CN117079959B - 一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料及其制备方法，属于生化分离技术领域。其包括：将3~7份介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒加入到丙醇溶液中，搅拌均匀后，得到初始反应液；向初始反应液中加入18‑35份的低聚乙二醇延胡索酸酯、15~30份的3‑对甲苯磺酰胺基苯硼酸，搅拌均匀后，得到反应体系；向反应体系中加入0.1‑0.2份过硫酸钾和1‑2份的二甲基丙烯酸乙二醇酯在50~80℃，反应1‑3h。本发明提供的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，采用核‑壳结构的介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒，在壳结构外用低聚乙二醇延胡索酸酯和3‑对甲苯磺酰胺基苯硼酸反应后进行修饰。
Description
技术领域
本发明涉及生化分离技术领域，具体涉及一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料及其制备方法。
背景技术
磁性纳米材料作为目前最富有生命力的新型材料之一，不仅具有高比表面积、小尺寸效应、量子隧道效应等普通纳米材料所具有的特性，还具有良好的表面可修饰性、特异性、类酶活性、超顺磁性、化学稳定性和生物相容性等特殊性质。在生物医学领域，磁标记检测技术已经广泛用于检测蛋白质、核酸、细胞以及病原体等对象，可以为多种疾病提供宽线性范围的高灵敏、特异性诊断。
磁性纳米离子具有超顺磁性和磁响应性的同时又具有超高的生物相容性，在生物医学检测领域得到了日益广泛的应用。与光学标记检测相比，磁标记检测在生物样本中的背景干扰小、信噪比高、磁信号穿透性强，且信号易于检测。这些优点使得磁标记检测技术具有更高的检测灵敏度，而且对大多数生物样品可直接检测，前处理要求低。磁标记检测的特性使得其在生物分析物的定量分析、痕量分析以及复杂基质样品的分析等领域具有显著的优势。目前，磁标记检测技术已成功地用于蛋白质、核酸、细胞以及病原体等多种物质的高灵敏度定量检测。
蛋白质中的疾病诊断中最常见的一类生物标志物，可以揭示某些疾病发展的状况。蛋白质标志物主要包括特异性抗体、病原、激素和酶等几类。磁性标记检测技术检测蛋白质的方免疫测定法，即通过功能化的磁性纳米材料与待测物发生-抗体反应，特异性地检测目标蛋白质的含量。
通常，糖蛋白质组学分析对象主要包括糖蛋白和糖肽，现有的富集方法中一磁性纳米材料作为磁性吸附剂用于样品前处理的富集技术称为磁性固相萃取，该方法相比起其他的富集处理方法技术，如固相萃取、液液萃取等，磁性固相萃取具有操作简便、有机试剂实用少、萃取效率高等优点。磁性固相萃取是一种利用磁性材料或可磁化的材料作为吸附剂进行样本前处理的一种新型方法，通过磁性吸附剂直接加入到含待测物的样品溶液中将其吸附至表面，在外部磁场作用下，使吸附有待测物的磁性吸附剂与其他组分分离后再利用洗脱液洗脱下待测物，最后借助外部磁场分离吸附剂与洗脱组分。
在磁性固相萃取技术中，磁性纳米吸附剂是影响富集和选择性的关键，现有的磁性纳米吸附剂对低分子量糖蛋白的吸附变现欠佳。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料及其制备方法，解决了现有的磁性纳米吸附剂对低分子量糖蛋白的吸附变现欠佳的问题。
本发明通过下述技术方案实现：
本发明提供的一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，包括：
将3~7份介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒加入到丙醇溶液中，搅拌均匀后，得到初始反应液；
向初始反应液中加入18-35份的低聚乙二醇延胡索酸酯、15~30份的3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸，搅拌均匀后，得到反应体系；
向反应体系中加入0.1-0.2份过硫酸钾和1-2份的二甲基丙烯酸乙二醇酯在50~80℃，反应1-3h，得到所述用于检测糖蛋白的磁性纳米材料。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒中，复合磁性纳米颗粒包裹氧化铁纳米粒子和氧化钴纳米粒子。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒中，复合磁性纳米颗粒的粒径为150-200nm，包裹层介孔二氧化钛的厚度为15-20nm。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒的制备包括：
将三乙醇胺溶解到有机溶剂，并加入钛酸四丁酯搅拌均匀后，再加入含量为20~30%Gemini表面活性剂的白油，搅拌反应2～4h后，得到混合溶液；
向混合溶液中加入复合磁性纳米颗粒搅拌混合均匀，在搅拌下，调节混合溶液的pH至碱性，得到固体沉淀；
将分离出的固体沉淀进行洗涤后，在150~200℃下处理3~6h后，得到所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，所述有机溶剂包括：甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或丙酮。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，调节混合溶液的pH值至8-9。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，三乙醇胺、钛酸四丁酯、白油的质量比为1：（0.7~0.9）：（0.1~0.2）。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，所述复合磁性纳米颗粒的制备包括：
