TW202300645A

TW202300645A - 用於調節ｐｎｐｌａ３表現之組合物及方法

Info

Publication number: TW202300645A
Application number: TW111114009A
Authority: TW
Inventors: 烏薩夫薩克森納; 亨立克Ｔ杜迪克; 馬克艾布蘭; 安東杜拉諾; 鮑伯戴爾布朗
Original assignee: 美商戴瑟納製藥股份有限公司
Priority date: 2021-04-14
Filing date: 2022-04-13
Publication date: 2023-01-01
Also published as: AU2022258459A1; US20220364098A1; KR20230171431A; BR112023021109A2; JP2024514880A; CA3209418A1; WO2022221430A1; EP4323519A1; AR125351A1; IL307625A; CN117120613A

Abstract

揭示用於抑制或降低含patatin樣磷脂酶結構域蛋白3 ( PNPLA3)基因表現之寡核苷酸及包括該等寡核苷酸之組合物。亦揭示製備及使用該等寡核苷酸之方法，特定而言揭示與治療與 PNPLA3表現相關之疾病、病症及/或疾患有關之用途。

Description

用於調節PNPLA3表現之組合物及方法

本發明總體上係關於生物學及醫學，且更特定而言其係關於使用寡核苷酸組合物來抑制或降低含patatin樣磷脂酶結構域蛋白3 ( PNPLA3)基因表現，以及其用途，特定而言與治療與PNPLA3相關之疾病、病症及/或疾患有關之用途。

PNPLA3為由 PNPLA3編碼之蛋白質且為具有三醯基甘油酯酶及醯基甘油轉醯酶活性的蛋白質。人類 PNPLA3在肝臟中高度表現且在脂肪組織、腦、腎臟及皮膚中適度表現。

本文中特別關注在人類PNPLA3中之位置148的異白胺酸(Ile/I)至甲硫胺酸(Met/M)之突變(I148M或PNPLA3 148M；亦即，PNPLA3 rs738409)。參見Pingitore及Romeo (2019) Biochim. Biophys. Acta Mol. Cell Biol. Lipids 1864:900-906。與野生型PNPLA3相比，PNPLA3 148M缺乏脂酶活性，但似乎具有增加之轉醯酶活性。參見Kumari等(2012) Cell Metab .15:691-702。

PNPLA3 148M與由甘油三酯(TG)累積、肝損傷及纖維化引起之廣譜肝病，包括酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝細胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)及非酒精性脂肪性肝炎(NASH)強烈相關。由蛋白酶體引起之PNPLA3 148M降解似乎延遲，此使得在脂質微滴表面之蛋白質累積且不允許其他蛋白質代謝肝細胞中之TG。因而，降低PNPLA3 148M表現可允許其他脂酶正常起作用且逆轉PNPLA3 I148M在多種病變中之有害作用。

若干基於RNA的治療劑已知用於試圖抑制或降低 PNPLA3表現。舉例而言，國際專利申請公開案第WO 2016/130806號及第WO 2019/118638號描述用於抑制或降低 PNPLA3表現之雙股(ds) RNAi構築體，以及使用該等雙股(ds) RNAi構築體來治療或預防諸如NAFLD之肝病之方法。另外，國際專利申請公開案第WO 2020/061200號描述用於抑制或降低 PNPLA3表現之反義寡核苷酸。

儘管存在一些定向至 PNPLA3之治療劑，但仍需要其他用於抑制或降低 PNPLA3表現以便治療肝病之治療劑。

為解決此需要，本發明描述用於治療與 PNPLA3表現有關之疾病、病症及/或疾患之組合物及方法。本發明係部分基於發現及開發用於選擇性抑制及/或降低例如肝臟中之 PNPLA3表現之ds寡核苷酸(例如RNAi寡核苷酸)。因此，已鑑定 PNPLA3內之目標序列，且已產生結合至此等目標序列且抑制PNPLA3 mRNA表現之RNAi寡核苷酸。如本文所示，RNAi寡核苷酸抑制肝臟中之人類及食蟹猴 PNPLA3表現。在不受理論約束之情況下，本文之RNAi寡核苷酸適用於治療與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患(例如肝病，諸如AH、ALD、肝硬化、HCC、膽管細胞癌(CCA)、原發性硬化性膽管炎(PSC)、NAFLD及NASH)。總體而言，本文之RNAi寡核苷酸適用於治療與異常 PNPLA3表現(例如突變體 PNPLA3等位基因表現)相關之疾病、病症或疾患。特定而言，本文之RNAi寡核苷酸適用於治療與突變體 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患。

因此，本發明描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括具有如表1 (例如SEQ ID NO: 9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253、255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477、479、481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553、555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、771、773及775)或表3 (例如SEQ ID NO: 777、779、781、783、785、787、789、791、793、795、797、799、801、803、805、807、809、811、813、815、817、819、821、823、825、827、829、831、833、835、837、839、841、843、845、847、849、851、853、855、857、859、861、863、865、867、869、871、873、875、877、879、881、883、885、887、889、891、893、895、897、899、901、903、905、907、909、911、913、915、917、919、921、923、925、927、929、931、933、935、937、939、941、943、945、947、949、951、953、955、957、959、961、963、965、967、969、971、973、975、977、979、981、983、985、987、989、991、993、995、997、999、1001、1003、1005、1007、1009、1011、1013、1015、1017、1019、1021、1023、1025、1027、1029、1031、1033、1035、1037、1039、1041、1043、1045、1047、1049、1051、1053、1055、1057、1059、1061、1063、1065、1067、1069、1071、1073、1075、1077、1079、1081、1083、1085、1087、1089、1091、1093、1095、1097、1099、1101、1103、1105、1107、1109、1111、1113、1115、1117、1119、1121、1123、1125、1127、1129、1131、1133、1135、1137、1139、1141、1143、1145、1147、1149、1151、1153、1155、1157、1159、1161及1163)中所列之序列，尤其SEQ ID NO: 787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中之任一者的有義股。

或者，本發明描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括具有如表1 (例如SEQ ID NO: 10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、342、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384、386、388、390、392、394、396、398、400、402、404、406、408、410、412、414、416、418、420、422、424、426、428、430、432、434、436、438、440、442、444、446、448、450、452、454、456、458、460、462、464、466、468、470、472、474、476、478、480、482、484、486、488、490、492、494、496、498、500、502、504、506、508、510、512、514、516、518、520、522、524、526、528、530、532、534、536、538、540、542、544、546、548、550、552、554、556、558、560、562、564、566、568、570、572、574、576、578、580、582、584、586、588、590、592、594、596、598、600、602、604、606、608、610、612、614、616、618、620、622、624、626、628、630、632、634、636、638、640、642、644、646、648、650、652、654、656、658、660、662、664、666、668、670、672、674、676、678、680、682、684、686、688、690、692、694、696、698、700、702、704、706、708、710、712、714、716、718、720、722、724、726、728、730、732、734、736、738、740、742、744、746、748、750、752、754、756、758、760、762、764、766、768、770、772、774及776)或表3 (例如SEQ ID NO: 778、780、782、784、786、788、790、792、794、796、798、800、802、804、806、808、810、812、814、816、818、820、822、824、826、828、830、832、834、836、838、840、842、844、846、848、850、852、854、856、858、860、862、864、866、868、870、872、874、876、878、880、882、884、886、888、890、892、894、896、898、900、902、904、906、908、910、912、914、916、918、920、922、924、926、928、930、932、934、936、938、940、942、944、946、948、950、952、954、956、958、960、962、964、966、968、970、972、974、976、978、980、982、984、986、988、990、992、994、996、998、1000、1002、1004、1006、1008、1010、1012、1014、1016、1018、1020、1022、1024、1026、1028、1030、1032、1034、1036、1038、1040、1042、1044、1046、1048、1050、1052、1054、1056、1058、1060、1062、1064、1066、1068、1070、1072、1074、1076、1078、1080、1082、1084、1086、1088、1090、1092、1094、1096、1098、1100、1102、1104、1106、1108、1110、1112、1114、1116、1118、1120、1122、1124、1126、1128、1130、1132、1134、1136、1138、1140、1142、1144、1146、1148、1150、1152、1154、1156、1158、1160、1162及1164)中所列之序列，尤其SEQ ID NO: 788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中之任一者的反義股。

在某些實施例中，本發明描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括具有如表A、B、C或D (例如SEQ ID NO: 1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300)中所列之序列的有義股。

在某些實施例中，本發明描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括具有如表A、B、C或D (例如SEQ ID NO: 1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301)中所列之序列的反義股。

在一些實施例中，描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括反義股及有義股，其中反義股具有如表1或表3中所列之序列，且其中有義股具有如表1或表3中所列之序列。

在一些實施例中，描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括反義股及有義股，其中反義股具有如表A、表B、表C或表D中所列之序列，且其中有義股具有如表A、表B、表C或表D中所列之序列。

在一些實施例中，描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括反義股及有義股，其中反義及有義股形成雙鏈體區域，且其中反義股具有與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域。

在以上實施例中之任一者中，反義股之長度為約15個核苷酸至約30個核苷酸。在一些實施例中，反義股為約20個核苷酸至約25個核苷酸。在一些實施例中，反義股之長度為22個核苷酸。

在以上實施例中之任一者中，有義股之長度為約15個核苷酸至約50個核苷酸。在一些情況下，有義股之長度為約20個核苷酸至約40個核苷酸。在一些實施例中，有義股之長度為36個核苷酸。

在以上實施例中之任一者中，雙鏈體區域之長度為約19個核苷酸至長度為約21個核苷酸。在某些實施例中，雙鏈體區域之長度為20個核苷酸。

在以上實施例中之任一者中，具互補性之區域的長度為至少15個連續核苷酸。在一些實施例中，具互補性之區域的長度為約19個連續核苷酸至長度為約21個連續核苷酸。在其他實施例中，具互補性之區域的長度為19個連續核苷酸或長度為21個連續核苷酸。

在以上實施例中之任一者中，RNAi寡核苷酸在有義股上在3'端包括闡述為S1-L-S2之莖-環，其中S1與S2互補，且其中L形成在S1與S2之間長度為約3至約5個核苷酸之環。

在以上實施例中之任一者中，反義股、有義股或兩者具有懸垂序列。在一些實施例中，反義股包括長度為1個或更多個核苷酸之3'-懸垂物。在其他實施例中，3'-懸垂序列之長度為2個核苷酸，諸如GG。

亦描述包括反義股及有義股之寡核苷酸，其中反義股可為長度為約21個核苷酸至約27個核苷酸且具有與 PNPLA3具互補性之區域，其中有義股在其3'端包括闡述為S1-L-S2之莖-環，其中S1與S2互補，其中L形成在S1與S2之間長度為約3個核苷酸至約5個核苷酸之環，且其中反義股及有義股形成長度為至少約19個核苷酸之雙鏈體結構但不共價鍵聯。

在一些實施例中，環L為三環或四環。在一些情況下，L為長度為4個核苷酸之四環。在其他實施例中，L包括序列5'-GAAA-3'。

在一些實施例中，S1及S2之長度為1-10個核苷酸且具有相同長度。在其他實施例中，S1及S2之長度為1個核苷酸、2個核苷酸、3個核苷酸、4個核苷酸、5個核苷酸、6個核苷酸、7個核苷酸、8個核苷酸、9個核苷酸或10個核苷酸。在其他實施例中，S1及S2之長度為6個核苷酸。在某些實施例中，莖-環包含序列5'-GCAGCCGAAAGGCUGC-3' (SEQ ID NO:1177)。

在一些實施例中，反義股之長度為27個核苷酸且有義股之長度為25個核苷酸。在其他實施例中，反義股之長度為22個核苷酸且有義股之長度為36個核苷酸。

在以上實施例中，雙鏈體區域包括反義股上之3'-懸垂序列。在一些實施例中，反義股上之3'-懸垂序列之長度為2個核苷酸。

在以上實施例中之任一者中，寡核苷酸中之至少一個核苷酸為經修飾之核苷酸。在一些情況下，經修飾之核苷酸包括2'-修飾，諸如2'-胺基乙基、2'-氟、2'-O-甲基、2'-O-甲氧基乙基及2'-去氧-2'-氟-β-阿拉伯糖基核酸。在某些情況下，寡核苷酸中之所有核苷酸均包括2'-修飾，諸如2'-氟或2'-O-甲基。

在以上實施例中之任一者中，寡核苷酸中之至少一個核苷酸包括經修飾之核苷酸間鍵聯。在一些實施例中，經修飾之核苷酸間鍵聯為硫代磷酸酯鍵聯。

在以上實施例中之任一者中，反義股之5'-核苷酸之糖的4'-碳包括磷酸酯類似物，諸如氧甲基膦酸酯、乙烯基膦酸酯或丙二醯基膦酸酯。或者或視情況，磷酸酯類似物為包括5'-甲氧基膦酸酯-4'-氧基之4'-磷酸酯類似物。

在以上實施例中之任一者中，寡核苷酸之至少一個核苷酸可結合至一或多個靶向配位體，諸如胺基糖、碳水化合物、膽固醇、脂質或多肽。在一些實施例中，靶向配位體為N-乙醯半乳糖胺(GalNAc)部分。在其他實施例中，GalNAc部分為單價GalNAc部分、二價GalNAc部分、三價GalNAc部分或四價GalNAc部分。

在一些實施例中，靶向配位體結合至莖環之L之一或多個核苷酸。在某些情況下，莖-環之L之至多4個核苷酸各自結合至單價GalNAc部分。

在以上實施例中之任一者中，寡核苷酸為RNAi寡核苷酸。在一些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有如表1或表3中所列之核苷酸序列，尤其SEQ ID NO: 787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中之任一者的有義股。在某些實施例中，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、B、C或D中所列之核苷酸序列，尤其SEQ ID NO: 1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中之任一者的有義股。在一些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有如表1或表3中所列之核苷酸序列，尤其SEQ ID NO: 788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中之任一者的反義股。在一些實施例中，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、B、C或D中所列之核苷酸序列，尤其SEQ ID NO: 1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中之任一者的反義股。在某些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO: 787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中之任一者或SEQ ID NO: 1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中之任一者之核苷酸序列的有義股，及具有SEQ ID NO: 788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中之任一者，SEQ ID NO: 1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中之任一者之核苷酸序列的反義股。在某些實施例中，RNAi寡核苷酸之有義股及反義股分別選自： (a) SEQ ID NO: 787及788， (b) SEQ ID NO: 843及844， (c) SEQ ID NO: 867及868， (d) SEQ ID NO: 871及872， (e) SEQ ID NO: 937及938， (f) SEQ ID NO: 1003及1004， (g) SEQ ID NO: 1007及1008， (h) SEQ ID NO: 1017及1018， (i) SEQ ID NO: 1161及1162，及 (j) SEQ ID NO: 1163及1164。

在一些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列之核苷酸序列，尤其SEQ ID NO: 1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中之任一者的有義股。在一些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列之核苷酸序列，尤其SEQ ID NO: 1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1202、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301中之任一者的反義股。在某些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO: 1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中之任一者之核苷酸序列的有義股，及具有SEQ ID NO: 1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301中之任一者之核苷酸序列的反義股。

在某些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO: 1188、1190、1200、1216、1218、1220、1224、1230、1232、1234、1244、1246、1250、1254、1262、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中之任一者之核苷酸序列的有義股，及具有SEQ ID NO: 1189、1191、1201、1215、1217、1219、1225、1231、1233、1235、1245、1247、1251、1255、1263、1289、1291、1295、1297、1299或1301中之任一者之核苷酸序列的反義股。

在特定情況下，RNAi寡核苷酸之有義股及反義股分別選自： (a) SEQ ID NO: 1220及1221， (b) SEQ ID NO: 1224及1225， (c) SEQ ID NO: 1230及1231， (d) SEQ ID NO: 1232及1233， (e) SEQ ID NO: 1188及1189， (f) SEQ ID NO: 1190及1191， (g) SEQ ID NO: 1244及1245， (h) SEQ ID NO: 1250及1251-， (i) SEQ ID NO: 1254及1255，及 (j) SEQ ID NO: 1246及1247。

亦描述用於抑制或降低 PNPLA3表現之寡核苷酸，其包括有義股及反義股，其中有義股及反義股形成雙鏈體區域，其中有義股及反義股之所有核苷酸包括鹼基、糖及/或核苷酸間鍵聯之修飾，其中反義股包括與SEQ ID NO: 1167至1176中之一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中具互補性之區域之長度為至少約15個連續核苷酸。

在其他態樣中，描述醫藥組合物，其包括本文之至少一種寡核苷酸及醫藥學上可接受之載劑、遞送劑或賦形劑。在一些情況下，醫藥組合物包括另一治療劑，諸如抗糖尿病劑或抗肥胖劑。

在其他態樣中，描述用於降低細胞、細胞群體、組織、器官或個體中之 PNPLA3表現的方法，該方法包括至少一個向細胞、細胞群體、組織、器官或個別投與本文之寡核苷酸或本文之醫藥組合物或使細胞、細胞群體、組織、器官或個別與本文之寡核苷酸或本文之醫藥組合物接觸之步驟。在一些情況下，降低 PNPLA3表現包括降低細胞、細胞群體、組織、器官或個體中PNPLA3 mRNA之量或水準、PNPLA3蛋白之量或水準或兩者。在一些情況下，細胞、細胞群體、組織、器官或個體具有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患。在某些情況下，該與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患為心臟代謝疾病、AH、ALD、肝硬化、HCC、CCA及其他膽管病(諸如PSC)、NAFLD及NASH。

在其他態樣中，描述用於治療患有或疑似患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體的方法。該等方法包括至少一個向有需要之個體投與有效量的本文之寡核苷酸或本文之醫藥組合物的步驟。在一些情況下，與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患為心臟代謝疾病、AH、ALD、CCA、肝硬化、HCC、NAFLD、PSC及NASH。在一些情況下，寡核苷酸或醫藥組合物經由SQ投與每天、每週、每月、每季、每年，尤其每月或每季投與。

在一些情況下，個體患有肝硬化、糖尿病、肝纖維化、肝臟炎症、高脂血症、AH、ALD、CCA、肝硬化、HCC、NAFLD、PSC、ASH、肥胖症及/或脂肪變性。

在以上實施例中之任一者中，該等方法包括其他步驟，諸如量測或獲得基因型資訊、 PNPLA3表現、PNPLA3蛋白水準、個體之重量及/或血糖及/或TG以及將此類所獲得之值與一或多個基線值或先前所獲得之值進行比較以評估接觸或投與之有效性。在一些實施例中，其他步驟包括證實個體具有PNPLA3 I148M變異體。在一些實施例中，其他步驟包括證實個體不具有PNPLA3 E434K變異體。在一些實施例中，其他步驟包括證實個體不具有蛋白質截短HSD17B13變異體(rs72613567)。

在以上實施例中之任一者中，該等方法可包括與第二組合物或第二治療劑同時、單獨或依序投與RNAi寡核苷酸或醫藥組合物。在一些實施例中，第二組合物或第二治療劑為PNPLA3抗體或其片段、抗糖尿病劑或抗肥胖劑。在一些實施例中，第二組合物或第二治療劑以與RNAi寡核苷酸相同之頻率投與(亦即，每隔一天一次、每週兩次或甚至每週一次)。在其他實施例中，第二組合物或第二治療劑以與RNAi寡核苷酸不同之頻率投與。同樣地，在其他實施例中，第二組合物或第二治療劑經由與RNAi寡核苷酸相同之途徑(例如SQ)投與。在其他實施例中，第二組合物或第二治療劑經由與RNAi寡核苷酸)不同之途徑投與。

在其他態樣中，描述本文之RNAi寡核苷酸用於治療與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之用途，其視情況與第二組合物或第二治療劑同時、單獨或依序(亦即，組合)投與。

在其他態樣中，描述本文之RNAi寡核苷酸在用於治療與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之藥劑的製造中之用途，其中藥劑視情況進一步包括第二組合物或第二治療劑。

在其他態樣中，描述套組，該等套組包括本文之至少一種寡核苷酸、視情況存在之醫藥學上可接受之載劑及包裝插頁，該包裝插頁具有關於向患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體投與該至少一種寡核苷酸的說明書。

本文之寡核苷酸及組合物的優點為其抑制 PNPLA3表現，尤其PNPLA3 148M之表現，對整個譜系之NAFLD (包括纖維化)發揮有益作用。

相關申請案之交叉參考

本申請案根據35 U.S.C. §119 (e)主張於2021年4月14日申請之美國臨時申請案第63/174,932號之優先權，該臨時申請案以全文引用之方式併入本文中。綜述

ALD及NAFLD為嚴重的公眾健康負擔。ALD及NAFLD為慢性肝臟病症，其從肝臟TG累積(脂肪變性)開始且進展為肝臟炎症及纖維化、肝硬化，且甚至進展為肝癌。PNPLA3 148M為已顯示與ALD及NAFLD以及肝硬化、HCC及肝臟相關死亡有關之遺傳因子。

RNA干擾(RNAi)為將外源性RNA引入細胞中之過程，該過程引起編碼所靶向之蛋白質之mRNA的特異性降解以及所得目標基因表現降低。

在人類中，PNPLA3之長度為481個胺基酸，預測分子量為52.865 kD。 PNPLA3之示例性核酸序列可見於NCBI參考序列號NM_025225 (人類)、NM_054088或XM_006520346 (小鼠)、NM_001282324 (大鼠)、XM_015457081 (靈長類動物)、XM_005567051 (靈長類動物)及XM_001109144 (靈長類動物)中。然而，熟習此項技術者理解，PNPLA3 mRNA序列之其他實例為使用公共可獲得之數據庫(諸如GenBank及UniProt)輕易可獲得的。定義

如本文所用，「約」意謂在一個或多個值(諸如所陳述之濃度、長度、分子量、pH值、序列相似性、時間範圍、溫度、體積等)之統計學意義範圍內。此類值或範圍可在給定值或範圍之一個數量級內，典型地在20%內，更典型地在10%內，且甚至更典型地在5%內。由「約」涵蓋之容許偏差將視研究中之系統而定，且可為熟習此項技術者容易理解的。

如本文所用，「投與(administer/administering/administration)」及類似術語係指以藥理學適用之方式向個體提供物質(例如本文之寡核苷酸或本文之組合物) (例如以治療個體之疾病、病症或疾患)。

如本文所用，「反義股」意謂本文之與目標序列之區域互補之寡核苷酸。同樣地，且如本文所用，「有義股」意謂本文之與反義股之區域互補之寡核苷酸。

如本文所用，「去唾液酸醣蛋白受體」或「ASGPR」意謂由主要48 kDa亞單位(ASGPR-1)及次要40 kDa亞單位(ASGPR-2)形成之二分C型凝集素。ASGPR主要在肝細胞之竇狀表面上表現且在循環醣蛋白之結合、內化及後續清除中起主要作用，該等循環醣蛋白含有末端半乳糖或GalNAc殘基(去唾液酸醣蛋白)。

如本文所用，「減輕(attenuate/attenuating/attenuation)」及類似術語係指減少或有效停止。作為非限制性實例，本文中之治療中之一或多者可減少或有效停止個體中AH、ALD、CCA、PSC、肝硬化、HCC、NAFLD及NASH以及相關疾病、病症以及疾患之發作或進展。此減輕可由例如以下來例示：AH、ALD、肝硬化、HCC、CCA、PSC、NAFLD及NASH以及相關疾病、病症及疾患之一或多個態樣(例如症狀、組織特徵及細胞、炎性或免疫活性等)的降低；沒有可偵測之AH、ALD、肝硬化、HCC、CCA、PSC、NAFLD及NASH以及相關疾病、病症及疾患之一或多個態樣之進展(惡化)；或當個體中可能以其他方式預測到AH、ALD、肝硬化、HCC、NAFLD及NASH以及相關疾病、病症及疾患時沒有可偵測之該等疾病之態樣。

如本文所用，「減輕(attenuate/attenuating/attenuation)」及類似術語意謂減少或有效停止。作為非限制性實例，本文中之治療中之一或多者可減少或有效停止個體中血脂異常/高甘油三酯血症/高脂血症之發作或進展。此減輕可由例如以下來例示：當個體中可以其他方式預測到AH、ALD、肝硬化、HCC、CCA、PSC、NAFLD及NASH以及相關疾病、病症以及疾患時該等疾病之一或多個態樣(例如症狀、組織特徵及細胞、炎性或免疫活性等)的降低。

如本文所用，「互補」意謂兩個核苷酸之間(例如兩個相對核酸上或單個核酸股之相對區域上)的結構關係，其容許兩個核苷酸彼此形成鹼基對。舉例而言，與相對核酸之嘧啶核苷酸互補的一個核酸之嘌呤核苷酸可藉由彼此形成氫鍵而鹼基配對在一起。互補核苷酸可以沃森-克裡克方式(Watson-Crick manner)或以允許形成穩定雙鏈體之任何其他方式鹼基配對。同樣地，如本文所描述，兩個核酸可具有彼此互補之多個核苷酸之區域以形成具互補性之區域。

如本文所用，「接觸(contact/contacting)」及類似術語意謂藉由促進或實現攝入或吸收至例如細胞中將RNAi直接或間接引入或遞送至細胞中。

如本文所用，「去氧核糖核苷酸」意謂當與核糖核苷酸相比較時在戊醣之2'位置具有氫代替羥基的核苷酸。經修飾之去氧核糖核苷酸具有除2'位置外之原子的一或多個修飾取代，包括核鹼基、糖或磷酸酯基中或核鹼基、糖或磷酸酯基之修飾或取代。

如本文所用，「雙股寡核苷酸」或「ds寡核苷酸」意謂實質上呈雙鏈體形式之寡核苷酸。ds寡核苷酸之雙鏈體區域之互補鹼基配對可在共價分開之核酸股之核苷酸的反向平行序列之間形成。同樣地，ds寡核苷酸之雙鏈體區域之互補鹼基配對可在共價鍵聯之核酸股之核苷酸的反向平行序列之間形成。此外，ds寡核苷酸之雙鏈體區域之互補鹼基配對可由單個核酸股形成，該單個核酸股摺疊(例如經由髮夾)以提供鹼基配對在一起之核苷酸之互補反向平行序列。ds寡核苷酸可包括彼此完全雙鏈體化之兩個共價分開之核酸股。然而，ds寡核苷酸可包括部分雙鏈體化(例如在一個或兩個末端具有懸垂物)之兩個共價分開之核酸股。ds寡核苷酸可包括部分互補之核苷酸之反向平行序列，且因此，可具有一或多個錯配，該一或多個錯配可包括內部錯配或末端錯配。

如本文所用，關於核酸(例如寡核苷酸)之「雙鏈體」意謂通過核苷酸之兩個反向平行序列之互補鹼基配對形成的結構。

如本文所用，「賦形劑」意謂可包括在本文之組合物中之非治療劑，例如用於提供或促進所需一致性或穩定化作用。

如本文所用，「肝細胞」意謂肝臟之實質組織之細胞。此等細胞佔肝臟質量之約70%-85%，並且製造血清白蛋白、纖連蛋白(FBN)及凝血酶原組之凝血因子(除因子3和4外)。肝細胞譜系細胞之標記物包括但不限於甲狀腺素轉運蛋白(Ttr)、麩醯胺合成酶(Glul)、肝細胞核因子1a (Hnf1a)及肝細胞核因子4a (Hnf4a)。成熟肝細胞之標記物可包括但不限於細胞色素P450 (Cyp3a11)、反丁烯二醯乙醯乙酸水解酶(Fah)、6-磷酸葡萄糖(G6p)、白蛋白(Alb)及OC2-2F8。參見例如Huch等(2013) NATURE 494:247-50。

如本文所用，「肝毒劑」意謂本身對肝臟具毒性或可經加工以形成對肝臟具毒性之代謝產物的化合物、病毒或其他物質。肝毒劑可包括但不限於四氯化碳(CCl ₄)、乙醯胺酚(對乙醯胺基酚)、氯乙烯、砷、氯仿、非類固醇消炎藥(諸如阿司匹林(aspirin)及丁二苯吡唑二酮(phenylbutazone))。

如本文所用，「不穩定連接子」意謂可裂解(例如藉由酸性pH值)之連接子。同樣地，「相當穩定之連接子」意謂不能裂解之連接子。

如本文所用，「肝臟炎症」或「肝炎」意謂尤其因如可能由暴露於肝毒劑引起之損傷或感染引起之其中肝臟變得腫脹、功能失調及/或疼痛之身體疾患。症狀可包括黃疸、疲勞、虛弱、噁心、嘔吐、食欲降低及重量減輕。肝臟炎症如果不治療可能進展為纖維化、肝硬化、肝衰竭或肝癌。

如本文所用，「肝臟纖維化」、「肝纖維化」或「肝臟之纖維化」係指細胞外基質蛋白在肝臟中之過量累積，該等細胞外基質蛋白可包括膠原蛋白(I、III及IV)、FBN、粗纖維調節素(undulin)、彈性蛋白、層黏連蛋白、玻尿酸(hyaluronan)及由炎症及肝臟細胞死亡產生之蛋白聚糖。肝臟纖維化如果不治療可能進展為肝硬化、肝衰竭或肝癌。

如本文所用，「環」意謂核酸(例如寡核苷酸)之未配對區域，其側接核酸之彼此足夠互補之兩個反向平行區域，使得在適當雜交條件下(例如在磷酸鹽緩衝液中、在細胞中)，側接未配對區域之兩個反向平行區域雜交以形成雙鏈體(稱為「莖」)。

如本文所用，「經修飾之核苷酸間鍵聯」意謂當與具有磷酸二酯鍵之參考核苷酸間鍵聯相比較時具有一或多個化學修飾之核苷酸間鍵聯。經修飾之核苷酸可為非天然存在之鍵聯。典型地，經修飾之核苷酸間鍵聯賦予其中存在該經修飾之核苷酸間鍵聯之核酸一或多種所需特性。舉例而言，經修飾之核苷酸可改善熱穩定性、對降解之抗性、核酸酶抗性、溶解度、生物可用性、生物活性、降低之免疫原性等。

如本文所用，「經修飾之核苷酸」係指當與選自以下之對應參考核苷酸相比較時具有一或多個化學修飾之核苷酸：腺嘌呤核糖核苷酸、鳥嘌呤核糖核苷酸、胞嘧啶核糖核苷酸、尿嘧啶核糖核苷酸、腺嘌呤去氧核糖核苷酸、鳥嘌呤去氧核糖核苷酸、胞嘧啶去氧核糖核苷酸及胸苷去氧核糖核苷酸。經修飾之核苷酸可為非天然存在之核苷酸。經修飾之核苷酸可在其糖、核鹼基及/或磷酸酯基中具有例如一或多個化學修飾。另外或或者，經修飾之核苷酸可具有結合至對應參考核苷酸之一或多個化學部分。典型地，經修飾之核苷酸賦予其中存在該經修飾之核苷酸之核酸一或多種所需特性。舉例而言，經修飾之核苷酸可改善熱穩定性、對降解之抗性、核酸酶抗性、溶解度、生物可用性、生物活性、降低之免疫原性等。

如本文所用，「缺口四環結構」意謂以分開之有義(過客)及反義(引導)股為特徵之RNAi寡核苷酸結構，其中有義股具有與反義股具互補性之區域，且其中該等股鏈中之至少一者(通常為有義股)具有經組態以穩定在至少一個股鏈內形成之相鄰莖區域的四環。

如本文所用，「核苷酸」意謂具有核苷(核鹼基，諸如腺嘌呤、胞嘧啶、鳥嘌呤、胸腺嘧啶或尿嘧啶；及戊醣，諸如核糖或2'-去氧核糖；及可充當核酸聚合物之單體單元之磷酸酯基(諸如去氧核糖核酸(DNA)及核糖核酸(RNA)之有機分子。

如本文所用，「寡核苷酸」意謂短核酸分子(例如長度為不到約100個核苷酸)。寡核苷酸可為單股的(ss)或ds。寡核苷酸可能具有或可能不具有雙鏈體區域。作為一組非限制性實例，寡核苷酸可為但不限於小干擾RNA (siRNA)、微RNA (miRNA)、短髮夾RNA (shRNA)、dicer受質小干擾RNA (dsiRNA)、反義寡核苷酸(ASO)、短siRNA或ss siRNA。典型地，ds寡核苷酸為RNAi寡核苷酸。

如本文所用，「懸垂物」意謂由一個股鏈或區域延伸超過與該股鏈或區域形成雙鏈體之互補鏈之末端所產生的末端非鹼基配對核苷酸。懸垂物可包括在ds寡核苷酸之5'端或3'端自雙鏈體區域延伸之一或多個未配對核苷酸。懸垂物可為ds寡核苷酸之反義股或有義股上之3'或5'懸垂物。

如本文所用，「磷酸酯類似物」意謂模擬磷酸酯基之靜電及/或空間特性之化學部分。在一些實施例中，磷酸酯類似物定位於寡核苷酸之5'端核苷酸處替代5'-磷酸酯，5'-磷酸酯常常容易發生酶移除。5'磷酸酯類似物可包括磷酸酶抗性鍵聯。磷酸酯類似物之實例包括但不限於5'膦酸酯，諸如5'亞甲基膦酸酯(5'-MP)及5'-(E)-乙烯基膦酸酯(5'-VP)。寡核苷酸可在5'端核苷酸處在糖之4'-碳位置具有磷酸酯類似物(稱為「4'-磷酸酯類似物」)。4'-磷酸酯類似物之實例為氧甲基膦酸酯，其中氧甲基之氧原子結合至糖部分(例如在其4'-碳處)或其類似物。參見例如國際專利申請公開案第WO 2018/045317號。已研發針對寡核苷酸之5'端的其他修飾(參見例如國際專利申請案第WO 2011/133871號；美國專利第8,927,513號；及Prakash等人(2015) NUCLEIC ACIDS RES .43:2993-3011)。

如本文所用，「PNPLA3相關之疾病」、「PNPLA3相關之病症」或「PNPLA3相關之疾患」意謂其中PNPLA3表現增加及/或存在例如PNPLA3 I148M變異體之疾患。示例性PNPLA3相關之疾患、疾病或病症包括但不限於肝臟中之脂肪累積、肝臟之肝硬化、脂肪肝(脂肪變性)、肝細胞壞死、HCC、肝臟纖維化、肝臟之炎症、NASH、NAFLD或肥胖症。

如本文所用，「降低之表現」且就基因(例如 PNPLA3)來說意謂當與適當參考(例如參考細胞、細胞群體、樣品或個體)相比時，RNA轉錄物(例如PNPLA3 mRNA)或由基因編碼之蛋白質之量或水準降低及/或細胞、細胞群體、樣品或個體中基因之活性之量或水準降低。舉例而言，當與未經ds寡核苷酸處理之細胞相比時，使細胞與本文之寡核苷酸(例如具有含有與包括PNPLA3 mRNA之核苷酸序列互補之核苷酸序列的反義股之寡核苷酸)接觸的動作可使得mRNA、蛋白質及/或活性之量或水準降低(例如經由藉由RNAi路徑降解PNPLA3 mRNA)。類似地且如本文所用，「降低表現」意謂使得基因(例如 PNPLA3)之表現降低的動作。特定而言且如本文所用，「PNPLA3表現之降低」意謂當與適當參考(例如參考細胞、細胞群體、組織或個體)相比時，細胞、細胞群體、樣品或個體中PNPLA3 mRNA、PMPLA3蛋白及/或PNPLA3活性之量或水準降低。

如本文所用，「互補區域」意謂核酸(例如ds寡核苷酸)之核苷酸序列，其與核苷酸之反向平行序列足夠互補從而容許核苷酸之兩個序列之間在適當雜交條件下(例如在磷酸鹽緩衝液中、在細胞中等)雜交。本文之寡核苷酸包括具有與mRNA目標序列互補之區域的靶向序列。

如本文所用，「核糖核苷酸」意謂具有核糖作為其戊醣之核苷酸，其在其2'位置含有羥基。經修飾之核糖核苷酸為具有除2'位置外之原子之一或多個修飾或取代，包括核鹼基、糖或磷酸酯基中或核鹼基、糖或磷酸酯基之修飾或取代的核糖核苷酸。

如本文所用，「RNAi寡核苷酸」係指(a)具有有義股(過客)及反義股(引導) 之ds寡核苷酸，其中反義股或反義股之一部分在目標mRNA之裂解中由 Argonaute2 (Ago2)核酸內切酶使用；或(b)具有單個反義股之ss寡核苷酸，其中彼反義股(或彼反義股之一部分)在目標mRNA之裂解中由Ago2核酸內切酶使用。

如本文所用，「股鏈」係指通過核苷酸間鍵聯(例如磷酸二酯鍵聯或硫代磷酸酯鍵聯)鍵聯在一起之核苷酸的單個連續序列。股鏈可具有兩個自由端(例如5'端及3'端)。

如本文所用，「個體」意謂任何哺乳動物，包括貓、狗、小鼠、大鼠及靈長類動物，尤其人類。此外，「個體(individual)」或「患者」可與「個體(subject)」互換使用。

如本文所用，「合成」係指核酸或其他分子為人工合成的(例如使用機器，諸如固態核酸合成儀)或以其他方式不衍生自通常產生該核酸或其他分子之天然來源(例如細胞或有機體)。

如本文所用，「靶向配位體」意謂選擇性結合至相關組織或細胞之同源分子(例如受體)且可結合至另一物質以使另一物質靶向至相關組織或細胞的分子(例如胺基糖、碳水化合物、膽固醇、脂質或多肽)。舉例而言，靶向配位體可出於使寡核苷酸靶向至特定相關組織或細胞之目的結合至本文之寡核苷酸。靶向配位體可選擇性結合至細胞表面受體。因此，在結合至寡核苷酸時，靶向配位體通過選擇性結合至在細胞之表面表現之受體及包含寡核苷酸、靶向配位體及受體之複合物由細胞內體內化促進寡核苷酸遞送至特定細胞中。此外，靶向配位體可經由連接子結合至寡核苷酸，該連接子在細胞內化之後或期間裂解，使得寡核苷酸自細胞中之靶向配位體釋放。

