CN117049912A - 一种促进小麦生长的有机微生物菌肥及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种促进小麦生长的有机微生物菌肥及其制备方法，属于微生物技术领域。本发明菌肥包括以下重量份的原料制备而成：微生物菌剂10‑20份、增效剂3‑6份、微生物菌剂载体20‑40份、腐殖酸10‑20份、尿素5‑10份、磷酸一铵3‑5份、硫酸钾3‑5份。本发明以三种功能微生物菌株组成核心菌种，实现固氮、溶磷和解钾的作用，同时可以有效抑制小麦病原菌，促进作物生长。同时添加纳米碳作为增效剂，促进微生物发挥作用，同时调节土壤环境。另外，辅以必要有机、无机营养物质，为小麦提供补充营养，以实现小麦产量和品质的综合提升，降低化肥使用量，具有重要的经济价值和社会价值。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种促进小麦生长的有机微生物菌肥及其制备方法。
背景技术
农业是国民经济的基础，长期以来，我国农业生产主要依靠增施化学肥料和化学农药来提高作物产量。但是，化肥的有效利用率不足40％，造成了资源浪费，同时在土壤中积累了大量的重金属和有毒物质；而且长期使用化学农药会加剧土壤内磷、钾的流失，造成严重的土壤板结等一系列问题。化学肥料和化学农药的不合理使用打破了土壤内部环境营养之间的平衡，对农田环境造成严重的破坏，导致农产品产量和质量下降，甚至威胁到食品安全。为了保护土壤生态系统，更为了人们的身体健康，化学肥料和化学农药的施用必然会减少，环境友好型生物肥料和生物农药产品将得到更多人的青睐。
近年来，人们发现了多种能促进植物生长的微生物菌株，它们能单独使用，也能与其它微生物和肥料混合使用，这样一定程度可以减少或者替代化学肥料的使用，在实现增产增效的同时，保护环境，以实现农业的绿色可持续发展。
微生物能够在土壤营养元素转化方面发挥重要作用，例如溶磷细菌可以将不溶性的磷转化为植物可利用的形态，硅酸盐细菌则可以将钾离子从钾长石中释放出来，固氮菌能将空气中的氮气转化为铵。这些植物益生菌不仅通过活化土壤中的营养元素，增强植物对氮、磷、钾的吸收，并且部分微生物还能合成和分泌对植物生长有促进作用的物质，如吲哚-3-乙酸(IAA)、铁载体及1-氨基环丙烷-羧酸(ACC)脱氨酶等，从而促进植物的生长和发育。
如申请号为CN2016101557187的中国专利公开了一种能促进白三叶地上组织生长的高效解磷菌及其应用，具体是采集白三叶根际土壤，利用PKO选择培养基从样本中分离纯化出一种溶磷细菌，经鉴定为阴沟肠杆菌(Enteuobactor cloacae)，该菌株在PKO培养基上能形成较大的溶磷圈。将该菌接种到白三叶上之后，宿主植物的生物量有大幅度的增加。该技术仅包含一种解磷菌，功能较为单一，只能提高土壤中磷含量。植物生长需要大量的氮、磷和钾，单一的解磷菌不能满足植物生长的需求，在推广使用中有一定的局限性。
也有一些现有技术将具有解磷作用的菌株和固氮作用的菌株进行复合，以得到功效较为综合的微生物菌剂。但是目前的一些微生物菌剂，菌种复杂，且实际作用效果稳定，缺乏针对性，导致了其市场化应用受阻，根本没有有效的利用和推广。因此，如何开发一种作用持久和稳定的微生物菌剂，是目前亟待解决的技术问题。
发明内容
本发明针对现有技术中存在的问题，提供一种针对小麦生长的复合微生物菌剂，一方面其可以有效促进小麦生长、提升产量，另一方面，可以有效提升抑制土壤有害病菌的繁殖，调节土壤结构，延长肥效。
为实现上述技术目的，本发明所采用的技术方案为：
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥，包括以下重量份的原料制备而成：微生物菌剂10-20份、增效剂3-6份、微生物菌剂载体20-40份、腐殖酸10-20份、尿素5-10份、磷酸一铵3-5份、硫酸钾3-5份。
进一步的，所述微生物菌剂为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)和索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)按照质量比1:1:1混合得到；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.12939；所述伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.8545；所述索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillussonorensis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.15888。
