CN116994846A - 一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠及其制备方法，该硅基磁珠，包括SiO2层，还包括微米级聚苯乙烯模板微球，微米级聚苯乙烯模板微球的表面设有Fe3O4层，SiO2层包裹在Fe3O4层的外表面；微米级聚苯乙烯模板微球采用的材料为改性的磺化聚苯乙烯。本发明磁珠具有粒径大，颗粒均一性及分散性好，磁响应强，磁珠大小可控性强等优势，能用于生物分离中多种不同需求的场景，特别是在核酸纯化样本的纯化中会取得良好的效果。本发明制备方法采用分散聚合法来制备微米级聚苯乙烯模板微球，具有杂质少，粒径均一程度高，具有分散性好，形貌规整，不易被氧化，工艺操作简单，原料简单易得，利于后续改性的特点。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物磁珠技术领域，具体是涉及一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠及其制备方法。
背景技术
磁珠是一种包被有生物活性基团的功能化载体，可分散于基液中形成磁性液体材料，生物活性基团可以与多种生物活性物质发生偶联，兼具有液体的流动性和固体磁性颗粒材料的双重特点。磁珠在外磁场的作用下可以定向移动和集中，撤去外磁场后，又可以恢复原来的结构与状态，从而使复杂的液固分离技术变得快捷简便。通过简单的洗脱即可得到纯度很高的靶向物质。目前，磁珠已被广泛应用于免疫分析、核酸分离提取、细胞分选、酶的固定等多个领域。对于核酸提取技术而言，磁珠法具有常规提取方法无法比拟的独特优势，诸如提取和纯化一步完成，定量提取，实现提取自动化，对于初学者而言操作简便。
纳米Fe3O4由于其制备简单、稳定性高、较强的超顺磁性、生物相容性和表面易于修饰等特点，成为目前应用最广泛的磁珠材料之一。但是，由于纳米Fe3O4的小尺寸效应、磁偶极子引力等作用，磁性纳米粒子易于团聚，且化学稳定性不高易受氧化，表面羟基不足，导致其难以直接应用到生物领域。
目前常规的硅基磁珠结构是核壳结构，即内层为纳米级别的磁性纳米粒子，外层包裹硅层，以硅羟基作为官能团吸附核酸分子链。其基本合成路线为：一.使用溶剂热法制备磁性纳米粒子；二.使用高分子修饰磁性纳米粒子；三、使用硅层进行原位包覆。
常规的核壳结构的硅基磁珠的缺点在于：对于磁珠来说，尺寸的均匀性是一个非常重要的指标，在现有的技术下，其合成的磁性纳米粒子的尺寸无法在做到尺寸超过500nm的同时保持粒径的均一性，这也意味着合成出来的磁珠只能在均匀性和磁响应性两者间做取舍，粒径的均一性会直接影响提取时的效果，尺寸的差异大会使得提取效果不稳定，测试所得到的的数据精准度不高。此外合成的磁核由于小尺寸效应、磁偶极子引力等作用，磁性纳米粒子易于团聚，且化学稳定性不高易受氧化。
发明内容
本发明的目的在于提出一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠，以解决现有技术中所存在的一个或多个技术问题，至少提供一种有益的选择或创造条件。
本发明的另一目的在于提供一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：
一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠，包括SiO2层，还包括微米级聚苯乙烯模板微球，所述微米级聚苯乙烯模板微球的表面设有Fe3O4层，所述SiO2层包裹在Fe3O4层的外表面；所述微米级聚苯乙烯模板微球采用的材料为改性的磺化聚苯乙烯。
优选的，包裹SiO2层后的磁珠粒径最大能达到1.5μm。
一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，包括以下步骤：
（1）利用分散聚合法制备微米级聚苯乙烯模板微球：在不活泼气体的保护下利用分散聚合法进行微米级聚苯乙烯模板微球的制备；
（2）聚苯乙烯磺化改性：利用浓硫酸对聚苯乙烯模板微球进行磺化改性；
（3）表面包覆Fe3O4：通入不活泼气体，利用改性后的磺酸基团对铁离子的吸引，诱导Fe3O4在微米级聚苯乙烯模板微球的表面原位生长，形成Fe3O4层；
（4）SiO2包覆：在步骤（3）制备的Fe3O4层的表面包裹一层SiO2。
优选的，所述步骤（1）中，制备聚苯乙烯模板微球的方法如下：将洗涤除去阻聚剂后的苯乙烯加入乙醇和水中，乙醇和水的质量比值为1:3～1:6；搅拌均匀，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，加入引发剂，在55℃～75℃下反应结束后，用滤网过滤，离心洗涤，烘干研磨后得到微米级聚苯乙烯模板微球；所述引发剂为偶氮二异丁腈、过氧化苯甲酰中的至少一种。
优选的，所述步骤（2）中，聚苯乙烯磺化改性的具体步骤如下：将步骤（1）制备的微米级聚苯乙烯模板微球，加入到浓硫酸中，超声搅拌20min～40min，使聚苯乙烯充分分散至浓硫酸内，然后加热至30℃～50℃，持续反应1h～4h；浓硫酸与微米级聚苯乙烯模板微球的质量比值为80:1～30:1。
