CN116987750A - 一种植物活性蛋白粉及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种植物活性蛋白粉的制备方法，具体为将大豆与花生按照质量比(1‑10)：1混合，浸泡，蒸煮作为发酵底物，待温度降至37‑40℃，将复合菌剂均匀接种至发酵底物中，复合菌剂用量为发酵底物质量的0.5‑2％，在37‑42℃温度下发酵2‑3天，再转移至0‑4℃冷藏2‑3天，冷冻干燥，粉碎得到植物活性蛋白粉。本发明最优选的复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉组成的组，使用所述复合菌剂发酵得到的植物蛋白粉溶解性好，营养价值高。

Description

一种植物活性蛋白粉及其制备方法
技术领域
本发明植物活性蛋白制备技术领域，具体涉及一种植物活性蛋白粉及其制备方法。
背景技术
植物蛋白是从植物里提取得到，营养与动物蛋白相仿，但是比动物蛋白更易于消化。在生产上，植物蛋白相对于动物蛋白含量较多，来源广泛，加工生产的成本和工艺相对容易和廉价，并且植物蛋白中胆固醇含量相较动物蛋白含量更低，含有较多的膳食纤维、维生素E、不饱和脂肪等健康成分。多数植物蛋白食品中还含有特殊的保健成分，如具有类雌激素作用的大豆异黄酮、具有降血脂作用的植物固醇、具有防癌和抗衰老作用的多酚类抗氧化物质等。所以，植物蛋白类产品食用更安全，适用于特殊人群食用，市场前景较好。
由于大豆产量高，蛋白质含量高，目前市场上多数植物蛋白产品是大豆蛋白粉，但是由于大豆蛋白发酵技术参差不齐，导致大豆蛋白产品鱼龙混杂，主要存在以下问题：1，粗蛋白含量高，消化率不足，蛋白分子量大，不易吸收；2，现有的植物蛋白粉均存在难溶的缺陷，在水中不易溶解，形成颗粒状不溶物，影响食用。因此，在大豆蛋白粉的基础上进一步开发和利用，解决其存在的缺陷是提高产品附加值的快速途径。
专利文献CN201710190455.8公开一种微生物酶解大豆蛋白的技术方案，具体是将80-90份豆粕与1-10份微生物浓缩酵素蛋白经过冷制粒装置制备得到。其中，所述微生物浓缩酵素蛋白是由饲料原料经微生物发酵酶解后制得，所述饲料原料为豆粕、菜粕或棉粕，微生物发酵使用的微生物菌剂为枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和酵母菌。
专利文献CN202211075804.9公开一种花生蛋白肽的制备方法，具体是将花生蛋白提取液中加入复合蛋白酶进行酶解制备得到，所述花生蛋白提取液是将花生粕粉碎，与水混合，浸提2-3小时，离心收集上层溶液得到。
本发明技术人员在长期工作实践中发现，造成上述问题难以克服的主要问题在于植物蛋白发酵技术，有一些菌株在大豆粕中不易生长繁殖，降解效率低，导致得到的大豆蛋白分子量大，导致食用者出现过敏现象。其次，目前大多数植物蛋白粉的加工原料是豆粕，即大豆经提取豆油后得到的副产品，虽然豆粕蛋白质含量高，但是一些营养成分已经随着油脂流失，并且豆粕中除了蛋白质还含有纤维素和半纤维素，但是发酵工艺并不关注这部分物质，导致发酵产物吸收效率低。
基于上述背景，本发明提供一种植物蛋白粉制备方法，所述方法选用全大豆和花生作为发酵原料，优选适宜生长的菌作为发酵菌，获得的植物蛋白营养价值高，溶解度好，易被人体吸收。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种以大豆和花生作为发酵原料制备得到的植物活性蛋白粉。本发明另一个目的是提供一种上述植物活性蛋白粉的制备方法。本发明还有一个目的是提供一种复合菌剂，所述复合菌剂适用于以大豆和花生为发酵底物制备活性蛋白。
本发明包括如下技术方案：
第一方面，本发明提供一种植物活性蛋白粉的制备方法，所述方法包括如下步骤：
将大豆与花生按照质量比(1-10)：1混合，浸泡，蒸煮作为发酵底物，待温度降至37-40℃，将复合菌剂均匀接种至发酵底物中，复合菌剂用量为发酵底物质量的0.5-2％，在37-42℃温度下发酵2-3天，再转移至0-4℃冷藏2-3天，冷冻干燥，粉碎得到植物活性蛋白粉。
优选的，所述发酵温度为40-42℃，发酵时间24-26h，发酵后每7-8h通风0.2-0.5h，风速3-5m/s，风压100-120Pa。
在本发明的具体实施方式中，所述发酵时间为待发酵底物表面出现均匀覆盖的菌丝为止，说明发酵充分。