本发明微生物菌种均可通过中国普通微生物菌种保藏管理中心通过采购流程购买得到，无需进行生物保藏。其中枯草芽孢杆菌(CGMCC1.12939)原始保藏时间为2014年5月30日。伊拉克固氮螺菌(CGMCC1.8545)原始保藏时间为2008年9月1日。索诺拉沙漠芽孢杆菌(CGMCC1.15888)原始保藏时间为2016年9月20日。
更进一步的，所述微生物菌剂的制备方法为：将枯草芽孢杆菌、伊拉克固氮螺菌和索诺拉沙漠芽孢杆菌三种菌菌株分别接种于NB培养基中，在150-200r/min，30-37℃恒温摇床活化培养12h制得活化菌液；用100mL容量瓶定容50mLNB培养基，吸取1mL活化菌液接种于100mL容量瓶中30-37℃摇培24h，转速150-200r/min，制得种子液；再将种子液接种于50L或100L液体发酵罐中发酵培养，培养至悬浮液的吸光度为OD600≈1.0，得到三种菌株的发酵液，然后按照1:1:1的体积比混合，得到微生物菌剂。
更进一步的，所述NB培养基组成为蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl5g，蒸馏水1L，pH7.2-7.4。
进一步的，所述增效剂为纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合得到。
更进一步的，所述纳米碳的制备方法为：将5g淀粉和1g纤维素分散于水中，在机械搅拌下95℃水浴加热1h，形成半透明溶胶，将溶胶自然冷却至室温，然后在室温下继续老化24h后形成白色湿凝胶，-20℃下冷藏24h，后放入冷冻干燥机中在-40℃下冷冻干燥48h后，再放入坩埚，于通有氮气的管式炉中以5℃/min的升温速率升至700℃，并在700℃时对其保温2h，自然降温后研磨得到纳米碳。
进一步的，所述微生物菌剂载体为硅藻土。
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥的制备方法，包括以下制备步骤：
(1)制备微生物菌剂，并将制备好的微生物菌剂进行喷雾干燥，得到微生物菌粉；
(2)制备纳米碳，并将纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合后，加入微生物菌粉混合均匀，得到预混料A；
(3)将预混料A与微生物菌剂载体混合均匀，充分吸附后，加入腐殖酸、尿素、磷酸一铵、硫酸钾混合造粒，干燥包装入库即可。
本发明微生物菌剂用量15-20kg/亩。
本发明筛选功能微生物菌种组成微生物菌剂，实现高效的溶磷、解钾、固氮的功效，分泌植物激素促进作物生长，同时可以有效抑制病原菌的生长，对于小麦的生长具有高效的促进作用。具体的，本发明枯草芽孢杆菌可以将土壤中的难溶磷转化为可溶性磷，同时可产生伊枯草菌素A和丰原素A等抑菌物质，特别对典型小麦病原菌禾谷炭疽菌、赤霉菌等有着明显的抑菌作用，在促进小麦生长的同时，有效降低小麦的病害率。而伊拉克固氮螺菌在有效固氮的同时，其分泌的活性物质可以影响小麦氨基酸代谢通路，同时具备高效分泌IAA的能力，促进小麦的生长。而索诺拉沙漠芽孢杆菌一方面有一定的解钾功效，特别的，其可以诱导小麦根系分泌有机酸等活性物质，调控根际微生物活性，促进有益菌发挥功效，从而提升作物的抗病能力。三种菌等比例混合后，具有协同解磷、固氮、解钾、抗病的功效，对于小麦的促生作用显著。
本发明为进一步提升微生物活性，以淀粉和纤维素制备纳米碳，一方面其为三维的网状结构，可以有效的保护微生物，使其持续保持高的生物活性；另一方面，能显著提高小麦根细胞的伸长，增强脱氢酶的活性，并有助于土壤中养分的保持，调节土壤活性，最终促进根的快速生长和产量的提高。
本发明辅以少量腐殖酸、尿素、磷酸一铵、硫酸钾为小麦提供补充营养，进一步促进小麦生长，减少并逐步实现替代化学肥料的使用。
有益效果
本发明以三种功能微生物菌株组成核心菌种，实现固氮、溶磷和解钾的作用，同时可以有效抑制小麦病原菌，促进作物生长。同时添加纳米碳作为增效剂，促进微生物发挥作用，同时调节土壤环境。辅以必要有机、无机营养物质，为小麦提供补充营养，以实现小麦产量和品质的综合提升，降低化肥使用量，具有重要的经济价值和社会价值。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明，但不限于此。
实施例1
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥，包括以下重量份的原料制备而成：微生物菌剂10份、增效剂3份、微生物菌剂载体20份、腐殖酸10份、尿素5份、磷酸一铵3份、硫酸钾3份。
所述微生物菌剂为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)和索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)按照质量比1:1:1混合得到；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.12939；所述伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.8545；所述索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillussonorensis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.15888。
