的能力得以维持。换句话说，靶向序列或具互补性的区域与对应PNPLA3靶序列不超过1、不超过2、不超过3、不超过4或不超过5个错配，前提条件为靶向序列或具互补性的区域在适当杂交条件下结合或退火至PNPLA3mRNA的能力和/或寡核苷酸降低或抑制PNPLA3表达的能力得以维持。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与对应靶序列具有1个错配的靶向序列或具互补性的区域。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与对应靶序列具有2个错配的靶向序列或具互补性的区域。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与对应靶序列具有3个错配的靶向序列或具互补性的区域。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与对应靶序列具有4个错配的靶向序列或具互补性的区域。在一些实施方案中，寡核苷酸包含与对应靶序列具有5个错配的靶向序列或具互补性的区域。在其他实施方案中，寡核苷酸包含与对应靶序列超过一个错配(例如2、3、4、5或更多个错配)的靶向序列或具互补性的区域，其中错配中的至少2者(例如全部)连续定位(例如2、3、4、5或更多个错配呈一排)，或其中错配分散在靶向序列或具互补性的区域中的任何位置。在其他实施方案中，寡核苷酸包含与对应靶序列超过一个错配(例如2、3、4、5或更多个错配)的靶向序列或具互补性的区域，其中错配中的至少2者(例如全部)连续定位(例如2、3、4、5或更多个错配呈一排)，或其中至少一个或多个非错配碱基对定位在错配之间，或它们的组合。
III.寡核苷酸的类型：适用于靶向PNPLA3 mRNA的多种寡核苷酸类型和/或结构包括但不限于RNAi寡核苷酸、反义寡核苷酸、miRNA等。涵盖出于抑制PNPLA3表达的目的将本文或别处所描述的寡核苷酸类型中的任一者用作构架来并入本文的靶向序列。在一些实施方案中，本文的寡核苷酸通过与Dicer参与上游或下游的RNAi路径接合来抑制PNPLA3表达。举例来说，已研发具有1至5个核苷酸的至少一个3'悬垂物的各股链尺寸为约19-25个核苷酸的RNAi寡核苷酸(参见例如美国专利号8,372,968)。还研发了由Dicer加工以产生活性RNAi产物的更长寡核苷酸(参见例如美国专利号8,883,996)。进一步的工作产生了延伸的ds寡核苷酸，其中至少一个股链的至少一个末端延伸超过双链体靶向区域，包括其中所述股链中的一者包括热力学稳定四环结构的结构(参见例如美国专利号8,513,207和8,927,705，以及国际专利申请公布号WO 2010/033225)。此类结构包括ss延伸(在分子的一侧或两侧)以及ds延伸。
本文的寡核苷酸与Dicer参与(例如Dicer裂解)下游的RNAi路径接合。在一些实施方案中，寡核苷酸在有义链的3'端具有悬垂物(例如长度为1、2或3个核苷酸)。在一些实施方案中，寡核苷酸(例如siRNA)包括与靶mRNA(例如PNPLA3 mRNA)反义的21-核苷酸引导链和互补过客链，其中两个股链退火以在任一个或两个3'端形成19-bp双链体和2核苷酸悬垂物。还涵盖更长的寡核苷酸设计，包括具有23个核苷酸的引导链以及21个核苷酸的过客链的寡核苷酸，其中在分子右侧(过客链的3'端/引导链的5'端)存在平末端并且在分子左侧(过客链的5'端/引导链的3'端)存在两个核苷酸3'-引导链悬垂物。在此类分子中，存在21bp双链体区域。参见例如美国专利号9,012,138；9,012,621以及9,193,753。
本文的寡核苷酸包含有义和反义链，所述两者的长度在约17至约26(例如17至26、20至25或21-23)个核苷酸范围内。在一些实施方案中，寡核苷酸包含有义和反义链，所述两者的长度均在约19至约22个核苷酸范围内。在一些实施方案中，有义和反义链具有相等长度。在一些实施方案中，寡核苷酸包含有义和反义链，使得有义链或反义链或有义与反义链两者上存在3'-悬垂物。在一些情况下，在具有有义和反义链并且两者的长度均在约21至约23个核苷酸范围内的寡核苷酸中，有义、反义或有义与反义链两者上的3'-悬垂物的长度为1或2个核苷酸。在一些实施方案中，寡核苷酸包含22个核苷酸的引导链以及20个核苷酸的过客链，其中在分子右侧(过客链的3'端/引导链的5'端)存在平末端并且在分子左侧(过客链的5'端/引导链的3'端)存在2核苷酸3'引导链悬垂物。在此类分子中，存在20-bp双链体区域。
本文所用的其他寡核苷酸设计包括：16聚体siRNA(参见例如“NUCLEIC ACIDS INCHEMISTRY&BIOLOGY”，Blackburn(编)，Royal Society ofChemistry，2006)、shRNA(例如具有19bp或更短的茎；参见例如Moore等(2010)METHODS MOL.BIOL.629:141-58)、平端siRNA(例如长度为19bp；参见例如Kraynack和Baker(2006)RNA 12:163-76)、不对称siRNA(aiRNA；参见例如Sun等(2008)NAT.BIOTECHNOL.26:1379-82)、非对称较短双链体siRNA(参见例如Chang等(2009)MOL.THER.17:725-32)、叉形siRNA(参见例如Hohjoh(2004)FEBSLETT.557:193-198)、ss siRNA(参见例如Elsner(2012)NAT.BIOTECHNOL.30:1063)、哑铃形环状siRNA(参见例如Abe等(2007)J.AM.CHEM.SOC.129:15108-09)以及小内部区段干扰RNA(sisiRNA；参见例如Bramsen等(2007)NUCLEIC ACIDS RES.35:5886-97)。可在本文中用于降低或抑制PNPLA3表达的寡核苷酸结构的其他非限制性实例为miRNA、shRNA以及短siRNA(参见例如Hamilton等(2002)EMBO J.21:4671-79；还参见美国专利申请公布号2009/0099115)。
或者，本文的寡核苷酸为单链的(ss)。此类结构包括但不限于ss RNAi分子。当前工作已证实ss RNAi分子的活性(参见例如Matsui等(2016)MOL.THER.24:946-55)。在一些实施方案中，寡核苷酸为ASO。ASO为ss寡核苷酸，所述ss寡核苷酸所具有的核碱基序列在以5'至3'方向书写或展示时包括特定核酸的所靶向片段的反向补体并且经过适当修饰(例如作为间隔聚体(gapmer))以诱导RNaseH介导的细胞中其靶RNA的裂解或(例如作为混合聚体(mixmer))以便抑制细胞中靶mRNA的翻译。以本领域中已知的包括例如如美国专利号9,567,587号中所示的任何合适的方式(包括例如长度、核碱基(嘧啶、嘌呤)的糖部分以及核碱基的杂环部分的改变)对供本文使用的ASO进行修饰。另外，ASO数十年来一直被用于降低特定靶基因的表达(参见例如Bennett等(2017)ANNU.REV.PHARMACOL.57:81-105)。
IV.双链RNAi寡核苷酸：用于靶向PNPLA3 mRNA并且抑制PNPLA3表达(例如经由RNAi路径)并且包含有义链(即，过客链)和反义链(即，引导链)的ds寡核苷酸。在一些实施方案中，有义链和反义链为分开的股链并且不共价键联。在一些实施方案中，有义链和反义链为共价键联的。
在一些实施方案中，有义链包含第一区域(R1)和第二区域(R2)，其中R2包含第一亚区(S1)、四环(L)或三环(triL)以及第二亚区(S2)，其中L或triL定位于S1与S2之间，并且其中S1和S2形成第二双链体(D2)。D2具有各种长度。在一些实施方案中，D2的长度为约1至约6bp。在一些实施方案中，D2的长度为2-6、3-6、4-6、5-6、1-5、2-5、3-5或4-5bp。在其他实施方案中，D2的长度为1、2、3、4、5或6bp。在某些实施方案中，D2的长度为6bp。
在一些实施方案中，有义链的R1和反义链形成第一双链体(D1)。在一些实施方案中，D1的长度为至少约15(例如至少15、至少16、至少17、至少18、至少19、至少20或至少21)个核苷酸。在一些实施方案中，D1的长度为约12至约30个核苷酸(例如长度为12至30、12至27、15至22、18至22、18至25、18至27、18至30或21至30个核苷酸)。在其他实施方案中，D1的长度为至少12个核苷酸(例如长度为至少12、至少15、至少20、至少25或至少30个核苷酸)。在其他实施方案中，D1的长度为12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个核苷酸。在某些实施方案中，D1的长度为20个核苷酸。在一些情况下，D1不跨越有义链和/或反义链的整个长度。在一些情况下，D1跨越有义链或反义链或两者的整个长度。在某些情况下，D1跨越有义链与反义链两者的整个长度。
在某些情况下，本文的ds寡核苷酸包括具有SEQ ID NO:9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253、255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477、479、481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553、555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、771、773以及775中的任一者的序列的有义链，以及具有选自SEQ ID NO:10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、342、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384、386、388、390、392、394、396、398、400、402、404、406、408、410、412、414、416、418、420、422、424、426、428、430、432、434、436、438、440、442、444、446、448、450、452、454、456、458、460、462、464、466、468、470、472、474、476、478、480、482、484、486、488、490、492、494、496、498、500、502、504、506、508、510、512、514、516、518、520、522、524、526、528、530、532、534、536、538、540、542、544、546、548、550、552、554、556、558、560、562、564、566、568、570、572、574、576、578、580、582、584、586、588、590、592、594、596、598、600、602、604、606、608、610、612、614、616、618、620、622、624、626、628、630、632、634、636、638、640、642、644、646、648、650、652、654、656、658、660、662、664、666、668、670、672、674、676、678、680、682、684、686、688、690、692、694、696、698、700、702、704、706、708、710、712、714、716、718、720、722、724、726、728、730、732、734、736、738、740、742、744、746、748、750、752、754、756、758、760、762、764、766、768、770、772、774以及776的互补序列的反义链，如表1中所排列。或者，本文的ds寡核苷酸包括具有SEQ ID NO:777、779、781、783、785、787、789、791、793、795、797、799、801、803、805、807、809、811、813、815、817、819、821、823、825、827、829、831、833、835、837、839、841、843、845、847、849、851、853、855、857、859、861、863、865、867、869、871、873、875、877、879、881、883、885、887、889、891、893、895、897、899、901、903、905、907、909、911、913、915、917、919、921、923、925、927、929、931、933、935、937、939、941、943、945、947、949、951、953、955、957、959、961、963、965、967、969、971、973、975、977、979、981、983、985、987、989、991、993、995、997、999、1001、1003、1005、1007、1009、1011、1013、1015、1017、1019、1021、1023、1025、1027、1029、1031、1033、1035、1037、1039、1041、1043、1045、1047、1049、1051、1053、1055、1057、1059、1061、1063、1065、1067、1069、1071、1073、1075、1077、1079、1081、1083、1085、1087、1089、1091、1093、1095、1097、1099、1101、1103、1105、1107、1109、1111、1113、1115、1117、1119、1121、1123、1125、1127、1129、1131、1133、1135、1137、1139、1141、1143、1145、1147、1149、1151、1153、1155、1157、1159、1161以及1163中的任一者的序列的有义链，以及具有选自SEQ ID NO:778、780、782、784、786、788、790、792、794、796、798、800、802、804、806、808、810、812、814、816、818、820、822、824、826、828、830、832、834、836、838、840、842、844、846、848、850、852、854、856、858、860、862、864、866、868、870、872、874、876、878、880、882、884、886、888、890、892、894、896、898、900、902、904、906、908、910、912、914、916、918、920、922、924、926、928、930、932、934、936、938、940、942、944、946、948、950、952、954、956、958、960、962、964、966、968、970、972、974、976、978、980、982、984、986、988、990、992、994、996、998、1000、1002、1004、1006、1008、1010、1012、1014、1016、1018、1020、1022、1024、1026、1028、1030、1032、1034、1036、1038、1040、1042、1044、1046、1048、1050、1052、1054、1056、1058、1060、1062、1064、1066、1068、1070、1072、1074、1076、1078、1080、1082、1084、1086、1088、1090、1092、1094、1096、1098、1100、1102、1104、1106、1108、1110、1112、1114、1116、1118、1120、1122、1124、1126、1128、1130、1132、1134、1136、1138、1140、1142、1144、1146、1148、1150、1152、1154、1156、1158、1160、1162以及1164的互补序列的反义链，如表3中所排列。在某些情况下，有义链为SEQ ID NO:787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中的任一者，并且反义链为SEQ ID NO:788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中的任一者。
在某些实施方案中，本公开描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的序列(例如SEQ ID NO:1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300)的有义链。
在某些实施方案中，本公开描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的序列(例如SEQ ID NO:1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301)的反义链。在某些实施方案中，本公开描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的序列(例如SEQ ID No:1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300)的有义链。
在某些实施方案中，本公开描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的序列(例如SEQ ID NO:1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301)的反义链。
在一些实施方案中，描述了用于降低或抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述RNAi寡核苷酸包括反义链和有义链，其中反义链具有如表A、表B、表C或表D中所列的序列，并且其中有义链具有如表A、表B、表C或表D中所列的序列。
在一些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的核苷酸序列，尤其SEQ ID NO:1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中的任一者的有义链。在一些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列的核苷酸序列，尤其SEQ ID NO:1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1202、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301中的任一者的反义链。在某些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO:1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中的任一者的核苷酸序列的有义链，以及具有SEQ ID NO:1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301中的任一者的核苷酸序列的反义链。
在某些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO:1188、1190、1200、1216、1218、1220、1224、1230、1232、1234、1244、1246、1250、1254、1262、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中的任一者的核苷酸序列的有义链，以及具有SEQ ID NO:1189、1191、1201、1215、1217、1221、1225、1231、1233、1235、1245、1247、1251、1255、1263、1289、1291、1295、1297、1299或1301中的任一者的核苷酸序列的反义链。
在某些情况下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO:1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中的任一者的核苷酸序列的有义链，以及具有SEQ ID NO:1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中的任一者的核苷酸序列的反义链。
在某些情况下，RNAi寡核苷酸的有义链和反义链分别选自：
(a)SEQ ID NO:1220和1221，
(b)SEQ ID NO:1224和1225，
(c)SEQ ID NO:1230和1231，
(d)SEQ ID NO:1232和1233，
(e)SEQ ID NO:1188和1189，
(f)SEQ ID NO:1190和1191，
(g)SEQ ID NO:1244和1245，
(h)SEQ ID NO:1250和1251-，
(i)SEQ ID NO:1254和1255，以及
(j)SEQ ID NO:1246和1247。
本领域技术人员了解，在一些情况下，在描述寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)或其他核酸的结构时提到呈现于序列表中的序列。在此类情况中，实际寡核苷酸或其他核酸当与指定序列相比较时具有一个或多个替代核苷酸(例如DNA核苷酸的RNA对应物或RNA核苷酸的DNA对应物)和/或一个或多个经过修饰的核苷酸和/或一个或多个经过修饰的核苷酸间键联和/或一个或多个其他修饰，同时保留与指定序列大体上相同或类似的互补特性。
在一些实施方案中，本文的ds寡核苷酸包括25-核苷酸有义链和27-核苷酸反义链，其当由Dicer酶作用时产生合并至成熟RISC中的反义链。在某些情况下，ds寡核苷酸的有义链比27个核苷酸更长(例如28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40个核苷酸)。在某些情况下，ds寡核苷酸的有义链比25个核苷酸更长(例如26、27、28、29或30个核苷酸)。
在一些情况下，本文的ds寡核苷酸具有一个5'端，所述5'端当与其他5'端相比时为热力学不太稳定的。在一些实施方案中，ds寡核苷酸为非对称的并且包括在有义链的3'端的平末端以及在反义链的3'端的3'-悬垂物。在一些实施方案中，反义链上的3'-悬垂物的长度为约1至约8个核苷酸(例如长度为1、2、3、4、5、6、7或8个核苷酸)。典型地，用于RNAi的ds寡核苷酸在反义(引导)链的3'端具有二核苷酸悬垂物。然而，其他悬垂物为可能的。在一些实施方案中，悬垂物为3'-悬垂物，其长度在约1至约6个核苷酸、任选1至5、1至4、1至3、1至2、2至6、2至5、2至4、2至3、3至6、3至5、3至4、4至6、4至5、5至6个核苷酸的间，或为1、2、3、4、5或6个核苷酸。然而，在其他情况下，悬垂物为5'-悬垂物，所述5'-悬垂物包含约1至约6个核苷酸、任选1至5、1至4、1至3、1至2、2至6、2至5、2至4、2至3、3至6、3至5、3至4、4至6、4至5、5至6个核苷酸的间或1、2、3、4、5或6个核苷酸的长度。
在一些情况下，反义链的3'端的两个末端核苷酸为经过修饰的。在一些情况下，反义链的3'端的两个末端核苷酸与靶mRNA(例如PNPLA3 mRNA)互补。在其他情况下，反义链的3'端的两个末端核苷酸不与靶mRNA互补。在一些情况下，缺口四环结构中的寡核苷酸的各3'端的两个末端核苷酸为GG。典型地，ds寡核苷酸的各3'端的两个末端GG核苷酸中的一者或两者不与靶mRNA互补。
在一些情况下，有义与反义链的间存在一个或多(例如1、2、3、4或5)个错配。如果有义与反义链的间存在超过一个错配，那么它们可连续定位(例如2、3或更多者呈一排)，或分散在具互补性的区域中。在一些情况下，有义链的3'端含有一个或多个错配。在某些情况下，在有义链的3'端并有两个错配。在一些情况下，在寡核苷酸的有义链3'端的碱基错配或区段扰动改善或增加ds寡核苷酸的性能。
A.反义链：本文中用于靶向PNPLA3 mRNA并且抑制PNPLA3表达的寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)包括反义链，所述反义链包括如表1或表3或表A、表B、表C或表D的反义链中所列的序列。在一些情况下，寡核苷酸包括具有如SEQ ID NO:788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中的任一者中所列的序列的至少约12(例如至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19、至少20、至少21、至少22或至少23)个连续核苷酸的反义链，或具有SEQ ID NO:1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中的任一者的核苷酸序列的反义链。
另外，本文的寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)可包括长度为至多约40个核苷酸(例如长度为至多40、至多35、至多30、至多27、至多25、至多21、至多19、至多17或至多12个核苷酸)的反义链。在一些情况下，寡核苷酸可具有长度为至少约12个核苷酸(例如长度为至少12、至少15、至少19、至少21、至少22、至少25、至少27、至少30、至少35或至少38个核苷酸)的反义链。或者，寡核苷酸可具有长度在约12至约40(例如12至40、12至36、12至32、12至28、15至40、15至36、15至32、15至28、17至22、17至25、19至27、19至30、20至40、22至40、25至40或32至40)个核苷酸范围内的反义链。在某些情况下，寡核苷酸可具有长度为12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40个核苷酸的反义链。
如上文所提到，本文的寡核苷酸的反义链可称为“引导链”。举例来说，与RISC接合并且结合至Argonaute蛋白(诸如Ago2)或与一种或多种类似因子接合或结合至一种或多种类似因子并且引导靶基因的沉默的反义链，所述反义链称为引导链(或“过客链”)。
B.有义链：本文中用于靶向PNPLA3 mRNA并且抑制PNPLA3表达的寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)包括有义链序列，所述有义链序列包括如表1或表3或表A、表B、表C或表D的有义链中所列的序列。在一些情况下，寡核苷酸包括有义链，所述有义链具有如SEQ ID NO:787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中的任一者中所列的序列的至少约12(例如至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19、至少20、至少21、至少22、或至少23)个连续核苷酸。
另外，本文的寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)包括长度为至多约40个核苷酸(例如长度为至多40、至多36、至多30、至多27、至多25、至多21、至多19、至多17或至多12个核苷酸)的有义链(或过客链)。在一些情况下，寡核苷酸可具有长度为至少约12个核苷酸(例如长度为至少12、至少15、至少19、至少21、至少25、至少27、至少30至少36或至少38个核苷酸)的有义链。或者，寡核苷酸可具有长度在约12至约40(例如12至40、12至36、12至32、12至28、15至40、15至36、15至32、15至28、17至21、17至25、19至27、19至30、20至40、22至40、25至40或32至40)个核苷酸范围内的有义链。在某些情况下，寡核苷酸可具有长度为12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40个核苷酸的有义链。
在一些实施方案中，有义链在其3'端包含茎-环结构。在其他实施方案中，有义链在其5'端包含茎-环结构。在其他实施方案中，茎为长度为约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14bp的双链体。在一些实施方案中，茎-环为寡核苷酸提供针对降解(例如酶降解)的保护作用并且有助于或改善对靶细胞、组织或器官(例如肝脏)的靶向和/或递送或两者。举例来说，茎-环的环提供具有一个或多个修饰的核苷酸，所述一个或多个修饰有助于、改善或增加对靶mRNA(例如PNPLA3 mRNA)的靶向、对靶基因表达(例如PNPLA3表达)的抑制和/或向靶细胞、组织或器官(例如肝脏)的递送或两者。在一些实施方案中，茎-环本身或对茎-环的修饰基本上不影响寡核苷酸的固有基因表达抑制活性，但有助于、改善或增加稳定性(例如提供针对降解的保护作用)和/或寡核苷酸向靶细胞、组织或器官(例如肝脏)的递送。在某些实施方案中，寡核苷酸包含包括(例如在其3'端)阐述为S1-L-S2的茎-环的有义链，其中S1与S2互补，并且其中L形成在S1与S2之间长度为至多约10个核苷酸(例如长度为3、4、5、6、7、8、9或10个核苷酸)的单链环。在某些实施方案中，环(L)的长度为4个核苷酸。图1和图2展示了此类寡核苷酸的非限制性实例。在一些实施方案中，具有如上文所描述的结构S1-L-S2的茎-环的环(L)为四环(例如在缺口四环结构内)。在一些实施方案中，四环包含核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸、经过修饰的核苷酸、递送配体以及它们的组合。
V.寡核苷酸修饰
A.糖修饰：经过修饰的糖(本文中还称为糖类似物)包括经过修饰的脱氧核糖或核糖部分，其中例如一个或多个修饰存在于糖的2'、3'、4'和/或5'碳位置处。经过修饰的糖还包括非天然替代碳结构，诸如存在于锁核酸(“LNA”；参见例如Koshkin等(1998)TETRAHEDRON54:3607-3630)、解锁核酸(“UNA”；参见例如Snead等(2013)MOL.THER-NUC.ACIDS2:e103)以及桥接核酸(“BNA」”；参见例如Imanishi和Obika(2002)CHEM.COMMUN.16:1653-1659)中的那些非天然替代碳结构。
在一些实施方案中，糖中的核苷酸修饰为2'-修饰，诸如2'-O-炔丙基、2'-O-丙氨基、2'-氨基、2'-乙基、2'-氟(2'-F)、2'-氨基乙基(EA)、2'-O-甲基(2'-OMe)、2'-O-甲氧基乙基(2'-MOE)、2'-O-[2-(甲氨基)-2-氧代乙基](2'-O-NMA)或2'-脱氧-2'-氟-β-d-阿拉伯糖基核酸(2'-FANA)。在某些实施方案中，修饰为2'-F、2'-OMe或2'-MOE。在其他实施方案中，糖中的修饰为糖环的修饰，所述修饰包括糖环的一个或多个碳的修饰。举例来说，糖中的修饰为糖的2'-氧键联至糖的1'-碳或4'-碳，或2'-氧经由亚乙基或亚甲基桥键联至1'-碳或4'-碳。在其他实施方案中，修饰为缺乏2'-碳至3'-碳键的非环糖。在其他实施方案中，修饰为诸如糖的4'位置中的硫醇基。
本文的寡核苷酸包括至少1(例如至少1、至少5、至少10、至少15、至少20、至少25、至少30、至少35、至少40、至少45、至少50、至少55、至少60或更多)个经过修饰的核苷酸。在一些实施方案中，有义链包含至少1(例如至少1、至少5、至少10、至少15、至少20、至少25、至少30、至少35或更多)个经过修饰的核苷酸。在一些实施方案中，反义链包含至少1(例如至少1、至少5、至少10、至少15、至少20或更多)个经过修饰的核苷酸。
在某些实施方案中，有义链的所有核苷酸均为经过修饰的。同样地，反义链的所有核苷酸均为经过修饰的。在一些实施方案中，本文的寡核苷酸的所有核苷酸(即，有义链与反义链两者)均为经过修饰的。如上文所述并且在一些实施方案中，经过修饰的核苷酸为2'-修饰(例如2'-F、2'-OMe、2'-MOE和/或2'-脱氧-2'-氟-β-d-阿拉伯糖基核酸)。在某些实施方案中，经过修饰的核苷酸为2'-修饰，诸如2'-F或2'-OMe。
此外，本文的寡核苷酸具有不同修饰模式。在一些实施方案中，经过修饰的寡核苷酸包含具有如表A、表B、表C或表D中的任一者中所列的修饰模式的反义链，并且包含具有如表A、表B、表C或表D(以及图1)中的任一者中所列的修饰模式的有义链序列。在一些实施方案中，有义链的位置8、9、10或11中的一者或多者为2'-F修饰的。在其他实施方案中，有义链中在位置1至7和12至20的各核苷酸的糖部分为2'-OMe修饰的。
在一些实施方案中，反义链包括3个在糖部分的2'-位置经过2'-F修饰的核苷酸。在一些实施方案中，在位置2、5以及14的糖部分以及任选反义链的位置1、3、7以及10的核苷酸中的至多3者为2'-F修饰的。在其他实施方案中，在反义链的位置2、5以及14的糖部分为2'-F修饰的。在其他实施方案中，在反义链的位置1、2、5以及14的糖部分为2'-F修饰的。在其他情况下，在反义链的位置1、2、3、5、7以及14的糖部分为2'-F修饰的。在其他实施方案中，在反义链的位置1、2、3、5、10以及14的糖部分为2'-F修饰的。在其他实施方案中，在反义链的位置2、3、5、7、10以及14的糖部分为2'-F修饰的。
B.5'端磷酸酯：可使用5'端磷酸酯基来增强本文的寡核苷酸与Ago2的相互作用。然而，具有5'-磷酸酯基的寡核苷酸可能易于经由磷酸酶或其他酶降解，这可限制其在体内的生物利用度。在一些实施方案中，寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)包含对此类降解具抗性的5'磷酸酯类似物。此类磷酸酯类似物的实例包括但不限于氧甲基膦酸酯、乙烯基膦酸酯、丙二酰基膦酸酯或它们的组合。在某些实施方案中，寡核苷酸的一个股链的3'端连接至模拟天然5'-磷酸酯基的静电和空间特性的化学部分(“磷酸酯模拟物”)。
或者或另外，本文的寡核苷酸在糖的4'-碳位置处具有磷酸酯类似物(称为“4'-磷酸酯类似物”)。参见例如国际专利申请公布号WO2018/045317。在一些实施方案中，本文的寡核苷酸在5'-末端核苷酸处包括4'-磷酸酯类似物。在一些实施方案中，磷酸酯类似物为氧甲基膦酸酯，其中氧甲基的氧原子结合至糖部分(例如在其4'-碳处)或其类似物。在其他实施方案中，4'-磷酸酯类似物为硫甲基膦酸酯或氨基甲基膦酸酯，其中硫甲基的硫原子或氨基甲基的氮原子结合至糖部分的4'-碳或其类似物。在某些实施方案中，4'-磷酸酯类似物为氧甲基膦酸酯，所述氧甲基膦酸酯由式–O–CH2–PO(OH)2或–O–CH2–PO(OR)2表示，其中R独立地选自H、CH3、CH2CH2CN、CH2OCOC(CH3)3、CH2OCH2CH2Si(CH3)3烷基或保护基。在某些实施方案中，烷基为CH2CH3。在某些其他实施方案中，R独立地选自H、CH3或CH2CH3。
C.经过修饰的核苷间键联：除以上修饰外，本文的寡核苷酸还包含经过修饰的核苷间键联。在一些情况下，磷酸酯修饰或取代产生包含至少约1(例如至少1、至少2、至少3或至少5)个经过修饰的核苷酸间键联的寡核苷酸。在一些实施方案中，寡核苷酸包含约1至约10(例如1至10、2至8、4至6、3至10、5至10、1至5、1至3或1至2)个经过修饰的核苷酸间键联。在某些其他实施方案中，寡核苷酸包含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个经过修饰的核苷酸间键联。
经过修饰的核苷酸间键联的实例包括但不限于二硫代磷酸酯键联、硫代磷酸酯键联、磷酸三酯键联、硫羰基烷基膦酸酯键联、硫羰基烷基磷酸三酯键联、亚磷酰胺键联、膦酸酯键联或硼代磷酸酯键联。在一些实施方案中，如本文所公开的寡核苷酸中的任一者的至少一个经过修饰的核苷酸间键联为硫代磷酸酯键联。
在一些实施方案中，本文的寡核苷酸包含有义链的位置1与2、反义链的位置1与2、反义链的位置2与3、反义链的位置3与4、反义链的位置20与21以及反义链的位置21与22中的一者或多者之间的硫代磷酸酯键联。在其他实施方案中，寡核苷酸包含有义链的位置1与2、反义链的位置1与2、反义链的位置2与3、反义链的位置20与21以及反义链的位置21与22中的每一者之间的硫代磷酸酯键联。
D.碱基修饰：除以上修饰外，本文的寡核苷酸还包含一个或多个经过修饰的核碱基。在一些实施方案中，经过修饰的核碱基(本文还称为碱基类似物)键联在核苷酸糖部分的1'位置处。在某些实施方案中，经过修饰的核碱基为含氮碱基。在某些其他实施方案中，经过修饰的核碱基不含氮原子。参见例如美国专利申请公布号2008/0274462。在一些实施方案中，经过修饰的核苷酸为通用碱基。然而，在某些实施方案中，经过修饰的核苷酸不含核碱基(无碱基)。
对于通用碱基，它们包含位于经过修饰的核苷酸中的核苷酸糖部分的1'位置或核苷酸糖部分取代中的等效位置的杂环部分，所述杂环部分当存在于双链体中时在基本上不改变双链体结构的情况下与超过一种类型的碱基相对定位。此外，并且与完全与靶核酸互补的参考ss核酸(例如寡核苷酸)相比，具有通用碱基的ss核酸与靶核酸形成双链体，所述双链体具有与互补核酸形成的双链体更低的Tm。然而，当与其中通用碱基已用碱基置换以产生单个错配的参考ss核酸相比时，具有通用碱基的ss核酸与靶核酸形成双链体，所述双链体具有比与具有错配碱基的核酸形成的双链体更高的Tm。