本发明所述的复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酵母菌和霉菌的组合，在所述复合菌剂中，枯草芽孢杆菌、酵母菌、霉菌的质量比为(30-35)：(6-18)：(5-12)。
其中，酵母菌选自酿酒酵母和/或毕赤酵母，所述毕赤酵母为季也蒙毕赤酵母、巴斯德毕赤酵母中的一种或两种以上的组合。
在本发明的一个具体实施方式中，所述酵母菌为酿酒酵母。
在本发明的一个具体实施方式中，所述酵母菌为酿酒酵母与巴斯德毕赤酵母的组合，酿酒酵母与巴斯德毕赤酵母的质量比为(7-12)：(1-8)。
在本发明的一个具体实施方式中，所述酵母菌为酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母与季也蒙毕赤酵母的组合，酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母的质量比为(5-10)：(1-5)：(1-5)。
本发明所述的霉菌选自绿色木霉、黑曲霉中的一种或两种以上的组合。
在本发明的一个实施方式中，所述霉菌为黑曲霉。
在本发明的优选实施方式中，所述霉菌为绿色木霉与黑曲霉的组合，绿色木霉与黑曲霉的质量比为(2-5)：(8-10)。
在本发明的最优选实施方式中，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉的组合，质量比依次为(30-35)：(5-10)：(1-5)：(1-5)：(2-5)：(8-10)。
在本发明的具体实施方式中，所述植物活性蛋白粉通过如下方法制备得到：
(1)菌种斜面培养
将保藏的菌种经斜面培养基活化，在斜面培养基中30-37℃培养12-24h，恢复菌种最佳性能；
(2)菌种固体培养
将斜面培养物接种至固体发酵培养基中，25-37℃培养24-72h；
(3)复合菌剂发酵制备蛋白粉，包括下述步骤：
S1：将枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉按照质量比(30-35)：(5-10)：(1-5)：(1-5)：(2-5)：(8-10)混合得到复合菌剂；
S2：将大豆与花生按照质量比(1-4)：1混合，浸泡，蒸煮作为发酵底物，待温度降至37-40℃，将复合菌剂均匀接种至发酵底物中；
S3：将接种后的发酵底物平铺在托盘中，厚度为4-5cm，在40-42℃温度下发酵24-26h，每7-8h通风0.2-0.5h；
S4：待发酵底物表面出现均匀覆盖的菌丝，将其转移至冷藏库中放置2-3天，真空冷冻干燥，粉碎，过80目筛，得到植物活性蛋白粉。
本发明中用于各菌种活化与扩增的斜面培养基和发酵培养基可根据本领域技术人员的常规选择进行配置，也可通过商业途径购买得到。
优选的，在本发明的具体实施例中，所述的斜面培养基包括如下的组：
枯草芽孢杆菌斜面培养基组分如下：蛋白胨12g、牛肉膏5g、葡萄糖4g、甲基纤维素10g、氯化钠5g、琼脂15g，加去离子水定容至1L，pH7.0，121℃灭菌30min，冷却、凝固备用。
毕赤酵母斜面培养基组分如下：蔗糖20g、酵母浸粉7g、玉米粉8g、磷酸二氢钾2g、磷酸氢二钾1g、硫酸镁0.3g、琼脂15g、加去离子水定容至1L，pH6.5，121℃灭菌30min，冷却、凝固备用。
霉菌斜面培养基组分如下：葡萄糖10g、酵母浸粉7g、牛肉膏3g、磷酸二氢钾2g、磷酸氢二钾2g、琼脂15g，加去离子水容至1L，pH7.2，121℃灭菌30min，冷却、凝固备用。
优选的，在本发明的具体实施例中，所述的固体发酵培养基包括如下的组：
枯草芽孢杆菌固体发酵培养基配方如下：麸皮9kg、玉米粉4.5kg、大豆粉3kg、葡萄糖1kg、尿素0.3kg、氯化钠0.4kg、磷酸氢二钾0.3kg、磷酸二氢钾0.15kg，121℃灭菌30min，冷却至37℃时接入菌种，培养48h。
毕赤酵母固体发酵培养基配方如下：麸皮9kg、玉米粉4.5kg、葡萄糖1kg，蔗糖1kg、尿素0.3kg、硫酸铵0.2kg、氯化钠0.4kg，磷酸氢二钾0.3kg、磷酸二氢钾0.15kg，121℃灭菌30min，冷却至30℃时接入菌种，培养48h。
霉菌固体发酵培养基配方如下：麸皮9kg、玉米粉4.5kg、葡萄糖1kg，碳酸钙0.3kg、氯化钠0.4kg，磷酸氢二钾0.5kg，121℃灭菌30min，冷却至30℃时接入菌种，培养72h。