将质量比为1：（0.2~0.4）的Fe3+盐和Co2+盐加入到乙二醇溶液中，超声分散均匀后，向溶液中依次加入质量比为1：（0.7~0.9）：（1~1.2）的醋酸钠、葡萄糖酸内酯和聚乙二醇，在150~180℃下反应8~10h，经过滤、洗涤、干燥后得到复合磁性纳米颗粒。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，所述Fe3+盐为六水合氯化铁，所述Co2+盐为醋酸钴。
本发明还提供用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法制得的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料。
本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：
本发明提供的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，采用核-壳结构的介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒，在壳结构外用低聚乙二醇延胡索酸酯和3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸进行修饰，利用介孔二氧化钛提高颗粒的整体比表面积，能从而提高吸附量，同时提供更多的修饰位点；通过低聚乙二醇延胡索酸酯和3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸提高磁性纳米材料的亲水性和尺寸排阻能力，去除高分子量蛋白质的干扰，能有利于低分子量糖蛋白的吸附。
附图说明
为了更清楚地说明本发明示例性实施方式的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。在附图中：
图1为本发明的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的结构示意图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例和附图，对本发明作进一步的详细说明，本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明，并不作为对本发明的限定。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明的技术方案为：
一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，其特征在于，包括：
将3~7份介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒加入到丙醇溶液中，搅拌均匀后，得到初始反应液；
向初始反应液中加入18-35份的低聚乙二醇延胡索酸酯、15~30份的3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸，搅拌均匀后，得到反应体系；
向反应体系中加入0.1-0.2份过硫酸钾和1-2份的二甲基丙烯酸乙二醇酯在50~80℃，反应1-3h，得到所述用于检测糖蛋白的磁性纳米材料。
本发明的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料，采用核-壳结构的介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒，在壳结构外用低聚乙二醇延胡索酸酯和3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸进行修饰，结构示意图如图1所示。
低聚乙二醇延胡索酸酯属于双官能度低聚物，由聚乙二醇和延胡索酸酯交替组成具有很好的亲水性，3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸同样具有亲水性，增加与糖蛋白结合位点，更有利于糖蛋白的结合和捕捉。低聚乙二醇延胡索酸酯和3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸发生反应，通过氢键作用发生物理交联，在介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒表面缠绕形成非共价交联网络，使得只有低分子量的分子才能通过，从而提高磁性纳米材料的尺寸排阻能力，去除高分子量蛋白质的干扰，能有利于低分子量糖蛋白的吸附。该磁性纳米材料中的硼酸基团，能与糖蛋白的顺式二醇部分的亲和吸附，选择性高。
采用介孔二氧化钛对包覆复合磁性纳米颗粒，利用介孔二氧化钛提高颗粒的整体比表面积，能从而提高吸附量。壳型的介孔二氧化钛为低聚乙二醇延胡索酸酯和3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸提供更多的修饰位点，提高磁性纳米材料的整体性能。此外，Ti4+子还具有强吸电子效应，促使硼酸对糖蛋白有较好的亲和作用。
本发明的磁性纳米材料富集糖蛋白的原理如下：在碱性条件下，磁性纳米材料的硼酸与糖蛋白的糖链上顺式二醇反应形成五元或六元环酯，并且在酸性条件下该反应可发生逆向移动，实现环酯断裂，进而释放富集的糖蛋白。