本实施例微生物菌种均可通过中国普通微生物菌种保藏管理中心通过采购流程购买得到，无需进行生物保藏。其中枯草芽孢杆菌(CGMCC1.12939)原始保藏时间为2014年5月30日。伊拉克固氮螺菌(CGMCC1.8545)原始保藏时间为2008年9月1日。索诺拉沙漠芽孢杆菌(CGMCC1.15888)原始保藏时间为2016年9月20日。
所述微生物菌剂的制备方法为：将枯草芽孢杆菌、伊拉克固氮螺菌和索诺拉沙漠芽孢杆菌三种菌菌株分别接种于NB培养基中，在150-200r/min，30-37℃恒温摇床活化培养12h制得活化菌液；用100mL容量瓶定容50mLNB培养基，吸取1mL活化菌液接种于100mL容量瓶中30-37℃摇培24h，转速150-200r/min，制得种子液；再将种子液接种于50L或100L液体发酵罐中发酵培养，培养至悬浮液的吸光度为OD600≈1.0，得到三种菌株的发酵液，然后按照1:1:1的体积比混合，得到微生物菌剂。
所述NB培养基组成为蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl5g，蒸馏水1L，pH7.2-7.4。
所述增效剂为纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合得到。
所述纳米碳的制备方法为：将5g淀粉和1g纤维素分散于水中，在机械搅拌下95℃水浴加热1h，形成半透明溶胶，将溶胶自然冷却至室温，然后在室温下继续老化24h后形成白色湿凝胶，-20℃下冷藏24h，后放入冷冻干燥机中在-40℃下冷冻干燥48h后，再放入坩埚，于通有氮气的管式炉中以5℃/min的升温速率升至700℃，并在700℃时对其保温2h，自然降温后研磨得到纳米碳。
所述微生物菌剂载体为硅藻土。
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥的制备方法，包括以下制备步骤：
(1)制备微生物菌剂，并将制备好的微生物菌剂进行喷雾干燥，得到微生物菌粉；
(2)制备纳米碳，并将纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合后，加入微生物菌粉混合均匀，得到预混料A；
(3)将预混料A与微生物菌剂载体混合均匀，充分吸附后，加入腐殖酸、尿素、磷酸一铵、硫酸钾混合造粒，干燥包装入库即可。
实施例2
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥，包括以下重量份的原料制备而成：微生物菌剂15份、增效剂5份、微生物菌剂载体30份、腐殖酸15份、尿素10份、磷酸一铵4份、硫酸钾4份。
所述微生物菌剂为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)和索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)按照质量比1:1:1混合得到；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.12939；所述伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.8545；所述索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillussonorensis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.15888。
本实施例微生物菌种均可通过中国普通微生物菌种保藏管理中心通过采购流程购买得到，无需进行生物保藏。其中枯草芽孢杆菌(CGMCC1.12939)原始保藏时间为2014年5月30日。伊拉克固氮螺菌(CGMCC1.8545)原始保藏时间为2008年9月1日。索诺拉沙漠芽孢杆菌(CGMCC1.15888)原始保藏时间为2016年9月20日。
更进一步的，所述微生物菌剂的制备方法为：将枯草芽孢杆菌、伊拉克固氮螺菌和索诺拉沙漠芽孢杆菌三种菌菌株分别接种于NB培养基中，在150-200r/min，30-37℃恒温摇床活化培养12h制得活化菌液；用100mL容量瓶定容50mLNB培养基，吸取1mL活化菌液接种于100mL容量瓶中30-37℃摇培24h，转速150-200r/min，制得种子液；再将种子液接种于50L或100L液体发酵罐中发酵培养，培养至悬浮液的吸光度为OD600≈1.0，得到三种菌株的发酵液，然后按照1:1:1的体积比混合，得到微生物菌剂。