根据本发明提供的方法得到的枯草芽孢杆菌的菌种浓度108-1011cfu/g；酿酒酵母的菌种浓度108-1011cfu/g；巴斯德毕赤酵母的菌种浓度107-1010cfu/g；季也蒙毕赤酵母的菌种浓度107-109cfu/g；绿色木霉的菌种浓度为107-1010cfu/g；黑曲霉的菌种浓度为108-109cfu/g。
第二方面，本发明提供一种通过上述方法制备得到的植物活性蛋白粉。
第三方面，本发明提供一种复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂适用于发酵植物活性蛋白粉，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、黑曲霉按照质量比为(30-35)：(6-18)：(5-12)组成的组。
优选的，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、绿色木霉、黑曲霉按照质量比为(30-35)：(6-18)：(2-5)：(8-10)组成的组。
优选的，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉按照质量比为(30-35)：(7-12)：(1-8)：(2-5)：(8-10)组成的组。
在本发明最优选的实施方式中，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉按照质量比为(30-35)：(5-10)：(1-5)：(1-5)：(2-5)：(8-10)组成的组。
优选的，发酵底物为大豆与花生按照质量比(1-4)：1混合，浸泡，蒸煮的产物。
本发明提供的制备植物活性蛋白的方法具备如下技术优势：
目前市场上已有的大豆蛋白制品的制备原料大多是豆粕，即大豆提取油脂之后的废料，这部分物料的成分单一，蛋白质含量高，但是纤维素和半纤维素含量也较高，营养物质单一。本发明优选大豆和花生全果实作为发酵底物，营养物质全面。
市面上的植物蛋白或者植物多肽多是加入蛋白酶水解得到，由于酶的购买成本较高，导致产品售价较高，限制一部分消费者使用。本发明提供的植物蛋白粉是由发酵得到，适合大规模生产，产品成本低。
本发明技术人员经过长期工作时间优化得到一种复合菌剂，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉组成的组，所述复合菌剂适用于以大豆和花生混合物为底物发酵制备植物蛋白粉。
复合菌剂中的酵母菌对大豆和花生混合物中的糖、蛋白质和脂肪菌有分解作用，其中季也蒙毕赤酵母不仅能水解蛋白质，还能分泌半纤维素酶，对发酵体系中的脂肪和纤维素进行水解，脂肪水解后形成游离脂肪酸。复合菌剂中的绿色木霉能分泌纤维素酶和木聚糖酶，对发酵底物中的纤维素进行分解。通过本发明提供的复合菌剂发酵制备的植物蛋白粉溶解度高，并且以该蛋白粉作为饲料投喂小鼠，30天内小鼠体重增长率最大，说明以大豆和花生作为发酵底物，优化的复合菌剂发酵得到的产物营养物质全面，对机体改善效果好。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的部分实施例，而不是全部。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
制备例菌种培养
本发明具体实施例中使用的菌种及菌种编号如下所示：
一、菌种斜面培养
(1)枯草芽孢杆菌斜面培养基组分如下：蛋白胨12g、牛肉膏5g、葡萄糖4g、甲基纤维素10g、氯化钠5g、琼脂15g，加去离子水定容至1L，pH7.0，121℃灭菌30min，冷却、凝固，将枯草芽孢杆菌接种于斜面培养基，37℃培养24h。
(2)毕赤酵母斜面培养基组分如下：蔗糖20g、酵母浸粉7g、玉米粉8g、磷酸二氢钾2g、磷酸氢二钾1g、硫酸镁0.3g、琼脂15g、加去离子水定容至1L，pH6.5，121℃灭菌30min，冷却、凝固，将巴斯德毕赤酵母和季也蒙毕赤酵母分别接种至斜面培养基，30℃培养24h。
(3)霉菌斜面培养基组分如下：葡萄糖10g、酵母浸粉7g、牛肉膏3g、磷酸二氢钾2g、磷酸氢二钾2g、琼脂15g，加去离子水容至1L，pH7.2，121℃灭菌30min，冷却、凝固，将绿色木霉和黑曲霉分别接种至斜面培养基，30℃培养24h。
二、菌种固体发酵培养