示例性通用结合核苷酸包括但不限于肌苷、1-β-D-呋喃核糖基-5-硝基吲哚和/或1-β-D-呋喃核糖基-3-硝基吡咯(参见例如美国专利申请公布号2007/0254362；VanAerschot等(1995)NUCLEIC ACIDS RES.23:4363-70；Loakes等(1995)NUCLEIC ACIDSRES.23:2361-66；以及Loakes和Brown(1994)NUCLEIC ACIDS RES.22:4039-43)。
E.可逆修饰：虽然可进行某些修饰以防止本文的寡核苷酸在到达靶细胞之前受到体内环境影响，但所述修饰还可降低寡核苷酸在其到达靶细胞的胞质液后的性能或活性。因此可进行可逆修饰，使得分子在细胞外保留所需特性，然后在进入细胞的胞质环境后将其移除。可逆修饰可例如通过胞内酶的作用或通过细胞内部的化学条件(例如通过由细胞内谷胱甘肽还原)移除。
在一些实施方案中，可逆修饰的核苷酸包含谷胱甘肽敏感部分。典型地，核酸分子用环状二硫化物部分化学修饰，以屏蔽由核苷酸间二磷酸键联形成的负电荷并且改善细胞摄取和核酸酶抗性。参见美国专利申请公布号2011/0294869、国际专利申请公布号WO2014/088920和WO 2015/188197以及Meade等(2014)NAT.BIOTECHNOL.32:1256-63。核苷酸间二磷酸键联的此可逆修饰被设计成通过胞质液的还原环境(例如谷胱甘肽)在细胞内裂解。早期实例包括中和磷酸三酯修饰，磷酸三酯修饰经报道将在细胞内部可裂解(参见例如Delling er等(2003)J.AM.CHEM.SOC.125:940-50)。
一些可逆修饰在体内施用期间(例如转运通过血液和/或细胞的溶酶体/内体区室)保护寡核苷酸，其中寡核苷酸将暴露于核酸酶和其他恶劣环境条件(例如pH值)。当释放至与细胞间隙相比其中谷胱甘肽的水平更高的细胞的胞质液中时，修饰发生逆转，并且结果为裂解的寡核苷酸。当与使用不可逆化学修饰可获得的选择相比时，使用可逆谷胱甘肽敏感部分有可能将空间上更大的化学基团引入寡核苷酸中。这是因为这些更大的化学基团在胞质液中将被移除，并且因此，不会妨碍寡核苷酸在细胞的胞质液内部的生物活性。因此，可对这些更大的化学基团进行工程化以赋予寡核苷酸各种优点，诸如核酸酶抗性、亲脂性、电荷、热稳定性、特异性以及降低的免疫原性。在一些情况下，可对谷胱甘肽敏感部分的结构进行工程化以改变其释放动力学。
在一些实施方案中，谷胱甘肽敏感部分连接至核苷酸的糖。在某些实施方案中，谷胱甘肽敏感部分连接至经过修饰的核苷酸的糖的2'-碳。另外或或者，特别地当经过修饰的核苷酸为寡核苷酸的5'端核苷酸时，谷胱甘肽敏感部分连接至糖的5'-碳。另外或或者，特别地当经过修饰的核苷酸为寡核苷酸的3'端核苷酸时，谷胱甘肽敏感部分连接至糖的3'-碳。在一些实施方案中，谷胱甘肽敏感部分包括磺酰基(参见例如国际专利申请公布号WO2018/039364)。
VI.靶向配体
需要使本文的寡核苷酸靶向一个或多个细胞或一个或多个器官。此类策略可帮助避免其他器官中不希望的效应或避免寡核苷酸不当地损失至将不因其受益的细胞、组织或器官中。因此，可对寡核苷酸进行修饰以有助于靶向和/或递送至组织、细胞或器官(例如有助于将寡核苷酸递送至肝脏)。在一些实施方案中，对寡核苷酸进行修饰以有助于寡核苷酸递送至肝脏的肝细胞。在某些实施方案中，寡核苷酸包含缀合至一个或多个靶向配体的至少一个核苷酸(例如1、2、3、4、5、6或更多个核苷酸)。
示例性靶向配体包括但不限于碳水化合物、氨基糖、胆固醇、肽、多肽、蛋白质或蛋白质的一部分(例如抗体或抗体片段)或脂质。在一些实施方案中，靶向配体为适体。举例来说，靶向配体为用于靶向肿瘤血管或神经胶质瘤细胞的RGD肽、用于靶向肿瘤血管或基质、转铁蛋白、乳铁蛋白的CREKA肽或用于靶向CNS脉管系统上所表达的转铁蛋白受体的适体或用于靶向神经胶质瘤细胞上的EGFR的抗EGFR抗体。在某些实施方案中，靶向配体为一个或多个GalNAc部分。
在一些实施方案中，寡核苷酸的1个或多(例如1、2、3、4、5或6)个核苷酸各自可缀合至单独的靶向配体。在一些实施方案中，寡核苷酸的2至4个核苷酸各自缀合至单独的靶向配体。在一些实施方案中，靶向配体可缀合至有义链或反义链任一末端的2至4个核苷酸(例如靶向配体缀合至有义链或反义链的5'或3'端的2至4核苷酸悬垂物或延伸物)，使得靶向配体类似牙刷的刷毛并且寡核苷酸类似于牙刷。举例来说，寡核苷酸在有义链的5'或3'端包含茎-环并且茎的环的1、2、3或4个核苷酸可个别地缀合至靶向配体。在一些实施方案中，寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)在有义链的3'端包含茎-环，其中茎-环的环包括三环或四环，并且其中三环或四环的3或4个核苷酸分别个别地缀合至靶向配体。
GalNAc为ASGPR的高亲和力配体，所述高亲和力配体主要在肝细胞的窦状表面表达并且在循环糖蛋白的结合、内化以及后续清除中具有主要作用，所述循环糖蛋白含有末端半乳糖或GalNAc残基(脱唾液酸糖蛋白)。利用GalNAc部分缀合(间接或直接)至本文的寡核苷酸来使其靶向细胞上所表达的ASGPR。在一些实施方案中，寡核苷酸缀合至至少一个或多个GalNAc部分，其中GalNAc部分使寡核苷酸靶向人肝脏细胞(例如人肝细胞)上所表达的ASGPR。
本文的寡核苷酸直接或间接缀合至单价GalNAc。在一些实施方案中，寡核苷酸直接或间接缀合至超过一个单价GalNAc(即，缀合至2、3或4个单价GalNAc部分，并且典型地缀合至3或4个单价GalNAc部分)。在一些实施方案中，寡核苷酸缀合至一个或多个二价GalNAc、三价GalNAc或四价GalNAc部分。
在一些实施方案中，本文的寡核苷酸的1个或多(例如1、2、3、4、5或6)个核苷酸各自可缀合至GalNAc部分。在一些实施方案中，四环的2至4个核苷酸各自缀合至单独的GalNAc。在其他实施方案中，三环之1至3个核苷酸各自缀合至单独的GalNAc。在一些实施方案中，靶向配体缀合至有义或反义链的任一末端的2至4个核苷酸(例如配体缀合至有义或反义链的5'或3'端的2至4核苷酸悬垂物或延伸物)，使得GalNAc部分类似于牙刷的刷毛并且寡核苷酸类似于牙刷。在一些实施方案中，GalNAc部分缀合至有义链的核苷酸。举例来说，4个GalNAc部分缀合至有义链的四环中的核苷酸，其中各GalNAc部分缀合至1个核苷酸。在某些实施方案中，3个GalNAc部分缀合至有义链的四环中的核苷酸，其中各GalNAc部分缀合至1个核苷酸。
在某些实施方案中，寡核苷酸包含连接至鸟苷酸的单价GalNAc，称为[ademG-GalNAc]或2'-氨基二乙氧基甲醇-鸟嘌呤-GalNAc，如以下所展示：
在某些实施方案中，本文的寡核苷酸包含连接至腺嘌呤核苷酸的单价GalNAc，称为[ademA-GalNAc]或2'-氨基二乙氧基甲醇-腺嘌呤-GalNAc，如以下所展示：
以下示出了用于从5'到3'具有核苷酸序列GAAA的环(L＝接头，X＝杂原子)的此类缀合的实例，其中示出了茎连接点。此类环存在于例如表3、表A、表B、表C或表D中所列以及如图1中所示的有义链的位置27-30。在化学式中，用于描述与寡核苷酸链的连接点：
使用适当方法或化学(例如点击化学)将靶向配体键联至核苷酸。一种使靶向配体缀合至核苷酸的方式是通过使用点击接头来进行。在一些实施方案中，使用基于缩醛的接头来使靶向配体缀合至本文的寡核苷酸中的任一者的核苷酸。例如国际专利申请公布号WO2016/100401中公开了基于缩醛的接头。在一些情况下，接头为不稳定接头。然而，在其他情况下，接头为稳定的。以下示出了关于从5'到3'具有核苷酸GAAA的环的实例，其中GalNAc部分使用缩醛接头连接至环的核苷酸。此类环存在于例如表3、表A、表B、表C或表D中所列的有义链中的任一者的位置27-30。在化学式中，为与寡核苷酸链的连接点：
在一些实施方案中，在靶向配体(例如GalNAc部分)与本文的寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)之间提供双链体延伸(例如长度为至多3、4、5或6bp)。在其他实施方案中，寡核苷酸不具有与其缀合的GalNAc。
制剂和药物组合物
本文的寡核苷酸合并至制剂或药物组合物中。已研发用于促进寡核苷酸用途的各种制剂。举例来说，可使用使降解最小化、有助于递送和/或摄入或为制剂中的寡核苷酸提供另一有益特性的制剂将寡核苷酸递送至受试者或细胞环境中。在一些实施方案中，在缓冲溶液(诸如磷酸盐缓冲盐水溶液)、脂质体、胶束结构以及衣壳中配制本文的寡核苷酸。
利用使用阳离子脂质的寡核苷酸制剂来促进寡核苷酸转染至细胞中。举例来说，可使用阳离子脂质(诸如lipofectin)、阳离子甘油衍生物以及聚阳离子分子(例如聚赖氨酸)。合适的脂质包括Oligofectamine、Lipofectamine(Life Technologies)、NC388(Ribozyme Pharmaceuticals，Inc.)或FuGene 6(Roche)，所述脂质全部根据制造商的说明书使用。
因此，在一些实施方案中，本文的制剂包含脂质体、脂质、脂质复合物、微球、微粒、纳米球或纳米粒子(诸如脂质纳米粒子)或可以其他方式被配制成用于向细胞、组织、器官或有需要的个体的身体施用(参见例如Remington，“The Science andPracticeofPharmacy”(L.V.Allen Jr.编，第22版，Pharmaceutical Press，2013)。
在一些实施方案中，本文的制剂还包含赋形剂，所述赋形剂可赋予组合物改善的稳定性、改善的吸收、改善的溶解度和/或活性成分的治疗增强。在一些实施方案中，赋形剂为缓冲剂(例如柠檬酸钠、磷酸钠、tris碱或氢氧化钠)或媒介物(例如缓冲溶液、矿脂、二甲亚砜或矿物油)。在一些实施方案中，将本文的寡核苷酸冻干以便延长保质期，然后在使用(例如向个体施用)前制成溶液。因此，包括寡核苷酸中的一者或多者的药物组合物中的赋形剂为冻干保护剂(例如甘露糖醇、乳糖、聚乙二醇或聚乙烯吡咯烷酮)或塌陷温度调节剂(例如右旋糖酐、FicollTM或明胶)。
将药物组合物配制成与其预期施用途径相容。施用途径包括但不限于肠胃外(例如静脉内、肌肉内、腹膜内、真皮内以及皮下)、经口(例如吸入)、经真皮(例如经表面)、经粘膜以及经直肠施用。
适合于可注射用途的药物组合物包含无菌水溶液(在水溶性情况下)或分散体和无菌粉末，用于临时制备无菌可注射溶液或分散体。对于静脉内施用，合适的载体包括但不限于生理盐水、抑细菌水、Cremophor ELTM(BASF)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。载体为含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等)以及它们的合适的混合物的溶剂或分散介质。在许多实施方案中，与等张剂(诸如糖、多元醇(诸如甘露糖醇、山梨糖醇)和/或氯化钠)一起包含在组合物中将为优选的。通过按需要将本文的寡核苷酸以所需量与上文列举的一种成分或成分组合一起合并至所选溶剂中，随后过滤灭菌来制备无菌可注射溶液。
此外，药物组合物包含至少约0.1％或更多的治疗剂(例如本文的寡核苷酸中的一者或多者)，不过治疗剂的百分比可介于占总组合物的重量或体积约1％至约80％之间或更多。熟习制备此类药物制剂的技术者将考虑诸如溶解度、生物利用度、生物半衰期、施用途径、产品保质期以及其他药理学考虑因素等因素，并且因而，可能需要多种剂量和治疗方案。
尽管若干实施例以本文的寡核苷酸中的至少一者的靶向肝脏的递送为目标，但也涵盖靶向其他组织。
药盒
可将本文的寡核苷酸合并至包含本文的寡核苷酸中的一者或多者以及使用说明书的药盒。在一些实施方案中，药盒包含寡核苷酸中的一者或多者以及含有药盒和/或其任何组分的使用说明书的包装插页。在其他实施方案中，药盒包含合适的容器、寡核苷酸中的一者或多者、一种或多种对照以及各种缓冲液、试剂、酶以及如本领域中已知的其他标准成分。
在一些实施方案中，容器可为至少一个小瓶、孔、试管、烧瓶、瓶、注射器或其他容器构件，一种或多种寡核苷酸被放入其中并且在一些情况下适当等分至其中。在其中提供另一组分的其他实施方案中，药盒含有将此组分放入其中的其他容器。药盒还包括用于严密封闭地容纳一种或多种寡核苷酸及任何其他试剂以便商业销售的构件。此类容器包括将所需小瓶保持在内部的注塑或吹塑塑料容器。容器和/或药盒包括具有使用说明书和/或警告的标签。
在一些实施方案中，药盒包含本文的一种或多种寡核苷酸以及药学上可接受的载体或包含寡核苷酸中的一者或多者的药物组合物以及关于治疗有需要的个体的与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患或延迟其进展的说明书。
方法
制备方法
使用本领域技术人员已知的方法和/或技术，诸如通过使用常规核酸固相合成来制备本文的寡核苷酸。在合适的核酸合成仪上使用标准核苷酸或核苷前体(例如亚磷酰胺)组装寡核苷酸的多核苷酸。包括DNA/RNA合成仪的自动化核酸合成仪可从例如AppliedBiosystems(Foster City，CA)、BioAutomation(Irving,TX)以及GE Healthcare LifeSciences(Pittsburgh，PA)商购获得。
如本领域技术人员所理解，使用合成本文的寡核苷酸的其他方法和/或技术。另外，以替代顺序或次序进行各种合成步骤以得到所需化合物。适用于合成寡核苷酸的其他合成化学转化、保护基(例如用于存在于碱基上的羟基、氨基等)以及保护基方法(保护和去保护)为本领域中已知的并且在例如Larock，“Comprehensive OrganicTransformations”，VCH Publishers(1989)；Greene和Wuts，PROTECTIVE GROUPS INORGANIC SYNTHESIS，第2版，John Wiley&Sons(1991)；Fieser和Fieser，FieserandFieser'sReagentsfor Organic Synthesis，John Wiley&Sons(1994)；以及Paquette编，ENCYCLOPEDIA OF REAGENTS FOR ORGANIC SYNTHESIS，John Wiley&Sons(1995)中有描述。
使用方法
I.降低细胞、组织、器官以及有机体中的PNPLA3表达的方法
使用本文的寡核苷酸减少细胞、组织、器官或个体中的PNPLA3mRNA。所述方法包括本文所描述的步骤，并且这些步骤可能但不一定以所描述的顺序进行。然而，其他顺序也是可想到的。此外，个别或多个步骤平行地和/或时间重迭地和/或个别地或以多次重复的步骤来进行。此外，所述方法包括其他未指定的步骤。
所述方法包括使细胞、细胞群体、组织、器官或个体与有效量的本文的寡核苷酸中的任一者(例如ds寡核苷酸)接触或向细胞、细胞群体、组织、器官或个体递送有效量的本文的寡核苷酸中的任一者(例如ds寡核苷酸)以便降低PNPLA3表达。在一些实施方案中，通过测量细胞中PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白或PNPLA3活性的量或水平降低来确定降低的PNPLA3表达。
关于适当的细胞类型，细胞类型为表达mRNA的任何细胞(例如肝细胞、巨噬细胞、单核细胞衍生的细胞、前列腺癌细胞、脑细胞、内分泌组织细胞、骨髓细胞、淋巴结细胞、肺细胞、胆囊细胞、肝脏细胞、十二指肠细胞、小肠细胞、胰腺细胞、肾脏细胞、胃肠道细胞、膀胱细胞、脂肪和软组织细胞以及皮肤细胞)。在一些实施方案中，细胞为从个体获得的原代细胞。在一些实施方案中，原代细胞已经历有限次数的传代，使得细胞基本上维持天然表型特性。在一些实施方案中，细胞为离体、体内或体外细胞(即，使得本文的寡核苷酸中的一者或多者可递送至培养物中的细胞或递送至细胞驻留其中的有机体)。
在一些实施方案中，使用本领域中已知的核酸递送方法将本文的寡核苷酸递送至细胞或细胞群体，包括但不限于注射含有寡核苷酸的溶液、用由寡核苷酸覆盖的粒子进行轰击、使细胞或细胞群体暴露于含有寡核苷酸的溶液或在存在寡核苷酸的情况下对细胞膜进行电穿孔。还使用本领域中已知用于将寡核苷酸递送至细胞的其他方法，诸如脂质介导的载体转运、化学介导的转运以及阳离子脂质体转染(诸如磷酸钙)以及其他方法。
通过评估细胞或细胞群体的与PNPLA3表达相关一个或多个分子、特性或特征的分析或技术(例如使用PNPLA3表达生物标记物)或通过评估直接指示细胞或细胞群体中的PNPLA3表达的分子(例如PNPLA3 mRNA或PNPLA3蛋白)的分析或技术来确定降低的PNPLA3表达。在一些实施方案中，通过将与寡核苷酸接触的细胞或细胞群体中的PNPLA3表达与对照细胞或细胞群体(例如未与寡核苷酸接触或与对照寡核苷酸接触的细胞或细胞群体)进行比较来评估寡核苷酸降低PNPLA3表达的程度。在一些实施方案中，预先确定对照细胞或细胞群体中的PNPLA3表达的对照量或水平，使得不需要在进行分析或技术的每种情况下均测量对照量或水平。预先确定的水平或值采用多种形式，包括但不限于单个截止值，诸如中值或平均值。
使本文的寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)接触细胞或细胞群体或将本文的寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)递送至细胞或细胞群体产生降低的PNPLA3表达。在一些实施方案中，降低的PNPLA3表达是相对于未与寡核苷酸接触或与对照寡核苷酸接触的细胞或细胞群体中的PNPLA3表达的对照量或水平。在一些实施方案中，降低的PNPLA3表达相对于PNPLA3表达的对照量或水平为约1％或更低、约5％或更低、约10％或更低、约15％或更低、约20％或更低、约25％或更低、约30％或更低、约35％或更低、约40％或更低、约45％或更低、约50％或更低、约55％或更低、约60％或更低、约70％或更低、约80％或更低或约90％或更低。在一些实施方案中，PNPLA3表达的对照量或水平为尚未与本文的寡核苷酸接触的细胞或细胞群体中的PNPLA3 mRNA和/或PNPLA3蛋白的量或水平。在一些实施方案中，在任何有限时间段或时间量(例如数分钟、数小时、数天、数周和/或数月)之后，对根据本文的方法将寡核苷酸递送至细胞或细胞群体的效应进行评估。举例来说，在至少约4小时、约8小时、约12小时、约18小时或约24小时时确定细胞或细胞群体中的PNPLA3表达。或者，在使寡核苷酸接触细胞或细胞群体或将寡核苷酸递送至细胞或细胞群体之后至少约1天、约2天、约3天、约4天、约5天、约6天、约7天、约8天、约9天、约10天、约11天、约12天、约13天、约14天、约21天、约28天、约35天、约42天、约49天、约56天、约63天、约70天、约77天或约84天或更久时确定细胞或细胞群体中的PNPLA3表达。在其他实施方案中，在使寡核苷酸接触细胞或细胞群体或将寡核苷酸递送至细胞或细胞群体之后至少约1个月、约2个月、约3个月、约4个月、约5个月或约6个月或更久时确定细胞或细胞群体中的PNPLA3表达。
在一些实施方案中，以转基因形式递送本文的寡核苷酸，对所述转基因进行工程化以使寡核苷酸或股链(例如有义和反义链)中的一者或多者在细胞中表达。举例来说，使用经过工程化以表达本文的任何寡核苷酸的转基因来递送寡核苷酸。转基因可使用病毒载体(例如腺病毒、逆转录病毒、痘苗病毒、痘病毒、腺相关病毒或单纯疱疹病毒)或非病毒载体(例如质粒或合成mRNA)递送。在一些实施方案中，将转基因直接注射至个体中。
II.治疗方法：
用于治疗患有、疑似患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患或处于发展与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的风险中的个体的方法包括施用本文的至少一种或多种寡核苷酸。另外，用于治疗或减慢个体中与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的发作或进展的方法包括使用本文的寡核苷酸中的一者或多者。此外，用于在患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的个体中实现一种或多种治疗益处的方法包括提供本文的寡核苷酸中的一者或多者。在一些实施方案中，可通过施用治疗有效量的以上所公开的实施方案中的任一者的寡核苷酸中的任何一者或多者来治疗个体。在一些实施方案中，治疗包括降低PNPLA3表达。在一些实施方案中，对个体进行治疗性治疗。在一些实施方案中，对个别进行预防性治疗。在所有这些实施方案，寡核苷酸选自表A、表B、表C或表D。
在一些实施方案中，向患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的个体施用一种或多种寡核苷酸或包含所述一种或多种寡核苷酸的药物组合物，使得个体中PNPLA3表达降低，从而治疗所述个体。在一些实施方案中，个体中PNPLA3 mRNA的量或水平降低。在其他实施方案中，个体中PNPLA3蛋白的量或水平降低。在其他实施方案中，个体中PNPLA3活性的量或水平降低。在其他实施方案中，个体中，尤其肝脏中，肝脏TG(例如肝脏中的一种或多种TG或总TG)的量或水平降低。在其他情况下，肝脏炎症的量或水平可降低。在其他情况下，肝脏纤维化的水平的量降低。在其他实施方案中，血浆AST、血浆ALT或甚至Pro-C3的量或水平降低。在上文所公开的实施方案中的任一者中，寡核苷酸包含具有SEQ ID NO:1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中的任一者的核苷酸序列的有义链，以及具有SEQ ID NO:1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中的任一者的核苷酸序列的反义链。
在一些实施方案中，当与施用一种或多种寡核苷酸或其药物组合物之前的PNPLA3表达相比时，个体中PNPLA3表达降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。在其他实施方案中，当与未接受一种或多种寡核苷酸或药物组合物或接受对照寡核苷酸、药物组合物或治疗的个体(例如参考或对照受试者)中的PNPLA3表达相比时，个体中PNPLA3表达降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。
在某些实施方案中，当与施用一种或多种寡核苷酸或其药物组合物之前的PNPLA3mRNA的量或水平相比时，个体中PNPLA3 mRNA的量或水平降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。在一些实施方案中，当与未施用一种或多种寡核苷酸或药物组合物或施用对照寡核苷酸、药物组合物或治疗的个体(例如参考或对照受试者)中的PNPLA3 mRNA的量或水平相比时，个体中PNPLA3 mRNA的量或水平降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。
在某些实施方案中，当与施用一种或多种寡核苷酸或其药物组合物之前的PNPLA3蛋白的量或水平相比时，个体中PNPLA3蛋白的量或水平降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。在其他实施方案中，当与未施用一种或多种寡核苷酸或药物组合物或施用对照寡核苷酸、药物组合物或治疗的个体(例如参考或对照受试者)中的PNPLA3蛋白的量或水平相比时，个体中PNPLA3蛋白的量或水平降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。
在某些实施方案中，当与施用一种或多种寡核苷酸或其药物组合物之前的PNPLA3活性的量或水平相比时，个体中PNPLA3活性的量或水平降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。在一些实施方案中，当与未施用一种或多种寡核苷酸或药物组合物或施用对照寡核苷酸、药物组合物或治疗的个体(例如参考或对照受试者)中的PNPLA3活性的量或水平相比时，个体中PNPLA3活性的量或水平降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。
在某些实施方案中，当与施用一种或多种寡核苷酸或其药物组合物之前的TG的量或水平相比时，个体中的TG，尤其肝脏TG的量或水平可降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。在一些实施方案中，当与未施用一种或多种寡核苷酸或药物组合物或施用对照寡核苷酸、药物组合物或治疗的个体(例如参考或对照受试者)中的TG的量或水平相比时，个体中TG的量或水平降低至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或大于99％。
在此，在细胞(例如肝细胞)、细胞群体或细胞群(例如类器官)、组织(例如肝组织)、样品(例如肝活组织检查样品)、器官(例如肝脏)、血液或其级分(例如血浆)或从个体获得或分离的任何其他生物材料中，PNPLA3表达、PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白、PNPLA3活性、肝脏TG的量或水平或它们的任何组合降低。在一些实施方案中，在从受试者获得或分离超过一种类型的细胞(例如肝细胞和一种或多种其他类型的细胞)、超过一个细胞群、超过一种类型的组织(例如肝组织和一种或多种其他类型的组织)、超过一种类型的样品(例如肝活组织检查样品和一种或多种其他类型的活组织检查样品)、超过一种器官(例如肝脏和一种或多种其他器官)、超过一种血液级分(例如血浆和一种或多种其他血液级分)中，PNPLA3表达、PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白、PNPLA3活性、TG的量或水平或它们的任何组合降低。
与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的实例包括但不限于AH、ALD、HCC、CCA、PSC、NAFLD、NASH、脂肪肝(脂肪变性)、肝脏炎症、肝脏纤维化、肝脏硬化或它们的组合。
由于本文的寡核苷酸的高特异性，它们特异性地靶向细胞、组织或器官(例如肝脏)的靶基因的mRNA。在预防疾病时，靶基因为起始或维持疾病所需的基因或已鉴定为与较高的感染疾病的风险相关的基因。在治疗疾病时，使寡核苷酸中的一者或多者与展现疾病或负责介导疾病的细胞、组织或器官接触。举例来说，使与野生型(即，天然)或突变的与同PNPLA3表达相关的病症或疾患相关的基因的全部或一部分基本上一致的寡核苷酸与相关细胞或组织类型(诸如肝细胞或其他肝脏细胞)接触或将所述寡核苷酸引入其中。
在一些实施方案中，靶基因来自任何哺乳动物，诸如人。根据本文的方法，任何基因均可为沉默的。此外，本文的方法典型地涉及向个体施用治疗有效量的本文的一种或多种寡核苷酸，治疗有效量为能够产生所需治疗结果的量。治疗可接受的量为治疗性治疗疾病或病症或疾患的量。用于任一个体的适当剂量将取决于某些因素，包括个体的体型、体表面积、年龄、要施用的组合物、组合物中的活性成分、施用时间和途径、总体健康情况以及并行施用的其他治疗剂。
在所述方法中，以肠内(例如经口、通过胃部喂食管、通过十二指肠喂食管、经由胃造口术或经直肠)、肠胃外(例如皮下注射、静脉注射或输注、动脉注射或输注、骨内输注、肌肉内注射、脑内注射、脑室内注射或鞘内)、经表面(例如经皮、吸入、经由滴眼剂或通过粘膜)或通过直接注射至靶器官(例如受试者的肝脏)中的方式为个体施用本文的寡核苷酸或组合物中的任一者。典型地，以静脉内或皮下方式施用寡核苷酸或组合物。
作为实例的非限制性集合，典型地每季(每三个月一次)、每两个月(每两个月一次)、每月或每周施用本文的寡核苷酸或组合物。举例来说，每周或以两周或三周的间隔施用寡核苷酸或组合物。在某些实施方案中，每天施用寡核苷酸或组合物。在一些实施方案中，为个体施用一种或多种加载剂量的寡核苷酸或组合物，随后施用一种或多种维持剂量的寡核苷酸或组合物。
在一些实施方案中，个体为人、非人灵长类动物或其他哺乳动物受试者。在其他实施方案中，个体为家养动物，诸如狗或猫；牲畜，诸如马、牛、猪、绵羊、山羊或鸡；以及诸如小鼠、大鼠、豚鼠或仓鼠等动物。
III.医学用途
本文的寡核苷酸可用于或适合用于治疗将受益于降低PNPLA3表达的个体(例如患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的人)。在一些实施方案中，提供寡核苷酸以便用于或适合用于治疗患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的个体。另外，提供寡核苷酸以便用于或适合于用于制造用于治疗与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的药剂或药物组合物。在其他实施方案中，提供寡核苷酸以便用于或适合于用于靶向PNPLA3 mRNA并且降低PNPLA3表达(例如经由RNAi路径)。在其他实施方案中，提供寡核苷酸以便用于或适合于用于靶向PNPLA3 mRNA并且降低PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白和/或PNPLA3活性的量或水平。
在一些实施方案中，所述方法包括基于个体具有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的标记物(例如生物标记物)(诸如但不限于PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白或它们的组合)或某人易患所述与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患来选择用于治疗的个体。同样地并且如下文详细描述，所述方法还包括其他步骤，诸如测量或获得PNPLA3表达的标记物(例如PNPLA3蛋白)的基线值，然后将此类所获得的值与一个或多个其他基线值或在为个体施用寡核苷酸中的一者或多者之后所获得的值进行比较以评估治疗的有效性。
实施例
出于说明而非限制的目的提供以下非限制性实施例。
寡核苷酸的合成
实施例1：制备ds RNAi寡核苷酸
寡核苷酸合成和纯化：使用本文所描述的方法化学合成实施例中的ds RNAi寡核苷酸。通常，使用如关于19-23聚体siRNA所描述的固相寡核苷酸合成法(参见例如Scaringe等(1990)NUCLEIC ACIDS RES.18:5433-41以及Usman等(1987)J.AM.CHEM.SOC.109:7845-45；还参见美国专利号5,804,683；5,831,071；5,998,203；6,008,400；6,111,086；6,117,657；6,353,098；6,362,323；6,437,117以及6,469,158)合成ds RNAi寡核苷酸。
根据标准方法(整合DNA技术)合成个别RNA股并且进行HPLC纯化。举例来说，使用固相亚磷酰胺化学合成RNA寡核苷酸，去保护并且使用标准技术(Damha和Olgivie(1993)METHODS MOL.BIOL.20:81-114；Wincott等(1995)NUCLEIC ACIDS RES.23:2677-84)在NAP-5柱(AmershamPharmacia Biotech；Piscataway，NJ)上去盐。使用离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)在Amersham Source15Q柱(1.0cm×25cm；AmershamPharmaciaBiotech)上使用15min逐步线性梯度对寡聚物进行纯化。梯度从90:10缓冲液A:B变化到52:48缓冲液A:B，其中缓冲液A为100mM Tris pH 8.5并且缓冲液B为100mM Tris pH 8.5，1MNaCl。在260nm下对样品进行监测并且收集对应于全长寡核苷酸物质的峰，汇集，在NAP-5柱上去盐，并且冻干。
通过在Beckman PACE 5000(Beckman Coulter，Inc.)上进行毛细管电泳(CE)来测定各寡聚物的纯度。CE毛细管具有100μm内径并且含有ssDNA 100R凝胶(Beckman-Coulter)。典型地，将约0.6nmol的寡核苷酸注入毛细管中，在444V/cm的电场中运行并且在260nm下通过UV吸光度来检测。变性Tris-硼酸盐-7M-尿素运行缓冲液购自Beckman-Coulter。获得如通过CE所评估至少90％纯的寡核糖核苷酸，用于下文所描述的实验。遵循制造商所建议的方案，通过在Voyager DETM生物光谱测定工作站(Applied Biosystems)上进行基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱分析来验证化合物身份。获得所有寡聚物的相对分子量，常常在预期分子量的0.2％内。
制备双链体：将ss RNA寡聚物再悬浮(例如以100μM浓度)于具有100mM乙酸钾、30mM HEPES，pH 7.5的双链体缓冲液中。将互补的有义和反义链以相等摩尔量混合以产生例如50μM双链体的最终溶液。将样品在RNA缓冲液(IDT)中加热至100℃持续5min并且在使用前使其冷却至室温。将ds RNA寡核苷酸储存在-20℃下。将ss RNA寡聚物冻干储存或储存在-80℃的不含核酸酶的水中。
体外功能
实施例2：RNAi寡核苷酸对体外PNPLA3表达的抑制
PNPLA3靶序列鉴定：为鉴定PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸抑制剂，使用基于计算机的算法通过计算机产生适合于分析通过RNAi路径进行的PNPLA3表达抑制的PNPLA3靶序列。所述算法提供RNAi寡核苷酸引导(反义)链序列，所述RNAi寡核苷酸引导链序列与人PNPLA3mRNA的合适的PNPLA3靶序列(例如SEQ ID NO:1)互补。通过所述算法鉴定的引导链序列中的一些还与猴PNPLA mRNA的对应PNPLA3靶序列互补。通过所述算法鉴定的反义(引导)链序列中的一些还与猴PNPLA3 mRNA的对应PNPLA3靶序列(例如SEQ ID NO:5)互补。由此产生384种ds RNAi寡核苷酸(格式化为DsiRNA寡核苷酸)，所述ds RNAi寡核苷酸各自具有独特的反义链，所述独特的反义链具有与通过所述算法鉴定的PNPLA3靶序列具互补性的区域。
体外基于细胞的分析：使用体外基于细胞的分析来确定表1中所列的384种DsiRNA中的每一者抑制PNPLA3表达的能力。另外，DsiRNA的过客链和引导链的核苷酸序列具有独特模式的经过修饰的核苷酸和硫代磷酸酯键联(参见例如图2)。简单来说，在多孔细胞培养板的单独孔中，将稳定表达PNPLA3的HuH-7人肝脏细胞用DsiRNA中的每一者(0.5nM)转染。将细胞在转染之后维持24小时，然后使用基于的qPCR分析确定来自经过转染的细胞的剩余PNPLA3 mRNA的水平。如分别通过HEX和FAM探针所测量，使用两种qPCR分析(3'分析和5'分析)来确定mRNA水平。
表2中示出了使用DsiRNA的基于HuH-7细胞的分析的结果。表2示出了使用384种DsiRNA的基于HuH-7细胞的分析的结果，所述384种DsiRNA具有与人和猴PNPLA3 mRNA互补的引导链(“双重共同”)。将当与阴性对照相比时使得细胞中剩余小于或等于30％PNPLA3mRNA的双重共同DsiRNA的转染视为候选PNPLA3表达抑制剂(在本文中称为“命中”)。
表2：HuH-7细胞中的双重共同DsiRNAPNPLA3基因敲低，0.5nM 24小时-5'分析和3'分析剩余mRNA％(相对于模拟对照针对HPRT1和SFRS9规范化).
这些结果表明，经过设计以靶向人PNPLA3 mRNA的DsiRNA抑制细胞中的PNPLA3表达(如通过DsiRNA转染的细胞中PNPLA3mRNA的量降低所确定)，并且包括DsiRNA命中的核苷酸序列可用于产生用于抑制PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸。另外，这些结果证实，多个PNPLA3靶序列适合于RNAi介导的对PNPLA3表达的抑制。
体内功能
实施例3：RNAi寡核苷酸对体内PNPLA3表达的抑制
在实施例2中所描述的基于HuH-7细胞的分析中筛选的384种DsiRNA中，选择192种DsiRNA命中的核苷酸序列(表3)在体内进一步评估。简单来说，使用所选DsiRNA的核苷酸序列来产生194种对应ds RNAi寡核苷酸，所述对应ds RNAi寡核苷酸包括具有36聚体有义(过客)链和22聚体反义(引导)链的缺口四环GalNAc缀合结构(在本文中称为“GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸”)。另外，GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸的过客链和引导链的核苷酸序列具有独特模式的经过修饰的核苷酸和硫代磷酸酯键联(GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸的通用结构和化学修饰模式的示意图参见例如图1)。四环的三个腺苷核苷酸各自缀合至GalNAc部分(CAS#：14131-60-3)。
表3：GalXC-PNPLA3：192种GalXC化合物的体外筛选.