进一步地，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒中，复合磁性纳米颗粒的粒径为150-200nm，包裹层介孔二氧化钛的厚度为15-20nm。
进一步地，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒的制备包括：
将三乙醇胺溶解到有机溶剂，并加入钛酸四丁酯搅拌均匀后，再加入含量为20~30%Gemini表面活性剂的白油，搅拌反应2～4h后，得到混合溶液；
向混合溶液中加入复合磁性纳米颗粒搅拌混合均匀，在搅拌下，调节混合溶液的pH至碱性，得到固体沉淀；
将分离出的固体沉淀进行洗涤后，在150~200℃下处理3~6h后，得到所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒。
在本发明中，采用双子表面活性剂的Gemini表面活性剂作为制备介孔二氧化硅的软膜板剂，利用Gemini表面活性剂具有的亲水基和疏水基的独特分子结构，与钛源在复合磁性纳米颗粒表面原位生长形成介孔二氧化碳包覆层，通过介孔二氧化钛提高吸附材料的比表面积，进而提供吸附量。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，所述有机溶剂包括：甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或丙酮。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，调节混合溶液的pH值至8-9。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，三乙醇胺、聚乙二醇的质量比为1：（0.01~0.1）；
三乙醇胺、钛酸四丁酯、白油的质量比为1：（0.7~0.9）：（0.1~0.2）。
进一步地，在所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法中，所述复合磁性纳米颗粒的制备包括：
将质量比为1：（0.2~0.4）的Fe3+盐和Co2+盐加入到乙二醇溶液中，超声分散均匀后，向溶液中依次加入质量比为1：（0.7~0.9）：（1~1.2）的醋酸钠、葡萄糖酸内酯和聚乙二醇，在150~180℃下反应8~10h，经过滤、洗涤、干燥后得到复合磁性纳米颗粒。
本发明的复合磁性纳米颗粒中以超顺磁性四氧化三铁纳米粒子和磁性二氧化钴粒子复合，具有高的磁饱和强度，从而对外加磁场具有很好的磁响应性能。其中，还通过葡萄糖酸内酯促进聚乙二醇分散均匀，以得到尺寸均匀的复合磁性纳米颗粒。
进一步地，所述Fe3+盐为六水合氯化铁，所述Co2+盐为醋酸钴。
为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法进行描述，但是应当理解，这些实施例是以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制，本发明的保护范围也不限于下述的实施例。
实施例1：
本实施例的一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，包括：
（1）将3份介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒加入到丙醇溶液中，搅拌均匀后，得到初始反应液；
（2）向初始反应液中加入18份的低聚乙二醇延胡索酸酯、15份的3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸，搅拌均匀后，得到反应体系；
（3）向反应体系中加入0.1份过硫酸钾和1份的二甲基丙烯酸乙二醇酯在50℃，反应1h，得到所述用于检测糖蛋白的磁性纳米材料。
其中，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒的制备包括：
（1）将三乙醇胺溶解到乙醇，并加入钛酸四丁酯搅拌均匀后，再加入含量为20%Gemini表面活性剂的白油，搅拌反应2h后，得到混合溶液；三乙醇胺、钛酸四丁酯、白油的质量比为1：0.7：0.1；
（2）向混合溶液中加入复合磁性纳米颗粒搅拌混合均匀，在搅拌下，调节混合溶液的pH至8，得到固体沉淀；
（3）将分离出的固体沉淀进行洗涤后，在150℃下处理3h后，得到所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒。
所述复合磁性纳米颗粒的制备包括：
将质量比为1：0.2的六水合氯化铁和醋酸钴加入到乙二醇溶液中，超声分散均匀后，向溶液中依次加入质量比为1：0.7：1的醋酸钠、葡萄糖酸内酯和聚乙二醇，在150℃下反应8h，经过滤、洗涤、干燥后得到复合磁性纳米颗粒。
取23.5mg制得的磁性纳米材料加入5mL 1.0mg/mL、pH7.4的牛血清白蛋白磷酸盐缓冲溶液中，于25℃恒温水浴摇床中150r/min振荡20min，完成吸附后，测定磁颗粒的蛋白吸附量。
用0.2mol/L NaCl+20 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)分别配制不同浓度的牛血清白蛋溶液。将20.0mg本实施例的磁性纳米材料加入到4.0mL蛋白溶液，超声分散，恒温振荡30min。收集上清液，Bradford法测定蛋白浓度，蛋白吸附量(Q)用公式计算，Q=（C0-Ce）×V0/m，其中，Q为吸附容量(mg/g)；C0和Ce分别是物质的原始和平衡浓度(mg/mL)；V0是溶液体积(mL)；m是本实施例的磁性纳米材料质量(mg)。
本实施例的蛋白吸附量(Q)为698.3mg/g。
实施例2：