如本文所用，「四環」意謂增加藉由核苷酸之側接序列之雜交形成的相鄰雙鏈體之穩定性的環。穩定性增加可偵測為相鄰莖雙鏈體之解鏈溫度(T _m)增加，其高於由一組隨機選擇之核苷酸序列組成之類似長度的環平均所預期之相鄰莖雙鏈體的T _m。舉例而言，四環可賦予包含長度為至少2個鹼基對(bp)之雙鏈體的髮夾在10 mM NaHPO ₄中至少約50℃、至少約55℃、至少約56℃、至少約58℃、至少約60℃、至少約65℃或至少約75℃之T _m。四環亦可藉由疊加相互作用穩定相鄰莖雙鏈體中之bp。另外，四環中之核苷酸間相互作用包括但不限於非沃森-克裡克鹼基配對、疊加相互作用、氫鍵結及接觸相互作用(Cheong等(1990) NATURE 346:680-682；Heus及Pardi (1991) SCIENCE 253:191-194)。在此，四環可包括或可具有約3至6個核苷酸，且典型地為約4至5個核苷酸。因此，四環可具有3、4、5或6個可能經修飾或可能未經修飾(例如其可能結合或可能未結合至靶向部分)之核苷酸，尤其4個核苷酸。任何核苷酸均可用於四環中，且此類核苷酸之標準IUPAC-IUB符號可如Cornish-Bowden (1985) NUCLEIC ACIDS RES . 13:3021-30中所描述來使用。舉例而言，字母「N」可用於意謂任何鹼基可位於彼位置，字母「R」可用於表明A (腺嘌呤)或G (鳥嘌呤)可位於彼位置，且「B」可用於表明C (胞嘧啶)、G (鳥嘌呤)或T (胸腺嘧啶)可位於彼位置。四環之實例包括四環之UNCG家族(例如UUCG)、四環之GNRA家族(例如GAAA)及CUUG四環(Woese等人(1990) PROC. NATL. ACAD. SCI. USA 87:8467-71；Antao等人(1991) NUCLEIC ACIDS RES. 19:5901-05)。DNA四環之實例包括四環之d(GNNA)家族(例如d(GTTA))、四環之d(GNRA)家族、四環之d(GNAB)家族、四環之d(CNNG)家族及四環之d(TNCG)家族(例如d(TTCG))。參見例如Nakano等人(2002) BIOCHEM .41:4281-92；及Shinji等人(2000) NIPPON KAGAKKAI KOEN YOKOSHU 78:731。在此，四環可在缺口四環結構內。

如本文所用，「治療(treat/treating)」意謂向有需要之個體提供照護之動作，例如藉由出於相對於現有情況(例如疾病、病症)改良個體之健康及/或幸福之目的或為防止疾患發生或降低其可能性向個體投與治療劑(例如本文之寡核苷酸)。治療亦可涉及減輕個體所經歷之疾患(例如疾病、病症)之至少一種跡象、症狀或促進因素之頻率或嚴重程度。

如本文所用，「iRNA」、「iRNA劑」、「RNAi」、「RNAi劑」及「RNA干擾劑」意謂含有RNA且經由RNA誘導之沈默複合體(RISC)路徑介導RNA轉錄物之靶向裂解的藥劑。iRNA經由RNA干擾引導mRNA之序列特異性降解。iRNA調節、抑制或降低細胞中之 PNPLA3表現。 組合物

根據一些態樣，本發明提供降低、調節或抑制肝臟中 PNPLA3之表現的寡核苷酸(例如雙股RNAi寡核苷酸)。在一些實施例中，本文所提供之寡核苷酸用於治療與 PNPLA3表現相關之疾病。在一些態樣中，本發明提供藉由降低、調節或抑制肝臟中(例如構成肝臟之細胞中)之 PNPLA3表現來治療與 PNPLA3表現相關之疾病的方法。 PNPLA3表現之寡核苷酸抑制劑

I. PNPLA3目標序列：使本文之寡核苷酸(例如RNAi寡核苷酸)靶向包含PNPLA3 mRNA之目標序列(亦即，PNPLA3目標序列)。在一些實施例中，寡核苷酸或其部分、片段或股鏈(例如ds RNAi寡核苷酸之反義股或引導股)結合或退火至PNPLA3目標序列，從而抑制 PNPLA3表現。在一些實施例中，使寡核苷酸靶向PNPLA3目標序列以抑制活體內 PNPLA3表現。在一些實施例中， PNPLA3表現受靶向PNPLA3目標序列之寡核苷酸抑制之量或程度與寡核苷酸之效能有關。在一些實施例中， PNPLA3表現受靶向PNPLA3目標序列之寡核苷酸抑制之量或程度與用寡核苷酸治療之患有或疑似患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患的個體中之治療益處之量或程度有關。

通過檢驗及分析PNPLA3 mRNA，包括多個不同物種(例如人類、食蟹猴及恆河猴；參見例如實例1)之mRNA之核苷酸序列且作為活體外及活體內測試之結果(參見例如實例2-3)，本文中顯示PNPLA3 mRNA之某些核苷酸序列比其他核苷酸序列更適合於基於寡核苷酸之對 PNPLA3表現之抑制且因此適合作為本文之寡核苷酸的目標序列。在一些實施例中，本文所描述之寡核苷酸(例如ds RNAi寡核苷酸)之有義股(例如表1或3或表A、B、C或D中)包含PNPLA3目標序列。在一些實施例中，本文所描述之寡核苷酸之有義股(例如表1或3或表A、B、C或D中)之部分或區域包含PNPLA3目標序列。在一些實施例中，PNPLA3目標序列包含SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之序列，或由其組成。

II. PNPLA3 mRNA靶向序列：在一些實施例中，本文之寡核苷酸具有用於靶向細胞中之PNPLA3 mRNA且抑制 PNPLA3表現的與PNPLA3 mRNA具互補性之區域(例如在PNPLA3 mRNA之目標序列內)。在一些實施例中，本文之寡核苷酸包含PNPLA3靶向序列(例如ds寡核苷酸之反義股或引導股)，其具有藉由互補(沃森-克裡克)鹼基配對結合或退火至PNPLA3 mRNA目標序列的具互補性之區域。靶向序列或具互補性之區域具有合適之長度及鹼基含量，以使寡核苷酸(或其股鏈)能夠結合或退火至PNPLA3 mRNA以便抑制其表現。在一些實施例中，靶向序列或具互補性之區域的長度為至少約12、至少約13、至少約14、至少約15、至少約16、至少約17、至少約18、至少約19、至少約20、至少約21、至少約22、至少約23、至少約24、至少約25、至少約26、至少約27、至少約28、至少約29或至少約30個核苷酸。或者，靶向序列或具互補性之區域之長度為約12至約30 (例如12至30、12至22、15至25、17至21、18至27、19至27或15至30)個核苷酸。或者，靶向序列或具互補性之區域的長度為約12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個核苷酸。在某些實施例中，靶向序列或具互補性之區域的長度為18個核苷酸。在某些實施例中，靶向序列或具互補性之區域的長度為19個核苷酸。在某些實施例中，靶向序列或具互補性之區域的長度為20個核苷酸。在某些實施例中，靶向序列或具互補性之區域的長度為21個核苷酸。在某些實施例中，靶向序列或具互補性之區域的長度為22個核苷酸。在某些實施例中，靶向序列或具互補性之區域的長度為23個核苷酸。在某些實施例中，靶向序列或具互補性之區域的長度為24個核苷酸。

在一些實施例中，本文之寡核苷酸包含與PNPLA3目標序列完全互補之靶向序列或具互補性之區域(例如雙股寡核苷酸之反義股或引導股)。在一些實施例中，靶向序列或具互補性之區域與PNPLA3目標序列部分互補。在一些實施例中，寡核苷酸包含與SEQ ID NO: 1167至1176之序列中之任一者完全互補的靶向序列或具互補性之區域。在一些實施例中，寡核苷酸包含與SEQ ID NO: 1167至1176之序列中之任一者部分互補的靶向序列或具互補性之區域。

或者，在一些實施例中，本文之寡核苷酸包含與包含PNPLA3 mRNA之核苷酸之連續序列互補的靶向序列或具互補性之區域，其中核苷酸之連續序列的長度為約12至約30個核苷酸(例如長度為12至30、12至28、12至26、12至24、12至20、12至18、12至16、14至22、16至20、18至20或18至19個核苷酸)。在一些實施例中，寡核苷酸包含與包含PNPLA3 mRNA之核苷酸之連續序列互補的靶向序列或具互補性之區域，其中核苷酸之連續序列的長度為10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個核苷酸。在一些實施例中，寡核苷酸包含與包含PNPLA3 mRNA之核苷酸之連續序列互補的靶向序列或具互補性之區域，其中核苷酸之連續序列的長度為19個核苷酸。在一些實施例中，寡核苷酸包含與包含PNPLA3 mRNA之核苷酸之連續序列互補的靶向序列或具互補性之區域，其中核苷酸之連續序列的長度為20個核苷酸。在其他實施例中，寡核苷酸包含與SEQ ID NO: 1167至1176中之任一者之核苷酸之連續序列互補的靶向序列或具互補性之區域，視情況其中核苷酸之連續序列的長度為19個核苷酸。

就本文之寡核苷酸之靶向序列或具互補性之區域來說，其與如SEQ ID NO: 1167至1176中之任一者中所列之序列的連續核苷酸互補且跨越反義股之整個長度。在一些實施例中，寡核苷酸之具互補性之區域與如SEQ ID NO: 1167至1176中之任一者中所列之序列的連續核苷酸互補且跨越反義股之整個長度的一部分。在一些其他實施例中，寡核苷酸包括具互補性之區域(例如在ds寡核苷酸之反義股上)，其與跨越如SEQ ID NO: 1167至1176中之任一者中所列之序列的核苷酸1-20之核苷酸的連續延伸段至少部分(例如完全)互補。

或者，本文之寡核苷酸包含與對應PNPLA3目標序列具有一或多個鹼基對(bp)錯配的靶向序列或具互補性之區域。在一些實施例中，靶向序列或具互補性之區域與對應PNPLA3目標序列至少約1、至多約2、至多約3、至多約4、至多約5等個錯配，前提條件為靶向序列或具互補性之區域在適當雜交條件下結合或退火至PNPLA3 mRNA之能力及/或寡核苷酸降低或抑制 PNPLA3表現之能力得以維持。換句話說，靶向序列或具互補性之區域與對應PNPLA3目標序列不超過1、不超過2、不超過3、不超過4或不超過5個錯配，前提條件為靶向序列或具互補性之區域在適當雜交條件下結合或退火至PNPLA3 mRNA之能力及/或寡核苷酸降低或抑制 PNPLA3表現之能力得以維持。在一些實施例中，寡核苷酸包含與對應目標序列具有1個錯配之靶向序列或具互補性之區域。在一些實施例中，寡核苷酸包含與對應目標序列具有2個錯配之靶向序列或具互補性之區域。在一些實施例中，寡核苷酸包含與對應目標序列具有3個錯配之靶向序列或具互補性之區域。在一些實施例中，寡核苷酸包含與對應目標序列具有4個錯配之靶向序列或具互補性之區域。在一些實施例中，寡核苷酸包含與對應目標序列具有5個錯配之靶向序列或具互補性之區域。在其他實施例中，寡核苷酸包含與對應目標序列超過一個錯配(例如2、3、4、5或更多個錯配)之靶向序列或具互補性之區域，其中錯配中之至少2者(例如全部)連續定位(例如2、3、4、5或更多個錯配呈一排)，或其中錯配分散在靶向序列或具互補性之區域中之任何位置。在其他實施例中，寡核苷酸包含與對應目標序列超過一個錯配(例如2、3、4、5或更多個錯配)之靶向序列或具互補性之區域，其中錯配中之至少2者(例如全部)連續定位(例如2、3、4、5或更多個錯配呈一排)，或其中至少一或多個非錯配鹼基對定位在錯配之間，或其組合。

III. 寡核苷酸之類型：適用於靶向PNPLA3 mRNA之多種寡核苷酸類型及/或結構包括但不限於RNAi寡核苷酸、反義寡核苷酸、miRNA等。涵蓋出於抑制 PNPLA3表現之目的將本文或別處所描述之寡核苷酸類型中之任一者用作構架來併入本文之靶向序列。在一些實施例中，本文之寡核苷酸藉由與Dicer參與上游或下游之RNAi路徑接合來抑制 PNPLA3表現。舉例而言，已研發具有1至5個核苷酸之至少一個3'懸垂物之各股鏈尺寸為約19-25個核苷酸之RNAi寡核苷酸(參見例如美國專利第8,372,968號)。亦已研發由Dicer加工以產生活性RNAi產物之更長寡核苷酸(參見例如美國專利第8,883,996號)。進一步之工作產生了延伸之ds寡核苷酸，其中至少一個股鏈之至少一個末端延伸超過雙鏈體靶向區域，包括其中該等股鏈中之一者包括熱力學穩定四環結構之結構(參見例如美國專利第8,513,207號及第8,927,705號，以及國際專利申請公開案第WO 2010/033225號)。此類結構包括ss延伸(在分子之一側或兩側)以及ds延伸。

本文之寡核苷酸與Dicer參與(例如Dicer裂解)下游之RNAi路徑接合。在一些實施例中，寡核苷酸在有義股之3'端具有懸垂物(例如長度為1、2或3個核苷酸)。在一些實施例中，寡核苷酸(例如siRNA)包括與目標mRNA (例如PNPLA3 mRNA)反義之21-核苷酸引導股及互補過客股，其中兩個股鏈退火以在任一個或兩個3'端形成19-bp雙鏈體及2核苷酸懸垂物。亦涵蓋更長之寡核苷酸設計，包括具有23個核苷酸之引導股及21個核苷酸之過客股的寡核苷酸，其中在分子右側(過客股之3'端/引導股之5'端)存在平末端且在分子左側(過客股之5'端/引導股之3'端)存在兩個核苷酸3'-引導股懸垂物。在此類分子中，存在21 bp雙鏈體區域。參見例如美國專利第9,012,138號；第9,012,621號及第9,193,753號。

本文之寡核苷酸包含有義及反義股，該兩者之長度在約17至約26 (例如17至26、20至25或21-23)個核苷酸範圍內。在一些實施例中，寡核苷酸包含有義及反義股，該兩者之長度均在約19至約22個核苷酸範圍內。在一些實施例中，有義及反義股具有相等長度。在一些實施例中，寡核苷酸包含有義及反義股，使得有義股或反義股或有義與反義股兩者上存在3'-懸垂物。在一些情況下，在具有有義及反義股且兩者之長度均在約21至約23個核苷酸範圍內之寡核苷酸中，有義、反義或有義與反義股兩者上之3'-懸垂物的長度為1或2個核苷酸。在一些實施例中，寡核苷酸包含22個核苷酸之引導股及20個核苷酸之過客股，其中在分子右側(過客股之3'端/引導股之5'端)存在平末端且在分子左側(過客股之5'端/引導股之3'端)存在2核苷酸3'引導股懸垂物。在此類分子中，存在20-bp雙鏈體區域。

本文所用之其他寡核苷酸設計包括：16聚體siRNA (參見例如「 NUCLEIC ACIDS IN CHEMISTRY & BIOLOGY」, Blackburn (編), Royal Society of Chemistry, 2006)、shRNA (例如具有19 bp或更短之莖；參見例如Moore等人(2010) METHODS MOL. BIOL. 629:141-58)、平端siRNA (例如長度為19 bp；參見例如Kraynack及Baker (2006) RNA12:163-76)、不對稱siRNA (aiRNA；參見例如Sun等人(2008) NAT. BIOTECHNOL . 26:1379-82)、非對稱較短雙鏈體siRNA (參見例如Chang等人(2009) MOL. THER. 17:725-32)、叉形siRNA (參見例如Hohjoh (2004) FEBS LETT. 557:193-198)、ss siRNA (參見例如Elsner (2012) NAT. BIOTECHNOL. 30:1063)、啞鈴形環狀siRNA (參見例如Abe等人(2007) J. AM. CHEM. SOC . 129:15108-09)及小內部區段干擾RNA (sisiRNA；參見例如Bramsen等人(2007) NUCLEIC ACIDS RES. 35:5886-97)。可在本文中用於降低或抑制 PNPLA3表現之寡核苷酸結構之其他非限制性實例為miRNA、shRNA及短siRNA (參見例如Hamilton等人(2002) EMBO J. 21:4671-79；亦參見美國專利申請公開案第2009/0099115號)。

或者，本文之寡核苷酸為單股的(ss)。此類結構包括但不限於ss RNAi分子。當前工作已證實ss RNAi分子之活性(參見例如Matsui等人(2016) MOL. THER .24:946-55)。在一些實施例中，寡核苷酸為ASO。ASO為ss寡核苷酸，其所具有之核鹼基序列在以5'至3'方向書寫或展示時包括特定核酸之所靶向片段之反向補體且經適當修飾(例如作為間隔聚體(gapmer))以誘導RNaseH介導之細胞中其目標RNA的裂解或(例如作為混合聚體(mixmer))以便抑制細胞中目標mRNA之轉譯。以此項技術中已知之包括例如如美國專利第9,567,587號中所示之任何合適之方式(包括例如長度、核鹼基(嘧啶、嘌呤)之糖部分及核鹼基之雜環部分之改變)對供本文使用之ASO進行修飾。另外，ASO數十年來一直用於降低特定目標基因之表現(參見例如Bennett等人(2017) ANNU. REV. PHARMACOL .57:81-105)。

IV. 雙股RNAi寡核苷酸：用於靶向PNPLA3 mRNA且抑制 PNPLA3表現(例如經由RNAi路徑)且包含有義股(亦即，過客股)及反義股(亦即，引導股)之ds寡核苷酸。在一些實施例中，有義股及反義股為分開之股鏈且不共價鍵聯。在一些實施例中，有義股及反義股為共價鍵聯的。

在一些實施例中，有義股包含第一區域(R1)及第二區域(R2)，其中R2包含第一亞區(S1)、四環(L)或三環(triL)及第二亞區(S2)，其中L或triL定位於S1與S2之間，且其中S1及S2形成第二雙鏈體(D2)。D2具有各種長度。在一些實施例中，D2之長度為約1至約6 bp。在一些實施例中，D2之長度為2-6、3-6、4-6、5-6、1-5、2-5、3-5或4-5 bp。在其他實施例中，D2之長度為1、2、3、4、5或6 bp。在某些實施例中，D2之長度為6 bp。

在一些實施例中，有義股之R1及反義股形成第一雙鏈體(D1)。在一些實施例中，D1之長度為至少約15 (例如至少15、至少16、至少17、至少18、至少19、至少20或至少21)個核苷酸。在一些實施例中，D1之長度為約12至約30個核苷酸(例如長度為12至30、12至27、15至22、18至22、18至25、18至27、18至30或21至30個核苷酸)。在其他實施例中，D1之長度為至少12個核苷酸(例如長度為至少12、至少15、至少20、至少25或至少30個核苷酸)。在其他實施例中，D1之長度為12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個核苷酸。在某些實施例中，D1之長度為20個核苷酸。在一些情況下，D1不跨越有義股及/或反義股之整個長度。在一些情況下，D1跨越有義股或反義股或兩者之整個長度。在某些情況下，D1跨越有義股與反義股兩者之整個長度。

在某些情況下，本文之ds寡核苷酸包括具有SEQ ID NO: 9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253、255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477、479、481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553、555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、771、773及775中之任一者之序列的有義股，及具有選自SEQ ID NO: 10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、342、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384、386、388、390、392、394、396、398、400、402、404、406、408、410、412、414、416、418、420、422、424、426、428、430、432、434、436、438、440、442、444、446、448、450、452、454、456、458、460、462、464、466、468、470、472、474、476、478、480、482、484、486、488、490、492、494、496、498、500、502、504、506、508、510、512、514、516、518、520、522、524、526、528、530、532、534、536、538、540、542、544、546、548、550、552、554、556、558、560、562、564、566、568、570、572、574、576、578、580、582、584、586、588、590、592、594、596、598、600、602、604、606、608、610、612、614、616、618、620、622、624、626、628、630、632、634、636、638、640、642、644、646、648、650、652、654、656、658、660、662、664、666、668、670、672、674、676、678、680、682、684、686、688、690、692、694、696、698、700、702、704、706、708、710、712、714、716、718、720、722、724、726、728、730、732、734、736、738、740、742、744、746、748、750、752、754、756、758、760、762、764、766、768、770、772、774及776之互補序列的反義股，如表1中所排列。或者，本文之ds寡核苷酸包括具有SEQ ID NO: 777、779、781、783、785、787、789、791、793、795、797、799、801、803、805、807、809、811、813、815、817、819、821、823、825、827、829、831、833、835、837、839、841、843、845、847、849、851、853、855、857、859、861、863、865、867、869、871、873、875、877、879、881、883、885、887、889、891、893、895、897、899、901、903、905、907、909、911、913、915、917、919、921、923、925、927、929、931、933、935、937、939、941、943、945、947、949、951、953、955、957、959、961、963、965、967、969、971、973、975、977、979、981、983、985、987、989、991、993、995、997、999、1001、1003、1005、1007、1009、1011、1013、1015、1017、1019、1021、1023、1025、1027、1029、1031、1033、1035、1037、1039、1041、1043、1045、1047、1049、1051、1053、1055、1057、1059、1061、1063、1065、1067、1069、1071、1073、1075、1077、1079、1081、1083、1085、1087、1089、1091、1093、1095、1097、1099、1101、1103、1105、1107、1109、1111、1113、1115、1117、1119、1121、1123、1125、1127、1129、1131、1133、1135、1137、1139、1141、1143、1145、1147、1149、1151、1153、1155、1157、1159、1161及1163中之任一者之序列的有義股，及具有選自SEQ ID NO: 778、780、782、784、786、788、790、792、794、796、798、800、802、804、806、808、810、812、814、816、818、820、822、824、826、828、830、832、834、836、838、840、842、844、846、848、850、852、854、856、858、860、862、864、866、868、870、872、874、876、878、880、882、884、886、888、890、892、894、896、898、900、902、904、906、908、910、912、914、916、918、920、922、924、926、928、930、932、934、936、938、940、942、944、946、948、950、952、954、956、958、960、962、964、966、968、970、972、974、976、978、980、982、984、986、988、990、992、994、996、998、1000、1002、1004、1006、1008、1010、1012、1014、1016、1018、1020、1022、1024、1026、1028、1030、1032、1034、1036、1038、1040、1042、1044、1046、1048、1050、1052、1054、1056、1058、1060、1062、1064、1066、1068、1070、1072、1074、1076、1078、1080、1082、1084、1086、1088、1090、1092、1094、1096、1098、1100、1102、1104、1106、1108、1110、1112、1114、1116、1118、1120、1122、1124、1126、1128、1130、1132、1134、1136、1138、1140、1142、1144、1146、1148、1150、1152、1154、1156、1158、1160、1162及1164之互補序列的反義股，如表3中所排列。在某些情況下，有義股為SEQ ID NO: 787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中之任一者，且反義股為SEQ ID NO: 788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中之任一者。

在某些實施例中，本發明描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括具有如表A、B、C或D中所列之序列(例如SEQ ID NO: 1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300)的有義股。

在某些實施例中，本發明描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括具有如表A、B、C或D中所列之序列(例如SEQ ID NO: 1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301)的反義股。在某些實施例中，本發明描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括具有如表A、B、C或D中所列之序列(例如SEQ ID No: 1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300)的有義股。

在某些實施例中，本發明描述用於降低或抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，其包括具有如表A、B、C或D中所列之序列(例如SEQ ID NO: 1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301)的反義股。

在一些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列之核苷酸序列，尤其SEQ ID NO: 1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或 1300中之任一者的有義股。在一些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有如表A、表B、表C或表D中所列之核苷酸序列，尤其SEQ ID NO: 1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1202、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或 1301中之任一者的反義股。在某些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO: 1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中之任一者之核苷酸序列的有義股，及具有SEQ ID NO: 1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301中之任一者之核苷酸序列的反義股。

在某些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO: 1188、1190、1200、1216、1218、1220、1224、1230、1232、1234、1244、1246、1250、1254、1262、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中之任一者之核苷酸序列的有義股，及具有SEQ ID NO: 1189、1191、1201、1215、1217、1221、1225、1231、1233、1235、1245、1247、1251、1255、1263、1289、1291、1295、1297、1299或1301中之任一者之核苷酸序列的反義股。

在某些情況下，RNAi寡核苷酸包括具有SEQ ID NO: 1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中之任一者之核苷酸序列的有義股，及具有SEQ ID NO: 1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中之任一者之核苷酸序列的反義股。

在某些情況下，RNAi寡核苷酸之有義股及反義股分別選自： (a) SEQ ID NO: 1220及1221， (b) SEQ ID NO: 1224及1225， (c) SEQ ID NO: 1230及1231， (d) SEQ ID NO: 1232及1233， (e) SEQ ID NO: 1188及1189， (f) SEQ ID NO: 1190及1191， (g) SEQ ID NO: 1244及1245， (h) SEQ ID NO: 1250及1251-， (i) SEQ ID NO: 1254及1255，及 (j) SEQ ID NO: 1246及1247。

熟習此項技術者瞭解，在一些情況下，在描述寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)或其他核酸之結構時提及呈現於序列表中之序列。在此類情況中，實際寡核苷酸或其他核酸當與指定序列相比較時具有一或多個替代核苷酸(例如DNA核苷酸之RNA對應物或RNA核苷酸之DNA對應物)及/或一或多個經修飾之核苷酸及/或一或多個經修飾之核苷酸間鍵聯及/或一或多個其他修飾，同時保留與指定序列基本上相同或類似之互補特性。

在一些實施例中，本文之ds寡核苷酸包括25-核苷酸有義股及27-核苷酸反義股，其當由Dicer酶作用時產生併入成熟RISC之反義股。在某些情況下，ds寡核苷酸之有義股比27個核苷酸更長(例如28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40個核苷酸)。在某些情況下，ds寡核苷酸之有義股比25個核苷酸更長(例如26、27、28、29或30個核苷酸)。

在一些情況下，本文之ds寡核苷酸具有一個5'端，其當與其他5'端相比時為熱力學不太穩定的。在一些實施例中，ds寡核苷酸為非對稱的且包括在有義股之3'端的平末端及在反義股之3'端的3'-懸垂物。在一些實施例中，反義股上之3'-懸垂物之長度為約1至約8個核苷酸(例如長度為1、2、3、4、5、6、7或8個核苷酸)。典型地，用於RNAi之ds寡核苷酸在反義(引導)股之3'端具有二核苷酸懸垂物。然而，其他懸垂物為可能的。在一些實施例中，懸垂物為3'-懸垂物，其長度在約1至約6個核苷酸、視情況1至5、1至4、1至3、1至2、2至6、2至5、2至4、2至3、3至6、3至5、3至4、4至6、4至5、5至6個核苷酸之間，或為1、2、3、4、5或6個核苷酸。然而，在其他情況下，懸垂物為5'-懸垂物，其包含約1至約6個核苷酸、視情況1至5、1至4、1至3、1至2、2至6、2至5、2至4、2至3、3至6、3至5、3至4、4至6、4至5、5至6個核苷酸之間或1、2、3、4、5或6個核苷酸的長度。

在一些情況下，反義股之3'端的兩個末端核苷酸為經修飾的。在一些情況下，反義股之3'端的兩個末端核苷酸與目標mRNA (例如PNPLA3 mRNA)互補。在其他情況下，反義股之3'端的兩個末端核苷酸不與目標mRNA互補。在一些情況下，缺口四環結構中之寡核苷酸之各3'端的兩個末端核苷酸為GG。典型地，ds寡核苷酸之各3'端之兩個末端GG核苷酸中之一者或兩者不與目標mRNA互補。

在一些情況下，有義與反義股之間存在一或多(例如1、2、3、4或5)個錯配。若有義與反義股之間存在超過一個錯配，則其可連續定位(例如2、3或更多者呈一排)，或分散在具互補性之區域中。在一些情況下，有義股之3'端含有一或多個錯配。在某些情況下，在有義股之3'端併有兩個錯配。在一些情況下，在寡核苷酸之有義股3'端之鹼基錯配或區段擾動改良或增加ds寡核苷酸之效能。

A. 反義股：本文中用於靶向PNPLA3 mRNA且抑制 PNPLA3表現之寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)包括反義股，該反義股包括如表1或表3或表A、B、C或D之反義股中所列之序列。在一些情況下，寡核苷酸包括具有如SEQ ID NO: 788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中之任一者中所列之序列的至少約12 (例如至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19、至少20、至少21、至少22或至少23)個連續核苷酸的反義股，或具有SEQ ID NO: 1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中之任一者之核苷酸序列的反義股。

另外，本文之寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)可包括長度為至多約40個核苷酸(例如長度為至多40、至多35、至多30、至多27、至多25、至多21、至多19、至多17或至多12個核苷酸)之反義股。在一些情況下，寡核苷酸可具有長度為至少約12個核苷酸(例如長度為至少12、至少15、至少19、至少21、至少22、至少25、至少27、至少30、至少35或至少38個核苷酸)之反義股。或者，寡核苷酸可具有長度在約12至約40 (例如12至40、12至36、12至32、12至28、15至40、15至36、15至32、15至28、17至22、17至25、19至27、19至30、20至40、22至40、25至40或32至40)個核苷酸範圍內之反義股。在某些情況下，寡核苷酸可具有長度為12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40個核苷酸之反義股。

如上文所提及，本文之寡核苷酸之反義股可稱為「引導股」。舉例而言，與RISC接合且結合至 Argonaute蛋白(諸如Ago2)或與一或多種類似因子接合或結合至一或多種類似因子且引導目標基因之沈默的反義股，該反義股稱為引導股(或「過客股」)。

B. 有義股：本文中用於靶向PNPLA3 mRNA且抑制 PNPLA3表現之寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)包括有義股序列，該有義股序列包括如表1或表3或表A、B、C或D之有義股中所列之序列。在一些情況下，寡核苷酸包括有義股，該有義股具有如SEQ ID NO: 787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中之任一者中中所列之序列的至少約12 (例如至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19、至少20、至少21、至少22、或至少23)個連續核苷酸。

另外，本文之寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)包括長度為至多約40個核苷酸(例如長度為至多40、至多36、至多30、至多27、至多25、至多21、至多19、至多17或至多12個核苷酸)之有義股(或過客股)。在一些情況下，寡核苷酸可具有長度為至少約12個核苷酸(例如長度為至少12、至少15、至少19、至少21、至少25、至少27、至少30至少36或至少38個核苷酸)之有義股。或者，寡核苷酸可具有長度在約12至約40 (例如12至40、12至36、12至32、12至28、15至40、15至36、15至32、15至28、17至21、17至25、19至27、19至30、20至40、22至40、25至40或32至40)個核苷酸範圍內之有義股。在某些情況下，寡核苷酸可具有長度為12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40個核苷酸之有義股。

在一些實施例中，有義股在其3'端包含莖-環結構。在其他實施例中，有義股在其5'端包含莖-環結構。在其他實施例中，莖為長度為約2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14 bp之雙鏈體。在一些實施例中，莖-環為寡核苷酸提供針對降解(例如酶降解)之保護作用且有助於或改良對目標細胞、組織或器官(例如肝臟)之靶向及/或遞送或兩者。舉例而言，莖-環之環提供具有一或多個修飾之核苷酸，該一或多個修飾有助於、改良或增加對目標mRNA (例如PNPLA3 mRNA)之靶向、對目標基因表現(例如 PNPLA3表現)之抑制及/或向目標細胞、組織或器官(例如肝臟)的遞送或兩者。在一些實施例中，莖-環本身或對莖-環之修飾不實質上影響寡核苷酸之固有基因表現抑制活性，但有助於、改良或增加穩定性(例如提供針對降解之保護作用)及/或寡核苷酸向目標細胞、組織或器官(例如肝臟)之遞送。在某些實施例中，寡核苷酸包含包括(例如在其3'端)闡述為S1-L-S2之莖-環的有義股，其中S1與S2互補，且其中L形成在S1與S2之間長度為至多約10個核苷酸(例如長度為3、4、5、6、7、8、9或10個核苷酸)之單股環。在某些實施例中，環(L)之長度為4個核苷酸。圖1及2展示此類寡核苷酸之非限制性實例。在一些實施例中，具有如上文所描述之結構S1-L-S2的莖-環之環(L)為四環(例如在缺口四環結構內)。在一些實施例中，四環包含核糖核苷酸、去氧核糖核苷酸、經修飾之核苷酸、遞送配位體及其組合。 V. 寡核苷酸修飾

A. 糖修飾：經修飾之糖(本文中亦稱為糖類似物)包括經修飾之去氧核糖或核糖部分，其中例如一或多個修飾存在於糖之2'、3'、4'及/或5'碳位置處。經修飾之糖亦包括非天然替代碳結構，諸如存在於鎖核酸(「LNA」；參見例如Koshkin等人(1998) TETRAHEDRON 54:3607-3630)、解鎖核酸(「UNA」；參見例如Snead等人(2013) MOL. THER-NUC. ACIDS2:e103)及橋接核酸(「BNA」；參見例如Imanishi及Obika (2002) CHEM. COMMUN .16:1653-1659)中之彼等非天然替代碳結構。

在一些實施例中，糖中之核苷酸修飾為2'-修飾，諸如2'-O-炔丙基、2'-O-丙胺基、2'-胺基、2'-乙基、2'-氟(2'-F)、2'-胺基乙基(EA)、2'-O-甲基(2'-OMe)、2'-O-甲氧基乙基(2'-MOE)、2'-O-[2-(甲胺基)-2-側氧基乙基](2'-O-NMA)或2'-去氧-2'-氟-β-d-阿拉伯糖基核酸(2'-FANA)。在某些實施例中，修飾為2'-F、2'-OMe或2'-MOE。在其他實施例中，糖中之修飾為糖環之修飾，其包括糖環之一或多個碳之修飾。舉例而言，糖中之修飾為糖之2'-氧鍵聯至糖之1'-碳或4'-碳，或2'-氧經由伸乙基或亞甲基橋鍵聯至1'-碳或4'-碳。在其他實施例中，修飾為缺乏2'-碳至3'-碳鍵之非環糖。在其他實施例中，修飾為諸如糖之4'位置中之硫醇基。

本文之寡核苷酸包括至少1 (例如至少1、至少5、至少10、至少15、至少20、至少25、至少30、至少35、至少40、至少45、至少50、至少55、至少60或更多)個經修飾之核苷酸。在一些實施例中，有義股包含至少1 (例如至少1、至少5、至少10、至少15、至少20、至少25、至少30、至少35或更多)個經修飾之核苷酸。在一些實施例中，反義股包含至少1 (例如至少1、至少5、至少10、至少15、至少20或更多)個經修飾之核苷酸。

在某些實施例中，有義股之所有核苷酸均為經修飾的。同樣地，反義股之所有核苷酸均為經修飾的。在一些實施例中，本文之寡核苷酸之所有核苷酸(亦即，有義股與反義股兩者)均為經修飾的。如上文所述且在一些實施例中，經修飾之核苷酸為2'-修飾(例如2'-F、2'-OMe、2'-MOE及/或2'-去氧-2'-氟-β-d-阿拉伯糖基核酸)。在某些實施例中，經修飾之核苷酸為2'-修飾，諸如2'-F或2'-OMe。

此外，本文之寡核苷酸具有不同修飾模式。在一些實施例中，經修飾之寡核苷酸包含具有如表A、B、C或D中之任一者中所列之修飾模式的反義股，且包含具有如表A、B、C或D (以及圖1)中之任一者中所列之修飾模式的有義股序列。在一些實施例中，有義股之位置8、9、10或11中之一或多者經2'-F修飾。在其他實施例中，有義股中在位置1至7及12至20之各核苷酸之糖部分經2'-OMe修飾。

在一些實施例中，反義股包括3個在糖部分之2'-位置經2'-F修飾之核苷酸。在一些實施例中，在位置2、5及14之糖部分及視情況反義股之位置1、3、7及10之核苷酸中之至多3者經2'-F修飾。在其他實施例中，在反義股之位置2、5及14之糖部分經2'-F修飾。在其他實施例中，在反義股之位置1、2、5及14之糖部分經2'-F修飾。在其他情況下，在反義股之位置1、2、3、5、7及14之糖部分經2'-F修飾。在其他實施例中，在反義股之位置1、2、3、5、10及14之糖部分經2'-F修飾。在其他實施例中，在反義股之位置2、3、5、7、10及14之糖部分經2'-F修飾。

B. 5'端磷酸酯：5'端磷酸酯基可用於增強本文之寡核苷酸與Ago2之相互作用。然而，具有5'-磷酸酯基之寡核苷酸可能易於經由磷酸酶或其他酶降解，此可限制其在活體內之生物可用性。在一些實施例中，寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)包含對此類降解具抗性之5'磷酸酯類似物。此類磷酸酯類似物之實例包括但不限於氧甲基膦酸酯、乙烯基膦酸酯、丙二醯基膦酸酯或其組合。在某些實施例中，寡核苷酸之一個股鏈之3'端連接至模擬天然5'-磷酸酯基之靜電及空間特性的化學部分(「磷酸酯模擬物」)。

或者或另外，本文之寡核苷酸在糖之4'-碳位置處具有磷酸酯類似物(稱為「4'-磷酸酯類似物」)。參見例如國際專利申請公開案第WO 2018/045317號。在一些實施例中，本文之寡核苷酸在5'-末端核苷酸處包括4'-磷酸酯類似物。在一些實施例中，磷酸酯類似物為氧甲基膦酸酯，其中氧甲基之氧原子結合至糖部分(例如在其4'-碳處)或其類似物。在其他實施例中，4'-磷酸酯類似物為硫甲基膦酸酯或胺基甲基膦酸酯，其中硫甲基之硫原子或胺基甲基之氮原子結合至糖部分之4'-碳或其類似物。在某些實施例中，4'-磷酸酯類似物為氧甲基膦酸酯，其由式–O–CH ₂–PO(OH) ₂或–O–CH ₂–PO(OR) ₂表示，其中R獨立地選自H、CH ₃、CH ₂CH ₂CN、CH ₂OCOC(CH ₃) ₃、CH ₂OCH ₂CH ₂Si (CH ₃) ₃烷基或保護基。在某些實施例中，烷基為CH ₂CH ₃。在某些其他實施例中，R獨立地選自H、CH ₃或CH ₂CH ₃。

C. 經修飾之核苷間鍵聯：除以上修飾外，本文之寡核苷酸亦包含經修飾之核苷間鍵聯。在一些情況下，磷酸酯修飾或取代產生包含至少約1 (例如至少1、至少2、至少3或至少5)個經修飾之核苷酸間鍵聯之寡核苷酸。在一些實施例中，寡核苷酸包含約1至約10 (例如1至10、2至8、4至6、3至10、5至10、1至5、1至3或1至2)個經修飾之核苷酸間鍵聯。在某些其他實施例中，寡核苷酸包含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個經修飾之核苷酸間鍵聯。

經修飾之核苷酸間鍵聯之實例包括但不限於二硫代磷酸酯鍵聯、硫代磷酸酯鍵聯、磷酸三酯鍵聯、硫羰基烷基膦酸酯鍵聯、硫羰基烷基磷酸三酯鍵聯、亞磷醯胺鍵聯、膦酸酯鍵聯或硼代磷酸酯鍵聯。在一些實施例中，如本文所揭示之寡核苷酸中之任一者之至少一個經修飾之核苷酸間鍵聯為硫代磷酸酯鍵聯。