优选的，所述步骤（3）中，表面包覆Fe3O4具体步骤如下：将步骤（2）制备的磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂、FeSO4.7H2O分散于水中，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，搅拌，于70℃～90℃保温，反应4h～6h得到Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球。
优选的，所述步骤（3）中，磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂和FeSO4.7H2O分散于水中后，磺化聚苯乙烯的浓度为0.01g/ml～0.05g/ml，FeSO4.7H2O的浓度为0.04g/ml～0.06g/ml，氧化剂的浓度为0.001g/ml～0.005g/ml，分散剂的浓度为0.003g/ml～0.006g/ml，氨水的浓度为0.01g/ml～0.05g/ml。
优选的，所述催化剂包括但不限于氨水、乙醇胺、氢氧化钠、氢氧化钾中的一种或几种；所述氧化剂包括但不限于次氯酸钠、硝酸钠、硝酸钾、过氧化氢中的至少一种；所述分散剂剂包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮K30、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇2000中的一种或几种。
优选的，所述步骤（4）中，SiO2包覆的具体步骤如下：将步骤（3）制备的Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球，催化剂分散于乙醇水溶液中，持续搅拌，超声25～35min分散，再用蠕动泵滴加正硅酸四乙酯，期间持续搅拌超声至滴加完成后，再保持超声10～20min后关闭超声，持续搅拌使其反应10～14h。
优选的，所述步骤（4）中，所述催化剂包括但不限于氨水、氢氧化钠、四甲基氢氧化铵中的一种或几种；滴加正硅酸四乙酯的速度为5～15rpm。
本发明的有益效果在于：
第一、本发明磁珠采用了以聚苯乙烯微球为模板，并在其外面依次包裹Fe3O4和SiO2的夹心结构，由于聚苯乙烯微球是较容易做到尺寸均一的且其易于改性，利于之后的原位生成，所以制成的磁珠尺寸均一性好，使得提取效果更加稳定，测试所得到的的数据精准度高；
第二、本发明磁珠中，作为模板的聚苯乙烯微球的密度较小，所以本发明磁珠相较于常规核壳结构的磁珠来说整体的密度也更小，故而能更稳定地分散到溶液中，具有更良好的悬浮性；
第三、在包覆硅层之后，其尺寸可以达到1.5μm，远大于市面上大多数常规的核壳结构的磁珠，相互之间不会团聚；
第四、本发明制备方法中，采用浓硫酸对聚苯乙烯进行了磺化改性，让其负载磺酸基团具有负电性，在表面包覆Fe3O4的步骤中，使聚苯乙烯微球对Fe3O4具有极佳的吸引能力，有助于Fe3O4在聚苯乙烯微球上的均匀沉积，原位生长，工艺操作简单，用料少，无毒无害；Fe3O4使得磁珠具有极佳的顺磁性，所以本发明磁珠具有更高的磁响应性，具有较高的提取效率，能够在高通量提取时节省下更多的时间及人力物力;
第五、本发明制备方法中，采用分散聚合法来制备微米级聚苯乙烯模板微球，具有杂质少，粒径均一程度高，工艺操作简单，原料简单易得，利于后续改性的特点；
第六、本发明制备方法中，采用氧化沉淀法合成的Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球，分散性好，形貌规整，不易被氧化，在SiO2包覆后，硅层完整，具有不漏磁，耐强酸的特点。
附图说明
利用附图对本发明作进一步说明，但附图中的实施例不构成对本发明的任何限制，对于本领域的普通技术人员，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据以下附图获得其它的附图：
图1为本发明夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的结构示意图；
图2为本发明制备方法的流程图。
图中：1、聚苯乙烯微球；2、Fe3O4层；3、SiO2层。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步详细的描述，需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
在本发明的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上表面”、“下表面”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”“内”、“外”、“正转”、“反转”、“轴向”、“径向”、“周向”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。