本实施例的一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，包括：
将4份介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒加入到丙醇溶液中，搅拌均匀后，得到初始反应液；
向初始反应液中加入22份的低聚乙二醇延胡索酸酯、17份的3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸，搅拌均匀后，得到反应体系；
向反应体系中加入0.1份过硫酸钾和1份的二甲基丙烯酸乙二醇酯在55℃，反应3h，得到所述用于检测糖蛋白的磁性纳米材料。
其中，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒的制备包括：
（1）将三乙醇胺溶解到乙醇，并加入钛酸四丁酯搅拌均匀后，再加入含量为25%Gemini表面活性剂的白油，搅拌反应3h后，得到混合溶液；三乙醇胺、钛酸四丁酯、白油的质量比为1：0.8：0.15；
（2）向混合溶液中加入复合磁性纳米颗粒搅拌混合均匀，在搅拌下，调节混合溶液的pH至9，得到固体沉淀；
（3）将分离出的固体沉淀进行洗涤后，在175℃下处理5h后，得到所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒。
所述复合磁性纳米颗粒的制备包括：
将质量比为1：0.3的六水合氯化铁和醋酸钴加入到乙二醇溶液中，超声分散均匀后，向溶液中依次加入质量比为1：0.8：1.1的醋酸钠、葡萄糖酸内酯和聚乙二醇，在160℃下反应9h，经过滤、洗涤、干燥后得到复合磁性纳米颗粒。
用0.2mol/L NaCl+20 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)分别配制不同浓度的牛血清白蛋溶液。将20.0mg本实施例的磁性纳米材料加入到4.0mL蛋白溶液，超声分散，恒温振荡30min。收集上清液，Bradford法测定蛋白浓度，蛋白吸附量(Q)用公式计算，Q=（C0-Ce）×V0/m，其中，Q为吸附容量(mg/g)；C0和Ce分别是物质的原始和平衡浓度(mg/mL)；V0是溶液体积(mL)；m是本实施例的磁性纳米材料质量(mg)。
本实施例的蛋白吸附量(Q)为712.5mg/g。
实施例3：
本实施例的一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，包括：
将5份介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒加入到丙醇溶液中，搅拌均匀后，得到初始反应液；
向初始反应液中加入27份的低聚乙二醇延胡索酸酯、22份的3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸，搅拌均匀后，得到反应体系；
向反应体系中加入0.15份过硫酸钾和1.5份的二甲基丙烯酸乙二醇酯在65℃，反应2h，得到所述用于检测糖蛋白的磁性纳米材料。
其中，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒的制备包括：
（1）将三乙醇胺溶解到乙醇，并加入钛酸四丁酯搅拌均匀后，再加入含量为30%Gemini表面活性剂的白油，搅拌反应4h后，得到混合溶液；三乙醇胺、钛酸四丁酯、白油的质量比为1：0.9：0.2；
（2）向混合溶液中加入复合磁性纳米颗粒搅拌混合均匀，在搅拌下，调节混合溶液的pH至8，得到固体沉淀；
（3）将分离出的固体沉淀进行洗涤后，在200℃下处理6h后，得到所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒。
所述复合磁性纳米颗粒的制备包括：
将质量比为1：0.4的六水合氯化铁和醋酸钴加入到乙二醇溶液中，超声分散均匀后，向溶液中依次加入质量比为1：0.9：1.2的醋酸钠、葡萄糖酸内酯和聚乙二醇，在180℃下反应10h，经过滤、洗涤、干燥后得到复合磁性纳米颗粒。
用0.2mol/L NaCl+20 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)分别配制不同浓度的牛血清白蛋溶液。将20.0mg本实施例的磁性纳米材料加入到4.0mL蛋白溶液，超声分散，恒温振荡30min。收集上清液，Bradford法测定蛋白浓度，蛋白吸附量(Q)用公式计算，Q=（C0-Ce）×V0/m，其中，Q为吸附容量(mg/g)；C0和Ce分别是物质的原始和平衡浓度(mg/mL)；V0是溶液体积(mL)；m是本实施例的磁性纳米材料质量(mg)。
本实施例的蛋白吸附量(Q)为727.9mg/g。
实施例4：
本实施例的一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，包括：
将6份介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒加入到丙醇溶液中，搅拌均匀后，得到初始反应液；
向初始反应液中加入30份的低聚乙二醇延胡索酸酯、27份的3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸，搅拌均匀后，得到反应体系；
向反应体系中加入0.2份过硫酸钾和1份的二甲基丙烯酸乙二醇酯在75℃，反应1h，得到所述用于检测糖蛋白的磁性纳米材料。
本实施例中介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒的制备以及复合磁性纳米颗粒的制备与实施例1中的一致。