在一些實施例中，本文之寡核苷酸包含有義股之位置1與2、反義股之位置1與2、反義股之位置2與3、反義股之位置3與4、反義股之位置20與21及反義股之位置21與22中之一或多者之間的硫代磷酸酯鍵聯。在其他實施例中，寡核苷酸包含有義股之位置1與2、反義股之位置1與2、反義股之位置2與3、反義股之位置20與21及反義股之位置21與22中之每一者之間的硫代磷酸酯鍵聯。

D. 鹼基修飾：除以上修飾外，本文之寡核苷酸亦包含一或多個經修飾之核鹼基。在一些實施例中，經修飾之核鹼基(本文亦稱為鹼基類似物)鍵聯在核苷酸糖部分之1'位置處。在某些實施例中，經修飾之核鹼基為含氮鹼基。在某些其他實施例中，經修飾之核鹼基不含氮原子。參見例如美國專利申請公開案第2008/0274462號。在一些實施例中，經修飾之核苷酸為通用鹼基。然而，在某些實施例中，經修飾之核苷酸不含核鹼基(無鹼基)。

對於通用鹼基，其包含位於經修飾之核苷酸中之核苷酸糖部分之1'位置或核苷酸糖部分取代中之等效位置的雜環部分，其當存在於雙鏈體中時在不實質上改變雙鏈體結構之情況下與超過一種類型之鹼基相對定位。此外，且與完全與目標核酸互補之參考ss核酸(例如寡核苷酸)相比，具有通用鹼基之ss核酸與目標核酸形成雙鏈體，該雙鏈體具有與互補核酸形成之雙鏈體更低的T _m。然而，當與其中通用鹼基已經鹼基置換以產生單個錯配之參考ss核酸相比時，具有通用鹼基之ss核酸與目標核酸形成雙鏈體，該雙鏈體具有比與具有錯配鹼基之核酸形成之雙鏈體更高的T _m。

示例性通用結合核苷酸包括但不限於肌苷、1-β-D-呋喃核糖基-5-硝基吲哚及/或1-β-D-呋喃核糖基-3-硝基吡咯(參見例如美國專利申請公開案第2007/0254362號；Van Aerschot等人(1995) NUCLEIC ACIDS RES . 23:4363-70；Loakes等人(1995) NUCLEIC ACIDS RES .23:2361-66；及Loakes及Brown (1994) NUCLEIC ACIDS RES . 22:4039-43)。

E. 可逆修飾：雖然可進行某些修飾以防止本文之寡核苷酸在達至目標細胞之前受到活體內環境影響，但其亦可降低寡核苷酸在其達至目標細胞之胞質液後之效能或活性。因此可進行可逆修飾，使得分子在細胞外保留所需特性，接著在進入細胞之胞質環境後將其移除。可逆修飾可例如藉由胞內酶之作用或藉由細胞內部之化學條件(例如通過由細胞內麩胱甘肽還原)移除。

在一些實施例中，可逆修飾之核苷酸包含麩胱甘肽敏感部分。典型地，核酸分子經環狀二硫化物部分化學修飾，以屏蔽由核苷酸間二磷酸鍵聯形成之負電荷且改良細胞攝取及核酸酶抗性。參見美國專利申請公開案第2011/0294869號、國際專利申請公開案第WO 2014/088920號及第WO 2015/188197號及Meade等人(2014) NAT. BIOTECHNOL .32:1256-63。核苷酸間二磷酸鍵聯之此可逆修飾經設計將藉由胞質液之還原環境(例如麩胱甘肽)在細胞內裂解。早期實例包括中和磷酸三酯修飾，磷酸三酯修飾經報道將在細胞內部可裂解(參見例如Dellinger等人(2003) J. AM. CHEM. SOC .125:940-50)。

一些可逆修飾在活體內投與期間(例如轉運通過血液及/或細胞之溶酶體/內體區室)保護寡核苷酸，其中寡核苷酸將暴露於核酸酶及其他惡劣環境條件(例如pH值)。當釋放至與細胞間隙相比其中麩胱甘肽之水準更高的細胞之胞質液中時，修飾發生逆轉，且結果為裂解之寡核苷酸。當與使用不可逆化學修飾可獲得之選擇相比時，使用可逆麩胱甘肽敏感部分有可能將空間上更大之化學基團引入寡核苷酸中。此係因為此等更大之化學基團在胞質液中將移除，且因此，不應妨礙寡核苷酸在細胞之胞質液內部之生物活性。因此，此等更大之化學基團可經工程改造以賦予寡核苷酸各種優點，諸如核酸酶抗性、親脂性、電荷、熱穩定性、特異性及降低之免疫原性。在一些情況下，麩胱甘肽敏感部分之結構可經工程改造以改變其釋放動力學。

在一些實施例中，麩胱甘肽敏感部分連接至核苷酸之糖。在某些實施例中，麩胱甘肽敏感部分連接至經修飾之核苷酸之糖的2'-碳。另外或或者，特定而言當經修飾之核苷酸為寡核苷酸之5'端核苷酸時，麩胱甘肽敏感部分連接至糖之5'-碳。另外或或者，特定而言當經修飾之核苷酸為寡核苷酸之3'端核苷酸時，麩胱甘肽敏感部分連接至糖之3'-碳。在一些實施例中，麩胱甘肽敏感部分包括磺醯基(參見例如國際專利申請公開案第WO 2018/039364號)。 VI. 靶向配位體

需要使本文之寡核苷酸靶向一或多個細胞或一或多個器官。此類策略可幫助避免其他器官中不希望之效應或避免寡核苷酸不當地損失至將不因其受益之細胞、組織或器官中。因此，寡核苷酸可經修飾以有助於靶向及/或遞送至組織、細胞或器官(例如有助於將寡核苷酸遞送至肝臟)。在一些實施例中，寡核苷酸經修飾以有助於寡核苷酸遞送至肝臟之肝細胞。在某些實施例中，寡核苷酸包含結合至一或多個靶向配位體之至少一個核苷酸(例如1、2、3、4、5、6或更多個核苷酸)。

示例性靶向配位體包括但不限於碳水化合物、胺基糖、膽固醇、肽、多肽、蛋白質或蛋白質之一部分(例如抗體或抗體片段)或脂質。在一些實施例中，靶向配位體為適配體。舉例而言，靶向配位體為用於靶向腫瘤血管或神經膠質瘤細胞之RGD肽、用於靶向腫瘤血管或基質、轉鐵蛋白、乳鐵蛋白之CREKA肽或用於靶向CNS脈管系統上所表現之轉鐵蛋白受體之適配體或用於靶向神經膠質瘤細胞上之EGFR之抗EGFR抗體。在某些實施例中，靶向配位體為一或多個GalNAc部分。

在一些實施例中，寡核苷酸之1或多(例如1、2、3、4、5或6)個核苷酸各自可結合至單獨靶向配位體。在一些實施例中，寡核苷酸之2至4個核苷酸各自結合至單獨靶向配位體。在一些實施例中，靶向配位體可結合至有義股或反義股任一末端之2至4個核苷酸(例如靶向配位體結合至有義股或反義股之5'或3'端之2至4核苷酸懸垂物或延伸物)，使得靶向配位體類似牙刷之刷毛且寡核苷酸類似於牙刷。舉例而言，寡核苷酸在有義股之5'或3'端包含莖-環且莖之環之1、2、3或4個核苷酸可個別地結合至靶向配位體。在一些實施例中，寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)在有義股之3'端包含莖-環，其中莖-環之環包括三環或四環，且其中三環或四環之3或4個核苷酸分別個別地結合至靶向配位體。

GalNAc為ASGPR之高親和力配位體，其主要在肝細胞之竇狀表面表現且在循環醣蛋白之結合、內化及後續清除中具有主要作用，該等循環醣蛋白含有末端半乳糖或GalNAc殘基(去唾液酸醣蛋白)。利用GalNAc部分結合(間接或直接)至本文之寡核苷酸來使其靶向細胞上所表現之ASGPR。在一些實施例中，寡核苷酸結合至至少一或多個GalNAc部分，其中GalNAc部分使寡核苷酸靶向人類肝臟細胞(例如人類肝細胞)上所表現之ASGPR。

本文之寡核苷酸直接或間接結合至單價GalNAc。在一些實施例中，寡核苷酸直接或間接結合至超過一個單價GalNAc (亦即，結合至2、3或4個單價GalNAc部分，且典型地結合至3或4個單價GalNAc部分)。在一些實施例中，寡核苷酸結合至一或多個二價GalNAc、三價GalNAc或四價GalNAc部分。

在一些實施例中，本文之寡核苷酸之1或多(例如1、2、3、4、5或6)個核苷酸各自可結合至GalNAc部分。在一些實施例中，四環之2至4個核苷酸各自結合至單獨之GalNAc。在其他實施例中，三環之1至3個核苷酸各自結合至單獨之GalNAc。在一些實施例中，靶向配位體結合至有義或反義股之任一末端的2至4個核苷酸(例如配位體結合至有義或反義股之5'或3'端之2至4個核苷酸懸垂物或延伸物)，使得GalNAc部分類似於牙刷之刷毛且寡核苷酸類似於牙刷。在一些實施例中，GalNAc部分結合至有義股之核苷酸。舉例而言，4個GalNAc部分結合至有義股之四環中之核苷酸，其中各GalNAc部分結合至1個核苷酸。在某些實施例中，3個GalNAc部分結合至有義股之四環中之核苷酸，其中各GalNAc部分結合至1個核苷酸。

在某些實施例中，寡核苷酸包含連接至鳥苷酸之單價GalNAc，稱為[ademG-GalNAc]或2'-胺基二乙氧基甲醇-鳥嘌呤-GalNAc，如以下所展示：

。

在某些實施例中，本文之寡核苷酸包含連接至腺嘌呤核苷酸之單價GalNAc，稱為[ademA-GalNAc]或2'-胺基二乙氧基甲醇-腺嘌呤-GalNAc，如以下所展示：

。

以下顯示用於自5'至3'具有核苷酸序列GAAA之環(L =連接子，X =雜原子)的此類結合之實例，其中顯示莖連接點。此類環存在於例如表3、A、B、C或D中所列及如圖1中所示之有義股之位置27-30。在化學式中，

用於描述與寡核苷酸股之連接點：

。

使用適當方法或化學(例如點擊化學)將靶向配位體鍵聯至核苷酸。一種使靶向配位體結合至核苷酸之方式係藉由使用點擊連接子來進行。在一些實施例中，使用基於縮醛之連接子來使靶向配位體結合至本文之寡核苷酸中之任一者之核苷酸。基於縮醛之連接子揭示於例如國際專利申請公開案第WO 2016/100401號中。在一些情況下，連接子為不穩定連接子。然而，在其他情況下，連接子為穩定的。以下顯示關於自5'至3'具有核苷酸GAAA之環的實例，其中GalNAc部分使用縮醛連接子連接至環之核苷酸。此類環存在於例如表3、A、B、C或D中所列之有義股中之任一者之位置27-30。在化學式中，

為與寡核苷酸股之連接點：

。

在一些實施例中，在靶向配位體(例如GalNAc部分)與本文之寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)之間提供雙鏈體延伸(例如長度為至多3、4、5或6 bp)。在其他實施例中，寡核苷酸不具有與其結合之GalNAc。製劑及醫藥組合物

本文之寡核苷酸併入製劑或醫藥組合物中。已研發用於促進寡核苷酸用途之各種製劑。舉例而言，可使用使降解最小化、有助於遞送及/或攝入或為製劑中之寡核苷酸提供另一有益特性之製劑將寡核苷酸遞送至個體或細胞環境中。在一些實施例中，在緩衝溶液(諸如磷酸鹽緩衝鹽水溶液)、脂質體、膠束結構及衣殼中調配本文之寡核苷酸。

使用陽離子脂質之寡核苷酸製劑用於促進寡核苷酸轉染至細胞中。舉例而言，可使用陽離子脂質(諸如lipofectin)、陽離子甘油衍生物及聚陽離子分子(例如聚離胺酸)。合適之脂質包括Oligofectamine、Lipofectamine (Life Technologies)、NC388 (Ribozyme Pharmaceuticals, Inc.)或FuGene 6 (Roche)，該等脂質全部根據製造商之說明書使用。

因此，在一些實施例中，本文之製劑包含脂質體、脂質、脂質複合物、微球、微粒、奈米球或奈米粒子(諸如脂質奈米粒子)或可以其他方式經調配用於向細胞、組織、器官或有需要之個體的身體投與(參見例如Remington, 「The Science and Practice of Pharmacy」 (L.V. Allen Jr.編, 第22版, Pharmaceutical Press, 2013)。

在一些實施例中，本文之製劑進一步包含賦形劑，其可賦予組合物改良之穩定性、改良之吸收、改良之溶解度及/或活性成分之治療增強。在一些實施例中，賦形劑為緩衝劑(例如檸檬酸鈉、磷酸鈉、tris鹼或氫氧化鈉)或媒劑(例如緩衝溶液、礦脂、二甲亞碸或礦物油)。在一些實施例中，本文之寡核苷酸經凍乾以便延長保質期，且接著在使用(例如向個體投與)前製成溶液。因此，包括寡核苷酸中之一或多者的醫藥組合物中之賦形劑為凍乾保護劑(例如甘露糖醇、乳糖、聚乙二醇或聚乙烯吡咯啶酮)或塌陷溫度調節劑(例如右旋糖酐、Ficoll™或明膠)。

醫藥組合物經調配與其預期投藥途徑相容。投藥途徑包括但不限於非經腸(例如靜脈內、肌肉內、腹膜內、真皮內及皮下)、經口(例如吸入)、經真皮(例如經表面)、經黏膜及直腸投與。

適合於可注射用途之醫藥組合物包含無菌水溶液(在水溶性情況下)或分散體及無菌粉末，用於臨時製備無菌可注射溶液或分散體。對於靜脈內投與，合適之載劑包括但不限於生理鹽水、抑細菌水、Cremophor EL™ (BASF)或磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)。載劑為含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液體聚乙二醇及類似物)以及其合適之混合物的溶劑或分散介質。在許多實施例中，與等張劑(諸如糖、多元醇(諸如甘露糖醇、山梨糖醇)及/或氯化鈉)一起包含在組合物中將為較佳的。藉由按需要將本文之寡核苷酸以所需量與上文列舉之一種成分或成分組合一起併入所選溶劑中，隨後過濾滅菌來製備無菌可注射溶液。

此外，醫藥組合物包含至少約0.1%或更多之治療劑(例如本文之寡核苷酸中之一或多者)，不過治療劑之百分比可介於佔總組合物之重量或體積約1%至約80%之間或更多。熟習製備此類藥物製劑之技術者將考慮諸如溶解度、生物可用性、生物半衰期、投藥途徑、產品保質期以及其他藥理學考慮因素之因素，且因而，可能需要多種劑量及治療方案。

儘管若干實例以本文之寡核苷酸中之至少一者之靶向肝臟之遞送為目標，但亦涵蓋靶向其他組織。套組

本文之寡核苷酸可併入包含本文之寡核苷酸中之一或多者及使用說明書的套組。在一些實施例中，套組包含寡核苷酸中之一或多者及含有套組及/或其任何組分之使用說明書的包裝插頁。在其他實施例中，套組包含合適之容器、寡核苷酸中之一或多者、一或多種對照及各種緩衝液、試劑、酶及如此項技術中已知之其他標準成分。

在一些實施例中，容器可為至少一個小瓶、孔、試管、燒瓶、瓶、注射器或其他容器構件，一或多種寡核苷酸放入其中且在一些情況下適當等分至其中。在其中提供另一組分之其他實施例中，套組含有將此組分放入其中之其他容器。套組亦包括用於嚴密封閉地容納一或多種寡核苷酸及任何其他試劑以便商業銷售之構件。此類容器包括將所需小瓶保持在內部之注塑或吹塑塑膠容器。容器及/或套組包括具有使用說明書及/或警告之標簽。

在一些實施例中，套組包含本文之一或多種寡核苷酸及醫藥學上可接受之載劑或包含寡核苷酸中之一或多者的醫藥組合物及關於治療有需要之個體的與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患或延遲其進展的說明書。方法製備方法

使用熟習此項技術者已知之方法及/或技術，諸如藉由使用習知核酸固相合成來製備本文之寡核苷酸。在合適之核酸合成儀上使用標準核苷酸或核苷前驅物(例如亞磷醯胺)組裝寡核苷酸之聚核苷酸。包括DNA/RNA合成儀之自動化核酸合成儀可自例如Applied Biosystems (Foster City, CA)、BioAutomation (Irving,TX)以及GE Healthcare Life Sciences (Pittsburgh, PA)商購獲得。

如熟習此項技術者所理解，使用合成本文之寡核苷酸之其他方法及/或技術。另外，以替代順序或次序進行各種合成步驟以得到所需化合物。適用於合成寡核苷酸之其他合成化學轉化、保護基(例如用於存在於鹼基上之羥基、胺基等)及保護基方法(保護及去保護)為此項技術中已知的且描述於例如Larock, 「Comprehensive Organic Transformations」, VCH Publishers (1989)；Greene及Wuts, PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, 第2版, John Wiley & Sons (1991)；Fieser及Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley & Sons (1994)；及Paquette編, ENCYCLOPEDIA OF REAGENTS FOR ORGANIC SYNTHESIS, John Wiley & Sons (1995)中。使用方法I. 降低細胞、組織、器官及有機體中之 PNPLA3表現之方法

使用本文之寡核苷酸減少細胞、組織、器官或個體中之PNPLA3 mRNA。該等方法包括本文所描述之步驟，且此等步驟可能但不一定以如所描述之順序進行。然而，其他順序亦為可想像的。此外，個別或多個步驟平行地及/或時間重疊地及/或個別地或以多次重複之步驟來進行。此外，該等方法包括其他未指定之步驟。

該等方法包括使細胞、細胞群體、組織、器官或個體與有效量之本文之寡核苷酸中之任一者(例如ds寡核苷酸)接觸或向細胞、細胞群體、組織、器官或個體遞送有效量之本文之寡核苷酸中之任一者(例如ds寡核苷酸)以便降低 PNPLA3表現。在一些實施例中，降低之 PNPLA3表現藉由量測細胞中PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白或PNPLA3活性之量或水準降低來確定。

關於適當之細胞類型，細胞類型為表現mRNA之任何細胞(例如肝細胞、巨噬細胞、單核細胞衍生之細胞、前列腺癌細胞、腦細胞、內分泌組織細胞、骨髓細胞、淋巴結細胞、肺細胞、膽囊細胞、肝臟細胞、十二指腸細胞、小腸細胞、胰腺細胞、腎臟細胞、胃腸道細胞、膀胱細胞、脂肪及軟組織細胞及皮膚細胞)。在一些實施例中，細胞為獲自個體之原代細胞。在一些實施例中，原代細胞已經歷有限次數之傳代，使得細胞實質上維持天然表型特性。在一些實施例中，細胞為離體、活體內或活體外細胞(亦即，使得本文之寡核苷酸中之一或多者可遞送至培養物中之細胞或遞送至細胞駐留其中之有機體)。

在一些實施例中，使用此項技術中已知之核酸遞送方法將本文之寡核苷酸遞送至細胞或細胞群體，包括但不限於注射含有寡核苷酸之溶液、用由寡核苷酸覆蓋之粒子進行轟擊、使細胞或細胞群體暴露於含有寡核苷酸之溶液或在存在寡核苷酸之情況下對細胞膜進行電穿孔。亦使用此項技術中已知用於將寡核苷酸遞送至細胞之其他方法，諸如脂質介導之載劑轉運、化學介導之轉運及陽離子脂質體轉染(諸如磷酸鈣)及其他方法。

藉由評估細胞或細胞群體之與 PNPLA3表現相關一或多個分子、特性或特徵的分析或技術(例如使用PNPLA3表現生物標記物)或藉由評估直接指示細胞或細胞群體中之 PNPLA3表現之分子(例如PNPLA3 mRNA或PNPLA3蛋白)的分析或技術來確定降低之 PNPLA3表現。在一些實施例中，藉由將與寡核苷酸接觸之細胞或細胞群體中之 PNPLA3表現與對照細胞或細胞群體(例如未與寡核苷酸接觸或與對照寡核苷酸接觸之細胞或細胞群體)進行比較來評估寡核苷酸降低 PNPLA3表現之程度。在一些實施例中，預先確定對照細胞或細胞群體中之 PNPLA3表現之對照量或水準，使得不需要在進行分析或技術之每種情況下均量測對照量或水準。預先確定之水準或值採用多種形式，包括但不限於單個截止值，諸如中值或平均值。

使本文之寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)接觸細胞或細胞群體或將本文之寡核苷酸(例如ds寡核苷酸)遞送至細胞或細胞群體產生降低之 PNPLA3表現。在一些實施例中，降低之 PNPLA3表現係相對於未與寡核苷酸接觸或與對照寡核苷酸接觸之細胞或細胞群體中之 PNPLA3表現之對照量或水準。在一些實施例中，降低之 PNPLA3表現相對於 PNPLA3表現之對照量或水準為約1%或更低、約5%或更低、約10%或更低、約15%或更低、約20%或更低、約25%或更低、約30%或更低、約35%或更低、約40%或更低、約45%或更低、約50%或更低、約55%或更低、約60%或更低、約70%或更低、約80%或更低或約90%或更低。在一些實施例中， PNPLA3表現之對照量或水準為尚未與本文之寡核苷酸接觸之細胞或細胞群體中之PNPLA3 mRNA及/或PNPLA3蛋白之量或水準。在一些實施例中，在任何有限時間段或時間量(例如數分鐘、數小時、數天、數週及/或數月)之後，對根據本文之方法將寡核苷酸遞送至細胞或細胞群體之效應進行評估。舉例而言，在至少約4小時、約8小時、約12小時、約18小時或約24小時時確定細胞或細胞群體中之 PNPLA3表現。或者，在使寡核苷酸接觸細胞或細胞群體或將寡核苷酸遞送至細胞或細胞群體之後至少約1天、約2天、約3天、約4天、約5天、約6天、約7天、約8天、約9天、約10天、約11天、約12天、約13天、約14天、約21天、約28天、約35天、約42天、約49天、約56天、約63天、約70天、約77天或約84天或更久時確定細胞或細胞群體中之 PNPLA3表現。在其他實施例中，在使寡核苷酸接觸細胞或細胞群體或將寡核苷酸遞送至細胞或細胞群體之後至少約1個月、約2個月、約3個月、約4個月、約5個月或約6個月或更久時確定細胞或細胞群體中之 PNPLA3表現。

在一些實施例中，以轉殖基因形式遞送本文之寡核苷酸，該轉殖基因經工程改造以使寡核苷酸或股鏈(例如有義及反義股)中之一或多者在細胞中表現。舉例而言，使用經工程改造以表現本文之任何寡核苷酸之轉殖基因來遞送寡核苷酸。轉殖基因可使用病毒載體(例如腺病毒、逆轉錄病毒、痘苗病毒、痘病毒、腺相關病毒或單純皰疹病毒)或非病毒載體(例如質粒或合成mRNA)遞送。在一些實施例中，將轉殖基因直接注射至個體中。 II. 治療方法：

用於治療患有、疑似患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患或處於發展與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之風險中之個體的方法包括投與本文之至少一或多種寡核苷酸。另外，用於治療或減慢個體中與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之發作或進展的方法包括使用本文之寡核苷酸中之一或多者。此外，用於在患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體中實現一或多種治療益處的方法包括提供本文之寡核苷酸中之一或多者。在一些實施例中，可藉由投與治療有效量之以上所揭示之實施例中之任一者之寡核苷酸中之任何一或多者來治療個體。在一些實施例中，治療包括降低 PNPLA3表現。在一些實施例中，對個體進行治療性治療。在一些實施例中，對個別進行預防性治療。在所有此等實施例，寡核苷酸選自表A、B、C或D。

在一些實施例中，向患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體投與一或多種寡核苷酸或包含該一或多種寡核苷酸之醫藥組合物，使得個體中 PNPLA3表現降低，從而治療該個體。在一些實施例中，個體中PNPLA3 mRNA之量或水準降低。在其他實施例中，個體中PNPLA3蛋白之量或水準降低。在其他實施例中，個體中PNPLA3活性之量或水準降低。在其他實施例中，個體中，尤其肝臟中，肝臟TG (例如肝臟中之一或多種TG或總TG)之量或水準降低。在其他情況下，肝臟炎症之量或水準可降低。在其他情況下，肝臟纖維化之水準之量降低。在其他實施例中，血漿AST、血漿ALT或甚至Pro-C3之量或水準降低。在上文所揭示之實施例中之任一者中，寡核苷酸包含具有SEQ ID NO: 1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中之任一者之核苷酸序列的有義股，及具有SEQ ID NO: 1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中之任一者之核苷酸序列的反義股。

在一些實施例中，當與投與一或多種寡核苷酸或其醫藥組合物之前的 PNPLA3表現相比時，個體中 PNPLA3表現降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。在其他實施例中，當與未接受一或多種寡核苷酸或醫藥組合物或接受對照寡核苷酸、醫藥組合物或治療之個體(例如參考或對照個體)中的 PNPLA3表現相比時，個體中 PNPLA3表現降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。

在某些實施例中，當與投與一或多種寡核苷酸或其醫藥組合物之前的PNPLA3 mRNA之量或水準相比時，個體中PNPLA3 mRNA之量或水準降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。在一些實施例中，當與未投與一或多種寡核苷酸或醫藥組合物或投與對照寡核苷酸、醫藥組合物或治療之個體(例如參考或對照個體)中的PNPLA3 mRNA之量或水準相比時，個體中PNPLA3 mRNA之量或水準降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。

在某些實施例中，當與投與一或多種寡核苷酸或其醫藥組合物之前的PNPLA3蛋白之量或水準相比時，個體中PNPLA3蛋白之量或水準降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。在其他實施例中，當與未投與一或多種寡核苷酸或醫藥組合物或投與對照寡核苷酸、醫藥組合物或治療之個體(例如參考或對照個體)中的PNPLA3蛋白之量或水準相比時，個體中PNPLA3蛋白之量或水準降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。

在某些實施例中，當與投與一或多種寡核苷酸或其醫藥組合物之前的PNPLA3活性之量或水準相比時，個體中PNPLA3活性之量或水準降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。在一些實施例中，當與未投與一或多種寡核苷酸或醫藥組合物或投與對照寡核苷酸、醫藥組合物或治療之個體(例如參考或對照個體)中的PNPLA3活性之量或水準相比時，個體中PNPLA3活性之量或水準降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。

在某些實施例中，當與投與一或多種寡核苷酸或其醫藥組合物之前的TG之量或水準相比時，個體中之TG，尤其肝臟TG之量或水準可降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。在一些實施例中，當與未投與一或多種寡核苷酸或醫藥組合物或投與對照寡核苷酸、醫藥組合物或治療之個體(例如參考或對照個體)中的TG之量或水準相比時，個體中TG之量或水準降低至少約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約99%或大於99%。

在此，在細胞(例如肝細胞)、細胞群體或細胞群(例如類器官)、組織(例如肝組織)、樣品(例如肝活組織檢查樣品)、器官(例如肝臟)、血液或其級分(例如血漿)或自個體獲得或分離之任何其他生物材料中， PNPLA3表現、PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白、PNPLA3活性、肝臟TG之量或水準或其任何組合降低。在一些實施例中，在自個體獲得或分離超過一種類型之細胞(例如肝細胞及一或多種其他類型之細胞)、超過一個細胞群、超過一種類型之組織(例如肝組織及一或多種其他類型之組織)、超過一種類型之樣品(例如肝活組織檢查樣品及一或多種其他類型之活組織檢查樣品)、超過一種器官(例如肝臟及一或多種其他器官)、超過一種血液級分(例如血漿及一或多種其他血液級分)中， PNPLA3表現、PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白、PNPLA3活性、TG之量或水準或其任何組合降低。

與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之實例包括但不限於AH、ALD、HCC、CCA、PSC、NAFLD、NASH、脂肪肝(脂肪變性)、肝臟炎症、肝臟纖維化、肝臟硬化或其組合。

由於本文之寡核苷酸之高特異性，其特異性地靶向細胞、組織或器官(例如肝臟)之目標基因之mRNA。在預防疾病時，目標基因為起始或維持疾病所需之基因或已鑑定為與較高之感染疾病之風險相關之基因。在治療疾病時，使寡核苷酸中之一或多者與展現疾病或負責介導疾病之細胞、組織或器官接觸。舉例而言，使與野生型(亦即，天然)或突變之與同 PNPLA3表現相關之病症或疾患相關之基因的全部或一部分實質上一致之寡核苷酸與相關細胞或組織類型(諸如肝細胞或其他肝臟細胞)接觸或將該寡核苷酸引入其中。

在一些實施例中，目標基因來自任何哺乳動物，諸如人類。根據本文之方法，任何基因均可為沈默的。此外，本文之方法典型地涉及向個體投與治療有效量之本文之一或多種寡核苷酸，治療有效量為能夠產生所需治療結果之量。治療可接受之量為治療性治療疾病或病症或疾患之量。用於任一個體之適當劑量將視某些因素而定，包括個體之體型、體表面積、年齡、要投與之組合物、組合物中之活性成分、投藥時間及途徑、總體健康情況及並行投與之其他治療劑。

在該等方法中，以腸內(例如經口、藉由胃部餵食管、藉由十二指腸餵食管、經由胃造口術或經直腸)、非經腸(例如皮下注射、靜脈注射或輸注、動脈注射或輸注、骨內輸注、肌肉內注射、腦內注射、腦室內注射或鞘內)、經表面(例如經皮、吸入、經由滴眼劑或通過黏膜)或藉由直接注射至靶器官(例如個體之肝臟)中之方式為個體投與本文之寡核苷酸或組合物中之任一者。典型地，以靜脈內或皮下方式投與寡核苷酸或組合物。

作為實例之非限制性集合，典型地每季(每三個月一次)、每兩個月(每兩個月一次)、每月或每週投與本文之寡核苷酸或組合物。舉例而言，每週或以兩週或三週之間隔投與寡核苷酸或組合物。在某些實施例中，每天投與寡核苷酸或組合物。在一些實施例中，為個體投與一或多種加載劑量之寡核苷酸或組合物，隨後投與一或多種維持劑量之寡核苷酸或組合物。

在一些實施例中，個體為人類、非人類靈長類動物或其他哺乳動物個體。在其他實施例中，個體為家養動物，諸如狗或貓；牲畜，諸如馬、牛、豬、綿羊、山羊或雞；及諸如小鼠、大鼠、豚鼠或倉鼠之動物。 III. 醫學用途

本文之寡核苷酸可用於或適合用於治療將受益於降低 PNPLA3表現之個體(例如患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之人類)。在一些實施例中，提供寡核苷酸以便用於或適合用於治療患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體。另外，提供寡核苷酸以便用於或適合於用於製造用於治療與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之藥劑或醫藥組合物。在其他實施例中，提供寡核苷酸以便用於或適合於用於靶向PNPLA3 mRNA且降低 PNPLA3表現(例如經由RNAi路徑)。在其他實施例中，提供寡核苷酸以便用於或適合於用於靶向PNPLA3 mRNA且降低PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白及/或PNPLA3活性之量或水準。

在一些實施例中，該等方法包括基於個體具有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之標記物(例如生物標記物) (諸如但不限於PNPLA3 mRNA、PNPLA3蛋白或其組合)或某人易患該與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患來選擇用於治療之個體。同樣地且如下文詳細描述，該等方法亦包括其他步驟，諸如量測或獲得 PNPLA3表現之標記物(例如PNPLA3蛋白)的基線值，且接著將此類所獲得之值與一或多個其他基線值或在為個體投與寡核苷酸中之一或多者之後所獲得之值進行比較以評估治療之有效性。實例

出於說明而非限制之目的提供以下非限制性實例。寡核苷酸之合成實例1：製備ds RNAi寡核苷酸

寡核苷酸合成及純化：使用本文所描述之方法化學合成實例中之ds RNAi寡核苷酸。通常，使用如關於19-23聚體siRNA所描述之固相寡核苷酸合成法(參見例如Scaringe等人(1990) NUCLEIC ACIDS RES. 18:5433-41及Usman等人(1987) J. AM. CHEM. SOC .109:7845-45；亦參見美國專利第5,804,683號；第5,831,071號；第5,998,203號；第6,008,400號；第6,111,086號；第6,117,657號；第6,353,098號；第6,362,323號；第6,437,117號及第6,469,158號)合成ds RNAi寡核苷酸。

根據標準方法(整合DNA技術)合成個別RNA股且進行HPLC純化。舉例而言，使用固相亞磷醯胺化學合成RNA寡核苷酸，去保護且使用標準技術(Damha及Olgivie (1993) METHODS MOL. BIOL . 20:81-114；Wincott等人(1995) NUCLEIC ACIDS RES .23:2677-84)在NAP-5管柱(Amersham Pharmacia Biotech; Piscataway, NJ)上去鹽。使用離子交換高效液相層析法(IE-HPLC)在Amersham Source 15Q管柱(1.0 cm×25 cm；Amersham Pharmacia Biotech)上使用15 min逐步線性梯度對寡聚物進行純化。梯度自90:10緩衝液A:B變化至52:48緩衝液A:B，其中緩衝液A為100 mM Tris pH 8.5且緩衝液B為100 mM Tris pH 8.5，1 M NaCl。在260 nm下對樣品進行監測且收集對應於全長寡核苷酸物質之峰，彙集，在NAP-5管柱上去鹽，且凍乾。

藉由在Beckman PACE 5000 (Beckman Coulter, Inc.)上進行毛細管電泳(CE)來測定各寡聚物之純度。CE毛細管具有100 μm內徑且含有ssDNA 100R凝膠(Beckman-Coulter)。典型地，將約0.6 nmol之寡核苷酸注入毛細管中，在444 V/cm之電場中運行且在260 nm下藉由UV吸光度來偵測。變性Tris-硼酸鹽-7 M-尿素運行緩衝液購自Beckman-Coulter。獲得如藉由CE所評估至少90%純之寡核糖核苷酸，用於下文所描述之實驗。遵循製造商所建議之方案，通過在Voyager DE™生物光譜測定工作站(Applied Biosystems)上進行基質輔助雷射解吸電離飛行時間(MALDI-TOF)質譜分析來驗證化合物身分。獲得所有寡聚物之相對分子量，常常在預期分子量之0.2%內。

製備雙鏈體：將ss RNA寡聚物再懸浮(例如以100 μM濃度)於具有100 mM乙酸鉀、30 mM HEPES，pH 7.5之雙鏈體緩衝液中。將互補之有義及反義股以相等莫耳量混合以產生例如50 μM雙鏈體之最終溶液。將樣品在RNA緩衝液(IDT)中加熱至100℃持續5 min且在使用前使其冷卻至室溫。將ds RNA寡核苷酸儲存在-20℃下。將ss RNA寡聚物凍乾儲存或儲存在-80℃之不含核酸酶之水中。 活體外功能實例2：RNAi寡核苷酸對活體外 PNPLA3表現之抑制

PNPLA3 目標序列鑑定：為鑑定 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸抑制劑，使用基於電腦之算法通過電腦產生適合於分析藉由RNAi路徑進行之PNPLA3表現抑制的PNPLA3目標序列。該算法提供RNAi寡核苷酸引導(反義)股序列，其與人類PNPLA3 mRNA之合適之 PNPLA3目標序列(例如SEQ ID NO:1)互補。藉由該算法鑑定之引導股序列中之一些亦與猴PNPLA mRNA之對應 PNPLA3目標序列互補。藉由該算法鑑定之反義(引導)股序列中之一些亦與猴PNPLA3 mRNA之對應PNPLA3目標序列(例如SEQ ID NO:5)互補。由此產生384種ds RNAi寡核苷酸(格式化為DsiRNA寡核苷酸)，其各自具有獨特的反義股，該獨特的反義股具有與藉由該算法鑑定之PNPLA3目標序列具互補性之區域。表1：在細胞中所評估之靶向人類PNPLA3 mRNA之DsiRNA (未經修飾)及對照.