(1)枯草芽孢杆菌固体发酵培养基配方如下：麸皮9kg、玉米粉4.5kg、大豆粉3kg、葡萄糖1kg、尿素0.3kg、氯化钠0.4kg、磷酸氢二钾0.3kg、磷酸二氢钾0.15kg，121℃灭菌30min，冷却至37℃时接入枯草芽孢杆菌，培养48h。
(2)毕赤酵母固体发酵培养基配方如下：麸皮9kg、玉米粉4.5kg、葡萄糖1kg，蔗糖1kg、尿素0.3kg、硫酸铵0.2kg、氯化钠0.4kg，磷酸氢二钾0.3kg、磷酸二氢钾0.15kg，121℃灭菌30min，冷却至30℃时分别接入巴斯德毕赤酵母和季也蒙毕赤酵母，培养48h。
(3)霉菌固体发酵培养基配方如下：麸皮9kg、玉米粉4.5kg、葡萄糖1kg，碳酸钙0.3kg、氯化钠0.4kg，磷酸氢二钾0.5kg，121℃灭菌30min，冷却至30℃时分别接入绿色木霉和黑曲霉，培养72h。
本发明具体实施例中，经固体发酵培养得到的上述菌种浓度如下：
植物活性蛋白粉的发酵制备
实施例1
S1：将枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉按照质量比35：7：8混合，得到复合菌剂；
S2：将大豆与花生按照质量比3：1混合，浸泡，蒸煮作为发酵底物，待温度降至37℃，将复合菌剂均匀接种至发酵底物中，复合菌剂的接种量为发酵底物质量的2％；
S3：将接种后的发酵底物平铺在托盘中，厚度为4cm，在40-42℃温度下发酵24-26h，发酵期间每7h通风20min；
S4：待发酵底物表面出现均匀覆盖的菌丝，将其转移至冷藏库中放3天，再真空冷冻干燥，粉碎，过80目筛，得到植物活性蛋白粉。
实施例2
发酵步骤与实施例1相同，区别仅在于复合菌剂的菌种与配比，具体的，所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、绿色木霉和黑曲霉按照质量比35：7：4：8组成。
实施例3
发酵步骤与实施例1相同，区别仅在于复合菌剂的菌种与配比，具体的，所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、绿色木霉和黑曲霉按照质量比35：7：5：4：8组成。
实施例4
发酵步骤与实施例1相同，区别仅在于复合菌剂的菌种与配比，具体的，所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉和黑曲霉按照质量比35：7：5：3：4：8组成。
对比例1
复合菌剂组合同实施例4，即所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉和黑曲霉按照质量比35：7：5：3：4：8组成，区别在于发酵底物，本实施例的发酵底物制备方法为：将大豆与花生按照质量比3：1混合，使用常规方法提取油脂后形成豆粕，以所述豆粕作为发酵底物接种复合菌剂，接种量同实施例4。
对比例2
复合菌剂组合同实施例4，即所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉和黑曲霉按照质量比35：7：5：3：4：8组成，区别在于发酵底物，本实施例的发酵底物仅为大豆经浸泡，蒸煮后的产物，复合菌剂接种量同实施例4。
对比例3
复合菌剂组合同实施例4，即所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉和黑曲霉按照质量比35：7：5：3：4：8组成，区别在于发酵底物，本实施例的发酵底物仅为花生经浸泡，蒸煮后的产物，复合菌剂接种量同实施例4。
效果例 植物活性蛋白粉的溶解性
试验目的：检测本发明实施例制备得到的植物活性蛋白粉的溶解度。
试验方法：将本发明实施例1-4，对比例1-3制备得到的蛋白粉按质量体积比为1:100加入去离子水，室温下100rpm的速度搅拌1h，离心，收集上清，取20mL上清液浓缩后测定蛋白含量，蛋白换算系数6.25。
蛋白质溶解度＝上清液中蛋白质含量/原料中总的蛋白质含量×100％，结果如下表所示。
表1植物活性蛋白粉的溶解度
组别 蛋白溶解度
实施例1 74.8％
实施例2 87.2％
实施例3 92.6％
实施例4 97.9％
对比例1 83.5％
对比例2 90.5％
对比例3 82.1％