所述NB培养基组成为蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl5g，蒸馏水1L，pH7.2-7.4。
所述增效剂为纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合得到。
所述纳米碳的制备方法为：将5g淀粉和1g纤维素分散于水中，在机械搅拌下95℃水浴加热1h，形成半透明溶胶，将溶胶自然冷却至室温，然后在室温下继续老化24h后形成白色湿凝胶，-20℃下冷藏24h，后放入冷冻干燥机中在-40℃下冷冻干燥48h后，再放入坩埚，于通有氮气的管式炉中以5℃/min的升温速率升至700℃，并在700℃时对其保温2h，自然降温后研磨得到纳米碳。
所述微生物菌剂载体为硅藻土。
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥的制备方法，包括以下制备步骤：
(1)制备微生物菌剂，并将制备好的微生物菌剂进行喷雾干燥，得到微生物菌粉；
(2)制备纳米碳，并将纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合后，加入微生物菌粉混合均匀，得到预混料A；
(3)将预混料A与微生物菌剂载体混合均匀，充分吸附后，加入腐殖酸、尿素、磷酸一铵、硫酸钾混合造粒，干燥包装入库即可。
实施例3
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥，包括以下重量份的原料制备而成：微生物菌剂17份、增效剂5份、微生物菌剂载体40份、腐殖酸15份、尿素8份、磷酸一铵4份、硫酸钾4份。
所述微生物菌剂为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)和索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)按照质量比1:1:1混合得到；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.12939；所述伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.8545；所述索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillussonorensis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.15888。
本实施例微生物菌种均可通过中国普通微生物菌种保藏管理中心通过采购流程购买得到，无需进行生物保藏。其中枯草芽孢杆菌(CGMCC1.12939)原始保藏时间为2014年5月30日。伊拉克固氮螺菌(CGMCC1.8545)原始保藏时间为2008年9月1日。索诺拉沙漠芽孢杆菌(CGMCC1.15888)原始保藏时间为2016年9月20日。
所述微生物菌剂的制备方法为：将枯草芽孢杆菌、伊拉克固氮螺菌和索诺拉沙漠芽孢杆菌三种菌菌株分别接种于NB培养基中，在150-200r/min，30-37℃恒温摇床活化培养12h制得活化菌液；用100mL容量瓶定容50mLNB培养基，吸取1mL活化菌液接种于100mL容量瓶中30-37℃摇培24h，转速150-200r/min，制得种子液；再将种子液接种于50L或100L液体发酵罐中发酵培养，培养至悬浮液的吸光度为OD600≈1.0，得到三种菌株的发酵液，然后按照1:1:1的体积比混合，得到微生物菌剂。
所述NB培养基组成为蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl5g，蒸馏水1L，pH7.2-7.4。
所述增效剂为纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合得到。
所述纳米碳的制备方法为：将5g淀粉和1g纤维素分散于水中，在机械搅拌下95℃水浴加热1h，形成半透明溶胶，将溶胶自然冷却至室温，然后在室温下继续老化24h后形成白色湿凝胶，-20℃下冷藏24h，后放入冷冻干燥机中在-40℃下冷冻干燥48h后，再放入坩埚，于通有氮气的管式炉中以5℃/min的升温速率升至700℃，并在700℃时对其保温2h，自然降温后研磨得到纳米碳。
所述微生物菌剂载体为硅藻土。
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥的制备方法，包括以下制备步骤：
(1)制备微生物菌剂，并将制备好的微生物菌剂进行喷雾干燥，得到微生物菌粉；
(2)制备纳米碳，并将纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合后，加入微生物菌粉混合均匀，得到预混料A；
(3)将预混料A与微生物菌剂载体混合均匀，充分吸附后，加入腐殖酸、尿素、磷酸一铵、硫酸钾混合造粒，干燥包装入库即可。
实施例4