DsiRNA	過客 (有義)	SEQ ID NO:	引導 (反義)	SEQ ID NO:
1	UCUGCAGGUCCUCUCAGAUCUUGUG	9	CACAAGAUCUGAGAGGACCUGCAGAGU	10
2	AGGUCCUCUCAGAUCUUGUGCGGAA	11	UUCCGCACAAGAUCUGAGAGGACCUGC	12
3	AUUGGCAUCUUCCAUCCAUCCUUCA	13	UGAAGGAUGGAUGGAAGAUGCCAAUGU	14
4	AUCUUCCAUCCAUCCUUCAACUUAA	15	UUAAGUUGAAGGAUGGAUGGAAGAUGC	16
5	UCUUCCAUCCAUCCUUCAACUUAAG	17	CUUAAGUUGAAGGAUGGAUGGAAGAUG	18
6	CCAGAGUGUCUGAUGGGGAAAACGU	19	ACGUUUUCCCCAUCAGACACUCUGGUA	20
7	GAGUGUCUGAUGGGGAAAACGUUCU	21	AGAACGUUUUCCCCAUCAGACACUCUG	22
8	AUGGGGAAAACGUUCUGGUGUCUGA	23	UCAGACACCAGAACGUUUUCCCCAUCA	24
9	GGGGAAAACGUUCUGGUGUCUGACU	25	AGUCAGACACCAGAACGUUUUCCCCAU	26
10	GGGAAAACGUUCUGGUGUCUGACUU	27	AAGUCAGACACCAGAACGUUUUCCCCA	28
11	GGAAAACGUUCUGGUGUCUGACUUU	29	AAAGUCAGACACCAGAACGUUUUCCCC	30
12	GAAAACGUUCUGGUGUCUGACUUUC	31	GAAAGUCAGACACCAGAACGUUUUCCC	32
13	AAAACGUUCUGGUGUCUGACUUUCG	33	CGAAAGUCAGACACCAGAACGUUUUCC	34
14	AAACGUUCUGGUGUCUGACUUUCGG	35	CCGAAAGUCAGACACCAGAACGUUUUC	36
15	AACGUUCUGGUGUCUGACUUUCGGU	37	ACCGAAAGUCAGACACCAGAACGUUUU	38
16	ACGUUCUGGUGUCUGACUUUCGGUC	39	GACCGAAAGUCAGACACCAGAACGUUU	40
17	GUUCUGGUGUCUGACUUUCGGUCCA	41	UGGACCGAAAGUCAGACACCAGAACGU	42
18	GACGAAGUCGUGGAUGCCUUGGUAU	43	AUACCAAGGCAUCCACGACUUCGUCUU	44
19	ACGAAGUCGUGGAUGCCUUGGUAUG	45	CAUACCAAGGCAUCCACGACUUCGUCU	46
20	CGAAGUCGUGGAUGCCUUGGUAUGU	47	ACAUACCAAGGCAUCCACGACUUCGUC	48
21	CAGAGGCGUGCGAUAUGUGGAUGGA	49	UCCAUCCACAUAUCGCACGCCUCUGAA	50
22	GCGAUAUGUGGAUGGAGGAGUGAGU	51	ACUCACUCCUCCAUCCACAUAUCGCAC	52
23	GAUGGAGGAGUGAGUGACAACGUAC	53	GUACGUUGUCACUCACUCCUCCAUCCA	54
24	GAGGAGUGAGUGACAACGUACCCUU	55	AAGGGUACGUUGUCACUCACUCCUCCA	56
25	GAGUGAGUGACAACGUACCCUUCAU	57	AUGAAGGGUACGUUGUCACUCACUCCU	58
26	AGUGAGUGACAACGUACCCUUCAUU	59	AAUGAAGGGUACGUUGUCACUCACUCC	60
27	GUGAGUGACAACGUACCCUUCAUUG	61	CAAUGAAGGGUACGUUGUCACUCACUC	62
28	UGAGUGACAACGUACCCUUCAUUGA	63	UCAAUGAAGGGUACGUUGUCACUCACU	64
29	GAGUGACAACGUACCCUUCAUUGAU	65	AUCAAUGAAGGGUACGUUGUCACUCAC	66
30	AGUGACAACGUACCCUUCAUUGAUG	67	CAUCAAUGAAGGGUACGUUGUCACUCA	68
31	GUGACAACGUACCCUUCAUUGAUGC	69	GCAUCAAUGAAGGGUACGUUGUCACUC	70
32	UGACAACGUACCCUUCAUUGAUGCC	71	GGCAUCAAUGAAGGGUACGUUGUCACU	72
33	GACAACGUACCCUUCAUUGAUGCCA	73	UGGCAUCAAUGAAGGGUACGUUGUCAC	74
34	CAACGUACCCUUCAUUGAUGCCAAA	75	UUUGGCAUCAAUGAAGGGUACGUUGUC	76
35	AACGUACCCUUCAUUGAUGCCAAAA	77	UUUUGGCAUCAAUGAAGGGUACGUUGU	78
36	ACGUACCCUUCAUUGAUGCCAAAAC	79	GUUUUGGCAUCAAUGAAGGGUACGUUG	80
37	CGUACCCUUCAUUGAUGCCAAAACA	81	UGUUUUGGCAUCAAUGAAGGGUACGUU	82
38	UACCCUUCAUUGAUGCCAAAACAAC	83	GUUGUUUUGGCAUCAAUGAAGGGUACG	84
39	UUGAUGCCAAAACAACCAUCACCGU	85	ACGGUGAUGGUUGUUUUGGCAUCAAUG	86
40	GAUGCCAAAACAACCAUCACCGUGU	87	ACACGGUGAUGGUUGUUUUGGCAUCAA	88
41	AUGGGGAGUACGACAUCUGCCCUAA	89	UUAGGGCAGAUGUCGUACUCCCCAUAG	90
42	GUACGACAUCUGCCCUAAAGUCAAG	91	CUUGACUUUAGGGCAGAUGUCGUACUC	92
43	GACAUCUGCCCUAAAGUCAAGUCCA	93	UGGACUUGACUUUAGGGCAGAUGUCGU	94
44	ACAUCUGCCCUAAAGUCAAGUCCAC	95	GUGGACUUGACUUUAGGGCAGAUGUCG	96
45	GUCAAGUCCACGAACUUUCUUCAUG	97	CAUGAAGAAAGUUCGUGGACUUGACUU	98
46	UCAAGUCCACGAACUUUCUUCAUGU	99	ACAUGAAGAAAGUUCGUGGACUUGACU	100
47	CAAGUCCACGAACUUUCUUCAUGUG	101	CACAUGAAGAAAGUUCGUGGACUUGAC	102
48	GUCCACGAACUUUCUUCAUGUGGAC	103	GUCCACAUGAAGAAAGUUCGUGGACUU	104
49	CCACGAACUUUCUUCAUGUGGACAU	105	AUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGUGGAC	106
50	CACGAACUUUCUUCAUGUGGACAUC	107	GAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGUGGA	108
51	ACGAACUUUCUUCAUGUGGACAUCA	109	UGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGUGG	110
52	CGAACUUUCUUCAUGUGGACAUCAC	111	GUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGUG	112
53	GAACUUUCUUCAUGUGGACAUCACC	113	GGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCGU	114
54	AACUUUCUUCAUGUGGACAUCACCA	115	UGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUCG	116
55	ACUUUCUUCAUGUGGACAUCACCAA	117	UUGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUUC	118
56	CUUUCUUCAUGUGGACAUCACCAAG	119	CUUGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGUU	120
57	UUUCUUCAUGUGGACAUCACCAAGC	121	GCUUGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAGU	122
58	UUCUUCAUGUGGACAUCACCAAGCU	123	AGCUUGGUGAUGUCCACAUGAAGAAAG	124
59	CUUCAUGUGGACAUCACCAAGCUCA	125	UGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGAAGAA	126
60	UUCAUGUGGACAUCACCAAGCUCAG	127	CUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGAAGA	128
61	UCAUGUGGACAUCACCAAGCUCAGU	129	ACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGAAG	130
62	CAUGUGGACAUCACCAAGCUCAGUC	131	GACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGAA	132
63	AUGUGGACAUCACCAAGCUCAGUCU	133	AGACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUGA	134
64	UGUGGACAUCACCAAGCUCAGUCUA	135	UAGACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAUG	136
65	GUGGACAUCACCAAGCUCAGUCUAC	137	GUAGACUGAGCUUGGUGAUGUCCACAU	138
66	UGGACAUCACCAAGCUCAGUCUACG	139	CGUAGACUGAGCUUGGUGAUGUCCACA	140
67	AGCUUUUGUCCCCCCGGAUCUCAAG	141	CUUGAGAUCCGGGGGGACAAAAGCUCU	142
68	AAGGUGCUGGGAGAGAUAUGCCUUC	143	GAAGGCAUAUCUCUCCCAGCACCUUGA	144
69	GGGAGAGAUAUGCCUUCGAGGAUAU	145	AUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCUCCCAG	146
70	GGAGAGAUAUGCCUUCGAGGAUAUU	147	AAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCUCCCA	148
71	AGAGAUAUGCCUUCGAGGAUAUUUG	149	CAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCUCC	150
72	GAGAUAUGCCUUCGAGGAUAUUUGG	151	CCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCUC	152
73	AGAUAUGCCUUCGAGGAUAUUUGGA	153	UCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUCU	154
74	GAUAUGCCUUCGAGGAUAUUUGGAU	155	AUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCUC	156
72	AUAUGCCUUCGAGGAUAUUUGGAUG	157	CAUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAUCU	158
76	AUGCCUUCGAGGAUAUUUGGAUGCA	159	UGCAUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUAU	160
77	UGCCUUCGAGGAUAUUUGGAUGCAU	161	AUGCAUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAUA	162
78	GCCUUCGAGGAUAUUUGGAUGCAUU	163	AAUGCAUCCAAAUAUCCUCGAAGGCAU	164
79	UCAGGUUCUUGGAAGAGAAGGGCAU	165	AUGCCCUUCUCUUCCAAGAACCUGAAU	166
80	CAGGUUCUUGGAAGAGAAGGGCAUC	167	GAUGCCCUUCUCUUCCAAGAACCUGAA	168
81	AGGUUCUUGGAAGAGAAGGGCAUCU	169	AGAUGCCCUUCUCUUCCAAGAACCUGA	170
82	GGUUCUUGGAAGAGAAGGGCAUCUG	171	CAGAUGCCCUUCUCUUCCAAGAACCUG	172
83	UGGAAGAGAAGGGCAUCUGCAACAG	173	CUGUUGCAGAUGCCCUUCUCUUCCAAG	174
84	UGAAGUCAUCCUCAGAAGGGAUGGA	175	UCCAUCCCUUCUGAGGAUGACUUCAGG	176
85	GAAGUCAUCCUCAGAAGGGAUGGAU	177	AUCCAUCCCUUCUGAGGAUGACUUCAG	178
86	AAGUCAUCCUCAGAAGGGAUGGAUC	179	GAUCCAUCCCUUCUGAGGAUGACUUCA	180
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282	AUUAUGUGAAUCAGUGAGAUGUUAG	571	CUAACAUCUCACUGAUUCACAUAAUAC	572
283	UUAUGUGAAUCAGUGAGAUGUUAGU	573	ACUAACAUCUCACUGAUUCACAUAAUA	574
284	UAUGUGAAUCAGUGAGAUGUUAGUA	575	UACUAACAUCUCACUGAUUCACAUAAU	576
285	AUGUGAAUCAGUGAGAUGUUAGUAG	577	CUACUAACAUCUCACUGAUUCACAUAA	578
286	UGUGAAUCAGUGAGAUGUUAGUAGA	579	UCUACUAACAUCUCACUGAUUCACAUA	580
287	GUGAAUCAGUGAGAUGUUAGUAGAA	581	UUCUACUAACAUCUCACUGAUUCACAU	582
288	GUGAGAUGUUAGUAGAAUAAGCCUU	583	AAGGCUUAUUCUACUAACAUCUCACUG	584
289	UUUUCUAUUUAUGCAUUUGAGUACA	585	UGUACUCAAAUGCAUAAAUAGAAAAAA	586
290	UUUCUAUUUAUGCAUUUGAGUACAG	587	CUGUACUCAAAUGCAUAAAUAGAAAAA	588
291	UUCUAUUUAUGCAUUUGAGUACAGT	589	ACUGUACUCAAAUGCAUAAAUAGAAAA	590
292	CUAUUUAUGCAUUUGAGUACAGUAC	591	GUACUGUACUCAAAUGCAUAAAUAGAA	592
293	UGCUCAAACUGUUAAAUGUUGGAAA	593	UUUCCAACAUUUAACAGUUUGAGCACA	594
294	GCUCAAACUGUUAAAUGUUGGAAAA	595	UUUUCCAACAUUUAACAGUUUGAGCAC	596
295	CUCAAACUGUUAAAUGUUGGAAAAG	597	CUUUUCCAACAUUUAACAGUUUGAGCA	598
296	UCAAACUGUUAAAUGUUGGAAAAGA	599	UCUUUUCCAACAUUUAACAGUUUGAGC	600
297	CAAACUGUUAAAUGUUGGAAAAGAA	601	UUCUUUUCCAACAUUUAACAGUUUGAG	602
298	AAACUGUUAAAUGUUGGAAAAGAAA	603	UUUCUUUUCCAACAUUUAACAGUUUGA	604
299	AACUGUUAAAUGUUGGAAAAGAAAG	605	CUUUCUUUUCCAACAUUUAACAGUUUG	606
300	ACUGUUAAAUGUUGGAAAAGAAAGA	607	UCUUUCUUUUCCAACAUUUAACAGUUU	608
301	CUGUUAAAUGUUGGAAAAGAAAGAT	609	AUCUUUCUUUUCCAACAUUUAACAGUU	610
302	UGUUAAAUGUUGGAAAAGAAAGATA	611	UAUCUUUCUUUUCCAACAUUUAACAGU	612
303	GUUAAAUGUUGGAAAAGAAAGAUAC	613	GUAUCUUUCUUUUCCAACAUUUAACAG	614
304	UUAAAUGUUGGAAAAGAAAGAUACA	615	UGUAUCUUUCUUUUCCAACAUUUAACA	616
305	UAAAUGUUGGAAAAGAAAGAUACAA	617	UUGUAUCUUUCUUUUCCAACAUUUAAC	618
306	GCACUUGACUGAGAAGACAGACCCT	619	AGGGUCUGUCUUCUCAGUCAAGUGCUU	620
307	GAGAAAAGAGGCUACUUGUGAAAAT	621	AUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUCUCAA	622
308	AGAAAAGAGGCUACUUGUGAAAATA	623	UAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUCUCA	624
309	GAAAAGAGGCUACUUGUGAAAAUAA	625	UUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUCUC	626
310	AAAAGAGGCUACUUGUGAAAAUAAT	627	AUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUCU	628
311	AAAGAGGCUACUUGUGAAAAUAATG	629	CAUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUUC	630
312	AAGAGGCUACUUGUGAAAAUAAUGA	631	UCAUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUUU	632
313	AGAGGCUACUUGUGAAAAUAAUGAG	633	CUCAUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUUU	634
314	GAGGCUACUUGUGAAAAUAAUGAGC	635	GCUCAUUAUUUUCACAAGUAGCCUCUU	636
315	GGCUACUUGUGAAAAUAAUGAGCCC	637	GGGCUCAUUAUUUUCACAAGUAGCCUC	638
316	CUACUUGUGAAAAUAAUGAGCCCCC	639	GGGGGCUCAUUAUUUUCACAAGUAGCC	640
317	UGAACCUGCCUUCUUACAUCUUGAG	641	CUCAAGAUGUAAGAAGGCAGGUUCAAA	642
318	AAAGUUACAAGUUUCUUUUCCCAAG	643	CUUGGGAAAAGAAACUUGUAACUUUCC	644
319	AAGUUACAAGUUUCUUUUCCCAAGT	645	ACUUGGGAAAAGAAACUUGUAACUUUC	646
320	AGUUACAAGUUUCUUUUCCCAAGTT	647	AACUUGGGAAAAGAAACUUGUAACUUU	648
321	AGUUUCUUUUCCCAAGUUUCCCAGT	649	ACUGGGAAACUUGGGAAAAGAAACUUG	650
322	CAACAGUAUUUUCUAAUAACCAGTA	651	UACUGGUUAUUAGAAAAUACUGUUGGC	652
323	AACAGUAUUUUCUAAUAACCAGUAT	653	AUACUGGUUAUUAGAAAAUACUGUUGG	654
324	ACAGUAUUUUCUAAUAACCAGUATA	655	UAUACUGGUUAUUAGAAAAUACUGUUG	656
325	CAGUAUUUUCUAAUAACCAGUAUAT	657	AUAUACUGGUUAUUAGAAAAUACUGUU	658
326	UUGUGAUUGUUAUCAGGAAAAAATA	659	UAUUUUUUCCUGAUAACAAUCACAAUA	660
327	UGUGAUUGUUAUCAGGAAAAAAUAT	661	AUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCACAAU	662
328	GUGAUUGUUAUCAGGAAAAAAUATA	663	UAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCACAA	664
329	UGAUUGUUAUCAGGAAAAAAUAUAT	665	AUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCACA	666
330	GAUUGUUAUCAGGAAAAAAUAUATT	667	AAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCAC	668
331	AUUGUUAUCAGGAAAAAAUAUAUTA	669	UAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUCA	670
332	UUGUUAUCAGGAAAAAAUAUAUUAA	671	UUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAUC	672
333	UGUUAUCAGGAAAAAAUAUAUUAAA	673	UUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAAU	674
334	GUUAUCAGGAAAAAAUAUAUUAAAT	675	AUUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACAA	676
335	UUAUCAGGAAAAAAUAUAUUAAATG	677	CAUUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAACA	678
336	UAUCAGGAAAAAAUAUAUUAAAUGG	679	CCAUUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAAC	680
337	AUCAGGAAAAAAUAUAUUAAAUGGC	681	GCCAUUUAAUAUAUUUUUUCCUGAUAA	682
338	AGGAAAAAAUAUAUUAAAUGGCUGA	683	UCAGCCAUUUAAUAUAUUUUUUCCUGA	684
339	GGAAAAAAUAUAUUAAAUGGCUGAT	685	AUCAGCCAUUUAAUAUAUUUUUUCCUG	686
340	GAAAAAAUAUAUUAAAUGGCUGATA	687	UAUCAGCCAUUUAAUAUAUUUUUUCCU	688
341	AAAAAAUAUAUUAAAUGGCUGAUAG	689	CUAUCAGCCAUUUAAUAUAUUUUUUCC	690
342	UAUUUUCUUUCUGCUUUUAAAAATT	691	AAUUUUUAAAAGCAGAAAGAAAAUACG	692
343	AUUUUCUUUCUGCUUUUAAAAAUTA	693	UAAUUUUUAAAAGCAGAAAGAAAAUAC	694
344	UCUUUCUGCUUUUAAAAAUUAUUCA	695	UGAAUAAUUUUUAAAAGCAGAAAGAAA	696
345	CUUUCUGCUUUUAAAAAUUAUUCAG	697	CUGAAUAAUUUUUAAAAGCAGAAAGAA	698
346	UUUCUGCUUUUAAAAAUUAUUCAGG	699	CCUGAAUAAUUUUUAAAAGCAGAAAGA	700
347	CUACUAAAAACACAAAAAUUAGCCA	701	UGGCUAAUUUUUGUGUUUUUAGUAGAG	702
348	CAAGAUAAGGAAAUCAGGAAGUGTA	703	UACACUUCCUGAUUUCCUUAUCUUGAU	704
349	AAGAUAAGGAAAUCAGGAAGUGUAA	705	UUACACUUCCUGAUUUCCUUAUCUUGA	706
350	AGAUAAGGAAAUCAGGAAGUGUAAT	707	AUUACACUUCCUGAUUUCCUUAUCUUG	708
351	GAUAAGGAAAUCAGGAAGUGUAATA	709	UAUUACACUUCCUGAUUUCCUUAUCUU	710
352	AUAAGGAAAUCAGGAAGUGUAAUAT	711	AUAUUACACUUCCUGAUUUCCUUAUCU	712
353	UAAGGAAAUCAGGAAGUGUAAUATT	713	AAUAUUACACUUCCUGAUUUCCUUAUC	714
354	AAGGAAAUCAGGAAGUGUAAUAUTC	715	GAAUAUUACACUUCCUGAUUUCCUUAU	716
355	AGGAAAUCAGGAAGUGUAAUAUUCT	717	AGAAUAUUACACUUCCUGAUUUCCUUA	718
356	GGAAAUCAGGAAGUGUAAUAUUCTT	719	AAGAAUAUUACACUUCCUGAUUUCCUU	720
357	GAAAUCAGGAAGUGUAAUAUUCUTA	721	UAAGAAUAUUACACUUCCUGAUUUCCU	722
358	CUAUGAAUGCAUUCUUAUUUCUUCT	723	AGAAGAAAUAAGAAUGCAUUCAUAGGC	724
359	UAUGAAUGCAUUCUUAUUUCUUCTT	725	AAGAAGAAAUAAGAAUGCAUUCAUAGG	726
360	CUACCACACCCAGCUAGUUUUUUTT	727	AAAAAAAACUAGCUGGGUGUGGUAGUG	728
361	CCACACCCAGCUAGUUUUUUUUUGT	729	ACAAAAAAAAACUAGCUGGGUGUGGUA	730
362	CACACCCAGCUAGUUUUUUUUUGTA	731	UACAAAAAAAAACUAGCUGGGUGUGGU	732
363	GCUAGGAUUACAGGUGUGAGCUACC	733	GGUAGCUCACACCUGUAAUCCUAGCAC	734
364	CUAGGAUUACAGGUGUGAGCUACCA	735	UGGUAGCUCACACCUGUAAUCCUAGCA	736
365	CCAUGCCUGGUCCAACAUUCUUCAT	737	AUGAAGAAUGUUGGACCAGGCAUGGUA	738
366	UGCAGAGUAUGAGCCUGAUUUUGTT	739	AACAAAAUCAGGCUCAUACUCUGCACU	740
367	GCAGAGUAUGAGCCUGAUUUUGUTT	741	AAACAAAAUCAGGCUCAUACUCUGCAC	742
368	CAGAGUAUGAGCCUGAUUUUGUUTA	743	UAAACAAAAUCAGGCUCAUACUCUGCA	744
369	AGAGUAUGAGCCUGAUUUUGUUUAA	745	UUAAACAAAAUCAGGCUCAUACUCUGC	746
370	GAGUAUGAGCCUGAUUUUGUUUAAA	747	UUUAAACAAAAUCAGGCUCAUACUCUG	748
371	GGGUGAAACCCCAUCUCUACUAAAA	749	UUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCACCCAG	750
372	GUGAAACCCCAUCUCUACUAAAAAA	751	UUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCACCC	752
373	UGAAACCCCAUCUCUACUAAAAAAT	753	AUUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCACC	754
374	GAAACCCCAUCUCUACUAAAAAATG	755	CAUUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCAC	756
375	AAACCCCAUCUCUACUAAAAAAUGC	757	GCAUUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUCA	758
376	AACCCCAUCUCUACUAAAAAAUGCA	759	UGCAUUUUUUAGUAGAGAUGGGGUUUC	760
377	CCCAUCUCUACUAAAAAAUGCAAAA	761	UUUUGCAUUUUUUAGUAGAGAUGGGGU	762
378	AUCAAAACCCUUAUGGCAGACUGTT	763	AACAGUCUGCCAUAAGGGUUUUGAUAU	764
379	UAUUUUAUUUGUCGUGCUUAUAUGT	765	ACAUAUAAGCACGACAAAUAAAAUACA	766
380	GUGUUGCCCAAGUUUCUAUGGUGAA	767	UUCACCAUAGAAACUUGGGCAACACAU	768
381	GCCCAAGUUUCUAUGGUGAACGGTA	769	UACCGUUCACCAUAGAAACUUGGGCAA	770
382	CCCAAGUUUCUAUGGUGAACGGUAT	771	AUACCGUUCACCAUAGAAACUUGGGCA	772
383	ACUUUCAGCAUGAGAAAAUAACUCC	773	GGAGUUAUUUUCUCAUGCUGAAAGUGA	774
384	CUUUCAGCAUGAGAAAAUAACUCCT	775	AGGAGUUAUUUUCUCAUGCUGAAAGUG	776

活體外基於細胞之分析：使用活體外基於細胞之分析來確定表1中所列之384種DsiRNA中之每一者抑制 PNPLA3表現之能力。另外，DsiRNA之過客股及引導股之核苷酸序列具有獨特模式之經修飾之核苷酸及硫代磷酸酯鍵聯(參見例如圖2)。簡單來說，在多孔細胞培養板之單獨孔中，將穩定表現 PNPLA3之HuH-7人類肝臟細胞用DsiRNA中之每一者(0.5 nM)轉染。將細胞在轉染之後維持24 h，且接著使用基於TAQMAN®之qPCR分析確定來自經轉染之細胞的剩餘PNPLA3 mRNA之水準。如分別藉由HEX及FAM探針所量測，使用兩種qPCR分析(3'分析及5'分析)來確定mRNA水準。

使用DsiRNA之基於HuH-7細胞之分析的結果顯示於表2中。表2顯示使用384種DsiRNA之基於HuH-7細胞之分析的結果，該384種DsiRNA具有與人類及猴PNPLA3 mRNA互補之引導股(「雙重共同」)。將當與陰性對照相比時使得細胞中剩餘小於或等於30% PNPLA3 mRNA之雙重共同DsiRNA之轉染視為候選PNPLA3表現抑制劑(在本文中稱為「命中」)。表2：HuH-7細胞中之雙重共同DsiRNA PNPLA3基因敲低，0.5 nM 24 h -5'分析及3'分析剩餘mRNA%(相對於模擬對照針對HPRT1及SFRS9標準化).

DsiRNA	PNPLA3-F495	PNPLA3-F595	平均值
剩餘%	% SEM	剩餘%	% SEM	平均剩餘%	平均% SEM
1	--	--	41.276	5.253	41.2760	5.2530
2	24.048	5.091	33.293	8.521	28.6705	6.8060
3	23.686	3.496	36.027	2.441	29.8565	2.9685
4	20.851	2.728	31.34	4.013	26.0955	3.3705
5	19.609	4.442	30.014	4.678	24.8115	4.5600
6	17.737	2.25	38.518	5.495	28.1275	3.8725
7	42.296	6.654	--	--	42.2960	6.6540
8	30.019	2.843	35.275	5.401	32.6470	4.1220
9	107.259	15.824	77.986	22.381	92.6225	19.1025
10	69.476	36.895	83.554	28.116	76.5150	32.5055
11	39.447	10.162	31.949	3.604	35.6980	6.8830
12	--	--	31.418	19.31	31.4180	19.3100
13	82.71	31.376	81.104	20.936	81.9070	26.1560
14	35.657	4.964	54.326	6.388	44.9915	5.6760
15	32.849	4.61	28.693	2.08	30.7710	3.3450
16	--	--	--	--	--	--
17	--	--	38.503	11.845	38.5030	11.8450
18	35.771	6.677	53.554	4.637	44.6625	5.6570
19	13.754	5.708	23.172	6.037	18.4630	5.8725
20	30.11	15.649	40.907	11.249	35.5085	13.4490
21	29.368	4.354	51.409	11.578	40.3885	7.9660
22	55.824	19.324	56.734	15.375	56.2790	17.3495
23	27.853	4.585	30.09	5.153	28.9715	4.8690
24	38.262	20.656	42.106	12.679	40.1840	16.6675
25	27.359	2.988	33.97	4.654	30.6645	3.8210
26	34.444	22.868	75.891	39.63	55.1675	31.2490
27	52.207	13.773	37.602	4.715	44.9045	9.2440
28	27.654	4.589	26.822	3.115	27.2380	3.8520
29	40.199	5.272	35.055	4.257	37.6270	4.7645
30	27.071	6.617	27.672	4.172	27.3715	5.3945
31	26.453	4.251	31.149	2.751	28.8010	3.5010
32	44.932	8.656	32.93	3.5	38.9310	6.0780
33	97.873	67.085	132.571	104.973	115.2220	86.0290
34	27.054	5.653	44.814	11.339	35.9340	8.4960
35	178.389	145.305	220.361	218.004	199.3750	181.6545
36	22.973	7.112	39.55	6.188	31.2615	6.6500
37	32.844	4.1	40.917	5.782	36.8805	4.9410
38	36.642	13.921	34.387	13.321	35.5145	13.6210
39	43.801	18.504	54.98	32.264	49.3905	25.3840
40	38.178	18.519	103.356	40.968	70.7670	29.7435
41	33.309	13.99	36.814	10.58	35.0615	12.2850
42	25.27	4.156	26.624	4.591	25.9470	4.3735
43	22.02	2.478	39.928	6.08	30.9740	4.2790
44	19.086	1.83	28.238	2.134	23.6620	1.9820
45	60.907	30.543	77.064	28.815	68.9855	29.6790
46	32.715	4.298	45.502	4.177	39.1085	4.2375
47	32.36	7.13	50.54	6.722	41.4500	6.9260
48	28.239	8.334	52.43	10.568	40.3345	9.4510
49	49.22	7.374	44.676	7.588	46.9480	7.4810
50	64.843	20.454	53.307	13.88	59.0750	17.1670
51	31.516	10.842	28.143	3.648	29.8295	7.2450
52	38.404	7.542	29.373	4.595	33.8885	6.0685
53	55.094	5.175	65.67	8.678	60.3820	6.9265
54	56.104	4.672	48.547	3.664	52.3255	4.1680
55	78.803	6.549	50.57	4.167	64.6865	5.3580
56	56.816	6.257	42.303	4.046	49.5595	5.1515
57	22.321	1.477	24.024	1.797	23.1725	1.6370
58	42.104	8.901	86.02	10.205	64.0620	9.5530
59	37.617	4.933	41.69	3.548	39.6535	4.2405
60	49.219	7.084	45.388	4.609	47.3035	5.8465
61	28.515	4.427	34.695	4.696	31.6050	4.5615
62	24.048	2.942	27.275	2.209	25.6615	2.5755
63	33.399	2.377	34.226	3.995	33.8125	3.1860
64	17.981	2.846	34.171	6.769	26.0760	4.8075
65	27.426	1.916	31.928	4.955	29.6770	3.4355
66	26.094	3.248	23.97	3.488	25.0320	3.3680
67	21.158	2.466	24.938	2.599	23.0480	2.5325
68	35.62	4.572	34.261	2.97	34.9405	3.7710
69	21.882	3.332	33.373	3.622	27.6275	3.4770
70	40.405	4.812	42.552	4.601	41.4785	4.7065
71	22.1	2.422	34.351	2.553	28.2255	2.4875
72	33.555	4.796	36.455	3.012	35.0050	3.9040
73	25.822	3.189	34.328	2.337	30.0750	2.7630
74	35.156	8.593	42.12	6.588	38.6380	7.5905
75	30.278	2.948	39.251	2.5	34.7645	2.7240
76	54.252	11.633	55.948	7.739	55.1000	9.6860
77	32.7	2.948	32.575	2.223	32.6375	2.5855
78	47.513	9.443	41.285	5.205	44.3990	7.3240
79	27.208	6.712	30.186	2.302	28.6970	4.5070
80	41.53	8.596	40.294	7.195	40.9120	7.8955
81	24.351	5.957	30.338	1.908	27.3445	3.9325
82	32.801	2.291	36.67	2.213	34.7355	2.2520
83	24.892	2.701	31.062	3.006	27.9770	2.8535
84	37.631	5.376	33.714	3.496	35.6725	4.4360
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87	77.564	4.28	69.537	3.448	73.5505	3.8640
88	52.849	5.817	56.297	6.566	54.5730	6.1915
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90	30.182	4.019	42.498	2.662	36.3400	3.3405
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251	45.472	4.875	32.346	3.885	38.9090	4.3800
252	43.062	3.621	28.848	2.106	35.9550	2.8635
253	37.701	3.518	25.509	2.268	31.6050	2.8930
254	58.2	18.808	36.005	9.635	47.1025	14.2215
255	31.77	3.926	27.901	4.411	29.8355	4.1685
256	38.708	3.847	36.377	3.262	37.5425	3.5545
257	30.508	3.645	31.26	2.622	30.8840	3.1335
258	44.359	5	34.497	2.636	39.4280	3.8180
259	67.139	7.485	40.465	2.943	53.8020	5.2140
260	66.589	6.837	39.106	3.29	52.8475	5.0635
261	48.322	10.679	26.008	2.39	37.1650	6.5345
262	50.546	4.737	32.219	2.427	41.3825	3.5820
263	59.307	7.82	29.231	2.967	44.2690	5.3935
264	97.302	11.857	53.08	6.094	75.1910	8.9755
265	76.539	14.949	85.905	13.021	81.2220	13.9850
266	57.905	6.615	64.596	7.651	61.2505	7.1330
267	69.77	6.607	53.074	4.276	61.4220	5.4415
268	48.668	10.684	40.916	5.466	44.7920	8.0750
269	47.46	7.531	42.844	4.1	45.1520	5.8155
270	70.579	11.73	61.976	6.502	66.2775	9.1160
271	115.007	12.121	67.306	4.174	91.1565	8.1475
272	82.348	12.571	104.237	16.188	93.2925	14.3795
273	72.215	14.678	53.943	7.425	63.0790	11.0515
274	49.167	8.023	49.69	6.118	49.4285	7.0705
275	41.439	3.584	29.44	2.996	35.4395	3.2900
276	53.402	8.54	50.701	3.872	52.0515	6.2060
277	56.148	3.835	32.342	3.153	44.2450	3.4940
278	67.762	15.057	45.771	7.974	56.7665	11.5155
279	53.393	3.781	31.896	2.753	42.6445	3.2670
280	62.738	14.71	39.414	4.46	51.0760	9.5850
281	40.384	8.034	38.263	3.196	39.3235	5.6150
282	40.763	5.446	40.712	4.898	40.7375	5.1720
283	46.465	10.212	46.647	6.183	46.5560	8.1975
284	38.536	4.547	41.452	2.836	39.9940	3.6915
285	42.301	4.416	43.768	4.259	43.0345	4.3375
286	46.313	8.357	38.798	5.187	42.5555	6.7720
287	50.769	6.505	43.597	4.509	47.1830	5.5070
288	38.562	8.297	37.896	4.33	38.2290	6.3135
289	97.407	9.944	84.032	7.979	90.7195	8.9615
290	96.276	16.596	80.344	14.757	88.3100	15.6765
291	97.306	19.495	65.589	6.382	81.4475	12.9385
292	55.475	9.264	45.599	8.096	50.5370	8.6800
293	62.494	8.981	44.842	6.356	53.6680	7.6685
294	64.097	10.104	45.876	4.721	54.9865	7.4125
295	54.142	14.352	44.557	6.065	49.3495	10.2085
296	45.915	5.238	42.595	4.868	44.2550	5.0530
297	52.489	10.839	40.88	3.707	46.6845	7.2730
298	63.515	15.058	48.368	7.137	55.9415	11.0975
299	68.855	5.952	39.142	4.218	53.9985	5.0850
300	41.279	2.923	42.539	2.744	41.9090	2.8335
301	61.222	5.21	35.294	2.489	48.2580	3.8495
302	61.31	7.946	54.541	6.669	57.9255	7.3075
303	72.478	6.439	34.292	3.108	53.3850	4.7735
304	67.572	16.336	42.125	6.87	54.8485	11.6030
305	50.921	8.983	33.358	4.008	42.1395	6.4955
306	57.53	5.6	69.86	6.547	63.6950	6.0735
307	64.026	11.056	39.867	4.008	51.9465	7.5320
308	49.409	3.059	42.979	2.509	46.1940	2.7840
309	54.897	4.814	31.307	1.962	43.1020	3.3880
310	41.554	2.628	37.128	1.841	39.3410	2.2345
311	51.666	8.47	40.257	4.367	45.9615	6.4185
312	49.509	6.575	28.02	4.538	38.7645	5.5565
313	--	--	194.826	68.134	194.8260	68.1340
314	121.989	16.822	138.651	21	130.3200	18.9110
315	80.309	31.932	61.6	21.185	70.9545	26.5585
316	92.927	25.688	67.475	19.158	80.2010	22.4230
317	90.794	26.314	68.783	17.49	79.7885	21.9020
318	78.946	5.722	89.051	5.366	83.9985	5.5440
319	78.528	22.516	68.248	14.662	73.3880	18.5890
320	88.504	27.66	74.364	17.313	81.4340	22.4865
321	80.819	11.586	72.082	9.362	76.4505	10.4740
322	66.905	11.106	59.407	7.519	63.1560	9.3125
323	56.665	7.201	65.996	7.423	61.3305	7.3120
324	58.472	14.789	52.989	6.283	55.7305	10.5360
325	73.835	10.27	45.629	3.865	59.7320	7.0675
326	83.653	12.949	55.705	5.376	69.6790	9.1625
327	48.135	5.765	47.686	2.973	47.9105	4.3690
328	58.846	13.768	64.173	8.7	61.5095	11.2340
329	46.418	3.234	43.86	4.767	45.1390	4.0005
330	48.925	5.8	47.32	5.483	48.1225	5.6415
331	60.81	13.53	36.129	3.04	48.4695	8.2850
332	56.142	10.276	41.861	5.196	49.0015	7.7360
333	57.072	5.485	46.44	1.828	51.7560	3.6565
334	57.031	14.153	47.644	5.986	52.3375	10.0695
335	63.616	8.355	62.766	7.336	63.1910	7.8455
336	61.994	10.795	49.157	4.36	55.5755	7.5775
337	109.966	11.513	73.307	11.438	91.6365	11.4755
338	110.715	15.908	92.237	13.006	101.4760	14.4570
339	75.364	14.03	67.654	10.63	71.5090	12.3300
340	109.658	7.631	67.114	6.374	88.3860	7.0025
341	81.366	8.105	61.479	4	71.4225	6.0525
342	64.415	15.53	79.511	24.66	71.9630	20.0950
343	74.24	10.057	46.431	5.731	60.3355	7.8940
344	86.963	13.807	54.298	8.525	70.6305	11.1660
345	71.074	6.207	57.396	6.551	64.2350	6.3790
346	91.626	10.114	74.902	8.206	83.2640	9.1600
347	77.149	8.202	53.758	5.371	65.4535	6.7865
348	80.631	9.944	56.546	8.401	68.5885	9.1725
349	60.505	5.38	37.207	4.379	48.8560	4.8795
350	64.783	11.132	46.827	8.602	55.8050	9.8670
351	70.732	7.768	42.967	3.442	56.8495	5.6050
352	85.716	13.405	56.756	5.896	71.2360	9.6505
353	49.942	6.657	49.317	3.253	49.6295	4.9550
354	38.757	3.56	37.798	2.633	38.2775	3.0965
355	45.029	2.934	38.812	2.665	41.9205	2.7995
356	38.688	3.896	34.3	2.617	36.4940	3.2565
357	52.918	9.736	35.223	3.54	44.0705	6.6380
358	52.294	3.336	44.793	5.552	48.5435	4.4440
359	53.158	3.096	41.327	3.233	47.2425	3.1645
360	103.51	27.753	62.923	11.824	83.2165	19.7885
361	122.759	25.999	106.083	13.134	114.4210	19.5665
362	106.559	19.744	101.161	14.303	103.8600	17.0235
363	109.834	19.943	79.727	14.271	94.7805	17.1070
364	102.297	10.688	78.932	9.566	90.6145	10.1270
365	82.014	8.363	73.591	5.609	77.8025	6.9860
366	67.391	23.514	69.264	11.51	68.3275	17.5120
367	95.165	15.862	42.233	5.102	68.6990	10.4820
368	95.977	20.567	51.602	9.654	73.7895	15.1105
369	65.153	14.652	46.363	7.328	55.7580	10.9900
370	58.571	7.578	50.496	6.145	54.5335	6.8615
371	84.037	13.739	52.431	5.879	68.2340	9.8090
372	67.564	8.585	48.839	4.307	58.2015	6.4460
373	57.82	10.735	38.625	4.956	48.2225	7.8455
374	84.402	27.865	37.659	6.895	61.0305	17.3800
375	72.533	12.7	45.661	5.549	59.0970	9.1245
376	68.34	7.43	44.068	4.428	56.2040	5.9290
377	70.417	6.309	53.79	6.279	62.1035	6.2940
378	61.427	3.64	47.649	2.676	54.5380	3.1580
379	95.519	18.074	57.492	7.143	76.5055	12.6085
380	65.481	5.625	42.825	2.2	54.1530	3.9125
381	59.761	9.824	33.808	2.686	46.7845	6.2550
382	58.179	4.499	36.306	3.105	47.2425	3.8020
383	73.232	3.793	41.961	2.581	57.5965	3.1870
384	69.482	14.129	34.575	5.662	52.0285	9.8955

此等結果表明，經設計以靶向人類PNPLA3 mRNA之DsiRNA抑制細胞中之 PNPLA3表現(如藉由DsiRNA轉染之細胞中PNPLA3 mRNA之量降低所確定)，且包括DsiRNA命中之核苷酸序列適用於產生用於抑制 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸。另外，此等結果證實，多個PNPLA3目標序列適合於RNAi介導之對PNPLA3表現之抑制。 活體內功能實例3：RNAi寡核苷酸對活體內PNPLA3表現之抑制

在實例2中所描述之基於HuH-7細胞之分析中篩選的384種DsiRNA中，選擇192種DsiRNA命中之核苷酸序列(表3)在活體內進一步評估。簡單來說，使用所選DsiRNA之核苷酸序列來產生194種對應ds RNAi寡核苷酸，其包括具有36聚體有義(過客)股及22聚體反義(引導)股之缺口四環GalNAc結合結構(在本文中稱為「GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸」)。另外，GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸之過客股及引導股的核苷酸序列具有獨特模式之經修飾之核苷酸及硫代磷酸酯鍵聯(GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸之通用結構及化學修飾模式之示意圖參見例如圖1)。四環之三個腺苷核苷酸各自結合至GalNAc部分(CAS#：14131-60-3)。表3：GalXC-PNPLA3： 192 種 GalXC 化合物之活體外篩選.