小鼠研究：在流体动力学注射(HDI)小鼠模型中评估各种GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸，其中一些列于表3中。其他HDI研究列于表4、表5以及表6中。在这些HDI研究中，对小鼠进行工程化以在肝细胞中瞬时表达人PNPLA3 mRNA。使用GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸对照(SEQ ID NO:1165和1166)作为基准对照。简单来说，以1mg/kg的剂量水平用GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸对6-8周龄雌性CD-1小鼠进行SQ处理。三天后(72小时)，为小鼠流体动力学注射在普遍存在的巨细胞病毒(CMV)启动子序列控制下编码完全人PNPLA3基因的DNA质粒。引入质粒之后一天，收集肝脏样品。相对于仅用相同体积的PBS处理的小鼠，针对PNPLA3mRNA对从这些小鼠得到的总RNA进行qRT-PCR分析。针对转染效率使用质粒上所包括的NeoR基因将所述值规范化。
如表4、表5以及表6中所示，如通过相对于用PBS处理的小鼠来自寡核苷酸处理的小鼠的肝脏样品中PNPLA3 mRNA的量降低所确定，所测试的许多GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸抑制PNPLA3表达。相对于用PBS处理的小鼠，用GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸基准对照处理的小鼠的肝脏样品中的平均剩余PNPLA3mRNA％。表4表明，与用作对照的参考GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸相比，21种GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸中的18种在更大程度上抑制PNPLA3表达。这些寡核苷酸的序列以及修饰模式和SEQ ID NO.公开于表A中。
表4：公开了单个0.5mg/kg GalXC-PNPLA3皮下剂量，第3天HDI，第4天取下，肝脏qPCR
表5和表6示出了使用18种GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸的HDI研究的2种其他集合(各集合中使用相同参考寡核苷酸)。这些寡核苷酸的序列以及修饰模式和SEQ ID NO.分别公开于表B和表C中。
根据这些结果，选择10种GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸来进行其抑制非人灵长类动物(NHP)中的PNPLA3表达的能力的评估。GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸具有如图1中所示模式的经过化学修饰的核苷酸。
表5：公开了单个1mg/kg皮下剂量，给药后3天HDI，给药后4天收获
表6：公开了单个1mg/kg皮下剂量，给药后3天HDI，给药后4天收获
表7公开了使用基于自如表4、表5以及6中所公开的先前研究以及先前3次HDI筛选获得的结果的最佳GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸(命中)的另一HDI研究。此HDI筛选中所用的寡核苷酸的序列以及修饰模式和SEQ ID NO.公开于表D中。
表7：来自使用单个1mg/kg皮下剂量，给药后3天HDI，给药后4天收获的早期研究以及3次HDI筛选的命中的比较.
NHP研究：在食蟹猴(食蟹猕猴(Macacafascicularis))中对选自表7的10种GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸进行评估。在此，对NHP进行分组，使得在对照与实验组之间其平均体重(约5.4kg)类似。各队列含有两个雄性和三个雌性受试者。在研究第0天SQ施用GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸。在研究第-8天、第-5天以及第0天以及给药之后每周收集血液样品。在研究第-7天、第28天以及第56天收集超声波引导空芯针肝脏活组织切片。在每个时间点，对从肝活组织检查样品得到的总RNA进行qRT-PCR分析以测量相对于用类似体积的PBS处理的猴寡核苷酸处理的猴中的PNPLA3 mRNA。为将数据规范化，相对于两个参考组(PPIB和18S rRNA)的几何平均值进行测量。如表8(第-7天)、表9(第28天)以及表10(第56天)中所示，如通过相对于用PBS处理的NHP来自寡核苷酸处理的NHP的肝脏样品中PNPLA3 mRNA的量降低所确定，用GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸处理NHP抑制肝脏中的PNPLA3表达。在所评估的所有时间点，与基准PBS和时间匹配的对照相比，PNPLA3寡核苷酸34、81以及121均在更大程度上抑制PNPLA3表达。由相同NHP研究，还通过根据ELISA测量从给药前和每周血液样品制备的血清中的PNPLA3蛋白来确定PNPLA3表达的抑制。总的来说，这些结果证实，用GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸处理NHP使肝脏中PNPLA3mRNA的量降低并且伴随地使血清中PNPLA3蛋白的量降低。
表8：在第-7天NHP中所选GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸的PNPLA3 mRNA基因敲低.
表9：在第28天NHP中所选GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸的PNPLA3 mRNA基因敲低.
表10：在第56天NHP中所选GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸的PNPLA3 mRNA基因敲低.
总的来说，这些结果表明，经过设计以靶向人PNPLA3 mRNA的GalNAc缀合的PNPLA3寡核苷酸抑制体内PNPLA3表达(如通过所处理动物中的PNPLA3 mRNA和PNPLA3蛋白的量降低所确定)。
序列
本公开中提到了以下核酸序列和/或氨基氨基酸序列并且提供如下用于参考。
SEQ ID NO:1–野生型人PNPLA3(2753bp；NCBI参考序列号NM_025225.3)
agagagcgcttgcgggcgccgggcggagctgctgcggatcaggacccgagccgattcccgatcccgacccagatcctaacccgcgcccccgccccgccgccgccgccatgtacgacgcagagcgcggctggagcttgtccttcgcgggctgcggcttcctgggcttctaccacgtcggggcgacccgctgcctgagcgagcacgccccgcacctcctccgcgacgcgcgcatgttgttcggcgcttcggccggggcgttgcactgcgtcggcgtcctctccggtatcccgctggagcagactctgcaggtcctctcagatcttgtgcggaaggccaggagtcggaacattggcatcttccatccatccttcaacttaagcaagttcctccgacagggtctctgcaaatgcctcccggccaatgtccaccagctcatctccggcaaaataggcatctctcttaccagagtgtctgatggggaaaacgttctggtgtctgactttcggtccaaagacgaagtcgtggatgccttggtatgttcctgcttcatccccttctacagtggccttatccctccttccttcagaggcgtgcgatatgtggatggaggagtgagtgacaacgtacccttcattgatgccaaaacaaccatcaccgtgtcccccttctatggggagtacgacatctgccctaaagtcaagtccacgaactttcttcatgtggacatcaccaagctcagtctacgcctctgcacagggaacctctaccttctctcgagagcttttgtccccccggatctcaaggtgctgggagagatatgccttcgaggatattt ggatgcattcaggttcttggaagagaagggcatctgcaacaggccccagccaggcctgaagtcatcctcagaagggatggatcctgaggtcgccatgcccagctgggcaaacatgagtctggattcttccccggagtcggctgccttggctgtgaggctggagggagatgagctgctagaccacctgcgtctcagcatcctgccctgggatgagagcatcctggacaccctctcgcccaggctcgctacagcactgagtgaagaaatgaaagacaaaggtggatacatgagcaagatttgcaacttgctacccattaggataatgtcttatgtaatgctgccctgtaccctgcctgtggaatctgccattgcgattgtccagagactggtgacatggcttccagatatgcccgacgatgtcctgtggttgcagtgggtgacctcacaggtgttcactcgagtgctgatgtgtctgctccccgcctccaggtcccaaatgccagtgagcagccaacaggcctccccatgcacacctgagcaggactggccctgctggactccctgctcccccaagggctgtccagcagagaccaaagcagaggccaccccgcggtccatcctcaggtccagcctgaacttcttcttgggcaataaagtacctgctggtgctgaggggctctccacctttcccagtttttcactagagaagagtctgtgagtcacttgaggaggcgagtctagcagattctttcagaggtgctaaagtttcccatctttgtgcagctacctccgcattgctgtgtagtgacccctgcctgtgacgtggaggatcccagcctctgagctgagttggttttatgaaaagctaggaagcaacctttcgcctgtgcagcggtccagcacttaactctaatacatcagcatgcgttaattcagctggttgggaaatgacaccaggaagcccagtgcagagggtcccttactgactgtttcgtggccctattaatggtcagactgttccagcatgaggttcttagaatgacaggtgtttggatgggtgggggccttgtgatggggggtaggctggcccatgtgtgatcttgtggggtggagggaagagaatagcatgatcccacttccccatgctgtgggaaggggtgcagttcgtccccaagaacgacactgcctgtcaggtggtctgcaaagatgataaccttgactactaaaaacgtctccatggcgggggtaacaagatgataatctacttaattttagaacacctttttcacctaactaaaataatgtttaaagagttttgtataaaaatgtaaggaagcgttgttacctgttgaattttgtattatgtgaatcagtgagatgttagtagaataagccttaaaaaaaaaaaaatcggttgggtgcagtggcacacggctgtaatcccagcactttgggaggccaaggttggcagatcacctgaggtcaggagttcaagaccagtctggccaacatagcaaaaccctgtctctactaaaaatacaaaaattatctgggcatggtggtgcatgcctgtaatcccagctattcggaaggctgaggcaggagaatcacttgaacccaggaggcggaggttgcggtgagctgagattgcaccatttcattccagcctgggcaacatgagtgaaagtctgactcaaaaaaaaaaaatttaaaaaacaaaataatctagtgtgcagggcattcacctcagccccccaggcaggagccaagcacagcaggagcttccgcctcctctccactggagcacacaacttgaacctggcttattttctgcagggaccagccccacatggtcagtgagtttctccccatgtgtggcgatgagagagtgtagaaataaagacacaagacaaagaga
SEQ ID NO:2–野生型人PNPLA3(481aa；NCBI参考序列号NP_079501.2)
MYDAERGWSLSFAGCGFLGFYHVGATRCLSEHAPHLLRDARMLFGASAGALHCVGVLSGIPLEQTLQVLSDLVRKARSRNIGIFHPSFNLSKFLRQGLCKCLPANVHQLISGKIGISLTRVSDGENVLVSDFRSKDEVVDALVCSCFIPFYSGLIPPSFRGVRYVDGGVSDNVPFIDAKTTITVSPFYGEYDICPKVKSTNFLHVDITKLSLRLCTGNLYLLSRAFVPPDLKVLGEICLRGYLDAFRFLEEKGICNRPQPGLKSSSEGMDPEVAMPSWANMSLDSSPESAALAVRLEGDELLDHLRLSILPWDESILDTLSPRLATALSEEMKDKGGYMSKICNLLPIRIMSYVMLPCTLPVESAIAIVQRLVTWLPDMPDDVLWLQWVTSQVFTRVLMCLLPASRSQMPVSSQQASPCTPEQDWPCWTPCSPKGCPAETKAEATPRSILRSSLNFFLGNKVPAGAEGLSTFPSFSLEKSL
SEQ ID NO:3–人PNPLA3 I148M(变体)mRNA
agagagcgcttgcgggcgccgggcggagctgctgcggatcaggacccgagccgattcccgatcccgacccagatcctaacccgcgcccccgccccgccgccgccgccatgtacgacgcagagcgcggctggagcttgtccttcgcgggctgcggcttcctgggcttctaccacgtcggggcgacccgctgcctgagcgagcacgccccgcacctcctccgcgacgcgcgcatgttgttcggcgcttcggccggggcgttgcactgcgtcggcgtcctctccggtatcccgctggagcagactctgcaggtcctctcagatcttgtgcggaaggccaggagtcggaacattggcatcttccatccatccttcaacttaagcaagttcctccgacagggtctctgcaaatgcctcccggccaatgtccaccagctcatctccggcaaaataggcatctctcttaccagagtgtctgatggggaaaacgttctggtgtctgactttcggtccaaagacgaagtcgtggatgccttggtatgttcctgcttcatgcccttctacagtggccttatccctccttccttcagaggcgtgcgatatgtggatggaggagtgagtgacaacgtacccttcattgatgccaaaacaaccatcaccgtgtcccccttctatggggagtacgacatctgccctaaagtcaagtccacgaactttcttcatgtggacatcaccaagctcagtctacgcctctgcacagggaacctctaccttctctcgagagcttttgtccccccggatctcaaggtgctgggagagatatgccttcgaggatatttggatgcattcaggttcttggaagagaagggcatctgcaacaggccccagccaggcctgaagtcatcctcagaagggatggatcctgaggtcgccatgcccagctgggcaaacatgagtctggattcttccccggagtcggctgccttggctgtgaggctggagggagatgagctgctagaccacctgcgtctcagcatcctgccctg ggatgagagcatcctggacaccctctcgcccaggctcgctacagcactgagtgaagaaatgaaagacaaaggtggatacatgagcaagatttgcaacttgctacccattaggataatgtcttatgtaatgctgccctgtaccctgcctgtggaatctgccattgcgattgtccagagactggtgacatggcttccagatatgcccgacgatgtcctgtggttgcagtgggtgacctcacaggtgttcactcgagtgctgatgtgtctgctccccgcctccaggtcccaaatgccagtgagcagccaacaggcctccccatgcacacctgagcaggactggccctgctggactccctgctcccccaagggctgtccagcagagaccaaagcagaggccaccccgcggtccatcctcaggtccagcctgaacttcttcttgggcaataaagtacctgctggtgctgaggggctctccacctttcccagtttttcactagagaagagtctgtgagtcacttgaggaggcgagtctagcagattctttcagaggtgctaaagtttcccatctttgtgcagctacctccgcattgctgtgtagtgacccctgcctgtgacgtggaggatcccagcctctgagctgagttggttttatgaaaagctaggaagcaacctttcgcctgtgcagcggtccagcacttaactctaatacatcagcatgcgttaattcagctggttgggaaatgacaccaggaagcccagtgcagagggtcccttactgactgtttcgtggccctattaatggtcagactgttccagcatgaggttcttagaatgacaggtgtttggatgggtgggggccttgtgatggggggtaggctggcccatgtgtgatcttgtggggtggagggaagagaatagcatgatcccacttccccatgctgtgggaaggggtgcagttcgtccccaagaacgacactgcctgtcaggtggtctgcaaagatgataaccttgactactaaaaacgtctccatggcgggggtaacaagatgataatctacttaattttagaacacctttttcacctaactaaaataatgtttaaagagttttgtataaaaatgtaaggaagcgttgttacctgttgaattttgtattatgtgaatcagtgagatgttagtagaataagccttaaaaaaaaaaaaatcggttgggtgcagtggcacacggctgtaatcccagcactttgggaggccaaggttggcagatcacctgaggtcaggagttcaagaccagtctggccaacatagcaaaaccctgtctctactaaaaatacaaaaattatctgggcatggtggtgcatgcctgtaatcccagctattcggaaggctgaggcaggagaatcacttgaacccaggaggcggaggttgcggtgagctgagattgcaccatttcattccagcctgggcaacatgagtgaaagtctgactcaaaaaaaaaaaatttaaaaaacaaaataatctagtgtgcagggcattcacctcagccccccaggcaggagccaagcacagcaggagcttccgcctcctctccactggagcacacaacttgaacctggcttattttctgcagggaccagccccacatggtcagtgagtttctccccatgtgtggcgatgagagagtgtagaaataaagacacaagacaaagaga
SEQ ID NO:4–人PNPLA3 I148M(变体)
MYDAERGWSLSFAGCGFLGFYHVGATRCLSEHAPHLLRDARMLFGASAGALHCVGVLSGIPLEQTLQVLSDLVRKARSRNIGIFHPSFNLSKFLRQGLCKCLPANVHQLISGKIGISLTRVSDGENVLVSDFR SKDEVVDALVCSCFMPFYSGLIPPSFRGVRYVDGGVSDNVPFIDAKTTITVSPFYGEYDICPKVKSTNFLHVDITKLSLRLCTGNLYLLSRAFVPPDLKVLGEICLRGYLDAFRFLEEKGICNRPQPGLKSSSEGMDPEVAMPSWANMSLDSSPESAALAVRLEGDELLDHLRLSILPWDESILDTLSPRLATALSEEMKDKGGYMSKICNLLPIRIMSYVMLPCTLPVESAIAIVQRLVTWLPDMPDDVLWLQWVTSQVFTRVLMCLLPASRSQMPVSSQQASPCTPEQDWPCWTPCSPKGCPAETKAEATPRSILRSSLNFFLGNKVPAGAEGLSTFPSFSLEKSL
SEQ ID NO:5–灵长类动物PNPLA3(2291bp；NCBI参考序列号XM_015457081.1)
cgagggaggcggggcggacgtcgcgcgtggaaagcccgggcggagacgcggcggctgggtcacgagcgcttgcgggcgcccggcggagctgctgcggatcaggacccgagccgatccccgatcccgactccgatccggatccgcgcccccgcccccgccccgccatgtacgacgccgagcgcggctggagcttgtccttcgcgggctgcggcttcctgggcttctaccacgtcggggcgacccggtgcctgagcgagcacgccccgcacctcctccgcgacgcgcgcatgttgttcggcgcctcggccggggcgttgcactgcgtcggcgtcctctccgggatcccgctggagcagactctgcaggtcctctcagatcttgtccggaaggccaggagtcggaacattggtatcttccatccatccttcaacataggcaagttcctccgacaggatctctacaaatacctcccggccaatgtccaccagctcatctctggcaaaatatgcgtctcactcaccagagtgtctgatggggaaaacgttctggtgtctgactttcagtccaaagacgaagtcgtggatgccttgatttgttcctgcttcatccctttctacagtggccttatccctccttccttcagaggcgtgcgatatgtggatggaggagcgagtgacaacgtacccttcattgatgccaagacaaccatcaccgtgtcgcccttctatggggagtacgacatctgccctaaagtcaagtccaccaactttcttcatgtggacatcaccaagctcagcctacgcctctgcacagggaacctctaccttctctcaagagcgtttgtccccccggatctcaaggtgctgggagagatatgccttcgaggatatttggacgcgttcaggttcttggaagagaagggcatctgcaacaagccccagcggggtctgaagtcatcctcagaagggatggattctgaggtcactgcgcccggctgggaaaacacaagtctggattcttccccggagccggctgccttggctatgaggctggatggagatgagctgctagaccacctgcgtctcagcatcctgccctgggatgagagcatcctggacaccctgtcgcccgagctcgctacagtgagtgaagcaatgaaagacaaaggtggatacatgagcaagatttgcaacttgctacccattaggataatatcttatgtgatgctgccctgtaccctgcctgtggagtctgccattgcgattgtccagagactggtgacatggcttccagatatgcccgacgatgtgcagtgg ctgcagtgggtgacctcacaggtcttcactcgagcgctgatgtgtctgcttcccgcctccaggtcccaaatgccagtgagcagcgaacaggcctccccatgcaaaccggagcaggactggcactgctggactccctgctcccccgaggactgtcctgcagaggccaaagcagaggctaccccacggtccatcctcaggtccagcctgaacttcttctggggcaataaagtacctgctggtgctgaggggctctccacctttcccagtttttcactggagaagaatttgtgagtcatttgaggaggcgagtctaggagattctttcagaggtgctaaagcttcccatctttgtgcagctacctccgcattgccgtgtagtgacccctgcctgtgacgtggaggatcccagcctctgagctgagttggttttatgaaaagctaggaagcaatgtttggtctgtgcagcagtccagcacttaagtctaatacgtcagcatgcgttagttcagctggttgggaaatgacaccgggaagcctagcgcagagggtcccttactgactatttcatggtcctattaatggtcagactgttccagtgtgaggttcttagaatgactagtgtttggatgggtgggggccttgtggtggggggtgggctggcctatgtgtgatcttgtggggtggaaggaagagagtagcacaatcccacctccccatgccgtgggaaggggtgcacttggttcccaagaaggacactgcctgtcaggtggcctgcaaatataataaccttgacaactaaaaacctctccatgggggtgggaggtaccaagataataaccgatttacattttagagcacctttttcacctaactaaaataatgtttaaagagttttatataaaaatgtaaggaagagttgttatctgttgaattttgtattatatgaatcagtgagatgttaatagaataagcctt
SEQ ID NO:6–灵长类动物PNPLA3(480aa；NCBI参考序列号XP_015312567.1)
MYDAERGWSLSFAGCGFLGFYHVGATRCLSEHAPHLLRDARMLFGASAGALHCVGVLSGIPLEQTLQVLSDLVRKARSRNIGIFHPSFNIGKFLRQDLYKYLPANVHQLISGKICVSLTRVSDGENVLVSDFQSKDEVVDALICSCFIPFYSGLIPPSFRGVRYVDGGASDNVPFIDAKTTITVSPFYGEYDICPKVKSTNFLHVDITKLSLRLCTGNLYLLSRAFVPPDLKVLGEICLRGYLDAFRFLEEKGICNKPQRGLKSSSEGMDSEVTAPGWENTSLDSSPEPAALAMRLDGDELLDHLRLSILPWDESILDTLSPELATVSEAMKDKGGYMSKICNLLPIRIISYVMLPCTLPVESAIAIVQRLVTWLPDMPDDVQWLQWVTSQVFTRALMCLLPASRSQMPVSSEQASPCKPEQDWHCWTPCSPEDCPAEAKAEATPRSILRSSLNFFWGNKVPAGAEGLSTFPSFSLEKNL
SEQ ID NO:7–小鼠PNPLA3(4675bp；NCBI参考序列号XM_006520346.5)
cacccgaagacagcttaggcggctgcggctctttaagctcagagcagcaacaccgggagcagagctgaactgcagcgccgcccggagcttcaagcaccatgtatgacccagagcgccgctggagcctgtcgtttgcaggctgcggcttcctgggcttctaccacgtcggggctacgctatgtctgagcgagcgcgccccgcacctcctccgcgatgcgcgcactttctttggctgctcggccggtgcactgcacgcggtcaccttcgtgtgcagtctccctctcggtgcgtccacggccactacccaggccccgcgtgcggggaggggttgctacacctggggaatcggtaacactttccggggtgcccgaagaaacctgtccggagagctctcatccttcccggtgccgttgagcactcagctggagaccctgggcctgtcacctggcgtgggatttcccggggccggctggagcagacgcgctccgagcatcttcttcctgacccgctctggcgccctggtcctgtcagctgggtcatccctgagcagcagggaacgacgcaggtttgccgggtcctctggtccctgagccgcagaaggccgtataatggagatcctcatggacctcgtgcggaaagccaggagccgcaacatcggcaccctccacccgttcttcaacattaacaagtgcatcagagacgggctccaggagagcctcccagacaatgtccaccaggtcatttctggcaaggttcacatctcactcaccagggtgtcggatggggagaacgtgctggtgtctgagttccattccaaagacgaagtcgtggatgccctggtgtgttcctgcttcattcccctcttctctggcctaatccctccttccttccgaggcgagcggtacgtggacggaggagtgagcgacaacgtccctgtgctggatgccaaaaccaccatcacggtgtcacctttctacggtgagcatgacatctgccccaaagtcaagtccaccaacttcttccacgtgaatatcaccaacctcagcctccgcctctgcactgggaacctccaacttctgaccagagcgctcttcccgtctgatgtgaaggtgatgggagagctgtgctatcaagggtacctggacgccttccggttcctggaggagaatggcatctgtaacgggccacagcgcagcctgagtctgtccttggtggcgccagaagcctgcttggaaaatggcaaacttgtgggagacaaggtgccagtcagcctatgctttacagatgagaacatctgggagacactgtcccccgagctcagcacagctctgagtgaagcgattaaggacagggagggctacctgagcaaagtctgcaacctcctgcccgtcaggatcctgtcctacatcatgctgccctgcagtctgcccgtggagtcggctatcgctgcagtccacaggctggtgacatggctccctgatatccaggatgatatccagtggctacaatgggcgacatcccaggtttgtgcccgaatgacgatgtgcctgctcccctctaccagcatgagattcctgggacaatcccaattccttggcctccattgtatcaaagggctgaaaaccaaagggaaggcacagctgtctcttcagcatgcctcttctgccagaaccactgcaaggtttggtgctcaggctgtgcaaacattctagcaatgtttgactcagtgtcaagcaggtgacaaggaacatggtgctgtgtggggggaacccatggcccaggtgagggcttattggtgggtgaagctgtgggtgttcaggtggtggagaaggccttaagggatgggactgacacctcagcactgaaggcaggaggaagctgtggctctgggttgcacccctgcctggctccaccctctctggcatctgtagaagttaca
gctggttcttcctctcagccccatgctcccagaaataagactcagacccaaattatagttacaaataccttg
gccatatagctaggctcttctcagactagctcataacttaactcattaattttaacctccatcctgccacatgg
ctggtggcctgtgctcaggtaccatgagtccagctcttcacatctttccggatgaatcttccataattctttct
gcctcctggatgttccaccttctattccaccttttcctataggccatggttttgtttttgttttttttttccaaatttaa
tttaattaattaatttatttatttttggtttttcgagacagggtttctctgtatcgccctggctgtcctggaactcac
tatgtaagccaggctggcctcaaactcagaaatccgcctgcctctgcctcctgagtgctgggattaaagg
cgtgcgcaaccatgcccggtgtggtttttttttttttttaattgacaggtggatgcatctatataatccataacat
attctctctacaggtatctattaggttttgggtgaggtgtggagttctagggaactctgagagaaattcctgg
ggagtaagtggtttatcaagttgattggaggagtttttaatgctatggacagacagacagaaggacaaca
gcatagtcggggctaccagggagttcaggccccggcatcggagatagaagcaggatggggtctttgaa
gagattctgagcccacacagcagaggagggactctctctttagagcttttgaggatgagggaggttgact
gcaagagcctacagccaggctcgaggcaggcagggggtggggagcaggatgtaaaccccttcgatg
ctgacagactcacttctggggtaaaatattatgagatgcctgtcagtgtctgtgaagagacctgagcagag
tctggattctgacatcaatcatgttcttacaatactgaagacctgagagcctgcaatcttggtttgtaaattgc
tggtctccgtgcttccagtgaacttggacattcttctcatggttggtccaggagaggccaaagctgagggc
accctgccttccacccccagtccagcttgaccttttatctggagcaacagtgtctagatgatgggtgggtg
aggggtgctatactgtctgtccctctgggaagggttctgttacttttggaggcagctaggaagtttctctgtg
cagctgccccctggtgctgtgtggtgacctcattgcctgtgaccccaggatcacaggatctgggctaaag
tggtagtccatagaaaccaaagacaatgatttggtgtttagaaagctactcttggtctgggtgaagtctggt
gcttaagggctatcacaaagagcgtgtcaaaccatctctcagcctgtgagtcagtggggagcccaaggg
catcagtgtttggaaactggaatccaaaccgggcaatctcggaaggaaactgtttaggaattgtgatggg
acgggccgtggctgtctctgaaaagggcctgccagataacttattacttttaaggacacctttggctcttac
taatttataaagcattttatataaacacaccagggagtgcatggtgaactacacgtatgatcagttaagtgg
ggctagaattaggtagggagagcatcggacctctgcctcctcaacctcaacttgcttgctttctccactgg
ctccaaatctttgtatagtcatcagccatgaccacctctctccctccccatctactaccagcagcgttaatgg
gaataagtacccacttctctcaggtgtactatacagctgtgggtgtggtgtgtgtttcctgtaattcacacttt
agaaaggaaacaagcaaacaaaagaaaccaggtgctgcccatactcctaagtgtagacagtgaaggtg
tgtgtctcccatgcctgagtctcctggaggcctagtgagctccaggttcatgcaagcacatcaggaggaa
tcatataatctcagcacggttgatccagatgggataagaaaggactctgggagagagaatgtggttctag
agacaaagtgtctaggctacacagaagataagactgtcccaaggaaagaaaagaaaccaggaactag
ggtgcagctcagttgtcagaggacttctctaggcttgaagcccagagtccaatctcagcaccttataaact
gtggagtgacaggcagtgacatcggcctgtaatcccaacactcaagcagtagaggcaagaggatcata
agttcaaggtcttccttggctatttagggagttggaggttagctctggctacatgagaccctgtctcaaaaa
aaaaaaaaaaaaaaagtagaaacttctgccttgctttgagctgcccctttctggacgtttctcatcagtaga
gaatattcctgccaccctatcagacaaaactcccactggtttggagtctctccattctcaggaacacctcag
gagtcagacagtgagcagcagggagcaatgtcttgacttgtaagccccttagcaaggctggttcatttgtt
tattaaaagcaggtgtgggtgaatttatgcaaatgagtatgcaaactagtggaacagcagaaggattgaat
ggatacaccaaaaataaccacaactgtttaagggaaaagggtccataataaatgtggggaacaaaaaac
aaataaatgtgatttttttta
SEQ ID NO:8–小鼠PNPLA3(367aa；NCBI参考序列号XP_006520409.1)
MEILMDLVRKARSRNIGTLHPFFNINKCIRDGLQESLPDNVHQVISGKVHISLTRVSDGENVLVSEFHSKDEVVDALVCSCFIPLFSGLIPPSFRGERYVDGGVSDNVPVLDAKTTITVSPFYGEHDICPKVKSTNFFHVNITNLSLRLCTGNLQLLTRALFPSDVKVMGELCYQGYLDAFRFLEENGICNGPQRSLSLSLVAPEACLENGKLVGDKVPVSLCFTDENIWETLSPELSTALSEAIKDREGYLSKVCNLLPVRILSYIMLPCSLPVESAIAAVHRLVTWLPDIQDDIQWLQWATSQVCARMTMCLLPSTSMRFLGQSQFLGLHCIKGLKTKGKAQLSLQHASSARTTARFGAQAVQTF
SEQ ID NO:9–DsiRNA 1过客(有义)链
UCUGCAGGUCCUCUCAGAUCUUGUG
SEQ ID NO:10–DsiRNA 1引导(反义)链
CACAAGAUCUGAGAGGACCUGCAGAGU
SEQ ID NO:11–DsiRNA 2过客(有义)链
AGGUCCUCUCAGAUCUUGUGCGGAA
SEQ ID NO:12–DsiRNA 2引导(反义)链
UUCCGCACAAGAUCUGAGAGGACCUGC
SEQ ID NO:13–DsiRNA 3过客(有义)链
AUUGGCAUCUUCCAUCCAUCCUUCA
SEQ ID NO:14–DsiRNA 3引导(反义)链
UGAAGGAUGGAUGGAAGAUGCCAAUGU
SEQ ID NO:15–DsiRNA4过客(有义)链
AUCUUCCAUCCAUCCUUCAACUUAA
SEQ ID NO:16–DsiRNA4引导(反义)链
UUAAGUUGAAGGAUGGAUGGAAGAUGC
SEQ ID NO:17–DsiRNA 5过客(有义)链
UCUUCCAUCCAUCCUUCAACUUAAG
SEQ ID NO:18–DsiRNA 5引导(反义)链
CUUAAGUUGAAGGAUGGAUGGAAGAUG
SEQ ID NO:19–DsiRNA 6过客(有义)链
CCAGAGUGUCUGAUGGGGAAAACGU
SEQ ID NO:20–DsiRNA 6引导(反义)链
ACGUUUUCCCCAUCAGACACUCUGGUA
SEQ ID NO:21–DsiRNA 7过客(有义)链
GAGUGUCUGAUGGGGAAAACGUUCU
SEQ ID NO:22–DsiRNA 7引导(反义)链
AGAACGUUUUCCCCAUCAGACACUCUG
SEQ ID NO:23–DsiRNA 8过客(有义)链
AUGGGGAAAACGUUCUGGUGUCUGA
SEQ ID NO:24–DsiRNA 8引导(反义)链
UCAGACACCAGAACGUUUUCCCCAUCA
SEQ ID NO:25–DsiRNA 9过客(有义)链
GGGGAAAACGUUCUGGUGUCUGACU
SEQ ID NO:26–DsiRNA 9引导(反义)链
AGUCAGACACCAGAACGUUUUCCCCAU
SEQ ID NO:27–DsiRNA 10过客(有义)链
GGGAAAACGUUCUGGUGUCUGACUU
SEQ ID NO:28–DsiRNA 10引导(反义)链
AAGUCAGACACCAGAACGUUUUCCCCA
SEQ ID NO:29–DsiRNA 11过客(有义)链
GGAAAACGUUCUGGUGUCUGACUUU
SEQ ID NO:30–DsiRNA 11引导(反义)链
AAAGUCAGACACCAGAACGUUUUCCCC
SEQ ID NO:31–DsiRNA 12过客(有义)链
GAAAACGUUCUGGUGUCUGACUUUC
SEQ ID NO:32–DsiRNA 12引导(反义)链
GAAAGUCAGACACCAGAACGUUUUCCC
SEQ ID NO:33–DsiRNA 13过客(有义)链
AAAACGUUCUGGUGUCUGACUUUCG
SEQ ID NO:34–DsiRNA 13引导(反义)链
CGAAAGUCAGACACCAGAACGUUUUCC
SEQ ID NO:35–DsiRNA 14过客(有义)链
AAACGUUCUGGUGUCUGACUUUCGG
SEQ ID NO:36–DsiRNA 14引导(反义)链
CCGAAAGUCAGACACCAGAACGUUUUC
SEQ ID NO:37–DsiRNA 15过客(有义)链
AACGUUCUGGUGUCUGACUUUCGGU
SEQ ID NO:38–DsiRNA 15引导(反义)链
ACCGAAAGUCAGACACCAGAACGUUUU
SEQ ID NO:39–DsiRNA 16过客(有义)链
ACGUUCUGGUGUCUGACUUUCGGUC
SEQ ID NO:40–DsiRNA 16引导(反义)链
GACCGAAAGUCAGACACCAGAACGUUU
SEQ ID NO:41–DsiRNA 17过客(有义)链
GUUCUGGUGUCUGACUUUCGGUCCA
SEQ ID NO:42–DsiRNA 17引导(反义)链
UGGACCGAAAGUCAGACACCAGAACGU
SEQ ID NO:43–DsiRNA 18过客(有义)链
GACGAAGUCGUGGAUGCCUUGGUAU
SEQ ID NO:44–DsiRNA 18引导(反义)链
AUACCAAGGCAUCCACGACUUCGUCUU
SEQ ID NO:45–DsiRNA 19过客(有义)链
ACGAAGUCGUGGAUGCCUUGGUAUG
SEQ ID NO:46–DsiRNA 19引导(反义)链
CAUACCAAGGCAUCCACGACUUCGUCU
SEQ ID NO:47–DsiRNA 20过客(有义)链
CGAAGUCGUGGAUGCCUUGGUAUGU