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥，包括以下重量份的原料制备而成：微生物菌剂20份、增效剂6份、微生物菌剂载体40份、腐殖酸20份、尿素10份、磷酸一铵5份、硫酸钾5份。
所述微生物菌剂为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)和索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)按照质量比1:1:1混合得到；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.12939；所述伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.8545；所述索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillussonorensis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.15888。
本实施例微生物菌种均可通过中国普通微生物菌种保藏管理中心通过采购流程购买得到，无需进行生物保藏。其中枯草芽孢杆菌(CGMCC1.12939)原始保藏时间为2014年5月30日。伊拉克固氮螺菌(CGMCC1.8545)原始保藏时间为2008年9月1日。索诺拉沙漠芽孢杆菌(CGMCC1.15888)原始保藏时间为2016年9月20日。
所述微生物菌剂的制备方法为：将枯草芽孢杆菌、伊拉克固氮螺菌和索诺拉沙漠芽孢杆菌三种菌菌株分别接种于NB培养基中，在150-200r/min，30-37℃恒温摇床活化培养12h制得活化菌液；用100mL容量瓶定容50mLNB培养基，吸取1mL活化菌液接种于100mL容量瓶中30-37℃摇培24h，转速150-200r/min，制得种子液；再将种子液接种于50L或100L液体发酵罐中发酵培养，培养至悬浮液的吸光度为OD600≈1.0，得到三种菌株的发酵液，然后按照1:1:1的体积比混合，得到微生物菌剂。
所述NB培养基组成为蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl5g，蒸馏水1L，pH7.2-7.4。
所述增效剂为纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合得到。
所述纳米碳的制备方法为：将5g淀粉和1g纤维素分散于水中，在机械搅拌下95℃水浴加热1h，形成半透明溶胶，将溶胶自然冷却至室温，然后在室温下继续老化24h后形成白色湿凝胶，-20℃下冷藏24h，后放入冷冻干燥机中在-40℃下冷冻干燥48h后，再放入坩埚，于通有氮气的管式炉中以5℃/min的升温速率升至700℃，并在700℃时对其保温2h，自然降温后研磨得到纳米碳。
所述微生物菌剂载体为硅藻土。
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥的制备方法，包括以下制备步骤：
(1)制备微生物菌剂，并将制备好的微生物菌剂进行喷雾干燥，得到微生物菌粉；
(2)制备纳米碳，并将纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合后，加入微生物菌粉混合均匀，得到预混料A；
(3)将预混料A与微生物菌剂载体混合均匀，充分吸附后，加入腐殖酸、尿素、磷酸一铵、硫酸钾混合造粒，干燥包装入库即可。
对比例1
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥，包括以下重量份的原料制备而成：微生物菌剂20份、增效剂6份、微生物菌剂载体40份、腐殖酸20份、尿素10份、磷酸一铵5份、硫酸钾5份。
所述微生物菌剂为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)和索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)按照质量比1:1:1混合得到；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.12939；所述伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.8545；所述索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillussonorensis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.15888。
本对比例微生物菌种均可通过中国普通微生物菌种保藏管理中心通过采购流程购买得到，无需进行生物保藏。其中枯草芽孢杆菌(CGMCC1.12939)原始保藏时间为2014年5月30日。伊拉克固氮螺菌(CGMCC1.8545)原始保藏时间为2008年9月1日。索诺拉沙漠芽孢杆菌(CGMCC1.15888)原始保藏时间为2016年9月20日。