PNPLA3 寡核苷酸	過客 ( 有義 ) (SEQ ID NO:)	引導 ( 反義 ) (SEQ ID NO:)	PNPLA3-F495	PNPLA3-F595
剩餘 %	%SEM	剩餘 %	%SEM
1	777	778	47.485	10.196	42.315	9.325
2	779	780	88.393	13.374	74.853	8.613
3	781	782	71.522	13.389	62.163	8.489
4	783	784	48.2	12.808	59.051	15.527
5	785	786	87.111	20.654	74.136	14.422
6	787	788	52.772	4.946	32.37	3.842
7	789	790	60	4.856	56.847	3.105
8	791	792	89.452	17.034	90.454	16.078
9	793	794	76.773	16.13	58.479	11.665
10	795	796	85.463	9.685	66.419	7.575
11	797	798	108.216	4.243	70.258	3.457
12	799	800	57.964	8.916	47.12	9.746
13	801	802	91.802	15.466	80.834	14.834
14	803	804	108.246	8.747	102.424	9.238
15	805	806	102.556	8.612	91.909	8.507
16	807	808	123.63	8.863	110.429	6.112
17	809	810	70.82	7.935	48.198	3.957
18	811	812	105.252	5.434	76.73	5.427
19	813	814	73.737	7.411	63.414	3.163
20	815	816	53.275	5.084	40.621	3.768
21	817	818	73.13	8.636	54.227	4.991
22	819	820	69.662	5.077	65.603	4.833
23	821	822	115.648	7.396	93.812	6.834
24	823	824	113.539	8.877	95.22	8.13
25	825	826	72.315	22.04	65.007	19.295
26	827	828	52.756	8.42	52.681	4.521
27	829	830	50.002	5.36	45.103	6.461
28	831	832	65.906	5.919	61.42	3.683
29	833	834	85.13	15.786	81.4	13.245
30	835	836	94.2	7.683	92.984	6.53
31	837	838	79.41	9.652	78.856	9.311
32	839	840	110.611	10.798	121.904	11.977
33	841	842	61.132	15.106	54.942	10.832
34	843	844	22.997	2.613	26.894	3.012
35	845	846	69.893	7.912	71.053	6.942
36	847	848	42.209	6.514	37.063	6.765
37	849	850	32.369	6.443	30.326	5.18
38	851	852	98.013	5.195	99.493	5.551
39	853	854	108.745	12.02	109.98	14.348
40	855	856	108.242	5.703	106.183	7.088
41	857	858	62.227	18.716	47.683	7.008
42	859	860	77.369	5.452	72.082	4.805
43	861	862	97.72	6.492	104.918	2.468
44	863	864	95.316	16.953	81.092	8.169
45	865	866	65.563	3.105	63.593	5.933
46	867	868	45.891	2.704	41.178	2.034
47	869	870	70.44	8.4	69.907	11.675
48	871	872	42.793	4.981	41.802	4.578
49	873	874	69.377	12.858	75.563	14.64
50	875	876	94.54	12.65	113.746	13.701
51	877	878	96.644	9.928	88.742	7.236
52	879	880	57.675	7.9	54.023	9.11
53	881	882	45.257	4.671	41.066	8.781
54	883	884	64.216	13.821	57.326	9.308
55	885	886	80.64	10.056	83.19	12.71
56	887	888	53.489	6.288	60.359	10.933
57	889	890	43.058	8.468	67.338	7.905
58	891	892	92.209	4.675	88.981	4.725
59	893	894	125.612	12.186	131.574	15.729
60	895	896	56.646	7.227	58.75	7.18
61	897	898	63.963	4.129	64.01	3.511
62	899	900	35.42	4.93	43.575	3.839
63	901	902	80.942	5.673	99.785	7.605
64	903	904	28.438	9.671	41.409	10.949
65	905	906	78.01	12.28	70.329	13.215
66	907	908	63.519	7.735	56.465	6.226
67	909	910	102.482	9.653	86.816	7.212
68	911	912	73.153	6.21	76.354	7.251
69	913	914	115.319	14.233	109.375	11.395
70	915	916	50.507	16.055	61.744	17.75
71	917	918	64.122	18.86	67.106	19.792
72	919	920	45.025	11.057	36.962	8.699
73	921	922	64.691	7.735	70.342	7.008
74	923	924	91.612	17.728	73.763	9.075
75	925	926	30.626	5.128	34.089	2.646
76	927	928	85.724	5.965	98.425	5.178
77	929	930	77.837	24.988	65.493	20.924
78	931	932	66.549	13.96	70.219	13.374
79	933	934	88.812	9.773	93.579	14.174
80	935	936	126.281	13.138	125.405	9.847
81	937	938	33.474	12.471	36.472	7.102
82	939	940	36.521	6.105	36.344	12.791
83	941	942	79.756	28.563	79.725	24.95
84	943	944	91.352	9.565	103.633	12.963
85	945	946	79.374	11.693	88.146	11.711
86	947	948	104.203	12.127	111.907	13.828
87	949	950	78.157	5.154	100.371	7.36
88	951	952	117.96	7.199	130.066	9.106
89	953	954	84.233	7.043	78.918	4.772
90	955	956	70.825	5.146	76.977	8.968
91	957	958	59.621	7.853	65.538	7.22
92	959	960	91.443	6.954	99.109	6.096
93	961	962	46.844	11.633	51.957	9.244
94	963	964	81.508	6.389	87.195	8.633
95	965	966	91.805	8.83	108.782	9.098
96	967	968	96.733	4.922	125.597	5.479
97	969	970	92.658	10.451	110.074	12.159
98	971	972	100.916	7.648	107.715	9.441
99	973	974	108.731	9.204	130.037	11.933
100	975	976	80.886	6.51	82.486	5.492
101	977	978	114.601	6.354	125.063	7.668
102	979	980	64.486	7.636	81.933	8.887
103	981	982	48.127	7.673	70.594	9.464
104	983	984	98.266	10.023	125.396	13.292
105	985	986	78.835	8.422	85.896	6.258
106	987	988	65.38	6.01	75.699	5.561
107	989	990	82.332	16.715	110.985	21.204
108	991	992	50.805	3.714	49.059	3.238
109	993	994	82.297	10.387	74.612	6.957
110	995	996	56.254	4.26	51.783	3.569
111	997	998	37.191	3.673	43.781	4.781
112	999	1000	54.832	3.334	45.421	4.277
113	1001	1002	24.729	2.434	22.466	2.637
114	1003	1004	34.923	6.177	40.356	5.286
115	1005	1006	42.682	3.081	57.453	2.391
116	1007	1008	30.325	3.011	34.404	1.82
117	1009	1010	70.118	7.78	89.223	8.905
118	1011	1012	43.339	6.479	44.854	6.904
119	1013	1014	104.192	5.672	110.895	6.371
120	1015	1016	95.131	8.872	108.847	8.363
121	1017	1018	22.097	2.259	25.862	3.07
122	1019	1020	50.635	11.129	59.072	10.096
123	1021	1022	68.368	9.482	90.191	15.479
124	1023	1024	50.658	2.598	62.686	2.149
125	1025	1026	67.692	4.608	104.474	6.486
126	1027	1028	60.169	6.81	103.156	11.309
127	1029	1030	37.137	3.679	49.778	7.312
128	1031	1032	87.29	4.881	127.439	10.802
129	1033	1034	41.409	6.549	47.012	11.236
130	1035	1036	32.213	7.175	43.875	10.706
131	1037	1038	77.807	7.013	109.299	9.799
132	1039	1040	37.026	6.758	49.133	8.307
133	1041	1042	57.723	5.921	70.531	6.977
134	1043	1044	94.403	10.058	130.999	12.973
135	1045	1046	42.258	3.137	56.368	4.699
136	1047	1048	77.667	6.622	106.147	4.946
137	1049	1050	51.002	3.36	62.009	6.073
138	1051	1052	38.522	4.21	43.297	7.219
139	1053	1054	75.103	5.866	115.191	7.77
140	1055	1056	46.405	3.737	57.89	3.035
141	1057	1058	34.308	4.135	44.278	3.532
142	1059	1060	36.66	3.327	48.931	4.389
143	1061	1062	36.323	6.447	50.414	7.284
144	1063	1064	48.346	4.964	69.682	5.951
145	1065	1066	71.349	8.498	63.576	12.402
146	1067	1068	66.855	7.354	54.028	10.308
147	1069	1070	58.02	6.725	81.61	6.225
148	1071	1072	46.107	4.599	47.578	5.721
149	1073	1074	79.89	11.647	94.885	12.091
150	1075	1076	51.93	6.887	60.564	5.631
151	1077	1078	67.023	11.379	78.549	9.92
152	1079	1080	69.029	12.304	64.36	9.232
153	1081	1082	56.372	11.395	50.897	6.456
154	1083	1084	54.923	8.02	56.301	7.96
155	1085	1086	47.848	4.993	52.756	4.92
156	1087	1088	72.997	5.423	89.098	8.279
157	1089	1090	49.577	9.222	61.752	9.967
158	1091	1092	57.345	5.967	55.082	5.124
159	1093	1094	49.719	8.465	50.474	6.318
160	1095	1096	66.221	8.527	60.526	6.042
161	1097	1098	59.431	5.38	51.367	4.575
162	1099	1100	44.241	2.416	42.17	2.266
163	1101	1102	67.893	7.786	85.144	7.578
164	1103	1104	54.101	3.156	64.663	5.874
165	1105	1106	74.353	11.203	73.215	11.059
166	1107	1108	91.603	5.407	78.535	4.566
167	1109	1110	86.259	4.861	84.54	5.247
168	1111	1112	100.862	9.39	83.472	3.848
169	1113	1114	64.233	6.416	55.446	5.259
170	1115	1116	82.913	8.265	67.499	6.098
171	1117	1118	63.834	4.157	66.965	7.54
172	1119	1120	87.059	6.502	80.608	3.299
173	1121	1122	52.896	8.619	50.91	8.301
174	1123	1124	89.834	8.687	60.792	7.648
175	1125	1126	56.928	16.722	55.37	13.438
176	1127	1128	91.989	35.495	98.901	26.361
177	1129	1130	78.111	6.12	85.965	5.555
178	1131	1132	81.351	5.528	68.852	4.702
179	1133	1134	82.851	10.171	87.313	8.301
180	1135	1136	94.367	3.317	87.13	5.434
181	1137	1138	108.095	11.973	99.858	9.769
182	1139	1140	95.753	5.346	87.366	6.613
183	1141	1142	88.199	15.408	67.131	13.665
184	1143	1144	102.928	9.669	84.541	9.709
185	1145	1146	48.692	11.647	48.288	10.808
186	1147	1148	84.114	6.361	82.348	3.469
187	1149	1150	89.182	14.563	92.44	12.983
188	1151	1152	85.958	10.066	85.508	8.055
189	1153	1154	56.68	12.506	63.775	15.034
190	1155	1156	77.223	11.068	75.609	8.161
191	1157	1158	85.696	6.162	92.128	6.673
192	1159	1160	50.761	3.422	51.217	2.474

小鼠研究：在流體動力學注射(HDI)小鼠模型中評估各種GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸，其中一些列於表3中。其他HDI研究列於表4、5及6中。在此等HDI研究中，小鼠經工程改造以在肝細胞中瞬時表現人類PNPLA3 mRNA。GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸對照(SEQ ID NO: 1165及1166)用作基準對照。簡單來說，以1 mg/kg之劑量水準用GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸對6-8週齡雌性CD-1小鼠進行SQ處理。三天後(72 h)，為小鼠流體動力學注射在普遍存在之巨細胞病毒(CMV)啟動子序列控制下編碼完全人類 PNPLA3基因之DNA質粒。引入質粒之後一天，收集肝臟樣品。相對於僅用相同體積之PBS處理的小鼠，針對PNPLA3 mRNA對自此等小鼠得到之總RNA進行qRT-PCR分析。針對轉染效率使用質粒上所包括之NeoR基因將該等值標準化。

如表4、5及6中所示，如藉由相對於用PBS處理之小鼠來自寡核苷酸處理之小鼠的肝臟樣品中PNPLA3 mRNA之量降低所確定，所測試之許多GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸抑制 PNPLA3表現。相對於用PBS處理之小鼠，用GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸基準對照處理之小鼠之肝臟樣品中的平均剩餘PNPLA3 mRNA%。表4表明，與用作對照之參考GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸相比，21種GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸中之18種在更大程度上抑制 PNPLA3表現。此等寡核苷酸之序列以及修飾模式及SEQ ID NO.揭示於表A中。表4：揭示單個 0.5 mg/kg GalXC-PNPLA3 皮下劑量，第 3 天 HDI ，第 4 天取下，肝臟 qPCR

	組
動物	PBS	-1170 (參考)	-643	-1110	-1162	-1170	-1699	-1703	-1708	-2104	-2143	-2155	-2156	-2157	-2163	-2165	-2170	-2195	-2200	-2204	-2205	-2210
1	105.7	96.7	78.2		69.2	76.5	65.0	41.6	68.1	56.7	82.5	60.7	63.1	104.4	41.1	93.9	66.8	91.3	144.7	76.6	57.0	64.5
2	104.5	66.6	101.7	88.0	72.0	89.3	82.9	81.8	98.1	69.3	61.6	81.5	76.4	81.6	31.0	50.7	48.1	57.0	109.8	77.0	33.9
3	89.9	115.5	96.8	99.7	54.2	23.3	53.0	46.5	85.6	41.6	77.7	70.0	80.5	123.1	30.8	36.6	47.8	28.7	87.5	104.5	26.8	58.7
4	99.9	57.1	64.1	92.2	84.4	26.7	69.6	48.6	61.8	29.3	92.5	81.0	83.0	107.6	36.3	52.3	46.8	56.0	102.6	64.1	41.6	60.3
5		107.2	64.2	70.4	118.2	75.0	39.4	63.4	39.7	35.5	89.1	61.2	42.4	153.9	50.1	23.5	89.2	48.6	84.1	173.5	36.6	83.0
平均值：	100.0	88.6	81.0	87.6	79.6	58.1	62.0	56.4	70.6	46.5	80.7	70.9	69.1	114.1	37.9	51.4	59.7	56.3	105.7	99.1	39.2	66.6
SEM：	3.6	11.4	7.9	6.2	10.8	13.8	7.4	7.3	10.0	7.3	5.4	4.5	7.5	11.9	3.6	11.8	8.3	10.1	10.8	19.7	5.1	5.6

表5及6顯示使用18種GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸之HDI研究之2種其他集合(各設定中使用相同參考寡核苷酸). 此等寡核苷酸之序列以及修飾模式及SEQ ID NO.分別揭示於表B及表C中。

基於此等結果，選擇10種GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸來進行其抑制非人類靈長類動物(NHP)中之PNPLA3表現之能力的評估。GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸具有如圖1中所示模式之經化學修飾之核苷酸。表5：揭示單個 1 mg/kg 皮下劑量，給藥後 3 天 HDI ，給藥後 4 天收穫

表6：揭示單個 1 mg/kg 皮下劑量，給藥後 3 天 HDI ，給藥後 4 天收穫

	組
動物	PBS	-637	-641	-923	-1116	-1125	-1136	-1151	-1157	-1158	-1173	-1541	-1163	-1614	-1697	-2136	-2176	-2222	-2205 (參考)
1		80.3	114.9	88.9	48.9	203.5	156.1	49.0	113.6	113.6	42.2	91.1	62.5	56.4	24.4	145.3	64.1	97.3	26.9
2	76.6	140.7	116.7	122.7	78.6	115.6		101.3	72.8	95.2	99.6	50.1		79.5	57.3	85.7	28.2	137.8	58.6
3	78.7	115.4	57.8	142.4	122.0	119.8	130.1	91.9	186.4	134.1	20.5	135.3	110.5	60.2	104.6	65.7	71.4	107.5	34.6
4	133.6	90.3	84.3	85.6	150.0	80.0			98.2	113.6	25.0		203.1	44.8		132.5	44.8	50.1	52.7
5	111.1	119.9	198.0	75.0	41.6	166.4	84.6	121.0	114.0		44.2	45.9	96.0	44.9	52.0	179.6	35.4	90.3	55.6
平均值：	100.0	109.4	114.3	102.9	88.2	137.1	123.6	90.8	117.0	114.1	46.3	80.6	118.0	57.2	59.6	121.8	48.8	96.6	45.7
SEM：	13.7	10.8	23.6	12.7	20.9	21.6	20.9	15.2	18.9	7.9	14.1	20.9	30.1	6.4	16.7	20.6	8.3	14.2	6.3

表7揭示使用基於自如表4、5及6中所揭示之先前研究及先前3次HDI篩選獲得之結果的最佳GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸(命中)之另一HDI研究。此HDI篩選中所用之寡核苷酸之序列以及修飾模式及SEQ ID NO.揭示於表D中。表7：來自使用單個 1 mg/kg 皮下劑量，給藥後 3 天 HDI ，給藥後 4 天收穫之早期研究及3次HDI篩選之命中的比較.

NHP 研究：在食蟹猴(食蟹獼猴( Macaca fascicularis))中對選自表7之10種GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸進行評估。在此，對NHP進行分組，使得在對照與實驗組之間其平均體重(約5.4 kg)類似。各隊列含有兩個雄性及三個雌性個體。在研究第0天SQ投與GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸。在研究第-8天、第-5天及第0天以及給藥之後每週收集血液樣品。在研究第-7天、第28天及第56天收集超音波引導空芯針肝臟活組織切片。在每個時間點，對自肝活組織檢查樣品得到之總RNA進行qRT-PCR分析以量測相對於用類似體積之PBS處理之猴寡核苷酸處理之猴中的PNPLA3 mRNA。為將數據標準化，相對於兩個參考組(PPIB及18S rRNA)之幾何平均值進行量測。如表8 (第-7天)、表9 (第28天)及表10 (第56天)中所示，如藉由相對於用PBS處理之NHP來自寡核苷酸處理之NHP的肝臟樣品中PNPLA3 mRNA之量降低所確定，用 GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸處理NHP抑制肝臟中之 PNPLA3表現。在所評估之所有時間點，與基準PBS及時間匹配之對照相比，PNPLA3寡核苷酸34、81及121均在更大程度上抑制PNPLA3表現。由相同NHP研究，亦藉由根據ELISA量測自給藥前及每週血液樣品製備之血清中之PNPLA3蛋白來確定 PNPLA3表現之抑制。總的來說，此等結果證實，用GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸處理NHP使肝臟中PNPLA3 mRNA之量降低且伴隨地使血清中PNPLA3蛋白之量降低。表8：在第-7天NHP中所選GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸之PNPLA3 mRNA基因敲低.

序列	過客 (有義) (SEQ ID NO:)	引導 (反義) (SEQ ID NO:)	相對於時間匹配之PBS的平均%KD
PBS	--	--	0
644	1220	1221	29
1126	1224	1225	-4.9
1143	1230	1231	43
1147	1232	1233	-2.5
1699	1188	1189	44
1703	1190	1191	28
2140	1244	1245	27
2149	1250	1251	20
1697	1254	1255	5.9
2144	1246	1247	-15

表9：在第28天NHP中所選GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸之PNPLA3 mRNA基因敲低.

序列	過客 (有義) (SEQ ID NO:)	引導 (反義) (SEQ ID NO:)	相對於時間匹配之PBS的平均%KD	相對於給藥前之平均值的平均%KD	相對於給藥前之個別動物的平均%KD
PBS	--	--	0	-9.8	-30
644	1220	1221	34	-3	-17
1126	1224	1225	50	48	36
1143	1230	1231	54	11	-0.1
1147	1232	1233	-2.4	-9.8	11
1699	1188	1189	65	32	30
1703	1190	1191	60	39	19
2140	1244	1245	65	47	40
2149	1250	1251	64	51	48
1697	1254	1255	49	40	42
2144	1246	1247	50	53	51

表10：在第56天NHP中所選GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸之PNPLA3 mRNA基因敲低.

序列	過客 (有義) (SEQ ID NO:)	引導 (反義) (SEQ ID NO:)	相對於時間匹配之PBS的平均%KD	相對於給藥前之平均值的平均%KD	相對於給藥前之個別動物的平均%KD
PBS	--	--	0	5	-12
644	1220	1221	46	28	28
1126	1224	1225	39	45	27
1143	1230	1231	35	-9.2	-32
1147	1232	1233	28	34	29
1699	1188	1189	51	18	14
1703	1190	1191	5.5	-24	-45
2140	1244	1245	-34	-73	-100
2149	1250	1251	48	39	36
1697	1254	1255	32	31	31
2144	1246	1247	-9.8	9.7	4.4

總的來說，此等結果表明，經設計以靶向人類PNPLA3 mRNA之GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸抑制活體內 PNPLA3表現(如藉由所處理動物中之PNPLA3 mRNA及PNPLA3蛋白之量降低所確定)。序列

本發明中提及以下核酸序列及/或胺基酸序列且提供如下用於參考。 SEQ ID NO:1 –野生型人類PNPLA3 (2753 bp；NCBI參考序列號NM_025225.3) agagagcgcttgcgggcgccgggcggagctgctgcggatcaggacccgagccgattcccgatcccgacccagatcctaacccgcgcccccgccccgccgccgccgccatgtacgacgcagagcgcggctggagcttgtccttcgcgggctgcggcttcctgggcttctaccacgtcggggcgacccgctgcctgagcgagcacgccccgcacctcctccgcgacgcgcgcatgttgttcggcgcttcggccggggcgttgcactgcgtcggcgtcctctccggtatcccgctggagcagactctgcaggtcctctcagatcttgtgcggaaggccaggagtcggaacattggcatcttccatccatccttcaacttaagcaagttcctccgacagggtctctgcaaatgcctcccggccaatgtccaccagctcatctccggcaaaataggcatctctcttaccagagtgtctgatggggaaaacgttctggtgtctgactttcggtccaaagacgaagtcgtggatgccttggtatgttcctgcttcatccccttctacagtggccttatccctccttccttcagaggcgtgcgatatgtggatggaggagtgagtgacaacgtacccttcattgatgccaaaacaaccatcaccgtgtcccccttctatggggagtacgacatctgccctaaagtcaagtccacgaactttcttcatgtggacatcaccaagctcagtctacgcctctgcacagggaacctctaccttctctcgagagcttttgtccccccggatctcaaggtgctgggagagatatgccttcgaggatatttggatgcattcaggttcttggaagagaagggcatctgcaacaggccccagccaggcctgaagtcatcctcagaagggatggatcctgaggtcgccatgcccagctgggcaaacatgagtctggattcttccccggagtcggctgccttggctgtgaggctggagggagatgagctgctagaccacctgcgtctcagcatcctgccctgggatgagagcatcctggacaccctctcgcccaggctcgctacagcactgagtgaagaaatgaaagacaaaggtggatacatgagcaagatttgcaacttgctacccattaggataatgtcttatgtaatgctgccctgtaccctgcctgtggaatctgccattgcgattgtccagagactggtgacatggcttccagatatgcccgacgatgtcctgtggttgcagtgggtgacctcacaggtgttcactcgagtgctgatgtgtctgctccccgcctccaggtcccaaatgccagtgagcagccaacaggcctccccatgcacacctgagcaggactggccctgctggactccctgctcccccaagggctgtccagcagagaccaaagcagaggccaccccgcggtccatcctcaggtccagcctgaacttcttcttgggcaataaagtacctgctggtgctgaggggctctccacctttcccagtttttcactagagaagagtctgtgagtcacttgaggaggcgagtctagcagattctttcagaggtgctaaagtttcccatctttgtgcagctacctccgcattgctgtgtagtgacccctgcctgtgacgtggaggatcccagcctctgagctgagttggttttatgaaaagctaggaagcaacctttcgcctgtgcagcggtccagcacttaactctaatacatcagcatgcgttaattcagctggttgggaaatgacaccaggaagcccagtgcagagggtcccttactgactgtttcgtggccctattaatggtcagactgttccagcatgaggttcttagaatgacaggtgtttggatgggtgggggccttgtgatggggggtaggctggcccatgtgtgatcttgtggggtggagggaagagaatagcatgatcccacttccccatgctgtgggaaggggtgcagttcgtccccaagaacgacactgcctgtcaggtggtctgcaaagatgataaccttgactactaaaaacgtctccatggcgggggtaacaagatgataatctacttaattttagaacacctttttcacctaactaaaataatgtttaaagagttttgtataaaaatgtaaggaagcgttgttacctgttgaattttgtattatgtgaatcagtgagatgttagtagaataagccttaaaaaaaaaaaaatcggttgggtgcagtggcacacggctgtaatcccagcactttgggaggccaaggttggcagatcacctgaggtcaggagttcaagaccagtctggccaacatagcaaaaccctgtctctactaaaaatacaaaaattatctgggcatggtggtgcatgcctgtaatcccagctattcggaaggctgaggcaggagaatcacttgaacccaggaggcggaggttgcggtgagctgagattgcaccatttcattccagcctgggcaacatgagtgaaagtctgactcaaaaaaaaaaaatttaaaaaacaaaataatctagtgtgcagggcattcacctcagccccccaggcaggagccaagcacagcaggagcttccgcctcctctccactggagcacacaacttgaacctggcttattttctgcagggaccagccccacatggtcagtgagtttctccccatgtgtggcgatgagagagtgtagaaataaagacacaagacaaagaga SEQ ID NO:2 –野生型人類PNPLA3 (481 aa；NCBI參考序列號NP_079501.2) MYDAERGWSLSFAGCGFLGFYHVGATRCLSEHAPHLLRDARMLFGASAGALHCVGVLSGIPLEQTLQVLSDLVRKARSRNIGIFHPSFNLSKFLRQGLCKCLPANVHQLISGKIGISLTRVSDGENVLVSDFRSKDEVVDALVCSCFIPFYSGLIPPSFRGVRYVDGGVSDNVPFIDAKTTITVSPFYGEYDICPKVKSTNFLHVDITKLSLRLCTGNLYLLSRAFVPPDLKVLGEICLRGYLDAFRFLEEKGICNRPQPGLKSSSEGMDPEVAMPSWANMSLDSSPESAALAVRLEGDELLDHLRLSILPWDESILDTLSPRLATALSEEMKDKGGYMSKICNLLPIRIMSYVMLPCTLPVESAIAIVQRLVTWLPDMPDDVLWLQWVTSQVFTRVLMCLLPASRSQMPVSSQQASPCTPEQDWPCWTPCSPKGCPAETKAEATPRSILRSSLNFFLGNKVPAGAEGLSTFPSFSLEKSL SEQ ID NO:3 –人類PNPLA3 I148M (變異體) mRNA agagagcgcttgcgggcgccgggcggagctgctgcggatcaggacccgagccgattcccgatcccgacccagatcctaacccgcgcccccgccccgccgccgccgccatgtacgacgcagagcgcggctggagcttgtccttcgcgggctgcggcttcctgggcttctaccacgtcggggcgacccgctgcctgagcgagcacgccccgcacctcctccgcgacgcgcgcatgttgttcggcgcttcggccggggcgttgcactgcgtcggcgtcctctccggtatcccgctggagcagactctgcaggtcctctcagatcttgtgcggaaggccaggagtcggaacattggcatcttccatccatccttcaacttaagcaagttcctccgacagggtctctgcaaatgcctcccggccaatgtccaccagctcatctccggcaaaataggcatctctcttaccagagtgtctgatggggaaaacgttctggtgtctgactttcggtccaaagacgaagtcgtggatgccttggtatgttcctgcttcatgcccttctacagtggccttatccctccttccttcagaggcgtgcgatatgtggatggaggagtgagtgacaacgtacccttcattgatgccaaaacaaccatcaccgtgtcccccttctatggggagtacgacatctgccctaaagtcaagtccacgaactttcttcatgtggacatcaccaagctcagtctacgcctctgcacagggaacctctaccttctctcgagagcttttgtccccccggatctcaaggtgctgggagagatatgccttcgaggatatttggatgcattcaggttcttggaagagaagggcatctgcaacaggccccagccaggcctgaagtcatcctcagaagggatggatcctgaggtcgccatgcccagctgggcaaacatgagtctggattcttccccggagtcggctgccttggctgtgaggctggagggagatgagctgctagaccacctgcgtctcagcatcctgccctgggatgagagcatcctggacaccctctcgcccaggctcgctacagcactgagtgaagaaatgaaagacaaaggtggatacatgagcaagatttgcaacttgctacccattaggataatgtcttatgtaatgctgccctgtaccctgcctgtggaatctgccattgcgattgtccagagactggtgacatggcttccagatatgcccgacgatgtcctgtggttgcagtgggtgacctcacaggtgttcactcgagtgctgatgtgtctgctccccgcctccaggtcccaaatgccagtgagcagccaacaggcctccccatgcacacctgagcaggactggccctgctggactccctgctcccccaagggctgtccagcagagaccaaagcagaggccaccccgcggtccatcctcaggtccagcctgaacttcttcttgggcaataaagtacctgctggtgctgaggggctctccacctttcccagtttttcactagagaagagtctgtgagtcacttgaggaggcgagtctagcagattctttcagaggtgctaaagtttcccatctttgtgcagctacctccgcattgctgtgtagtgacccctgcctgtgacgtggaggatcccagcctctgagctgagttggttttatgaaaagctaggaagcaacctttcgcctgtgcagcggtccagcacttaactctaatacatcagcatgcgttaattcagctggttgggaaatgacaccaggaagcccagtgcagagggtcccttactgactgtttcgtggccctattaatggtcagactgttccagcatgaggttcttagaatgacaggtgtttggatgggtgggggccttgtgatggggggtaggctggcccatgtgtgatcttgtggggtggagggaagagaatagcatgatcccacttccccatgctgtgggaaggggtgcagttcgtccccaagaacgacactgcctgtcaggtggtctgcaaagatgataaccttgactactaaaaacgtctccatggcgggggtaacaagatgataatctacttaattttagaacacctttttcacctaactaaaataatgtttaaagagttttgtataaaaatgtaaggaagcgttgttacctgttgaattttgtattatgtgaatcagtgagatgttagtagaataagccttaaaaaaaaaaaaatcggttgggtgcagtggcacacggctgtaatcccagcactttgggaggccaaggttggcagatcacctgaggtcaggagttcaagaccagtctggccaacatagcaaaaccctgtctctactaaaaatacaaaaattatctgggcatggtggtgcatgcctgtaatcccagctattcggaaggctgaggcaggagaatcacttgaacccaggaggcggaggttgcggtgagctgagattgcaccatttcattccagcctgggcaacatgagtgaaagtctgactcaaaaaaaaaaaatttaaaaaacaaaataatctagtgtgcagggcattcacctcagccccccaggcaggagccaagcacagcaggagcttccgcctcctctccactggagcacacaacttgaacctggcttattttctgcagggaccagccccacatggtcagtgagtttctccccatgtgtggcgatgagagagtgtagaaataaagacacaagacaaagaga SEQ ID NO:4 –人類PNPLA3 I148M (變異體) MYDAERGWSLSFAGCGFLGFYHVGATRCLSEHAPHLLRDARMLFGASAGALHCVGVLSGIPLEQTLQVLSDLVRKARSRNIGIFHPSFNLSKFLRQGLCKCLPANVHQLISGKIGISLTRVSDGENVLVSDFRSKDEVVDALVCSCFMPFYSGLIPPSFRGVRYVDGGVSDNVPFIDAKTTITVSPFYGEYDICPKVKSTNFLHVDITKLSLRLCTGNLYLLSRAFVPPDLKVLGEICLRGYLDAFRFLEEKGICNRPQPGLKSSSEGMDPEVAMPSWANMSLDSSPESAALAVRLEGDELLDHLRLSILPWDESILDTLSPRLATALSEEMKDKGGYMSKICNLLPIRIMSYVMLPCTLPVESAIAIVQRLVTWLPDMPDDVLWLQWVTSQVFTRVLMCLLPASRSQMPVSSQQASPCTPEQDWPCWTPCSPKGCPAETKAEATPRSILRSSLNFFLGNKVPAGAEGLSTFPSFSLEKSL SEQ ID NO:5 –靈長類動物PNPLA3 (2291 bp；NCBI參考序列號XM_015457081.1) cgagggaggcggggcggacgtcgcgcgtggaaagcccgggcggagacgcggcggctgggtcacgagcgcttgcgggcgcccggcggagctgctgcggatcaggacccgagccgatccccgatcccgactccgatccggatccgcgcccccgcccccgccccgccatgtacgacgccgagcgcggctggagcttgtccttcgcgggctgcggcttcctgggcttctaccacgtcggggcgacccggtgcctgagcgagcacgccccgcacctcctccgcgacgcgcgcatgttgttcggcgcctcggccggggcgttgcactgcgtcggcgtcctctccgggatcccgctggagcagactctgcaggtcctctcagatcttgtccggaaggccaggagtcggaacattggtatcttccatccatccttcaacataggcaagttcctccgacaggatctctacaaatacctcccggccaatgtccaccagctcatctctggcaaaatatgcgtctcactcaccagagtgtctgatggggaaaacgttctggtgtctgactttcagtccaaagacgaagtcgtggatgccttgatttgttcctgcttcatccctttctacagtggccttatccctccttccttcagaggcgtgcgatatgtggatggaggagcgagtgacaacgtacccttcattgatgccaagacaaccatcaccgtgtcgcccttctatggggagtacgacatctgccctaaagtcaagtccaccaactttcttcatgtggacatcaccaagctcagcctacgcctctgcacagggaacctctaccttctctcaagagcgtttgtccccccggatctcaaggtgctgggagagatatgccttcgaggatatttggacgcgttcaggttcttggaagagaagggcatctgcaacaagccccagcggggtctgaagtcatcctcagaagggatggattctgaggtcactgcgcccggctgggaaaacacaagtctggattcttccccggagccggctgccttggctatgaggctggatggagatgagctgctagaccacctgcgtctcagcatcctgccctgggatgagagcatcctggacaccctgtcgcccgagctcgctacagtgagtgaagcaatgaaagacaaaggtggatacatgagcaagatttgcaacttgctacccattaggataatatcttatgtgatgctgccctgtaccctgcctgtggagtctgccattgcgattgtccagagactggtgacatggcttccagatatgcccgacgatgtgcagtggctgcagtgggtgacctcacaggtcttcactcgagcgctgatgtgtctgcttcccgcctccaggtcccaaatgccagtgagcagcgaacaggcctccccatgcaaaccggagcaggactggcactgctggactccctgctcccccgaggactgtcctgcagaggccaaagcagaggctaccccacggtccatcctcaggtccagcctgaacttcttctggggcaataaagtacctgctggtgctgaggggctctccacctttcccagtttttcactggagaagaatttgtgagtcatttgaggaggcgagtctaggagattctttcagaggtgctaaagcttcccatctttgtgcagctacctccgcattgccgtgtagtgacccctgcctgtgacgtggaggatcccagcctctgagctgagttggttttatgaaaagctaggaagcaatgtttggtctgtgcagcagtccagcacttaagtctaatacgtcagcatgcgttagttcagctggttgggaaatgacaccgggaagcctagcgcagagggtcccttactgactatttcatggtcctattaatggtcagactgttccagtgtgaggttcttagaatgactagtgtttggatgggtgggggccttgtggtggggggtgggctggcctatgtgtgatcttgtggggtggaaggaagagagtagcacaatcccacctccccatgccgtgggaaggggtgcacttggttcccaagaaggacactgcctgtcaggtggcctgcaaatataataaccttgacaactaaaaacctctccatgggggtgggaggtaccaagataataaccgatttacattttagagcacctttttcacctaactaaaataatgtttaaagagttttatataaaaatgtaaggaagagttgttatctgttgaattttgtattatatgaatcagtgagatgttaatagaataagcctt SEQ ID NO:6 –靈長類動物PNPLA3 (480 aa；NCBI參考序列號XP_015312567.1) MYDAERGWSLSFAGCGFLGFYHVGATRCLSEHAPHLLRDARMLFGASAGALHCVGVLSGIPLEQTLQVLSDLVRKARSRNIGIFHPSFNIGKFLRQDLYKYLPANVHQLISGKICVSLTRVSDGENVLVSDFQSKDEVVDALICSCFIPFYSGLIPPSFRGVRYVDGGASDNVPFIDAKTTITVSPFYGEYDICPKVKSTNFLHVDITKLSLRLCTGNLYLLSRAFVPPDLKVLGEICLRGYLDAFRFLEEKGICNKPQRGLKSSSEGMDSEVTAPGWENTSLDSSPEPAALAMRLDGDELLDHLRLSILPWDESILDTLSPELATVSEAMKDKGGYMSKICNLLPIRIISYVMLPCTLPVESAIAIVQRLVTWLPDMPDDVQWLQWVTSQVFTRALMCLLPASRSQMPVSSEQASPCKPEQDWHCWTPCSPEDCPAEAKAEATPRSILRSSLNFFWGNKVPAGAEGLSTFPSFSLEKNL SEQ ID NO:7 –小鼠PNPLA3 (4675 bp；NCBI參考序列號XM_006520346.5) cacccgaagacagcttaggcggctgcggctctttaagctcagagcagcaacaccgggagcagagctgaactgcagcgccgcccggagcttcaagcaccatgtatgacccagagcgccgctggagcctgtcgtttgcaggctgcggcttcctgggcttctaccacgtcggggctacgctatgtctgagcgagcgcgccccgcacctcctccgcgatgcgcgcactttctttggctgctcggccggtgcactgcacgcggtcaccttcgtgtgcagtctccctctcggtgcgtccacggccactacccaggccccgcgtgcggggaggggttgctacacctggggaatcggtaacactttccggggtgcccgaagaaacctgtccggagagctctcatccttcccggtgccgttgagcactcagctggagaccctgggcctgtcacctggcgtgggatttcccggggccggctggagcagacgcgctccgagcatcttcttcctgacccgctctggcgccctggtcctgtcagctgggtcatccctgagcagcagggaacgacgcaggtttgccgggtcctctggtccctgagccgcagaaggccgtataatggagatcctcatggacctcgtgcggaaagccaggagccgcaacatcggcaccctccacccgttcttcaacattaacaagtgcatcagagacgggctccaggagagcctcccagacaatgtccaccaggtcatttctggcaaggttcacatctcactcaccagggtgtcggatggggagaacgtgctggtgtctgagttccattccaaagacgaagtcgtggatgccctggtgtgttcctgcttcattcccctcttctctggcctaatccctccttccttccgaggcgagcggtacgtggacggaggagtgagcgacaacgtccctgtgctggatgccaaaaccaccatcacggtgtcacctttctacggtgagcatgacatctgccccaaagtcaagtccaccaacttcttccacgtgaatatcaccaacctcagcctccgcctctgcactgggaacctccaacttctgaccagagcgctcttcccgtctgatgtgaaggtgatgggagagctgtgctatcaagggtacctggacgccttccggttcctggaggagaatggcatctgtaacgggccacagcgcagcctgagtctgtccttggtggcgccagaagcctgcttggaaaatggcaaacttgtgggagacaaggtgccagtcagcctatgctttacagatgagaacatctgggagacactgtcccccgagctcagcacagctctgagtgaagcgattaaggacagggagggctacctgagcaaagtctgcaacctcctgcccgtcaggatcctgtcctacatcatgctgccctgcagtctgcccgtggagtcggctatcgctgcagtccacaggctggtgacatggctccctgatatccaggatgatatccagtggctacaatgggcgacatcccaggtttgtgcccgaatgacgatgtgcctgctcccctctaccagcatgagattcctgggacaatcccaattccttggcctccattgtatcaaagggctgaaaaccaaagggaaggcacagctgtctcttcagcatgcctcttctgccagaaccactgcaaggtttggtgctcaggctgtgcaaacattctagcaatgtttgactcagtgtcaagcaggtgacaaggaacatggtgctgtgtggggggaacccatggcccaggtgagggcttattggtgggtgaagctgtgggtgttcaggtggtggagaaggccttaagggatgggactgacacctcagcactgaaggcaggaggaagctgtggctctgggttgcacccctgcctggctccaccctctctggcatctgtagaagttacagctggttcttcctctcagccccatgctcccagaaataagactcagacccaaattatagttacaaataccttggccatatagctaggctcttctcagactagctcataacttaactcattaattttaacctccatcctgccacatggctggtggcctgtgctcaggtaccatgagtccagctcttcacatctttccggatgaatcttccataattctttctgcctcctggatgttccaccttctattccaccttttcctataggccatggttttgtttttgttttttttttccaaatttaatttaattaattaatttatttatttttggtttttcgagacagggtttctctgtatcgccctggctgtcctggaactcactatgtaagccaggctggcctcaaactcagaaatccgcctgcctctgcctcctgagtgctgggattaaaggcgtgcgcaaccatgcccggtgtggtttttttttttttttaattgacaggtggatgcatctatataatccataacatattctctctacaggtatctattaggttttgggtgaggtgtggagttctagggaactctgagagaaattcctggggagtaagtggtttatcaagttgattggaggagtttttaatgctatggacagacagacagaaggacaacagcatagtcggggctaccagggagttcaggccccggcatcggagatagaagcaggatggggtctttgaagagattctgagcccacacagcagaggagggactctctctttagagcttttgaggatgagggaggttgactgcaagagcctacagccaggctcgaggcaggcagggggtggggagcaggatgtaaaccccttcgatgctgacagactcacttctggggtaaaatattatgagatgcctgtcagtgtctgtgaagagacctgagcagagtctggattctgacatcaatcatgttcttacaatactgaagacctgagagcctgcaatcttggtttgtaaattgctggtctccgtgcttccagtgaacttggacattcttctcatggttggtccaggagaggccaaagctgagggcaccctgccttccacccccagtccagcttgaccttttatctggagcaacagtgtctagatgatgggtgggtgaggggtgctatactgtctgtccctctgggaagggttctgttacttttggaggcagctaggaagtttctctgtgcagctgccccctggtgctgtgtggtgacctcattgcctgtgaccccaggatcacaggatctgggctaaagtggtagtccatagaaaccaaagacaatgatttggtgtttagaaagctactcttggtctgggtgaagtctggtgcttaagggctatcacaaagagcgtgtcaaaccatctctcagcctgtgagtcagtggggagcccaagggcatcagtgtttggaaactggaatccaaaccgggcaatctcggaaggaaactgtttaggaattgtgatgggacgggccgtggctgtctctgaaaagggcctgccagataacttattacttttaaggacacctttggctcttactaatttataaagcattttatataaacacaccagggagtgcatggtgaactacacgtatgatcagttaagtggggctagaattaggtagggagagcatcggacctctgcctcctcaacctcaacttgcttgctttctccactggctccaaatctttgtatagtcatcagccatgaccacctctctccctccccatctactaccagcagcgttaatgggaataagtacccacttctctcaggtgtactatacagctgtgggtgtggtgtgtgtttcctgtaattcacactttagaaaggaaacaagcaaacaaaagaaaccaggtgctgcccatactcctaagtgtagacagtgaaggtgtgtgtctcccatgcctgagtctcctggaggcctagtgagctccaggttcatgcaagcacatcaggaggaatcatataatctcagcacggttgatccagatgggataagaaaggactctgggagagagaatgtggttctagagacaaagtgtctaggctacacagaagataagactgtcccaaggaaagaaaagaaaccaggaactagggtgcagctcagttgtcagaggacttctctaggcttgaagcccagagtccaatctcagcaccttataaactgtggagtgacaggcagtgacatcggcctgtaatcccaacactcaagcagtagaggcaagaggatcataagttcaaggtcttccttggctatttagggagttggaggttagctctggctacatgagaccctgtctcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagtagaaacttctgccttgctttgagctgcccctttctggacgtttctcatcagtagagaatattcctgccaccctatcagacaaaactcccactggtttggagtctctccattctcaggaacacctcaggagtcagacagtgagcagcagggagcaatgtcttgacttgtaagccccttagcaaggctggttcatttgtttattaaaagcaggtgtgggtgaatttatgcaaatgagtatgcaaactagtggaacagcagaaggattgaatggatacaccaaaaataaccacaactgtttaagggaaaagggtccataataaatgtggggaacaaaaaacaaataaatgtgatttttttta SEQ ID NO:8 –小鼠PNPLA3 (367 aa；NCBI參考序列號XP_006520409.1) MEILMDLVRKARSRNIGTLHPFFNINKCIRDGLQESLPDNVHQVISGKVHISLTRVSDGENVLVSEFHSKDEVVDALVCSCFIPLFSGLIPPSFRGERYVDGGVSDNVPVLDAKTTITVSPFYGEHDICPKVKSTNFFHVNITNLSLRLCTGNLQLLTRALFPSDVKVMGELCYQGYLDAFRFLEENGICNGPQRSLSLSLVAPEACLENGKLVGDKVPVSLCFTDENIWETLSPELSTALSEAIKDREGYLSKVCNLLPVRILSYIMLPCSLPVESAIAAVHRLVTWLPDIQDDIQWLQWATSQVCARMTMCLLPSTSMRFLGQSQFLGLHCIKGLKTKGKAQLSLQHASSARTTARFGAQAVQTF SEQ ID NO:9 – DsiRNA 1過客(有義)股 UCUGCAGGUCCUCUCAGAUCUUGUG SEQ ID NO:10 – DsiRNA 1引導(反義)股 CACAAGAUCUGAGAGGACCUGCAGAGU SEQ ID NO:11 – DsiRNA 2過客(有義)股 AGGUCCUCUCAGAUCUUGUGCGGAA SEQ ID NO:12 – DsiRNA 2引導(反義)股 UUCCGCACAAGAUCUGAGAGGACCUGC SEQ ID NO:13 – DsiRNA 3過客(有義)股 AUUGGCAUCUUCCAUCCAUCCUUCA SEQ ID NO:14 – DsiRNA 3引導(反義)股 UGAAGGAUGGAUGGAAGAUGCCAAUGU SEQ ID NO:15 – DsiRNA 4過客(有義)股 AUCUUCCAUCCAUCCUUCAACUUAA SEQ ID NO:16 – DsiRNA 4引導(反義)股 UUAAGUUGAAGGAUGGAUGGAAGAUGC SEQ ID NO:17 – DsiRNA 5過客(有義)股 UCUUCCAUCCAUCCUUCAACUUAAG SEQ ID NO:18 – DsiRNA 5引導(反義)股 CUUAAGUUGAAGGAUGGAUGGAAGAUG SEQ ID NO:19 – DsiRNA 6過客(有義)股 CCAGAGUGUCUGAUGGGGAAAACGU SEQ ID NO:20 – DsiRNA 6引導(反義)股 ACGUUUUCCCCAUCAGACACUCUGGUA SEQ ID NO:21 – DsiRNA 7過客(有義)股 GAGUGUCUGAUGGGGAAAACGUUCU SEQ ID NO:22 – DsiRNA 7引導(反義)股 AGAACGUUUUCCCCAUCAGACACUCUG SEQ ID NO:23 – DsiRNA 8過客(有義)股 AUGGGGAAAACGUUCUGGUGUCUGA SEQ ID NO:24 – DsiRNA 8引導(反義)股 UCAGACACCAGAACGUUUUCCCCAUCA SEQ ID NO:25 – DsiRNA 9過客(有義)股 GGGGAAAACGUUCUGGUGUCUGACU SEQ ID NO:26 – DsiRNA 9引導(反義)股 AGUCAGACACCAGAACGUUUUCCCCAU SEQ ID NO:27 – DsiRNA 10過客(有義)股 GGGAAAACGUUCUGGUGUCUGACUU SEQ ID NO:28 – DsiRNA 10引導(反義)股 AAGUCAGACACCAGAACGUUUUCCCCA SEQ ID NO:29 – DsiRNA 11過客(有義)股 GGAAAACGUUCUGGUGUCUGACUUU SEQ ID NO:30 – DsiRNA 11引導(反義)股 AAAGUCAGACACCAGAACGUUUUCCCC SEQ ID NO:31 – DsiRNA 12過客(有義)股 GAAAACGUUCUGGUGUCUGACUUUC SEQ ID NO:32 – DsiRNA 12引導(反義)股 GAAAGUCAGACACCAGAACGUUUUCCC SEQ ID NO:33 – DsiRNA 13過客(有義)股 AAAACGUUCUGGUGUCUGACUUUCG SEQ ID NO:34 – DsiRNA 13引導(反義)股 CGAAAGUCAGACACCAGAACGUUUUCC SEQ ID NO:35 – DsiRNA 14過客(有義)股 AAACGUUCUGGUGUCUGACUUUCGG SEQ ID NO:36 – DsiRNA 14引導(反義)股 CCGAAAGUCAGACACCAGAACGUUUUC SEQ ID NO:37 – DsiRNA 15過客(有義)股 AACGUUCUGGUGUCUGACUUUCGGU SEQ ID NO:38 – DsiRNA 15引導(反義)股 ACCGAAAGUCAGACACCAGAACGUUUU SEQ ID NO:39 – DsiRNA 16過客(有義)股 ACGUUCUGGUGUCUGACUUUCGGUC SEQ ID NO:40 – DsiRNA 16引導(反義)股 GACCGAAAGUCAGACACCAGAACGUUU SEQ ID NO:41 – DsiRNA 17過客(有義)股 GUUCUGGUGUCUGACUUUCGGUCCA SEQ ID NO:42 – DsiRNA 17引導(反義)股 UGGACCGAAAGUCAGACACCAGAACGU SEQ ID NO:43 – DsiRNA 18過客(有義)股 GACGAAGUCGUGGAUGCCUUGGUAU SEQ ID NO:44 – DsiRNA 18引導(反義)股 AUACCAAGGCAUCCACGACUUCGUCUU SEQ ID NO:45 – DsiRNA 19過客(有義)股 ACGAAGUCGUGGAUGCCUUGGUAUG SEQ ID NO:46 – DsiRNA 19引導(反義)股 CAUACCAAGGCAUCCACGACUUCGUCU SEQ ID NO:47 – DsiRNA 20過客(有義)股 CGAAGUCGUGGAUGCCUUGGUAUGU SEQ ID NO:48 – DsiRNA 20引導(反義)股 ACAUACCAAGGCAUCCACGACUUCGUC SEQ ID NO:49 – DsiRNA 21過客(有義)股 CAGAGGCGUGCGAUAUGUGGAUGGA SEQ ID NO:50 – DsiRNA 21引導(反義)股 UCCAUCCACAUAUCGCACGCCUCUGAA SEQ ID NO:51 – DsiRNA 22過客(有義)股 GCGAUAUGUGGAUGGAGGAGUGAGU SEQ ID NO: 52 – DsiRNA 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UUAAAACCAACUCAGCUCAGGG SEQ ID NO:1163 – PNPLA3寡核苷酸194過客(有義)股 GCUGAGUUGGUUUUAUGAAAGCAGCCGAAAGGCUGC SEQ ID NO:1164 – PNPLA3寡核苷酸194引導(有義)股 UUUCAUAAAACCAACUCAGCGG SEQ ID NO:1165 – PNPLA3對照過客(有義)股 CUGUUGAAUUUUGUAUUAUA SEQ ID NO:1166 – PNPLA3對照引導(反義)股 UAUAAUACAAAAUUCAACAGGG SEQ ID NO:1167 –目標序列1 CAACGTACCCTTCATTGAT SEQ ID NO:1168 –目標序列2 TGAAAGACAAAGGTGGATA SEQ ID NO:1169 –目標序列3 TACATGAGCAAGATTTGCA SEQ ID NO:1170 –目標序列4 TGAGCAAGATTTGCAACTT SEQ ID NO:1171 –目標序列5 CTCTGAGCTGAGTTGGTTT SEQ ID NO:1172 –目標序列6 CTTTTTCACCTAACTAAAA SEQ ID NO:1173 –目標序列7 TTCACCTAACTAAAATAAT SEQ ID NO:1174 –目標序列8 CTAACTAAAATAATGTTTA SEQ ID NO:1175 –目標序列9 CTGAGCTGAGTTGGTTTTA SEQ ID NO:1176 –目標序列10 GCTGAGTTGGTTTTATGAA SEQ ID NO:1177 –人工序列 GCAGCCGAAAGGCUGC 表 A ：