如图1所示，一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠，包括SiO2层3，还包括聚苯乙烯微球1，所述聚苯乙烯微球1的表面设有Fe3O4层2，所述SiO2层3包裹在Fe3O4层2的外表面。所述所述聚苯乙烯微球1采用的材料为改性的磺化聚苯乙烯；包裹SiO2层3后的磁珠粒径最大能达到1.5μm，远大于市面上大多数常规的核壳结构的磁珠，相互之间不会团聚。
本发明磁珠的特点：采用了以聚苯乙烯微球为模板，并在其外面依次包裹Fe3O4和SiO2的夹心结构，由于聚苯乙烯微球是较容易做到尺寸均一的且其易于改性，利于之后的原位生成，所以制成的磁珠尺寸均一性好，使得提取效果更加稳定，测试所得到的的数据精准度高；另外，作为模板的聚苯乙烯微球的密度较小，所以本发明磁珠相较于常规核壳结构的磁珠来说整体的密度也更小，故而能更稳定地分散到溶液中，具有更良好的悬浮性。
总之，本发明磁珠具有粒径大，颗粒均一性及分散性好，磁响应强，磁珠大小可控性强等优势，能用于生物分离中多种不同需求的场景，特别是在核酸纯化样本的纯化中会取得良好的效果。
实施例1
一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，包括以下步骤：
利用分散聚合法制备微米级聚苯乙烯模板微球：在不活泼气体的保护下利用分散聚合法进行微米级聚苯乙烯模板微球的制备；
制备聚苯乙烯模板微球的具体步骤如下：将洗涤除去阻聚剂后的苯乙烯加入乙醇和水中，乙醇和水的质量比值为1:4.5；搅拌均匀，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，加入引发剂，在65℃下反应结束后，用滤网过滤，离心洗涤，烘干研磨后得到微米级聚苯乙烯模板微球；所述引发剂为偶氮二异丁腈。
聚苯乙烯磺化改性：利用浓硫酸对聚苯乙烯模板微球进行磺化改性；聚苯乙烯磺化改性的具体步骤如下：将步骤（1）制备的微米级聚苯乙烯模板微球，加入到浓硫酸中，超声搅拌30min，使聚苯乙烯充分分散至浓硫酸内，然后加热至40℃，持续反应2.5h；浓硫酸与微米级聚苯乙烯模板微球的质量比值为55:1。
表面包覆Fe3O4：通入不活泼气体，利用改性后的磺酸基团对铁离子的吸引，诱导Fe3O4在微米级聚苯乙烯模板微球的表面原位生长，形成Fe3O4层；表面包覆Fe3O4具体步骤如下：将步骤（2）制备的磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂、FeSO4.7H2O分散于水中，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，搅拌，于80℃保温，反应5h得到Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球。
磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂和FeSO4.7H2O分散于水中后，磺化聚苯乙烯的浓度为0.03g/ml，FeSO4.7H2O的浓度为0.05g/ml，氧化剂的浓度为0.003g/ml，分散剂的浓度为0.0045g/ml，氨水的浓度为0.03g/ml。所述催化剂为氨水；所述氧化剂为硝酸钠；所述分散剂剂为十二烷基苯磺酸钠。
（4）SiO2包覆：在步骤（3）制备的Fe3O4层的表面包裹一层SiO2。
SiO2包覆的具体步骤如下：将步骤（3）制备的Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球，催化剂分散于乙醇水溶液中，持续搅拌，超声30min分散，再用蠕动泵滴加正硅酸四乙酯，期间持续搅拌超声至滴加完成后，再保持超声15min后关闭超声，持续搅拌使其反应12h。所述催化剂为氢氧化钠；滴加正硅酸四乙酯的速度为10rpm，该转速为蠕动泵的转速。
实施例2
一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，包括以下步骤：
利用分散聚合法制备微米级聚苯乙烯模板微球：在不活泼气体的保护下利用分散聚合法进行微米级聚苯乙烯模板微球的制备；
制备聚苯乙烯模板微球的具体步骤如下：将洗涤除去阻聚剂后的苯乙烯加入乙醇和水中，乙醇和水的质量比值为1:3；搅拌均匀，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，加入引发剂，在55℃下反应结束后，用滤网过滤，离心洗涤，烘干研磨后得到微米级聚苯乙烯模板微球；所述引发剂为偶氮二异丁腈、过氧化苯甲酰中的至少一种。
聚苯乙烯磺化改性：利用浓硫酸对聚苯乙烯模板微球进行磺化改性；聚苯乙烯磺化改性的具体步骤如下：将步骤（1）制备的微米级聚苯乙烯模板微球，加入到浓硫酸中，超声搅拌20min，使聚苯乙烯充分分散至浓硫酸内，然后加热至30℃，持续反应1h；浓硫酸与微米级聚苯乙烯模板微球的质量比值为80:1。