所述微生物菌剂的制备方法为：将枯草芽孢杆菌、伊拉克固氮螺菌和索诺拉沙漠芽孢杆菌三种菌菌株分别接种于NB培养基中，在150-200r/min，30-37℃恒温摇床活化培养12h制得活化菌液；用100mL容量瓶定容50mLNB培养基，吸取1mL活化菌液接种于100mL容量瓶中30-37℃摇培24h，转速150-200r/min，制得种子液；再将种子液接种于50L或100L液体发酵罐中发酵培养，培养至悬浮液的吸光度为OD600≈1.0，得到三种菌株的发酵液，然后按照1:1:1的体积比混合，得到微生物菌剂。
所述NB培养基组成为蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl5g，蒸馏水1L，pH7.2-7.4。
所述增效剂为海藻酸钠。
所述微生物菌剂载体为硅藻土。
一种促进小麦生长的有机微生物菌肥的制备方法，包括以下制备步骤：
(1)制备微生物菌剂，并将制备好的微生物菌剂进行喷雾干燥，得到微生物菌粉；
(2)制备纳米碳，并将纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合后，加入微生物菌粉混合均匀，得到预混料A；
(3)将预混料A与微生物菌剂载体混合均匀，充分吸附后，加入腐殖酸、尿素、磷酸一铵、硫酸钾混合造粒，干燥包装入库即可。
本对比例除了增效剂中不添加纳米碳外，其余原料和制备方法均同实施例4。
对比例2-10
改变实施例4菌株种类及组成比例，其余工艺参数均不变，即只改变菌株的体积比，设置对比例，进行后续试验，实施例4及对比例组成如表1所示：
表1实施例4及对比例微生物菌剂组成比例
| 枯草芽孢杆菌 | 伊拉克固氮螺菌 | 索诺拉沙漠芽孢杆菌 | |
| 实施例4 | 1 | 1 | 1 |
| 对比例2 | 1 | 2 | 1 |
| 对比例3 | 1 | 1 | 2 |
| 对比例4 | 2 | 1 | 1 |
| 对比例5 | 1 | 1 | 0 |
| 对比例6 | 1 | 0 | 1 |
| 对比例7 | 0 | 1 | 1 |
| 对比例8 | 1 | 0 | 0 |
| 对比例9 | 0 | 1 | 0 |
| 对比例10 | 0 | 0 | 1 |
解磷、解钾和固氮能力的测定：
按照实施例4，对比例2-10的方法制备微生物菌液：
微生物菌剂的制备方法为：将菌株分别接种于NB培养基中，在150-200r/min，30-37℃恒温摇床活化培养12h制得活化菌液；用100mL容量瓶定容50mLNB培养基，吸取1mL活化菌液接种于100mL容量瓶中30-37℃摇培24h，转速150-200r/min，制得种子液；再将种子液接种于50L或100L液体发酵罐中发酵培养，培养至悬浮液的吸光度为OD600≈1.0，得到三种菌株的发酵液，按照实施例或者对比例要求比例混合后得到微生物菌液。
吸取2mL微生物菌液接种到解磷、解钾、固氮菌的发酵培养基中。
无氮培养基组成为：KH2PO4 0.2g、NaCl0.2g、MgSO4`7H2O 0.2g、CaCO3 5.0g、CaSO4·2H2O0.1g、甘露醇10g、琼脂20g(液体培养基则不加)、蒸馏水1000mL，调pH至7.0，121℃下灭菌20min。
无机磷固体培养基组成为：葡萄糖10g、Ca3(PO4)225g、(NH4)2SO40.5g、MgSO4·7H2O0.3g、NaCl0.3g、KCl0.3g、FeSO40.03g、MnSO4·H2O0.03g、琼脂20g(液体培养基则不加)、蒸馏水1000mL，调pH至7.0。
解钾培养基组成为：Na2HPO42g、FeCl30.005g、MgSO4·7H2O0.5g、CaCO30.1g、蔗糖5g，钾长石粉(去离子水洗涤5次)1g、溴百里香酚蓝0.1g、琼脂20g(液体培养基则不加)、蒸馏水1000mL，调pH至7.0。
其中设加等量无菌水作为空白对照处理，每个处理设3个重复，取平均值。分别采用钼锑抗比色法、原子吸收分光光度计法和全自动凯氏定氮法，测定可溶性磷含量、有效态钾含量和总氮量。
表2固氮、解磷、解钾实验测试结果
从表中数据可以看出，本发明实施例4三种菌株等比例混合后得到的微生物菌液，具有较好的溶磷、解钾和固氮的功效，而改变了微生物菌剂组成的对比例2-10，各菌株间的协同平衡作用被打破，溶磷、解钾、固氮的功效均有所减弱。
大田实验
实验地点：山东省德州市，供试小麦品种为扬麦20
试验设计：处理S1-4使用本发明实施例微生物菌剂20kg/亩，处理D2-10使用对比例2-10微生物菌剂，用量同实施例，同时设置空白对照，即不施用任何菌剂。
播种方式为人工播撒，播种量为150kg/hm2。每个处理设3个重复，小区面积为110m2，小区随机排列。
调查项目