編號	SEQ ID NO. 及修飾模式	DP 編號	經修飾之寡核苷酸
1	1170 SM1224/ASM1508	DP17736P:DP17735G	[mCs][mC][fC][mA][mU][mU][mA][fG][fG][fA][mU][fA][fA][mU][mG][mU][fC][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1178) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][mG][fA][mC][fA][fU][mU][fA][mU][fC][mC][fU][mA][fA][mU][mG][fG][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1179)
2	0643 SM1405/ASM2028	DP17919P:DP17918G	[mAs][mC][mA][mA][mC][mG][mU][fA][fC][fC][fC][mU][mU][mC][mA][mU][mU][mG][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1180) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fCs][fA][fA][mU][fG][mA][mA][fG][mG][mG][mU][fA][mC][mG][mU][mU][mG][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1181)
3	1110 SM1405/ASM2028	DP17921P:DP17920G	[mGs][mC][mA][mC][mU][mG][mA][fG][fU][fG][fA][mA][mG][mA][mA][mA][mU][mG][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1182) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fCs][fA][fU][mU][fU][mC][mU][fU][mC][mA][mC][fU][mC][mA][mG][mU][mG][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1183)
4	1162 SM1405/ASM2028	DP17923P:DP17922G	[mAs][mC][mU][mU][mG][mC][mU][fA][fC][fC][fC][mA][mU][mU][mA][mG][mG][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1184) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fC][fC][mU][fA][mA][mU][fG][mG][mG][mU][fA][mG][mC][mA][mA][mG][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1185)
5	1170 SM1405/ASM2028	DP17925P:DP17924G	[mCs][mC][mC][mA][mU][mU][mA][fG][fG][fA][fU][mA][mA][mU][mG][mU][mC][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1186) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fG][fA][mC][fA][mU][mU][fA][mU][mC][mC][fU][mA][mA][mU][mG][mG][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1187)
6	1699 SM1405/ASM2028	DP17927P:DP17926G	[mCs][mU][mG][mA][mG][mC][mU][fG][fA][fG][fU][mU][mG][mG][mU][mU][mU][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1188) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fA][fA][mA][fC][mC][mA][fA][mC][mU][mC][fA][mG][mC][mU][mC][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1189)
7	1703 SM1405/ASM2028	DP17929P:DP17928G	[mGs][mC][mU][mG][mA][mG][mU][fU][fG][fG][fU][mU][mU][mU][mA][mU][mG][mA][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1190) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fUs][fC][fA][mU][fA][mA][mA][fA][mC][mC][mA][fA][mC][mU][mC][mA][mG][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1191)
8	1708 SM1405/ASM2028	DP17931P:DP17930G	[mGs][mU][mU][mG][mG][mU][mU][fU][fU][fA][fU][mG][mA][mA][mA][mA][mG][mC][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1192) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fGs][fC][fU][mU][fU][mU][mC][fA][mU][mA][mA][fA][mA][mC][mC][mA][mA][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1193)
9	2104 SM1405/ASM2028	DP17933P:DP17932G	[mGs][mG][mU][mA][mA][mC][mA][fA][fG][fA][fU][mG][mA][mU][mA][mA][mU][mC][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1194) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fGs][fA][fU][mU][fA][mU][mC][fA][mU][mC][mU][fU][mG][mU][mU][mA][mC][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1195)
10	2143 SM1405/ASM2028	DP17935P:DP17934G	[mUs][mU][mU][mC][mA][mC][mC][fU][fA][fA][fC][mU][mA][mA][mA][mA][mU][mA][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1196) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fUs][fA][fU][mU][fU][mU][mA][fG][mU][mU][mA][fG][mG][mU][mG][mA][mA][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1197)
11	2155 SM1405/ASM2028	DP17937P:DP17936G	[mAs][mA][mA][mA][mU][mA][mA][fU][fG][fU][fU][mU][mA][mA][mA][mG][mA][mG][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1198) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fCs][fU][fC][mU][fU][mU][mA][fA][mA][mC][mA][fU][mU][mA][mU][mU][mU][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1199)
12	2156 SM1405/ASM2028	DP17939P:DP17938G	[mAs][mA][mA][mU][mA][mA][mU][fG][fU][fU][fU][mA][mA][mA][mG][mA][mG][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1200) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fC][fU][mC][fU][mU][mU][fA][mA][mA][mC][fA][mU][mU][mA][mU][mU][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1201)
13	2157 SM1405/ASM2028	DP17941P:DP17940G	[mAs][mA][mU][mA][mA][mU][mG][fU][fU][fU][fA][mA][mA][mG][mA][mG][mU][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1202) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fA][fC][mU][fC][mU][mU][fU][mA][mA][mA][fC][mA][mU][mU][mA][mU][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1203)
14	2163 SM1405/ASM2028	DP17943P:DP17942G	[mGs][mU][mU][mU][mA][mA][mA][fG][fA][fG][fU][mU][mU][mU][mG][mU][mA][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1204) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fU][fA][mC][fA][mA][mA][fA][mC][mU][mC][fU][mU][mU][mA][mA][mA][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1205)
15	2165 SM1405/ASM2028	DP17945P:DP17944G	[mUs][mU][mA][mA][mA][mG][mA][fG][fU][fU][fU][mU][mG][mU][mA][mU][mA][mA][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1206) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fUs][fU][fA][mU][fA][mC][mA][fA][mA][mA][mC][fU][mC][mU][mU][mU][mA][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1207)
16	2170 SM1405/ASM2028	DP17947P:DP17946G	[mGs][mA][mG][mU][mU][mU][mU][fG][fU][fA][fU][mA][mA][mA][mA][mA][mU][mG][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1208) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fCs][fA][fU][mU][fU][mU][mU][fA][mU][mA][mC][fA][mA][mA][mA][mC][mU][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1209)
17	2195 SM1405/ASM2028	DP17949P:DP17948G	[mGs][mC][mG][mU][mU][mG][mU][fU][fA][fC][fC][mU][mG][mU][mU][mG][mA][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1210) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fU][fC][mA][fA][mC][mA][fG][mG][mU][mA][fA][mC][mA][mA][mC][mG][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1211)
18	2200 SM1405/ASM2028	DP17951P:DP17950G	[mGs][mU][mU][mA][mC][mC][mU][fG][fU][fU][fG][mA][mA][mU][mU][mU][mU][mG][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1212) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fCs][fA][fA][mA][fA][mU][mU][fC][mA][mA][mC][fA][mG][mG][mU][mA][mA][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1213)
19	2204 SM1405/ASM2028	DP17953P:DP17952G	[mCs][mC][mU][mG][mU][mU][mG][fA][fA][fU][fU][mU][mU][mG][mU][mA][mU][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1214) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fA][fU][mA][fC][mA][mA][fA][mA][mU][mU][fC][mA][mA][mC][mA][mG][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1215)
20	2205 SM1405/ASM2028	DP17955P:DP17954G	[mCs][mU][mG][mU][mU][mG][mA][fA][fU][fU][fU][mU][mG][mU][mA][mU][mU][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1216) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fA][fA][mU][fA][mC][mA][fA][mA][mA][mU][fU][mC][mA][mA][mC][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1217)
21	2210 SM1405/ASM2028	DP17957P:DP17956G	[mGs][mA][mA][mU][mU][mU][mU][fG][fU][fA][fU][mU][mA][mU][mG][mU][mG][mA][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1218) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fUs][fC][fA][mC][fA][mU][mA][fA][mU][mA][mC][fA][mA][mA][mA][mU][mU][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1219)

表 B

SEQ ID NO. 及修飾模式	DP 編號	經修飾之寡核苷酸
0644 SM1405/ASM2028	DP18056P:DP18055G	[mCs][mA][mA][mC][mG][mU][mA][fC][fC][fC][fU][mU][mC][mA][mU][mU][mG][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1220) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fC][fA][mA][fU][mG][mA][fA][mG][mG][mG][fU][mA][mC][mG][mU][mU][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1221)
0745 SM1405/ASM2028	DP18084P:DP18083G	[mUs][mG][mG][mA][mC][mA][mU][fC][fA][fC][fC][mA][mA][mG][mC][mU][mC][mA][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1222) [MePhosphonate-4O-mUs][fCs][fUs][fG][fA][mG][fC][mU][mU][fG][mG][mU][mG][fA][mU][mG][mU][mC][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1223)
1126 SM1405/ASM2028	DP18112P:DP18111G	[mUs][mG][mA][mA][mA][mG][mA][fC][fA][fA][fA][mG][mG][mU][mG][mG][mA][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1224) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fU][fC][mC][fA][mC][mC][fU][mU][mU][mG][fU][mC][mU][mU][mU][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1225)
1129 SM1405/ASM2028	DP18116P:DP18115G	[mAs][mA][mG][mA][mC][mA][mA][fA][fG][fG][fU][mG][mG][mA][mU][mA][mC][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1226) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fG][fU][mA][fU][mC][mC][fA][mC][mC][mU][fU][mU][mG][mU][mC][mU][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1227)
1130 SM1405/ASM2028	DP18118P:DP18117G	[mAs][mG][mA][mC][mA][mA][mA][fG][fG][fU][fG][mG][mA][mU][mA][mC][mA][mU][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1228) [MePhosphonate-4O-mUs][fCs][fAs][fU][fG][mU][fA][mU][mC][fC][mA][mC][mC][fU][mU][mU][mG][mU][mC][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1229)
1143 SM1405/ASM2028	DP18136P:DP18135G	[mUs][mA][mC][mA][mU][mG][mA][fG][fC][fA][fA][mG][mA][mU][mU][mU][mG][mC][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1230) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fGs][fC][fA][mA][fA][mU][mC][fU][mU][mG][mC][fU][mC][mA][mU][mG][mU][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1231)
1147 SM1405/ASM2028	DP18140P:DP18139G	[mUs][mG][mA][mG][mC][mA][mA][fG][fA][fU][fU][mU][mG][mC][mA][mA][mC][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1232) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fG][fU][mU][fG][mC][mA][fA][mA][mU][mC][fU][mU][mG][mC][mU][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1233)
1152 SM1405/ASM2028	DP18150P:DP18149G	[mAs][mA][mG][mA][mU][mU][mU][fG][fC][fA][fA][mC][mU][mU][mG][mC][mU][mA][mC][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1234) [MePhosphonate-4O-mUs][fGs][fUs][fA][fG][mC][fA][mA][mG][fU][mU][mG][mC][fA][mA][mA][mU][mC][mU][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1235)
1229 SM1405/ASM2028	DP18172P:DP18171G	[mUs][mG][mC][mG][mA][mU][mU][fG][fU][fC][fC][mA][mG][mA][mG][mA][mC][mU][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1236) [MePhosphonate-4O-mUs][fCs][fAs][fG][fU][mC][fU][mC][mU][fG][mG][mA][mC][fA][mA][mU][mC][mG][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1237)
2142 SM1405/ASM2028	DP18274P:DP18273G	[mUs][mU][mU][mU][mC][mA][mC][fC][fU][fA][fA][mC][mU][mA][mA][mA][mA][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1238) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fU][fU][mU][fU][mA][mG][fU][mU][mA][mG][fG][mU][mG][mA][mA][mA][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1239)
1698 SM1405/ASM2028	DP18208P:DP18207G	[mUs][mC][mU][mG][mA][mG][mC][fU][fG][fA][fG][mU][mU][mG][mG][mU][mU][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1240) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fA][fA][mC][fC][mA][mA][fC][mU][mC][mA][fG][mC][mU][mC][mA][mG][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1241)
2138 SM1405/ASM2028	DP18270P:DP18269G	[mAs][mC][mC][mU][mU][mU][mU][fU][fC][fA][fC][mC][mU][mA][mA][mC][mU][mA][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1242) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fUs][fA][fG][mU][fU][mA][mG][fG][mU][mG][mA][fA][mA][mA][mA][mG][mG][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1243)
2140 SM1405/ASM2028	DP18272P:DP18271G	[mCs][mU][mU][mU][mU][mU][mC][fA][fC][fC][fU][mA][mA][mC][mU][mA][mA][mA][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1244) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fUs][fU][fU][mA][fG][mU][mU][fA][mG][mG][mU][fG][mA][mA][mA][mA][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1245)
2144 SM1405/ASM2028	DP18276P:DP18275G	[mUs][mU][mC][mA][mC][mC][mU][fA][fA][fC][fU][mA][mA][mA][mA][mU][mA][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1246) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fU][fA][mU][fU][mU][mU][fA][mG][mU][mU][fA][mG][mG][mU][mG][mA][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1247)
2146 SM1405/ASM2028	DP18280P:DP18279G	[mCs][mA][mC][mC][mU][mA][mA][fC][fU][fA][fA][mA][mA][mU][mA][mA][mU][mG][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1248) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fCs][fA][fU][mU][fA][mU][mU][fU][mU][mA][mG][fU][mU][mA][mG][mG][mU][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1249)
2149 SM1405/ASM2028	DP18286P:DP18285G	[mCs][mU][mA][mA][mC][mU][mA][fA][fA][fA][fU][mA][mA][mU][mG][mU][mU][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1250) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fA][fA][mC][fA][mU][mU][fA][mU][mU][mU][fU][mA][mG][mU][mU][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1251)
2137 SM1405/ASM2028	DP18268P:DP18267G	[mCs][mA][mC][mC][mU][mU][mU][fU][fU][fC][fA][mC][mC][mU][mA][mA][mC][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1252) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fG][fU][mU][fA][mG][mG][fU][mG][mA][mA][fA][mA][mA][mG][mG][mU][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1253)
2205 SM1405/ASM2028	DP17955P:DP17954G	[mCs][mU][mG][mU][mU][mG][mA][fA][fU][fU][fU][mU][mG][mU][mA][mU][mU][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1216) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fA][fA][mU][fA][mC][mA][fA][mA][mA][mU][fU][mC][mA][mA][mC][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1217)

表 C

SEQ ID NO. 及修飾模式	DP 編號	經修飾之寡核苷酸
1697 SM1405/ASM2028	DP18206P:DP18205G	[mCs][mU][mC][mU][mG][mA][mG][fC][fU][fG][fA][mG][mU][mU][mG][mG][mU][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1254) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fA][fC][mC][fA][mA][mC][fU][mC][mA][mG][fC][mU][mC][mA][mG][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1255)
1614 SM1405/ASM2028	DP18194P:DP18193G	[mAs][mG][mG][mU][mG][mC][mU][fA][fA][fA][fG][mU][mU][mU][mC][mC][mC][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1256) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fG][fG][mG][fA][mA][mA][fC][mU][mU][mU][fA][mG][mC][mA][mC][mC][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1257)
2176 SM1405/ASM2028	DP18304P:DP18303G	[mUs][mG][mU][mA][mU][mA][mA][fA][fA][fA][fU][mG][mU][mA][mA][mG][mG][mA][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1258) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fUs][fC][fC][mU][fU][mA][mC][fA][mU][mU][mU][fU][mU][mA][mU][mA][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1259)
2222 SM1405/ASM2028	DP18326P:DP18325G	[mAs][mU][mG][mU][mG][mA][mA][fU][fC][fA][fG][mU][mG][mA][mG][mA][mU][mG][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1260) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fCs][fA][fU][mC][fU][mC][mA][fC][mU][mG][mA][fU][mU][mC][mA][mC][mA][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1261)
1173 SM1405/ASM2028	DP18168P:DP18167G	[mAs][mU][mU][mA][mG][mG][mA][fU][fA][fA][fU][mG][mU][mC][mU][mU][mA][mU][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1262) [MePhosphonate-4O-mUs][fCs][fAs][fU][fA][mA][fG][mA][mC][fA][mU][mU][mA][fU][mC][mC][mU][mA][mA][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1263)
2136 SM1405/ASM2028	DP18266P:DP18265G	[mAs][mC][mA][mC][mC][mU][mU][fU][fU][fU][fC][mA][mC][mC][mU][mA][mA][mC][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1264) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fGs][fU][fU][mA][fG][mG][mU][fG][mA][mA][mA][fA][mA][mG][mG][mU][mG][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1265)
0637 SM1405/ASM2028	DP18046P:DP18045G	[mUs][mG][mA][mG][mU][mG][mA][fC][fA][fA][fC][mG][mU][mA][mC][mC][mC][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1266) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fG][fG][mG][fU][mA][mC][fG][mU][mU][mG][fU][mC][mA][mC][mU][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1267)
1116 SM1405/ASM2028	DP18098P:DP18097G	[mAs][mG][mU][mG][mA][mA][mG][fA][fA][fA][fU][mG][mA][mA][mA][mG][mA][mC][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1268) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fGs][fU][fC][mU][fU][mU][mC][fA][mU][mU][mU][fC][mU][mU][mC][mA][mC][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1269)
0923 SM1405/ASM2028	DP18096P:DP18095G	[mAs][mU][mC][mC][mU][mC][mA][fG][fA][fA][fG][mG][mG][mA][mU][mG][mG][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1270) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fC][fC][mA][fU][mC][mC][fC][mU][mU][mC][fU][mG][mA][mG][mG][mA][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1271)
0641 SM1405/ASM2028	DP18052P:DP18051G	[mUs][mG][mA][mC][mA][mA][mC][fG][fU][fA][fC][mC][mC][mU][mU][mC][mA][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1272) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fU][fG][mA][fA][mG][mG][fG][mU][mA][mC][fG][mU][mU][mG][mU][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1273)
1136 SM1405/ASM2028	DP18126P:DP18125G	[mAs][mG][mG][mU][mG][mG][mA][fU][fA][fC][fA][mU][mG][mA][mG][mC][mA][mA][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1274) [MePhosphonate-4O-mUs][fCs][fUs][fU][fG][mC][fU][mC][mA][fU][mG][mU][mA][fU][mC][mC][mA][mC][mC][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1275)
1158 SM1405/ASM2028	DP18158P:DP18157G	[mUs][mG][mC][mA][mA][mC][mU][fU][fG][fC][fU][mA][mC][mC][mC][mA][mU][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1276) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fA][fU][mG][fG][mG][mU][fA][mG][mC][mA][fA][mG][mU][mU][mG][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1277)
1151 SM1405/ASM2028	DP18148P:DP18147G	[mCs][mA][mA][mG][mA][mU][mU][fU][fG][fC][fA][mA][mC][mU][mU][mG][mC][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1278) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fG][fC][mA][fA][mG][mU][fU][mG][mC][mA][fA][mA][mU][mC][mU][mU][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1279)
1541 SM1405/ASM2028	DP18184P:DP18183G	[mCs][mA][mC][mC][mU][mU][mU][fC][fC][fC][fA][mG][mU][mU][mU][mU][mU][mC][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1280) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fGs][fA][fA][mA][fA][mA][mC][fU][mG][mG][mG][fA][mA][mA][mG][mG][mU][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1281)
1157 SM1405/ASM2028	DP18156P:DP18155G	[mUs][mU][mG][mC][mA][mA][mC][fU][fU][fG][fC][mU][mA][mC][mC][mC][mA][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1282) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fU][fG][mG][fG][mU][mA][fG][mC][mA][mA][fG][mU][mU][mG][mC][mA][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1283)
1163 SM1405/ASM2028	DP18164P:DP18163G	[mCs][mU][mU][mG][mC][mU][mA][fC][fC][fC][fA][mU][mU][mA][mG][mG][mA][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1284) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fU][fC][mC][fU][mA][mA][fU][mG][mG][mG][fU][mA][mG][mC][mA][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1285)
1125 SM1405/ASM2028	DP18110P:DP18109G	[mAs][mU][mG][mA][mA][mA][mG][fA][fC][fA][fA][mA][mG][mG][mU][mG][mG][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1286) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fC][fC][mA][fC][mC][mU][fU][mU][mG][mU][fC][mU][mU][mU][mC][mA][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1287)
2205 SM1405/ASM2028	DP17955P:DP17954G	[mCs][mU][mG][mU][mU][mG][mA][fA][fU][fU][fU][mU][mG][mU][mA][mU][mU][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1216) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fA][fA][mU][fA][mC][mA][fA][mA][mA][mU][fU][mC][mA][mA][mC][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1217)

表 D

SEQ ID NO. 及修飾模式	DP 編號	經修飾之寡核苷酸
0639 SM1405/ASM2028	DP18050P:DP18049G	[mAs][mG][mU][mG][mA][mC][mA][fA][fC][fG][fU][mA][mC][mC][mC][mU][mU][mC][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1288) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fGs][fA][fA][mG][fG][mG][mU][fA][mC][mG][mU][fU][mG][mU][mC][mA][mC][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1289)
0644 SM1405/ASM2028	DP18056P:DP18055G	[mCs][mA][mA][mC][mG][mU][mA][fC][fC][fC][fU][mU][mC][mA][mU][mU][mG][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1220) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fC][fA][mA][fU][mG][mA][fA][mG][mG][mG][fU][mA][mC][mG][mU][mU][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1221)
0729 SM1405/ASM2028	DP18068P:DP18067G	[mAs][mC][mG][mA][mA][mC][mU][fU][fU][fC][fU][mU][mC][mA][mU][mG][mU][mG][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1290) [MePhosphonate-4O-mUs][fCs][fCs][fA][fC][mA][fU][mG][mA][fA][mG][mA][mA][fA][mG][mU][mU][mC][mG][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1291)
0735 SM1405/ASM2028	DP18074P:DP18073G	[mUs][mU][mU][mC][mU][mU][mC][fA][fU][fG][fU][mG][mG][mA][mC][mA][mU][mC][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1292) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fGs][fA][fU][mG][fU][mC][mC][fA][mC][mA][mU][fG][mA][mA][mG][mA][mA][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1293)
0743 SM1405/ASM2028	DP18080P:DP18079G	[mUs][mG][mU][mG][mG][mA][mC][fA][fU][fC][fA][mC][mC][mA][mA][mG][mC][mU][mC][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1294) [MePhosphonate-4O-mUs][fGs][fAs][fG][fC][mU][fU][mG][mG][fU][mG][mA][mU][fG][mU][mC][mC][mA][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1295)
0744 SM1405/ASM2028	DP18082P:DP18081G	[mGs][mU][mG][mG][mA][mC][mA][fU][fC][fA][fC][mC][mA][mA][mG][mC][mU][mC][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1296) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fGs][fA][fG][mC][fU][mU][mG][fG][mU][mG][mA][fU][mG][mU][mC][mC][mA][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1297)
0838 SM1405/ASM2028	DP18086P:DP18085G	[mAs][mG][mA][mU][mA][mU][mG][fC][fC][fU][fU][mC][mG][mA][mG][mG][mA][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1298) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fU][fC][mC][fU][mC][mG][fA][mA][mG][mG][fC][mA][mU][mA][mU][mC][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1299)
1126 SM1405/ASM2028	DP18112P:DP18111G	[mUs][mG][mA][mA][mA][mG][mA][fC][fA][fA][fA][mG][mG][mU][mG][mG][mA][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1224) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fU][fC][mC][fA][mC][mC][fU][mU][mU][mG][fU][mC][mU][mU][mU][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1225)
1143 SM1405/ASM2028	DP18136P:DP18135G	[mUs][mA][mC][mA][mU][mG][mA][fG][fC][fA][fA][mG][mA][mU][mU][mU][mG][mC][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1230) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fGs][fC][fA][mA][fA][mU][mC][fU][mU][mG][mC][fU][mC][mA][mU][mG][mU][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1231)
1147 SM1405/ASM2028	DP18140P:DP18139G	[mUs][mG][mA][mG][mC][mA][mA][fG][fA][fU][fU][mU][mG][mC][mA][mA][mC][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1232) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fG][fU][mU][fG][mC][mA][fA][mA][mU][mC][fU][mU][mG][mC][mU][mC][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1233)
1152 SM1405/ASM2028	DP18150P:DP18149G	[mAs][mA][mG][mA][mU][mU][mU][fG][fC][fA][fA][mC][mU][mU][mG][mC][mU][mA][mC][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1234) [MePhosphonate-4O-mUs][fGs][fUs][fA][fG][mC][fA][mA][mG][fU][mU][mG][mC][fA][mA][mA][mU][mC][mU][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1235)
1173 SM1405/ASM2028	DP18168P:DP18167G	[mAs][mU][mU][mA][mG][mG][mA][fU][fA][fA][fU][mG][mU][mC][mU][mU][mA][mU][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1262) [MePhosphonate-4O-mUs][fCs][fAs][fU][fA][mA][fG][mA][mC][fA][mU][mU][mA][fU][mC][mC][mU][mA][mA][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1263)
1697 SM1405/ASM2028	DP18206P:DP18205G	[mCs][mU][mC][mU][mG][mA][mG][fC][fU][fG][fA][mG][mU][mU][mG][mG][mU][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1254) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fA][fC][mC][fA][mA][mC][fU][mC][mA][mG][fC][mU][mC][mA][mG][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1255)
1699 SM1405/ASM2028	DP17927P:DP17926G	[mCs][mU][mG][mA][mG][mC][mU][fG][fA][fG][fU][mU][mG][mG][mU][mU][mU][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1188) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fA][fA][mA][fC][mC][mA][fA][mC][mU][mC][fA][mG][mC][mU][mC][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1189)
1703 SM1405/ASM2028	DP17929P:DP17928G	[mGs][mC][mU][mG][mA][mG][mU][fU][fG][fG][fU][mU][mU][mU][mA][mU][mG][mA][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1190) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fUs][fC][fA][mU][fA][mA][mA][fA][mC][mC][mA][fA][mC][mU][mC][mA][mG][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1191)
2140 SM1405/ASM2028	DP18272P:DP18271G	[mCs][mU][mU][mU][mU][mU][mC][fA][fC][fC][fU][mA][mA][mC][mU][mA][mA][mA][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1244) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fUs][fU][fU][mA][fG][mU][mU][fA][mG][mG][mU][fG][mA][mA][mA][mA][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1245)
2144 SM1405/ASM2028	DP18276P:DP18275G	[mUs][mU][mC][mA][mC][mC][mU][fA][fA][fC][fU][mA][mA][mA][mA][mU][mA][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1246) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fU][fA][mU][fU][mU][mU][fA][mG][mU][mU][fA][mG][mG][mU][mG][mA][mAs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1247)
2149 SM1405/ASM2028	DP18286P:DP18285G	[mCs][mU][mA][mA][mC][mU][mA][fA][fA][fA][fU][mA][mA][mU][mG][mU][mU][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1250) [MePhosphonate-4O-mUs][fUs][fAs][fA][fA][mC][fA][mU][mU][fA][mU][mU][mU][fU][mA][mG][mU][mU][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1251)
2156 SM1405/ASM2028	DP17939P:DP17938G	[mAs][mA][mA][mU][mA][mA][mU][fG][fU][fU][fU][mA][mA][mA][mG][mA][mG][mU][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1200) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fAs][fC][fU][mC][fU][mU][mU][fA][mA][mA][mC][fA][mU][mU][mA][mU][mU][mUs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1201)
2195 SM1405/ASM2028	DP17949P:DP17948G	[mGs][mC][mG][mU][mU][mG][mU][fU][fA][fC][fC][mU][mG][mU][mU][mG][mA][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1300) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fU][fC][mA][fA][mC][mA][fG][mG][mU][mA][fA][mC][mA][mA][mC][mG][mCs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1301)
2205 SM1405/ASM2028	DP17955P:DP17954G	[mCs][mU][mG][mU][mU][mG][mA][fA][fU][fU][fU][mU][mG][mU][mA][mU][mU][mA][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][ademA-GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC] (SEQ ID NO: 1216) [MePhosphonate-4O-mUs][fAs][fUs][fA][fA][mU][fA][mC][mA][fA][mA][mA][mU][fU][mC][mA][mA][mC][mA][mGs][mGs][mG] (SEQ ID NO: 1217)