从上表数据可以看到，以枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉作为复合菌剂发酵得到的蛋白粉溶解度为74.8％；在上述复合菌剂的基础上增加绿色木霉后，发酵得到的蛋白粉溶解度由74.8％增加至87.2％；在此基础上增加巴斯德毕赤酵母，蛋白粉溶解度由87.2％增加至92.6％；继续向上述复合菌剂中增加季也蒙毕赤酵母，蛋白粉溶解度由92.6％增加至97.9％。技术人员分析认为，绿色木霉能产纤维素酶和木聚糖酶，对大豆和花生中的纤维素进行分解，会显著增加发酵产物的溶解度。在此基础上增加巴斯德毕赤酵母，作为酵母菌的一种，其对发酵底物中的蛋白质进一步水解，在发酵中消耗氧，降低体系pH，有助于增加其他发酵菌活性。进一步的，向体系中加入季也蒙毕赤酵母，其不仅能进一步水解蛋白，还能分泌半纤维素酶，对发酵体系中的纤维素和脂肪进行水解，脂肪水解后形成游离脂肪酸，使发酵产物的溶解性进一步提升，并且发明人明显发现，实施例4发酵得到的蛋白粉香气更丰富。
对比例1的发酵底物为豆粕，由于大豆和花生中的油脂已经被提取，导致发酵产物中的蛋白质和纤维素含量要比实施例中发酵底物的更高，所以，在相同复合菌剂的作用下，发酵得到的产物溶解性并不高。对比例2的发酵底物为纯大豆，不含花生，由于大豆中的蛋白质含量比花生更高，使得以纯大豆作为发酵底物的发酵产物溶解性较低。对比例3的发酵底物为纯花生，不含大豆，由于花生中的油脂含量较大，所以以相同复合菌进行发酵后的产物溶解性更低。
通过上述实验数据可以看到，当发酵底物为大豆与花生的混合物时，由于蛋白质和脂肪含量均有所中和，以枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉和黑曲霉按照质量比35：7：5：3：4：8组合作为复合菌剂进行发酵后，发酵产物的溶解度达到97.9％，并且发酵产物香味浓郁，食用性更好。
应用例植物活性蛋白粉对小鼠体重的影响
试验目的：将本发明制备的植物活性蛋白粉作为饲料投喂小鼠，根据小鼠体重增长数据评估植物蛋白粉的营养价值。
试验方法：购买体重为18-25g的健康雄性昆明小鼠40只，随机分为8组，分别为实验组1-7和对照组，每组5只，在常规条件下饲养1天后开始试验，试验开始前对每组小鼠称重；试验期限为30天，试验期间所有小鼠均按照常规方法进行饲养，同时实验组1-7分别每日灌胃本发明实施例1-4和对比例1-3制备的植物活性蛋白粉，蛋白粉浓度为10％(g/ml)，灌胃量每天为1.5ml/只，分早、中、晚3次灌胃完成，对照组灌胃相同体积蒸馏水，试验结束对每组小鼠进行称重。
每组小鼠的初始和结束平均体重，以及计算得到的小鼠体重增长率如下表所示。体重增长率＝(结束体重-初始体重)/初始体重×100％
表2小鼠生长性能测试数据
组别 初始平均体重/g 结束平均体重/g 体重增长率/％
实验组1 22.63 45.33 100.3％
实验组2 22.79 46.40 103.6％
实验组3 23.02 46.94 103.9％
实验组4 22.82 49.15 115.4％
实验组5 23.06 44.64 93.6％
实验组6 22.67 45.59 101.1％
实验组7 23.10 45.46 96.8％
对照组 23.03 42.65 85.2％
从上表数据可以看出，与对照组相比，每天投喂本发明制备的植物活性蛋白粉的小鼠体重增长更快，其中灌胃实施例1-4制备的蛋白粉的小鼠体重增长率均大于100％，其中，实施例4制备的蛋白粉最有利于小鼠体重增长。发明人分析原因认为，实施例4制备的蛋白粉多肽分子量小，易吸收。此外复合菌剂对大豆和花生中的纤维素和脂肪均有水解作用，使纤维素和脂肪的水解产物也能被小鼠很好吸收，小鼠体重增长更快。发明人预料不到的发现，以豆粕作为发酵底物发酵制备的蛋白粉对小鼠的体重增长效果最差，因为当大豆和花生中的油脂被提取后，豆类作为的营养成分出现大量流失，使发酵产物的营养价值并不高。相比较，使用未经提取油脂的大豆和花生全豆作为发酵底物，经过优化的复合菌剂发酵所得的产物营养价值最高。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种植物活性蛋白粉的制备方法，所述方法包括如下步骤：
将大豆与花生按照质量比(1-10)：1混合，浸泡，蒸煮作为发酵底物，待温度降至37-40℃，将复合菌剂均匀接种至发酵底物中，复合菌剂用量为发酵底物质量的0.5-2％，在37-42℃温度下发酵2-3天，再转移至0-4℃冷藏2-3天，冷冻干燥，粉碎得到植物活性蛋白粉；