表面包覆Fe3O4：通入不活泼气体，利用改性后的磺酸基团对铁离子的吸引，诱导Fe3O4在微米级聚苯乙烯模板微球的表面原位生长，形成Fe3O4层；表面包覆Fe3O4具体步骤如下：将步骤（2）制备的磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂、FeSO4.7H2O分散于水中，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，搅拌，于70℃保温，反应4h得到Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球。
磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂和FeSO4.7H2O分散于水中后，磺化聚苯乙烯的浓度为0.01g/ml，FeSO4.7H2O的浓度为0.04g/ml，氧化剂的浓度为0.001g/ml，分散剂的浓度为0.003g/ml，氨水的浓度为0.01g/ml。所述催化剂为乙醇胺；所述氧化剂为次氯酸钠；所述分散剂剂为聚乙烯吡咯烷酮K30。
（4）SiO2包覆：在步骤（3）制备的Fe3O4层的表面包裹一层SiO2。
SiO2包覆的具体步骤如下：将步骤（3）制备的Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球，催化剂分散于乙醇水溶液中，持续搅拌，超声25min分散，再用蠕动泵滴加正硅酸四乙酯，期间持续搅拌超声至滴加完成后，再保持超声10min后关闭超声，持续搅拌使其反应10h。所述催化剂为氨水；滴加正硅酸四乙酯的速度为5rpm，该转速为蠕动泵的转速。
实施例3
一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，包括以下步骤：
利用分散聚合法制备微米级聚苯乙烯模板微球：在不活泼气体的保护下利用分散聚合法进行微米级聚苯乙烯模板微球的制备；
制备聚苯乙烯模板微球的具体步骤如下：将洗涤除去阻聚剂后的苯乙烯加入乙醇和水中，乙醇和水的质量比值为1:6；搅拌均匀，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，加入引发剂，在75℃下反应结束后，用滤网过滤，离心洗涤，烘干研磨后得到微米级聚苯乙烯模板微球；所述引发剂为偶氮二异丁腈、过氧化苯甲酰中的至少一种。
聚苯乙烯磺化改性：利用浓硫酸对聚苯乙烯模板微球进行磺化改性；聚苯乙烯磺化改性的具体步骤如下：将步骤（1）制备的微米级聚苯乙烯模板微球，加入到浓硫酸中，超声搅拌40min，使聚苯乙烯充分分散至浓硫酸内，然后加热至50℃，持续反应4h；浓硫酸与微米级聚苯乙烯模板微球的质量比值为30:1。
表面包覆Fe3O4：通入不活泼气体，利用改性后的磺酸基团对铁离子的吸引，诱导Fe3O4在微米级聚苯乙烯模板微球的表面原位生长，形成Fe3O4层；表面包覆Fe3O4具体步骤如下：将步骤（2）制备的磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂、FeSO4.7H2O分散于水中，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，搅拌，于90℃保温，反应4h～6h得到Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球。
磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂和FeSO4.7H2O分散于水中后，磺化聚苯乙烯的浓度为0.05g/ml，FeSO4.7H2O的浓度为0.06g/ml，氧化剂的浓度为0.005g/ml，分散剂的浓度为0.006g/ml，氨水的浓度为0.05g/ml。所述催化剂为氢氧化钾；所述氧化剂为过氧化氢；所述分散剂剂为聚乙二醇2000。
（4）SiO2包覆：在步骤（3）制备的Fe3O4层的表面包裹一层SiO2。
SiO2包覆的具体步骤如下：将步骤（3）制备的Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球，催化剂分散于乙醇水溶液中，持续搅拌，超声35min分散，再用蠕动泵滴加正硅酸四乙酯，期间持续搅拌超声至滴加完成后，再保持超声20min后关闭超声，持续搅拌使其反应14h。所述催化剂四甲基氢氧化铵；滴加正硅酸四乙酯的速度为15rpm。
工作原理：上述一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法的3个实施例中，采用浓硫酸对聚苯乙烯进行了磺化改性，让其负载磺酸基团具有负电性，在表面包覆Fe3O4的步骤中，使聚苯乙烯微球对Fe3O4具有极佳的吸引能力，有助于Fe3O4在聚苯乙烯微球上的均匀沉积，原位生长，工艺操作简单，用料少，无毒无害；Fe3O4使得磁珠具有极佳的顺磁性，所以本发明磁珠具有更高的磁响应性，具有较高的提取效率，能够在高通量提取时节省下更多的时间及人力物力；尤其是利用氧化沉淀法合成的Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球，具有分散性好，形貌规整，不易被氧化的特点，在SiO2包覆后，硅层完整，不漏磁，耐强酸。另外，本发明的步骤（1）采用分散聚合法来制备得到的微米级聚苯乙烯模板微球，具有杂质少，粒径均一程度高，工艺操作简单，原料简单易得，利于后续改性的特点。本发明制备方法中。