每小区固定10丛为观察对象，每7d调查1次苗分蘖数，收获成熟期测定产量、穂长、千粒质量等。播前和收获后采集混合土壤样品，测有机质、碱解氮、有效磷、速效钾含量及pH值5项。有机质含量采用重铬酸钾容量法测定；碱解氮含量采用碱解-扩散法测定；有效磷含量采用钼蓝比色法测定；速效钾含量采用火焰光度法测定；土壤pH值采用电位法测定。每小区随机调查4点，每点调查100穗，分别记录小麦赤霉病的发病穗数，参照《农药田间药效试验准则》的5级分类法统计赤霉病发病情况，计算病情指数和防治效果：病情指数＝Σ(各级病株数×相对级数值)/(调查总株数×发病最高病级)×100；防治效果＝(空白对照病情指数－处理病情指数)/空白对照病情指数×100％。病穗分级标准：0级，全穗无病；1级，枯穗面积占全穗面积的1/4以下；2级，枯穗面积占全穗面积的1/4～1/2；3级，枯穗面积占全穗面积的1/2～3/4；4级，枯穗面积占全穗面积的3/4以上。
表3小麦种植实验效果
表4土壤性状
需要说明的是，上述实施例仅仅是实现本发明的优选方式的部分实施例，而非全部实施例。显然，基于本发明的上述实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的其他所有实施例，都应当属于本发明保护的范围。
Claims (8)
1.一种促进小麦生长的有机微生物菌肥，其特征在于，包括以下重量份的原料制备而成：微生物菌剂10-20份、增效剂3-6份、微生物菌剂载体20-40份、腐殖酸10-20份、尿素5-10份、磷酸一铵3-5份、硫酸钾3-5份。
2.根据权利要求1所述促进小麦生长的有机微生物菌肥，其特征在于，所述微生物菌剂为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)和索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)按照质量比1:1:1混合得到；所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.12939；所述伊拉克固氮螺菌(Azospirillum irakense)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.8545；所述索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)购于中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.15888。
3.根据权利要求2所述促进小麦生长的有机微生物菌肥，其特征在于，所述微生物菌剂的制备方法为：将枯草芽孢杆菌、伊拉克固氮螺菌和索诺拉沙漠芽孢杆菌三种菌菌株分别接种于NB培养基中，在150-200r/min，30-37℃恒温摇床活化培养12h制得活化菌液；用100mL容量瓶定容50mLNB培养基，吸取1mL活化菌液接种于100mL容量瓶中30-37℃摇培24h，转速150-200r/min，制得种子液；再将种子液接种于50L或100L液体发酵罐中发酵培养，培养至悬浮液的吸光度为OD600≈1.0，得到三种菌株的发酵液，然后按照1:1:1的体积比混合，得到微生物菌剂。
4.根据权利要求3所述促进小麦生长的有机微生物菌肥，其特征在于，所述NB培养基组成为蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl5g，蒸馏水1L，pH7.2-7.4。
5.根据权利要求1所述促进小麦生长的有机微生物菌肥，其特征在于，所述增效剂为纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合得到。
6.根据权利要求5所述促进小麦生长的有机微生物菌肥，其特征在于，所述纳米碳的制备方法为：将5g淀粉和1g纤维素分散于水中，在机械搅拌下95℃水浴加热1h，形成半透明溶胶，将溶胶自然冷却至室温，然后在室温下继续老化24h后形成白色湿凝胶，-20℃下冷藏24h，后放入冷冻干燥机中在-40℃下冷冻干燥48h后，再放入坩埚，于通有氮气的管式炉中以5℃/min的升温速率升至700℃，并在700℃时对其保温2h，自然降温后研磨得到纳米碳。
7.根据权利要求1所述促进小麦生长的有机微生物菌肥，其特征在于，所述微生物菌剂载体为硅藻土。
8.一种权利要求1-7任意一项所述促进小麦生长的有机微生物菌肥的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：
(1)制备微生物菌剂，并将制备好的微生物菌剂进行喷雾干燥，得到微生物菌粉；
(2)制备纳米碳，并将纳米碳和海藻酸钠按照质量比1:1混合后，加入微生物菌粉混合均匀，得到预混料A；
(3)将预混料A与微生物菌剂载体混合均匀，充分吸附后，加入腐殖酸、尿素、磷酸一铵、硫酸钾混合造粒，干燥包装入库即可。
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