當考慮以下具體實施方式時，除上文闡述之那些優點、效應、特徵及目標外之優點、效應、特徵及目標將變得更容易顯而易見。此類具體實施方式提及以下圖式，其中：圖1揭示展示通用GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸之結構及化學修飾模式的示意圖。圖2揭示展示替代通用GalNAc結合之PNPLA3寡核苷酸之結構及化學修飾模式的示意圖。


          <![CDATA[<110> 美商戴瑟納製藥股份有限公司(DICERNA PHARMACEUTICALS, INC.)]]>
          <![CDATA[<120> 用於調節PNPLA3表現之組合物及方法]]>
          <![CDATA[<130> 400930-028(通用)]]>
          <![CDATA[<140> TW111114009]]>
          <![CDATA[<141> 2022-04-13]]>
          <![CDATA[<150> US63/174,932]]>
          <![CDATA[<151> 2021-04-14]]>
          <![CDATA[<160> 1303  ]]>
          <![CDATA[<170> PatentIn version 3.5]]>
          <![CDATA[<210> 1]]>
          <![CDATA[<211> 2753]]>
          <![CDATA[<212> DNA]]>
          <![CDATA[<213> 智人(Homo sapiens)]]>
          <![CDATA[<400> 1]]>
          agagagcgct tgcgggcgcc gggcggagct gctgcggatc aggacccgag ccgattcccg       60
          atcccgaccc agatcctaac ccgcgccccc gccccgccgc cgccgccatg tacgacgcag      120
          agcgcggctg gagcttgtcc ttcgcgggct gcggcttcct gggcttctac cacgtcgggg      180
          cgacccgctg cctgagcgag cacgccccgc acctcctccg cgacgcgcgc atgttgttcg      240
          gcgcttcggc cggggcgttg cactgcgtcg gcgtcctctc cggtatcccg ctggagcaga      300
          ctctgcaggt cctctcagat cttgtgcgga aggccaggag tcggaacatt ggcatcttcc      360
          atccatcctt caacttaagc aagttcctcc gacagggtct ctgcaaatgc ctcccggcca      420
          atgtccacca gctcatctcc ggcaaaatag gcatctctct taccagagtg tctgatgggg      480
          aaaacgttct ggtgtctgac tttcggtcca aagacgaagt cgtggatgcc ttggtatgtt      540
          cctgcttcat ccccttctac agtggcctta tccctccttc cttcagaggc gtgcgatatg      600
          tggatggagg agtgagtgac aacgtaccct tcattgatgc caaaacaacc atcaccgtgt      660
          cccccttcta tggggagtac gacatctgcc ctaaagtcaa gtccacgaac tttcttcatg      720
          tggacatcac caagctcagt ctacgcctct gcacagggaa cctctacctt ctctcgagag      780
          cttttgtccc cccggatctc aaggtgctgg gagagatatg ccttcgagga tatttggatg      840
          cattcaggtt cttggaagag aagggcatct gcaacaggcc ccagccaggc ctgaagtcat      900
          cctcagaagg gatggatcct gaggtcgcca tgcccagctg ggcaaacatg agtctggatt      960
          cttccccgga gtcggctgcc ttggctgtga ggctggaggg agatgagctg ctagaccacc     1020
          tgcgtctcag catcctgccc tgggatgaga gcatcctgga caccctctcg cccaggctcg     1080
          ctacagcact gagtgaagaa atgaaagaca aaggtggata catgagcaag atttgcaact     1140
          tgctacccat taggataatg tcttatgtaa tgctgccctg taccctgcct gtggaatctg     1200
          ccattgcgat tgtccagaga ctggtgacat ggcttccaga tatgcccgac gatgtcctgt     1260
          ggttgcagtg ggtgacctca caggtgttca ctcgagtgct gatgtgtctg ctccccgcct     1320
          ccaggtccca aatgccagtg agcagccaac aggcctcccc atgcacacct gagcaggact     1380
          ggccctgctg gactccctgc tcccccaagg gctgtccagc agagaccaaa gcagaggcca     1440
          ccccgcggtc catcctcagg tccagcctga acttcttctt gggcaataaa gtacctgctg     1500
          gtgctgaggg gctctccacc tttcccagtt tttcactaga gaagagtctg tgagtcactt     1560
          gaggaggcga gtctagcaga ttctttcaga ggtgctaaag tttcccatct ttgtgcagct     1620
          acctccgcat tgctgtgtag tgacccctgc ctgtgacgtg gaggatccca gcctctgagc     1680
          tgagttggtt ttatgaaaag ctaggaagca acctttcgcc tgtgcagcgg tccagcactt     1740
          aactctaata catcagcatg cgttaattca gctggttggg aaatgacacc aggaagccca     1800
          gtgcagaggg tcccttactg actgtttcgt ggccctatta atggtcagac tgttccagca     1860
          tgaggttctt agaatgacag gtgtttggat gggtgggggc cttgtgatgg ggggtaggct     1920
          ggcccatgtg tgatcttgtg gggtggaggg aagagaatag catgatccca cttccccatg     1980
          ctgtgggaag gggtgcagtt cgtccccaag aacgacactg cctgtcaggt ggtctgcaaa     2040
          gatgataacc ttgactacta aaaacgtctc catggcgggg gtaacaagat gataatctac     2100
          ttaattttag aacacctttt tcacctaact aaaataatgt ttaaagagtt ttgtataaaa     2160
          atgtaaggaa gcgttgttac ctgttgaatt ttgtattatg tgaatcagtg agatgttagt     2220
          agaataagcc ttaaaaaaaa aaaaatcggt tgggtgcagt ggcacacggc tgtaatccca     2280
          gcactttggg aggccaaggt tggcagatca cctgaggtca ggagttcaag accagtctgg     2340
          ccaacatagc aaaaccctgt ctctactaaa aatacaaaaa ttatctgggc atggtggtgc     2400
          atgcctgtaa tcccagctat tcggaaggct gaggcaggag aatcacttga acccaggagg     2460
          cggaggttgc ggtgagctga gattgcacca tttcattcca gcctgggcaa catgagtgaa     2520
          agtctgactc aaaaaaaaaa aatttaaaaa acaaaataat ctagtgtgca gggcattcac     2580
          ctcagccccc caggcaggag ccaagcacag caggagcttc cgcctcctct ccactggagc     2640
          acacaacttg aacctggctt attttctgca gggaccagcc ccacatggtc agtgagtttc     2700
          tccccatgtg tggcgatgag agagtgtaga aataaagaca caagacaaag aga            2753
          <![CDATA[<210> 2]]>
          <![CDATA[<211> 481]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人(Homo sapiens)]]>
          <![CDATA[<400> 2]]>
          Met Tyr Asp Ala Glu Arg Gly Trp Ser Leu Ser Phe Ala Gly Cys Gly 
          1               5                   10                  15      
          Phe Leu Gly Phe Tyr His Val Gly Ala Thr Arg Cys Leu Ser Glu His 
                      20                  25                  30          
          Ala Pro His Leu Leu Arg Asp Ala Arg Met Leu Phe Gly Ala Ser Ala 
                  35                  40                  45              
          Gly Ala Leu His Cys Val Gly Val Leu Ser Gly Ile Pro Leu Glu Gln 
              50                  55                  60                  
          Thr Leu Gln Val Leu Ser Asp Leu Val Arg Lys Ala Arg Ser Arg Asn 
          65                  70                  75                  80  
          Ile Gly Ile Phe His Pro Ser Phe Asn Leu Ser Lys Phe Leu Arg Gln 
                          85                  90                  95      
          Gly Leu Cys Lys Cys Leu Pro Ala Asn Val His Gln Leu Ile Ser Gly 
                      100                 105                 110         
          Lys Ile Gly Ile Ser Leu Thr Arg Val Ser Asp Gly Glu Asn Val Leu 
                  115                 120                 125             
          Val Ser Asp Phe Arg Ser Lys Asp Glu Val Val Asp Ala Leu Val Cys 
              130                 135                 140                 
          Ser Cys Phe Ile Pro Phe Tyr Ser Gly Leu Ile Pro Pro Ser Phe Arg 
          145                 150                 155                 160 
          Gly Val Arg Tyr Val Asp Gly Gly Val Ser Asp Asn Val Pro Phe Ile 
                          165                 170                 175     
          Asp Ala Lys Thr Thr Ile Thr Val Ser Pro Phe Tyr Gly Glu Tyr Asp 
                      180                 185                 190         
          Ile Cys Pro Lys Val Lys Ser Thr Asn Phe Leu His Val Asp Ile Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Leu Ser Leu Arg Leu Cys Thr Gly Asn Leu Tyr Leu Leu Ser Arg 
              210                 215                 220                 
          Ala Phe Val Pro Pro Asp Leu Lys Val Leu Gly Glu Ile Cys Leu Arg 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Tyr Leu Asp Ala Phe Arg Phe Leu Glu Glu Lys Gly Ile Cys Asn 
                          245                 250                 255     
          Arg Pro Gln Pro Gly Leu Lys Ser Ser Ser Glu Gly Met Asp Pro Glu 
                      260                 265                 270         
          Val Ala Met Pro Ser Trp Ala Asn Met Ser Leu Asp Ser Ser Pro Glu 
                  275                 280                 285             
          Ser Ala Ala Leu Ala Val Arg Leu Glu Gly Asp Glu Leu Leu Asp His 
              290                 295                 300                 
          Leu Arg Leu Ser Ile Leu Pro Trp Asp Glu Ser Ile Leu Asp Thr Leu 
          305                 310                 315                 320 
          Ser Pro Arg Leu Ala Thr Ala Leu Ser Glu Glu Met Lys Asp Lys Gly 
                          325                 330                 335     
          Gly Tyr Met Ser Lys Ile Cys Asn Leu Leu Pro Ile Arg Ile Met Ser 
                      340                 345                 350         
          Tyr Val Met Leu Pro Cys Thr Leu Pro Val Glu Ser Ala Ile Ala Ile 
                  355                 360                 365             
          Val Gln Arg Leu Val Thr Trp Leu Pro Asp Met Pro Asp Asp Val Leu 
              370                 375                 380                 
          Trp Leu Gln Trp Val Thr Ser Gln Val Phe Thr Arg Val Leu Met Cys 
          385                 390                 395                 400 
          Leu Leu Pro Ala Ser Arg Ser Gln Met Pro Val Ser Ser Gln Gln Ala 
                          405                 410                 415     
          Ser Pro Cys Thr Pro Glu Gln Asp Trp Pro Cys Trp Thr Pro Cys Ser 
                      420                 425                 430         
          Pro Lys Gly Cys Pro Ala Glu Thr Lys Ala Glu Ala Thr Pro Arg Ser 
                  435                 440                 445             
          Ile Leu Arg Ser Ser Leu Asn Phe Phe Leu Gly Asn Lys Val Pro Ala 
              450                 455                 460                 
          Gly Ala Glu Gly Leu Ser Thr Phe Pro Ser Phe Ser Leu Glu Lys Ser 
          465                 470                 475                 480 
          Leu 
          <![CDATA[<210> 3]]>
          <![CDATA[<211> 2753]]>
          <![CDATA[<212> DNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成聚核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 3]]>
          agagagcgct tgcgggcgcc gggcggagct gctgcggatc aggacccgag ccgattcccg       60
          atcccgaccc agatcctaac ccgcgccccc gccccgccgc cgccgccatg tacgacgcag      120
          agcgcggctg gagcttgtcc ttcgcgggct gcggcttcct gggcttctac cacgtcgggg      180
          cgacccgctg cctgagcgag cacgccccgc acctcctccg cgacgcgcgc atgttgttcg      240
          gcgcttcggc cggggcgttg cactgcgtcg gcgtcctctc cggtatcccg ctggagcaga      300
          ctctgcaggt cctctcagat cttgtgcgga aggccaggag tcggaacatt ggcatcttcc      360
          atccatcctt caacttaagc aagttcctcc gacagggtct ctgcaaatgc ctcccggcca      420
          atgtccacca gctcatctcc ggcaaaatag gcatctctct taccagagtg tctgatgggg      480
          aaaacgttct ggtgtctgac tttcggtcca aagacgaagt cgtggatgcc ttggtatgtt      540
          cctgcttcat gcccttctac agtggcctta tccctccttc cttcagaggc gtgcgatatg      600
          tggatggagg agtgagtgac aacgtaccct tcattgatgc caaaacaacc atcaccgtgt      660
          cccccttcta tggggagtac gacatctgcc ctaaagtcaa gtccacgaac tttcttcatg      720
          tggacatcac caagctcagt ctacgcctct gcacagggaa cctctacctt ctctcgagag      780
          cttttgtccc cccggatctc aaggtgctgg gagagatatg ccttcgagga tatttggatg      840
          cattcaggtt cttggaagag aagggcatct gcaacaggcc ccagccaggc ctgaagtcat      900
          cctcagaagg gatggatcct gaggtcgcca tgcccagctg ggcaaacatg agtctggatt      960
          cttccccgga gtcggctgcc ttggctgtga ggctggaggg agatgagctg ctagaccacc     1020
          tgcgtctcag catcctgccc tgggatgaga gcatcctgga caccctctcg cccaggctcg     1080
          ctacagcact gagtgaagaa atgaaagaca aaggtggata catgagcaag atttgcaact     1140
          tgctacccat taggataatg tcttatgtaa tgctgccctg taccctgcct gtggaatctg     1200
          ccattgcgat tgtccagaga ctggtgacat ggcttccaga tatgcccgac gatgtcctgt     1260
          ggttgcagtg ggtgacctca caggtgttca ctcgagtgct gatgtgtctg ctccccgcct     1320
          ccaggtccca aatgccagtg agcagccaac aggcctcccc atgcacacct gagcaggact     1380
          ggccctgctg gactccctgc tcccccaagg gctgtccagc agagaccaaa gcagaggcca     1440
          ccccgcggtc catcctcagg tccagcctga acttcttctt gggcaataaa gtacctgctg     1500
          gtgctgaggg gctctccacc tttcccagtt tttcactaga gaagagtctg tgagtcactt     1560
          gaggaggcga gtctagcaga ttctttcaga ggtgctaaag tttcccatct ttgtgcagct     1620
          acctccgcat tgctgtgtag tgacccctgc ctgtgacgtg gaggatccca gcctctgagc     1680
          tgagttggtt ttatgaaaag ctaggaagca acctttcgcc tgtgcagcgg tccagcactt     1740
          aactctaata catcagcatg cgttaattca gctggttggg aaatgacacc aggaagccca     1800
          gtgcagaggg tcccttactg actgtttcgt ggccctatta atggtcagac tgttccagca     1860
          tgaggttctt agaatgacag gtgtttggat gggtgggggc cttgtgatgg ggggtaggct     1920
          ggcccatgtg tgatcttgtg gggtggaggg aagagaatag catgatccca cttccccatg     1980
          ctgtgggaag gggtgcagtt cgtccccaag aacgacactg cctgtcaggt ggtctgcaaa     2040
          gatgataacc ttgactacta aaaacgtctc catggcgggg gtaacaagat gataatctac     2100
          ttaattttag aacacctttt tcacctaact aaaataatgt ttaaagagtt ttgtataaaa     2160
          atgtaaggaa gcgttgttac ctgttgaatt ttgtattatg tgaatcagtg agatgttagt     2220
          agaataagcc ttaaaaaaaa aaaaatcggt tgggtgcagt ggcacacggc tgtaatccca     2280
          gcactttggg aggccaaggt tggcagatca cctgaggtca ggagttcaag accagtctgg     2340
          ccaacatagc aaaaccctgt ctctactaaa aatacaaaaa ttatctgggc atggtggtgc     2400
          atgcctgtaa tcccagctat tcggaaggct gaggcaggag aatcacttga acccaggagg     2460
          cggaggttgc ggtgagctga gattgcacca tttcattcca gcctgggcaa catgagtgaa     2520
          agtctgactc aaaaaaaaaa aatttaaaaa acaaaataat ctagtgtgca gggcattcac     2580
          ctcagccccc caggcaggag ccaagcacag caggagcttc cgcctcctct ccactggagc     2640
          acacaacttg aacctggctt attttctgca gggaccagcc ccacatggtc agtgagtttc     2700
          tccccatgtg tggcgatgag agagtgtaga aataaagaca caagacaaag aga            2753
          <![CDATA[<210> 4]]>
          <![CDATA[<211> 481]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成多肽]]>
          <![CDATA[<400> 4]]>
          Met Tyr Asp Ala Glu Arg Gly Trp Ser Leu Ser Phe Ala Gly Cys Gly 
          1               5                   10                  15      
          Phe Leu Gly Phe Tyr His Val Gly Ala Thr Arg Cys Leu Ser Glu His 
                      20                  25                  30          
          Ala Pro His Leu Leu Arg Asp Ala Arg Met Leu Phe Gly Ala Ser Ala 
                  35                  40                  45              
          Gly Ala Leu His Cys Val Gly Val Leu Ser Gly Ile Pro Leu Glu Gln 
              50                  55                  60                  
          Thr Leu Gln Val Leu Ser Asp Leu Val Arg Lys Ala Arg Ser Arg Asn 
          65                  70                  75                  80  
          Ile Gly Ile Phe His Pro Ser Phe Asn Leu Ser Lys Phe Leu Arg Gln 
                          85                  90                  95      
          Gly Leu Cys Lys Cys Leu Pro Ala Asn Val His Gln Leu Ile Ser Gly 
                      100                 105                 110         
          Lys Ile Gly Ile Ser Leu Thr Arg Val Ser Asp Gly Glu Asn Val Leu 
                  115                 120                 125             
          Val Ser Asp Phe Arg Ser Lys Asp Glu Val Val Asp Ala Leu Val Cys 
              130                 135                 140                 
          Ser Cys Phe Met Pro Phe Tyr Ser Gly Leu Ile Pro Pro Ser Phe Arg 
          145                 150                 155                 160 
          Gly Val Arg Tyr Val Asp Gly Gly Val Ser Asp Asn Val Pro Phe Ile 
                          165                 170                 175     
          Asp Ala Lys Thr Thr Ile Thr Val Ser Pro Phe Tyr Gly Glu Tyr Asp 
                      180                 185                 190         
          Ile Cys Pro Lys Val Lys Ser Thr Asn Phe Leu His Val Asp Ile Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Leu Ser Leu Arg Leu Cys Thr Gly Asn Leu Tyr Leu Leu Ser Arg 
              210                 215                 220                 
          Ala Phe Val Pro Pro Asp Leu Lys Val Leu Gly Glu Ile Cys Leu Arg 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Tyr Leu Asp Ala Phe Arg Phe Leu Glu Glu Lys Gly Ile Cys Asn 
                          245                 250                 255     
          Arg Pro Gln Pro Gly Leu Lys Ser Ser Ser Glu Gly Met Asp Pro Glu 
                      260                 265                 270         
          Val Ala Met Pro Ser Trp Ala Asn Met Ser Leu Asp Ser Ser Pro Glu 
                  275                 280                 285             
          Ser Ala Ala Leu Ala Val Arg Leu Glu Gly Asp Glu Leu Leu Asp His 
              290                 295                 300                 
          Leu Arg Leu Ser Ile Leu Pro Trp Asp Glu Ser Ile Leu Asp Thr Leu 
          305                 310                 315                 320 
          Ser Pro Arg Leu Ala Thr Ala Leu Ser Glu Glu Met Lys Asp Lys Gly 
                          325                 330                 335     
          Gly Tyr Met Ser Lys Ile Cys Asn Leu Leu Pro Ile Arg Ile Met Ser 
                      340                 345                 350         
          Tyr Val Met Leu Pro Cys Thr Leu Pro Val Glu Ser Ala Ile Ala Ile 
                  355                 360                 365             
          Val Gln Arg Leu Val Thr Trp Leu Pro Asp Met Pro Asp Asp Val Leu 
              370                 375                 380                 
          Trp Leu Gln Trp Val Thr Ser Gln Val Phe Thr Arg Val Leu Met Cys 
          385                 390                 395                 400 
          Leu Leu Pro Ala Ser Arg Ser Gln Met Pro Val Ser Ser Gln Gln Ala 
                          405                 410                 415     
          Ser Pro Cys Thr Pro Glu Gln Asp Trp Pro Cys Trp Thr Pro Cys Ser 
                      420                 425                 430         
          Pro Lys Gly Cys Pro Ala Glu Thr Lys Ala Glu Ala Thr Pro Arg Ser 
                  435                 440                 445             
          Ile Leu Arg Ser Ser Leu Asn Phe Phe Leu Gly Asn Lys Val Pro Ala 
              450                 455                 460                 
          Gly Ala Glu Gly Leu Ser Thr Phe Pro Ser Phe Ser Leu Glu Lys Ser 
          465                 470                 475                 480 
          Leu 
          <![CDATA[<210> 5]]>
          <![CDATA[<211> 2291]]>
          <![CDATA[<212> DNA]]>
          <![CDATA[<213> 食蟹猴(Macaca fascicularis)]]>
          <![CDATA[<400> 5]]>
          cgagggaggc ggggcggacg tcgcgcgtgg aaagcccggg cggagacgcg gcggctgggt       60
          cacgagcgct tgcgggcgcc cggcggagct gctgcggatc aggacccgag ccgatccccg      120
          atcccgactc cgatccggat ccgcgccccc gcccccgccc cgccatgtac gacgccgagc      180
          gcggctggag cttgtccttc gcgggctgcg gcttcctggg cttctaccac gtcggggcga      240
          cccggtgcct gagcgagcac gccccgcacc tcctccgcga cgcgcgcatg ttgttcggcg      300
          cctcggccgg ggcgttgcac tgcgtcggcg tcctctccgg gatcccgctg gagcagactc      360
          tgcaggtcct ctcagatctt gtccggaagg ccaggagtcg gaacattggt atcttccatc      420
          catccttcaa cataggcaag ttcctccgac aggatctcta caaatacctc ccggccaatg      480
          tccaccagct catctctggc aaaatatgcg tctcactcac cagagtgtct gatggggaaa      540
          acgttctggt gtctgacttt cagtccaaag acgaagtcgt ggatgccttg atttgttcct      600
          gcttcatccc tttctacagt ggccttatcc ctccttcctt cagaggcgtg cgatatgtgg      660
          atggaggagc gagtgacaac gtacccttca ttgatgccaa gacaaccatc accgtgtcgc      720
          ccttctatgg ggagtacgac atctgcccta aagtcaagtc caccaacttt cttcatgtgg      780
          acatcaccaa gctcagccta cgcctctgca cagggaacct ctaccttctc tcaagagcgt      840
          ttgtcccccc ggatctcaag gtgctgggag agatatgcct tcgaggatat ttggacgcgt      900
          tcaggttctt ggaagagaag ggcatctgca acaagcccca gcggggtctg aagtcatcct      960
          cagaagggat ggattctgag gtcactgcgc ccggctggga aaacacaagt ctggattctt     1020
          ccccggagcc ggctgccttg gctatgaggc tggatggaga tgagctgcta gaccacctgc     1080
          gtctcagcat cctgccctgg gatgagagca tcctggacac cctgtcgccc gagctcgcta     1140
          cagtgagtga agcaatgaaa gacaaaggtg gatacatgag caagatttgc aacttgctac     1200
          ccattaggat aatatcttat gtgatgctgc cctgtaccct gcctgtggag tctgccattg     1260
          cgattgtcca gagactggtg acatggcttc cagatatgcc cgacgatgtg cagtggctgc     1320
          agtgggtgac ctcacaggtc ttcactcgag cgctgatgtg tctgcttccc gcctccaggt     1380
          cccaaatgcc agtgagcagc gaacaggcct ccccatgcaa accggagcag gactggcact     1440
          gctggactcc ctgctccccc gaggactgtc ctgcagaggc caaagcagag gctaccccac     1500
          ggtccatcct caggtccagc ctgaacttct tctggggcaa taaagtacct gctggtgctg     1560
          aggggctctc cacctttccc agtttttcac tggagaagaa tttgtgagtc atttgaggag     1620
          gcgagtctag gagattcttt cagaggtgct aaagcttccc atctttgtgc agctacctcc     1680
          gcattgccgt gtagtgaccc ctgcctgtga cgtggaggat cccagcctct gagctgagtt     1740
          ggttttatga aaagctagga agcaatgttt ggtctgtgca gcagtccagc acttaagtct     1800
          aatacgtcag catgcgttag ttcagctggt tgggaaatga caccgggaag cctagcgcag     1860
          agggtccctt actgactatt tcatggtcct attaatggtc agactgttcc agtgtgaggt     1920
          tcttagaatg actagtgttt ggatgggtgg gggccttgtg gtggggggtg ggctggccta     1980
          tgtgtgatct tgtggggtgg aaggaagaga gtagcacaat cccacctccc catgccgtgg     2040
          gaaggggtgc acttggttcc caagaaggac actgcctgtc aggtggcctg caaatataat     2100
          aaccttgaca actaaaaacc tctccatggg ggtgggaggt accaagataa taaccgattt     2160
          acattttaga gcaccttttt cacctaacta aaataatgtt taaagagttt tatataaaaa     2220
          tgtaaggaag agttgttatc tgttgaattt tgtattatat gaatcagtga gatgttaata     2280
          gaataagcct t                                                          2291
          <![CDATA[<210> 6]]>
          <![CDATA[<211> 480]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 食蟹猴(Macaca fascicularis)]]>
          <![CDATA[<400> 6]]>
          Met Tyr Asp Ala Glu Arg Gly Trp Ser Leu Ser Phe Ala Gly Cys Gly 
          1               5                   10                  15      
          Phe Leu Gly Phe Tyr His Val Gly Ala Thr Arg Cys Leu Ser Glu His 
                      20                  25                  30          
          Ala Pro His Leu Leu Arg Asp Ala Arg Met Leu Phe Gly Ala Ser Ala 
                  35                  40                  45              
          Gly Ala Leu His Cys Val Gly Val Leu Ser Gly Ile Pro Leu Glu Gln 
              50                  55                  60                  
          Thr Leu Gln Val Leu Ser Asp Leu Val Arg Lys Ala Arg Ser Arg Asn 
          65                  70                  75                  80  
          Ile Gly Ile Phe His Pro Ser Phe Asn Ile Gly Lys Phe Leu Arg Gln 
                          85                  90                  95      
          Asp Leu Tyr Lys Tyr Leu Pro Ala Asn Val His Gln Leu Ile Ser Gly 
                      100                 105                 110         
          Lys Ile Cys Val Ser Leu Thr Arg Val Ser Asp Gly Glu Asn Val Leu 
                  115                 120                 125             
          Val Ser Asp Phe Gln Ser Lys Asp Glu Val Val Asp Ala Leu Ile Cys 
              130                 135                 140                 
          Ser Cys Phe Ile Pro Phe Tyr Ser Gly Leu Ile Pro Pro Ser Phe Arg 
          145                 150                 155                 160 
          Gly Val Arg Tyr Val Asp Gly Gly Ala Ser Asp Asn Val Pro Phe Ile 
                          165                 170                 175     
          Asp Ala Lys Thr Thr Ile Thr Val Ser Pro Phe Tyr Gly Glu Tyr Asp 
                      180                 185                 190         
          Ile Cys Pro Lys Val Lys Ser Thr Asn Phe Leu His Val Asp Ile Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Leu Ser Leu Arg Leu Cys Thr Gly Asn Leu Tyr Leu Leu Ser Arg 
              210                 215                 220                 
          Ala Phe Val Pro Pro Asp Leu Lys Val Leu Gly Glu Ile Cys Leu Arg 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Tyr Leu Asp Ala Phe Arg Phe Leu Glu Glu Lys Gly Ile Cys Asn 
                          245                 250                 255     
          Lys Pro Gln Arg Gly Leu Lys Ser Ser Ser Glu Gly Met Asp Ser Glu 
                      260                 265                 270         
          Val Thr Ala Pro Gly Trp Glu Asn Thr Ser Leu Asp Ser Ser Pro Glu 
                  275                 280                 285             
          Pro Ala Ala Leu Ala Met Arg Leu Asp Gly Asp Glu Leu Leu Asp His 
              290                 295                 300                 
          Leu Arg Leu Ser Ile Leu Pro Trp Asp Glu Ser Ile Leu Asp Thr Leu 
          305                 310                 315                 320 
          Ser Pro Glu Leu Ala Thr Val Ser Glu Ala Met Lys Asp Lys Gly Gly 
                          325                 330                 335     
          Tyr Met Ser Lys Ile Cys Asn Leu Leu Pro Ile Arg Ile Ile Ser Tyr 
                      340                 345                 350         
          Val Met Leu Pro Cys Thr Leu Pro Val Glu Ser Ala Ile Ala Ile Val 
                  355                 360                 365             
          Gln Arg Leu Val Thr Trp Leu Pro Asp Met Pro Asp Asp Val Gln Trp 
              370                 375                 380                 
          Leu Gln Trp Val Thr Ser Gln Val Phe Thr Arg Ala Leu Met Cys Leu 
          385                 390                 395                 400 
          Leu Pro Ala Ser Arg Ser Gln Met Pro Val Ser Ser Glu Gln Ala Ser 
                          405                 410                 415     
          Pro Cys Lys Pro Glu Gln Asp Trp His Cys Trp Thr Pro Cys Ser Pro 
                      420                 425                 430         
          Glu Asp Cys Pro Ala Glu Ala Lys Ala Glu Ala Thr Pro Arg Ser Ile 
                  435                 440                 445             
          Leu Arg Ser Ser Leu Asn Phe Phe Trp Gly Asn Lys Val Pro Ala Gly 
              450                 455                 460                 
          Ala Glu Gly Leu Ser Thr Phe Pro Ser Phe Ser Leu Glu Lys Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          <![CDATA[<210> 7]]>
          <![CDATA[<211> 4675]]>
          <![CDATA[<212> DNA]]>
          <![CDATA[<213> 小家鼠(Mus musculus)]]>
          <![CDATA[<400> 7]]>
          cacccgaaga cagcttaggc ggctgcggct ctttaagctc agagcagcaa caccgggagc       60
          agagctgaac tgcagcgccg cccggagctt caagcaccat gtatgaccca gagcgccgct      120
          ggagcctgtc gtttgcaggc tgcggcttcc tgggcttcta ccacgtcggg gctacgctat      180
          gtctgagcga gcgcgccccg cacctcctcc gcgatgcgcg cactttcttt ggctgctcgg      240
          ccggtgcact gcacgcggtc accttcgtgt gcagtctccc tctcggtgcg tccacggcca      300
          ctacccaggc cccgcgtgcg gggaggggtt gctacacctg gggaatcggt aacactttcc      360
          ggggtgcccg aagaaacctg tccggagagc tctcatcctt cccggtgccg ttgagcactc      420
          agctggagac cctgggcctg tcacctggcg tgggatttcc cggggccggc tggagcagac      480
          gcgctccgag catcttcttc ctgacccgct ctggcgccct ggtcctgtca gctgggtcat      540
          ccctgagcag cagggaacga cgcaggtttg ccgggtcctc tggtccctga gccgcagaag      600
          gccgtataat ggagatcctc atggacctcg tgcggaaagc caggagccgc aacatcggca      660
          ccctccaccc gttcttcaac attaacaagt gcatcagaga cgggctccag gagagcctcc      720
          cagacaatgt ccaccaggtc atttctggca aggttcacat ctcactcacc agggtgtcgg      780
          atggggagaa cgtgctggtg tctgagttcc attccaaaga cgaagtcgtg gatgccctgg      840
          tgtgttcctg cttcattccc ctcttctctg gcctaatccc tccttccttc cgaggcgagc      900
          ggtacgtgga cggaggagtg agcgacaacg tccctgtgct ggatgccaaa accaccatca      960
          cggtgtcacc tttctacggt gagcatgaca tctgccccaa agtcaagtcc accaacttct     1020
          tccacgtgaa tatcaccaac ctcagcctcc gcctctgcac tgggaacctc caacttctga     1080
          ccagagcgct cttcccgtct gatgtgaagg tgatgggaga gctgtgctat caagggtacc     1140
          tggacgcctt ccggttcctg gaggagaatg gcatctgtaa cgggccacag cgcagcctga     1200
          gtctgtcctt ggtggcgcca gaagcctgct tggaaaatgg caaacttgtg ggagacaagg     1260
          tgccagtcag cctatgcttt acagatgaga acatctggga gacactgtcc cccgagctca     1320
          gcacagctct gagtgaagcg attaaggaca gggagggcta cctgagcaaa gtctgcaacc     1380
          tcctgcccgt caggatcctg tcctacatca tgctgccctg cagtctgccc gtggagtcgg     1440
          ctatcgctgc agtccacagg ctggtgacat ggctccctga tatccaggat gatatccagt     1500
          ggctacaatg ggcgacatcc caggtttgtg cccgaatgac gatgtgcctg ctcccctcta     1560
          ccagcatgag attcctggga caatcccaat tccttggcct ccattgtatc aaagggctga     1620
          aaaccaaagg gaaggcacag ctgtctcttc agcatgcctc ttctgccaga accactgcaa     1680
          ggtttggtgc tcaggctgtg caaacattct agcaatgttt gactcagtgt caagcaggtg     1740
          acaaggaaca tggtgctgtg tggggggaac ccatggccca ggtgagggct tattggtggg     1800
          tgaagctgtg ggtgttcagg tggtggagaa ggccttaagg gatgggactg acacctcagc     1860
          actgaaggca ggaggaagct gtggctctgg gttgcacccc tgcctggctc caccctctct     1920
          ggcatctgta gaagttacag ctggttcttc ctctcagccc catgctccca gaaataagac     1980
          tcagacccaa attatagtta caaatacctt ggccatatag ctaggctctt ctcagactag     2040
          ctcataactt aactcattaa ttttaacctc catcctgcca catggctggt ggcctgtgct     2100
          caggtaccat gagtccagct cttcacatct ttccggatga atcttccata attctttctg     2160
          cctcctggat gttccacctt ctattccacc ttttcctata ggccatggtt ttgtttttgt     2220
          tttttttttc caaatttaat ttaattaatt aatttattta tttttggttt ttcgagacag     2280
          ggtttctctg tatcgccctg gctgtcctgg aactcactat gtaagccagg ctggcctcaa     2340
          actcagaaat ccgcctgcct ctgcctcctg agtgctggga ttaaaggcgt gcgcaaccat     2400
          gcccggtgtg gttttttttt ttttttaatt gacaggtgga tgcatctata taatccataa     2460
          catattctct ctacaggtat ctattaggtt ttgggtgagg tgtggagttc tagggaactc     2520
          tgagagaaat tcctggggag taagtggttt atcaagttga ttggaggagt ttttaatgct     2580
          atggacagac agacagaagg acaacagcat agtcggggct accagggagt tcaggccccg     2640
          gcatcggaga tagaagcagg atggggtctt tgaagagatt ctgagcccac acagcagagg     2700
          agggactctc tctttagagc ttttgaggat gagggaggtt gactgcaaga gcctacagcc     2760
          aggctcgagg caggcagggg gtggggagca ggatgtaaac cccttcgatg ctgacagact     2820
          cacttctggg gtaaaatatt atgagatgcc tgtcagtgtc tgtgaagaga cctgagcaga     2880
          gtctggattc tgacatcaat catgttctta caatactgaa gacctgagag cctgcaatct     2940
          tggtttgtaa attgctggtc tccgtgcttc cagtgaactt ggacattctt ctcatggttg     3000
          gtccaggaga ggccaaagct gagggcaccc tgccttccac ccccagtcca gcttgacctt     3060
          ttatctggag caacagtgtc tagatgatgg gtgggtgagg ggtgctatac tgtctgtccc     3120
          tctgggaagg gttctgttac ttttggaggc agctaggaag tttctctgtg cagctgcccc     3180
          ctggtgctgt gtggtgacct cattgcctgt gaccccagga tcacaggatc tgggctaaag     3240
          tggtagtcca tagaaaccaa agacaatgat ttggtgttta gaaagctact cttggtctgg     3300
          gtgaagtctg gtgcttaagg gctatcacaa agagcgtgtc aaaccatctc tcagcctgtg     3360
          agtcagtggg gagcccaagg gcatcagtgt ttggaaactg gaatccaaac cgggcaatct     3420
          cggaaggaaa ctgtttagga attgtgatgg gacgggccgt ggctgtctct gaaaagggcc     3480
          tgccagataa cttattactt ttaaggacac ctttggctct tactaattta taaagcattt     3540
          tatataaaca caccagggag tgcatggtga actacacgta tgatcagtta agtggggcta     3600
          gaattaggta gggagagcat cggacctctg cctcctcaac ctcaacttgc ttgctttctc     3660
          cactggctcc aaatctttgt atagtcatca gccatgacca cctctctccc tccccatcta     3720
          ctaccagcag cgttaatggg aataagtacc cacttctctc aggtgtacta tacagctgtg     3780
          ggtgtggtgt gtgtttcctg taattcacac tttagaaagg aaacaagcaa acaaaagaaa     3840
          ccaggtgctg cccatactcc taagtgtaga cagtgaaggt gtgtgtctcc catgcctgag     3900
          tctcctggag gcctagtgag ctccaggttc atgcaagcac atcaggagga atcatataat     3960
          ctcagcacgg ttgatccaga tgggataaga aaggactctg ggagagagaa tgtggttcta     4020
          gagacaaagt gtctaggcta cacagaagat aagactgtcc caaggaaaga aaagaaacca     4080
          ggaactaggg tgcagctcag ttgtcagagg acttctctag gcttgaagcc cagagtccaa     4140
          tctcagcacc ttataaactg tggagtgaca ggcagtgaca tcggcctgta atcccaacac     4200
          tcaagcagta gaggcaagag gatcataagt tcaaggtctt ccttggctat ttagggagtt     4260
          ggaggttagc tctggctaca tgagaccctg tctcaaaaaa aaaaaaaaaa aaaagtagaa     4320
          acttctgcct tgctttgagc tgcccctttc tggacgtttc tcatcagtag agaatattcc     4380
          tgccacccta tcagacaaaa ctcccactgg tttggagtct ctccattctc aggaacacct     4440
          caggagtcag acagtgagca gcagggagca atgtcttgac ttgtaagccc cttagcaagg     4500
          ctggttcatt tgtttattaa aagcaggtgt gggtgaattt atgcaaatga gtatgcaaac     4560
          tagtggaaca gcagaaggat tgaatggata caccaaaaat aaccacaact gtttaaggga     4620
          aaagggtcca taataaatgt ggggaacaaa aaacaaataa atgtgatttt tttta          4675
          <![CDATA[<210> 8]]>
          <![CDATA[<211> 367]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 小家鼠(Mus musculus)]]>
          <![CDATA[<400> 8]]>
          Met Glu Ile Leu Met Asp Leu Val Arg Lys Ala Arg Ser Arg Asn Ile 
          1               5                   10                  15      
          Gly Thr Leu His Pro Phe Phe Asn Ile Asn Lys Cys Ile Arg Asp Gly 
                      20                  25                  30          
          Leu Gln Glu Ser Leu Pro Asp Asn Val His Gln Val Ile Ser Gly Lys 
                  35                  40                  45              
          Val His Ile Ser Leu Thr Arg Val Ser Asp Gly Glu Asn Val Leu Val 
              50                  55                  60                  
          Ser Glu Phe His Ser Lys Asp Glu Val Val Asp Ala Leu Val Cys Ser 
          65                  70                  75                  80  
          Cys Phe Ile Pro Leu Phe Ser Gly Leu Ile Pro Pro Ser Phe Arg Gly 
                          85                  90                  95      
          Glu Arg Tyr Val Asp Gly Gly Val Ser Asp Asn Val Pro Val Leu Asp 
                      100                 105                 110         
          Ala Lys Thr Thr Ile Thr Val Ser Pro Phe Tyr Gly Glu His Asp Ile 
                  115                 120                 125             
          Cys Pro Lys Val Lys Ser Thr Asn Phe Phe His Val Asn Ile Thr Asn 
              130                 135                 140                 
          Leu Ser Leu Arg Leu Cys Thr Gly Asn Leu Gln Leu Leu Thr Arg Ala 
          145                 150                 155                 160 
          Leu Phe Pro Ser Asp Val Lys Val Met Gly Glu Leu Cys Tyr Gln Gly 
                          165                 170                 175     
          Tyr Leu Asp Ala Phe Arg Phe Leu Glu Glu Asn Gly Ile Cys Asn Gly 
                      180                 185                 190         
          Pro Gln Arg Ser Leu Ser Leu Ser Leu Val Ala Pro Glu Ala Cys Leu 
                  195                 200                 205             
          Glu Asn Gly Lys Leu Val Gly Asp Lys Val Pro Val Ser Leu Cys Phe 
              210                 215                 220                 
          Thr Asp Glu Asn Ile Trp Glu Thr Leu Ser Pro Glu Leu Ser Thr Ala 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Ser Glu Ala Ile Lys Asp Arg Glu Gly Tyr Leu Ser Lys Val Cys 
                          245                 250                 255     
          Asn Leu Leu Pro Val Arg Ile Leu Ser Tyr Ile Met Leu Pro Cys Ser 
                      260                 265                 270         
          Leu Pro Val Glu Ser Ala Ile Ala Ala Val His Arg Leu Val Thr Trp 
                  275                 280                 285             
          Leu Pro Asp Ile Gln Asp Asp Ile Gln Trp Leu Gln Trp Ala Thr Ser 
              290                 295                 300                 
          Gln Val Cys Ala Arg Met Thr Met Cys Leu Leu Pro Ser Thr Ser Met 
          305                 310                 315                 320 
          Arg Phe Leu Gly Gln Ser Gln Phe Leu Gly Leu His Cys Ile Lys Gly 
                          325                 330                 335     
          Leu Lys Thr Lys Gly Lys Ala Gln Leu Ser Leu Gln His Ala Ser Ser 
                      340                 345                 350         
          Ala Arg Thr Thr Ala Arg Phe Gly Ala Gln Ala Val Gln Thr Phe 
                  355                 360                 365         
          <![CDATA[<210> 9]]>
          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 9]]>
          ucugcagguc cucucagauc uugug                                             25
          <![CDATA[<210> 10]]>
          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 10]]>
          cacaagaucu gagaggaccu gcagagu                                           27
          <![CDATA[<210> 11]]>
          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 11]]>
          agguccucuc agaucuugug cggaa                                             25
          <![CDATA[<210> 12]]>
          <![CDATA[<211> ]]>27
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 12]]>
          uuccgcacaa gaucugagag gaccugc                                           27
          <![CDATA[<210> 13]]>
          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 13]]>
          auuggcaucu uccauccauc cuuca                                             25
          <![CDATA[<210> 14]]>
          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 14]]>
          ugaaggaugg auggaagaug ccaaugu                                           27
          <![CDATA[<210> 15]]>
          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 15]]>
          aucuuccauc cauccuucaa cuuaa                                             25
          <![CDATA[<210> 16]]>
          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Arti]]>ficial Sequence)
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400>]]> 16
          uuaaguugaa ggauggaugg aagaugc                                           27
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          ucuuccaucc auccuucaac uuaag                                             25
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          cuuaaguuga aggauggaug gaagaug                                           27
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          uguuuuggca ucaaugaagg guacguu                                           27
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          gaugccaaaa caaccaucac cgugu                                             25
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          cuugacuuua gggcagaugu cguacuc                                           27
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          <![CDATA[<400> 99]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          acaugaagaa aguucgugga cuugacu                                           27
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          <![CDATA[<220>]]>
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          cacaugaaga aaguucgugg acuugac                                           27
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          ccacgaacuu ucuucaugug gacau                                             25
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          <br/>
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          ggugaugucc acaugaagaa aguucgu                                           27
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          auauccucga aggcauaucu cucccag                                           27
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          aagucauccu cagaagggau ggauc                                             25
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          <![CDATA[<220>]]>
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          gauccauccc uucugaggau gacuuca                                           27
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          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          gucauccuca gaagggaugg auccu                                             25
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          <![CDATA[<211> 27]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 182]]>
          aggauccauc ccuucugagg augacuu                                           27
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          cauccucaga agggauggau ccuga                                             25
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          agugaagaaa ugaaagacaa aggug                                             25
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          auuaugugaa ucagugagau guuag                                             25
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          cuaacaucuc acugauucac auaauac                                           27
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          uuaugugaau cagugagaug uuagu                                             25
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 588]]>
          cuguacucaa augcauaaau agaaaaa                                           27
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 597]]>
          cucaaacugu uaaauguugg aaaag                                             25
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 599]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
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          ucuuuuccaa cauuuaacag uuugagc                                           27
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 601]]>
          caaacuguua aauguuggaa aagaa                                             25
          <![CDATA[<210> 602]]>
          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
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          uucuuuucca acauuuaaca guuugag                                           27
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          aaacuguuaa auguuggaaa agaaa                                             25
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          uuucuuuucc aacauuuaac aguuuga                                           27
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          aacuguuaaa uguuggaaaa gaaag                                             25
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          cucauuauuu ucacaaguag ccucuuu                                           27
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          gaggcuacuu gugaaaauaa ugagc                                             25
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          <![CDATA[<220>]]>
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          gcucauuauu uucacaagua gccucuu                                           27
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          ggcuacuugu gaaaauaaug agccc                                             25
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          <![CDATA[<220>]]>
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          gggcucauua uuuucacaag uagccuc                                           27
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          <![CDATA[<220>]]>
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          cuacuuguga aaauaaugag ccccc                                             25
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          ugaaccugcc uucuuacauc uugag                                             25
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          cucaagaugu aagaaggcag guucaaa                                           27
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          aaaguuacaa guuucuuuuc ccaag                                             25
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          cuugggaaaa gaaacuugua acuuucc                                           27
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          <![CDATA[<212> DNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 645]]>
          aaguuacaag uuucuuuucc caagt                                             25
          <![CDATA[<210> 646]]>
          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 646]]>
          acuugggaaa agaaacuugu aacuuuc                                           27
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          <![CDATA[<212> DNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 組合DNA/RNA分子之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 647]]>
          aguuacaagu uucuuuuccc aagtt                                             25
          <![CDATA[<210> 648]]>
          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 648]]>
          aacuugggaa aagaaacuug uaacuuu                                           27
          <![CDATA[<210> 649]]>
          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> DNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 組合DNA/RNA分子之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 649]]>
          aguuucuuuu cccaaguuuc ccagt                                             25
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          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          acugggaaac uugggaaaag aaacuug                                           27
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          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> DNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 組合DNA/RNA分子之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 651]]>
          caacaguauu uucuaauaac cagta                                             25
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          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 652]]>
          uacugguuau uagaaaauac uguuggc                                           27
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          <![CDATA[<212> DNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 組合DNA/RNA分子之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 653]]>
          aacaguauuu ucuaauaacc aguat                                             25
          <![CDATA[<210> 654]]>
          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 654]]>
          auacugguua uuagaaaaua cuguugg                                           27
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          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> DNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 組合DNA/RNA分子之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 655]]>
          acaguauuuu cuaauaacca guata                                             25
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          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 656]]>
          uauacugguu auuagaaaau acuguug                                           27
          <![CDATA[<21]]>0> 657]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;211&gt; 25]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;212&gt; DNA]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;213&gt; 人工序列(Artificial Sequence)]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt; 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt; 組合DNA/RNA分子之描述：合成寡核苷酸]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;400&gt; 657]]&gt;
          <br/><![CDATA[caguauuuuc uaauaaccag uauat                                             25
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 659]]>
          uugugauugu uaucaggaaa aaata                                             25
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          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 660]]>
          uauuuuuucc ugauaacaau cacaaua                                           27
          <![CDATA[<210> 661]]>
          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> DNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 661]]>
          ugugauuguu aucaggaaaa aauat                                             25
          <![CDATA[<210> 662]]>
          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 662]]>
          auauuuuuuc cugauaacaa ucacaau                                           27
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 663]]>
          gugauuguua ucaggaaaaa auata                                             25
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          uauauuuuuu ccugauaaca aucacaa                                           27
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          ugauuguuau caggaaaaaa uauat                                             25
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          auauauuuuu uccugauaac aaucaca                                           27
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          aauauauuuu uuccugauaa caaucac                                           27
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          uguuaucagg aaaaaauaua uuaaa                                             25
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          <![CDATA[<220>]]>
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          cuaucagcca uuuaauauau uuuuucc                                           27
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          <![CDATA[<220>]]>
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          aauuuuuaaa agcagaaaga aaauacg                                           27
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          auuuucuuuc ugcuuuuaaa aauta                                             25
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          ugaauaauuu uuaaaagcag aaagaaa                                           27
          <![CDATA[<210> 697]]>
          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 697]]>
          cuuucugcuu uuaaaaauua uucag                                             25
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          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 698]]>
          cugaauaauu uuuaaaagca gaaagaa                                           27
          <![CDATA[<210> 699]]>
          <![CDATA[<211> 25]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 699]]>
          uuucugcuuu uaaaaauuau ucagg                                             25
          <![CDATA[<210> 700]]>
          <![CDATA[<211> 27]]>
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          ccugaauaau uuuuaaaagc agaaaga                                           27
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          <![CDATA[<220>]]>
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          cuacuaaaaa cacaaaaauu agcca                                             25
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          uggcuaauuu uuguguuuuu aguagag                                           27
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          uacacuuccu gauuuccuua ucuugau                                           27
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          aagauaagga aaucaggaag uguaa                                             25
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          gauaaggaaa ucaggaagug uaata                                             25
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<212> DNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 713]]>
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          <![CDATA[<211> 27]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 714]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 715]]>
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          <![CDATA[<400> 716]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 781]]>
          agugacaacg uacccuucaa gcagccgaaa ggcugc                                 36
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 782]]>
          uugaagggua cguugucacu gg                                                22
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序]]>列之描述：合成寡核苷酸
          <![CDATA[<400> 783]]>
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          <![CDATA[<211> 22]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
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          uaaugaaggg uacguuguca gg                                                22
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          <![CDATA[<400> 785]]>
          gacaacguac ccuucauuga gcagccgaaa ggcugc                                 36
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          uucuuuucca acauuuaaca gg                                                22
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          uaaaaaacua gcugggugug gg                                                22
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 1151]]>
          cuaggauuac aggugugaga gcagccgaaa ggcugc                                 36
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
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          ucucacaccu guaauccuag gg                                                22
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          <![CDATA[<211> 36]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          agaguaugag ccugauuuua gcagccgaaa ggcugc                                 36
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          uaaaaucagg cucauacucu gg                                                22
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          gaguaugagc cugauuuuga gcagccgaaa ggcugc                                 36
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          ucaaaaucag gcucauacuc gg                                                22
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          uauuuuuuag uagagauggg gg                                                22
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          uauuuucuca ugcugaaagu gg                                                22
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          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡]]>核苷酸
          <![CDATA[<400> 1282]]>
          uugcaacuug cuacccauua gcagccgaaa ggcugc                                 36
          <![CDATA[<210> 1283]]>
          <![CDATA[<211> 22]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1283]]>
          uaauggguag caaguugcaa gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1284]]>
          <![CDATA[<211> 36]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 1284]]>
          cuugcuaccc auuaggauaa gcagccgaaa ggcugc                                 36
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 1285]]>
          uuauccuaau ggguagcaag gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1286]]>
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          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<400> 1286]]>
          augaaagaca aagguggaua gcagccgaaa ggcugc                                 36
          <![CDATA[<210> 128]]>7
          <![CDATA[<211> 22]]>
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          <![CDATA[<400> 1287]]>
          uauccaccuu ugucuuucau gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1288]]>
          <![CDATA[<211> 36]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1288]]>
          agugacaacg uacccuucaa gcagccgaaa ggcugc                                 36
          <![CDATA[<210> 1289]]>
          <![CDATA[<211> 22]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 1289]]>
          uugaagggua cguugucacu gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1290]]>
          <![CDATA[<211> 36]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 1290]]>
          acgaacuuuc uucaugugga gcagccgaaa ggcugc                                 36
          <![CDATA[<210> 1291]]>
          <![CDATA[<211> 22]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> ]]>人工序列之描述：合成寡核苷酸
          <![CDATA[<400> 1291]]>
          uccacaugaa gaaaguucgu gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1292]]>
          <![CDATA[<211> 36]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1292]]>
          uuucuucaug uggacaucaa gcagccgaaa ggcugc                                 36
          <![CDATA[<210> 1293]]>
          <![CDATA[<211> 22]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1293]]>
          uugaugucca caugaagaaa gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1294]]>
          <![CDATA[<211> 36]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1294]]>
          uguggacauc accaagcuca gcagccgaaa ggcugc                                 36
          <![CDATA[<210> 1295]]>
          <![CDATA[<211> 22]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1295]]>
          ugagcuuggu gauguccaca gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1296]]>
          <![CDATA[<211> 36]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1296]]>
          guggacauca ccaagcucaa gcagccgaaa ggcugc                                 36
          <![CDATA[<210> 1297]]>
          <![CDATA[<211> 22]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1297]]>
          uugagcuugg ugauguccac gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1298]]>
          <![CDATA[<211> 36]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1298]]>
          agauaugccu ucgaggauaa gcagccgaaa ggcugc                                 36
          <![CDATA[<210> 1299]]>
          <![CDATA[<211> 22]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1299]]>
          uuauccucga aggcauaucu gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1300]]>
          <![CDATA[<211> 36]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1300]]>
          gcguuguuac cuguugaaua gcagccgaaa ggcugc                                 36
          <![CDATA[<210> 1301]]>
          <![CDATA[<211> 22]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<400> 1301]]>
          uauucaacag guaacaacgc gg                                                22
          <![CDATA[<210> 1302]]>
          <![CDATA[<211> 58]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 經修飾之堿基]]>
          <![CDATA[<222> (1)..(19)]]>
          <![CDATA[<223> a、c、u、g未知或其他]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 經修飾之堿基]]>
          <![CDATA[<222> (38)..(56)]]>
          <![CDATA[<223> a、c、u、g未知或其他]]>
          <![CDATA[<400> 1302]]>
          nnnnnnnnnn nnnnnnnnna gcagccgaaa ggcugcunnn nnnnnnnnnn nnnnnngg         58
          <![CDATA[<210> 1303]]>
          <![CDATA[<211> 36]]>
          <![CDATA[<212> RNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223> 人工序列之描述：合成寡核苷酸]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 經修飾之堿基]]>
          <![CDATA[<222> (1)..(19)]]>
          <![CDATA[<223> a、c、u、g未知或其他]]>
          <![CDATA[<400> 1303]]>
          nnnnnnnnnn nnnnnnnnna gcagccgaaa ggcugc                                 36