SEQ ID NO:48–DsiRNA 20引导(反义)链
ACAUACCAAGGCAUCCACGACUUCGUC
SEQ ID NO:49–DsiRNA 21过客(有义)链
CAGAGGCGUGCGAUAUGUGGAUGGA
SEQ ID NO:50–DsiRNA 21引导(反义)链
UCCAUCCACAUAUCGCACGCCUCUGAA
SEQ ID NO:51–DsiRNA 22过客(有义)链
GCGAUAUGUGGAUGGAGGAGUGAGU
SEQ ID NO:52–DsiRNA 22引导(反义)链
ACUCACUCCUCCAUCCACAUAUCGCAC
SEQ ID NO:53–DsiRNA 23过客(有义)链
GAUGGAGGAGUGAGUGACAACGUAC
SEQ ID NO:54–DsiRNA 23引导(反义)链
GUACGUUGUCACUCACUCCUCCAUCCA
SEQ ID NO:55–DsiRNA 24过客(有义)链
GAGGAGUGAGUGACAACGUACCCUU
SEQ ID NO:56–DsiRNA 24引导(反义)链
AAGGGUACGUUGUCACUCACUCCUCCA
SEQ ID NO:57–DsiRNA 25过客(有义)链
GAGUGAGUGACAACGUACCCUUCAU
SEQ ID NO:58–DsiRNA 25引导(反义)链
AUGAAGGGUACGUUGUCACUCACUCCU
SEQ ID NO:59–DsiRNA 26过客(有义)链
AGUGAGUGACAACGUACCCUUCAUU
SEQ ID NO:60–DsiRNA 26引导(反义)链
AAUGAAGGGUACGUUGUCACUCACUCC
SEQ ID NO:61–DsiRNA 27过客(有义)链
GUGAGUGACAACGUACCCUUCAUUG
SEQ ID NO:62–DsiRNA 27引导(反义)链
CAAUGAAGGGUACGUUGUCACUCACUC
SEQ ID NO:63–DsiRNA 28过客(有义)链
UGAGUGACAACGUACCCUUCAUUGA
SEQ ID NO:64–DsiRNA 28引导(反义)链
UCAAUGAAGGGUACGUUGUCACUCACU
SEQ ID NO:65–DsiRNA 29过客(有义)链
GAGUGACAACGUACCCUUCAUUGAU
SEQ ID NO:66–DsiRNA 29引导(反义)链
AUCAAUGAAGGGUACGUUGUCACUCAC
SEQ ID NO:67–DsiRNA 30过客(有义)链
AGUGACAACGUACCCUUCAUUGAUG
SEQ ID NO:68–DsiRNA 30引导(反义)链
CAUCAAUGAAGGGUACGUUGUCACUCA
SEQ ID NO:69–DsiRNA 31过客(有义)链
GUGACAACGUACCCUUCAUUGAUGC
SEQ ID NO:70–DsiRNA 31引导(反义)链
GCAUCAAUGAAGGGUACGUUGUCACUC
SEQ ID NO:71–DsiRNA 32过客(有义)链
UGACAACGUACCCUUCAUUGAUGCC
SEQ ID NO:72–DsiRNA 32引导(反义)链
GGCAUCAAUGAAGGGUACGUUGUCACU
SEQ ID NO:73–DsiRNA 33过客(有义)链
GACAACGUACCCUUCAUUGAUGCCA
SEQ ID NO:74–DsiRNA 33引导(反义)链
UGGCAUCAAUGAAGGGUACGUUGUCAC
SEQ ID NO:75–DsiRNA 34过客(有义)链
CAACGUACCCUUCAUUGAUGCCAAA
SEQ ID NO:76–DsiRNA 34引导(反义)链
UUUGGCAUCAAUGAAGGGUACGUUGUC
SEQ ID NO:77–DsiRNA 35过客(有义)链
AACGUACCCUUCAUUGAUGCCAAAA
SEQ ID NO:78–DsiRNA 35引导(反义)链
UUUUGGCAUCAAUGAAGGGUACGUUGU
SEQ ID NO:79–DsiRNA 36过客(有义)链
ACGUACCCUUCAUUGAUGCCAAAAC
SEQ ID NO:80–DsiRNA 36引导(反义)链
GUUUUGGCAUCAAUGAAGGGUACGUUG
SEQ ID NO:81–DsiRNA 37过客(有义)链
CGUACCCUUCAUUGAUGCCAAAACA
SEQ ID NO:82–DsiRNA 37引导(反义)链
UGUUUUGGCAUCAAUGAAGGGUACGUU
SEQ ID NO:83–DsiRNA 38过客(有义)链
UACCCUUCAUUGAUGCCAAAACAAC
SEQ ID NO:84–DsiRNA 38引导(反义)链
GUUGUUUUGGCAUCAAUGAAGGGUACG
SEQ ID NO:85–DsiRNA 39过客(有义)链
UUGAUGCCAAAACAACCAUCACCGU
SEQ ID NO:86–DsiRNA 39引导(反义)链
ACGGUGAUGGUUGUUUUGGCAUCAAUG
SEQ ID NO:87–DsiRNA40过客(有义)链
GAUGCCAAAACAACCAUCACCGUGU
SEQ ID NO:88–DsiRNA40引导(反义)链
ACACGGUGAUGGUUGUUUUGGCAUCAA
SEQ ID NO:89–DsiRNA41过客(有义)链
AUGGGGAGUACGACAUCUGCCCUAA
SEQ ID NO:90–DsiRNA41引导(反义)链
UUAGGGCAGAUGUCGUACUCCCCAUAG
SEQ ID NO:91–DsiRNA42过客(有义)链
GUACGACAUCUGCCCUAAAGUCAAG
SEQ ID NO:92–DsiRNA42引导(反义)链
CUUGACUUUAGGGCAGAUGUCGUACUC
SEQ ID NO:93–DsiRNA43过客(有义)链
GACAUCUGCCCUAAAGUCAAGUCCA
SEQ ID NO:94–DsiRNA43引导(反义)链
UGGACUUGACUUUAGGGCAGAUGUCGU
SEQ ID NO:95–DsiRNA44过客(有义)链
ACAUCUGCCCUAAAGUCAAGUCCAC
SEQ ID NO:96–DsiRNA44引导(有义)链
GUGGACUUGACUUUAGGGCAGAUGUCG
SEQ ID NO:97–DsiRNA45过客(有义)链
GUCAAGUCCACGAACUUUCUUCAUG
SEQ ID NO:98–DsiRNA45引导(反义)链
CAUGAAGAAAGUUCGUGGACUUGACUU
SEQ ID NO:99–DsiRNA46过客(有义)链
UCAAGUCCACGAACUUUCUUCAUGU
SEQ ID NO:100–DsiRNA46引导(反义)链
ACAUGAAGAAAGUUCGUGGACUUGACU
SEQ ID NO:101–DsiRNA47过客(有义)链
CAAGUCCACGAACUUUCUUCAUGUG
SEQ ID NO:102–DsiRNA47引导(反义)链
CACAUGAAGAAAGUUCGUGGACUUGAC
SEQ ID NO:103–DsiRNA48过客(有义)链
GUCCACGAACUUUCUUCAUGUGGAC
SEQ ID NO:104–DsiRNA48引导(反义)链
GUCCACAUGAAGAAAGUUCGUGGACUU
SEQ ID NO:105–DsiRNA49过客(有义)链
CCACGAACUUUCUUCAUGUGGACAU
SEQ ID NO:106–DsiRNA49引导(反义)链
AUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGUGGAC
SEQ ID NO:107–DsiRNA 50过客(有义)链
CACGAACUUUCUUCAUGUGGACAUC
SEQ ID NO:108–DsiRNA 50引导(反义)链
GAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGUGGA
SEQ ID NO:109–DsiRNA 51过客(有义)链
ACGAACUUUCUUCAUGUGGACAUCA
SEQ ID NO:110–DsiRNA 51引导(反义)链
UGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGUGG
SEQ ID NO:111–DsiRNA 52过客(有义)链
CGAACUUUCUUCAUGUGGACAUCAC
SEQ ID NO:112–DsiRNA 52引导(反义)链
GUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGUG
SEQ ID NO:113–DsiRNA 53过客(有义)链
GAACUUUCUUCAUGUGGACAUCACC
SEQ ID NO:114–DsiRNA 53引导(反义)链
GGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGU
SEQ ID NO:115–DsiRNA 54过客(有义)链
AACUUUCUUCAUGUGGACAUCACCA
SEQ ID NO:116–DsiRNA 54引导(反义)链
UGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCG
SEQ ID NO:117–DsiRNA 55过客(有义)链
ACUUUCUUCAUGUGGACAUCACCAA
SEQ ID NO:118–DsiRNA 55引导(反义)链
UUGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUC
SEQ ID NO:119–DsiRNA 56过客(有义)链
CUUUCUUCAUGUGGACAUCACCAAG
SEQ ID NO:120–DsiRNA 56引导(反义)链
CUUGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUU
SEQ ID NO:121–DsiRNA 57过客(有义)链
UUUCUUCAUGUGGACAUCACCAAGC
SEQ ID NO:122–DsiRNA 57引导(反义)链
GCUUGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGU
SEQ ID NO:123–DsiRNA 58过客(有义)链
UUCUUCAUGUGGACAUCACCAAGCU
SEQ ID NO:124–DsiRNA 58引导(反义)链
AGCUUGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAG
SEQ ID NO:125–DsiRNA 59过客(有义)链
CUUCAUGUGGACAUCACCAAGCUCA
SEQ ID NO:126–DsiRNA 59引导(反义)链
UGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGAAGAA
SEQ ID NO:127–DsiRNA 60过客(有义)链
UUCAUGUGGACAUCACCAAGCUCAG
SEQ ID NO:128–DsiRNA 60引导(反义)链
CUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGAAGA
SEQ ID NO:129–DsiRNA 61过客(有义)链
UCAUGUGGACAUCACCAAGCUCAGU
SEQ ID NO:130–DsiRNA 61引导(反义)链
ACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGAAG
SEQ ID NO:131–DsiRNA 62过客(有义)链
CAUGUGGACAUCACCAAGCUCAGUC
SEQ ID NO:132–DsiRNA 62引导(反义)链
GACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGAA
SEQ ID NO:133–DsiRNA 63过客(有义)链
AUGUGGACAUCACCAAGCUCAGUCU
SEQ ID NO:134–DsiRNA 63引导(反义)链
AGACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGA
SEQ ID NO:135–DsiRNA 64过客(有义)链
UGUGGACAUCACCAAGCUCAGUCUA
SEQ ID NO:136–DsiRNA 64引导(反义)链
UAGACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUG
SEQ ID NO:137–DsiRNA 65过客(有义)链
GUGGACAUCACCAAGCUCAGUCUAC
SEQ ID NO:138–DsiRNA 65引导(反义)链
GUAGACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAU
SEQ ID NO:139–DsiRNA 66过客(有义)链
UGGACAUCACCAAGCUCAGUCUACG
SEQ ID NO:140–DsiRNA 66引导(反义)链
CGUAGACUGAGCUUGGUGAUGUCCACA
SEQ ID NO:141–DsiRNA 67过客(有义)链
AGCUUUUGUCCCCCCGGAUCUCAAG
SEQ ID NO:142–DsiRNA 67引导(反义)链
CUUGAGAUCCGGGGGGACAAAAGCUCU
SEQ ID NO:143–DsiRNA 68过客(有义)链
AAGGUGCUGGGAGAGAUAUGCCUUC
SEQ ID NO:144–DsiRNA 68引导(反义)链
GAAGGCAUAUCUCUCCCAGCACCUUGA
SEQ ID NO:145–DsiRNA 69过客(有义)链
GGGAGAGAUAUGCCUUCGAGGAUAU
SEQ ID NO:146–DsiRNA 69引导(反义)链
AUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCUCCCAG
SEQ ID NO:147–DsiRNA 70过客(有义)链
GGAGAGAUAUGCCUUCGAGGAUAUU
SEQ ID NO:148–DsiRNA 70引导(反义)链
AAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCUCCCA
SEQ ID NO:149–DsiRNA 71过客(有义)链
AGAGAUAUGCCUUCGAGGAUAUUUG
SEQ ID NO:150–DsiRNA 71引导(反义)链
CAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCUCC
SEQ ID NO:151–DsiRNA 72过客(有义)链
GAGAUAUGCCUUCGAGGAUAUUUGG
SEQ ID NO:152–DsiRNA 72引导(反义)链
CCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCUC
SEQ ID NO:153–DsiRNA 73过客(有义)链
AGAUAUGCCUUCGAGGAUAUUUGGA
SEQ ID NO:154–DsiRNA 73引导(反义)链
UCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCU
SEQ ID NO:155–DsiRNA 74过客(有义)链
GAUAUGCCUUCGAGGAUAUUUGGAU
SEQ ID NO:156–DsiRNA 74引导(反义)链
AUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUC
SEQ ID NO:157–DsiRNA 75过客(有义)链
AUAUGCCUUCGAGGAUAUUUGGAUG
SEQ ID NO:158–DsiRNA 75引导(反义)链
CAUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCU
SEQ ID NO:159–DsiRNA 76过客(有义)链
AUGCCUUCGAGGAUAUUUGGAUGCA
SEQ ID NO:160–DsiRNA 76引导(反义)链
UGCAUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAU
SEQ ID NO:161–DsiRNA 77过客(有义)链
UGCCUUCGAGGAUAUUUGGAUGCAU
SEQ ID NO:162–DsiRNA 77引导(反义)链
AUGCAUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUA
SEQ ID NO:163–DsiRNA 78过客(有义)链
GCCUUCGAGGAUAUUUGGAUGCAUU
SEQ ID NO:164–DsiRNA 78引导(反义)链
AAUGCAUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAU
SEQ ID NO:165–DsiRNA 79过客(有义)链
UCAGGUUCUUGGAAGAGAAGGGCAU
SEQ ID NO:166–DsiRNA 79引导(反义)链
AUGCCCUUCUCUUCCAAGAACCUGAAU
SEQ ID NO:167–DsiRNA 80过客(有义)链
CAGGUUCUUGGAAGAGAAGGGCAUC
SEQ ID NO:168–DsiRNA 80引导(反义)链
GAUGCCCUUCUCUUCCAAGAACCUGAA
SEQ ID NO:169–DsiRNA 81过客(有义)链
AGGUUCUUGGAAGAGAAGGGCAUCU
SEQ ID NO:170–DsiRNA 81引导(反义)链
AGAUGCCCUUCUCUUCCAAGAACCUGA
SEQ ID NO:171–DsiRNA 82过客(有义)链
GGUUCUUGGAAGAGAAGGGCAUCUG
SEQ ID NO:172–DsiRNA 82引导(反义)链
CAGAUGCCCUUCUCUUCCAAGAACCUG
SEQ ID NO:173–DsiRNA 83过客(有义)链
UGGAAGAGAAGGGCAUCUGCAACAG
SEQ ID NO:174–DsiRNA 83引导(反义)链
CUGUUGCAGAUGCCCUUCUCUUCCAAG
SEQ ID NO:175–DsiRNA 84过客(有义)链
UGAAGUCAUCCUCAGAAGGGAUGGA
SEQ ID NO:176–DsiRNA 84引导(反义)链
UCCAUCCCUUCUGAGGAUGACUUCAGG
SEQ ID NO:177–DsiRNA 85过客(有义)链
GAAGUCAUCCUCAGAAGGGAUGGAU
SEQ ID NO:178–DsiRNA 85引导(反义)链
AUCCAUCCCUUCUGAGGAUGACUUCAG
SEQ ID NO:179–DsiRNA 86过客(有义)链
AAGUCAUCCUCAGAAGGGAUGGAUC
SEQ ID NO:180–DsiRNA 86引导(反义)链
GAUCCAUCCCUUCUGAGGAUGACUUCA
SEQ ID NO:181–DsiRNA 87过客(有义)链
GUCAUCCUCAGAAGGGAUGGAUCCU
SEQ ID NO:182–DsiRNA 87引导(反义)链
AGGAUCCAUCCCUUCUGAGGAUGACUU
SEQ ID NO:183–DsiRNA 88过客(有义)链
CAUCCUCAGAAGGGAUGGAUCCUGA
SEQ ID NO:184–DsiRNA 88引导(反义)链
UCAGGAUCCAUCCCUUCUGAGGAUGAC
SEQ ID NO:185–DsiRNA 89过客(有义)链
AUCCUCAGAAGGGAUGGAUCCUGAG
SEQ ID NO:186–DsiRNA 89引导(反义)链)
CUCAGGAUCCAUCCCUUCUGAGGAUGA
SEQ ID NO:187–DsiRNA 90过客(有义)链
CUAGACCACCUGCGUCUCAGCAUCC
SEQ ID NO:188–DsiRNA 90引导(反义)链
GGAUGCUGAGACGCAGGUGGUCUAGCA
SEQ ID NO:189–DsiRNA 91过客(有义)链
AGUGAAGAAAUGAAAGACAAAGGUG
SEQ ID NO:190–DsiRNA 91引导(反义)链
CACCUUUGUCUUUCAUUUCUUCACUCA
SEQ ID NO:191–DsiRNA 92过客(有义)链
GUGAAGAAAUGAAAGACAAAGGUGG
SEQ ID NO:192–DsiRNA 92引导(反义)链
CCACCUUUGUCUUUCAUUUCUUCACUC
SEQ ID NO:193–DsiRNA 93过客(有义)链
UGAAGAAAUGAAAGACAAAGGUGGA
SEQ ID NO:194–DsiRNA 93引导(反义)链
UCCACCUUUGUCUUUCAUUUCUUCACU
SEQ ID NO:195–DsiRNA 94过客(有义)链
GAAGAAAUGAAAGACAAAGGUGGAU
SEQ ID NO:196–DsiRNA 94引导(反义)链
AUCCACCUUUGUCUUUCAUUUCUUCAC
SEQ ID NO:197–DsiRNA 95过客(有义)链
AAGAAAUGAAAGACAAAGGUGGAUA
SEQ ID NO:198–DsiRNA 95引导(反义)链
UAUCCACCUUUGUCUUUCAUUUCUUCA
SEQ ID NO:199–DsiRNA 96过客(有义)链
AGAAAUGAAAGACAAAGGUGGAUAC
SEQ ID NO:200–DsiRNA 96引导(反义)链
GUAUCCACCUUUGUCUUUCAUUUCUUC
SEQ ID NO:201–DsiRNA 97过客(有义)链
GAAAUGAAAGACAAAGGUGGAUACA
SEQ ID NO:202–DsiRNA 97引导(反义)链
UGUAUCCACCUUUGUCUUUCAUUUCUU
SEQ ID NO:203–DsiRNA 98过客(有义)链
AAAUGAAAGACAAAGGUGGAUACAU
SEQ ID NO:204–DsiRNA 98引导(反义)链
AUGUAUCCACCUUUGUCUUUCAUUUCU
SEQ ID NO:205–DsiRNA 99过客(有义)链
AAUGAAAGACAAAGGUGGAUACAUG
SEQ ID NO:206–DsiRNA 99引导(反义)链
CAUGUAUCCACCUUUGUCUUUCAUUUC
SEQ ID NO:207–DsiRNA 100过客(有义)链
AUGAAAGACAAAGGUGGAUACAUGA
SEQ ID NO:208–DsiRNA 100引导(反义)链
UCAUGUAUCCACCUUUGUCUUUCAUUU
SEQ ID NO:209–DsiRNA 101过客(有义)链
UGAAAGACAAAGGUGGAUACAUGAG
SEQ ID NO:210–DsiRNA 101引导(反义)链
CUCAUGUAUCCACCUUUGUCUUUCAUU
SEQ ID NO:211–DsiRNA 102过客(有义)链
GAAAGACAAAGGUGGAUACAUGAGC
SEQ ID NO:212–DsiRNA 102引导(反义)链
GCUCAUGUAUCCACCUUUGUCUUUCAU
SEQ ID NO:213–DsiRNA 103过客(有义)链
AAGACAAAGGUGGAUACAUGAGCAA
SEQ ID NO:214–DsiRNA 103引导(反义)链
UUGCUCAUGUAUCCACCUUUGUCUUUC
SEQ ID NO:215–DsiRNA 104过客(有义)链
AGACAAAGGUGGAUACAUGAGCAAG
SEQ ID NO:216–DsiRNA 104引导(反义)链
CUUGCUCAUGUAUCCACCUUUGUCUUU
SEQ ID NO:217–DsiRNA 105过客(有义)链
GACAAAGGUGGAUACAUGAGCAAGA
SEQ ID NO:218–DsiRNA 105引导(反义)链
UCUUGCUCAUGUAUCCACCUUUGUCUU
SEQ ID NO:219–DsiRNA 106过客(有义)链
ACAAAGGUGGAUACAUGAGCAAGAU
SEQ ID NO:220–DsiRNA 106引导(反义)链
AUCUUGCUCAUGUAUCCACCUUUGUCU
SEQ ID NO:221–DsiRNA 107过客(有义)链
AAGGUGGAUACAUGAGCAAGAUUUG
SEQ ID NO:222–DsiRNA 107引导(反义)链
CAAAUCUUGCUCAUGUAUCCACCUUUG
SEQ ID NO:223–DsiRNA 108过客(有义)链
AGGUGGAUACAUGAGCAAGAUUUGC
SEQ ID NO:224–DsiRNA 108引导(反义)链
GCAAAUCUUGCUCAUGUAUCCACCUUU
SEQ ID NO:225–DsiRNA 109过客(有义)链
UGGAUACAUGAGCAAGAUUUGCAAC
SEQ ID NO:226–DsiRNA 109引导(反义)链
GUUGCAAAUCUUGCUCAUGUAUCCACC
SEQ ID NO:227–DsiRNA 110过客(有义)链
GGAUACAUGAGCAAGAUUUGCAACU
SEQ ID NO:228–DsiRNA 110引导(反义)链
AGUUGCAAAUCUUGCUCAUGUAUCCAC
SEQ ID NO:229–DsiRNA 111过客(有义)链
GAUACAUGAGCAAGAUUUGCAACUU
SEQ ID NO:230–DsiRNA 111引导(反义)链
AAGUUGCAAAUCUUGCUCAUGUAUCCA
SEQ ID NO:231–DsiRNA 112过客(有义)链
AUACAUGAGCAAGAUUUGCAACUUG
SEQ ID NO:232–DsiRNA 112引导(反义)链
CAAGUUGCAAAUCUUGCUCAUGUAUCC
SEQ ID NO:233–DsiRNA 113过客(有义)链
UACAUGAGCAAGAUUUGCAACUUGC
SEQ ID NO:234–DsiRNA 113引导(反义)链
GCAAGUUGCAAAUCUUGCUCAUGUAUC
SEQ ID NO:235–DsiRNA 114过客(有义)链
ACAUGAGCAAGAUUUGCAACUUGCU
SEQ ID NO:236–DsiRNA 114引导(反义)链
AGCAAGUUGCAAAUCUUGCUCAUGUAU
SEQ ID NO:237–DsiRNA 115过客(有义)链
CAUGAGCAAGAUUUGCAACUUGCUA
SEQ ID NO:238–DsiRNA 115引导(反义)链
UAGCAAGUUGCAAAUCUUGCUCAUGUA
SEQ ID NO:239:DsiRNA 116过客(有义)链
AUGAGCAAGAUUUGCAACUUGCUAC
SEQ ID NO:240–DsiRNA 116引导(反义)链
GUAGCAAGUUGCAAAUCUUGCUCAUGU
SEQ ID NO:241–DsiRNA 117过客(有义)链
UGAGCAAGAUUUGCAACUUGCUACC
SEQ ID NO:242–DsiRNA 117引导(反义)链
GGUAGCAAGUUGCAAAUCUUGCUCAUG
SEQ ID NO:243–DsiRNA 118过客(有义)链
GAGCAAGAUUUGCAACUUGCUACCC
SEQ ID NO:244–DsiRNA 118引导(反义)链
GGGUAGCAAGUUGCAAAUCUUGCUCAU
SEQ ID NO:245–DsiRNA 119过客(有义)链
AGCAAGAUUUGCAACUUGCUACCCA
SEQ ID NO:246–DsiRNA 119引导(反义)链
UGGGUAGCAAGUUGCAAAUCUUGCUCA
SEQ ID NO:247–DsiRNA 120过客(有义)链
GCAAGAUUUGCAACUUGCUACCCAU
SEQ ID NO:248–DsiRNA 120引导(反义)链
AUGGGUAGCAAGUUGCAAAUCUUGCUC
SEQ ID NO:249–DsiRNA 121过客(有义)链
CAAGAUUUGCAACUUGCUACCCAUU
SEQ ID NO:250–DsiRNA 121引导(反义)链
AAUGGGUAGCAAGUUGCAAAUCUUGCU
SEQ ID NO:251–DsiRNA 122过客(有义)链
AAGAUUUGCAACUUGCUACCCAUUA
SEQ ID NO:252–DsiRNA 122引导(反义)链
UAAUGGGUAGCAAGUUGCAAAUCUUGC
SEQ ID NO:253–DsiRNA 123过客(有义)链
AGAUUUGCAACUUGCUACCCAUUAG
SEQ ID NO:254–DsiRNA 123引导(反义)链
CUAAUGGGUAGCAAGUUGCAAAUCUUG
SEQ ID NO:255–DsiRNA 124过客(有义)链
GAUUUGCAACUUGCUACCCAUUAGG
SEQ ID NO:256–DsiRNA 124引导(反义)链
CCUAAUGGGUAGCAAGUUGCAAAUCUU
SEQ ID NO:257–DsiRNA 125过客(有义)链
AUUUGCAACUUGCUACCCAUUAGGA
SEQ ID NO:258–DsiRNA 125引导(反义)链
UCCUAAUGGGUAGCAAGUUGCAAAUCU
SEQ ID NO:259–DsiRNA 126过客(有义)链
UUUGCAACUUGCUACCCAUUAGGAU
SEQ ID NO:260–DsiRNA 126引导(反义)链
AUCCUAAUGGGUAGCAAGUUGCAAAUC
SEQ ID NO:261–DsiRNA 127过客(有义)链
UUGCAACUUGCUACCCAUUAGGAUA
SEQ ID NO:262–DsiRNA 127引导(反义)链
UAUCCUAAUGGGUAGCAAGUUGCAAAU
SEQ ID NO:263–DsiRNA 128过客(有义)链
UGCAACUUGCUACCCAUUAGGAUAA
SEQ ID NO:264–DsiRNA 128引导(反义)链
UUAUCCUAAUGGGUAGCAAGUUGCAAA
SEQ ID NO:265–DsiRNA 129–过客(有义)链
GCAACUUGCUACCCAUUAGGAUAAU
SEQ ID NO:266–DsiRNA 129引导(反义)链
AUUAUCCUAAUGGGUAGCAAGUUGCAA
SEQ ID NO:267–DsiRNA 130过客(有义)链
CAACUUGCUACCCAUUAGGAUAAUG
SEQ ID NO:268–DsiRNA 130引导(反义)链
CAUUAUCCUAAUGGGUAGCAAGUUGCA
SEQ ID NO:269–DsiRNA 131过客(有义)链
CUUGCUACCCAUUAGGAUAAUGUCU
SEQ ID NO:270–DsiRNA 131引导(反义)链
AGACAUUAUCCUAAUGGGUAGCAAGUU
SEQ ID NO:271–DsiRNA 132过客(有义)链
UUGCUACCCAUUAGGAUAAUGUCUU
SEQ ID NO:272–DsiRNA 132引导(反义)链
AAGACAUUAUCCUAAUGGGUAGCAAGU
SEQ ID NO:273–DsiRNA 133过客(有义)链
UGCUACCCAUUAGGAUAAUGUCUUA
SEQ ID NO:274–DsiRNA 133引导(反义)链
UAAGACAUUAUCCUAAUGGGUAGCAAG
SEQ ID NO:275–DsiRNA 134过客(有义)链
AUUAGGAUAAUGUCUUAUGUAAUGC
SEQ ID NO:276–DsiRNA 134引导(反义)链
GCAUUACAUAAGACAUUAUCCUAAUGG
SEQ ID NO:277–DsiRNA 135过客(有义)链
UUAGGAUAAUGUCUUAUGUAAUGCU
SEQ ID NO:278–DsiRNA 135引导(反义)链
AGCAUUACAUAAGACAUUAUCCUAAUG
SEQ ID NO:279–DsiRNA 136过客(有义)链
CUGUGGAAUCUGCCAUUGCGAUUGU
SEQ ID NO:280–DsiRNA 136引导(反义)链
ACAAUCGCAAUGGCAGAUUCCACAGGC
SEQ ID NO:281–DsiRNA 137过客(有义)链
GGAAUCUGCCAUUGCGAUUGUCCAG
SEQ ID NO:282–DsiRNA 137引导(反义)链
CUGGACAAUCGCAAUGGCAGAUUCCAC
SEQ ID NO:283–DsiRNA 138过客(有义)链
GAAUCUGCCAUUGCGAUUGUCCAGA
SEQ ID NO:284–DsiRNA 138引导(反义)链
UCUGGACAAUCGCAAUGGCAGAUUCCA
SEQ ID NO:285–DsiRNA 139过客(有义)链
AAUCUGCCAUUGCGAUUGUCCAGAG
SEQ ID NO:286–DsiRNA 139引导(反义)链
CUCUGGACAAUCGCAAUGGCAGAUUCC
SEQ ID NO:287–DsiRNA 140过客(有义)链
AUCUGCCAUUGCGAUUGUCCAGAGA
SEQ ID NO:288–DsiRNA 140引导(反义)链
UCUCUGGACAAUCGCAAUGGCAGAUUC
SEQ ID NO:289–DsiRNA 141过客(有义)链
CCAUUGCGAUUGUCCAGAGACUGGU
SEQ ID NO:290–DsiRNA 141引导(反义)链
ACCAGUCUCUGGACAAUCGCAAUGGCA
SEQ ID NO:291–DsiRNA 142过客(有义)链
CAUUGCGAUUGUCCAGAGACUGGUG
SEQ ID NO:292–DsiRNA 142引导(反义)链
CACCAGUCUCUGGACAAUCGCAAUGGC
SEQ ID NO:293–DsiRNA 143过客(有义)链
AUUGCGAUUGUCCAGAGACUGGUGA
SEQ ID NO:294–DsiRNA 143引导(反义)链
UCACCAGUCUCUGGACAAUCGCAAUGG
SEQ ID NO:295–DsiRNA 144过客(有义)链
UUGCGAUUGUCCAGAGACUGGUGAC
SEQ ID NO:296–DsiRNA 144引导(反义)链
GUCACCAGUCUCUGGACAAUCGCAAUG
SEQ ID NO:297–DsiRNA 145过客(有义)链
UGCGAUUGUCCAGAGACUGGUGACA
SEQ ID NO:298–DsiRNA 145引导(反义)链
UGUCACCAGUCUCUGGACAAUCGCAAU
SEQ ID NO:299–DsiRNA 146过客(有义)链
GCGAUUGUCCAGAGACUGGUGACAU
SEQ ID NO:300–DsiRNA 146引导(反义)链
AUGUCACCAGUCUCUGGACAAUCGCAA
SEQ ID NO:301–DsiRNA 147过客(有义)链
CGAUUGUCCAGAGACUGGUGACAUG
SEQ ID NO:302–DsiRNA 147引导(反义)链
CAUGUCACCAGUCUCUGGACAAUCGCA
SEQ ID NO:303–DsiRNA 148过客(有义)
AUUGUCCAGAGACUGGUGACAUGGC
SEQ ID NO:304–DsiRNA 148引导(反义)链
GCCAUGUCACCAGUCUCUGGACAAUCG
SEQ ID NO:305–DsiRNA 149过客(有义)链
GUCCAGAGACUGGUGACAUGGCUUC
SEQ ID NO:306–DsiRNA 149引导(反义)链
GAAGCCAUGUCACCAGUCUCUGGACAA
SEQ ID NO:307–DsiRNA 150过客(有义)链
CCAGAGACUGGUGACAUGGCUUCCA
SEQ ID NO:308–DsiRNA 150引导(反义)链
UGGAAGCCAUGUCACCAGUCUCUGGAC
SEQ ID NO:309–DsiRNA 151过客(有义)
CAGAGACUGGUGACAUGGCUUCCAG
SEQ ID NO:310–DsiRNA 151引导(反义)链
CUGGAAGCCAUGUCACCAGUCUCUGGA
SEQ ID NO:311–DsiRNA 152过客(有义)链
AGAGACUGGUGACAUGGCUUCCAGA
SEQ ID NO:312–DsiRNA 152引导(反义)链
UCUGGAAGCCAUGUCACCAGUCUCUGG
SEQ ID NO:313–DsiRNA 153过客(有义)链
GAGACUGGUGACAUGGCUUCCAGAU
SEQ ID NO:314–DsiRNA 153引导(反义)链
AUCUGGAAGCCAUGUCACCAGUCUCUG
SEQ ID NO:315–DsiRNA 154过客(有义)链
AGACUGGUGACAUGGCUUCCAGAUA
SEQ ID NO:316–DsiRNA 154引导(反义)链
UAUCUGGAAGCCAUGUCACCAGUCUCU
SEQ ID NO:317–DsiRNA 155过客(有义)链
GACUGGUGACAUGGCUUCCAGAUAU
SEQ ID NO:318–DsiRNA 155引导(反义)链
AUAUCUGGAAGCCAUGUCACCAGUCUC
SEQ ID NO:319–DsiRNA 156过客(有义)链
ACUGGUGACAUGGCUUCCAGAUAUG
SEQ ID NO:320–DsiRNA 156引导(反义)链
CAUAUCUGGAAGCCAUGUCACCAGUCU
SEQ ID NO:321–DsiRNA 157过客(有义)链
CUGGUGACAUGGCUUCCAGAUAUGC
SEQ ID NO:322–DsiRNA 157引导(反义)链
GCAUAUCUGGAAGCCAUGUCACCAGUC
SEQ ID NO:323–DsiRNA 158过客(有义)链
GACAUGGCUUCCAGAUAUGCCCGAC
SEQ ID NO:324–DsiRNA 158引导(反义)链
GUCGGGCAUAUCUGGAAGCCAUGUCAC
SEQ ID NO:325–DsiRNA 159过客(有义)链
CAUGGCUUCCAGAUAUGCCCGACGA
SEQ ID NO:326–DsiRNA 159引导(反义)链
UCGUCGGGCAUAUCUGGAAGCCAUGUC
SEQ ID NO:327–DsiRNA 160过客(有义)链
CAGAUAUGCCCGACGAUGUCCUGUG
SEQ ID NO:328–DsiRNA 160引导(反义)链
CACAGGACAUCGUCGGGCAUAUCUGGA
SEQ ID NO:329–DsiRNA 161过客(有义)链
CUCACAGGUGUUCACUCGAGUGCUG
SEQ ID NO:330–DsiRNA 161引导(反义)链
CAGCACUCGAGUGAACACCUGUGAGGU
SEQ ID NO:331–DsiRNA 162过客(有义)链
CACUCGAGUGCUGAUGUGUCUGCUC
SEQ ID NO:332–DsiRNA 162引导(反义)链
GAGCAGACACAUCAGCACUCGAGUGAA
SEQ ID NO:333–DsiRNA 163过客(有义)链
CUCGAGUGCUGAUGUGUCUGCUCCC
SEQ ID NO:334–DsiRNA 163引导(反义)链
GGGAGCAGACACAUCAGCACUCGAGUG
SEQ ID NO:335–DsiRNA 164过客(有义)链
CCCAAAUGCCAGUGAGCAGCCAACA
SEQ ID NO:336–DsiRNA 164引导(反义)链
UGUUGGCUGCUCACUGGCAUUUGGGAC
SEQ ID NO:337–DsiRNA 165过客(有义)链
UCAGGUCCAGCCUGAACUUCUUCUU
SEQ ID NO:338–DsiRNA 165引导(反义)链
AAGAAGAAGUUCAGGCUGGACCUGAGG
SEQ ID NO:339–DsiRNA 166过客(有义)链
CAGGUCCAGCCUGAACUUCUUCUUG
SEQ ID NO:340–DsiRNA 166引导(反义)链
CAAGAAGAAGUUCAGGCUGGACCUGAG
SEQ ID NO:341–DsiRNA 167过客(有义)链
AGGUCCAGCCUGAACUUCUUCUUGG
SEQ ID NO:342–DsiRNA 167引导(反义)链
CCAAGAAGAAGUUCAGGCUGGACCUGA
SEQ ID NO:343–DsiRNA 168过客(有义)链
CAAUAAAGUACCUGCUGGUGCUGAG
SEQ ID NO:344–DsiRNA 168引导(反义)链
CUCAGCACCAGCAGGUACUUUAUUGCC
SEQ ID NO:345–DsiRNA 169过客(有义)链
AAUAAAGUACCUGCUGGUGCUGAGG
SEQ ID NO:346–DsiRNA 169引导(反义)链
CCUCAGCACCAGCAGGUACUUUAUUGC
SEQ ID NO:347–DsiRNA 170过客(有义)链
AUAAAGUACCUGCUGGUGCUGAGGG
SEQ ID NO:348–DsiRNA 170引导(反义)链
CCCUCAGCACCAGCAGGUACUUUAUUG
SEQ ID NO:349–DsiRNA 171过客(有义)链
CUCUCCACCUUUCCCAGUUUUUCAC
SEQ ID NO:350–DsiRNA 171引导(反义)链
GUGAAAAACUGGGAAAGGUGGAGAGCC
SEQ ID NO:351–DsiRNA 172过客(有义)链
CUCCACCUUUCCCAGUUUUUCACUA
SEQ ID NO:352–DsiRNA 172引导(反义)链
UAGUGAAAAACUGGGAAAGGUGGAGAG
SEQ ID NO:353–DsiRNA 173过客(有义)链
UCCACCUUUCCCAGUUUUUCACUAG
SEQ ID NO:354–DsiRNA 173引导(反义)链
CUAGUGAAAAACUGGGAAAGGUGGAGA
SEQ ID NO:355–DsiRNA 174过客(有义)链
CCACCUUUCCCAGUUUUUCACUAGA
SEQ ID NO:356–DsiRNA 174引导(反义)链
UCUAGUGAAAAACUGGGAAAGGUGGAG
SEQ ID NO:357–DsiRNA 175过客(有义)链
CACCUUUCCCAGUUUUUCACUAGAG
SEQ ID NO:358–DsiRNA 175引导(反义)链
CUCUAGUGAAAAACUGGGAAAGGUGGA
SEQ ID NO:359–DsiRNA 176过客(有义)链
ACCUUUCCCAGUUUUUCACUAGAGA
SEQ ID NO:360–DsiRNA 176引导(反义)链
UCUCUAGUGAAAAACUGGGAAAGGUGG
SEQ ID NO:361–DsiRNA 177过客(有义)链
CCUUUCCCAGUUUUUCACUAGAGAA
SEQ ID NO:362–DsiRNA 177引导(反义)链
UUCUCUAGUGAAAAACUGGGAAAGGUG
SEQ ID NO:363–DsiRNA 178过客(有义)链
AGUUUUUCACUAGAGAAGAGUCUGU
SEQ ID NO:364–DsiRNA 178引导(反义)链
ACAGACUCUUCUCUAGUGAAAAACUGG
SEQ ID NO:365–DsiRNA 179过客(有义)链
UCUAGCAGAUUCUUUCAGAGGUGCU
SEQ ID NO:366–DsiRNA 179引导(反义)链
AGCACCUCUGAAAGAAUCUGCUAGACU
SEQ ID NO:367–DsiRNA 180过客(有义)链
AGCAGAUUCUUUCAGAGGUGCUAAA
SEQ ID NO:368–DsiRNA 180引导(反义)链
UUUAGCACCUCUGAAAGAAUCUGCUAG
SEQ ID NO:369–DsiRNA 181过客(有义)链
GCAGAUUCUUUCAGAGGUGCUAAAG
SEQ ID NO:370–DsiRNA 181引导(反义)链
CUUUAGCACCUCUGAAAGAAUCUGCUA
SEQ ID NO:371–DsiRNA 182过客(有义)链