此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (10)
1.一种夹心结构的核酸提取用硅基磁珠，包括SiO2层，其特征在于：还包括微米级聚苯乙烯模板微球，所述微米级聚苯乙烯模板微球的表面设有Fe3O4层，所述SiO2层包裹在Fe3O4层的外表面；所述微米级聚苯乙烯模板微球采用的材料为改性的磺化聚苯乙烯。
2.根据权利要求1所述夹心结构的核酸提取用硅基磁珠，其特征在于：包裹SiO2层后的磁珠粒径最大能达到1.5μm。
3.根据权利要求1至2任一何所述夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）利用分散聚合法制备微米级聚苯乙烯模板微球：在不活泼气体的保护下利用分散聚合法进行微米级聚苯乙烯模板微球的制备；
（2）聚苯乙烯磺化改性：利用浓硫酸对聚苯乙烯模板微球进行磺化改性；
（3）表面包覆Fe3O4：通入不活泼气体，利用改性后的磺酸基团对铁离子的吸引，诱导Fe3O4在微米级聚苯乙烯模板微球的表面原位生长，形成Fe3O4层；
（4）SiO2包覆：在步骤（3）制备的Fe3O4层的表面包裹一层SiO2。
4.根据权利要求3所述夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，制备聚苯乙烯模板微球的方法如下：将洗涤除去阻聚剂后的苯乙烯加入乙醇和水中，乙醇和水的质量比值为1:3～1:6；搅拌均匀，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，加入引发剂，在55℃～75℃下反应结束后，用滤网过滤，离心洗涤，烘干研磨后得到微米级聚苯乙烯模板微球；所述引发剂为偶氮二异丁腈、过氧化苯甲酰中的至少一种。
5.根据权利要求3所述夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中，聚苯乙烯磺化改性的具体步骤如下：将步骤（1）制备的微米级聚苯乙烯模板微球，加入到浓硫酸中，超声搅拌20min～40min，使聚苯乙烯充分分散至浓硫酸内，然后加热至30℃～50℃，持续反应1h～4h；浓硫酸与微米级聚苯乙烯模板微球的质量比值为80:1～30:1。
6.根据权利要求3所述夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中，表面包覆Fe3O4具体步骤如下：将步骤（2）制备的磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂、FeSO4.7H2O分散于水中，通入不活泼气体，不活泼气体为氮气，搅拌，于70℃～90℃保温，反应4h～6h得到Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球。
7.根据权利要求6所述夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中，磺化聚苯乙烯、氧化剂、分散剂、催化剂和FeSO4.7H2O分散于水中后，磺化聚苯乙烯的浓度为0.01g/ml～0.05g/ml，FeSO4.7H2O的浓度为0.04g/ml～0.06g/ml，氧化剂的浓度为0.001g/ml～0.005g/ml，分散剂的浓度为0.003g/ml～0.006g/ml，氨水的浓度为0.01g/ml～0.05g/ml。
8.根据权利要求7所述夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，其特征在于：所述催化剂包括但不限于氨水、乙醇胺、氢氧化钠、氢氧化钾中的一种或几种；所述氧化剂包括但不限于次氯酸钠、硝酸钠、硝酸钾、过氧化氢中的至少一种；所述分散剂剂包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮K30、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇2000中的一种或几种。
9.根据权利要求3所述夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中，SiO2包覆的具体步骤如下：将步骤（3）制备的Fe3O4包覆的聚苯乙烯微球，催化剂分散于乙醇水溶液中，持续搅拌，超声25～35min分散，再用蠕动泵滴加正硅酸四乙酯，期间持续搅拌超声至滴加完成后，再保持超声10～20min后关闭超声，持续搅拌使其反应10～14h。
10.根据权利要求9所述夹心结构的核酸提取用硅基磁珠的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中，所述催化剂包括但不限于氨水、氢氧化钠、四甲基氢氧化铵中的一种或几种；滴加正硅酸四乙酯的速度为5～15rpm。
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