用0.2mol/L NaCl+20 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)分别配制不同浓度的牛血清白蛋溶液。将20.0mg本实施例的磁性纳米材料加入到4.0mL蛋白溶液，超声分散，恒温振荡30min。收集上清液，Bradford法测定蛋白浓度，蛋白吸附量(Q)用公式计算，Q=（C0-Ce）×V0/m，其中，Q为吸附容量(mg/g)；C0和Ce分别是物质的原始和平衡浓度(mg/mL)；V0是溶液体积(mL)；m是本实施例的磁性纳米材料质量(mg)。
本实施例的蛋白吸附量(Q)为707.8mg/g。
实施例5：
本实施例的一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，包括：
将7份介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒加入到丙醇溶液中，搅拌均匀后，得到初始反应液；
向初始反应液中加入35份的低聚乙二醇延胡索酸酯、30份的3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸，搅拌均匀后，得到反应体系；
向反应体系中加入0.2份过硫酸钾和2份的二甲基丙烯酸乙二醇酯在80℃，反应3h，得到所述用于检测糖蛋白的磁性纳米材料。
本实施例中介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒的制备以及复合磁性纳米颗粒的制备与实施例2中的一致。
用0.2mol/L NaCl+20 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)分别配制不同浓度的牛血清白蛋溶液。将20.0mg本实施例的磁性纳米材料加入到4.0mL蛋白溶液，超声分散，恒温振荡30min。收集上清液，Bradford法测定蛋白浓度，蛋白吸附量(Q)用公式计算，Q=（C0-Ce）×V0/m，其中，Q为吸附容量(mg/g)；C0和Ce分别是物质的原始和平衡浓度(mg/mL)；V0是溶液体积(mL)；m是本实施例的磁性纳米材料质量(mg)。
本实施例的蛋白吸附量(Q)为699.5mg/g。
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，其特征在于，包括：
将3~7份介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒加入到丙醇溶液中，搅拌均匀后，得到初始反应液；
向初始反应液中加入18-35份的低聚乙二醇延胡索酸酯、15~30份的3-对甲苯磺酰胺基苯硼酸，搅拌均匀后，得到反应体系；
向反应体系中加入0.1-0.2份过硫酸钾和1-2份的二甲基丙烯酸乙二醇酯在50~80℃，反应1-3h，得到所述用于检测糖蛋白的磁性纳米材料；
其中，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒中，复合磁性纳米颗粒包括氧化铁纳米粒子和氧化钴纳米粒子；
所述复合磁性纳米颗粒的制备包括：
将质量比为1：（0.2~0.4）的Fe3+盐和Co2+盐加入到乙二醇溶液中，超声分散均匀后，向溶液中依次加入质量比为1：（0.7~0.9）：（1~1.2）的醋酸钠、葡萄糖酸内酯和聚乙二醇，在150~180℃下反应8~10h，经过滤、洗涤、干燥后得到复合磁性纳米颗粒；
所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒的制备包括：
将三乙醇胺溶解到有机溶剂，并加入钛酸四丁酯搅拌均匀后，再加入含量为20~30%Gemini表面活性剂的白油，搅拌反应2～4h后，得到混合溶液；
向混合溶液中加入复合磁性纳米颗粒搅拌混合均匀，在搅拌下，调节混合溶液的pH至碱性，得到固体沉淀；
将分离出的固体沉淀进行洗涤后，在150~200℃下处理3~6h后，得到所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒。
2.根据权利要求1所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，其特征在于，所述介孔二氧化钛包覆复合磁性纳米颗粒中，复合磁性纳米颗粒的粒径为150-200nm，包裹层介孔二氧化钛的厚度为15-20nm。
3.根据权利要求1所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂包括：甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或丙酮。
4.根据权利要求1所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，其特征在于，调节混合溶液的pH值至8-9。
5.根据权利要求1所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，其特征在于，三乙醇胺、钛酸四丁酯、白油的质量比为1：（0.7~0.9）：（0.1~0.2）。
6.根据权利要求1所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法，其特征在于，所述Fe3+盐为六水合氯化铁，所述Co2+盐为醋酸钴。
7.一种由权利要求1-6任一项所述的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料的制备方法制得的用于检测糖蛋白的磁性纳米材料。
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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