CAGAUUCUUUCAGAGGUGCUAAAGU
SEQ ID NO:372–DsiRNA 182引导(反义)链
ACUUUAGCACCUCUGAAAGAAUCUGCU
SEQ ID NO:373–DsiRNA 183过客(有义)链
AGAUUCUUUCAGAGGUGCUAAAGUU
SEQ ID NO:374–DsiRNA 183引导(反义)链
AACUUUAGCACCUCUGAAAGAAUCUGC
SEQ ID NO:375–DsiRNA 184过客(有义)链
GAUUCUUUCAGAGGUGCUAAAGUUU
SEQ ID NO:376–DsiRNA 184引导(反义)链
AAACUUUAGCACCUCUGAAAGAAUCUG
SEQ ID NO:377–DsiRNA 185过客(有义)链
AUUCUUUCAGAGGUGCUAAAGUUUC
SEQ ID NO:378–DsiRNA 185引导(反义)链
GAAACUUUAGCACCUCUGAAAGAAUCU
SEQ ID NO:379–DsiRNA 186过客(有义)链
AGGUGCUAAAGUUUCCCAUCUUUGU
SEQ ID NO:380–DsiRNA 186引导(反义)链
ACAAAGAUGGGAAACUUUAGCACCUCU
SEQ ID NO:381–DsiRNA 187过客(有义)链
GGUGCUAAAGUUUCCCAUCUUUGUG
SEQ ID NO:382–DsiRNA 187引导(反义)链
CACAAAGAUGGGAAACUUUAGCACCUC
SEQ ID NO:383–DsiRNA 188过客(有义)链
GUGCUAAAGUUUCCCAUCUUUGUGC
SEQ ID NO:384–DsiRNA 188引导(反义)链
GCACAAAGAUGGGAAACUUUAGCACCU
SEQ ID NO:385–DsiRNA 189过客(有义)链
GCUAAAGUUUCCCAUCUUUGUGCAG
SEQ ID NO:386–DsiRNA 189引导(反义)链
CUGCACAAAGAUGGGAAACUUUAGCAC
SEQ ID NO:387–DsiRNA 190过客(有义)链
CUAAAGUUUCCCAUCUUUGUGCAGC
SEQ ID NO:388–DsiRNA 190引导(反义)链
GCUGCACAAAGAUGGGAAACUUUAGCA
SEQ ID NO:389–DsiRNA 191过客(有义)链
UAAAGUUUCCCAUCUUUGUGCAGCU
SEQ ID NO:390–DsiRNA 191引导(反义)链
AGCUGCACAAAGAUGGGAAACUUUAGC
SEQ ID NO:391–DsiRNA 192过客(有义)链
AAAGUUUCCCAUCUUUGUGCAGCUA
SEQ ID NO:392–DsiRNA 192引导(反义)链
UAGCUGCACAAAGAUGGGAAACUUUAG
SEQ ID NO:393–DsiRNA 193过客(有义)链
AAGUUUCCCAUCUUUGUGCAGCUAC
SEQ ID NO:394–DsiRNA 193引导(反义)链
GUAGCUGCACAAAGAUGGGAAACUUUA
SEQ ID NO:395–DsiRNA 194过客(有义)链
AGUUUCCCAUCUUUGUGCAGCUACC
SEQ ID NO:396–DsiRNA 194引导(反义)链
GGUAGCUGCACAAAGAUGGGAAACUUU
SEQ ID NO:397–DsiRNA 195过客(有义)链
GUUUCCCAUCUUUGUGCAGCUACCU
SEQ ID NO:398–DsiRNA 195引导(反义)链
AGGUAGCUGCACAAAGAUGGGAAACUU
SEQ ID NO:399–DsiRNA 196过客(有义)链
AUCUUUGUGCAGCUACCUCCGCAUU
SEQ ID NO:400–DsiRNA 196引导(反义)链
AAUGCGGAGGUAGCUGCACAAAGAUGG
SEQ ID NO:401–DsiRNA 197过客(有义)链
GUGCAGCUACCUCCGCAUUGCUGUG
SEQ ID NO:402–DsiRNA 197引导(反义)链
CACAGCAAUGCGGAGGUAGCUGCACAA
SEQ ID NO:403–DsiRNA 198过客(有义)链
CCAGCCUCUGAGCUGAGUUGGUUUU
SEQ ID NO:404–DsiRNA 198引导(反义)链
AAAACCAACUCAGCUCAGAGGCUGGGA
SEQ ID NO:405–DsiRNA 199过客(有义)链
CAGCCUCUGAGCUGAGUUGGUUUUA
SEQ ID NO:406–DsiRNA 199引导(反义)链
UAAAACCAACUCAGCUCAGAGGCUGGG
SEQ ID NO:407–DsiRNA 200过客(有义)链
AGCCUCUGAGCUGAGUUGGUUUUAU
SEQ ID NO:408–DsiRNA 200引导(反义)链
AUAAAACCAACUCAGCUCAGAGGCUGG
SEQ ID NO:409–DsiRNA 201过客(有义)链
GCCUCUGAGCUGAGUUGGUUUUAUG
SEQ ID NO:410–DsiRNA 201引导(反义)链
CAUAAAACCAACUCAGCUCAGAGGCUG
SEQ ID NO:411–DsiRNA 202过客(有义)链
CCUCUGAGCUGAGUUGGUUUUAUGA
SEQ ID NO:412–DsiRNA 202引导(反义)链
UCAUAAAACCAACUCAGCUCAGAGGCU
SEQ ID NO:413–DsiRNA 203过客(有义)链
CUCUGAGCUGAGUUGGUUUUAUGAA
SEQ ID NO:414–DsiRNA 203引导(反义)链
UUCAUAAAACCAACUCAGCUCAGAGGC
SEQ ID NO:415–DsiRNA 204过客(有义)链
UCUGAGCUGAGUUGGUUUUAUGAAA
SEQ ID NO:416–DsiRNA 204引导(反义)链
UUUCAUAAAACCAACUCAGCUCAGAGG
SEQ ID NO:417–DsiRNA 205过客(有义)链
UGAGCUGAGUUGGUUUUAUGAAAAG
SEQ ID NO:418–DsiRNA 205引导(反义)链
CUUUUCAUAAAACCAACUCAGCUCAGA
SEQ ID NO:419–DsiRNA 206过客(有义)链
UGAGUUGGUUUUAUGAAAAGCUAGG
SEQ ID NO:420–DsiRNA 206引导(反义)链
CCUAGCUUUUCAUAAAACCAACUCAGC
SEQ ID NO:421–DsiRNA 207过客(有义)链
GAGUUGGUUUUAUGAAAAGCUAGGA
SEQ ID NO:422–DsiRNA 207引导(反义)链
UCCUAGCUUUUCAUAAAACCAACUCAG
SEQ ID NO:423–DsiRNA 208过客(有义)链
UUGGUUUUAUGAAAAGCUAGGAAGC
SEQ ID NO:424–DsiRNA 208引导(反义)链
GCUUCCUAGCUUUUCAUAAAACCAACU
SEQ ID NO:425–DsiRNA 209过客(有义)链
UGGUUUUAUGAAAAGCUAGGAAGCA
SEQ ID NO:426–DsiRNA 209引导(反义)链
UGCUUCCUAGCUUUUCAUAAAACCAAC
SEQ ID NO:427–DsiRNA 210过客(有义)链
GGUUUUAUGAAAAGCUAGGAAGCAA
SEQ ID NO:428–DsiRNA 210引导(反义)链
UUGCUUCCUAGCUUUUCAUAAAACCAA
SEQ ID NO:429–DsiRNA 211过客(有义)链
UUUUAUGAAAAGCUAGGAAGCAACC
SEQ ID NO:430–DsiRNA 211引导(反义)链
GGUUGCUUCCUAGCUUUUCAUAAAACC
SEQ ID NO:431–DsiRNA 212过客(有义)链
UUAUGAAAAGCUAGGAAGCAACCUU
SEQ ID NO:432–DsiRNA 212引导(反义)链
AAGGUUGCUUCCUAGCUUUUCAUAAAA
SEQ ID NO:433–DsiRNA 213过客(有义)链
UAUGAAAAGCUAGGAAGCAACCUUU
SEQ ID NO:434–DsiRNA 213引导(反义)链
AAAGGUUGCUUCCUAGCUUUUCAUAAA
SEQ ID NO:435–DsiRNA 214过客(有义)链
AUGAAAAGCUAGGAAGCAACCUUUC
SEQ ID NO:436–DsiRNA 214引导(反义)链
GAAAGGUUGCUUCCUAGCUUUUCAUAA
SEQ ID NO:437–DsiRNA 215过客(有义)链
CCAGCACUUAACUCUAAUACAUCAG
SEQ ID NO:438–DsiRNA 215引导(反义)链
CUGAUGUAUUAGAGUUAAGUGCUGGAC
SEQ ID NO:439–DsiRNA 216过客(有义)链
CAGCACUUAACUCUAAUACAUCAGC
SEQ ID NO:440–DsiRNA 216引导(反义)链
GCUGAUGUAUUAGAGUUAAGUGCUGGA
SEQ ID NO:441–DsiRNA 217过客(有义)链
UAAUACAUCAGCAUGCGUUAAUUCA
SEQ ID NO:442–DsiRNA 217引导(反义)链
UGAAUUAACGCAUGCUGAUGUAUUAGA
SEQ ID NO:443–DsiRNA 218过客(有义)链
AAUACAUCAGCAUGCGUUAAUUCAG
SEQ ID NO:444–DsiRNA 218引导(反义)链
CUGAAUUAACGCAUGCUGAUGUAUUAG
SEQ ID NO:445–DsiRNA 219过客(有义)链
AGCAUGCGUUAAUUCAGCUGGUUGG
SEQ ID NO:446–DsiRNA 219引导(反义)链
CCAACCAGCUGAAUUAACGCAUGCUGA
SEQ ID NO:447–DsiRNA 220过客(有义)链
GCAUGCGUUAAUUCAGCUGGUUGGG
SEQ ID NO:448–DsiRNA 220引导(反义)链
CCCAACCAGCUGAAUUAACGCAUGCUG
SEQ ID NO:449–DsiRNA 221过客(有义)链
UGCGUUAAUUCAGCUGGUUGGGAAA
SEQ ID NO:450–DsiRNA 221引导(反义)链
UUUCCCAACCAGCUGAAUUAACGCAUG
SEQ ID NO:451–DsiRNA 222过客(有义)链
GCGUUAAUUCAGCUGGUUGGGAAAU
SEQ ID NO:452–DsiRNA 222引导(反义)链
AUUUCCCAACCAGCUGAAUUAACGCAU
SEQ ID NO:453–DsiRNA 223过客(有义)链
CGUUAAUUCAGCUGGUUGGGAAAUG
SEQ ID NO:454–DsiRNA 223引导(反义)链
CAUUUCCCAACCAGCUGAAUUAACGCA
SEQ ID NO:455–DsiRNA 224过客(有义)链
GUUAAUUCAGCUGGUUGGGAAAUGA
SEQ ID NO:456–DsiRNA 224引导(反义)链
UCAUUUCCCAACCAGCUGAAUUAACGC
SEQ ID NO:457–DsiRNA 225过客(有义)链
UUAAUUCAGCUGGUUGGGAAAUGAC
SEQ ID NO:458–DsiRNA 225引导(反义)链
GUCAUUUCCCAACCAGCUGAAUUAACG
SEQ ID NO:459–DsiRNA 226过客(有义)链
UAAUUCAGCUGGUUGGGAAAUGACA
SEQ ID NO:460–DsiRNA 226引导(反义)链
UGUCAUUUCCCAACCAGCUGAAUUAAC
SEQ ID NO:461–DsiRNA 227过客(有义)链
AUUCAGCUGGUUGGGAAAUGACACC
SEQ ID NO:462–DsiRNA 227引导(反义)链
GGUGUCAUUUCCCAACCAGCUGAAUUA
SEQ ID NO:463–DsiRNA 228过客(有义)链
UUCAGCUGGUUGGGAAAUGACACCA
SEQ ID NO:464–DsiRNA 228引导(反义)链
UGGUGUCAUUUCCCAACCAGCUGAAUU
SEQ ID NO:465–DsiRNA 229过客(有义)链
UCAGCUGGUUGGGAAAUGACACCAG
SEQ ID NO:466–DsiRNA 229引导(反义)链
CUGGUGUCAUUUCCCAACCAGCUGAAU
SEQ ID NO:467–DsiRNA 230过客(有义)链
CAGCUGGUUGGGAAAUGACACCAGG
SEQ ID NO:468–DsiRNA 230引导(反义)链
CCUGGUGUCAUUUCCCAACCAGCUGAA
SEQ ID NO:469–DsiRNA 231过客(有义)链
AGCUGGUUGGGAAAUGACACCAGGA
SEQ ID NO:470–DsiRNA 231引导(反义)链
UCCUGGUGUCAUUUCCCAACCAGCUGA
SEQ ID NO:471–DsiRNA 232过客(有义)链
GCUGGUUGGGAAAUGACACCAGGAA
SEQ ID NO:472–DsiRNA 232引导(反义)链
UUCCUGGUGUCAUUUCCCAACCAGCUG
SEQ ID NO:473–DsiRNA 233过客(有义)链
GCAGAGGGUCCCUUACUGACUGUUU
SEQ ID NO:474–DsiRNA 233引导(反义)链
AAACAGUCAGUAAGGGACCCUCUGCAC
SEQ ID NO:475–DsiRNA 234过客(有义)链
CAGAGGGUCCCUUACUGACUGUUUC
SEQ ID NO:476–DsiRNA 234引导(反义)链
GAAACAGUCAGUAAGGGACCCUCUGCA
SEQ ID NO:477–DsiRNA 235过客(有义)链
AGAGGGUCCCUUACUGACUGUUUCG
SEQ ID NO:478–DsiRNA 235引导(反义)链
CGAAACAGUCAGUAAGGGACCCUCUGC
SEQ ID NO:479–DsiRNA 236过客(有义)链
CCUAUUAAUGGUCAGACUGUUCCAG
SEQ ID NO:480–DsiRNA 236引导(反义)链
CUGGAACAGUCUGACCAUUAAUAGGGC
SEQ ID NO:481–DsiRNA 237过客(有义)链
CUAUUAAUGGUCAGACUGUUCCAGC
SEQ ID NO:482–DsiRNA 237引导(反义)链
GCUGGAACAGUCUGACCAUUAAUAGGG
SEQ ID NO:483–DsiRNA 238过客(有义)链
UAUUAAUGGUCAGACUGUUCCAGCA
SEQ ID NO:484–DsiRNA 238引导(反义)链
UGCUGGAACAGUCUGACCAUUAAUAGG
SEQ ID NO:485–DsiRNA 239过客(有义)链
AUUAAUGGUCAGACUGUUCCAGCAU
SEQ ID NO:486–DsiRNA 239引导(反义)链
AUGCUGGAACAGUCUGACCAUUAAUAG
SEQ ID NO:487–DsiRNA 240过客(有义)链
UUAAUGGUCAGACUGUUCCAGCAUG
SEQ ID NO:488–DsiRNA 240引导(反义)链
CAUGCUGGAACAGUCUGACCAUUAAUA
SEQ ID NO:489–DsiRNA 241过客(有义)链
UAAUGGUCAGACUGUUCCAGCAUGA
SEQ ID NO:490–DsiRNA 241引导(反义)链
UCAUGCUGGAACAGUCUGACCAUUAAU
SEQ ID NO:491–DsiRNA 242过客(有义)链
AAUGGUCAGACUGUUCCAGCAUGAG
SEQ ID NO:492–DsiRNA 242引导(反义)链
CUCAUGCUGGAACAGUCUGACCAUUAA
SEQ ID NO:493–DsiRNA 243过客(有义)链
AGAACGACACUGCCUGUCAGGUGGU
SEQ ID NO:494–DsiRNA 243引导(反义)链
ACCACCUGACAGGCAGUGUCGUUCUUG
SEQ ID NO:495–DsiRNA 244过客(有义)链
CGACACUGCCUGUCAGGUGGUCUGC
SEQ ID NO:496–DsiRNA 244引导(反义)链
GCAGACCACCUGACAGGCAGUGUCGUU
SEQ ID NO:497–DsiRNA 245过客(有义)链
AACCUUGACUACUAAAAACGUCUCC
SEQ ID NO:498–DsiRNA 245引导(反义)链
GGAGACGUUUUUAGUAGUCAAGGUUAU
SEQ ID NO:499–DsiRNA 246过客(有义)链
UUUAGAACACCUUUUUCACCUAACU
SEQ ID NO:500–DsiRNA 246引导(反义)链
AGUUAGGUGAAAAAGGUGUUCUAAAAU
SEQ ID NO:501–DsiRNA 247过客(有义)链
UUAGAACACCUUUUUCACCUAACUA
SEQ ID NO:502–DsiRNA 247引导(反义)链
UAGUUAGGUGAAAAAGGUGUUCUAAAA
SEQ ID NO:503–DsiRNA 248过客(有义)链
UAGAACACCUUUUUCACCUAACUAA
SEQ ID NO:504–DsiRNA 248引导(反义)链
UUAGUUAGGUGAAAAAGGUGUUCUAAA
SEQ ID NO:505–DsiRNA 249过客(有义)链
AGAACACCUUUUUCACCUAACUAAA
SEQ ID NO:506–DsiRNA 249引导(反义)链
UUUAGUUAGGUGAAAAAGGUGUUCUAA
SEQ ID NO:507–DsiRNA 250过客(有义)链
GAACACCUUUUUCACCUAACUAAAA
SEQ ID NO:508–DsiRNA 250引导(反义)链
UUUUAGUUAGGUGAAAAAGGUGUUCUA
SEQ ID NO:509–DsiRNA 251过客(有义)链
AACACCUUUUUCACCUAACUAAAAU
SEQ ID NO:510–DsiRNA 251引导(反义)链
AUUUUAGUUAGGUGAAAAAGGUGUUCU
SEQ ID NO:511–DsiRNA 252过客(有义)链
ACACCUUUUUCACCUAACUAAAAUA
SEQ ID NO:512–DsiRNA 252引导(反义)链
UAUUUUAGUUAGGUGAAAAAGGUGUUC
SEQ ID NO:513–DsiRNA 253过客(有义)链
CACCUUUUUCACCUAACUAAAAUAA
SEQ ID NO:514–DsiRNA 253引导(反义)链
UUAUUUUAGUUAGGUGAAAAAGGUGUU
SEQ ID NO:515–DsiRNA 254过客(有义)链
ACCUUUUUCACCUAACUAAAAUAAU
SEQ ID NO:516–DsiRNA 254引导(反义)链
AUUAUUUUAGUUAGGUGAAAAAGGUGU
SEQ ID NO:517–DsiRNA 255过客(有义)链
CUUUUUCACCUAACUAAAAUAAUGU
SEQ ID NO:518–DsiRNA 255引导(反义)链
ACAUUAUUUUAGUUAGGUGAAAAAGGU
SEQ ID NO:519–DsiRNA 256过客(有义)链
UUUUCACCUAACUAAAAUAAUGUUU
SEQ ID NO:520–DsiRNA 256引导(反义)链
AAACAUUAUUUUAGUUAGGUGAAAAAG
SEQ ID NO:521–DsiRNA 257过客(有义)链
UUCACCUAACUAAAAUAAUGUUUAA
SEQ ID NO:522–DsiRNA 257引导(反义)链
UUAAACAUUAUUUUAGUUAGGUGAAAA
SEQ ID NO:523–DsiRNA 258过客(有义)链
UCACCUAACUAAAAUAAUGUUUAAA
SEQ ID NO:524–DsiRNA 258引导(反义)链
UUUAAACAUUAUUUUAGUUAGGUGAAA
SEQ ID NO:525–DsiRNA 259过客(有义)链
CACCUAACUAAAAUAAUGUUUAAAG
SEQ ID NO:526–DsiRNA 259引导(反义)链
CUUUAAACAUUAUUUUAGUUAGGUGAA
SEQ ID NO:527–DsiRNA 260过客(有义)链
ACCUAACUAAAAUAAUGUUUAAAGA
SEQ ID NO:528–DsiRNA 260引导(反义)链
UCUUUAAACAUUAUUUUAGUUAGGUGA
SEQ ID NO:529–DsiRNA 261过客(有义)链
CCUAACUAAAAUAAUGUUUAAAGAG
SEQ ID NO:530–DsiRNA 261引导(反义)链
CUCUUUAAACAUUAUUUUAGUUAGGUG
SEQ ID NO:531–DsiRNA 262过客(有义)链
CUAACUAAAAUAAUGUUUAAAGAGU
SEQ ID NO:532–DsiRNA 262引导(反义)链
ACUCUUUAAACAUUAUUUUAGUUAGGU
SEQ ID NO:533–DsiRNA 263过客(有义)链
UAACUAAAAUAAUGUUUAAAGAGUU
SEQ ID NO:534–DsiRNA 263引导(反义)链
AACUCUUUAAACAUUAUUUUAGUUAGG
SEQ ID NO:535–DsiRNA 264过客(有义)链
AACUAAAAUAAUGUUUAAAGAGUUU
SEQ ID NO:536–DsiRNA 264引导(反义)链
AAACUCUUUAAACAUUAUUUUAGUUAG
SEQ ID NO:537–DsiRNA 265过客(有义)链
ACUAAAAUAAUGUUUAAAGAGUUUU
SEQ ID NO:538–DsiRNA 265引导(反义)链
AAAACUCUUUAAACAUUAUUUUAGUUA
SEQ ID NO:539–DsiRNA 266过客(有义)链
CUAAAAUAAUGUUUAAAGAGUUUUG
SEQ ID NO:540–DsiRNA 266引导(反义)链
CAAAACUCUUUAAACAUUAUUUUAGUU
SEQ ID NO:541–DsiRNA 267过客(有义)链
UAAAAUAAUGUUUAAAGAGUUUUGU
SEQ ID NO:542–DsiRNA 267引导(反义)链
ACAAAACUCUUUAAACAUUAUUUUAGU
SEQ ID NO:543–DsiRNA 268过客(有义)链
AAGAGUUUUGUAUAAAAAUGUAAGG
SEQ ID NO:544–DsiRNA 268引导(反义)链
CCUUACAUUUUUAUACAAAACUCUUUA
SEQ ID NO:545–DsiRNA 269过客(有义)链
GUUUUGUAUAAAAAUGUAAGGAAGC
SEQ ID NO:546–DsiRNA 269引导(反义)链
GCUUCCUUACAUUUUUAUACAAAACUC
SEQ ID NO:547–DsiRNA 270过客(有义)链
UUUUGUAUAAAAAUGUAAGGAAGCG
SEQ ID NO:548–DsiRNA 270引导(反义)链
CGCUUCCUUACAUUUUUAUACAAAACU
SEQ ID NO:549–DsiRNA 271过客(有义)链
UUUGUAUAAAAAUGUAAGGAAGCGU
SEQ ID NO:550–DsiRNA 271引导(反义)链
ACGCUUCCUUACAUUUUUAUACAAAAC
SEQ ID NO:551–DsiRNA 272过客(有义)链
UUGUAUAAAAAUGUAAGGAAGCGUU
SEQ ID NO:552–DsiRNA 272引导(反义)链
AACGCUUCCUUACAUUUUUAUACAAAA
SEQ ID NO:553–DsiRNA 273过客(有义)链
UGUAUAAAAAUGUAAGGAAGCGUUG
SEQ ID NO:554–DsiRNA 273引导(反义)链
CAACGCUUCCUUACAUUUUUAUACAAA
SEQ ID NO:555–DsiRNA 274过客(有义)链
GUAUAAAAAUGUAAGGAAGCGUUGU
SEQ ID NO:556–DsiRNA 274引导(反义)链
ACAACGCUUCCUUACAUUUUUAUACAA
SEQ ID NO:557–DsiRNA 275过客(有义)链
AUGUAAGGAAGCGUUGUUACCUGUU
SEQ ID NO:558–DsiRNA 275引导(反义)链
AACAGGUAACAACGCUUCCUUACAUUU
SEQ ID NO:559–DsiRNA 276过客(有义)链
UUUUGUAUUAUGUGAAUCAGUGAGA
SEQ ID NO:560–DsiRNA 276引导(反义)链
UCUCACUGAUUCACAUAAUACAAAAUU
SEQ ID NO:561–DsiRNA 277过客(有义)链
UUUGUAUUAUGUGAAUCAGUGAGAU
SEQ ID NO:562–DsiRNA 277引导(反义)链
AUCUCACUGAUUCACAUAAUACAAAAU
SEQ ID NO:563–DsiRNA 278过客(有义)链
UUGUAUUAUGUGAAUCAGUGAGAUG
SEQ ID NO:564–DsiRNA 278引导(反义)链
CAUCUCACUGAUUCACAUAAUACAAAA
SEQ ID NO:565–DsiRNA 279过客(有义)链
UGUAUUAUGUGAAUCAGUGAGAUGU
SEQ ID NO:566–DsiRNA 279引导(反义)链
ACAUCUCACUGAUUCACAUAAUACAAA
SEQ ID NO:567–DsiRNA 280过客(有义)链
GUAUUAUGUGAAUCAGUGAGAUGUU
SEQ ID NO:568–DsiRNA 280引导(反义)链
AACAUCUCACUGAUUCACAUAAUACAA
SEQ ID NO:569–DsiRNA 281过客(有义)链
UAUUAUGUGAAUCAGUGAGAUGUUA
SEQ ID NO:570–DsiRNA 281引导(反义)链
UAACAUCUCACUGAUUCACAUAAUACA
SEQ ID NO:571–DsiRNA 282过客(有义)链
AUUAUGUGAAUCAGUGAGAUGUUAG
SEQ ID NO:572–DsiRNA 282引导(反义)链
CUAACAUCUCACUGAUUCACAUAAUAC
SEQ ID NO:573–DsiRNA 283过客(有义)链
UUAUGUGAAUCAGUGAGAUGUUAGU
SEQ ID NO:574–DsiRNA 283引导(反义)链
ACUAACAUCUCACUGAUUCACAUAAUA
SEQ ID NO:575–DsiRNA 284过客(有义)链
UAUGUGAAUCAGUGAGAUGUUAGUA
SEQ ID NO:576–DsiRNA 284引导(反义)链
UACUAACAUCUCACUGAUUCACAUAAU
SEQ ID NO:577–DsiRNA 285过客(有义)链
AUGUGAAUCAGUGAGAUGUUAGUAG
SEQ ID NO:578–DsiRNA 285引导(反义)链
CUACUAACAUCUCACUGAUUCACAUAA
SEQ ID NO:579–DsiRNA 286过客(有义)链
UGUGAAUCAGUGAGAUGUUAGUAGA
SEQ ID NO:580–DsiRNA 286引导(反义)链
UCUACUAACAUCUCACUGAUUCACAUA
SEQ ID NO:581–DsiRNA 287过客(有义)链
GUGAAUCAGUGAGAUGUUAGUAGAA
SEQ ID NO:582–DsiRNA 287引导(反义)链
UUCUACUAACAUCUCACUGAUUCACAU
SEQ ID NO:583–DsiRNA 288过客(有义)链
GUGAGAUGUUAGUAGAAUAAGCCUU
SEQ ID NO:584–DsiRNA 288引导(反义)链
AAGGCUUAUUCUACUAACAUCUCACUG
SEQ ID NO:585–DsiRNA 289过客(有义)链
UUUUCUAUUUAUGCAUUUGAGUACA
SEQ ID NO:586–DsiRNA 289引导(反义)链
UGUACUCAAAUGCAUAAAUAGAAAAAA
SEQ ID NO:587–DsiRNA 290过客(有义)链
UUUCUAUUUAUGCAUUUGAGUACAG
SEQ ID NO:588–DsiRNA 290引导(反义)链
CUGUACUCAAAUGCAUAAAUAGAAAAA
SEQ ID NO:589–DsiRNA 291过客(有义)链
UUCUAUUUAUGCAUUUGAGUACAGT
SEQ ID NO:590–DsiRNA 291引导(反义)链
ACUGUACUCAAAUGCAUAAAUAGAAAA
SEQ ID NO:591–DsiRNA 292过客(有义)链CUAUUUAUGCAUUUGAGUACAGUACSEQ IDNO:592–DsiRNA 292引导(反义)链GUACUGUACUCAAAUGCAUAAAUAGAASEQ ID NO:593–DsiRNA293过客(有义)链UGCUCAAACUGUUAAAUGUUGGAAASEQ ID NO:594–DsiRNA 293引导(反义)链UUUCCAACAUUUAACAGUUUGAGCACASEQ ID NO:–DsiRNA 294过客(有义)链GCUCAAACUGUUAAAUGUUGGAAAA 595SEQ ID NO:596–DsiRNA 294引导(反义)链UUUUCCAACAUUUAACAGUUUGAGCACSEQ ID NO:597–DsiRNA 295过客(有义)链CUCAAACUGUUAAAUGUUGGAAAAGSEQ ID NO:598–DsiRNA 295引导(反义)链CUUUUCCAACAUUUAACAGUUUGAGCASEQ ID NO:599–DsiRNA 296过客(有义)链UCAAACUGUUAAAUGUUGGAAAAGASEQ ID NO:600–DsiRNA 296引导(反义)链
UCUUUUCCAACAUUUAACAGUUUGAGC
SEQ ID NO:601–DsiRNA 297过客(有义)链
CAAACUGUUAAAUGUUGGAAAAGAA
SEQ ID NO:602–DsiRNA 297引导(反义)链
UUCUUUUCCAACAUUUAACAGUUUGAG
SEQ ID NO:603–DsiRNA 298过客(有义)链
AAACUGUUAAAUGUUGGAAAAGAAA
SEQ ID NO:604–DsiRNA 298引导(反义)链
UUUCUUUUCCAACAUUUAACAGUUUGA
SEQ ID NO:605–DsiRNA 299过客(有义)链
AACUGUUAAAUGUUGGAAAAGAAAG
SEQ ID NO:606–DsiRNA 299引导(反义)链
CUUUCUUUUCCAACAUUUAACAGUUUG
SEQ ID NO:607–DsiRNA 300过客(有义)链
ACUGUUAAAUGUUGGAAAAGAAAGA
SEQ ID NO:608–DsiRNA 300引导(反义)链
UCUUUCUUUUCCAACAUUUAACAGUUU
SEQ ID NO:609–DsiRNA 301过客(有义)链
CUGUUAAAUGUUGGAAAAGAAAGAT
SEQ ID NO:610–DsiRNA 301引导(反义)链
AUCUUUCUUUUCCAACAUUUAACAGUU
SEQ ID NO:611–DsiRNA 302过客(有义)链
UGUUAAAUGUUGGAAAAGAAAGATA
SEQ ID NO:612–DsiRNA 302引导(反义)链
UAUCUUUCUUUUCCAACAUUUAACAGU
SEQ ID NO:613–DsiRNA 303过客(有义)链
GUUAAAUGUUGGAAAAGAAAGAUAC
SEQ ID NO:614–DsiRNA 303引导(反义)链
GUAUCUUUCUUUUCCAACAUUUAACAG
SEQ ID NO:615–DsiRNA 304过客(有义)链
UUAAAUGUUGGAAAAGAAAGAUACA
SEQ ID NO:616–DsiRNA 304引导(反义)链
UGUAUCUUUCUUUUCCAACAUUUAACA
SEQ ID NO:617–DsiRNA 305过客(有义)链
UAAAUGUUGGAAAAGAAAGAUACAA
SEQ ID NO:618–DsiRNA 305引导(反义)链
UUGUAUCUUUCUUUUCCAACAUUUAAC
SEQ ID NO:619–DsiRNA 306过客(有义)链
GCACUUGACUGAGAAGACAGACCCT
SEQ ID NO:620–DsiRNA 306引导(反义)链
AGGGUCUGUCUUCUCAGUCAAGUGCUU
SEQ ID NO:621–DsiRNA 307过客(有义)链
GAGAAAAGAGGCUACUUGUGAAAAT
SEQ ID NO:622–DsiRNA 307引导(反义)链
AUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUCUCAA
SEQ ID NO:623–DsiRNA 308过客(有义)链
AGAAAAGAGGCUACUUGUGAAAATA
SEQ ID NO:624–DsiRNA 308引导(反义)链
UAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUCUCA
SEQ ID NO:625–DsiRNA 309过客(有义)链
GAAAAGAGGCUACUUGUGAAAAUAA
SEQ ID NO:626–DsiRNA 309引导(反义)链
UUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUCUC
SEQ ID NO:627–DsiRNA 310过客(有义)链
AAAAGAGGCUACUUGUGAAAAUAAT
SEQ ID NO:628–DsiRNA 310引导(反义)链
AUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUCU
SEQ ID NO:629–DsiRNA 311过客(有义)链
AAAGAGGCUACUUGUGAAAAUAATG
SEQ ID NO:630–DsiRNA 311引导(反义)链
CAUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUC
SEQ ID NO:631–DsiRNA 312过客(有义)链
AAGAGGCUACUUGUGAAAAUAAUGA
SEQ ID NO:632–DsiRNA 312引导(反义)链
UCAUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUU
SEQ ID NO:633–DsiRNA 313过客(有义)链
AGAGGCUACUUGUGAAAAUAAUGAG
SEQ ID NO:634–DsiRNA 313引导(反义)链
CUCAUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUU
SEQ ID NO:635–DsiRNA 314过客(有义)链
GAGGCUACUUGUGAAAAUAAUGAGC
SEQ ID NO:636–DsiRNA 314引导(反义)链
GCUCAUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUU
SEQ ID NO:637–DsiRNA 315过客(有义)链
GGCUACUUGUGAAAAUAAUGAGCCC
SEQ ID NO:638–DsiRNA 315引导(反义)链
GGGCUCAUUAUUUUCACAAGUAGCCUC
SEQ ID NO:639–DsiRNA 316过客(有义)链
CUACUUGUGAAAAUAAUGAGCCCCC
SEQ ID NO:640–DsiRNA 316引导(反义)链
GGGGGCUCAUUAUUUUCACAAGUAGCC
SEQ ID NO:641–DsiRNA 317过客(有义)链
UGAACCUGCCUUCUUACAUCUUGAG
SEQ ID NO:642–DsiRNA 317引导(反义)链
CUCAAGAUGUAAGAAGGCAGGUUCAAA
SEQ ID NO:643–DsiRNA 318过客(有义)链
AAAGUUACAAGUUUCUUUUCCCAAG
SEQ ID NO:644–DsiRNA 318引导(反义)链
CUUGGGAAAAGAAACUUGUAACUUUCC
SEQ ID NO:645–DsiRNA 319过客(有义)链
AAGUUACAAGUUUCUUUUCCCAAGT
SEQ ID NO:646–DsiRNA 319引导(反义)链
ACUUGGGAAAAGAAACUUGUAACUUUC
SEQ ID NO:647–DsiRNA 320过客(有义)链
AGUUACAAGUUUCUUUUCCCAAGTT
SEQ ID NO:648–DsiRNA 320引导(反义)链
AACUUGGGAAAAGAAACUUGUAACUUU
SEQ ID NO:649–DsiRNA 321过客(有义)链
AGUUUCUUUUCCCAAGUUUCCCAGT
SEQ ID NO:650–DsiRNA 321引导(反义)链
ACUGGGAAACUUGGGAAAAGAAACUUG
SEQ ID NO:651–DsiRNA 322过客(有义)链
CAACAGUAUUUUCUAAUAACCAGTA
SEQ ID NO:652–DsiRNA 322引导(反义)链
UACUGGUUAUUAGAAAAUACUGUUGGC
SEQ ID NO:653–DsiRNA 323过客(有义)链
AACAGUAUUUUCUAAUAACCAGUAT
SEQ ID NO:654–DsiRNA 323引导(反义)链
AUACUGGUUAUUAGAAAAUACUGUUGG
SEQ ID NO:655–DsiRNA 324过客(有义)链
ACAGUAUUUUCUAAUAACCAGUATA
SEQ ID NO:656–DsiRNA 324引导(反义)链
UAUACUGGUUAUUAGAAAAUACUGUUG
SEQ ID NO:657–DsiRNA 325过客(有义)链
CAGUAUUUUCUAAUAACCAGUAUAT
SEQ ID NO:658–DsiRNA 325引导(反义)链
AUAUACUGGUUAUUAGAAAAUACUGUU
SEQ ID NO:659–DsiRNA 326过客(有义)链
UUGUGAUUGUUAUCAGGAAAAAATA
SEQ ID NO:660–DsiRNA 326引导(反义)链
UAUUUUUUCCUGAUAACAAUCACAAUA
SEQ ID NO:661–DsiRNA 327过客(有义)链
UGUGAUUGUUAUCAGGAAAAAAUAT
SEQ ID NO:662–DsiRNA 327引导(反义)链
AUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCACAAU
SEQ ID NO:663–DsiRNA 328过客(有义)链
GUGAUUGUUAUCAGGAAAAAAUATA
SEQ ID NO:664–DsiRNA 328引导(反义)链
UAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCACAA
SEQ ID NO:665–DsiRNA 329过客(有义)链
UGAUUGUUAUCAGGAAAAAAUAUAT
SEQ ID NO:666–DsiRNA 329引导(反义)链
AUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCACA
SEQ ID NO:667–DsiRNA 330过客(有义)链
GAUUGUUAUCAGGAAAAAAUAUATT
SEQ ID NO:668–DsiRNA 330引导(反义)链
AAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCAC
SEQ ID NO:669–DsiRNA 331过客(有义)链
AUUGUUAUCAGGAAAAAAUAUAUTA
SEQ ID NO:670–DsiRNA 331引导(反义)链
UAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCA
SEQ ID NO:671–DsiRNA 332过客(有义)链
UUGUUAUCAGGAAAAAAUAUAUUAA
SEQ ID NO:672–DsiRNA 332引导(反义)链
UUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUC
SEQ ID NO:673–DsiRNA 333过客(有义)链
UGUUAUCAGGAAAAAAUAUAUUAAA
SEQ ID NO:674–DsiRNA 333引导(反义)链
UUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAU
SEQ ID NO:675–DsiRNA 334过客(有义)链
GUUAUCAGGAAAAAAUAUAUUAAAT
SEQ ID NO:676–DsiRNA 334引导(反义)链
AUUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAA
SEQ ID NO:677–DsiRNA 335过客(有义)链
UUAUCAGGAAAAAAUAUAUUAAATG
SEQ ID NO:678–DsiRNA 335引导(反义)链
CAUUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACA
SEQ ID NO:679–DsiRNA 336过客(有义)链
UAUCAGGAAAAAAUAUAUUAAAUGG
SEQ ID NO:680–DsiRNA 336引导(反义)链
CCAUUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAAC
SEQ ID NO:681–DsiRNA 337过客(有义)链
AUCAGGAAAAAAUAUAUUAAAUGGC
SEQ ID NO:682–DsiRNA 337引导(反义)链
GCCAUUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAA
SEQ ID NO:683–DsiRNA 338过客(有义)链
AGGAAAAAAUAUAUUAAAUGGCUGA
SEQ ID NO:684–DsiRNA 338引导(反义)链
UCAGCCAUUUAAUAUAUUUUUUCCUGA
SEQ ID NO:685–DsiRNA 339过客(有义)链
GGAAAAAAUAUAUUAAAUGGCUGAT
SEQ ID NO:686–DsiRNA 339引导(反义)链
AUCAGCCAUUUAAUAUAUUUUUUCCUG
SEQ ID NO:687–DsiRNA 340过客(有义)链
GAAAAAAUAUAUUAAAUGGCUGATA
SEQ ID NO:688–DsiRNA 340引导(反义)链
UAUCAGCCAUUUAAUAUAUUUUUUCCU
SEQ ID NO:689–DsiRNA 341过客(有义)链
AAAAAAUAUAUUAAAUGGCUGAUAG
SEQ ID NO:690–DsiRNA 341引导(反义)链
CUAUCAGCCAUUUAAUAUAUUUUUUCC
SEQ ID NO:691–DsiRNA 342过客(有义)链
UAUUUUCUUUCUGCUUUUAAAAATT
SEQ ID NO:692–DsiRNA 342引导(反义)链
AAUUUUUAAAAGCAGAAAGAAAAUACG
SEQ ID NO:693–DsiRNA 343过客(有义)链
AUUUUCUUUCUGCUUUUAAAAAUTA
SEQ ID NO:694–DsiRNA 343引导(反义)链
UAAUUUUUAAAAGCAGAAAGAAAAUAC
SEQ ID NO:695–DsiRNA 344过客(有义)链