Claims

一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含有義股及反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為至少15個連續核苷酸。
如請求項1之RNAi寡核苷酸，其中該有義股之長度為15至50個核苷酸。
如請求項1或2之RNAi寡核苷酸，其中該有義股之長度為18至36個核苷酸。
如請求項1或2之RNAi寡核苷酸，其中該反義股之長度為15至30個核苷酸。
如請求項1或2之RNAi寡核苷酸，其中該反義股之長度為22個核苷酸，且其中該反義股及該有義股形成長度為至少19個核苷酸、視情況長度為至少20個核苷酸之雙鏈體區域。
如請求項1或2之RNAi寡核苷酸，其中該具互補性之區域之長度為至少19個連續核苷酸，視情況長度為至少20個核苷酸。
如請求項1或2之RNAi寡核苷酸，其中該有義股之3'端包含闡述為S1-L-S2之莖-環，其中S1與S2具互補性，且其中L形成在S1與S2之間長度為3至5個核苷酸之環。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含長度為15至50個核苷酸之有義股及反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中該其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為至少15個連續核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含長度為15至50個核苷酸之有義股及長度為15至30個核苷酸之反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為至少15個連續核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含長度為15至50個核苷酸之有義股及反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為19個連續核苷酸，視情況長度為20個核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含長度為18至36個核苷酸之有義股及反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為19個連續核苷酸，視情況長度為20個核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含長度為18至36個核苷酸之有義股及長度為22個核苷酸之反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為19個連續核苷酸，視情況長度為20個核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含長度為18至36個核苷酸之有義股及長度為22個核苷酸之反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中該有義股之3'端包含闡述為S1-L-S2之莖-環，其中S1與S2互補，且其中L形成在S1與S2之間長度為3至5個核苷酸之環，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為19個連續核苷酸，視情況長度為20個核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含長度為36個核苷酸之有義股及長度為22個核苷酸之反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中該有義股之3'端包含闡述為S1-L-S2之莖-環，其中S1與S2互補，且其中L形成在S1與S2之間長度為3至5個核苷酸之環，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為19個連續核苷酸，視情況長度為20個核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含長度為36個核苷酸之有義股及長度為22個核苷酸之反義股，其中該有義股及該反義股形成長度為至少19個核苷酸、視情況長度為20個核苷酸之雙鏈體區域，其中該有義股之3'端包含闡述為S1-L-S2之莖-環，其中S1與S2互補，且其中L形成在S1與S2之間長度為3至5個核苷酸之環，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之 PNPLA3mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為19個連續核苷酸，視情況長度為20個核苷酸。
如請求項13至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中L為三環或四環。
如請求項16之RNAi寡核苷酸，其中L為四環。
如請求項17之RNAi寡核苷酸，其中該四環包含序列5'-GAAA-3'。
如請求項16之RNAi寡核苷酸，其中S1及S2之長度為1-10個核苷酸且具有相同長度。
如請求項19之RNAi寡核苷酸，其中S1及S2之長度為1個核苷酸、2個核苷酸、3個核苷酸、4個核苷酸、5個核苷酸、6個核苷酸、7個核苷酸、8個核苷酸、9個核苷酸或10個核苷酸。
如請求項20之RNAi寡核苷酸，其中S1及S2之長度為6個核苷酸。
如請求項16之RNAi寡核苷酸，其中該莖-環包含序列5'-GCAGCCGAAAGGCUGC-3' (SEQ ID NO:1177)。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該反義股包含長度為一或多個核苷酸之3'懸垂序列。
如請求項23之RNAi寡核苷酸，其中該3'懸垂序列之長度為2個核苷酸，視情況其中該3'懸垂序列為GG。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該寡核苷酸包含至少一個經修飾之核苷酸。
如請求項25之RNAi寡核苷酸，其中該經修飾之核苷酸包含2'-修飾。
如請求項26之RNAi寡核苷酸，其中該2'-修飾為選自由以下組成之群的修飾：2'-胺基乙基、2'-氟、2'-O-甲基、2'-O-甲氧基乙基及2'-去氧-2'-氟-β-d-阿拉伯糖基核酸。
如請求項25之RNAi寡核苷酸，其中構成該寡核苷酸之所有核苷酸均為經修飾的，視情況其中該修飾為選自由2'-氟及2'-O-甲基組成之群的2'-修飾。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該寡核苷酸包含至少一個經修飾之核苷酸間鍵聯。
如請求項29之RNAi寡核苷酸，其中該至少一個經修飾之核苷酸間鍵聯為硫代磷酸酯鍵聯。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該反義股之5'-核苷酸之糖的4'-碳包含磷酸酯類似物。
如請求項31之RNAi寡核苷酸，其中該磷酸酯類似物為氧甲基膦酸酯、乙烯基膦酸酯或丙二醯基膦酸酯，視情況其中該磷酸酯類似物為包含5'-甲氧基膦酸酯-4'-氧基之4'-磷酸酯類似物。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該寡核苷酸之至少一個核苷酸結合至一或多個靶向配位體。
如請求項33之RNAi寡核苷酸，其中各靶向配位體包含碳水化合物、胺基糖、膽固醇、多肽或脂質。
如請求項33之RNAi寡核苷酸，其中各靶向配位體包含N-乙醯半乳糖胺(GalNAc)部分。
如請求項35之RNAi寡核苷酸，其中該GalNAc部分為單價GalNAc部分、二價GalNAc部分、三價GalNAc部分或四價GalNAc部分。
如請求項16之RNAi寡核苷酸，其中該莖-環之L之至多4個核苷酸各自結合至單價GalNAc部分。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO: 9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253、255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477、479、481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553、555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、771、773及775中之任一者之核苷酸序列，或其中該有義股包含SEQ ID NO:777、779、781、783、785、787、789、791、793、795、797、799、801、803、805、807、809、811、813、815、817、819、821、823、825、827、829、831、833、835、837、839、841、843、845、847、849、851、853、855、857、859、861、863、865、867、869、871、873、875、877、879、881、883、885、887、889、891、893、895、897、899、901、903、905、907、909、911、913、915、917、919、921、923、925、927、929、931、933、935、937、939、941、943、945、947、949、951、953、955、957、959、961、963、965、967、969、971、973、975、977、979、981、983、985、987、989、991、993、995、997、999、1001、1003、1005、1007、1009、1011、1013、1015、1017、1019、1021、1023、1025、1027、1029、1031、1033、1035、1037、1039、1041、1043、1045、1047、1049、1051、1053、1055、1057、1059、1061、1063、1065、1067、1069、1071、1073、1075、1077、1079、1081、1083、1085、1087、1089、1091、1093、1095、1097、1099、1101、1103、1105、1107、1109、1111、1113、1115、1117、1119、1121、1123、1125、1127、1129、1131、1133、1135、1137、1139、1141、1143、1145、1147、1149、1151、1153、1155、1157、1159、1161及1163中之任一者之核苷酸序列，或其中該有義股包含SEQ ID NO: 1178、1180、1182、1184、1186、1188、1190、1192、1194、1196、1198、1200、1202、1204、1206、1208、1210、1212、1214、1216、1218、1220、1222、1224、1226、1228、1230、1232、1234、1236、1238、1240、1242、1244、1246、1248、1250、1252、1254、1256、1258、1260、1262、1264、1266、1268、1270、1272、1274、1276、1278、1280、1282、1284、1286、1288、1290、1292、1294、1296、1298或1300中之任一者之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該反義股包含SEQ ID NO:10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、342、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384、386、388、390、392、394、396、398、400、402、404、406、408、410、412、414、416、418、420、422、424、426、428、430、432、434、436、438、440、442、444、446、448、450、452、454、456、458、460、462、464、466、468、470、472、474、476、478、480、482、484、486、488、490、492、494、496、498、500、502、504、506、508、510、512、514、516、518、520、522、524、526、528、530、532、534、536、538、540、542、544、546、548、550、552、554、556、558、560、562、564、566、568、570、572、574、576、578、580、582、584、586、588、590、592、594、596、598、600、602、604、606、608、610、612、614、616、618、620、622、624、626、628、630、632、634、636、638、640、642、644、646、648、650、652、654、656、658、660、662、664、666、668、670、672、674、676、678、680、682、684、686、688、690、692、694、696、698、700、702、704、706、708、710、712、714、716、718、720、722、724、726、728、730、732、734、736、738、740、742、744、746、748、750、752、754、756、758、760、762、764、766、768、770、772、774及776中之任一者之核苷酸序列，或其中該反義股包含SEQ ID NO:778、780、782、784、786、788、790、792、794、796、798、800、802、804、806、808、810、812、814、816、818、820、822、824、826、828、830、832、834、836、838、840、842、844、846、848、850、852、854、856、858、860、862、864、866、868、870、872、874、876、878、880、882、884、886、888、890、892、894、896、898、900、902、904、906、908、910、912、914、916、918、920、922、924、926、928、930、932、934、936、938、940、942、944、946、948、950、952、954、956、958、960、962、964、966、968、970、972、974、976、978、980、982、984、986、988、990、992、994、996、998、1000、1002、1004、1006、1008、1010、1012、1014、1016、1018、1020、1022、1024、1026、1028、1030、1032、1034、1036、1038、1040、1042、1044、1046、1048、1050、1052、1054、1056、1058、1060、1062、1064、1066、1068、1070、1072、1074、1076、1078、1080、1082、1084、1086、1088、1090、1092、1094、1096、1098、1100、1102、1104、1106、1108、1110、1112、1114、1116、1118、1120、1122、1124、1126、1128、1130、1132、1134、1136、1138、1140、1142、1144、1146、1148、1150、1152、1154、1156、1158、1160、1162及1164中之任一者之核苷酸序列；或其中該反義股包含SEQ ID NO: 1179、1181、1183、1185、1187、1189、1191、1193、1195、1197、1199、1201、1203、1205、1207、1209、1211、1213、1215、1217、1219、1221、1223、1225、1227、1229、1231、1233、1235、1237、1239、1241、1243、1245、1247、1249、1251、1253、1255、1257、1259、1261、1263、1265、1267、1269、1271、1273、1275、1277、1279、1281、1283、1285、1287、1289、1291、1293、1295、1297、1299或1301中之任一者之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股及該反義股包含選自由以下組成之群的核苷酸序列： (a) SEQ ID NO:787及788， (b) SEQ ID NO:843及844， (c) SEQ ID NO:867及868， (d) SEQ ID NO:871及872， (e) SEQ ID NO:937及938， (f) SEQ ID NO:1003及1004， (g) SEQ ID NO:1007及1008， (h) SEQ ID NO:1017及1018， (i) SEQ ID NO:1161及1162， (j) SEQ ID NO: 1163及1164， (k) SEQ ID NO: 1220及1221， (l) SEQ ID NO: 1224及1225， (m) SEQ ID NO: 1230及1231， (n) SEQ ID NO: 1232及1233， (o) SEQ ID NO: 1188及1189， (p) SEQ ID NO: 1190及1191， (q) SEQ ID NO: 1244及1245， (r) SEQ ID NO: 1250及1251-， (s) SEQ ID NO: 1254及1255，及 (t) SEQ ID NO: 1246及1247。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO: 1220中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1221中所列之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO:1224中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1225中所列之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO:1230中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1231中所列之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO:1232中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1233中所列之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO:1188中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1189中所列之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO:1190中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1191中所列之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO:1244中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1245中所列之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO:1250中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1251中所列之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO:1254中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1255中所列之核苷酸序列。
如請求項1、2及8至15中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含如SEQ ID NO:1246中所列之核苷酸序列，且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1247中所列之核苷酸序列。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含有義股及反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中構成該有義股及該反義股之所有核苷酸均為經修飾的，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為至少15個連續核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含有義股及反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中構成該有義股及該反義股之所有核苷酸均為經修飾的，其中該反義股之5'-核苷酸之糖的4'-碳包含磷酸酯類似物，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為至少15個連續核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含有義股及反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中構成該有義股及該反義股之所有核苷酸均為經修飾的，其中該反義股之5'-核苷酸之糖的4'-碳包含磷酸酯類似物，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之 PNPLA3mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為至少15個連續核苷酸。
一種用於降低 PNPLA3表現之RNAi寡核苷酸，該寡核苷酸包含有義股及反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中構成該有義股及該反義股之所有核苷酸均為經修飾的，其中該反義股及該有義股包含一或多個2'-氟及2'-O-甲基修飾之核苷酸及至少一個硫代磷酸酯鍵聯，其中該反義股之5'-核苷酸之糖的4'-碳包含磷酸酯類似物，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為至少15個連續核苷酸。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:787、843、867、871、937、1003、1007、1017、1161或1163中之任一者，或其中該有義股包含SEQ ID NO: 1188、1190、1220、1224、1230、1232、1244、1246、1250或1254中之任一者。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該反義股包含SEQ ID NO: 788、844、868、872、938、1004、1008、1018、1162或1164中之任一者，或其中該反義股包含SEQ ID NO: 1189、1191、1221、1225、1231、1233、1245、1247、1251或1255中之任一者。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股及該反義股選自由以下組成之群： (a) SEQ ID NO:787及788， (b) SEQ ID NO:843及844， (c) SEQ ID NO:867及868， (d) SEQ ID NO:871及872， (e) SEQ ID NO:937及938， (f) SEQ ID NO:1003及1004， (g) SEQ ID NO:1007及1008， (h) SEQ ID NO:1017及1018， (i) SEQ ID NO:1161及1162，及 (j) SEQ ID NO: 1163及1164， (k) SEQ ID NO: 1220及1221， (l) SEQ ID NO: 1224及1225， (m) SEQ ID NO: 1230及1231， (n) SEQ ID NO: 1232及1233， (o) SEQ ID NO: 1188及1189， (p) SEQ ID NO: 1190及1191， (q) SEQ ID NO: 1244及1245， (r) SEQ ID NO: 1250及1251-， (s) SEQ ID NO: 1254及1255，及 (t) SEQ ID NO: 1246及1247。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO: 1220，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1221。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:1224，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1225。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:1230，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1231。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:1232，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1233。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:1188，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1189。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:1190，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1191。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:1244，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1245。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:1250，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1251。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:1254，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1255。
如請求項51至54中任一項之RNAi寡核苷酸，其中該有義股包含SEQ ID NO:1246，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1247。
一種如請求項1至67中任一項之RNAi寡核苷酸之用途，其用於製造用於治療患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體的醫藥品。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1至67中任一項之RNAi寡核苷酸，及醫藥學上可接受之載劑、遞送劑或賦形劑。
一種如請求項69之醫藥組合物之用途，其用於製造向個體遞送寡核苷酸之醫藥品。
一種如請求項1至67中任一項之RNAi寡核苷酸或如請求項69之醫藥組合物之用途，其用於製造用於降低個體中之 PNPLA3表現的醫藥品。
如請求項71之用途，其中降低 PNPLA3表現包括降低PNPLA3 mRNA之量或水準、PNPLA3蛋白之量或水準或兩者。
如請求項71或72之用途，其中該個體患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患。
如請求項73之用途，其中該與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患為心臟代謝疾病、酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝細胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
如請求項68及70至74中任一項之用途，其中該RNAi寡核苷酸或該醫藥組合物用於與第二組合物或治療劑組合投與。
一種用於降低細胞或細胞群體中之 PNPLA3表現的活體外方法，該方法包括以下步驟：使該細胞或該細胞群體與如請求項1至67中任一項之RNAi寡核苷酸或如請求項69之醫藥組合物接觸。
如請求項76之方法，其中降低 PNPLA3表現包括降低PNPLA3 mRNA之量或水準、PNPLA3蛋白之量或水準或兩者。
如請求項76或77之方法，其中該RNAi寡核苷酸或該醫藥組合物與第二組合物或治療劑組合投與。
一種RNAi寡核苷酸之用途，其用於製造用於治療患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體的醫藥品，其中該RNAi寡核苷酸包含有義股及反義股，其中該有義股及該反義股形成雙鏈體區域，其中該反義股包含與SEQ ID NO:1167至1176中之任一者之PNPLA3 mRNA目標序列具互補性之區域，且其中該具互補性之區域之長度為至少15個連續核苷酸。
一種RNAi寡核苷酸之用途，其用於製造用於治療患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體的醫藥品，其中該RNAi寡核苷酸包含自表1、表3、表A、表B、表C或表D中所列之列選擇的有義股及反義股。
一種RNAi寡核苷酸之用途，其用於製造用於治療患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體的醫藥品，其中該RNAi寡核苷酸包含有義股及反義股，其中該有義股及該反義股包含選自由以下組成之群的核苷酸序列： (a) SEQ ID NO:787及788， (b) SEQ ID NO:843及844， (c) SEQ ID NO:867及868， (d) SEQ ID NO:871及872， (e) SEQ ID NO:937及938， (f) SEQ ID NO:1003及1004， (g) SEQ ID NO:1007及1008， (h) SEQ ID NO:1017及1018， (i) SEQ ID NO:1161及1162，及 (j) SEQ ID NO: 1163及1164， (k) SEQ ID NO: 1220及1221， (l) SEQ ID NO: 1224及1225， (m) SEQ ID NO: 1230及1231， (n) SEQ ID NO: 1232及1233， (o) SEQ ID NO: 1188及1189， (p) SEQ ID NO: 1190及1191， (q) SEQ ID NO: 1244及1245， (r) SEQ ID NO: 1250及1251-， (s) SEQ ID NO: 1254及1255，及 (t) SEQ ID NO: 1246及1247。
一種RNAi寡核苷酸之用途，其用於製造用於治療患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體的醫藥品，其中該RNAi寡核苷酸包含有義股及反義股，其中該有義股及該反義股選自由以下組成之群： (a) SEQ ID NO:787及788, (b) SEQ ID NO:843及844， (c) SEQ ID NO:867及868， (d) SEQ ID NO:871及872， (e) SEQ ID NO:937及938， (f) SEQ ID NO:1003及1004， (g) SEQ ID NO:1007及1008， (h) SEQ ID NO:1017及1018， (i) SEQ ID NO:1161及1162，及 (j) SEQ ID NO: 1163及1164， (k) SEQ ID NO: 1220及1221， (l) SEQ ID NO: 1224及1225， (m) SEQ ID NO: 1230及1231， (n) SEQ ID NO: 1232及1233， (o) SEQ ID NO: 1188及1189， (p) SEQ ID NO: 1190及1191， (q) SEQ ID NO: 1244及1245， (r) SEQ ID NO: 1250及1251-， (s) SEQ ID NO: 1254及1255，及 (t) SEQ ID NO: 1246及1247。
如請求項82之用途，其中該有義股包含SEQ ID NO:1224，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1225；或其中該有義股包含如SEQ ID NO: 1220中所列之核苷酸序列且其中該反義股包含如SEQ ID NO:1221中所列之核苷酸序列。
如請求項82之用途，其中該有義股包含SEQ ID NO: 1230，且其中該反義股包含SEQ ID NO: 1231。
如請求項82之用途，其中該有義股包含SEQ ID NO: 1232，且其中該反義股包含SEQ ID NO: 1233。
如請求項82之用途，其中該有義股包含SEQ ID NO: 1188，且其中該反義股包含SEQ ID NO: 1189。
如請求項82之用途，其中該有義股包含SEQ ID NO: 1190，且其中該反義股包含SEQ ID NO: 1191。
如請求項82之用途，其中該有義股包含SEQ ID NO: 1244，且其中該反義股包含SEQ ID NO: 1245。
如請求項82之用途，其中該有義股包含SEQ ID NO:1250，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1251。
如請求項82之用途，其中該有義股包含SEQ ID NO:1254，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1255。
如請求項82之用途，其中該有義股包含SEQ ID NO:1246，且其中該反義股包含SEQ ID NO:1247。
如請求項79至91中任一項之用途，其中該與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患選自由以下組成之群：心臟代謝疾病、酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝細胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)及非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
一種如請求項1至67中任一項之RNAi寡核苷酸或如請求項69之醫藥組合物之用途，其用於製造用於治療與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之醫藥品。
如請求項93之用途，其中該與 PNPLA3表現相關疾病、病症或疾患為心臟代謝疾病、酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝細胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
一種套組，其包含如請求項1至67中任一項之RNAi寡核苷酸、視情況存在之醫藥學上可接受之載劑及包裝插頁，該包裝插頁包含關於向患有與 PNPLA3表現相關之疾病、病症或疾患之個體投與的說明書。
如請求項95之套組，其中該與 PNPLA3表現相關疾病、病症或疾患為心臟代謝疾病、酒精性肝炎(AH)、酒精性肝病(ALD)、肝硬化、肝細胞癌(HCC)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。