所述的复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酵母菌和霉菌的组合，在所述复合菌剂中，枯草芽孢杆菌、酵母菌、霉菌的质量比为(30-35)：(6-18)：(5-12)，酵母菌选自酿酒酵母和/或毕赤酵母，所述毕赤酵母为季也蒙毕赤酵母、巴斯德毕赤酵母中的一种或两种以上的组合；霉菌选自绿色木霉、黑曲霉中的一种或两种以上的组合。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述发酵温度为40-42℃，发酵时间24-26h，发酵后每7-8h通风0.2-0.5h，风速3-5m/s，风压100-120Pa；所述酵母菌为酿酒酵母，所述霉菌为黑曲霉。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述酵母菌为酿酒酵母与巴斯德毕赤酵母的组合，酿酒酵母与巴斯德毕赤酵母的质量比为(7-12)：(1-8)；所述霉菌为绿色木霉与黑曲霉的组合，绿色木霉与黑曲霉的质量比为(2-5)：(8-10)。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述酵母菌为酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母与季也蒙毕赤酵母的组合，酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母的质量比为(5-10)：(1-5)：(1-5)。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉的组合，质量比依次为(30-35)：(5-10)：(1-5)：(1-5)：(2-5)：(8-10)。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述植物活性蛋白粉通过如下方法制备得到：
(1)菌种斜面培养
将保藏的菌种经斜面培养基活化，在斜面培养基中30-37℃培养12-24h，恢复菌种最佳性能；
(2)菌种固体培养
将斜面培养物接种至固体发酵培养基中，25-37℃培养24-72h；
(3)复合菌剂发酵制备蛋白粉，包括下述步骤：
S1：将枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉按照质量比(30-35)：(5-10)：(1-5)：(1-5)：(2-5)：(8-10)混合得到复合菌剂；
S2：将大豆与花生按照质量比(1-4)：1混合，浸泡，蒸煮作为发酵底物，待温度降至37-40℃，将复合菌剂均匀接种至发酵底物中；
S3：将接种后的发酵底物平铺在托盘中，厚度为4-5cm，在40-42℃温度下发酵24-26h，每7-8h通风0.2-0.5h；
S4：待发酵底物表面出现均匀覆盖的菌丝，将其转移至冷藏库中放置2-3天，真空冷冻干燥，粉碎，过80目筛，得到植物活性蛋白粉。
7.一种通过权利要求1-6任一所述的方法制备得到的植物活性蛋白粉。
8.一种复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂适用于发酵植物活性蛋白粉，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、黑曲霉按照质量比为(30-35)：(6-18)：(5-12)组成的组，发酵底物为大豆与花生按照质量比(1-4)：1混合，浸泡，蒸煮的产物。
9.根据权利要求8所述的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、绿色木霉、黑曲霉按照质量比为(30-35)：(6-18)：(2-5)：(8-10)组成的组；
优选的，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉按照质量比为(30-35)：(7-12)：(1-8)：(2-5)：(8-10)组成的组。
10.根据权利要求9所述的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、绿色木霉、黑曲霉按照质量比为(30-35)：(5-10)：(1-5)：(1-5)：(2-5)：(8-10)组成的组。
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