UCUUUCUGCUUUUAAAAAUUAUUCA
SEQ ID NO:696–DsiRNA 344引导(反义)链
UGAAUAAUUUUUAAAAGCAGAAAGAAA
SEQ ID NO:697–DsiRNA 345过客(有义)链
CUUUCUGCUUUUAAAAAUUAUUCAG
SEQ ID NO:698–DsiRNA 345引导(反义)链
CUGAAUAAUUUUUAAAAGCAGAAAGAA
SEQ ID NO:699–DsiRNA 346过客(有义)链
UUUCUGCUUUUAAAAAUUAUUCAGG
SEQ ID NO:700–DsiRNA 346引导(反义)链
CCUGAAUAAUUUUUAAAAGCAGAAAGA
SEQ ID NO:701–DsiRNA 347过客(有义)链
CUACUAAAAACACAAAAAUUAGCCA
SEQ ID NO:702–DsiRNA 347引导(反义)链
UGGCUAAUUUUUGUGUUUUUAGUAGAG
SEQ ID NO:703–DsiRNA 348过客(有义)链
CAAGAUAAGGAAAUCAGGAAGUGTA
SEQ ID NO:704–DsiRNA 348引导(反义)链
UACACUUCCUGAUUUCCUUAUCUUGAU
SEQ ID NO:705–DsiRNA 349过客(有义)链
AAGAUAAGGAAAUCAGGAAGUGUAA
SEQ ID NO:706–DsiRNA 349引导(反义)链
UUACACUUCCUGAUUUCCUUAUCUUGA
SEQ ID NO:707–DsiRNA 350过客(有义)链
AGAUAAGGAAAUCAGGAAGUGUAAT
SEQ ID NO:708–DsiRNA 350引导(反义)链
AUUACACUUCCUGAUUUCCUUAUCUUG
SEQ ID NO:709–DsiRNA 351过客(有义)链
GAUAAGGAAAUCAGGAAGUGUAATA
SEQ ID NO:710–DsiRNA 351引导(反义)链
UAUUACACUUCCUGAUUUCCUUAUCUU
SEQ ID NO:711–DsiRNA 352过客(有义)链
AUAAGGAAAUCAGGAAGUGUAAUAT
SEQ ID NO:712–DsiRNA 352引导(反义)链
AUAUUACACUUCCUGAUUUCCUUAUCU
SEQ ID NO:713–DsiRNA 353过客(有义)链
UAAGGAAAUCAGGAAGUGUAAUATT
SEQ ID NO:714–DsiRNA 353引导(反义)链
AAUAUUACACUUCCUGAUUUCCUUAUC
SEQ ID NO:715–DsiRNA 354过客(有义)链
AAGGAAAUCAGGAAGUGUAAUAUTC
SEQ ID NO:716–DsiRNA 354引导(反义)链
GAAUAUUACACUUCCUGAUUUCCUUAU
SEQ ID NO:717–DsiRNA 355过客(有义)链
AGGAAAUCAGGAAGUGUAAUAUUCT
SEQ ID NO:718–DsiRNA 355引导(反义)链
AGAAUAUUACACUUCCUGAUUUCCUUA
SEQ ID NO:719–DsiRNA 356过客(有义)链
GGAAAUCAGGAAGUGUAAUAUUCTT
SEQ ID NO:720–DsiRNA 356引导(反义)链
AAGAAUAUUACACUUCCUGAUUUCCUU
SEQ ID NO:721–DsiRNA 357过客(有义)链
GAAAUCAGGAAGUGUAAUAUUCUTA
SEQ ID NO:722–DsiRNA 357引导(反义)链
UAAGAAUAUUACACUUCCUGAUUUCCU
SEQ ID NO:723–DsiRNA 358过客(有义)链
CUAUGAAUGCAUUCUUAUUUCUUCT
SEQ ID NO:724–DsiRNA 358引导(反义)链
AGAAGAAAUAAGAAUGCAUUCAUAGGC
SEQ ID NO:725–DsiRNA 359过客(有义)链
UAUGAAUGCAUUCUUAUUUCUUCTT
SEQ ID NO:726–DsiRNA 359引导(反义)链
AAGAAGAAAUAAGAAUGCAUUCAUAGG
SEQ ID NO:727–DsiRNA 360过客(有义)链
CUACCACACCCAGCUAGUUUUUUTT
SEQ ID NO:728–DsiRNA 360引导(反义)链
AAAAAAAACUAGCUGGGUGUGGUAGUG
SEQ ID NO:729–DsiRNA 361过客(有义)链
CCACACCCAGCUAGUUUUUUUUUGT
SEQ ID NO:730–DsiRNA 361引导(反义)链
ACAAAAAAAAACUAGCUGGGUGUGGUA
SEQ ID NO:731–DsiRNA 362过客(有义)链
CACACCCAGCUAGUUUUUUUUUGTA
SEQ ID NO:732–DsiRNA 362引导(反义)链
UACAAAAAAAAACUAGCUGGGUGUGGU
SEQ ID NO:733–DsiRNA 363过客(有义)链
GCUAGGAUUACAGGUGUGAGCUACC
SEQ ID NO:734–DsiRNA 363引导(反义)链
GGUAGCUCACACCUGUAAUCCUAGCAC
SEQ ID NO:735–DsiRNA 364过客(有义)链
CUAGGAUUACAGGUGUGAGCUACCA
SEQ ID NO:736–DsiRNA 364引导(反义)链
UGGUAGCUCACACCUGUAAUCCUAGCA
SEQ ID NO:737–DsiRNA 365过客(有义)链
CCAUGCCUGGUCCAACAUUCUUCAT
SEQ ID NO:738–DsiRNA 365引导(反义)链
AUGAAGAAUGUUGGACCAGGCAUGGUA
SEQ ID NO:739–DsiRNA 366过客(有义)链
UGCAGAGUAUGAGCCUGAUUUUGTT
SEQ ID NO:740–DsiRNA 366引导(反义)链
AACAAAAUCAGGCUCAUACUCUGCACU
SEQ ID NO:741–DsiRNA 367过客(有义)链
GCAGAGUAUGAGCCUGAUUUUGUTT
SEQ ID NO:742–DsiRNA 367引导(反义)链
AAACAAAAUCAGGCUCAUACUCUGCAC
SEQ ID NO:743–DsiRNA 368过客(有义)链
CAGAGUAUGAGCCUGAUUUUGUUTA
SEQ ID NO:744–DsiRNA 368引导(反义)链
UAAACAAAAUCAGGCUCAUACUCUGCA
SEQ ID NO:745–DsiRNA 369过客(有义)链
AGAGUAUGAGCCUGAUUUUGUUUAA
SEQ ID NO:746–DsiRNA 369引导(反义)链
UUAAACAAAAUCAGGCUCAUACUCUGC
SEQ ID NO:747–DsiRNA 370过客(有义)链
GAGUAUGAGCCUGAUUUUGUUUAAA
SEQ ID NO:748–DsiRNA 370引导(反义)链
UUUAAACAAAAUCAGGCUCAUACUCUG
SEQ ID NO:749–DsiRNA 371过客(有义)
GGGUGAAACCCCAUCUCUACUAAAA
SEQ ID NO:750–DsiRNA 371引导(反义)链
UUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCACCCAG
SEQ ID NO:751–DsiRNA 372过客(有义)链
GUGAAACCCCAUCUCUACUAAAAAA
SEQ ID NO:752–DsiRNA 372引导(反义)链
UUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCACCC
SEQ ID NO:753–DsiRNA 373过客(有义)链
UGAAACCCCAUCUCUACUAAAAAAT
SEQ ID NO:754–DsiRNA 373引导(反义)链
AUUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCACC
SEQ ID NO:755–DsiRNA 374过客(有义)链
GAAACCCCAUCUCUACUAAAAAATG
SEQ ID NO:756–DsiRNA 374引导(反义)链
CAUUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCAC
SEQ ID NO:757–DsiRNA 375引导(反义)链
AAACCCCAUCUCUACUAAAAAAUGC
SEQ ID NO:758–DsiRNA 375引导(反义)链
GCAUUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCA
SEQ ID NO:759–DsiRNA 376过客(有义)链
AACCCCAUCUCUACUAAAAAAUGCA
SEQ ID NO:760–DsiRNA 376引导(反义)链
UGCAUUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUC
SEQ ID NO:761–DsiRNA 377过客(有义)链
CCCAUCUCUACUAAAAAAUGCAAAA
SEQ ID NO:762–DsiRNA 377引导(反义)链
UUUUGCAUUUUUUAGUAGAGAUGGGGU
SEQ ID NO:763–DsiRNA 378过客(有义)链
AUCAAAACCCUUAUGGCAGACUGTT
SEQ ID NO:764–DsiRNA 378引导(反义)链
AACAGUCUGCCAUAAGGGUUUUGAUAU
SEQ ID NO:765–DsiRNA 379过客(有义)链
UAUUUUAUUUGUCGUGCUUAUAUGT
SEQ ID NO:766–DsiRNA 379引导(反义)链
ACAUAUAAGCACGACAAAUAAAAUACA
SEQ ID NO:767–DsiRNA 380过客(有义)链
GUGUUGCCCAAGUUUCUAUGGUGAA
SEQ ID NO:768–DsiRNA 380引导(反义)链
UUCACCAUAGAAACUUGGGCAACACAU
SEQ ID NO:769–DsiRNA 381过客(有义)链
GCCCAAGUUUCUAUGGUGAACGGTA
SEQ ID NO:770–DsiRNA 381引导(反义)链
UACCGUUCACCAUAGAAACUUGGGCAA
SEQ ID NO:771–DsiRNA 382过客(有义)链
CCCAAGUUUCUAUGGUGAACGGUAT
SEQ ID NO:772–DsiRNA 382引导(反义)链
AUACCGUUCACCAUAGAAACUUGGGCA
SEQ ID NO:773–DsiRNA 383过客(有义)链
ACUUUCAGCAUGAGAAAAUAACUCC
SEQ ID NO:774–DsiRNA 383引导(反义)链
GGAGUUAUUUUCUCAUGCUGAAAGUGA
SEQ ID NO:775–DsiRNA 384过客(有义)链
CUUUCAGCAUGAGAAAAUAACUCCT
SEQ ID NO:776–DsiRNA 384引导(反义)链
AGGAGUUAUUUUCUCAUGCUGAAAGUG
SEQ ID NO:777–PNPLA3寡核苷酸1过客(有义)链
UGAGUGACAACGUACCCUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:778–PNPLA3寡核苷酸1引导(反义)链
UAAGGGUACGUUGUCACUCAGG
SEQ ID NO:779–PNPLA3寡核苷酸2过客(有义)链
GAGUGACAACGUACCCUUCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:780–PNPLA3寡核苷酸2引导(反义)链
UGAAGGGUACGUUGUCACUCGG
SEQ ID NO:781–PNPLA3寡核苷酸3过客(有义)链
AGUGACAACGUACCCUUCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:782–PNPLA3寡核苷酸3引导(反义)链
UUGAAGGGUACGUUGUCACUGG
SEQ ID NO:783–PNPLA3寡核苷酸4过客(有义)链
UGACAACGUACCCUUCAUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:784–PNPLA3寡核苷酸4引导(反义)链
UAAUGAAGGGUACGUUGUCAGG
SEQ ID NO:785–PNPLA3寡核苷酸5过客(有义)链
GACAACGUACCCUUCAUUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:786–PNPLA3寡核苷酸5引导(反义)链
UCAAUGAAGGGUACGUUGUCGG
SEQ ID NO:787–PNPLA3寡核苷酸6过客(有义)链
CAACGUACCCUUCAUUGAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:788–PNPLA3寡核苷酸6引导(反义)链
UAUCAAUGAAGGGUACGUUGGG
SEQ ID NO:789–PNPLA3寡核苷酸7过客(有义)链
AACGUACCCUUCAUUGAUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:790–PNPLA3寡核苷酸7引导(反义)链
UCAUCAAUGAAGGGUACGUUGG
SEQ ID NO:791–PNPLA3寡核苷酸8过客(有义)链
ACGUACCCUUCAUUGAUGCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:792–PNPLA3寡核苷酸8引导(反义)链
UGCAUCAAUGAAGGGUACGUGG
SEQ ID NO:793–PNPLA3寡核苷酸9过客(有义)链
CGUACCCUUCAUUGAUGCCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:794–PNPLA3寡核苷酸9引导(反义)链
UGGCAUCAAUGAAGGGUACGGG
SEQ ID NO:795–PNPLA3寡核苷酸10过客(有义)链
UACCCUUCAUUGAUGCCAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:796–PNPLA3寡核苷酸10引导(反义)链
UUUGGCAUCAAUGAAGGGUAGG
SEQ ID NO:797–PNPLA3寡核苷酸11过客(有义)链
CACGAACUUUCUUCAUGUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:798–PNPLA3寡核苷酸11引导(反义)链
UCACAUGAAGAAAGUUCGUGGG
SEQ ID NO:799–PNPLA3寡核苷酸12过客(有义)链
ACGAACUUUCUUCAUGUGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:800–PNPLA3寡核苷酸12引导(反义)链
UCCACAUGAAGAAAGUUCGUGG
SEQ ID NO:801–PNPLA3寡核苷酸13过客(有义)链
CGAACUUUCUUCAUGUGGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:802–PNPLA3寡核苷酸13引导(反义)链
UUCCACAUGAAGAAAGUUCGGG
SEQ ID NO:803–PNPLA3寡核苷酸14过客(有义)链
ACUUUCUUCAUGUGGACAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:804–PNPLA3寡核苷酸14引导(反义)链
UAUGUCCACAUGAAGAAAGUGG
SEQ ID NO:805–PNPLA3寡核苷酸15过客(有义)链
UUUCUUCAUGUGGACAUCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:806–PNPLA3寡核苷酸15引导(反义)链
UUGAUGUCCACAUGAAGAAAGG
SEQ ID NO:807–PNPLA3寡核苷酸16过客(有义)链
CUUCAUGUGGACAUCACCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:808–PNPLA3寡核苷酸16引导(反义)链
UUGGUGAUGUCCACAUGAAGGG
SEQ ID NO:809–PNPLA3寡核苷酸17过客(有义)链
AUGUGGACAUCACCAAGCUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:810–PNPLA3寡核苷酸17引导(反义)链
UAGCUUGGUGAUGUCCACAUGG
SEQ ID NO:811–PNPLA3寡核苷酸18过客(有义)链
UGUGGACAUCACCAAGCUCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:812–PNPLA3寡核苷酸18引导(反义)链
UGAGCUUGGUGAUGUCCACAGG
SEQ ID NO:813–PNPLA3寡核苷酸19过客(有义)链
GUGGACAUCACCAAGCUCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:814–PNPLA3寡核苷酸19引导(反义)链
UUGAGCUUGGUGAUGUCCACGG
SEQ ID NO:815–PNPLA3寡核苷酸20过客(有义)链
UGGACAUCACCAAGCUCAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:816–PNPLA3寡核苷酸20引导(反义)链
UCUGAGCUUGGUGAUGUCCAGG
SEQ ID NO:817–PNPLA3寡核苷酸21过客(有义)链
AGAUAUGCCUUCGAGGAUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:818–PNPLA3寡核苷酸21引导(反义)链
UUAUCCUCGAAGGCAUAUCUGG
SEQ ID NO:819–PNPLA3寡核苷酸22过客(有义)链
AUGCCUUCGAGGAUAUUUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:820–PNPLA3寡核苷酸22引导(反义)链
UCAAAUAUCCUCGAAGGCAUGG
SEQ ID NO:821–PNPLA3寡核苷酸23过客(有义)链
GCCUUCGAGGAUAUUUGGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:822–PNPLA3寡核苷酸23引导(反义)链
UUCCAAAUAUCCUCGAAGGCGG
SEQ ID NO:823–PNPLA3寡核苷酸24过客(有义)链
UGAAGUCAUCCUCAGAAGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:824–PNPLA3寡核苷酸24引导(反义)链
UCCUUCUGAGGAUGACUUCAGG
SEQ ID NO:825–PNPLA3寡核苷酸25过客(有义)链
GAAGUCAUCCUCAGAAGGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:826–PNPLA3寡核苷酸25引导(反义)链
UCCCUUCUGAGGAUGACUUCGG
SEQ ID NO:827–PNPLA3寡核苷酸26过客(有义)链
AUCCUCAGAAGGGAUGGAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:828–PNPLA3寡核苷酸26引导(反义)链
UAUCCAUCCCUUCUGAGGAUGG
SEQ ID NO:829–PNPLA3寡核苷酸27过客(有义)链
AGUGAAGAAAUGAAAGACAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:830–PNPLA3寡核苷酸27引导(反义)链
UUGUCUUUCAUUUCUUCACUGG
SEQ ID NO:831–PNPLA3寡核苷酸28过客(有义)链
AAGAAAUGAAAGACAAAGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:832–PNPLA3寡核苷酸28引导(反义)链
UCCUUUGUCUUUCAUUUCUUGG
SEQ ID NO:833–PNPLA3寡核苷酸29过客(有义)链
AGAAAUGAAAGACAAAGGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:834–PNPLA3寡核苷酸29引导(反义)链
UACCUUUGUCUUUCAUUUCUGG
SEQ ID NO:835–PNPLA3寡核苷酸30过客(有义)链
GAAAUGAAAGACAAAGGUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:836–PNPLA3寡核苷酸30引导(反义)链
UCACCUUUGUCUUUCAUUUCGG
SEQ ID NO:837–PNPLA3寡核苷酸31过客(有义)链
AAAUGAAAGACAAAGGUGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:838–PNPLA3寡核苷酸31引导(反义)链
UCCACCUUUGUCUUUCAUUUGG
SEQ ID NO:839–PNPLA3寡核苷酸32过客(有义)链
AAUGAAAGACAAAGGUGGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:840–PNPLA3寡核苷酸32引导(反义)链
UUCCACCUUUGUCUUUCAUUGG
SEQ ID NO:841–PNPLA3寡核苷酸33过客(有义)链
AUGAAAGACAAAGGUGGAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:842–PNPLA3寡核苷酸33引导(反义)链
UAUCCACCUUUGUCUUUCAUGG
SEQ ID NO:843–PNPLA3寡核苷酸34过客(有义)链
UGAAAGACAAAGGUGGAUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:844–PNPLA3寡核苷酸34引导(反义)链
UUAUCCACCUUUGUCUUUCAGG
SEQ ID NO:845–PNPLA3寡核苷酸35过客(有义)链
GAAAGACAAAGGUGGAUACAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:846–PNPLA3寡核苷酸35引导(反义)链
UGUAUCCACCUUUGUCUUUCGG
SEQ ID NO:847–PNPLA3寡核苷酸36过客(有义)链
AAGACAAAGGUGGAUACAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:848–PNPLA3寡核苷酸36引导(反义)链
UAUGUAUCCACCUUUGUCUUGG
SEQ ID NO:849–PNPLA3寡核苷酸37过客(有义)链
AGACAAAGGUGGAUACAUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:850–PNPLA3寡核苷酸37引导(反义)链
UCAUGUAUCCACCUUUGUCUGG
SEQ ID NO:851–PNPLA3寡核苷酸38过客(有义)链
GACAAAGGUGGAUACAUGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:852–PNPLA3寡核苷酸38引导(反义)链
UUCAUGUAUCCACCUUUGUCGG
SEQ ID NO:853–PNPLA3寡核苷酸39过客引导(有义)链
ACAAAGGUGGAUACAUGAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:854–PNPLA3寡核苷酸39引导(反义)链
UCUCAUGUAUCCACCUUUGUGG
SEQ ID NO:855–PNPLA3寡核苷酸40过客(有义)链
AAGGUGGAUACAUGAGCAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:856–PNPLA3寡核苷酸40引导(反义)链
UUUGCUCAUGUAUCCACCUUGG
SEQ ID NO:857–PNPLA3寡核苷酸41过客(有义)链
AGGUGGAUACAUGAGCAAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:858–PNPLA3寡核苷酸41引导(反义)链
UCUUGCUCAUGUAUCCACCUGG
SEQ ID NO:859–PNPLA3寡核苷酸42过客(有义)链
UGGAUACAUGAGCAAGAUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:860–PNPLA3寡核苷酸42引导(反义)链
UAAUCUUGCUCAUGUAUCCAGG
SEQ ID NO:861–PNPLA3寡核苷酸43过客(有义)链
GGAUACAUGAGCAAGAUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:862–PNPLA3寡核苷酸43引导(反义)链
UAAAUCUUGCUCAUGUAUCCGG
SEQ ID NO:863–PNPLA3寡核苷酸44过客(有义)链
GAUACAUGAGCAAGAUUUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:864–PNPLA3寡核苷酸44引导(反义)链
UCAAAUCUUGCUCAUGUAUCGG
SEQ ID NO:865–PNPLA3寡核苷酸45过客(有义)链
AUACAUGAGCAAGAUUUGCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:866–PNPLA3寡核苷酸45引导(反义)链
UGCAAAUCUUGCUCAUGUAUGG
SEQ ID NO:867–PNPLA3寡核苷酸46过客(有义)链
UACAUGAGCAAGAUUUGCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:868–PNPLA3寡核苷酸46引导(反义)链
UUGCAAAUCUUGCUCAUGUAGG
SEQ ID NO:869–PNPLA3寡核苷酸47过客(有义)链
ACAUGAGCAAGAUUUGCAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:870–PNPLA3寡核苷酸47引导(反义)链
UUUGCAAAUCUUGCUCAUGUGG
SEQ ID NO:871–PNPLA3寡核苷酸48过客(有义)链
UGAGCAAGAUUUGCAACUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:872–PNPLA3寡核苷酸48引导(反义)链
UAAGUUGCAAAUCUUGCUCAGG
SEQ ID NO:873–PNPLA3寡核苷酸49过客(有义)链
GAGCAAGAUUUGCAACUUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:874–PNPLA3寡核苷酸49引导(反义)链
UCAAGUUGCAAAUCUUGCUCGG
SEQ ID NO:875–PNPLA3寡核苷酸50过客(有义)链
AGCAAGAUUUGCAACUUGCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:876–PNPLA3寡核苷酸50引导(反义)链
UGCAAGUUGCAAAUCUUGCUGG
SEQ ID NO:877–PNPLA3寡核苷酸51过客(有义)链
GCAAGAUUUGCAACUUGCUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:878–PNPLA3寡核苷酸51引导(反义)链
UAGCAAGUUGCAAAUCUUGCGG
SEQ ID NO:879–PNPLA3寡核苷酸52过客(有义)链
CAAGAUUUGCAACUUGCUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:880–PNPLA3寡核苷酸52引导(反义)链
UUAGCAAGUUGCAAAUCUUGGG
SEQ ID NO:881–PNPLA3寡核苷酸53过客(有义)链
AAGAUUUGCAACUUGCUACAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:882–PNPLA3寡核苷酸53引导(反义)链
UGUAGCAAGUUGCAAAUCUUGG
SEQ ID NO:883–PNPLA3寡核苷酸54过客(有义)链
AGAUUUGCAACUUGCUACCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:884–PNPLA3寡核苷酸54引导(反义)链
UGGUAGCAAGUUGCAAAUCUGG
SEQ ID NO:885–PNPLA3寡核苷酸55过客(有义)链
AUUUGCAACUUGCUACCCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:886–PNPLA3寡核苷酸55引导(反义)链
UUGGGUAGCAAGUUGCAAAUGG
SEQ ID NO:887–PNPLA3寡核苷酸56过客(有义)链
UUGCAACUUGCUACCCAUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:888–PNPLA3寡核苷酸56引导(反义)链
UAAUGGGUAGCAAGUUGCAAGG
SEQ ID NO:889–PNPLA3寡核苷酸57过客(有义)链
UGCAACUUGCUACCCAUUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:890–PNPLA3寡核苷酸57引导(反义)链
UUAAUGGGUAGCAAGUUGCAGG
SEQ ID NO:891–PNPLA3寡核苷酸58过客(有义)链
GCAACUUGCUACCCAUUAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:892–PNPLA3寡核苷酸58引导(反义)链
UCUAAUGGGUAGCAAGUUGCGG
SEQ ID NO:893–PNPLA3寡核苷酸59过客(有义)链
CAACUUGCUACCCAUUAGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:894–PNPLA3寡核苷酸59引导(反义)链
UCCUAAUGGGUAGCAAGUUGGG
SEQ ID NO:895–PNPLA3寡核苷酸60过客(有义)链
CUUGCUACCCAUUAGGAUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:896–PNPLA3寡核苷酸60引导(反义)链
UUAUCCUAAUGGGUAGCAAGGG
SEQ ID NO:897–PNPLA3寡核苷酸61过客(有义)链
UGCUACCCAUUAGGAUAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:898–PNPLA3寡核苷酸61引导(反义)链
UAUUAUCCUAAUGGGUAGCAGG
SEQ ID NO:899–PNPLA3寡核苷酸62过客(有义)链
AUUAGGAUAAUGUCUUAUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:900–PNPLA3寡核苷酸62引导(反义)链
UCAUAAGACAUUAUCCUAAUGG
SEQ ID NO:901–PNPLA3寡核苷酸63过客(有义)链
UUAGGAUAAUGUCUUAUGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:902–PNPLA3寡核苷酸63引导(反义)链
UACAUAAGACAUUAUCCUAAGG
SEQ ID NO:903–PNPLA3寡核苷酸64过客(有义)链
UGCGAUUGUCCAGAGACUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:904–PNPLA3寡核苷酸64引导(反义)链
UCAGUCUCUGGACAAUCGCAGG
SEQ ID NO:905–PNPLA3寡核苷酸65过客(有义)链
CGAUUGUCCAGAGACUGGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:906–PNPLA3寡核苷酸65引导(反义)链
UACCAGUCUCUGGACAAUCGGG
SEQ ID NO:907–PNPLA3寡核苷酸66过客(有义)链
GUCCAGAGACUGGUGACAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:908–PNPLA3寡核苷酸66引导(反义)链
UAUGUCACCAGUCUCUGGACGG
SEQ ID NO:909–PNPLA3寡核苷酸67过客(有义)链
AGAGACUGGUGACAUGGCUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:910–PNPLA3寡核苷酸67引导(反义)链
UAGCCAUGUCACCAGUCUCUGG
SEQ ID NO:911–PNPLA3寡核苷酸68过客(有义)链
ACUGGUGACAUGGCUUCCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:912–PNPLA3寡核苷酸68引导(反义)链
UUGGAAGCCAUGUCACCAGUGG
SEQ ID NO:913–PNPLA3寡核苷酸69过客(有义)链
CUCCACCUUUCCCAGUUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:914–PNPLA3寡核苷酸69引导(反义)链
UAAAACUGGGAAAGGUGGAGGG
SEQ ID NO:915–PNPLA3寡核苷酸70过客(有义)链
CACCUUUCCCAGUUUUUCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:916–PNPLA3寡核苷酸70引导(反义)链
UUGAAAAACUGGGAAAGGUGGG
SEQ ID NO:917–PNPLA3寡核苷酸71过客(有义)链
AGUUUUUCACUAGAGAAGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:918–PNPLA3寡核苷酸71引导(反义)链
UUCUUCUCUAGUGAAAAACUGG
SEQ ID NO:919–PNPLA3寡核苷酸72过客(有义)链
AGCAGAUUCUUUCAGAGGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:920–PNPLA3寡核苷酸72引导(反义)链
UACCUCUGAAAGAAUCUGCUGG
SEQ ID NO:921–PNPLA3寡核苷酸73过客(有义)链
GCAGAUUCUUUCAGAGGUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:922–PNPLA3寡核苷酸73引导(反义)链
UCACCUCUGAAAGAAUCUGCGG
SEQ ID NO:923–PNPLA3寡核苷酸74过客(有义)链
AGAUUCUUUCAGAGGUGCUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:924–PNPLA3寡核苷酸74引导(反义)链
UAGCACCUCUGAAAGAAUCUGG
SEQ ID NO:925–PNPLA3寡核苷酸75过客(有义)链
AGGUGCUAAAGUUUCCCAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:926–PNPLA3寡核苷酸75引导(反义)链
UAUGGGAAACUUUAGCACCUGG
SEQ ID NO:927–PNPLA3寡核苷酸76过客(有义)链
AAAGUUUCCCAUCUUUGUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:928–PNPLA3寡核苷酸76引导(反义)链
UCACAAAGAUGGGAAACUUUGG
SEQ ID NO:929–PNPLA3寡核苷酸77过客(有义)链
AGUUUCCCAUCUUUGUGCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:930–PNPLA3寡核苷酸77引导(反义)链
UUGCACAAAGAUGGGAAACUGG
SEQ ID NO:931–PNPLA3寡核苷酸78过客(有义)链
AGCCUCUGAGCUGAGUUGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:932–PNPLA3寡核苷酸78引导(反义)链
UCCAACUCAGCUCAGAGGCUGG
SEQ ID NO:933–PNPLA3寡核苷酸79过客(有义)链
GCCUCUGAGCUGAGUUGGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:934–PNPLA3寡核苷酸79引导(反义)链
UACCAACUCAGCUCAGAGGCGG
SEQ ID NO:935–PNPLA3寡核苷酸80过客(有义)链
CCUCUGAGCUGAGUUGGUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:936–PNPLA3寡核苷酸80引导(反义)链
UAACCAACUCAGCUCAGAGGGG
SEQ ID NO:937–PNPLA3寡核苷酸81过客(有义)链
CUCUGAGCUGAGUUGGUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:938–PNPLA3寡核苷酸81引导(反义)链
UAAACCAACUCAGCUCAGAGGG
SEQ ID NO:939–PNPLA3寡核苷酸82过客(有义)链
UCUGAGCUGAGUUGGUUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:940–PNPLA3寡核苷酸82引导(反义)链
UAAAACCAACUCAGCUCAGAGG
SEQ ID NO:941–PNPLA3寡核苷酸83过客(有义)链
UGAGCUGAGUUGGUUUUAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:942–PNPLA3寡核苷酸83引导(反义)链
UAUAAAACCAACUCAGCUCAGG
SEQ ID NO:943–PNPLA3寡核苷酸84过客(有义)链
UGAGUUGGUUUUAUGAAAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:944–PNPLA3寡核苷酸84引导(反义)链
UUUUUCAUAAAACCAACUCAGG
SEQ ID NO:945–PNPLA3寡核苷酸85过客(有义)链
GAGUUGGUUUUAUGAAAAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:946–PNPLA3寡核苷酸85引导(反义)链
UCUUUUCAUAAAACCAACUCGG
SEQ ID NO:947–PNPLA3寡核苷酸86过客(有义)链
UUGGUUUUAUGAAAAGCUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:948–PNPLA3寡核苷酸86引导(反义)链
UUAGCUUUUCAUAAAACCAAGG
SEQ ID NO:949–PNPLA3寡核苷酸87过客(有义)链
UGGUUUUAUGAAAAGCUAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:950–PNPLA3寡核苷酸87引导(反义)链
UCUAGCUUUUCAUAAAACCAGG
SEQ ID NO:951–PNPLA3寡核苷酸88过客(有义)链
GGUUUUAUGAAAAGCUAGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:952–PNPLA3寡核苷酸88引导(反义)链
UCCUAGCUUUUCAUAAAACCGG
SEQ ID NO:953–PNPLA3寡核苷酸89过客(有义)链
UUUUAUGAAAAGCUAGGAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:954–PNPLA3寡核苷酸89引导(反义)链
UUUCCUAGCUUUUCAUAAAAGG
SEQ ID NO:955–PNPLA3寡核苷酸90过客(有义)链
UAUGAAAAGCUAGGAAGCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:956–PNPLA3寡核苷酸90引导(反义)链
UUGCUUCCUAGCUUUUCAUAGG
SEQ ID NO:957–PNPLA3寡核苷酸91过客(有义)链
AUGAAAAGCUAGGAAGCAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:958–PNPLA3寡核苷酸91引导(反义)链
UUUGCUUCCUAGCUUUUCAUGG
SEQ ID NO:959–PNPLA3寡核苷酸92过客(有义)链
CCAGCACUUAACUCUAAUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:960–PNPLA3寡核苷酸92引导(反义)链
UUAUUAGAGUUAAGUGCUGGGG
SEQ ID NO:961–PNPLA3寡核苷酸93过客(有义)链
CAGCACUUAACUCUAAUACAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:962–PNPLA3寡核苷酸93引导(反义)链
UGUAUUAGAGUUAAGUGCUGGG
SEQ ID NO:963–PNPLA3寡核苷酸94过客(有义)链
UAAUACAUCAGCAUGCGUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:964–PNPLA3寡核苷酸94引导(反义)链
UAACGCAUGCUGAUGUAUUAGG
SEQ ID NO:965–PNPLA3寡核苷酸95过客(有义)链
AAUACAUCAGCAUGCGUUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:966–PNPLA3寡核苷酸95引导(反义)链
UUAACGCAUGCUGAUGUAUUGG
SEQ ID NO:967–PNPLA3寡核苷酸96过客(有义)链
UGCGUUAAUUCAGCUGGUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:968–PNPLA3寡核苷酸96引导(反义)链
UAACCAGCUGAAUUAACGCAGG
SEQ ID NO:969–PNPLA3寡核苷酸97过客(有义)链
GCGUUAAUUCAGCUGGUUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:970–PNPLA3寡核苷酸97引导(反义)链
UCAACCAGCUGAAUUAACGCGG
SEQ ID NO:971–PNPLA3寡核苷酸98过客(有义)链
CGUUAAUUCAGCUGGUUGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:972–PNPLA3寡核苷酸98引导(反义)链
UCCAACCAGCUGAAUUAACGGG
SEQ ID NO:973–PNPLA3寡核苷酸99过客(有义)链
UUAAUUCAGCUGGUUGGGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:974–PNPLA3寡核苷酸99引导(反义)链
UUCCCAACCAGCUGAAUUAAGG
SEQ ID NO:975–PNPLA3寡核苷酸100过客(有义)链
UAAUUCAGCUGGUUGGGAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:976–PNPLA3寡核苷酸100引导(反义)链
UUUCCCAACCAGCUGAAUUAGG
SEQ ID NO:977–PNPLA3寡核苷酸101过客(有义)链
GCAGAGGGUCCCUUACUGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:978–PNPLA3寡核苷酸101引导(反义)链
UUCAGUAAGGGACCCUCUGCGG
SEQ ID NO:979–PNPLA3寡核苷酸102过客(有义)链
CUAUUAAUGGUCAGACUGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:980–PNPLA3寡核苷酸102引导(反义)链
UACAGUCUGACCAUUAAUAGGG
SEQ ID NO:981–PNPLA3寡核苷酸103过客(有义)链
UAUUAAUGGUCAGACUGUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:982–PNPLA3寡核苷酸103引导(反义)链
UAACAGUCUGACCAUUAAUAGG
SEQ ID NO:983–PNPLA3寡核苷酸104过客(有义)链
AUUAAUGGUCAGACUGUUCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:984–PNPLA3寡核苷酸104引导(反义)链
UGAACAGUCUGACCAUUAAUGG
SEQ ID NO:985–PNPLA3寡核苷酸105过客(有义)链
UUAAUGGUCAGACUGUUCCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:986–PNPLA3寡核苷酸105引导(反义)链
UGGAACAGUCUGACCAUUAAGG
SEQ ID NO:987–PNPLA3寡核苷酸106过客(有义)链
UAAUGGUCAGACUGUUCCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:988–PNPLA3寡核苷酸106引导(反义)链
UUGGAACAGUCUGACCAUUAGG
SEQ ID NO:989–PNPLA3寡核苷酸107过客(有义)链
AAUGGUCAGACUGUUCCAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:990–PNPLA3寡核苷酸107引导(反义)链
UCUGGAACAGUCUGACCAUUGG
SEQ ID NO:991–PNPLA3寡核苷酸108过客(有义)链
AGAACACCUUUUUCACCUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:992–PNPLA3寡核苷酸108引导(反义)链
UUAGGUGAAAAAGGUGUUCUGG
SEQ ID NO:993–PNPLA3寡核苷酸109过客(有义)链
GAACACCUUUUUCACCUAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:994–PNPLA3寡核苷酸109引导(反义)链
UUUAGGUGAAAAAGGUGUUCGG
SEQ ID NO:995–PNPLA3寡核苷酸110过客(有义)链
AACACCUUUUUCACCUAACAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:996–PNPLA3寡核苷酸110引导(反义)链
UGUUAGGUGAAAAAGGUGUUGG
SEQ ID NO:997–PNPLA3寡核苷酸111过客(有义)链
ACACCUUUUUCACCUAACUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:998–PNPLA3寡核苷酸111引导(反义)链
UAGUUAGGUGAAAAAGGUGUGG
SEQ ID NO:999–PNPLA3寡核苷酸112过客(有义)链
CACCUUUUUCACCUAACUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1000–PNPLA3寡核苷酸112引导(反义)链
UUAGUUAGGUGAAAAAGGUGGG
SEQ ID NO:1001–PNPLA3寡核苷酸113过客(有义)链
ACCUUUUUCACCUAACUAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1002–PNPLA3寡核苷酸113引导(反义)链
UUUAGUUAGGUGAAAAAGGUGG
SEQ ID NO:1003–PNPLA3寡核苷酸114过客(有义)链
CUUUUUCACCUAACUAAAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1004–PNPLA3寡核苷酸114引导(反义)链
UUUUUAGUUAGGUGAAAAAGGG
SEQ ID NO:1005–PNPLA3寡核苷酸115过客(有义)链
UUUUCACCUAACUAAAAUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1006–PNPLA3寡核苷酸115引导(反义)链
UUAUUUUAGUUAGGUGAAAAGG
SEQ ID NO:1007–PNPLA3寡核苷酸116过客(有义)链
UUCACCUAACUAAAAUAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1008–PNPLA3寡核苷酸116引导(反义)链
UAUUAUUUUAGUUAGGUGAAGG
SEQ ID NO:1009–PNPLA3寡核苷酸117过客(有义)链
UCACCUAACUAAAAUAAUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1010–PNPLA3寡核苷酸117引导(反义)链
UCAUUAUUUUAGUUAGGUGAGG
SEQ ID NO:1011–PNPLA3寡核苷酸118过客(有义)链
CACCUAACUAAAAUAAUGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1012–PNPLA3寡核苷酸118引导(反义)链
UACAUUAUUUUAGUUAGGUGGG
SEQ ID NO:1013–PNPLA3寡核苷酸119过客(有义)链
ACCUAACUAAAAUAAUGUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1014–PNPLA3寡核苷酸119引导(反义)链
UAACAUUAUUUUAGUUAGGUGG
SEQ ID NO:1015–PNPLA3寡核苷酸120过客(有义)链
CCUAACUAAAAUAAUGUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1016–PNPLA3寡核苷酸120引导(反义)链
UAAACAUUAUUUUAGUUAGGGG
SEQ ID NO:1017–PNPLA3寡核苷酸121过客(有义)链
CUAACUAAAAUAAUGUUUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1018–PNPLA3寡核苷酸121引导(反义)链
UUAAACAUUAUUUUAGUUAGGG
SEQ ID NO:1019–PNPLA3寡核苷酸122过客(有义)链
UAACUAAAAUAAUGUUUAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1020–PNPLA3寡核苷酸122引导(反义)链
UUUAAACAUUAUUUUAGUUAGG
SEQ ID NO:1021–PNPLA3寡核苷酸123过客(有义)链
AACUAAAAUAAUGUUUAAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1022–PNPLA3寡核苷酸123引导(反义)链
UUUUAAACAUUAUUUUAGUUGG
SEQ ID NO:1023–PNPLA3寡核苷酸124过客(有义)链
ACUAAAAUAAUGUUUAAAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1024–PNPLA3寡核苷酸124引导(反义)链
UCUUUAAACAUUAUUUUAGUGG
SEQ ID NO:1025–PNPLA3寡核苷酸125过客(有义)链
CUAAAAUAAUGUUUAAAGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1026–PNPLA3寡核苷酸125引导(反义)链
UUCUUUAAACAUUAUUUUAGGG
SEQ ID NO:1027–PNPLA3寡核苷酸126过客(有义)链
UAAAAUAAUGUUUAAAGAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1028–PNPLA3寡核苷酸126引导(反义)链
UCUCUUUAAACAUUAUUUUAGG
SEQ ID NO:1029–PNPLA3寡核苷酸127过客(有义)链
AAGAGUUUUGUAUAAAAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1030–PNPLA3寡核苷酸127引导(反义)链
UAUUUUUAUACAAAACUCUUGG
SEQ ID NO:1031–PNPLA3寡核苷酸128过客(有义)链
GUUUUGUAUAAAAAUGUAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1032–PNPLA3寡核苷酸128引导(反义)链
UUUACAUUUUUAUACAAAACGG
SEQ ID NO:1033–PNPLA3寡核苷酸129过客(有义)链
UUGUAUAAAAAUGUAAGGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1034–PNPLA3寡核苷酸129引导(反义)链
UUCCUUACAUUUUUAUACAAGG
SEQ ID NO:1035–PNPLA3寡核苷酸130过客(有义)链
UGUAUAAAAAUGUAAGGAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1036–PNPLA3寡核苷酸130引导(反义)链
UUUCCUUACAUUUUUAUACAGG
SEQ ID NO:1037–PNPLA3寡核苷酸131过客(有义)链
GUAUAAAAAUGUAAGGAAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1038–PNPLA3寡核苷酸131引导(反义)链
UCUUCCUUACAUUUUUAUACGG
SEQ ID NO:1039–PNPLA3寡核苷酸132过客(有义)链
AUGUAAGGAAGCGUUGUUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1040–PNPLA3寡核苷酸132引导(反义)链
UUAACAACGCUUCCUUACAUGG
SEQ ID NO:1041–PNPLA3寡核苷酸133过客(有义)链
UUUUGUAUUAUGUGAAUCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1042–PNPLA3寡核苷酸133引导(反义)链
UUGAUUCACAUAAUACAAAAGG
SEQ ID NO:1043–PNPLA3寡核苷酸134过客(有义)链
UUUGUAUUAUGUGAAUCAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1044–PNPLA3寡核苷酸134引导(反义)链
UCUGAUUCACAUAAUACAAAGG
SEQ ID NO:1045–PNPLA3寡核苷酸135过客(有义)链
UUGUAUUAUGUGAAUCAGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1046–PNPLA3寡核苷酸135引导(反义)链
UACUGAUUCACAUAAUACAAGG
SEQ ID NO:1047–PNPLA3寡核苷酸136过客(有义)链
GUAUUAUGUGAAUCAGUGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1048–PNPLA3寡核苷酸136引导(反义)链
UUCACUGAUUCACAUAAUACGG
SEQ ID NO:1049–PNPLA3寡核苷酸137过客(有义)链
UAUUAUGUGAAUCAGUGAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1050–PNPLA3寡核苷酸137引导(反义)链
UCUCACUGAUUCACAUAAUAGG
SEQ ID NO:1051–PNPLA3寡核苷酸138过客(有义)链
AUUAUGUGAAUCAGUGAGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1052–PNPLA3寡核苷酸138引导(反义)链
UUCUCACUGAUUCACAUAAUGG
SEQ ID NO:1053–PNPLA3寡核苷酸139过客(有义)链
UUAUGUGAAUCAGUGAGAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1054–PNPLA3寡核苷酸139引导(反义)链
UAUCUCACUGAUUCACAUAAGG
SEQ ID NO:1055–PNPLA3寡核苷酸140过客(有义)链
UAUGUGAAUCAGUGAGAUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1056–PNPLA3寡核苷酸140引导(反义)链
UCAUCUCACUGAUUCACAUAGG
SEQ ID NO:1057–PNPLA3寡核苷酸141过客(有义)链
AUGUGAAUCAGUGAGAUGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1058–PNPLA3寡核苷酸141引导(反义)链
UACAUCUCACUGAUUCACAUGG
SEQ ID NO:1059–PNPLA3寡核苷酸142过客(有义)链
UGUGAAUCAGUGAGAUGUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1060–PNPLA3寡核苷酸142引导(反义)链
UAACAUCUCACUGAUUCACAGG
SEQ ID NO:1061–PNPLA3寡核苷酸143过客(有义)链
GUGAAUCAGUGAGAUGUUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1062–PNPLA3寡核苷酸143引导(反义)链
UUAACAUCUCACUGAUUCACGG
SEQ ID NO:1063–PNPLA3寡核苷酸144过客(有义)链
GUGAGAUGUUAGUAGAAUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1064–PNPLA3寡核苷酸144引导(反义)链
UUAUUCUACUAACAUCUCACGG
SEQ ID NO:1065–PNPLA3寡核苷酸145过客(有义)链
UUUCUAUUUAUGCAUUUGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1066–PNPLA3寡核苷酸145引导(反义)链
UUCAAAUGCAUAAAUAGAAAGG
SEQ ID NO:1067–PNPLA3寡核苷酸146过客(有义)链
CUAUUUAUGCAUUUGAGUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1068–PNPLA3寡核苷酸146引导(反义)链
UUACUCAAAUGCAUAAAUAGGG
SEQ ID NO:1069–PNPLA3寡核苷酸147过客(有义)链
UGCUCAAACUGUUAAAUGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1070–PNPLA3寡核苷酸147引导(反义)链
UACAUUUAACAGUUUGAGCAGG
SEQ ID NO:1071–PNPLA3寡核苷酸148过客(有义)链
GCUCAAACUGUUAAAUGUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1072–PNPLA3寡核苷酸148引导(反义)链
UAACAUUUAACAGUUUGAGCGG
SEQ ID NO:1073–PNPLA3寡核苷酸149过客(有义)链
CUCAAACUGUUAAAUGUUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1074–PNPLA3寡核苷酸149引导(反义)链
UCAACAUUUAACAGUUUGAGGG
SEQ ID NO:1075–PNPLA3寡核苷酸150过客(有义)链
UCAAACUGUUAAAUGUUGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1076–PNPLA3寡核苷酸150引导(反义)链
UCCAACAUUUAACAGUUUGAGG
SEQ ID NO:1077–PNPLA3寡核苷酸151过客(有义)链
CAAACUGUUAAAUGUUGGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1078–PNPLA3寡核苷酸151引导(反义)链
UUCCAACAUUUAACAGUUUGGG
SEQ ID NO:1079–PNPLA3寡核苷酸152过客(有义)链
AAACUGUUAAAUGUUGGAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1080–PNPLA3寡核苷酸152引导(反义)链
UUUCCAACAUUUAACAGUUUGG
SEQ ID NO:1081–PNPLA3寡核苷酸153过客(有义)链
AACUGUUAAAUGUUGGAAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1082–PNPLA3寡核苷酸153引导(反义)链
UUUUCCAACAUUUAACAGUUGG
SEQ ID NO:1083–PNPLA3寡核苷酸154过客(有义)链
UGUUAAAUGUUGGAAAAGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1084–PNPLA3寡核苷酸154引导(反义)链
UUCUUUUCCAACAUUUAACAGG
SEQ ID NO:1085–PNPLA3寡核苷酸155过客(有义)链
GUUAAAUGUUGGAAAAGAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1086–PNPLA3寡核苷酸155引导(反义)链
UUUCUUUUCCAACAUUUAACGG
SEQ ID NO:1087–PNPLA3寡核苷酸156过客(有义)链
UUAAAUGUUGGAAAAGAAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1088–PNPLA3寡核苷酸156引导(反义)链
UUUUCUUUUCCAACAUUUAAGG
SEQ ID NO:1089–PNPLA3寡核苷酸157过客(有义)链
UAAAUGUUGGAAAAGAAAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1090–PNPLA3寡核苷酸157引导(反义)链
UCUUUCUUUUCCAACAUUUAGG
SEQ ID NO:1091–PNPLA3寡核苷酸158过客(有义)链
AGAAAAGAGGCUACUUGUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1092–PNPLA3寡核苷酸158引导(反义)链
UCACAAGUAGCCUCUUUUCUGG
SEQ ID NO:1093–PNPLA3寡核苷酸159过客(有义)链
GAAAAGAGGCUACUUGUGAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1094–PNPLA3寡核苷酸159引导(反义)链
UUCACAAGUAGCCUCUUUUCGG
SEQ ID NO:1095–PNPLA3寡核苷酸160过客(有义)链
AAAAGAGGCUACUUGUGAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1096–PNPLA3寡核苷酸160引导(反义)链
UUUCACAAGUAGCCUCUUUUGG
SEQ ID NO:1097–PNPLA3寡核苷酸161过客(有义)链
AGAGGCUACUUGUGAAAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1098–PNPLA3寡核苷酸161引导(反义)链
UAUUUUCACAAGUAGCCUCUGG
SEQ ID NO:1099–PNPLA3寡核苷酸162过客(有义)链
GAGGCUACUUGUGAAAAUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1100–PNPLA3寡核苷酸162引导(反义)链
UUAUUUUCACAAGUAGCCUCGG
SEQ ID NO:1101–PNPLA3寡核苷酸163过客(有义)链
AAAGUUACAAGUUUCUUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1102–PNPLA3寡核苷酸163引导(反义)链
UAAAAGAAACUUGUAACUUUGG
SEQ ID NO:1103–PNPLA3寡核苷酸164过客(有义)链
CAACAGUAUUUUCUAAUAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1104–PNPLA3寡核苷酸164引导(反义)链
UUUAUUAGAAAAUACUGUUGGG
SEQ ID NO:1105–PNPLA3寡核苷酸165过客(有义)链
AACAGUAUUUUCUAAUAACAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1106–PNPLA3寡核苷酸165引导(反义)链
UGUUAUUAGAAAAUACUGUUGG
SEQ ID NO:1107–PNPLA3寡核苷酸166过客(有义)链
ACAGUAUUUUCUAAUAACCAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1108–PNPLA3寡核苷酸166引导(反义)链
UGGUUAUUAGAAAAUACUGUGG
SEQ ID NO:1109–PNPLA3寡核苷酸167过客(有义)链
CAGUAUUUUCUAAUAACCAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1110–PNPLA3寡核苷酸167引导(反义)链
UUGGUUAUUAGAAAAUACUGGG
SEQ ID NO:1111–PNPLA3寡核苷酸168过客(有义)链
UUGUGAUUGUUAUCAGGAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1112–PNPLA3寡核苷酸168引导(反义)链
UUUCCUGAUAACAAUCACAAGG
SEQ ID NO:1113–PNPLA3寡核苷酸169过客(有义)链
UGUGAUUGUUAUCAGGAAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1114–PNPLA3寡核苷酸169引导(反义)链
UUUUCCUGAUAACAAUCACAGG
SEQ ID NO:1115–PNPLA3寡核苷酸170过客(有义)链
GUGAUUGUUAUCAGGAAAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1116–PNPLA3寡核苷酸170引导(反义)链
UUUUUCCUGAUAACAAUCACGG
SEQ ID NO:1117–PNPLA3寡核苷酸171过客(有义)链
UGAUUGUUAUCAGGAAAAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1118–PNPLA3寡核苷酸171引导(反义)链
UUUUUUCCUGAUAACAAUCAGG
SEQ ID NO:1119–PNPLA3寡核苷酸172过客(有义)链
GAUUGUUAUCAGGAAAAAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1120–PNPLA3寡核苷酸172引导(反义)链
UUUUUUUCCUGAUAACAAUCGG
SEQ ID NO:1121–PNPLA3寡核苷酸173过客(有义)链
AUUGUUAUCAGGAAAAAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1122–PNPLA3寡核苷酸173引导(反义)链
UAUUUUUUCCUGAUAACAAUGG
SEQ ID NO:1123–PNPLA3寡核苷酸174过客(有义)链
UUGUUAUCAGGAAAAAAUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1124–PNPLA3寡核苷酸174引导(反义)链
UUAUUUUUUCCUGAUAACAAGG
SEQ ID NO:1125–PNPLA3寡核苷酸175过客(有义)链
UGUUAUCAGGAAAAAAUAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1126–PNPLA3寡核苷酸175引导(反义)链
UAUAUUUUUUCCUGAUAACAGG
SEQ ID NO:1127–PNPLA3寡核苷酸176过客(有义)链
GUUAUCAGGAAAAAAUAUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1128–PNPLA3寡核苷酸176引导(反义)链
UUAUAUUUUUUCCUGAUAACGG
SEQ ID NO:1129–PNPLA3寡核苷酸177过客(有义)链
UUAUCAGGAAAAAAUAUAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1130–PNPLA3寡核苷酸177引导(反义)链
UAUAUAUUUUUUCCUGAUAAGG
SEQ ID NO:1131–PNPLA3寡核苷酸178过客(有义)链
AGGAAAAAAUAUAUUAAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1132–PNPLA3寡核苷酸178引导(反义)链
UAUUUAAUAUAUUUUUUCCUGG
SEQ ID NO:1133–PNPLA3寡核苷酸179过客(有义)链
GGAAAAAAUAUAUUAAAUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1134–PNPLA3寡核苷酸179引导(反义)链
UCAUUUAAUAUAUUUUUUCCGG
SEQ ID NO:1135–PNPLA3寡核苷酸180过客(有义)链
GAAAAAAUAUAUUAAAUGGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1136–PNPLA3寡核苷酸180引导(反义)链
UCCAUUUAAUAUAUUUUUUCGG
SEQ ID NO:1137–PNPLA3寡核苷酸181过客(有义)链
AUUUUCUUUCUGCUUUUAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1138–PNPLA3寡核苷酸181引导(反义)链
UUUAAAAGCAGAAAGAAAAUGG
SEQ ID NO:1139–PNPLA3寡核苷酸182过客(有义)链
UCUUUCUGCUUUUAAAAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1140–PNPLA3寡核苷酸182引导(反义)链
UAUUUUUAAAAGCAGAAAGAGG
SEQ ID NO:1141–PNPLA3寡核苷酸183过客(有义)链
UAAGGAAAUCAGGAAGUGUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1142–PNPLA3寡核苷酸183引导(反义)链
UACACUUCCUGAUUUCCUUAGG
SEQ ID NO:1143–PNPLA3寡核苷酸184过客(有义)链
AAGGAAAUCAGGAAGUGUAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1144–PNPLA3寡核苷酸184引导(反义)链
UUACACUUCCUGAUUUCCUUGG
SEQ ID NO:1145–PNPLA3寡核苷酸185过客(有义)链
GGAAAUCAGGAAGUGUAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1146–PNPLA3寡核苷酸185引导(反义)链
UAUUACACUUCCUGAUUUCCGG
SEQ ID NO:1147–PNPLA3寡核苷酸186过客(有义)链
CCACACCCAGCUAGUUUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1148–PNPLA3寡核苷酸186引导(反义)链
UAAAAACUAGCUGGGUGUGGGG
SEQ ID NO:1149–PNPLA3寡核苷酸187过客(有义)链
CACACCCAGCUAGUUUUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1150–PNPLA3寡核苷酸187引导(反义)链
UAAAAAACUAGCUGGGUGUGGG
SEQ ID NO:1151–PNPLA3寡核苷酸188过客(有义)链
CUAGGAUUACAGGUGUGAGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1152–PNPLA3寡核苷酸188引导(反义)链
UCUCACACCUGUAAUCCUAGGG
SEQ ID NO:1153–PNPLA3寡核苷酸189过客(有义)链
AGAGUAUGAGCCUGAUUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1154–PNPLA3寡核苷酸189引导(反义)链
UAAAAUCAGGCUCAUACUCUGG
SEQ ID NO:1155–PNPLA3寡核苷酸190过客(有义)链
GAGUAUGAGCCUGAUUUUGAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1156–PNPLA3寡核苷酸190引导(反义)链
UCAAAAUCAGGCUCAUACUCGG
SEQ ID NO:1157–PNPLA3寡核苷酸191过客(有义)链
CCCAUCUCUACUAAAAAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1158–PNPLA3寡核苷酸191引导(反义)链
UAUUUUUUAGUAGAGAUGGGGG
SEQ ID NO:1159–PNPLA3寡核苷酸192过客(有义)链
ACUUUCAGCAUGAGAAAAUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1160–PNPLA3寡核苷酸192引导(反义)链
UAUUUUCUCAUGCUGAAAGUGG
SEQ ID NO:1161–PNPLA3寡核苷酸193过客(有义)链
CUGAGCUGAGUUGGUUUUAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1162–PNPLA3寡核苷酸193引导(反义)链
UUAAAACCAACUCAGCUCAGGG
SEQ ID NO:1163–PNPLA3寡核苷酸194过客(有义)链
GCUGAGUUGGUUUUAUGAAAGCAGCCGAAAGGCUGC
SEQ ID NO:1164–PNPLA3寡核苷酸194引导(有义)链
UUUCAUAAAACCAACUCAGCGG
SEQ ID NO:1165–PNPLA3对照过客(有义)链
CUGUUGAAUUUUGUAUUAUA
SEQ ID NO:1166–PNPLA3对照引导(反义)链
UAUAAUACAAAAUUCAACAGGG
SEQ ID NO:1167–靶序列1
CAACGTACCCTTCATTGAT
SEQ ID NO:1168–靶序列2
TGAAAGACAAAGGTGGATA
SEQ ID NO:1169–靶序列3
TACATGAGCAAGATTTGCA
SEQ ID NO:1170–靶序列4
TGAGCAAGATTTGCAACTT
SEQ ID NO:1171–靶序列5
CTCTGAGCTGAGTTGGTTT
SEQ ID NO:1172–靶序列6
CTTTTTCACCTAACTAAAA
SEQ ID NO:1173–靶序列7
TTCACCTAACTAAAATAAT
SEQ ID NO:1174–靶序列8
CTAACTAAAATAATGTTTA
SEQ ID NO:1175–靶序列9
CTGAGCTGAGTTGGTTTTA
SEQ ID NO:1176–靶序列10
GCTGAGTTGGTTTTATGAA
SEQ ID NO:1177–人工序列
GCAGCCGAAAGGCUGC
表A：
表B
表C
表D

Claims (93)

1.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为至少15个连续核苷酸。
2.如权利要求1所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链的长度为15至50个核苷酸。
3.如权利要求1或2所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链的长度为18至36个核苷酸。
4.如权利要求1至3中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链的长度为15至30个核苷酸。
5.如权利要求1至4中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链的长度为22个核苷酸，并且其中所述反义链和所述有义链形成长度为至少19个核苷酸、任选地长度为至少20个核苷酸的双链体区域。
6.如权利要求1至5中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述具互补性的区域的长度为至少19个连续核苷酸，任选地长度为至少20个核苷酸。
7.如权利要求1至6中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链的3'端包含阐述为S1-L-S2的茎-环，其中S1与S2具互补性，并且其中L形成在S1与S2之间长度为3至5个核苷酸的环。
8.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含长度为15至50个核苷酸的有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为至少15个连续核苷酸。
9.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含长度为15至50个核苷酸的有义链和长度为15至30个核苷酸的反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为至少15个连续核苷酸。
10.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含长度为15至50个核苷酸的有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。
11.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含长度为18至36个核苷酸的有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。
12.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含长度为18至36个核苷酸的有义链和长度为22个核苷酸的反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。
13.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含长度为18至36个核苷酸的有义链和长度为22个核苷酸的反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述有义链的3'端包含阐述为S1-L-S2的茎-环，其中S1与S2互补，并且其中L形成在S1与S2之间长度为3至5个核苷酸的环，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。
14.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含长度为36个核苷酸的有义链和长度为22个核苷酸的反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述有义链的3'端包含阐述为S1-L-S2的茎-环，其中S1与S2互补，并且其中L形成在S1与S2之间长度为3至5个核苷酸的环，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。
15.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含长度为36个核苷酸的有义链和长度为22个核苷酸的反义链，其中所述有义链和所述反义链形成长度为至少19个核苷酸、任选地长度为20个核苷酸的双链体区域，其中所述有义链的3'端包含阐述为S1-L-S2的茎-环，其中S1与S2互补，并且其中L形成在S1与S2之间长度为3至5个核苷酸的环，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。
16.如权利要求7和13至15中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中L为三环或四环。
17.如权利要求16所述的RNAi寡核苷酸，其中L为四环。
18.如权利要求17所述的RNAi寡核苷酸，其中所述四环包含序列5'-GAAA-3'。
19.如权利要求16至18中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中S1和S2的长度为1-10个核苷酸并且具有相同长度。
20.如权利要求19所述的RNAi寡核苷酸，其中S1和S2的长度为1个核苷酸、2个核苷酸、3个核苷酸、4个核苷酸、5个核苷酸、6个核苷酸、7个核苷酸、8个核苷酸、9个核苷酸或10个核苷酸。
21.如权利要求20所述的RNAi寡核苷酸，其中S1和S2的长度为6个核苷酸。
22.如权利要求16至21中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述茎-环包含序列5'-GCAGCCGAAAGGCUGC-3'(SEQ ID NO:1177)。
23.如权利要求1至22中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链包含长度为一个或多个核苷酸的3'悬垂序列。
24.如权利要求23所述的RNAi寡核苷酸，其中所述3'悬垂序列的长度为2个核苷酸，任选其中所述3'悬垂序列为GG。
25.如前述权利要求中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含至少一个经过修饰的核苷酸。
26.如权利要求25所述的RNAi寡核苷酸，其中所述经过修饰的核苷酸包含2'-修饰。
27.如权利要求26所述的RNAi寡核苷酸，其中所述2'-修饰为选自由以下组成的组的修饰：2'-氨基乙基、2'-氟、2'-O-甲基、2'-O-甲氧基乙基以及2'-脱氧-2'-氟-β-d-阿拉伯糖基核酸。
28.如权利要求25至27中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中构成所述寡核苷酸的所有核苷酸均为经过修饰的，任选其中所述修饰为选自由2'-氟和2'-O-甲基组成的组的2'-修饰。
29.如前述权利要求中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含至少一个经过修饰的核苷酸间键联。
30.如权利要求29所述的RNAi寡核苷酸，其中所述至少一个经过修饰的核苷酸间键联为硫代磷酸酯键联。
31.如前述权利要求中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链的5'-核苷酸的糖的4'-碳包含磷酸酯类似物。
32.如权利要求31所述的RNAi寡核苷酸，其中所述磷酸酯类似物为氧甲基膦酸酯、乙烯基膦酸酯或丙二酰基膦酸酯，任选其中所述磷酸酯类似物为包含5'-甲氧基膦酸酯-4'-氧基的4'-磷酸酯类似物。
33.如前述权利要求中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述寡核苷酸的至少一个核苷酸缀合至一个或多个靶向配体。
34.如权利要求33所述的RNAi寡核苷酸，其中各靶向配体包含碳水化合物、氨基糖、胆固醇、多肽或脂质。
35.如权利要求33所述的RNAi寡核苷酸，其中各靶向配体包含N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)部分。
36.如权利要求35所述的RNAi寡核苷酸，其中所述GalNAc部分为单价GalNAc部分、二价GalNAc部分、三价GalNAc部分或四价GalNAc部分。
37.如权利要求16至32中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述茎-环的L的至多4个核苷酸各自缀合至单价GalNAc部分。
38.如权利要求1至37中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ ID NO:9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253、255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477、479、481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553、555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、771、773以及775中的任一者的核苷酸序列，或
其中所述有义链包含SEQ ID NO:777、779、781、783、785、787、789、791、793、795、797、799、801、803、805、807、809、811、813、815、817、819、821、823、825、827、829、831、833、835、837、839、841、843、845、847、849、851、853、855、857、859、861、863、865、867、869、871、873、875、877、879、881、883、885、887、889、891、893、895、897、899、901、903、905、907、909、911、913、915、917、919、921、923、925、927、929、931、933、935、937、939、941、943、945、947、949、951、953、955、957、959、961、963、965、967、969、971、973、975、977、979、981、983、985、987、989、991、993、995、997、999、1001、1003、1005、1007、1009、1011、1013、1015、1017、1019、1021、1023、1025、1027、1029、1031、1033、1035、1037、1039、1041、1043、1045、1047、1049、1051、1053、1055、1057、1059、1061、1063、1065、1067、1069、1071、1073、1075、1077、1079、1081、1083、1085、1087、1089、1091、1093、1095、1097、1099、1101、1103、1105、1107、1109、1111、1113、1115、1117、1119、1121、1123、1125、1127、1129、1131、1133、1135、1137、1139、1141、1143、1145、1147、1149、1151、1153、1155、1157、1159、1161以及1163中的任一者的核苷酸序列，或其中所述有义链包含SEQ ID NO:1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中的任一者的核苷酸序列。
39.如权利要求1至38中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链包含SEQ ID NO:10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、342、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384、386、388、390、392、394、396、398、400、402、404、406、408、410、412、414、416、418、420、422、424、426、428、430、432、434、436、438、440、442、444、446、448、450、452、454、456、458、460、462、464、466、468、470、472、474、476、478、480、482、484、486、488、490、492、494、496、498、500、502、504、506、508、510、512、514、516、518、520、522、524、526、528、530、532、534、536、538、540、542、544、546、548、550、552、554、556、558、560、562、564、566、568、570、572、574、576、578、580、582、584、586、588、590、592、594、596、598、600、602、604、606、608、610、612、614、616、618、620、622、624、626、628、630、632、634、636、638、640、642、644、646、648、650、652、654、656、658、660、662、664、666、668、670、672、674、676、678、680、682、684、686、688、690、692、694、696、698、700、702、704、706、708、710、712、714、716、718、720、722、724、726、728、730、732、734、736、738、740、742、744、746、748、750、752、754、756、758、760、762、764、766、768、770、772、774以及776中的任一者的核苷酸序列，或
其中所述反义链包含SEQ ID NO:778、780、782、784、786、788、790、792、794、796、798、800、802、804、806、808、810、812、814、816、818、820、822、824、826、828、830、832、834、836、838、840、842、844、846、848、850、852、854、856、858、860、862、864、866、868、870、872、874、876、878、880、882、884、886、888、890、892、894、896、898、900、902、904、906、908、910、912、914、916、918、920、922、924、926、928、930、932、934、936、938、940、942、944、946、948、950、952、954、956、958、960、962、964、966、968、970、972、974、976、978、980、982、984、986、988、990、992、994、996、998、1000、1002、1004、1006、1008、1010、1012、1014、1016、1018、1020、1022、1024、1026、1028、1030、1032、1034、1036、1038、1040、1042、1044、1046、1048、1050、1052、1054、1056、1058、1060、1062、1064、1066、1068、1070、1072、1074、1076、1078、1080、1082、1084、1086、1088、1090、1092、1094、1096、1098、1100、1102、1104、1106、1108、1110、1112、1114、1116、1118、1120、1122、1124、1126、1128、1130、1132、1134、1136、1138、1140、1142、1144、1146、1148、1150、1152、1154、1156、1158、1160、1162以及1164中的任一者的核苷酸序列；
或其中所述反义链包含SEQ ID NO:1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301中的任一者的核苷酸序列。
40.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链和所述反义链包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：
(a)SEQ ID NO:787和788，
(b)SEQ ID NO:843和844，
(c)SEQ ID NO:867和868，
(d)SEQ ID NO:871和872，
(e)SEQ ID NO:937和938，
(f)SEQ ID NO:1003和1004，
(g)SEQ ID NO:1007和1008，
(h)SEQ ID NO:1017和1018，
(i)SEQ ID NO:1161和1162，
(j)SEQ ID NO:1163和1164，
(k)SEQ ID NO:1220和1221，
(l)SEQ ID NO:1224和1225，
(m)SEQ ID NO:1230和1231，
(n)SEQ ID NO:1232和1233，
(o)SEQ ID NO:1188和1189，
(p)SEQ ID NO:1190和1191，
(q)SEQ ID NO:1244和1245，
(r)SEQ ID NO:1250和1251-，
(s)SEQ ID NO:1254和1255，以及
(t)SEQ ID NO:1246和1247。
41.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1220中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1221中所列的核苷酸序列。
42.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1224中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1225中所列的核苷酸序列。
43.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1230中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1231中所列的核苷酸序列。
44.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1232中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1233中所列的核苷酸序列。
45.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1188中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1189中所列的核苷酸序列。
46.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1190中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1191中所列的核苷酸序列。
47.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1244中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1245中所列的核苷酸序列。
48.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1250中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1251中所列的核苷酸序列。
49.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1254中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1255中所列的核苷酸序列。
50.如权利要求1至39中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如SEQ IDNO:1246中所列的核苷酸序列，并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1247中所列的核苷酸序列。
51.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中构成所述有义链和所述反义链的所有核苷酸均为经过修饰的，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为至少15个连续核苷酸。
52.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中构成所述有义链和所述反义链的所有核苷酸均为经过修饰的，其中所述反义链的5'-核苷酸的糖的4'-碳包含磷酸酯类似物，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为至少15个连续核苷酸。
53.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中构成所述有义链和所述反义链的所有核苷酸均为经过修饰的，其中所述反义链的5'-核苷酸的糖的4'-碳包含磷酸酯类似物，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为至少15个连续核苷酸。
54.一种用于降低PNPLA3表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中构成所述有义链和所述反义链的所有核苷酸均为经过修饰的，其中所述反义链和所述有义链包含一个或多个2'-氟和2'-O-甲基修饰的核苷酸以及至少一个硫代磷酸酯键联，其中所述反义链的5'-核苷酸的糖的4'-碳包含磷酸酯类似物，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为至少15个连续核苷酸。
55.如权利要求51至54中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中的任一者，或其中所述有义链包含SEQ ID NO:1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中的任一者。
56.如权利要求51至55中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链包含SEQ IDNO:788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中的任一者，或其中所述反义链包含SEQ ID NO:1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中的任一者。
57.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链和所述反义链选自由以下组成的组：
(a)SEQ ID NO:787和788，
(b)SEQ ID NO:843和844，
(c)SEQ ID NO:867和868，
(d)SEQ ID NO:871和872，
(e)SEQ ID NO:937和938，
(f)SEQ ID NO:1003和1004，
(g)SEQ ID NO:1007和1008，
(h)SEQ ID NO:1017和1018，
(i)SEQ ID NO:1161和1162，以及(j)SEQ ID NO:1163和1164，
(k)SEQ ID NO:1220和1221，
(l)SEQ ID NO:1224和1225，
(m)SEQ ID NO:1230和1231，
(n)SEQ ID NO:1232和1233，
(o)SEQ ID NO:1188和1189，
(p)SEQ ID NO:1190和1191，
(q)SEQ ID NO:1244和1245，
(r)SEQ ID NO:1250和1251-，
(s)SEQ ID NO:1254和1255，以及(t)SEQ ID NO:1246和1247。
58.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1220，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1221。
59.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1224，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1225。
60.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1230，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1231。
61.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1232，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1233。
62.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1188，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1189。
63.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1190，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1191。
64.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1244，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1245。
65.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1250，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1251。
66.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1254，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1255。
67.如权利要求51至56中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ IDNO:1246，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1247。
68.一种用于治疗患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的如前述权利要求中任一项所述的RNAi寡核苷酸或其药物组合物，从而治疗所述受试者。
69.一种药物组合物，所述药物组合物包含如权利要求1至67中任一项所述的RNAi寡核苷酸，以及药学上可接受的载体、递送剂或赋形剂。
70.一种向受试者递送寡核苷酸的方法，所述方法包括向所述受试者施用如权利要求69所述的药物组合物。
71.一种用于降低细胞、细胞群体或受试者中的PNPLA3表达的方法，所述方法包括以下步骤：
i.使所述细胞或所述细胞群体与如权利要求1至67中任一项所述的RNAi寡核苷酸或如权利要求69所述的药物组合物接触；或
ii.向所述受试者施用如权利要求1至67中任一项所述的RNAi寡核苷酸，或如权利要求69所述的药物组合物。
72.如权利要求71所述的方法，其中降低PNPLA3表达包括降低PNPLA3 mRNA的量或水平、PNPLA3蛋白的量或水平或两者。
73.如权利要求71或72所述的方法，其中所述受试者患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患。
74.如权利要求73所述的方法，其中所述与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患为心脏代谢疾病、酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝细胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
75.如权利要求68和70至74中任一项所述的方法，其中所述RNAi寡核苷酸或所述药物组合物与第二组合物或治疗剂组合施用。
76.一种用于治疗患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包含有义链和反义链的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包含与SEQ ID NO:1167至1176中的任一者的PNPLA3 mRNA靶序列具互补性的区域，并且其中所述具互补性的区域的长度为至少15个连续核苷酸。
77.一种用于治疗患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包含从表1、表3、表A、表B、表C或表D中所列的行选择的有义链和反义链的RNAi寡核苷酸或其药物组合物，从而治疗所述受试者。
78.一种用于治疗患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包含有义链和反义链的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链和所述反义链包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：
(a)SEQ ID NO:787和788，
(b)SEQ ID NO:843和844，
(c)SEQ ID NO:867和868，
(d)SEQ ID NO:871和872，
(e)SEQ ID NO:937和938，
(f)SEQ ID NO:1003和1004，
(g)SEQ ID NO:1007和1008，
(h)SEQ ID NO:1017和1018，
(i)SEQ ID NO:1161和1162，以及
(j)SEQ ID NO:1163和1164，
(k)SEQ ID NO:1220和1221，
(l)SEQ ID NO:1224和1225，
(m)SEQ ID NO:1230和1231，
(n)SEQ ID NO:1232和1233，
(o)SEQ ID NO:1188和1189，
(p)SEQ ID NO:1190和1191，
(q)SEQ ID NO:1244和1245，
(r)SEQ ID NO:1250和1251-，
(s)SEQ ID NO:1254和1255，以及
(t)SEQ ID NO:1246和1247。
79.一种用于治疗患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患之受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包含有义链和反义链的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链和所述反义链选自由以下组成的组：
(a)SEQ ID NO:787和788，
(b)SEQ ID NO:843和844，
(c)SEQ ID NO:867和868，
(d)SEQ ID NO:871和872，
(e)SEQ ID NO:937和938，
(f)SEQ ID NO:1003和1004，
(g)SEQ ID NO:1007和1008，
(h)SEQ ID NO:1017和1018，
(i)SEQ ID NO:1161和1162，以及(j)SEQ ID NO:1163和1164，
(k)SEQ ID NO:1220和1221，
(l)SEQ ID NO:1224和1225，
(m)SEQ ID NO:1230和1231，
(n)SEQ ID NO:1232和1233，
(o)SEQ ID NO:1188和1189，
(p)SEQ ID NO:1190和1191，
(q)SEQ ID NO:1244和1245，
(r)SEQ ID NO:1250和1251-，
(s)SEQ ID NO:1254和1255，以及
(t)SEQ ID NO:1246和1247。
80.如权利要求79所述的方法，其中所述有义链包含SEQ ID NO:1224，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1225；或其中所述有义链包含如SEQ ID NO:1220中所列的核苷酸序列并且其中所述反义链包含如SEQ ID NO:1221中所列的核苷酸序列。
81.如权利要求79所述的方法，其中所述有义链包含SEQ ID NO:1230，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1231。
82.如权利要求79所述的方法，其中所述有义链包含SEQ ID NO:1232，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1233。
83.如权利要求79所述的方法，其中所述有义链包含SEQ ID NO:1188，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1189。
84.如权利要求79所述的方法，其中所述有义链包含SEQ ID NO:1190，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1191。
85.如权利要求79所述的方法，其中所述有义链包含SEQ ID NO:1244，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1245。
86.如权利要求79所述的方法，其中所述有义链包含SEQ ID NO:1250，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1251。
87.如权利要求79所述的方法，其中所述有义链包含SEQ ID NO:1254，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1255。
88.如权利要求79所述的方法，其中所述有义链包含SEQ ID NO:1246，并且其中所述反义链包含SEQ ID NO:1247。
89.如权利要求76至88中任一项所述的方法，其中所述与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患选自由以下组成的组：心脏代谢疾病、酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝细胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)以及非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
90.如权利要求1至67中任一项所述的RNAi寡核苷酸或如权利要求69所述的药物组合物的用途，所述用途是用于制造用于治疗与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患，任选用于治疗心脏代谢疾病、酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝细胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的药剂。
91.如权利要求1至67中任一项所述的RNAi寡核苷酸或如权利要求69所述的药物组合物，所述RNAi寡核苷酸或所述药物组合物供用于或适合于用于治疗与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患，任选用于治疗心脏代谢疾病、酒精性肝炎(AH)、CCA、PSC、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝细胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
92.一种药盒，所述药盒包含如权利要求1至67中任一项所述的RNAi寡核苷酸、任选的药学上可接受的载体以及包装插页，所述包装插页包含关于向患有与PNPLA3表达相关的疾病、病症或疾患的受试者施用的说明书。
93.如权利要求90所述的用途、如权利要求91所述的供使用或适合于使用的RNAi寡核苷酸或药物组合物或如权利要求92所述的药盒，其中所述与PNPLA3表达相关疾病、病症或疾患为心脏代谢疾病、酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝细胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
CN202280028149.3A 2021-04-14 2022-04-13 用于调节pnpla3表达的组合物和方法 Pending CN117120613A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163174932P 2021-04-14 2021-04-14
US63/174932 2021-04-14
PCT/US2022/024657 WO2022221430A1 (en) 2021-04-14 2022-04-13 Compositions and methods for modulating pnpla3 expression

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN117120613A true CN117120613A (zh) 2023-11-24

Family

ID=81580082

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280028149.3A Pending CN117120613A (zh) 2021-04-14 2022-04-13 用于调节pnpla3表达的组合物和方法

Country Status (12)

Country Link
US (1) US12084662B2 (zh)
EP (1) EP4323519A1 (zh)
JP (1) JP2024514880A (zh)
KR (1) KR20230171431A (zh)
CN (1) CN117120613A (zh)
AR (1) AR125351A1 (zh)
AU (1) AU2022258459A1 (zh)
BR (1) BR112023021109A2 (zh)
CA (1) CA3209418A1 (zh)
IL (1) IL307625A (zh)
MX (1) MX2023012216A (zh)
WO (1) WO2022221430A1 (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230171431A (ko) 2021-04-14 2023-12-20 다이서나 파마수이티컬, 인크. Pnpla3 발현을 조절하기 위한 조성물 및 방법
WO2024112865A1 (en) 2022-11-23 2024-05-30 Eli Lilly And Company Method of synthesizing 4'-phosphate analog nucleotide phosphoramidite
WO2024112877A1 (en) 2022-11-23 2024-05-30 Eli Lilly And Company Methods of synthesizing a targeting ligand-conjugated nucleotide phosphoramidite
WO2024182446A2 (en) * 2023-02-28 2024-09-06 Aligos Therapeutics, Inc. Pnpla3-targeting short interfering rna (sirna) molecules and uses thereof

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6469158B1 (en) 1992-05-14 2002-10-22 Ribozyme Pharmaceuticals, Incorporated Synthesis, deprotection, analysis and purification of RNA and ribozymes
US5977343A (en) 1992-05-14 1999-11-02 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Synthesis, deprotection, analysis and purification of RNA and ribozymes
US5804683A (en) 1992-05-14 1998-09-08 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Deprotection of RNA with alkylamine
JPH09502092A (ja) 1993-09-02 1997-03-04 リボザイム・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 非ヌクレオチドを含有する酵素性核酸
US5889136A (en) 1995-06-09 1999-03-30 The Regents Of The University Of Colorado Orthoester protecting groups in RNA synthesis
US5998203A (en) 1996-04-16 1999-12-07 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Enzymatic nucleic acids containing 5'-and/or 3'-cap structures
US6111086A (en) 1998-02-27 2000-08-29 Scaringe; Stephen A. Orthoester protecting groups
DK1309726T4 (en) 2000-03-30 2019-01-28 Whitehead Inst Biomedical Res RNA Sequence-Specific Mediators of RNA Interference
CZ308053B6 (cs) 2000-12-01 2019-11-27 Max Planck Gesellschaft Izolovaná molekula dvouřetězcové RNA, způsob její výroby a její použití
US20050159378A1 (en) 2001-05-18 2005-07-21 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated inhibition of Myc and/or Myb gene expression using short interfering nucleic acid (siNA)
US7259150B2 (en) 2001-08-07 2007-08-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of apolipoprotein (a) expression
WO2003040395A2 (en) 2001-11-07 2003-05-15 Applera Corporation Universal nucleotides for nucleic acid analysis
US20070265220A1 (en) 2004-03-15 2007-11-15 City Of Hope Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded RNA
US20090018097A1 (en) 2005-09-02 2009-01-15 Mdrna, Inc Modification of double-stranded ribonucleic acid molecules
ES2708944T3 (es) 2008-09-22 2019-04-12 Dicerna Pharmaceuticals Inc Composiciones y métodos para la inhibición específica de la expresión de genes por DSRNA que tenga modificaciones
EP3067359A1 (en) 2008-09-23 2016-09-14 Scott G. Petersen Self delivering bio-labile phosphate protected pro-oligos for oligonucleotide based therapeutics and mediating rna interference
US8513207B2 (en) 2008-12-18 2013-08-20 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Extended dicer substrate agents and methods for the specific inhibition of gene expression
WO2010093788A2 (en) 2009-02-11 2010-08-19 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Multiplex dicer substrate rna interference molecules having joining sequences
US8927513B2 (en) 2009-07-07 2015-01-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 5′ phosphate mimics
US9725479B2 (en) 2010-04-22 2017-08-08 Ionis Pharmaceuticals, Inc. 5′-end derivatives
RU2014119787A (ru) 2011-10-25 2015-12-10 Айсис Фармасьютикалс, Инк. Антисмысловая регуляция экспрессии gccr
RU2015126856A (ru) 2012-12-06 2017-01-13 Мерк Шарп И Доум Корп. Дисульфидные маскированные пролекарственные композиции и способы
RU2686080C2 (ru) 2013-05-01 2019-04-24 Ионис Фармасьютикалз, Инк. Композиции и способы
US10150965B2 (en) 2013-12-06 2018-12-11 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for the specific inhibition of transthyretin (TTR) by double-stranded RNA
JP2017522046A (ja) 2014-06-06 2017-08-10 ソルスティス バイオロジクス，リミティッド 生物可逆的および生物不可逆的基を有するポリヌクレオチド構築物
CA2970801C (en) 2014-12-15 2024-02-13 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Ligand-modified double-stranded nucleic acids
CA2976445A1 (en) 2015-02-13 2016-08-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Patatin-like phospholipase domain containing 3 (pnpla3) irna compositions and methods of use thereof
CN109890207B (zh) 2016-08-23 2022-05-27 迪克纳制药公司 包含可逆修饰的寡核苷酸的组合物及其用途
CN110072530A (zh) 2016-09-02 2019-07-30 迪克纳制药公司 4′-磷酸酯类似物和包含其的寡核苷酸
JP7557941B2 (ja) 2017-06-02 2024-09-30 ウェイブ ライフ サイエンシズ リミテッド オリゴヌクレオチド組成物及びその使用方法
WO2019006375A1 (en) * 2017-06-29 2019-01-03 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING HMGB1 EXPRESSION
UY38003A (es) 2017-12-12 2019-06-28 Amgen Inc Construcciones de arni para inhibir la expresión de pnpla3 y métodos de uso de las mismas
TW202423454A (zh) 2018-09-19 2024-06-16 美商Ionis製藥公司 Pnpla3表現之調節劑
AR117297A1 (es) * 2018-12-10 2021-07-28 Amgen Inc Constructos de arni para inhibir la expresión de pnpla3 y métodos de uso de estos
CA3153026A1 (en) * 2019-10-02 2021-04-08 Weimin Wang Chemical modifications of small interfering rna with minimal fluorine content
KR20230171431A (ko) 2021-04-14 2023-12-20 다이서나 파마수이티컬, 인크. Pnpla3 발현을 조절하기 위한 조성물 및 방법

Also Published As

Publication number Publication date
KR20230171431A (ko) 2023-12-20
WO2022221430A1 (en) 2022-10-20
IL307625A (en) 2023-12-01
CA3209418A1 (en) 2022-10-20
AU2022258459A1 (en) 2023-09-14
JP2024514880A (ja) 2024-04-03
US12084662B2 (en) 2024-09-10
EP4323519A1 (en) 2024-02-21
US20220364098A1 (en) 2022-11-17
BR112023021109A2 (pt) 2023-12-12
MX2023012216A (es) 2023-10-26
TW202300645A (zh) 2023-01-01
AR125351A1 (es) 2023-07-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7398007B2 (ja) Ａｎｇｐｔｌ３発現を阻害する組成物及び方法
WO2022032288A1 (en) Compositions and methods for inhibiting lpa expression
CN117120613A (zh) 用于调节pnpla3表达的组合物和方法
CN117120612A (zh) 用于抑制己酮糖激酶（khk）的组合物及方法
US20220072024A1 (en) Compositions and methods for inhibiting hmgb1 expression
JP7453921B2 (ja) Ｇｙｓ２発現を阻害するための組成物及び方法
JP2024071571A (ja) ミトコンドリアアミドキシム還元成分１（ｍａｒｃ１）発現を阻害するための組成物および方法
TWI857290B (zh) 用於調節ｐｎｐｌａ３表現之組合物及方法
US20230272393A1 (en) Compositions and methods for modulating apoc3 expression
US20230374522A1 (en) Compositions and methods for modulating scap activity
CN117396606A (zh) 用于抑制线粒体偕胺肟还原组分1（marc1）表达的组合物和方法
CN117280031A (zh) 用于抑制核受体亚家族1组h成员3（nr1h3）表达的组合物和方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination